Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-15Bitstream added on 2014-06-13T19:50:53Z : No. of bitstreams: 1 souza_fo_me_arafcf.pdf: 544783 bytes, checksum: b3fed971745dc3f334fa44491c3bbfe9 (MD5) / Atualmente, o câncer cervical é considerado a segunda causa mais comum entre as mulheres e encontra-se associado ao Papilomavírus Humano (HPV), que infecta células epiteliais escamosas, dando origem a grandes lesões. Em face da necessidade de se encontrar novos fármacos com atividade antineoplásica, têm-se procurado identificar substâncias isoladas de plantas brasileiras capazes de impedir a proliferação de células neoplásicas infectadas por HPV. A nitensidina B é um alcalóide guanidínico isolado de Pterogyne nitens Tul. (Fabaceae), que possui atividade citotóxica e antifúngica. O presente estudo teve por objetivo, verificar a atividade citotóxica, pró-apoptótica, genotóxica e mutagênica de nitensidina B, por meio de experimentos in vitro, utilizando células de carcinoma cervical infectadas por HPV-16 (SiHa) e não infectadas pelo vírus (C-33A). Para avaliar a citotoxicidade da nitensidina B o teste MTT foi realizado, sendo possível observar um efeito concentração-resposta nas duas linhagens testadas SiHa e C-33A, CI50 = 28,95 µM e 25,78 µM, respectivamente por 24 horas de tratamento e SiHa e C-33A, CI50 = 20,77 µM e 20,96 µM, respectivamente por 48 horas de exposição a nitensidina B. Com o intuito de avaliar a ação pró-apoptótica, foi realizado o ensaio de anexina V por citometria de fluxo e o ensaio do Hoechst-Iodeto de propídio, na qual pode-se verificar que a nitensidina B apresentou morte celular por apoptose tardia na linhagem de células infectadas por HPV-16 (SiHa) e baixa porcentagem de células apoptóticas nas células não infectadas pelo HPV-16 (C-33A), tanto por apoptose precoce, quanto na apoptose tardia/necrose, em todas as concentrações. Para o ensaio de genotoxicidade foi realizado o ensaio do... / Nowadays, cervical cancer is considered the second most common among women, and have been associated with human papillomavirus (HPV), which infects squamous epithelial cells resulting in major injuries. Given the need to find new drugs with antineoplastic activity, have sought to identify compounds antineoplastic from plants, wich are capable of preventing the proliferation of neoplastic cells infected by HPV. Nitensidine B is a guanidine alkaloid isolated from Pterogyne nitens Tul. (Fabaceae), which has cytotoxic and antifungical activies. This study aimed verify by cytotoxic, pro-apoptotic, genotoxic and mutagenic of nitensidine B through in vitro experiments, using cervical carcinoma cells infected by HPV-16 (SiHa) and not infected (C -33A). To evaluate the cytotoxicity of nitensidine B, by MTT assay, it being possible to observe an effect concentration response in both strains tested SiHa and C-33A, IC50 = 28.95 µM and 25.78 µM, respectively, by 24 hours of treatment and SiHa and C-33A, IC50 = 20.77 µM and 20.96 µM, respectively, by 48 hours. In order, to investigate pro-apoptotic activity, it was carried out annexin V flow cytometric and Hoechst-propidium iodide assay, which it could be seen that the nitensidine B showed apoptotic cell death late in the lineage of cells infected by HPV-16 (SiHa) and lower percentages of apoptotic cells in the cells not infected by HPV-16 (C-33A), both early apoptotic, late apoptotic and in necrosis at all concentrations used. For the genotoxicity assay was performed comet assay, where there was a high percentage of DNA in the tail of the cells studied. In SiHa cell line was observed significant genotoxicity at all concentrations tested in treatment for 6 hours and the concentration of DNA in the tail at 5.00 µM to 16.0 µM on exposing cells for 24 hours with nitensidine B. For the line... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Maria Aparecida Marin Morales / Banca: Diogo Cavalcanti Cabral de Mello / Banca: Vera Maria Ferrão Vargas / Banca: Grasiela Dias de C. S. Aguiar / Banca: Maria Tercilia V. de A. Oliveira / Resumo: O Brasil é o maior produtor de cana-de-açúcar no mundo. Dentre os Estados brasileiros, São Paulo representa 60% de todo o açúcar produzido e 70% das exportações. Pela alta produção de cana-de-açúcar no Estado de São Paulo e o consequente consumo elevado de agrotóxicos, este trabalho teve como objetivo investigar os efeitos citotóxicos, genotóxicos e mutagênicos de baixas concentrações de dois agrotóxicos utilizados nesta cultura, o herbicida sulfentrazona e o inseticida imidaclopride, tanto em testes individuais quanto associados entre si. As avaliações foram feitas pelos testes de aberrações cromossômicas (AC) e de micronúcleos (MN) em Allium cepa; teste do MN e ensaio do cometa em células HepG2; e teste de Ames com Salmonella typhimurium. Para melhor avaliar o modo de ação dos agrotóxicos, a técnica de hibridização in situ fluorescente (FISH) com sonda pan-centromérica foi associada ao teste do MN realizado com células HepG2. Os testes com A. cepa indicaram genotoxicidade para todas as concentrações de imidaclopride, após um período de recuperação de 48 horas. A maior indução de pontes e aderências cromossômicas sugeriu uma ação clastogênica para o inseticida. Esta hipótese foi confirmada nos testes com HepG2, pela técnica de FISH, uma vez que a maioria dos MN (76,6%) não apresentou sinal fluorescente, indicando presença de fragmentos cromossômicos. Para o herbicida sulfentrazona, foram observadas AC para todas as concentrações, considerando os diferentes tempos de tratamento. A indução de MN foi observada para a menor concentração, para todos os tempos de tratamento, sugerindo que os danos induzidos por essa concentração persistem ao longo do ciclo celular. A maior concentração testada do herbicida causou uma diminuição no índice mitótico... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Brazil is the largest producer of sugarcane in the world. Among the Brazilian states, São Paulo represents 60% of all sugar produced and 70% of exports. Due to the high production of sugarcane in São Paulo state and the great pesticide consumption, this work investigated the cytotoxic, genotoxic and mutagenic effects of low concentrations of two pesticides utilized in sugarcane culture: the herbicide sulfentrazone and the insecticide imidacloprid, both individually and combined. The evaluations were made by chromosome aberrations (CA) and micronucleus (MN) tests in Allium cepa, MN and comet assay in HepG2 cells and Ames test with Salmonella typhimurium. Associated to the MN test in HepG2 cells, the fluorescent in situ hybridization (FISH) technique with pan-centromeric probe was applied in order to better evaluate the mode of action of the agrochemicals. The tests with A. cepa indicated genotoxicity for all concentrations of imidacloprid, after a recovery period of 48 hours. The higher induction of bridges and chromosome stickiness suggests a clastogenic action for the insecticide. This hypothesis was confirmed in the tests with HepG2, by FISH, since most of the MN (76.6%) did not present fluorescent signal, indicating presence of chromosomal fragments. For the herbicide sulfentrazone, CA were observed in all concentrations, in the different treatment times. The induction of MN was observed for the lowest concentration for all the treatment times, suggesting that the damages induced by this concentration persist throughout the cell cycles. The highest concentration tested of the herbicide caused a decrease in the mitotic index of the cells after 72 hours recovery period. This effect may be associated with the high amount of induced chromosome stickiness. The mixture of pesticides induced cytotoxicity, genotoxicity... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Christiane Pienna Soares / Banca: Luís Octávio Regasini / Banca: Eliana Aparecida Varanda / Resumo: Atualmente, o câncer cervical é considerado a segunda causa mais comum entre as mulheres e encontra-se associado ao Papilomavírus Humano (HPV), que infecta células epiteliais escamosas, dando origem a grandes lesões. Em face da necessidade de se encontrar novos fármacos com atividade antineoplásica, têm-se procurado identificar substâncias isoladas de plantas brasileiras capazes de impedir a proliferação de células neoplásicas infectadas por HPV. A nitensidina B é um alcalóide guanidínico isolado de Pterogyne nitens Tul. (Fabaceae), que possui atividade citotóxica e antifúngica. O presente estudo teve por objetivo, verificar a atividade citotóxica, pró-apoptótica, genotóxica e mutagênica de nitensidina B, por meio de experimentos in vitro, utilizando células de carcinoma cervical infectadas por HPV-16 (SiHa) e não infectadas pelo vírus (C-33A). Para avaliar a citotoxicidade da nitensidina B o teste MTT foi realizado, sendo possível observar um efeito concentração-resposta nas duas linhagens testadas SiHa e C-33A, CI50 = 28,95 µM e 25,78 µM, respectivamente por 24 horas de tratamento e SiHa e C-33A, CI50 = 20,77 µM e 20,96 µM, respectivamente por 48 horas de exposição a nitensidina B. Com o intuito de avaliar a ação pró-apoptótica, foi realizado o ensaio de anexina V por citometria de fluxo e o ensaio do Hoechst-Iodeto de propídio, na qual pode-se verificar que a nitensidina B apresentou morte celular por apoptose tardia na linhagem de células infectadas por HPV-16 (SiHa) e baixa porcentagem de células apoptóticas nas células não infectadas pelo HPV-16 (C-33A), tanto por apoptose precoce, quanto na apoptose tardia/necrose, em todas as concentrações. Para o ensaio de genotoxicidade foi realizado o ensaio do... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Nowadays, cervical cancer is considered the second most common among women, and have been associated with human papillomavirus (HPV), which infects squamous epithelial cells resulting in major injuries. Given the need to find new drugs with antineoplastic activity, have sought to identify compounds antineoplastic from plants, wich are capable of preventing the proliferation of neoplastic cells infected by HPV. Nitensidine B is a guanidine alkaloid isolated from Pterogyne nitens Tul. (Fabaceae), which has cytotoxic and antifungical activies. This study aimed verify by cytotoxic, pro-apoptotic, genotoxic and mutagenic of nitensidine B through in vitro experiments, using cervical carcinoma cells infected by HPV-16 (SiHa) and not infected (C -33A). To evaluate the cytotoxicity of nitensidine B, by MTT assay, it being possible to observe an effect concentration response in both strains tested SiHa and C-33A, IC50 = 28.95 µM and 25.78 µM, respectively, by 24 hours of treatment and SiHa and C-33A, IC50 = 20.77 µM and 20.96 µM, respectively, by 48 hours. In order, to investigate pro-apoptotic activity, it was carried out annexin V flow cytometric and Hoechst-propidium iodide assay, which it could be seen that the nitensidine B showed apoptotic cell death late in the lineage of cells infected by HPV-16 (SiHa) and lower percentages of apoptotic cells in the cells not infected by HPV-16 (C-33A), both early apoptotic, late apoptotic and in necrosis at all concentrations used. For the genotoxicity assay was performed comet assay, where there was a high percentage of DNA in the tail of the cells studied. In SiHa cell line was observed significant genotoxicity at all concentrations tested in treatment for 6 hours and the concentration of DNA in the tail at 5.00 µM to 16.0 µM on exposing cells for 24 hours with nitensidine B. For the line... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Existem evidências crescentes indicando a associação entre dietas ricas em frutas e vegetais e a diminuição da incidência de câncer. O suco de laranja (OJ) pode ser incluído entre os alimentos com potencial quimioprotetor e seu estudo é muito relevante pelo amplo consumo desta bebida. O OJ possui vários nutrientes e compostos bioativos com atividades antioxidante, antimutagênica, anticarcinogênica e antiaterogênica, entre outras. A vitamina C (Vit C) é um dos nutrientes mais abundantes no OJ, e o único nutriente que pode ser provido em quantidade superior à recomendação diária por uma única porção de 200 mL de OJ. A Vit C, a exemplo de outros componentes do OJ, pode ser tanto benéfica quanto maléfica para os sistemas biológicos, dependendo do contexto metabólico. Neste sentido, vários nutrientes presentes no OJ têm sido identificados como mutagênicos ou carcinogênicos, especialmente quando administrados de forma isolada. Este estudo utilizou o ensaio Cometa alcalino em sangue de camundongos (in vivo) para avaliar: 1) a genotoxicidade do OJ e da Vit C; 2) a genotoxicidade do FeSO4 e do CuSO4: 3) o efeito modulador do OJ e da Vit C sobre a genotoxicidade do FeSO4 e CuSO4, bem como do metilmetanosulfonato (MMS) e da ciclofosfamida (CP). A versão alcalina do ensaio Cometa foi utilizada para avaliar o dano no DNA em células brancas do sangue periférico de camundongos. Adicionalmente, os níveis de cobre e ferro no sangue e no fígado dos camundongos tratados com metais e OJ foram avaliados pela metodologia de PIXE (Particle-Induced X-ray Emission). Grupos com pelo menos 6 camundongos (metade de cada sexo) foram tratados por gavage com uma ou duas doses de água (controle), CP, MMS, FeSO4 ou CuSO4. OJ (0.1 mL/Kg) foi administrado tanto antes (pré-tratamento) quanto após a administração das substâncias-teste (pós-tratamento). A Vit C (1 e 30 mg/Kg) foi administrada apenas no pós-tratamento. O dano no DNA foi avaliado 24 e 48 h após o início do tratamento. Após 24 h, o OJ induziu um suave aumento no dano no DNA, enquanto a Vit C foi genotóxica (30 mg/Kg > 1 mg/Kg). O tratamento duplo com Vit C (a 0 e a 24 h) induziu uma resposta genotóxica cumulativa a 48 h, que foi mais intensa para a dose maior. O FeSO4 e o CuSO4 foram genotóxicos após 24 h, mas tiveram seu dano efetivamente reparado após 48 h do tratamento. O pré-tratamento com OJ reduziu a genotoxicidade do FeSO4 e do CuSO4 (efeito preventivo). O pós-tratamento com OJ também reduziu a genotoxicidade do CuSO4 (efeito reparador). O OJ mostrou tanto efeito preventivo quanto reparador sobre a genotoxicidade do MMS. O OJ teve apenas efeito reparador sobre a CP. Ambas doses de Vit C aumentaram os danos no DNA causados pelo FeSO4 e pelo CuSO4. Adicionalmente, os níveis de cobre e ferro no sangue e no fígado dos camundongos tratados com metais e OJ foram avaliados pela metodologia de PIXE (Particle-Induced X-ray Emission). Grupos com pelo menos 6 camundongos (metade de cada sexo) foram tratados por gavage com uma ou duas doses de água (controle), CP, MMS, FeSO4 ou CuSO4. OJ (0.1 mL/Kg) foi administrado tanto antes (pré-tratamento) quanto após a administração das substâncias-teste (pós-tratamento). A Vit C (1 e 30 mg/Kg) foi administrada apenas no pós-tratamento. O dano no DNA foi avaliado 24 e 48 h após o início do tratamento. Após 24 h, o OJ induziu um suave aumento no dano no DNA, enquanto a Vit C foi genotóxica (30 mg/Kg > 1 mg/Kg). O tratamento duplo com Vit C (a 0 e a 24 h) induziu uma resposta genotóxica cumulativa a 48 h, que foi mais intensa para a dose maior. O FeSO4 e o CuSO4 foram genotóxicos após 24 h, mas tiveram seu dano efetivamente reparado após 48 h do tratamento. O pré-tratamento com OJ reduziu a genotoxicidade do FeSO4 e do CuSO4 (efeito preventivo). O pós-tratamento com OJ também reduziu a genotoxicidade do CuSO4 (efeito reparador). O OJ mostrou tanto efeito preventivo quanto reparador sobre a genotoxicidade do MMS. O OJ teve apenas efeito reparador sobre a CP. Ambas doses de Vit C aumentaram os danos no DNA causados pelo FeSO4 e pelo CuSO4. processado e armazenado de forma a preservar o seu potencial biológico é um alimento sugerido como uma das porções de uma dieta equilibrada (contendo pelo menos 5 porções de frutas e vegetais), recomendada para uma vida saudável e longeva. / Evidence indicates an association between diets rich in fresh fruit and vegetables and a decreased incidence of cancers. Orange juice (OJ) is a food with chemoprotective potential highly relevant for study due to its widespread consumption. OJ is composed of several nutrients and bioactive compounds with antioxidant, antimutagenic, anticarcinogenic and antiathrerogenic activities. Vitamina C (Vit C) is the most abundant nutrient in OJ, and the only one that can be provided in amounts higher that the daily recommended intake by a single portion of OJ (200 mL). Vit C, like other components of OJ, can be either benefical or noxious for biological system, depending of their metabolic context. Indeed, some components of juices have been identified as mutagenic or carcinogenic when isolated. In this study we tested by comet assay in mice in vivo: 1) the genotoxicity of orange juice (OJ) and vitamin C (Vit C); 2) the genotoxicity of FeSO4 and CuSO4: 3) the modulator effect of orange juice and Vit C over genotoxicity of FeSO4 and CuSO4, as well as over methyl methanesulfonate (MMS) and cyclophosphamide (CP). We used the alkaline version of the comet assay to assess DNA damage in peripheral white blood cells of mice. Moreover, the levels of iron and copper in the whole blood and liver of the mice treated with this metals were evaluated by PIXE (Particle-Induced X-ray Emission). Groups of at least 6 mice (half of each gender) were orally given a single dose of either water (control), CP, MMS, FeSO4 or CuSO4. OJ (0.1 mL/Kg) was given either before (pre-treatment) or after (post-treatment) administration of the test substances. Vit C (1 and 30 mg/Kg) was only administered after treatment (post-treatment). DNA damage was evaluated 24 and 48 h after the beginning of the treatment. After 24 h, OJ induced a slight increase in DNA damage and Vit C was genotoxic (30 mg/Kg > 1 mg/Kg). Double treatment with Vit C (at 0 and 24 h) induced a cumulative genotoxic response at 48 h, more intense for the higher dose. FeSO4 and CuSO4 were genotoxic after 24 h and significant DNA damage repair was observed after 48 h of treatment. OJ pre-treatment reduced the genotoxicity of FeSO4 (preventive effect). OJ had a preventive effect over the genotoxicity of CuSO4. OJ post-treatment also reduced the genotoxicity of CuSO4 (restorative effect). OJ had both protective and reparative effects over MMS. OJ had only a reparative effect over CP. Both doses of Vit C enhanced DNA damage caused by FeSO4 and CuSO4. DNA damage caused by MMS was significantly reduced by the lower dose, but not by the higher dose of Vit C. For CP, the DNA damage was not affected by the post-treatment with any of the doses of Vit C. PIXE analysis indicated a positive correlation between DNA damage and the hepatic levels of iron and a negative correlation between whole blood copper and DNA damage. A negative correlation between hepatic iron and whole blood copper content was also seen in the treatment with both ferrous and cupric sulfates. These results point a dynamic interaction between the genotoxicity and the tecidual fate of iron and copper. Vit C and the other components of OJ have several biological effects, including: 1) action as targets for toxicants; 2) influence in drug metabolization/detoxification; and 3) effect in DNA repair and homeostasis. Moreover, Vit C and transition metals, particularly copper and iron, can induce oxidative stress; however, they can also play roles in antioxidant defense system, being a DNA repair modulators. Further data from other treatment schedules are needed to shed light upon the beneficial/noxious effects of OJ as a complex mixture, as well as of its compounds in genomic stability. Indeed, one glass of fresh or adequate processed and stored OJ can be among the options for the daily 5 portions (or even more) of fruits and vegetables recommended for a health and longevity.

Submitted by Haroudo Xavier Filho (haroudo.xavierfo@ufpe.br) on 2016-08-30T18:08:06Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação (Anderson Rodrigues).pdf: 1100092 bytes, checksum: 006b7ba8f56e81d9066bc271f99edcbe (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-30T18:08:06Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação (Anderson Rodrigues).pdf: 1100092 bytes, checksum: 006b7ba8f56e81d9066bc271f99edcbe (MD5) Previous issue date: 2016-02-17 / FACEPE / A perda da diversidade biológica pode ser um reflexo da degradação ambiental, principalmente em locais com grandes contingentes demográficos. No Nordeste do Brasil, a maioria das regiões metropolitanas estão concentradas em zonas costeiras, ocasionando a liberação de uma grande quantidade de poluentes e ameaçando a sobrevivência de inúmeras espécies, como os peixes. Neste estudo, tentamos avaliar possíveis danos no DNA em um dos recursos pesqueiros mais consumidos pelas comunidades ribeirinhas nesta região, a tainha (Mugil curema). Metodologias de Ensaio Cometa (EC) e Teste do Micronúcleo (MN) foram utilizadas em populações desta espécie, provenientes de cinco estuários Pernambucanos (rios Goiana e Jaguaribe no litoral Norte), (rios Sirinhaém e Formoso no litoral Sul) e (rio Capibaribe na região metropolitana). Para fins de comparação, uma amostra controle foi coletada no estuário do Rio Una (local de preservação ambiental), litoral sul do estado de São Paulo. Nossos resultados mostram que o estuário mais afastado da região metropolitana, o Rio Formoso, quando comparado ao grupo controle, foi quem apresentou os menores níveis de danificação genômica (P >0,05). Já os demais estuários apresentaram níveis elevados de danificação quando comparados ao controle (P < 0,05). Em especial, o estuário do rio Capibaribe, localizado na capital Pernambucana, foi aquele que apresentou um dos maiores níveis de dano genômico (P = 0,0001). Tais dados caracterizam-no como o mais impactado entre os cinco avaliados. Estes dados também apontam para uma forte associação entre níveis elevados de danificação genômica (macro e microlesões no DNA) em locais próximos a grandes contingentes demográficos e industriais. Consequentemente, este cenário de impactação pode também estar afetando a comunidade biótica como um todo, incluindo as comunidades humanas ribeirinhas que tem este recurso como forma de subsistência. Estes resultados demonstram a efetividade do uso de metodologias de EC e MN como protocolos rápidos e precisos na avaliação de ecossistemas marinhos, principalmente em regiões fortemente impactadas pelas atividades antrópicas. / The loss of biological diversity may be a reflection of environmental degradation, especially in places with large demographic contingents. In northeastern Brazil, most metropolitan regions are concentrated in coastal areas, causing the release of large amounts of pollutants and threatening the survival of many species, such as fish. In this study, we attempt to assess possible damage to the DNA in one of the most consumed fish resources by coastal communities in this region, mullet (Mugil curema). Methodologies comet assay (EC) and micronucleus test (MN) were used in populations of this species, from five Pernambucanos estuaries (Goiana and Jaguaribe rivers in the northern coast), (Sirinhaém and Formoso rivers in the south coast) and (Capibariberiver in Metropolitan region). For comparison purposes, a control sample was collected in the estuary of the Una River (local environmental preservation), southern coast of São Paulo. Our results show that the far estuary in the metropolitan area, the Formoso River, when compared to the control group, was the one who had the lowest levels of genomic damage (P> 0.05). None of the other estuaries showed elevated levels of damage compared to the control (P <0.05). In particular, the estuary of the river Capibaribe, located in Pernambuco capital, was the one who presented one of the highest levels of genomic damage (P = 0.0001). These data characterize it as the most affected among the five evaluated. These data also point to a strong association between high levels of genomic damage (macro and micro-lesions in DNA) in locations near major demographic and industrial contingent. Consequently, this scenario impaction may also be affecting the biotic community as a whole, including the riparian human communities that have this feature as a means of subsistence. These results demonstrate the effectiveness of using EC and MN methodologies as fast and accurate protocols in evaluating marine ecosystems, particularly in regions heavily impacted by human activities.

Submitted by Natalia de Souza Gonçalves (natalia.goncalves@ufpe.br) on 2016-09-23T12:01:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Caio Bruno Ribeiro Falcão_Programa de Pós-Graduação em Genética_CB_2016.pdf: 1323776 bytes, checksum: 25bf87d5c7e7ecd8429e2f3db35e5bbc (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-23T12:01:54Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Caio Bruno Ribeiro Falcão_Programa de Pós-Graduação em Genética_CB_2016.pdf: 1323776 bytes, checksum: 25bf87d5c7e7ecd8429e2f3db35e5bbc (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 / FACEPE / CNPQ / Os sistemas estuarinos da costa brasileira e sua fauna têm sido severamente impactados ao longo das últimas décadas. O Cardisoma guanhumi é um crustáceo difundido na culinária local do Nordeste do Brasil apresentando um grande valor de mercado, mas tem mostrado significativa diminuição nos seus estoques populacionais. A intensa captura de espécimes e a destruição de seus habitats incluiu C. guanhumi na Lista de Espécies da Fauna Ameaçadas de Extinção publicada em dezembro de 2014. Objetivando aferir a impactação sobre as populações de guaiamuns e sobre seus habitats ao longo de cinco estuários da costa pernambucana duas metodologias foram utilizadas: (i) análise de danificação genômica ao longo dos períodos de inverno e verão dos anos de 2012 e 2013, e (ii) avaliação de possíveis alterações da estrutura genética de C. guanhumi em um contexto espaço-temporal nos anos de 2012 e 2014. Os resultados das análises genotóxicas evidenciaram dano genômico no inverno do ano de 2012 que coincidiu com um rigoroso inverno e intensas chuvas atípicas para região. A avaliação da estruturação genética das populações nos dois anos não mostrou alterações significativas da diversidade genética nem mudança na estrutura da espécie. Os resultados obtidos sugerem que os manguezais/estuários pernambucanos têm recebido o aporte de componentes tóxicos, tendo em vista os danos genômicos detectados. Tais resultados alertam para a necessidade de uma maior atenção acerca da conservação dos manguezais/estuários pernambucanos. / Estuarine systems along the Brazilian coast and its wildlife have been severely impacted over the past decades. Cardisoma guanhumi is a crustacean widespread in local gastronomy of northeastern Brazil presenting a great market value, but has shown significant decrease in their population stocks. Intense capture of specimens and the destruction of their habitats included C. guanhumi in the Endangered Fauna Species List published in December 2014. In order to assess the impaction on the populations of blue crabs and about their habitats over five estuaries of the coast Pernambuco two methodologies were used: a genomic damage analysis over the winter and summer periods of the years 2012 and 2013 and an assessment of possible changes in the genetic structure of C. guanhumi in a space-time context in the years 2012 and 2014. The results of the analysis showed genomic genotoxic damage in the winter of 2012 year coincided with a harsh winter and heavy rains atypical for the region. The genetic structure of populations in both years showed no significant changes in the genetic diversity of the species or change in structure. The results suggest that mangroves / estuaries have received the injection of toxic components, considering the identified genomic damage. These results emphasize the need for greater attention on the conservation of Pernambuco estuaries.

Aquatic environments are ecosystems that most affected impacts caused by anthropogenic action, since it is the final compartments of various products produced by human activity. This study evaluated the fish specie Serrasalmus brandtii (pirambeba), collected at two sites in the Itaparica reservoir (Brazil) during March/12 to January/2013 through biochemical and genotoxic biomarkers. Around the reservoir resettlement areas exist with agricultural practices using agrochemicals. Thus, the study aimed to use S. brandtii as specie sentinel for this region of the Sao Francisco river. There was no significant difference in the physicochemical parameters measured such as temperature and dissolved oxygen over the sample period. Among the morphological parameters, the masses of the specimens varied between sampling period. Acetylcholinesterase (AChE) and butyrylcholinesterase (BChE) activities were quantify on the brain and muscle specimens collected from the two sites. Brain AChE from pirambeba collected at site 1 showed a significant decay in specific activity over the study period, however protein content did not show the same profile. Brain BChE specific activity had significant variation during the sampling period. On the contrary, pirambeba collected at site 2 showed no significant difference in the brain AChE specific activity and protein content. Brain BChE of these specimens showed significant variation on the specific activity values. On muscle tissue, pirambeba collected at site 1 showed significant variation in the values of AChE specific activity as well as on the protein content during the sample period. BChE specific activity on the muscle also had significant variation. Pirambeba collected at site 2 showed significant variation on muscle AChE specific activity and protein content values over the analyzed period. For muscle BChE activity,values, the results showed pattern similar to the one observed on site 1. Genotoxicity assays were performed on pirambeba erythrocyte cells collected at two sites. The results showed frequency of micronuclei (MN) and significant variation between the mean frequencies of MN over the study period was observed. Nuclear abnormalities (NA) were also analyzed and the results indicated that pirambeba the site 1 had higher nuclear abnormalities frequencies than the pirambeba from site 2. The Comet assay indicated that majority of erythrocyte nuclei analyzed from both sites shown class 1damage indicating slight DNA damage. In vitro studies were also performed for the characterization of brain AChE from pirambeba and kinetic assays showed values of 0.324 ± 0.04 mmol /L and 0.709 ± 0.014 mmol / min-1.mg protein for the apparent kinetic constants Kmapp and Vmáxapp respectively. Brain AChE inhibitory assays showed that muscle AChE (0.362±0.2 μM) was more sensitive to carbamate eserine that brain AChE (0.887 ± 0.1 μM) AChE and when compared brain AChE between eserine (0.887 ± 0,1μM) and glyphosate (2,276 ± 0,02μM), there was a greater sensitivity for brain AChE with eserine. We conclude that among the biomarkers genotoxic tested, the results showed that the MN test was considered the most sensitive; S. brandtii specie can be a specie sentinel for the submedium San Francisco region, since was present in all samples of the river, even during the most severe period of drought and low water level, but also by having a direct relationship with the AChE activity and forming MN. / Ambientes aquáticos são ecossistemas que mais sofrem impactos causados pela ação antropogênica, uma vez que constitui compartimentos finais de vários produtos gerados pela atividade humana. O presente trabalho avaliou a espécie de peixe Serrasalmus brandtii (pirambeba), coletada em dois sítios no reservatório Itaparica (Brasil) durante o período de março/12 a janeiro de 2013 através de biomarcadores bioquímicos e genotóxicos. No entorno do reservatório existem reassentamentos com práticas agrícolas empregando agroquímicos. Desta forma, o trabalho visou a utilização de S. brandtii como sentinela no rio Sao Francisco. Não houve diferença marcante nos parâmetros físico-químicos temperatura e oxigênio dissolvido mensurados ao longo do período amostral. Entre os parâmetros morfológicos, as massas dos espécimes variaram entre os meses de amostragem. Foi realizada quantificação de atividade acetilcolinesterase (AChE) e butirilcolinesterase (BChE) cerebral e muscular de espécimes coletados nos dois sítios. AChE cerebral de pirambeba coletada no sítio 1 apresentou decaimento significativo na atividade específica ao longo do período estudado, no entanto o conteúdo protéico não mostrou o mesmo perfil. A atividade específica BChE cerebral mostrou variação significativa durante o período de amostragem. Todavia, pirambeba coletada no sítio 2 não mostrou diferença significativa na atividade específica de AChE cerebral e conteúdo protéico. BChE cerebral nesses espécimes apresentou variação significativa nos valores de atividade específica. No tecido muscular, pirambeba coletada no sítio 1 apresentou variação significativa nos valores de atividade específica AChE, bem como conteúdo protéico durante período amostrado. A atividade específica de BChE muscular também teve variação significativa. Espécimes coletadas no sítio 2 apresentaram variação significativa na atividade específica da AChE muscular e no conteúdo protéico ao longo do período estudado. Para valores de atividade de BChE muscular, os resultados apresentaram um padrão semelhante ao observado no sítio 1. Os ensaios genotóxicos foram realizados em eritrócitos de pirambeba coletadas nos dois sítios. Os resultados mostraram frequência de micronúcleos (MN) e variação significativa entre as freqüências de MN foi observada ao longo do período estudado. Anormalidades nucleares (AN) também foram analisadas e resultados indicaram que espécimes do sítio 1 tiveram maiores freqüências de AN do que espécimes do sítio 2. O ensaio Cometa indicou que a maioria dos núcleos de eritrócitos analisados nos dois sítios apresentou dano na classe1, indicando danos leves no DNA das células. Estudos in vitro foram também realizados para caracterização de AChE cerebral de pirambeba e ensaios cinéticos mostraram valores de 0,324±0,04 mmol/L e 0,709±0,014 mmol/min-1.mg de proteína para constantes cinéticas aparentes Kmapp e Vmáxapp, respectivamente. Ensaios inibitórios de AChE mostraram que AChE muscular (0,362±0,2) foi mais sensível ao carbamato de eserina que a AChE cerebral (0,887±0,1) e quando comparados AChE cerebral entre a eserina (0.887±0,1μM) e o glifosato (2,276±0,02μM), verificou-se uma maior sensibilidade para a AChE cerebral com eserina. Concluímos que dentre os biomarcadores genotóxicos testados, os resultados mostraram que teste de MN foi considerado o mais sensível; a espécie S. brandtii pode ser a espécie sentinela para a região do submédio São Francisco, visto que esteve presente no rio em todas as coletas, mesmo durante o período mais rigoroso de estiagem e baixo nível da água, como também por apresentar relação direta com a atividade de AChE e a formação de MN.

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2017-09-21T19:58:03Z No. of bitstreams: 2 Tese - Fernanda Craveiro Franco - 2017.pdf: 4803005 bytes, checksum: 35b5c5c99f5a0689a4c30ebe8ea513cd (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-09-22T11:38:57Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Fernanda Craveiro Franco - 2017.pdf: 4803005 bytes, checksum: 35b5c5c99f5a0689a4c30ebe8ea513cd (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-22T11:38:57Z (GMT). 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For this, a systematic review of articles published between the years of 2011 and 2015 was carried out, focusing on these exposure conditions. The results showed that 44% of the studies addressed only men and 44% approached men and women, and 78% used rural workers as an exposed population. The most evaluated class of pesticide was organophosphorus. The studies were separated by methodologies of analysis used and all showed some type of alteration in the populations occupationally exposed to pesticides. The second chapter, published in the journal Environmental Science and Pollution Research, considered the dengue scene in the state of Goias and techniques of mosquitoes control, and sought to understand the genotoxic effects caused by exposure of endemic agents to pesticides used against Aedes aegypti, being the first study published with this group of workers. The main pesticides used were insecticides and larvicides and an increase in DNA damage was observed in the exposed population, without influence of the lifestyle factors. In the whole transcriptome assay the differential expression of genes related to various chronic diseases was observed. Finally, the third chapter was carried out in collaboration with the Institute of Experimental Medicine of the Czech Academy of Sciences, aiming the determination of cytotoxic and genotoxic effects caused by in vitro exposure to different types of metallic nanomaterials. In nanomaterials that showed cell viability reduction (cytotoxic), an increase in genotoxicity was also identified. In addition, three of the four non-cytotoxic nanomaterials evaluated showed genotoxic effects. Studies aimed at detecting the compounds genotoxic potential are extremely important for the regulatory definition and identification of risks caused by exposure. In this study, the toxicological and genotoxic effects of different compounds and mixtures were evaluated using traditional and modern techniques, in vitro or by human biomonitoring, seeking to understand and determine the risks involved in exposure to these substances. / Compostos que interagem com a molécula de DNA podem provocar alterações genotóxicas. Os testes utilizados para avaliação de genotoxicidade evoluíram ao longo dos anos, apresentando grande eficiência. Atualmente, utilizam-se várias metodologias tradicionais, como o ensaio cometa, e também algumas mais modernas, baseadas na biologia molecular. Considerando a importância de detectar os efeitos causados pela exposição a agentes potencialmente genotóxicos, essa tese apresenta três capítulos com formas de abordagem distintas, referente a essa temática. O primeiro capítulo visou a avaliação de estudos publicados acerca dos efeitos mutagênicos, genotóxicos e oxidativos causados pela exposição ocupacional a pesticidas pela realização uma revisão sistemática de artigos publicados entre os anos de 2011 a 2015. Observou-se que 44% dos estudos abordaram exclusivamente indivíduos do sexo masculino e 44% abordaram ambos os sexos, e 78% utilizaram trabalhadores rurais como população exposta. A classe de pesticida mais avaliada foi a de organofosforado. Os estudos foram separados por metodologias de análise utilizada e todos apresentaram algum tipo de alteração nas populações expostas a pesticidas no ambiente de trabalho. O segundo capítulo, publicado na revista Environmental Science and Pollution Research, considerou o cenário da dengue no estado de Goiás e as formas de combate ao mosquito, e buscou compreender os efeitos genotóxicos causados pela exposição de Agentes de combate a endemias aos pesticidas utilizados contra o mosquito, sendo o primeiro estudo publicado com esse grupo de trabalhadores na região centro-oeste. Os principais pesticidas utilizados foram inseticidas e larvicidas e foi observado um aumento no dano ao DNA na população exposta, sem influência dos fatores relacionados ao estilo de vida. No ensaio de transcritoma foi observada a expressão diferencial de genes relacionados a diversas doenças crônicas. Finalmente, o terceiro capítulo foi realizado em colaboração com o Instituto de Medicina Experimental, da Academia Tcheca de Ciências, visando a determinação de efeitos citotóxicos e genotóxicos, causados pela exposição in vitro a diferentes tipos de nanomateriais metálicos. Nos nanomateriais que apresentaram redução na viabilidade celular (citotóxicos) também foi identificado aumento na genotoxicidade. Além disso, três dos quatro nanomateriais não citotóxicos avaliados apresentaram efeitos genotóxicos. Estudos que visam detectar o potencial gentoxicológico de compostos são de extrema importância para definição de normas e regulamentações de aplicação e identificação dos riscos causados pela exposição. Nesse estudo, foram avaliados os efeitos toxicológicos e genotóxicos de diferentes compostos e misturas, com a utilização de técnicas tradicionais e modernas, in vitro ou por biomonitoramento humano, buscando compreender e determinar os riscos envolvidos na exposição a essas substâncias.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-02-06T09:39:55Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Rangel Moreira Silva - 2016.pdf: 3905320 bytes, checksum: 6b2881f7623815dc402d04f906727e47 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-02-06T09:40:57Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Rangel Moreira Silva - 2016.pdf: 3905320 bytes, checksum: 6b2881f7623815dc402d04f906727e47 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-06T09:40:57Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Rangel Moreira Silva - 2016.pdf: 3905320 bytes, checksum: 6b2881f7623815dc402d04f906727e47 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-06-30 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Myrciaria cauliflora (Mart), commonly known as “Jabuticaba” (Brazilian Grape) occurs in all of South America, especially in Brazil. This species presents medicinal properties and it is popularly used to treat diarrhea and respiratory diseases. It has already been proven several biological activities such as antioxidant, antimutagenic and anti-proliferative. The phytochemical analysis of M. cauliflora detected the presence of several compounds, including the ellagitannin pedunculagin. Due to the widespread use of this species for therapeutic and food purposes, this study aimed to evaluate the genotoxic, antigenotoxic, cytotoxic and anticytotoxic actions of the aqueous fraction (AF) and pedunculagin from M. cauliflora seed, by micronucleus (MN) test and the comet assay in mice bone marrow cells. In order to analyze AF and pedunculagin activities prior to CP’s toxic effects, the animals were co-, pre- and post-treated with these substances. The results showed that AF at 24 h treatment did not show genotoxic or cytotoxic effects in the MN test and comet assay. However, AF showed cytotoxic action, but did not show genotoxic effect at 120 h treatment in the MN test. In the comet assay it was able to significantly reduce the frequency of DNA breaks when compared to the negative control. In the evaluation of the antigenotoxic and anticytotoxic effects, it was observed that in all treatments, in both assays, AF and pedunculagin showed antigenotoxic and anticytotoxic activities, but in the post-treatment pedunculagin increased the cytotoxic effect of CP. In general, our results indicated that AF and pedunculagin were able to protect the mice bone marrow cells against DNA damage induced by CP in the MN test and comet assay. These findings indicated that AF and pedunculagin could be probable candidates for the development of new drugs. / Myrciaria cauliflora (Mart), comumente conhecida como jabuticaba, ocorre em toda América do Sul e especialmente no Brasil. Esta espécie apresenta propriedades medicinais e é popularmente usada para tratar diarreia e doenças respiratórias. A essa espécie já foram atribuídas várias atividades biológicas, tais como: antioxidante, antimutagênica e antiproliferativa. A análise fitoquímica de M. cauliflora detectou a presença de vários compostos, incluindo o elagitanino pedunculagina. Devido ao grande uso desta espécie para fins terapêuticos e alimentícios, este estudo teve como objetivo avaliar as ações genotóxica, antigenotóxica, citotóxica e anticitotóxica da fração aquosa (FA) e do composto pedunculagina da semente de M. cauliflora pelo teste do micronúcleo e ensaio do cometa em células da medula óssea de camundongos. A fim de avaliar a atividade da FA e da pedunculagina frente aos efeitos genotóxicos da CP, os animais foram co, pré e pós-tratados com essas substâncias. Os resultados mostraram que a FA no tempo de 24 horas não apresentou efeitos genotóxico e citotóxico no teste do micronúcleo e no ensaio do cometa. No tempo de 120 horas, pelo teste do micronúcleo, a FA não mostrou ação genotóxica, porém exibiu efeito citotóxico e pelo ensaio do cometa, a frequência de quebras de DNA foi menor, quando comparada ao controle negativo. Na avaliação dos efeitos da antigenotoxicidade e anticitotoxicidade, em ambos os ensaios, a FA e a pedunculagina mostraram atividades antigenotóxica e anticitotóxica, porém, no pós-tratamento, o composto pedunculagina potencializou o efeito citotóxico da CP. De modo geral, nossos resultados indicaram que a FA e a pedunculagina foram capazes de proteger as células da medula óssea de camundongos contra os danos no DNA induzidos pela CP no teste do micronúcleo e no ensaio do cometa. Esses resultados indicaram que a FA e a pedunculagina podem ser prováveis candidatos para o desenvolvimento de novas drogas.

Made available in DSpace on 2016-05-02T13:54:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao completa Patricia Scotini Freitas.pdf: 380463 bytes, checksum: 593d35f67c31f8a091c16952ef946b32 (MD5) Previous issue date: 2007-04-27 / Coordenacao de Aperfeicoamento de Pessoal de Nïvel Superior / Blueberry Vaccinium corymbosum is a vegetable very rich in anthocyanins which have strong antioxidant capacity and other potential health benefits and because of that is widely consumed in the world as medicinal plant In this work the mutagenic potential of the crude extract from this plant was studied in mice after acute treatment using the comet and micronucleus assay Animals were treated orally with three different concentrations of the extract (1000 1500 and 2000 mg/kg) Peripheral blood cells of Swiss mice were collected 4 and 24 hours after the treatment for the comet assay and 48 and 72 hours for the micronucleus test The results have shown that the extract of Vaccinium corymbosum did not induce statistically significant increases in the average number of damages to desoxyribonucleic acid in peripheral blood cells However a significant increase in the mean of the micronucleated polychromatic erythrocytes was observed at three tested doses It is suggested that its consumption could be moderate until a definitive risk for humans is established / Vaccinium corymbosum é um vegetal muito rico em antocianinas que tem uma grande capacidade antioxidante e outros potenciais benefícios à saúde e por este motivo é altamente utilizado no mundo inteiro como planta medicinal Neste trabalho foi analisado o potencial mutagênico da administração aguda do extrato bruto de frutos desta planta em células de camundongos utilizando o ensaio cometa e o teste do micronúcleo Os animais foram tratados oralmente com três diferentes concentrações do extrato (1000, 1500 e 2000 mg/kg de peso corporal) Células do sangue periférico de camundongos foram coletados 4 e 24 horas após o tratamento para a realização do ensaio cometa e 48 e 72 horas para o teste do micronúcleo Os resultados mostraram que o extrato de Vaccinium corymbosum não induziu aumentos estatisticamente significativos de danos ao ácido desoxirribonucléico nas células de sangue periférico Entretanto o teste do micronúcleo evidenciou um aumento significativo na média de eritrócitos policromáticos micronucleados nas três concentrações testadas Sugere-se que o consumo deste extrato seja moderado até que seu risco definitivo para os seres humanos seja melhor estabelecido