Se realizó el estudio hematológico de una población de 400 adultos mayores, de ambos sexos, que cumplieron los criterios de inclusión y que acudieron ambulatoriamente al Servicio Académico Asistencial de Análisis Clínicos (S.A.A.A.C) de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la U.N.M.S.M. Se determinaron los valores hematológicos: Número de hematíes, hemoglobina y hematocrito; a partir de los cuales se calcularon los Indices Eritrocitarios: Volumen corpuscular medio, Hemoglobina corpuscular media y Concentración de hemoglobina corpuscular media; para determinar si existe relación de estos parámetros con la edad y el sexo, y comparar los resultados obtenidos con los valores de referencia (2), y los reportados por otros autores. Los valores medios hallados fueron: Número de hematíes 4.23 mills/mm3, hematocrito 38.2 %, hemoglobina 13 g/dL, los que se encuentran dentro de los rangos normales, y muestran diferencias estadísticamente significativas (p<0.000) atribuibles al sexo y grupos etáreos. Los Indices eritrocitarios: V.C.M 90.31 μ3, H.C.M 30.7 pg. y C.H.C.M 34% están dentro de los rangos normales; no encontrándose diferencias estadísticamente significativas (p > 0.05) debidos a la edad y el sexo. Se encontró valores disminuidos de hemoglobina en el 28.5% y de hematocrito en el 19% de la población muestreada, siendo el grupo etáreo “mayor de 90 años” el que registra estos valores mas bajos (11.7 g/dL y 34.4% respectivamente). Los Indices eritrocitarios: VCM, HCM y CHCM son normales en el 99, 99.5 y 100 % respectivamente. PALABRAS CLAVES: Indices eritrocitarios, adulto mayor, hematíes, eritrocitos, hematocrito, glóbulos rojos, hemoglobina, volumen corpuscular medio, hemoglobina corpuscular media, concentración de hemoglobina corpuscular media, parámetros hematológicos, anemia. / The hematologic study of a population of 400 greater adults was made, of both sexes, that fulfilled the inclusion criteria and which the Pharmacy Faculty of and Biochemistry of the U.N.M.S.M went ambulatorily to the Welfare Academic of Clinical Analysis Service (S.A.A.A.C). The hematologic values were determined: Number of erythrocyte, hemoglobin and hematocrite; and from which they calculated the Erythrocyte Indices: Average corpuscular volume, corpuscular Hemoglobin average and Concentration of corpuscular hemoglobin average; in order to determine if it exists relation of these parameters with respect to sex and the age, and to compare the results obtained with the values of reference of the Manual Merck (2), and the reported ones by other investigators of different countries. The found average values were: Number of erythrocyte 4,23 mills/mm3, hematocrite 38,2%, hemoglobin 13 g/dL being within the normal ranks, obtaining statistically significant differences (p<0.000) between the values of erythrocyte, hematocrite and hemoglobin attributable to sex and etáreos groups. The Erythrocyte Indices: VCM 90,3 µ3, HCM 30,7 pg. and CHCM 34% were within the normal ranks; not being statistically significant differences (p > 0.05) with respect to the age and sex. One was diminished values of hemoglobin in the 28,5% and the hematocrite in 19% of the study population, being “the greater group of 90 years” the one that registers low values (11.7gr/dL y 34.4% respectively). The erythrocyte indices: VCM, HCM and CHCM are normal in the 99, 99.5 and 100% respectively. KEY WORDS: Erythrocitary Indices, greater adult, red cell, erythrocyte, hematocrit, globules, hemoglobin, corpuscular average, hemoglobin volume corpuscular average, hematologic concentration of corpuscular hemoglobin average, parameters, anemia.

Se realizó el estudio hematológico de una población de 400 adultos mayores, de ambos sexos, que cumplieron los criterios de inclusión y que acudieron ambulatoriamente al Servicio Académico Asistencial de Análisis Clínicos (S.A.A.A.C) de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la U.N.M.S.M. Se determinaron los valores hematológicos: Número de hematíes, hemoglobina y hematocrito; a partir de los cuales se calcularon los Indices Eritrocitarios: Volumen corpuscular medio, Hemoglobina corpuscular media y Concentración de hemoglobina corpuscular media; para determinar si existe relación de estos parámetros con la edad y el sexo, y comparar los resultados obtenidos con los valores de referencia (2), y los reportados por otros autores. Los valores medios hallados fueron: Número de hematíes 4.23 mills/mm3, hematocrito 38.2 %, hemoglobina 13 g/dL, los que se encuentran dentro de los rangos normales, y muestran diferencias estadísticamente significativas (p<0.000) atribuibles al sexo y grupos etáreos. Los Indices eritrocitarios: V.C.M 90.31 μ3, H.C.M 30.7 pg. y C.H.C.M 34% están dentro de los rangos normales; no encontrándose diferencias estadísticamente significativas (p > 0.05) debidos a la edad y el sexo. Se encontró valores disminuidos de hemoglobina en el 28.5% y de hematocrito en el 19% de la población muestreada, siendo el grupo etáreo “mayor de 90 años” el que registra estos valores mas bajos (11.7 g/dL y 34.4% respectivamente). Los Indices eritrocitarios: VCM, HCM y CHCM son normales en el 99, 99.5 y 100 % respectivamente. PALABRAS CLAVES: Indices eritrocitarios, adulto mayor, hematíes, eritrocitos, hematocrito, glóbulos rojos, hemoglobina, volumen corpuscular medio, hemoglobina corpuscular media, concentración de hemoglobina corpuscular media, parámetros hematológicos, anemia. / The hematologic study of a population of 400 greater adults was made, of both sexes, that fulfilled the inclusion criteria and which the Pharmacy Faculty of and Biochemistry of the U.N.M.S.M went ambulatorily to the Welfare Academic of Clinical Analysis Service (S.A.A.A.C). The hematologic values were determined: Number of erythrocyte, hemoglobin and hematocrite; and from which they calculated the Erythrocyte Indices: Average corpuscular volume, corpuscular Hemoglobin average and Concentration of corpuscular hemoglobin average; in order to determine if it exists relation of these parameters with respect to sex and the age, and to compare the results obtained with the values of reference of the Manual Merck (2), and the reported ones by other investigators of different countries. The found average values were: Number of erythrocyte 4,23 mills/mm3, hematocrite 38,2%, hemoglobin 13 g/dL being within the normal ranks, obtaining statistically significant differences (p<0.000) between the values of erythrocyte, hematocrite and hemoglobin attributable to sex and etáreos groups. The Erythrocyte Indices: VCM 90,3 µ3, HCM 30,7 pg. and CHCM 34% were within the normal ranks; not being statistically significant differences (p > 0.05) with respect to the age and sex. One was diminished values of hemoglobin in the 28,5% and the hematocrite in 19% of the study population, being “the greater group of 90 years” the one that registers low values (11.7gr/dL y 34.4% respectively). The erythrocyte indices: VCM, HCM and CHCM are normal in the 99, 99.5 and 100% respectively. KEY WORDS: Erythrocitary Indices, greater adult, red cell, erythrocyte, hematocrit, globules, hemoglobin, corpuscular average, hemoglobin volume corpuscular average, hematologic concentration of corpuscular hemoglobin average, parameters, anemia.

Orientador: Sara Terezinha Olalla Saad / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas. Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-27T08:46:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lima_PauloRobertoMoura_D.pdf: 4111332 bytes, checksum: 7243dfc06daf8a58f41c137629b12750 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: A esferocitose é um tipo comum de anemia hemolítica hereditária cujo primeiro defeito molecular foi caracterizado em 1992. A proteína banda 3, codificada pelo gene AE1, foi a primeira isoforma clonada de uma famma de genes de trocadores de ânions "Anion Exchanger-AE gene family" e é a mais abundante das proteínas integrais da membrana eritrocitária. Alterações moleculares neste polipeptídeo estão associadas à formação de esferócitos. Hemácias esferocíticas são osmoticamente frágeis, estando mais sujeitas à lise e ao sequestramento pelo baço, o que encurta seu tempo de vida. A proteína banda 3 também é expressa nos rins, na membrana basolateral de células alfa intercaladas do tubo coletor cortical, onde é responsável pela reabsorção de bicarbonato, compensando a secreção de ácidos pela H+ ATPase vacuolar apical, e participando da regulação fina do equilíbrio ácido-básico. Tanto a banda 3 eritrocitária como a renal são isoformas de um mesmo gene que através de um promotor tecido específico, diferem quanto à transcrição. O mRNA da banda 3 renal não apresenta os três primeiros exons observados na forma eritróide. O presente estudo teve o objetivo de investigar as alterações moleculares e regulação do gene da banda 3 na esferocitose hereditária em 5 pacientes com deficiência de banda 3, e investigar possíveis alterações neste gene em cinco pacientes com acidose renal tubular distal. Este estudo foi baseado no rastreamento de mutações e polimorfismos no gene mencionado, incluindo a região promotora, que também pode estar envolvida na fisiopatologia da doença. Para detecção das alterações moleculares foram utilizadas as técnicas de PCR, análise de polimorfismo de conformação em fita simples, subclonagem e sequenciamento. O estudo do cDNA foi realizado após a transcrição reversa do mRNA extraído de reticulócitos por RT-PCR. Outro objetivo foi investigar as alterações renais de pacientes com esferocitose hereditária e deficiência de banda 3, uma vez que esta proteína também é expressa nos rins. Os estudos renais foram realizados através da avaliação da capacidade de acidificação tubular distal e obtenção de medidas de bicarbonatúria, pH urinário, acidez titulável e excreção de amônia no período basal e após estímulo com furosemida. Também foi avaliado o contratransporte de sódio e lítio em hemácias de pacientes com esferocitose hereditária, uma vez que esta é uma medida indireta do contra-transporte Na+/H+, envolvido na regulação do pH intracelular do eritrócito e na homeostase ácido-básica do organismo, por secretar ácido e reabsorver Na+ em epitélio renal. Nossos resultados caracterizaram duas novas mutações no gene AEI. O estudo da Banda 3 Campinas, uma mutação no sítio doador de clivagem no intron 8, demonstrou a perda de bicarbonato pela urina dos pacientes afetados e um aumento na atividade de contra-transporte de sódio e lítio nas hemácias. A Banda 3 Pinhal, uma substituição de um resíduo de arginina altamente conservado, por histidina no domínio transmembrana, é a segunda mutação afetando o codon 490 da banda 3, e pode ser um "hot spot" para mutações no gene AEI. As hemácias destes pacientes apresentaram menor número de sítios para o inibidor DIDS. Outra mutação caracterizada foi a Banda 3 MODtefiore, previamente descrita. O estudo dos pacientes com acidose renal tubular distal revelou uma nova mutação na região promotora renal em um paciente com acidose renal tubular distal incompleta, que pode estar associada com o defeito na reabsorção de bicarbonato pelos rins. O estudo da acidose também caracterizou um novo polimorfismo no intron 3, a deleção da adenina 1233, com frequência alélica de 0,34 em 120 cromossomos analisados. Um conflito de sequência (quatro guaninas no lugar de três nt. 1272-1274) também foi verificado em todos indivíduos estudados. O polimorfismo Asp38-7Ala (Darmstad) foi encontrado em uma paciente com acidose, mas parece não estar relacionado com a doença. Finalmente concluímos que mutações no gene da banda 3 podem estar associadas com a esferocitose hereditária e com a acidose renal tubular distal incompleta, pois isoformas da proteína são expressas nas hemácias e nas células a-intercaladas. Sugerimos que em casos onde há perda de ânions pelos rins, mecanismos de compensação podem estar ativados, como o aumento da atividade excretora de prótons pela Na+/H+, ou pela H+-ATPase vacuolar apical. A fim de realizar estudos de interações protéicas, foi subclonado o domínio citoplasmático completo da fosfolípide scramblase dos seguintes tecidos humanos: cérebro, testículos e baço. A sequência do cDNA da enzima scramblase usada no ensaio duplo-híbrido resultou no fenômeno de auto-ativação, que é uma razão comum da falha do rastreamento pelo método duplo-híbrido / Abstract: Hereditary spherocytosis is a common type of hemolytic anemia. The first molecular defect in the band 3 gene associated with spherocytosis was characterized in 1992. Band 3, codified by the AEl gene, was the first isoform to be c10ned of a family of genes of anion exchangers (Anion Exchanger-AE gene family) and is the most abundant of the integral proteins of the erythrocyte membrane. The molecular alterations in this polypeptide are associated to spherocyte formation. Spherocytic red cells have osmotic fragility , and are more liable to undergo lise and splenic sequestration, which decreases their life span. Band 3 protein is also expressed in the kidney, in the basolateral membrane of the cortical collecting duct intercalated alpha cells, where it is responsible for the bicarbonate reabsorption, compensating the acid secretion at apical membrane by the H+ ATPase vacuolar, and taking part in the fine regulation of the acid-base equilibrium. Both erythrocyte and renal band 3 are isoforms of the same gene, which differ in transcription due to a tissue-specific promoter. The first three exons are not present in the erythroid form of renal band 3 rnRNA. The aim of this study was to investigate the molecular alterations and gene regulation, of band 3 in hereditary spherocytosis in 5 families with band 3 deficiency. This study was based on the screening of mutations and polymorphisms of the gene formerly mentioned, inc1uding the promoter region, which might be involved in the pathophysiology of the disease. In order to detect the molecular alterations, PCR technique, single strand conformation polymorphism analysis, subc10nning and sequencing were used. The cDNA study was performed afier the reverse transcription of the rnRNA extracted from the reticulocytes using RT-PCR. Another aim was to investigate the renal alterations of patients with hereditary spherocytosis and band 3 deficiency, as this protein is also expressed in the kidneys. Renal studies were performed using urinary acidification tests and measures of. bicarbonate, urinary pH, acid titration and ammonia excretion during the basal period and afier furosemide stimulation. The sodiumllithium countertransport activity in the red blood cells of patients with hereditary spherocytosis was also assessed, as it is an indirect measure of the Na + /Ir countertransport, which is involved in the intracellular pH regulation of the erythrocyte and in the acid-base homeostasis of the organism, secreting acid and reabsorbing Na + in the renal epithelium. Our results caracterized two novel mutations in the AEI gene. The study of Band 3 campinas, a mutation at the splice donor site in the intron 8, revealed a bicarbonate loss by the urine from patients and an increase in the sodiumllithium countertransport activity of their red blood cells. The Band 3 Pinhal is a highly conserved arginine to histidine substitution in the transmembrane domain. This is the second mutation affecting the codon 490 of band 3, and could represent a hot spot for mutations in the AEI gene. The red blood cells of these patients showed a reduced number of sites for DIDS, the band 3 anion exchange inhibitor. Another mutation found was the Band 3 Montefiore, previously described. The study of the patient's tubular acidosis revealed a new mutation neighboring the kidney promoter in a child presenting incomplete distal renal tubular acidosis, which might be associated with the kidney bicarbonate reabsorption defect. The acidosis study also caracterized a novel polymorphysm in intron 3, the adenine 1233 deletion, with an allele frequency of 0.34 in the 120 chromossomes analyzed. A sequence conflict (four guanines in the place of three nt.1272-1274) was also verified in all subjects studied. The polymorphysm Asp38-7Ala (Darmstad) was found in one patient with acidosis, but was not related with the disease. Finally, we conc1uded that mutations in the band 3 gene may be associated with hereditary spherocytosis and with incomplete distal renal tubular acidosis, as the band 3 isoforms are expressed in the red cells and in the renal {X-intercalated cells. We suggest that the proton excretion mechanisms, as the Na+/H+ exchanger or the vacuolar Ir-ATPase, might be activated to compensate the basal bicarbonate loss by the kidney. In order to perform protein interaction studies, we have subc10ned the entire cytoplasmic domain inc1uding part of the transmembrane segment of phospholipid scramblase from the following human cDNA tissues: brain, testis and spleen. The cDNA sequence of phospholipid scramblase used in the two-hybrids system caused auto-activation, a common reason for failure of two-hybrid screens / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Karin Werther / Banca: Nádia Regina Pereira Almosny / Banca: Marcos Rogério André / Banca: Lúcia Helena O'Dwyer de Oliveira / Banca: Estevam Guilherme Lux Hoppe / Resumo: Testudines atuam como hospedeiros intermediários para hemogregarinas (Haemogregarina spp. e Hemolivia spp.) e hemosporídeos (Haemoproteus spp. e Haemocystidium spp.). Esses hemoprotozoários pertencentes ao Filo Apicomplexa são parasitas heteroxenos que afetam principalmente hemácias. Sua presença, intracitoplasmática, em extensões sanguíneas de répteis, pode ser eventualmente observada. A identificação morfológica não é suficiente para a classificação de espécie, sendo recomendada a utilização de métodos moleculares. Com o objetivo de pesquisar a presença de hemogregarinas e hemosporídeos em Phrynops geoffroanus (cágados-de-barbicha) e Podocnemis expansa (tartarugas-da-Amazônia) ambos de vida livre, foram utilizados métodos morfológicos e moleculares. Nas extensões sanguíneas coradas e em cortes histológicos (de fígado, pulmão, baço e coração de P. geoffroanus) foi investigada a presença de hemoparasitas. A partir de amostras de sangue e de tecidos foi realizada a pesquisa de material genômico de hemoparasitas por meio da Reação em Cadeia da Polimerase (cPCR), com base nos genes 18S rRNA (hemogregarinas) e Citocromo b (hemosporídeos). Em extensões sanguíneas de 100% (7/7) de P. expansa foram observadas estruturas sugestivas para hemogregarinas. Observou-se amplificação de fragmentos baseados no gene 18S rRNA para 100% (7/7) de P. expansa. As análises filogenéticas de Máxima Verossimilhança (MV) e Bayesiana foram obtidas de sequências de amostras sanguíneas de P. expansa. Tais... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Testudines act as intermediate hosts for hemogregarines (Haemogregarina spp. and Hemolivia spp.) and hemosporidia (Haemoproteus spp. and Haemocystidium spp.). These haemoprotozoans belongs to the phylum Apicomplexa are heteroxenous parasites that affect erythrocytes. Their presence in reptiles' blood extensions can eventually be observed. Morphological identification is not enough for the classification, so molecular methods are recommended. In order to investigate the presence of hemogregarines and hemosporidia in free-living Phrynops geoffroanus (geoffroy's side-necked turtle) and Podocnemis expansa (giant Amazon turtle), morphological and molecular methods were used. The presence of hemoparasites was investigated at stained blood smears and histological slides (liver, lung, spleen and heart from P. geoffroanus). Genomic material of hemoparasites was detected by Polymerase Chain Reaction (cPCR), based on the 18S rRNA genes (hemogregarines) and Cytochrome b genes (hemosporidia). Hemogregarines-like structures were observed in stained blood smears from 100% (7/7) P. expansa. Amplification of fragments based on 18S rRNA gene was observed at 100% (7/7) P. expansa samples. Maximum Likelihood and Bayesian phylogenetic analyzes were obtained from sequences from P. expansa blood samples. These sequences were grouped into a monophyletic clade and clustered close Haemogregarina genus sequences, obtained from fresh water turtles from North America, Asia, Europe and Africa. This situation put forward molecular investigation of more sequences of hemogregarines from freshwater turtles from geographically close South American countries, with the view to collaborate in a robust affirmation of the emergence of a new clade of the genus Hemogregarina. / Doutor

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Engenharia Elétrica / Made available in DSpace on 2012-10-24T20:08:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 266728.pdf: 1581002 bytes, checksum: e697a795a3a8fcf4a1ce205abc829bb4 (MD5) / A aplicação de campos elétricos intensos em suspensões de células provoca o aumento da condutância da membrana plasmática (Gm). Este fenômeno, chamado de eletroporação, tem sido utilizado na biologia e medicina. Alguns mecanismos e fundamentos da eletroporação ainda não são completamente entendidos. Neste trabalho realizou-se medições macroscópicas da condutividade de suspensões celulares, e através da análise numérica, obteve-se as alterações microscópicas (como, condutância e potencial na membrana) causadas pela eletroporação. A alteração da condutividade da suspensão de células foi medida com a aplicação de campo entre 400 e 1650V/cm, para frações volumétricas de p=0,07 e 0,35. Os resultados experimentais (p=0,07) foram utilizados para obter os parâmetros dos modelos de Krassowska et al. (1999) e Hibino et al. (1993). Com a análise numérica, estudou-se a dinâmica de abertura e fechamento dos poros, a distribuição do potencial de transmembrana induzido, o potencial crítico, efeito da condutividade do meio ( o), do citoplasma e do raio da célula (r) na eletroporação. Comparamos os resultados com o modelo da condutividade de Maxwell e Pavlin et al. (2005). O máximo valor de Gm foi entre 1-7S/cm2, e variação do ângulo crítico (a partir do qual Gm é desprezível) entre 50 e 65 . Estes valores confirmam os resultados obtidos por Kakorin et al. (2002) e Schmeer et al. (2004). Os modelos matemáticos apresentaram um erro menor que 3%. A metodologia desenvolvida mostrou-se adequada para o estudo experimental da eletroporação. Demonstrou-se que o e 'r' têm que ser considerados na escolha adequada da intensidade e duração dos pulsos. No entanto, para meios de baixa condutividade, contendo células maiores que 7 m de raio, as dimensões das células não afetam significativamente a abertura de poros.

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-07Bitstream added on 2014-08-13T18:01:21Z : No. of bitstreams: 1 000766182.pdf: 2220320 bytes, checksum: 0d872d9c610a05baae89b1a4d138ca2e (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A anemia falciforme é uma anemia hemolítica hereditária crônica devida à herança de um gene para a hemoglobina S, de cada um dos progenitores, e caracteriza-se pela presença de glóbulos vermelhos que, quando privados de oxigênio, tomam a forma de foice. Tem sido relatado que pacientes com anemia falciforme apresentam aumento dos níveis circulantes de citocinas, incluindo fator de necrose tumoral-α (TNF-α). A hidroxiuréia (HU), fármaco citotóxico, é a estratégia terapêutica disponível para o tratamento, e atua como fonte de óxido nítrico beneficiando pacientes por aumentar os níveis de hemoglobina fetal (Hb F), uma hemoglobina geneticamente distinta que evita a polimerização de hemoglobina falciforme desoxigenada. Nesse contexto, dentro de uma linha de pesquisa que visa o planejamento, síntese e avaliação farmacológica de novos candidatos à protótipos de fármacos foram sintetizados uma série de compostos híbridos com propriedades inibidoras de TNF-α e doadoras de óxido nítrico, a fim de explorar eventual sinergismo de ação benéfico ao tratamento da anemia falaciforme.Foram sintetizados seis compostos, dos quais cinco, são derivados nitratos e um sulfonamídico. Os compostos: (1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)metil nitrato (composto I); (1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)etil nitrato (composto II);3-(1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)benzil nitrato (composto III);4-(1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)-N-hidroxibenzenosulfonamida (composto IV); 4-(1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)benzil nitrato (composto V); 2-[4-(1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)fenil]etil nitrato (composto VI), foram obtidos utilizando metodologia sintética linear, e obtidos com ótimos rendimentos globais. Todos os compostos apresentam atividade antinflamatória em edema de orelha de camundongo, e propriedades de inibição da infiltração leucocitária. Os compostos arílicos III, IV e V apresentam menor ... / The sickle cell disease is a chronicle hereditary hemolitic anemia due to the inheritance of each one of the ancestors, to a gene for the hemoglobina S. It is characterized for the red globule presence that, when private of oxygen, they take the form of a scythe. It has been reported that patient with sickle cell disease present increase the circulating levels of cytokines, including TNF-alpha. The hydroxyurea (HU), a cytotoxic drug, is the mainly available therapeutical strategy for the treatment which acts as nitric oxide source benefiting patient for increasing the levels of fetal hemoglobin (HbF), a kind of hemoglobin that decrease the polimerizaron of hemoglobin S in deoxy state. In this context, inside of a research program that aims at the designing, synthesis and pharmacological evaluation of new drug candidates we synthetized a hybrid compounds series with properties of TNF-alpha inhibition and nitric oxide donors, acting by a sinergic effect that may improve the life quality of sickle cells patients. We had sinthetized six compounds: five nitrates and one sulfonamidic.The compounds : 1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)methyl nitrate (compound I); (1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)ethyl nitrate (compound II); 3-(1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)benzyl nitrate (compound III); 4-(1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)-N-hydroxybenzenesulfonamide (compound IV); 4-(1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)benzyl nitrate (compound V); 2-[4-(1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)phenyl]ethyl nitrate (compound VI), had been synthetized using linear synthetic methodology, with good global yields. All compounds had presented antiinflamatory activity, and white blood cells infiltration inhibition properties. Aryl compounds III, IV and V had presented minor mutagenic effect when comparative to compounds I, II and VI. Compounds IV and VI, showed activity in the assay with erythroid progenitor K562 cells, increasing the genic expr

Publicación a texto completo no autorizada por el autor / Determina la variabilidad en el reporte de las alteraciones morfológicas de los hematíes en extendidos de sangre periférica entre tecnólogos médicos de laboratorios de análisis clínicos de Lima. Para ello, describe la característica morfológica de los hematíes, que alcanza mayor cantidad de coincidencias entre tecnólogos médicos, establece el grado de concordancia en el reporte de las alteraciones morfológicas entre tecnólogos de los laboratorios según categorización y calificación, relaciona el grado de concordancia en el reporte al tiempo de experiencia del observador y el nivel de complejidad del laboratorio donde labora, halla la variación en el reporte entre tecnólogos de una misma institución, identifica el uso de guías, protocolos, consensos para el reporte de la morfología hemática, y verifica la capacitación y participación en esquemas de control de calidad para la evaluación morfológica de hematíes, asociado a un mayor grado de coincidencias en el reporte de tecnólogos médicos. / Tesis

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-08-29Bitstream added on 2014-06-13T20:49:46Z : No. of bitstreams: 1 magro_nm_me_botib_parcial.pdf: 150597 bytes, checksum: f72560387269837347ffc3d3d8176cb8 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-06-03T11:42:40Z: magro_nm_me_botib_parcial.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-03T11:44:07Z : No. of bitstreams: 1 000723156_20150829.pdf: 138154 bytes, checksum: 11e183a97d82ce65283a9e648179ab21 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-08-31T12:12:23Z: 000723156_20150829.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-31T12:12:58Z : No. of bitstreams: 1 000723156.pdf: 899918 bytes, checksum: a91a38997709ba305d3e3525bae8ff50 (MD5) / Este trabalho teve como objetivo avaliar a presença de hemogregarinas em arraias de água doce da Bacia Amazônica. Foram examinadas arraias pertencentes às espécies Potamotrygon sp., Potamotrygon motoro e Paratrygon aiereba, do Arquipélago de Mariuá, Rio Negro, Bacia Amazônica, e do Lago Amapá, Bacia do Rio Acre, Brasil. Os animais foram capturados com redes de mão e sedados com Eugenol (0,2 g/L) para a colheita de sangue, através da punção do capilar branquial. Foram confeccionadas extensões sanguíneas, que foram fixadas com metanol e coradas por May-Grünwald-Giemsa. Ao todo, foram capturados 93 animais sendo 34 Potamotrygon sp., 44 P. motoro e 15 P. aiereba. A prevalência total de animais positivos foi 49,46% e entre as espécies, P. aiereba foi de 23,91%, P. motoro de 26,08% e Potamotrygon sp. de 50%. A parasitemia variou de 0,1% a 10%, porém, na região do Lago Amapá, os animais capturados pertenciam apenas à espécie P. motoro (n = 25) e todos eram negativos para a presença de formas parasitárias nos eritrócitos. Os estágios evolutivos observados nas extensões sanguíneas incluíam trofozoítos ou merozoítos, merontes ou esquizontes, prégamontes ou gamontes imaturos e gamontes (microgamontes e macrogamontes). As diversas fases do desenvolvimento foram encontradas, com maior frequência, dentro dos eritrócitos, porém, formas extraeritrocitária também foram observadas. As formas intraeritrocitárias não causaram alterações significativas nos eritrócitos, exceto as fases consideradas merontes. As formas evolutivas observadas eram similares àquelas descritas na literatura como pertencentes ao gênero Cyrilia. Baseando-se nos dados morfológicos e morfométricos descrevemos uma espécie nova pertencente ao gênero Cyrilia. Este foi o primeiro estudo de prevalência e caracterização de hemogregarina em arraias de água doce no Brasil / This research aimed to evaluate the presence of hemogregarinas in freshwater stingrays of the Amazon basin. Were examined stingrays belonging to the species Potamotrygon sp., Potamotrygon motoro e Paratrygon aiereba, from the Archipelago of Mariuá, Negro River, Middle Negro RiverBasin, and Lake Amapá, Acre River Basin, Brazil. The animals were captured with dipnets and sedated with Eugenol (0, 2 g/L) for blood sample, through capillary gill puncture. Blood smears were made and fixed with methanol and stained with May-Grünwald-Giemsa.Altogether 93 animals were captured being 34 Potamotrygon sp., 44 P. motoro and 15 P. aiereba. The Total prevalence of positive animals were 48.5% and between the species, P. aiereba was about 23.9%, P. motoro was 26.1% and P. sp was about 50%. The parasitaemia ranged from 0.1% to 10%, however, in the region of Amapá Lake, the animals that was captured belongs only to the P.motoro species (n = 25) and all the blood samples were negatives to parasitic forms. The evolutionary stages observed on the blood samples includes trophozoites or merozoites, schizonts or meronts, pregamonts or immature gamonts and gamonts (microgamonts and macrogamonts). The various evolutionary stages were found, with more frequency, inside the erythrocyte, however, extraerythrocyte forms were observerd. The intraerythrocytedid not cause significant changes in the erythrocyte, except merontes stage. The evolutionary forms observed were similar to those descripts in the literature as belonging to the Cyrilia genus. Relying on the morphological data and morphometric we described a new species of genus Cyrilia. This is the first report of prevalence and characterization of hemogregarine in freshwater stingrays in Brazil

Orientador: Lucia Helena O'Dwyer de Oliveira / Banca: Reinaldo Jose da Silva / Banca: Karina Paduan Rubini / Resumo: Este trabalho teve como objetivo avaliar a presença de hemogregarinas em arraias de água doce da Bacia Amazônica. Foram examinadas arraias pertencentes às espécies Potamotrygon sp., Potamotrygon motoro e Paratrygon aiereba, do Arquipélago de Mariuá, Rio Negro, Bacia Amazônica, e do Lago Amapá, Bacia do Rio Acre, Brasil. Os animais foram capturados com redes de mão e sedados com Eugenol (0,2 g/L) para a colheita de sangue, através da punção do capilar branquial. Foram confeccionadas extensões sanguíneas, que foram fixadas com metanol e coradas por May-Grünwald-Giemsa. Ao todo, foram capturados 93 animais sendo 34 Potamotrygon sp., 44 P. motoro e 15 P. aiereba. A prevalência total de animais positivos foi 49,46% e entre as espécies, P. aiereba foi de 23,91%, P. motoro de 26,08% e Potamotrygon sp. de 50%. A parasitemia variou de 0,1% a 10%, porém, na região do Lago Amapá, os animais capturados pertenciam apenas à espécie P. motoro (n = 25) e todos eram negativos para a presença de formas parasitárias nos eritrócitos. Os estágios evolutivos observados nas extensões sanguíneas incluíam trofozoítos ou merozoítos, merontes ou esquizontes, prégamontes ou gamontes imaturos e gamontes (microgamontes e macrogamontes). As diversas fases do desenvolvimento foram encontradas, com maior frequência, dentro dos eritrócitos, porém, formas extraeritrocitária também foram observadas. As formas intraeritrocitárias não causaram alterações significativas nos eritrócitos, exceto as fases consideradas merontes. As formas evolutivas observadas eram similares àquelas descritas na literatura como pertencentes ao gênero Cyrilia. Baseando-se nos dados morfológicos e morfométricos descrevemos uma espécie nova pertencente ao gênero Cyrilia. Este foi o primeiro estudo de prevalência e caracterização de hemogregarina em arraias de água doce no Brasil / Abstract: This research aimed to evaluate the presence of hemogregarinas in freshwater stingrays of the Amazon basin. Were examined stingrays belonging to the species Potamotrygon sp., Potamotrygon motoro e Paratrygon aiereba, from the Archipelago of Mariuá, Negro River, Middle Negro RiverBasin, and Lake Amapá, Acre River Basin, Brazil. The animals were captured with dipnets and sedated with Eugenol (0, 2 g/L) for blood sample, through capillary gill puncture. Blood smears were made and fixed with methanol and stained with May-Grünwald-Giemsa.Altogether 93 animals were captured being 34 Potamotrygon sp., 44 P. motoro and 15 P. aiereba. The Total prevalence of positive animals were 48.5% and between the species, P. aiereba was about 23.9%, P. motoro was 26.1% and P. sp was about 50%. The parasitaemia ranged from 0.1% to 10%, however, in the region of Amapá Lake, the animals that was captured belongs only to the P.motoro species (n = 25) and all the blood samples were negatives to parasitic forms. The evolutionary stages observed on the blood samples includes trophozoites or merozoites, schizonts or meronts, pregamonts or immature gamonts and gamonts (microgamonts and macrogamonts). The various evolutionary stages were found, with more frequency, inside the erythrocyte, however, extraerythrocyte forms were observerd. The intraerythrocytedid not cause significant changes in the erythrocyte, except merontes stage. The evolutionary forms observed were similar to those descripts in the literature as belonging to the Cyrilia genus. Relying on the morphological data and morphometric we described a new species of genus Cyrilia. This is the first report of prevalence and characterization of hemogregarine in freshwater stingrays in Brazil / Mestre

Orientador: Chung Man Chin / Coorientadora: Lídia Moreira Lima / Banca: Wagner Vilegas / Banca: Leoberto Costa Tavares / Resumo: A anemia falciforme é uma anemia hemolítica hereditária crônica devida à herança de um gene para a hemoglobina S, de cada um dos progenitores, e caracteriza-se pela presença de glóbulos vermelhos que, quando privados de oxigênio, tomam a forma de foice. Tem sido relatado que pacientes com anemia falciforme apresentam aumento dos níveis circulantes de citocinas, incluindo fator de necrose tumoral-α (TNF-α). A hidroxiuréia (HU), fármaco citotóxico, é a estratégia terapêutica disponível para o tratamento, e atua como fonte de óxido nítrico beneficiando pacientes por aumentar os níveis de hemoglobina fetal (Hb F), uma hemoglobina geneticamente distinta que evita a polimerização de hemoglobina falciforme desoxigenada. Nesse contexto, dentro de uma linha de pesquisa que visa o planejamento, síntese e avaliação farmacológica de novos candidatos à protótipos de fármacos foram sintetizados uma série de compostos híbridos com propriedades inibidoras de TNF-α e doadoras de óxido nítrico, a fim de explorar eventual sinergismo de ação benéfico ao tratamento da anemia falaciforme.Foram sintetizados seis compostos, dos quais cinco, são derivados nitratos e um sulfonamídico. Os compostos: (1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)metil nitrato (composto I); (1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)etil nitrato (composto II);3-(1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)benzil nitrato (composto III);4-(1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)-N-hidroxibenzenosulfonamida (composto IV); 4-(1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)benzil nitrato (composto V); 2-[4-(1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)fenil]etil nitrato (composto VI), foram obtidos utilizando metodologia sintética linear, e obtidos com ótimos rendimentos globais. Todos os compostos apresentam atividade antinflamatória em edema de orelha de camundongo, e propriedades de inibição da infiltração leucocitária. Os compostos arílicos III, IV e V apresentam menor ... / Abstract: The sickle cell disease is a chronicle hereditary hemolitic anemia due to the inheritance of each one of the ancestors, to a gene for the hemoglobina S. It is characterized for the red globule presence that, when private of oxygen, they take the form of a scythe. It has been reported that patient with sickle cell disease present increase the circulating levels of cytokines, including TNF-alpha. The hydroxyurea (HU), a cytotoxic drug, is the mainly available therapeutical strategy for the treatment which acts as nitric oxide source benefiting patient for increasing the levels of fetal hemoglobin (HbF), a kind of hemoglobin that decrease the polimerizaron of hemoglobin S in deoxy state. In this context, inside of a research program that aims at the designing, synthesis and pharmacological evaluation of new drug candidates we synthetized a hybrid compounds series with properties of TNF-alpha inhibition and nitric oxide donors, acting by a sinergic effect that may improve the life quality of sickle cells patients. We had sinthetized six compounds: five nitrates and one sulfonamidic.The compounds : 1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)methyl nitrate (compound I); (1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)ethyl nitrate (compound II); 3-(1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)benzyl nitrate (compound III); 4-(1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)-N-hydroxybenzenesulfonamide (compound IV); 4-(1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)benzyl nitrate (compound V); 2-[4-(1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)phenyl]ethyl nitrate (compound VI), had been synthetized using linear synthetic methodology, with good global yields. All compounds had presented antiinflamatory activity, and white blood cells infiltration inhibition properties. Aryl compounds III, IV and V had presented minor mutagenic effect when comparative to compounds I, II and VI. Compounds IV and VI, showed activity in the assay with erythroid progenitor K562 cells, increasing the genic expr / Mestre