Thesis (Ph. D.)--University of Missouri--Columbia, 1997. / Typescript. Vita. Includes bibliographical references (leaves: 147-162). Also available on the Internet.

Thesis (Ph. D.)--Chemical and Biomolecular Engineering, Georgia Institute of Technology, 2006. / Dr. Peter A. Lane, Committee Member ; Dr. Larry V. McIntire, Committee Member ; Dr. Ronald W. Rousseau, Committee Member ; Dr. James R. Eckman, Committee Member ; Dr. Timothy M. Wick, Committee Chair.

Este trabalho propõe um sistema de baixo custo baseado em uma plataforma com um processador RISC para contagem de células vermelhas (hemácias) de animais silvestres aplicável a animais domésticos. Este sistema tem o objetivo de realizar a contagem semi-automática de células de diferentes espécies de animais silvestre, cujos tamanhos e volumes variam consideravelmente. Os resultados obtidos com a contagem de células de cães e cavalos mostram que o sistema proposto consegue contar de modo automático a maioria das células, apresentando um erro médio de 1,88% de falsos negativos e de 1,82% de falsos positivos. O sistema permite ao usuário corrigir manualmente esta contagem, no máximo, 3,70% da quantidade total das células. Também, o sistema permite o armazenamento das imagens das amostras como forma de documentação do exame. / A RISC-based platform is proposed for supporting the counting of red blood cells of wild animals. This platform is aimed for semi-automatic counting of the cells from different species of animals where size and volume of cells can greatly differ. The results show that this system can automatically count most of the cells correctly with an average error of only 1.88% of false negatives and 1.82% of false positives. It’s possible for the user to manually correct the results where a work at most 3.70%. It´s also possible to storage the images for future use.

Made available in DSpace on 2016-08-15T20:31:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarcondesDT_DISSERT.pdf: 728916 bytes, checksum: 8c13a239f8df3b37ffebe85a27801c15 (MD5) Previous issue date: 2013-11-28 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The present study aimed to evaluate the hematological, biochemical and hemogasometric changes in caprine blood stored in CPDA-1 and CPD/SAG-M bags. Seven male, adult, neutered, mixed breed goats weighing an average of 45kg were used. From each animal, 25% of the estimated total blood volume was collected into two plastic bags, one containing CPDA-1 and another with CPD/SAG-M; next they were stored for 42 days. Hematological (number of erythrocytes, packed cell volume, total and plasmatic hemoglobin, degree of hemolysis, mean cell volume, leukocytes), biochemical (glucose, lactate, sodium, potassium, total plasma protein), hemogasometric (pH, bicarbonate, partial pressure of oxygen, partial pressure of carbon dioxide, oxygen saturation, base deficit, total carbon dioxide) and microbiological evaluations were performed in seven moments (T), T0 (immediately after sampling), T7 (seven days), T14 (fourteen days), T21 (twenty-one days) , T28 (twenty-eight days), T35 (thirty-five days) and T42 (forty-two days after sampling). In the two bags there was an increase of plasmatic hemoglobin, degree of hemolysis, lactate, pO2 and a decrease of total hemoglobin and pH. In the bags there was no alteration in the erythrocyte count, glucose, sodium, potassium or partial pressure of carbon dioxide. In the comparison with the CPDA-1, the CPD/SAG-M bag had lower erythrocytes, packed cell volume, total hemoglobin and sodium, as well as higher levels of hemolysis and plasmatic hemoglobin. The changes observed in the caprine blood stored for 42 days in CPDA-1 and CPD/SAG-M bags were not sufficient to invalidate their use as a therapeutic resource, however, it has been found that it is preferable to use CPDA-1 bags for the conservation of caprine blood / O presente trabalho objetivou fazer avaliação hematológica, bioquímica e hemogasométrica do sangue caprino armazenado em bolsas CPDA-1 e CPD/SAG-M. Foram utilizados 7 caprinos machos, adultos, castrados, sem raça definida, pesando em média 45kg. O sangue foi coletado em duas bolsas plásticas, uma contendo CPDA-1 e outra CPD/SAG-M, sendo armazenadas durante 42 dias. Realizou-se avaliações hematológicas (número de eritrócitos, volume globular, hemoglobina total e plasmática, grau de hemólise, volume corpuscular médio, leucócitos), variáveis bioquímicas (glicose, lactato, sódio, potássio, proteínas totais), variáveis hemogasométricas (pH, bicarbonato, pressão parcial de oxigênio e de dióxido de carbono, saturação de oxigênio, déficit de base, dióxido de carbono total) e microbiologia, em sete momentos (T), sendo T0 (imediatamente após a coleta), T7 (sete dias), T14 (quatorze dias), T21 (vinte e um dias), T28 (vinte e oito dias), T35 (trinta e cinco dias) e T42 (quarenta e dois dias após a coleta). Nas duas bolsas houve aumento da hemoglobina plasmática, grau de hemólise, lactato, pressão parcial de oxigênio, redução de hemoglobina total e pH. Nas bolsas não houve variação no número de eritrócitos, glicose, sódio, potássio e pressão parcial de dióxido de carbono. Na comparação com a CPDA-1, a bolsa CPD/SAG-M apresentou menores valores de eritrócitos, VG, hemoglobina total e sódio, e maiores valores de grau de hemólise e hemoglobina plasmática. As alterações observadas no sangue caprino armazenado durante 42 dias, em bolsas CPDA-1 e CPD/SAG-M, não foram suficientes para invalidar seu uso como recurso terapêutico

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-09-04T19:02:19Z No. of bitstreams: 1 Yanaihara Pinchemel O papel de ROS (especies reativas de oxigenio)....pdf: 2179005 bytes, checksum: aa4588aae63e38910925daad6e5a1a78 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-09-04T19:02:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Yanaihara Pinchemel O papel de ROS (especies reativas de oxigenio)....pdf: 2179005 bytes, checksum: aa4588aae63e38910925daad6e5a1a78 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / Sepse é uma das doenças com a maior causa de morbidade para as quais não existe tratamento efetivo capaz de mudar o desfecho. O tratamento da sepse grave tem um custo alto devido ao fato de, geralmente, ser tratada em Unidades de Terapia Intensiva com fluídos intravenosos e antibióticos caros. Neste trabalho nós estudamos as primeiras etapas desta patologia com o foco na produção de espécies reativas de oxigênio deletérias pelas células inflamatórias circulantes. Nós encontramos usando microscopia eletrônica de varredura e análise de esfregaço de sangue a presença de eritrócitos morfologicamente alterados com a predominância de equinócitos. O mesmo efeito pode ser observado quando o sangue de voluntários sadios foram submetidos ao estresse oxidativo por adição direta de radicais livres oxidantes, principalmente peróxido de nitrito ou através da redução dos antioxidantes intracelulares, neste caso, o mais importante, os sistemas dependentes de glutationa. Como macrófagos removem eritrócitos modificados, foi utilizada a linhagem celular de macrófagos J774 e observamos a adesão imediata e iniciação do processo de fagocitose por essas células. Essas células iniciam a produção de superóxido quando em contato com eritrócitos modificados in vitro ou eritrócitos de pacientes sépticos. Nós também medimos a produção de ROS em sangue total pelo contador de fótons, usando como inibidores a superóxido dismutase para superóxido, azida para mieloperoxidase, desferroxamina e hidralazina para peróxido de nitrito, todas essas espécies estiveram presentes. O valor medido no sangue dos pacientes sépticos foi aumentado de 20 a 1000 vezes em relação aos voluntários. Quando usamos eritrócitos de pacientes sépticos com neutrófilos isolados observamos a produção de ROS durante a adesão dessas células com os neutrófilos. Esses dados nos permite sugerir que durante a sepse o primeiro contado com patógenos inicia uma produção de ROS que modifica oxidativamente os eritrócitos por um mecanismo de feedback positivo o qual amplifica a produção de espécies oxidativas para além da presença desses patógenos causando danos nos vasos e órgãos. / Sepsis is one of is a illness with the highest cause of morbidity for which no effective treatment exist capable of change the outcome. Severe sepsis treatment has a high care cost due to the fact that is usually treated in the intensive care unit with intravenous fluids and expensive antibiotics. In this submission we study the earliest stages of this pathology with the focus in the deleterious production of Reactive Oxygen Species by the inflammatory circulating cells. We found using both scanning electron microscopy and analysis of blood smear the ubiquitous presence of red blood cells (RBC) morphologically modified, with the predominance of equinocytes. The same effects could be observed when the blood of healthy volunteers were subject to oxidative stress, either by direct addition of free radicals oxidants, mainly peroxynitrite, or by lowering the intracellular antioxidants, in this case arguably the more important, the GSH dependent systems. As macrophage removes modified RBC we used the macrophage cell line j774 and could see the immediate attachment and initiation of phagocytosis by these cells. These cells initiate a production of superoxide when in contact with in vitro modified or sepsis pacients RBCs. We also measure total blood ROS production by photon counting, using as inhibitors SOD for superoxide, azide for myeloperoxidase and desferrioxamine and hydralazine for peroxinitrite; all these species were present. The amount measured in the blood of patients was increased from 20 to 1000 times in relation to controls. When we used sepsis patients RBC with isolated neutrophils again we saw attachment of these cells to the PMN a production of ROS. These data allow us to suggest that during sepsis the initial contact with pathogens initiate a production of ROS that modifies oxidativaly RBC that than by a mechanism of positive feedback amplifies the production beyond the presence of the pathogens and causes vessels and organs damage that this species are known to induce.

The genome size of evolutionary polyploid, neopolyploid and hybrid sturgeons is well known for its high variability. Aim of this study was 1) to specify the genome size of polyploid and neopolyploid sturgeons using an analysis of 2-D and 3-D images of specifically stained cells nuclei, 2) to evaluate the samples of populations for cytogenetic analysis needs and thereafter, 3) to compare both methods and record the data either for next research or for negative selection from the broodstock. This test has been done at the laboratory of molecular, cellular and quantitative genetics, Faculty of Fisheries and Protection of Waters USB in Vodňany using all sturgeons spawners and using samples obtained from some foreign fish farms which cooperated with the faculty. The samples included A. ruthenus, A. baerii, A. stellatus, A. gueldenstaedtii and Huso huso, intentionally bred hybrids of A. gueldenstaedtii (8n) x A. baerii (12n), A. baerii (8n) x A. ruthenus (4n), A. gueldenstaedtii (8n) x A. baerii (10n) a A. gueldenstaedtii (8n) x A. ruthenus (4n). As methods have been chosen image cytometry and confocal microscopy which use image digitalization and subsequently its computer analysis. The genome size was measured from the size of specifically stained nuclei of erythrocytes in specimens sampled. Result of this study was measuring the genome size in sturgeons under study using different methods, recording the obtained data, description of spatial conformation changes of cell nucleus with increasing ploidy level and deduction of impact to their physiology and comparing the methods between each other. The conclusion is necessity of another sturgeons genome size determination , choice of the best methods for more effective search and research of non-standard individuals and subsequently an examination of their physiological differences.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-08-28Bitstream added on 2014-06-13T18:29:10Z : No. of bitstreams: 1 sabino_aj_me_araca.pdf: 203707 bytes, checksum: 2e1c3c45b12f8f08080a961981b5bb46 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Objetivou-se obter valores eritrocitários de referência para avestruzes criados em sistema comercial na Região de São José do Rio Preto, São Paulo, Brasil. Para tal foi padronizada a forma de colheita de sangue, comparando o efeito de dois diferentes anticoagulantes (ácido etilenodiaminotetracético sódico - EDTA e heparina sódica) na morfometria e integridade dos eritrócitos permitindo concluir que, para fins de análises quantitativa e morfométrica dos parâmetros eritrocitários de avestruzes, a heparina sódica (10 U/mL sangue) é um anticoagulante mais adequando do que o EDTA sódico (2 mg/ mL sangue). Foram analisadas 240 amostras de sangue heparinizadas de avestruzes de ambos sexos, divididos em três diferentes faixas etárias: 4├13meses; 13 ├ 22 meses e 22 ├ 30 meses. Utilizando-se método analítico padrão, verificou-se que os valores de eritrócitos, hemoglobina, hematócrito, volume corpuscular médio (VCM), hemoglobina corpuscular média (HCM), concentração da hemoglobina corpuscular média (CHCM), o diâmetro maior e menor dos eritrócitos sofrem influência do sexo (fêmeas) e faixa etária. Concluiu-se deste estudo que para adequada interpretação clínica dos valores eritrocitários dos avestruzes deve-se levar em consideração o tipo de anticoagulante utilizado para obtenção da amostra e valores de referência que considere as particularidades do sexo e da idade. / The aim of this study was to obtain the reference values of erythrocyte indices for ostriches raised in a commercial system in the region of São José do Rio Preto, São Paulo State, Brazil. To achieve the purpose of the study, we standardized a blood specimen collection comparing the effect of two different anticoagulants such as Ethylenediaminetetraacetic Acid sodium (EDTA) and Heparin sodium on the erythrocyte morphometry and integrity, which made possible to conclude that for the purposes of quantitative and morphometric analyses of the erythrocyte parameters of ostriches, the heparin sodium (10 U/mL of blood) is a much more appropriated anticoagulant than the EDTA sodium (2 mg/mL of blood). We analyzed 240 heparinized blood samples of both male and female ostriches divided into different age groups: 4 ├ 13 months; 13 ├ 22 months; and 22 ├ 30 months. Using a standard analytical method it was observed that the erythrocytes, hemoglobin, hematocrit, mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (MCH); mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) values, and both the greater and the smaller diameters of the erythrocytes are under the influence of gender and age group. It was concluded that to have an appropriate clinical interpretation of the erythrocyte indices of the ostriches it should be taken into account the type of the anticoagulant used to obtain the sample and the reference values considering the peculiarities of ostriches’ gender and age.

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:43:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:07:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 06215.pdf: 3526908 bytes, checksum: cc8e43873e065cc38e12399bc94209dc (MD5) / Tese (Doutoramento) / IPEN/T / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP

Orientador: Paulo César Ciarlini / Banca: José Juradir Fagliari / Banca: Suely Regina Mogami Bomfim / Resumo: Objetivou-se obter valores eritrocitários de referência para avestruzes criados em sistema comercial na Região de São José do Rio Preto, São Paulo, Brasil. Para tal foi padronizada a forma de colheita de sangue, comparando o efeito de dois diferentes anticoagulantes (ácido etilenodiaminotetracético sódico - EDTA e heparina sódica) na morfometria e integridade dos eritrócitos permitindo concluir que, para fins de análises quantitativa e morfométrica dos parâmetros eritrocitários de avestruzes, a heparina sódica (10 U/mL sangue) é um anticoagulante mais adequando do que o EDTA sódico (2 mg/ mL sangue). Foram analisadas 240 amostras de sangue heparinizadas de avestruzes de ambos sexos, divididos em três diferentes faixas etárias: 4├13meses; 13 ├ 22 meses e 22 ├ 30 meses. Utilizando-se método analítico padrão, verificou-se que os valores de eritrócitos, hemoglobina, hematócrito, volume corpuscular médio (VCM), hemoglobina corpuscular média (HCM), concentração da hemoglobina corpuscular média (CHCM), o diâmetro maior e menor dos eritrócitos sofrem influência do sexo (fêmeas) e faixa etária. Concluiu-se deste estudo que para adequada interpretação clínica dos valores eritrocitários dos avestruzes deve-se levar em consideração o tipo de anticoagulante utilizado para obtenção da amostra e valores de referência que considere as particularidades do sexo e da idade. / Abstract: The aim of this study was to obtain the reference values of erythrocyte indices for ostriches raised in a commercial system in the region of São José do Rio Preto, São Paulo State, Brazil. To achieve the purpose of the study, we standardized a blood specimen collection comparing the effect of two different anticoagulants such as Ethylenediaminetetraacetic Acid sodium (EDTA) and Heparin sodium on the erythrocyte morphometry and integrity, which made possible to conclude that for the purposes of quantitative and morphometric analyses of the erythrocyte parameters of ostriches, the heparin sodium (10 U/mL of blood) is a much more appropriated anticoagulant than the EDTA sodium (2 mg/mL of blood). We analyzed 240 heparinized blood samples of both male and female ostriches divided into different age groups: 4 ├ 13 months; 13 ├ 22 months; and 22 ├ 30 months. Using a standard analytical method it was observed that the erythrocytes, hemoglobin, hematocrit, mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (MCH); mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) values, and both the greater and the smaller diameters of the erythrocytes are under the influence of gender and age group. It was concluded that to have an appropriate clinical interpretation of the erythrocyte indices of the ostriches it should be taken into account the type of the anticoagulant used to obtain the sample and the reference values considering the peculiarities of ostriches' gender and age. / Mestre

NaCl is a classic osmoregulatory agent that in isotonic conditions with the plasma is able to stabilize the red blood cells (RBC) in a relaxed (R) state, where these cells congregate a certain degree of stability with the capacity of exercise properly all its functions. The ethanol is a classic chaotropic agent, capable of promoting denaturation, but is also an osmolyte, able to promote stabilization of RBC. In 0.9% w/v NaCl and between 0 and 24% v/v ethanol, the RBC suffer lysis, but between 24 and 32%, the RBC are stabilized by the action of ethanol. This stabilization forms compacted or tight (T) RBC, which lost however many cell functions. In this work we studied the effect of concentrations of NaCl at 0.5, 0.9 and 1.1% w/v on the fixed time incubation (30 min) of human blood with concentrations of ethanol between 0 and 32%v/v. The RBC lysis and stabilization transitions by ethanol were described by sigmoids and characterized by their lysis half-point (D50) and stabilization (S50) transitions, respectively, and also by the amplitude (dX) and height (h) of those curves. The average value of D50 increased from 12.61 to 14.29%, but fell back again to 13.97% of ethanol/100 mL of 0.5, 0.9 and 1.1% w/v NaCl, respectively. The average value of S50 fell from 27.26 to 26.22 and 25.99% of ethanol/100 mL of solution with the increase in the concentration of NaCl solution of 0.5 to 0.9 and mL of 1.1% w/v saline, respectively. These results indicate that hypertonic saline solution potentiated the stabilizing effect of ethanol, certainly moving the RBC from of the state R to the state T. / O NaCl é um agente osmorregulatório clássico que em condições isotônicas com o plasma é capaz de estabilizar os eritrócitos em um estado R, onde essas células congregam um certo grau de estabilidade com a capacidade de exercerem suas funções. O etanol é um agente caotrópico clássico, capaz de promover desnaturação, mas é também um osmólito, capaz de promover estabilização de eritrócitos. Em NaCl a 0,9% m/v e entre 0 e 24% v/v de etanol, os eritrócitos sofrem lise, mas entre 24 e 32% v/v, os eritrócitos são estabilizados pela ação do etanol. Essa estabilização forma eritrócitos compactados, em um estado morfológico T, que perdem, entretanto, várias funções dessas células. Neste trabalho nós estudamos o efeito de concentrações de NaCl a 0,5, 0,9 e 1,1% m/v sobre a incubação por tempo fixo (30 min) de amostras de sangue humano com concentrações de etanol entre 0 e 32% v/v. As transições de lise e estabilização dos eritrócitos pelo etanol foram descritas por sigmóides e caracterizadas pelo ponto de meia-transição de lise (D50) e de estabilização (S50), respectivamente, mas também pela amplitude (dX) e altura (h) daquelas curvas (h). O valor de D50 do etanol aumentou de 12,61 para 14,29, mas voltou a diminuir para 13,97%, com o aumento da concentração da NaCl de 0,5 para 0,9 e 1,1% m/v, respectivamente. O valor médio de S50 diminuiu de 27,26 para 26,22 e 25,99% de etanol/100 mL de solução com o aumento na concentração de NaCl da solução de 0,5 para 0,9 e 1,1% m/v, respectivamente. Esses resultados indicam que a solução salina hipertônica potencializou o efeito de estabilização promovido pelo etanol, certamente deslocando os eritrócitos do estado R para o estado T. / Mestre em Genética e Bioquímica