Orientador: Luciane Dias de Oliveira / Coorientadora: Graziella Nuernberg Back Brito / Banca: Juliana Campos Junqueira / Banca: Jonatas Rafael de Oliveira / Resumo: As plantas medicinais e seus extratos têm sido utilizados na medicina tradicional para fins terapêuticos e como uma atrativa fonte de pesquisa em diversas vertentes ciêntíficas, dentre elas, a atividade anti-inflamatória. O objetivo deste estudo foi analisar a citotoxicidade e ação anti-inflamatória in vitro dos extratos glicólicos das plantas medicinais Morus nigra (amora), Ziziphus joazeiro (juá) e Vitis vinifera (uva) em macrófagos de camundongo RAW 264.7. A citotoxicidade dos extratos foi analisada pelo teste de viabilidade celular MTT em dois períodos de tratamento, 5 min e 24 h. A ação anti-inflamatória dos extratos foi avaliada em macrófagos RAW 264.7 estimulados pelo lipopolissacarídeo (LPS) por meio da quantificação das citocinas pró-inflamatórias fator de necrose tumoral (TNF-α) e interleucina-6 (IL-6) pelo teste imunoenzimático (ELISA), e da quantificação do óxido nítrico pela reação de Griess. Os valores obtidos foram submetidos à análise estatística ANOVA ou Kruskal-Wallis com comparação múltipla de Tukey ou Dunn, com nível de significância de 5%. Concentrações não citotóxicas foram observadas após exposição por 5 min e 24 h, respectivamente, para os extratos de M. nigra (≤ 50 mg/mL e ≤ 1,56 mg/mL), Z. joazeiro (≤ 6,25 mg/mL e ≤ 3,12 mg/mL) e V. vinifera (≤ 25 mg/mL e ≤ 3,12 mg/mL). Em relação à resposta anti-inflamatória, 0,78 e 1,56 mg/mL do extrato de M. nigra e 3,12 mg/mL de V. vinifera apresentaram inibição significativa na produção da citocina TNF-α, e o ex... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Medicinal plants and theirs extracts have been used in traditional medicine for therapeutic purposes and as a source of research in several scientific aspects, e.g. the anti-inflammatory activity. This study aimed to analyze the in vitro cytotoxicity and anti-inflammatory action of the glycolic extracts of the medicinal plants Morus nigra (black mulberry), Ziziphus joazeiro (juá) and Vitis vinifera (grape) in mouse macrophages cells RAW 264.7. The cytotoxicity of the extracts was analyzed by MTT cell viability assay in two periods, 5 min and 24 h. The anti-inflammatory action of the extracts was evaluated in lipopolysaccharide (LPS) stimulated RAW 264.7 cells by quantifying the pro-inflammatory cytokines tumor necrosis factor (TNF-α) and interleukin-6 (IL-6) by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and nitric oxide by Griess reagent. The values obtained were submitted to statistical tests ANOVA or Kruskal-Wallis with post-test Tukey or Dunn multiple comparisons with the significance level of 5%. After exposure for 5 min and 24 h, respectively, non-cytotoxic concentrations were observed for M. nigra (≤ 50 mg/mL and ≤ 1.56 mg/mL), Z. joazeiro (≤ 6.25 mg/mL and ≤ 3.12 mg/mL) and V. vinifera (≤ 25 mg/mL and ≤ 3.12 mg/mL) extracts. Concerning the anti-inflammatory response, 0.78 and 1.56 mg/mL of M. nigra extract and 3.12 mg/mL of V. vinifera extract showed significant inhibition of TNF-α cytokine production. Z. joazeiro extract suppressed significantly the TNF-α cytokine (3.1... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004Bitstream added on 2014-06-13T19:56:36Z : No. of bitstreams: 1 bianco_kg_me_aracadg.pdf: 1820532 bytes, checksum: 7812845cf18ce62e21909ba413ecedcf (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-01Bitstream added on 2014-06-13T19:35:58Z : No. of bitstreams: 1 novais_rz_me_araca.pdf: 1191994 bytes, checksum: a7914fcbcd51f1ec3443e49390808e03 (MD5) / Atualmente, tem se verificado um grande avanço científico envolvendo os estudos químicos, farmacológicos e microbiológicos de plantas medicinais que visam obter novos compostos com propriedades terapêuticas. A demonstração de notável atividade antimicrobiana de extratos aquoso e hidroalcoólico de Araçá (Psidium cattleianum) sobre a microbiota bucal e a busca de substâncias que reúnam tais propriedades resguardando os princípios biológicos, nos levam a considerar uma possível utilização clínica desse extrato como coadjuvante na terapia odontológica. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar a resposta biológica imediata e tardia de soluções hidroalcoólica e aquosa preparadas à base de extrato vegetal de Araçá (Psidium cattleianum). Para a análise edemogênica (reação imediata), foram utilizados 18 ratos machos. Sob anestesia geral, os animais receberam injeção intravenosa de Azul de Evans 1%. Após 30 minutos, foi injetado 0,1mL de um dos extratos ou do controle (soro fisiológico), na região subcutânea dorsal do animal. Os animais foram sacrificados após 3 e 6 horas e as peças obtidas colocadas em formamida por 72 horas. A leitura foi realizada em espectrofotômetro com comprimento de onda de 630hm. Para a análise morfológica (reação tardia), 30 ratos receberam implantes de tubos de polietileno contendo os extratos ou o soro na região dorsal, e sacrificados após 7 e 28 dias. As peças foram processadas, cortadas e coradas com Hematoxilina e Eosina. Os resultados obtidos através da leitura dos espécimes em microscópio óptico, em aumentos de 10 e 40x, para avaliação da espessura da cápsula fibrosa e contagem de células inflamatórias, que quantificam o infiltrado inflamatório. / Nowadays, it’s been seen great scientific advance involving chemistry, pharmacological and micro biotical researches in medicinal plants. These researches can find new components with therapeutic property. The demonstration of great anti micro biotic activity of watery vegetable and hydro alcoholic extract of araça (Psidium cattleianum) on the oral microbiota and the search form substances which can put together these properties keeping the biological principles, make us consider a possible clinical use of this extract as supporting on dentistry therapy. This way, the objective of this paper (research) was evaluate the biological immediate and late answer of hydro alcoholic and watery solutions prepared with vegetable extract of araça (Psidium cattleianum). For the edemogenic analysis (immediate reaction), we used 18 male mice. Under general anesthesia, the animals received intra shot of Evans blue 1%. 30 minutes later, it was injected 0,1mL of one of the extracts or the control (physiological serum), on the dorsal under skin region of the animal. The animals were sacrificed after 3 and 6 hours and the obtained material were put in formamide for 72 hours. The reading was made for spectrophotometer with waves length of 630nm. For the morphological analysis (late reaction), 30 mice received duct implant of polyethylene with the extracts or the serum on the dorsal region, and sacrificed after 7 and 28 days. The material were processed, cut and printed with HE. The obtained results from the reading of the species in optical microscopy, with raisings of 10 and 40x, for the thickness evaluation of the fiber capsule and counting of the damaged cells, that quantified the damaged infiltrate.

Orientador: Eloi Dezan Júnior / Banca: José Flávio Affonso de Almeida / Banca: Luciano Tavares Angelo Cintra / Resumo: Extratos de folhas de araçá (Psidium cattleianum) são biocompatíveis e quando associados ao hidróxido de cálcio [Ca(OH)2] inibe o Enterococcus faecalis em 24 horas. O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta tecidual dos extratos da folha de araçá associado com Ca(OH)2, por meio da análise edemogênica e histológica. Foram utilizados 80 ratos machos (Wistar) pesando entre 200g e 280g. Para a análise edemogênica foram utilizados 30 animais divididos em 3 grupos [Extrato aquoso + Ca(OH)2 (A), Extrato etanólico + Ca(OH)2 (B), Propilenoglicol + Ca(OH)2 (C)], com 10 animais sendo 5 para cada período de 3 e 6 horas. Sob anestesia geral foram injetados 0,2ml/100g de massa corporal de Azul de Evans a 1% na veia peniana, após 30 minutos foi injetado no subcutâneo da região dorsal cada associação a ser avaliada. A análise edemogênica foi realizada por meio de espectrofotometria (λ=630ηm) após 3 e 6 horas. Para análise da reação inflamatória foram utilizados 50 ratos, que receberam quatro tubos de polietileno contendo os grupos experimentais citados anteriormente e um grupo controle (tubo vazio). Os períodos de avaliação foram de 7, 15, 30, 60 e 90 dias. As lâminas obtidas foram analisadas na coloração de Hematoxilina e Eosina atribuindo-se escores para intensidade da resposta tecidual. Observou-se que para a análise edemogênica a associação do extrato etanólico ao Ca(OH)2 mostrou no período de 3 horas maior edema em comparação aos outros grupos (p<0,05). No período de 6 horas os grupos não apresentaram diferença significante. Para a análise histológica foi observada evolução do reparo ao longo do tempo (p<0,05), os extratos aquoso e etanólico apresentaram resposta semelhante aos grupos controle e Ca(OH)2 + propilenoglicol. Pode-se concluir que a utilização de extratos de araçá como veículo do Ca(OH)2 apresentam resposta tecidual favorável assim como o propilenoglicol associado ao Ca(OH)2 / Abstract: Leaf extracts from 'araçá' (Psidium cattleianum) are biocompatible and when combined with calcium hydroxide [Ca (OH) 2] inhibits Enterococcus faecalis in 24 hours. This study aimed to evaluate the tissue respons of the 'araça' leaf extracts associated to Ca(OH)2 by edemogenic and histological analysis. Eighty male wistar rats weighing between 200 and 280g were used in this study. For edemogenic analysis, 30 animals were divided in 3 groups (n=10) - (a) aqueous 'araça' extract + Ca(OH)2; (b) ethanolic extract + Ca(OH)2; (c) propylene glycol + Ca(OH)2. Half of the specimens were evaluated after 3 hours and half after 6 hours. Under general anesthesia, 0,2ml/100g body weight of 1% Evans blue were injected in the penile vein. After 30 minutes, each studied substance was injected in the subcutaneous. Edemogenic analysis was performed though spectrophotometry (λ=630ηm) after 3 and 6 hours. For the inflammatory reaction evaluation, 50 rats were used. Each rat received 4 polyethylene tubes containing the studied substances and one empty tube (control). Evaluation periods were 7, 15, 30, 60 and 90 days. The tissues were stained with Hematoxylin and Eosin and scores were attributed for intensity of tissue response. The association of ethanolic extract to Ca(OH)2 presented larger edema after 3 hours than the other groups (p<0.05). After 6 hours there was no significant difference. On the histological analysis, an evolution on tissue repair was observed over time. The extract groups presented similar response to the Ca(OH)2 + propylene glycol and control. In conclusion that the use of guava extract as vehicle of Ca (OH)2 exhibit favorable tissue response as well as propylene associated with Ca (OH)2 / Mestre

Neste trabalho foi estudado a aplicação de pigmentos anti-incrustantes com baixa toxicidade, sintetizados a partir da papaína, tanino de acácia negra, tanato de ferro e dodecanoato de cobre (pigmento super-hidrofóbico). Os agentes anti-incrustantes foram caracterizados antes da sua incorporação nas diferentes formulações. As tintas foram formuladas com resina epóxi monocomponente e breu e a sua eficiência anti-incrustante foi posteriormente avaliada. Testes de imersão em um canal aberto (cerca de 400 m do oceano Atlântico) do Rio Tramandaí e no mar Mediterrâneo foram realizados para avaliar a eficiência destas tintas desenvolvidas, sendo os resultados comparados com os resultados obtidos com tintas comerciais. Os ensaios in situ indicam claramente o excelente comportamento, em ambos os ambientes, dos revestimentos anti-incrustantes desenvolvidos, sendo os resultados semelhantes aos obtidos com os revestimentos comerciais. O uso de pigmentos biodegradáveis e pouco tóxicos como agentes anti-incrustantes pode eliminar o impacto ambiental negativo causado por metais e biocidas químicos, que são normalmente utilizados em formulações comerciais. / The aim of this work is to study the application of environmentally-friendly antifouling pigments formulated with papain, black wattle tannin, iron tannate and copper dodecanoate (superhydrophobic pigment). Before its incorporation into the different formulations, the synthesized pigments were characterized. Antifouling paints were formulated with mono-component epoxy resin and rosin matrixes, and both their antifouling efficiency were subsequently evaluated. Immersion tests in an open channel (approximately 400 m from the Atlantic ocean) of the Tramandaí River and in the Mediterranean Sea were carried out to evaluate the antifouling efficiency of the developed paints; the results were compared with those from a commercial paint. These field assays clearly indicate the excellent behaviour of developed antifouling coatings in both environments, results being similar to those achieved using a commercial coating. The use of biodegradable pigments as nature-friendly antifouling agent can eliminate the negative environmental impact caused by metals and chemical biocides typically used in current commercial formulations.

Neste trabalho foi estudado a aplicação de pigmentos anti-incrustantes com baixa toxicidade, sintetizados a partir da papaína, tanino de acácia negra, tanato de ferro e dodecanoato de cobre (pigmento super-hidrofóbico). Os agentes anti-incrustantes foram caracterizados antes da sua incorporação nas diferentes formulações. As tintas foram formuladas com resina epóxi monocomponente e breu e a sua eficiência anti-incrustante foi posteriormente avaliada. Testes de imersão em um canal aberto (cerca de 400 m do oceano Atlântico) do Rio Tramandaí e no mar Mediterrâneo foram realizados para avaliar a eficiência destas tintas desenvolvidas, sendo os resultados comparados com os resultados obtidos com tintas comerciais. Os ensaios in situ indicam claramente o excelente comportamento, em ambos os ambientes, dos revestimentos anti-incrustantes desenvolvidos, sendo os resultados semelhantes aos obtidos com os revestimentos comerciais. O uso de pigmentos biodegradáveis e pouco tóxicos como agentes anti-incrustantes pode eliminar o impacto ambiental negativo causado por metais e biocidas químicos, que são normalmente utilizados em formulações comerciais. / The aim of this work is to study the application of environmentally-friendly antifouling pigments formulated with papain, black wattle tannin, iron tannate and copper dodecanoate (superhydrophobic pigment). Before its incorporation into the different formulations, the synthesized pigments were characterized. Antifouling paints were formulated with mono-component epoxy resin and rosin matrixes, and both their antifouling efficiency were subsequently evaluated. Immersion tests in an open channel (approximately 400 m from the Atlantic ocean) of the Tramandaí River and in the Mediterranean Sea were carried out to evaluate the antifouling efficiency of the developed paints; the results were compared with those from a commercial paint. These field assays clearly indicate the excellent behaviour of developed antifouling coatings in both environments, results being similar to those achieved using a commercial coating. The use of biodegradable pigments as nature-friendly antifouling agent can eliminate the negative environmental impact caused by metals and chemical biocides typically used in current commercial formulations.

Orientador: Mary Luci de Souza Queiroz / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T06:30:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Figueiredo_CamilaAlexandrinaVianade_D.pdf: 9514972 bytes, checksum: 602b147a415d93d261e4b82f68a9f117 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Esse trabalho investiga o efeito protetor do tratamento com diferentes doses (50, 100 e 250 mg/Kg) do extrato padronizado de Chá Verde (GTE) em camundongos infectados com Listeria monocytogenes (LM). A eficácia terapêutica foi avaliada para uma dose letal de LM por sete dias consecutivos com diferentes doses de GTE. A proteção significativa do extrato foi verificada durante a fase aguda da infecção e um mecanismo de ação foi proposto a partir da análise dos efeitos do GTE sobre o crescimento e a diferenciação de progenitores hematopoéticos para granulócitos e macrófagos (CFU-GM) da medula óssea e do baço, sobre a atividade estimuladora de colônias (CSA) do soro, sobre a atividade lítica de células NK, sobre a proliferação de linfócitos e sobre a produção de citocinas de padrão Thl (IFN-y) / Th2 (IL-10) em animais normais e infectados com LM. Os resultados demonstraram que a resistência dos animais infectados com uma dose letal de LM tratados com GTE está relacionada com a modulação da mielossupressão e diminuição da hematopoese extramedular produzidas pela infecção. Também foi verificado um aumento da atividade lítica de células NK, da capacidade proliferativa de linfócitos e da polarização da resposta imunológica para Thl. O GTE não apresentou toxicidade sobre o estroma medular e estimulou a geração de progenitores para granulócitos-macrófagos em sistema de cultura líquida de longa duração (LTBMC). O mecanismo de ação da atividade imunomoduladora do GTE ainda não está completamente definido. No entanto, os mecanismos de ação apresentados neste trabalho são de fundamental importância para a atividade antibacteriana in vivo do GTE / Abstract: In the present study we investigated the protective effects of the oral administration of Green tea (GTE) (50, 100 and 250mg/Kg) in mice infected with Listeria monocytogenes (LM). We demonstrated that GTE protects mice from a lethal dose of LM when administered prophylactically for seven consecutive days. To determine the mechanism of action of GTE, we examined the effect of GTE on the number of granulocyte and macrophage colony-forming units (CFU-GM) from bone marrow and spleen, on the colony-stimulating activity (CSA) of serum, on natural killer (NK) cell activity, on lymphocyte proliferation and on Thl/Th2-based cytokine production in normal and LM infected mice. Myelosuppression and extramedular hematopoiesis/splenomegaly were the major features of LM infection, in association with NK cell activation and alteration of lymphocyte proliferation. The resistance of mice infected with a lethal dose of LM but treated prophylactically with 100 and 250mg/Kg of GTE could be related to the modulation of myelosuppression and extramedular hematopoesis induced by the infection, and to an increase in NK cell activity, lymphocyte proliferation and polarization of the Thl-based immune response. The GTE extract was not toxic to either the stromal cell layer or to GM progenitors generated from long-term bone marrow culture (LTBMC). In this way, the mechanism of action through GTE exerts its pharmacological effect is not completely elucidated, although the parameters mentioned here are essential for its antibacterial effect in vivo / Doutorado / Doutor em Farmacologia

Orientador: Mary Luci de Souza Queiroz / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-06T23:55:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marques_VanessaAlvesArruda_D.pdf: 1717936 bytes, checksum: 37ac1f747e37b8fb133778d014bd61d5 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Com os recentes progressos na compreensão dos complexos mecanismos moleculares relacionados a diferentes aspectos da modulação imunológica, cada vez mais vem se tornando possível ampliar os conhecimentos acerca das potenciais interferências do ponto de vista imunopatogênico induzidas pela presença e evolução tanto de processos infecciosos quanto tumorais. Modelos experimentais vêm sendo desenvolvidos e aprimorados com a finalidade de criar condições controladas para avaliações de diferentes aspectos relativos a potenciais modificações no comportamento imunológico de linhagens celulares frente à ação de novos agentes. O modelo do Tumor Ascítico de Erlich apresentou-se como uma opção de interesse, uma vez que os conhecimentos experimentais sobre diferentes aspectos relativos a sua manipulação já fazem parte de consagrada linha de pesquisa nacional. Um dos comportamentos mais recentemente estudados a seu respeito se refere a condições onde ocorre a migração do fenótipo Th1 para Th2, relacionadas ao agravamento da doença. A busca de fontes naturais para conhecimento e aplicação de novos princípios ativos vem se caracterizando como uma das mais promissoras soluções do ponto de vista farmacêutico, e pode corresponder a uma importante área de exploração da biodiversidade nacional. Dessa forma, a proposta do presente estudo foi, unindo linhas de pesquisa bastante consolidadas e conhecimentos relativos à nossa biodiversidade, avaliar o potencial terapêutico, com foco em abordagens imunopatológicas, do extrato da planta Tabebuia avellanedae (ETA) através do modelo experimental Tumor ascítico de Ehrlich. Neste trabalho investigamos os efeitos do ETA e seu constituinte isolado, a ß-lapachona (ß-lap), sobre o crescimento e diferenciação de progenitores hematopoéticos [células formadoras de colônias de granulócitos e macrófagos (CFU-GM)], a capacidade funcional das células ¿Natural Killer¿(NK) e a produção das citocinas do perfil Th1 [fator de necrose tumoral- a (TNF-a ) e interferon- ? (IFN-?)] e do perfil Th2 [interleucina (IL)-10] de animais normais e portadores do TAE. Como esperado, o TAE produziu, concomitante à mielosupressão, um aumento no número de CFU-GM esplênico. O tratamento destes animais com a dose de 120mg/kg de ETA, administrado por 7 dias após a inoculação do tumor, demonstrou uma maior eficácia, produzindo aumento na mielopoiese, redução no numero de colônias esplênicas e reversão dos fatores estimuladores de colônias (CSF) induzidos pelo TAE. Além disso, esta dose de ETA produziu a melhor eficácia na sobrevida de animais portadores do TAE, aumentando em 42% a duração da sobrevida. No entanto, doses de 30 e 500mg/kg não afetaram a mielosupressão e a hematopoese extramedular induzidas pelo tumor. O tratamento dos animais portadores do TAE com 1, 2 ou 5mg/kg de ß-lap por 3 dias após a inoculação do tumor resultou em um padrão semelhante de dose resposta, sendo a mielosupressão prevenida apenas com a dose de 1mg/kg. Interessante observar que esta dose prolongou a duração na sobrevida de animais portadores do TAE de maneira similar à dose mais eficaz do ETA, ambos em 42%. Nosso estudo também demonstrou importantes diferenças entre os tratamentos com ETA e ß-lap. Neste sentido, animais normais tratados com 2 e 5mg/kg de ß-lap apresentaram hematopoese extramedular, respectivamente 2 e 3 vezes maior que o CFU-GM de animais normais. Além disso, uma drástica mielosupressão foi observada após tratamento com ß-lap 5mg/kg, atingindo valores similares aos observados nos animais portadores do TAE e não tratados. Quanto à produção de citocinas, o tratamento com 120mg/kg de ETA impediu a polarização Th1-Th2 encontrada nos animais portadores do TAE. Neste sentido, o tratamento destes animais aumentou os níveis de secreção de TNF-a e IFN-? e reduziu os níveis de IL-10, aumentados durante a evolução temporal do TAE. O estudo da atividade funcional das células NK em animais portadores do tumor e tratados com EAT demonstrou um aumento na capacidade citotóxica das células NK, a qual se encontrava reduzida. O tratamento destes animais com ß-lap 1mg/kg impediu parcialmente a polarização Th1-Th2 em animais portadores, assim como demonstrou aumento parcial na capacidade citotóxica das células NK. Estes resultados sugerem que a eficácia antitumoral demonstrada pelo ETA pode estar relacionada com seu constituinte, a ß-lap. Por outro lado, a ausência de constituintes associados presentes no extrato bruto pode ser responsável pelos efeitos inibitórios dose-dependentes deste composto na hematopoese de animais normais. A comparação entre efeitos de um extrato vegetal e um de seus constituintes ativos isolado é outro aspecto a ser considerado, sendo importante etapa no desenvolvimento de novos fármacos de origem vegetal / Abstract: In accordance with the recent progress in the understanding of immunological and molecular mechanisms related to the different aspects of immunological modulation, the improvement of knowledge about the potential interferences, at the immunopathogenic point of view, induced by the presence and evolution of infectious diseases or neoplastic process has increased. Experimental models have been developed and refined in order to create appropriate conditions to evaluate different aspects related to potential changes in the immunological behaviors of determinate cell lines with the presence of new pharmacological agents. The Ehrlich ascites tumor (EAT) model is an option of interest, since the accumulated experimental knowledge about its manipulation is part of a consolidated research line. One of its more recently studied behaviors is concerned with situations where the migration from Th1 to Th2 phenotype occurs, at the same time with the disease impairment. The search for new natural sources of pharmaceutical active principles and the careful and detailed studies about them, has been characterized as one of most promising therapeutic solutions at the moment, and would be seen as a strategic way to explore the national biodiversity. Therefore, the aim of the present study was to combine the well known techniques related to the Ehrlich ascites tumor changing behavior with a potential active principle from our botanical biodiversity, the Tabebuia avellanedae extract (TACE), in order to evaluate its immunological therapeutic potential. The effects of TACE and its isolated naphtoquinone, ß-lapachone (ß-lap), on the growth and differentiation of granulocyte-macrophage progenitor cells in normal and EAT-bearing mice were studied. Myelosupression concomitant with an increased number of spleen CFU-GM was observed in tumour-bearing mice. Treatment of these animals with the dose of 120mg/Kg TACE given for seven days after tumour inoculation elicited optimal modulatory effects on bone marrow formation and also produced a favourable response for the reduction of splenic haematopoiesis. Increased serum colony-stimulating activity induced by the tumour was also reversed with this dose-regimen. In addition, this dose-schedule showed the better efficacy in prolonging life span of EAT-bearing mice, with an extension of 42% in the duration of survival. Conversely, the doses of 30 and 500mg/kg hardly affected the myelosuppression and extramedular hematopoiesis induced by the tumor. Treatment of tumour-bearing mice with 1, 2 and 5mg/kg ß-lap given for 3 days after tumour inoculation resulted in a similar pattern of dose response, with tumour-induced myelosupression being prevented only with the 1mg/kg dose. Surprisingly, this dose-schedule prolonged the duration of survival by the same rate of 42% observed with the optimal dose of TACE. However, an important divergent response of ß-lap was its stimulating effect on the extramedular hematopoiesis of normal mice treated with the doses of 2 and 5mg/kg, which produced, respectively, 2 and 3-fold increases of CFU-GM in the spleen. In addition, in the group of normal mice exposed to the dose of 5mg/kg, a drastic reduction in the number of bone marrow CFU-GM was observed, reaching levels as low as those found in non-treated tumour bearers. We also investigated the effects of TACE and ß-lap on the natural killer cell activity (NK) and on Th1 [tumor necrosis factor- a (TNF-a ) and interferon- ? (IFN-?)] and Th2 [interleukin (IL)-10] responses in normal and EAT-bearing mice. Regarding the production of cytokines, the treatment with TACE blocked the Th1-Th2 polarization found during the EAT progression. In this respect, the treatment of these animals with TACE 120mg/kg increased the TNF-a and IFN-? levels and reduced the levels of IL-10, increased during the temporal evolution of EAT. In relation to the functional activity of NK cells, the treatment with this same dose of TACE enhanced the NK cell function, reduced during the EAT growth. The treatment of these animals with ß-lap 1mg/kg produced a significant, but partial response on NK cell activity on EAT-bearing mice. In this respect, this compound only partially increased the TNF-a and IFN-? levels and reduced the levels of IL-10, increased during the temporal evolution of EAT. These findings suggest that the antitumoral efficacy demonstrated by the crude extract of T. avellanedae might be related to its constituent, the ß-lapachone. On the other hand, the absence of the associated constituents present in the crude extract might be responsible for the dose-dependent inhibitory effect of this biosynthetic compound on normal murine hematopoiesis. The comparison between a total vegetal extract and some of its isolated compounds remain another significant aspect in phytochemical research, specially focused in new medicines discovery / Doutorado / Medicina Experimental / Doutor em Fisiopatologia Medica

Submitted by Carla Santos (biblioteca.cp2.carla@bahiana.edu.br) on 2018-11-09T13:17:23Z No. of bitstreams: 1 9.3.1 Dissertac??a??o Alzeir.versa??o final.versa??o final vers??o para corre????o VERS??O PARA TAISE.pdf: 1277616 bytes, checksum: 44bacd138d124ddbc107b4dc154e7a11 (MD5) / Approved for entry into archive by JOELMA MAIA (ebmsp-bibliotecacp2@bahiana.edu.br) on 2018-11-09T17:48:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 9.3.1 Dissertac??a??o Alzeir.versa??o final.versa??o final vers??o para corre????o VERS??O PARA TAISE.pdf: 1277616 bytes, checksum: 44bacd138d124ddbc107b4dc154e7a11 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-09T17:48:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 9.3.1 Dissertac??a??o Alzeir.versa??o final.versa??o final vers??o para corre????o VERS??O PARA TAISE.pdf: 1277616 bytes, checksum: 44bacd138d124ddbc107b4dc154e7a11 (MD5) Previous issue date: 2017-10-26 / Esta pesquisa tem como objetivo principal realizar a triagem fitoqu??mica e a avalia????o das atividades antibacterianas e antif??ngicas, in vitro, das esp??cies: Canavalia brasiliensis Mart, Cassia excelsea Schrader, Genipa americana L., Copernicia cerifera Mart., Celtis iguanaea Sarg., Azadeirata indica, Myracroduon urundeuva Allem??o, Anadenanthera colubrina Vell., Bromelia laciniosa Mart. e Schinopsis brasiliensis Engl. Os extratos hidroalco??licos de diferentes partes destas plantas foram obtidos por extra????o a frio. As folhas e os caules foram secos ao ar. Em seguida, mo??dos e submetidas ?? extra????o, por 72 horas (3x) com solvente alco??lico (etanol e metanol). As solu????es alco??licas obtidas foram submetidas ?? destila????o, ?? press??o reduzida, para obten????o dos respectivos extratos, que foram utilizados no ensaio de microdilui????o em caldo para determina????o da Concentra????o Inibit??ria M??nima (CIM), conduzido segundo as normas do Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), com modifica????es. Foram utilizadas bact??rias Gram-positivas: Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Micrococcus luteus e Gram-negativas: Salmonella choleraesuis, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosas e o fungo Candida albicans. Al??m disso, foi determinada a Concentra????o Bactericida M??nima (CBM) e realizada a triagem fitoqu??mica. Observou-se que dos extratos das folhas, das partes a??reas e dos caules das esp??cies testados, 14.81% apresentaram atividade antimicrobiana, n??o havendo diferen??a entre os percentuais de atividade entre os extratos das folhas e dos caules. Os extratos hidroalco??licos apresentaram mais atividade contra microrganismos Gram-positivos (12.04%) do que contra os Gram-negativos (2.78%). Nenhum extrato apresentou atividade contra a Candida albicans. Dos 18 extratos das 10 esp??cies testadas, 94,44% (17) apresentaram resultado positivo para taninos, excetuando-se apenas o extrato etan??lico do caule da Genipa americana L.. Os extratos etan??lico da folha da Celtis iguanacea Sarg. e do caule da Genipa americana e os extratos metan??licos das partes a??reas da Bromelia laciniosa Mart., do caule da Canavalia Brasiliensis Mart., da Celtis iguanaea Sarg. e da Myracrodruon urundeuva Allem??o deram positivo para esteroides, correspondendo a 33.33 % dos extratos testados. A presen??a de alcaloides foi identificada nos extratos etan??licos do caule da Genipa americana L., da Copernicia cerifera Mart.. e da Anadenanthera colubrina Vell. e metan??lico da Azadirachta indica, da Myrocrodruon urundeuva Allem??o e da Celtis iguanaea Sarg., o que corresponde a 33,33 % dos extratos. Os triterpenos foram identificados nos extratos etan??licos das folhas da Genipa americana L., da Celtis iguanaea Sarg., do caule da Genipa americana L. e metan??lico das folhas da Cassia excelsea Schrader, da Schinopsis brasiliensis Engl. e do caule da Celtis iguanaea Sarg., estando, portanto, presente em 38,89% dos extratos testados.

Orientadores: Mary Luci de Souza Queiroz / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T23:28:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Melo_Adrianade_D.pdf: 659613 bytes, checksum: 7fad6c2766a54d3e79d1362ad24ec460 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: O câncer é uma das doenças mais prevalentes no Brasil e no mundo. Atualmente, a radioterapia e a quimioterapia são utilizadas como tratamento de primeira escolha para esta doença e caracterizam-se por não possuir toxicidade seletiva, causando sérios efeitos adversos como a inibição da resposta imunológica e a mielossupressão. O desenvolvimento de novas drogas, visando terapias mais eficientes, vem aumentando a procura por fitoterápicos para o tratamento do câncer. A Withania somnifera (Ashwagandha) é uma planta bastante utilizada na medicina Ayurvédica devido sua eficácia em uma grande variedeade de doenças. Possui sinonímia bastante diversificada sendo conhecida por Cereja de Inverno, Ashwagandha, Ginseng Indiano entre outros nomes. Cresce em áreas subtropicais da Índia, África e oeste da Ásia. A Withania somnifera (WS) foi investigada extensivamente durante as últimas três décadas e resultados de estudos envolvendo indivíduos de diferentes faixas etárias e de ambos os sexos demonstram ação terapêutica potente com efeitos tóxicos mínimos. Neste sentido, investigamos os efeitos desta planta sobre o crescimento e diferenciação de precursores hematopoéticos [Células formadoras de colônias de granulócitos/macrófagos (CFU-GM)], de camundongos normais e portadores do tumor ascítico de Ehrlich (TAE), os quais foram tratados com diferentes doses de Withania somnifera (20, 50 ou 100 mg/kg/dia). Nestes animais, avaliamos ainda a presença de fatores estimuladores de colônias no soro e a sobrevida. Além disso, foi avaliada também a proliferação de linfócitos e a lise específica de células natural killer (NK), a concentração das citocinas IL-1, IL-6, IL-10, IFN-g e TNF-a nos camundongos inoculados com TAE e tratados com o extrato da planta, bem como a presença de micronúcleos de eritrócitos da medula óssea dos camundongos tratados com o extrato da planta e ciclofosfamida, e por último a citotoxicidade do extrato nas linhagens leucêmicas HL-60, K-562 e MOLT-4. Nossos resultados demonstraram uma eficácia do extrato de Withania somnifera no crescimento de diferenciação dos precursores hematopoéticos da medula e baço dos camundongos inoculados com TAE. Como já esperado, o TAE produziu concomitantemente a mielossupressão e um aumento no número de CFU-GM esplênico. O tratamento dos animais portadores do TAE com WS (20, 50 e 100 mg/kg) produziu aumento na sobrevida e aumento na mielopoese, além da redução no número de colônias esplênicas e no peso do baço. Quanto à proliferação de linfócitos e a lise específica de células NK, ocorreu uma resposta dose-dependente dos animais inoculados e tratados com o extrato de WS. Da mesma forma, pudemos observar que o tratamento dos animais portadores do TAE e tratados com a planta impediu a polarização da resposta imunológica Th1-Th2 encontrada nos animais portadores do TAE. Neste sentido, a avaliação dos níveis de IL-1 revelou que a administração das doses de 20, 50 e 100 mg/Kg de WS por 10 dias consecutivos em camundongos normais produziu um aumento significativo (P<0,001) comparado aos grupos controle e inoculados com TAE, em 24 e 48 horas após a incubação. Os resultados obtidos para a produção de IL-6 revelaram níveis estatisticamente mais elevados, em relação aos observados para os animais somente inoculados. Um aumento pronunciado (P<0,001) nos níveis de IL-10 foi observado nos animais inoculados com TAE (24 e 48 horas). Reduções significativas foram observadas nos níveis desta citocina após o tratamento com todas as doses de WS em 24 e 48 horas de incubação, quando comparadas ao grupo inoculado com TAE (P<0,001). Por outro lado, os níveis de IL-10 nos animais normais não foram alterados pelo tratamento com as mesmas doses de WS. Em relação aos níveis de IFN-g, observamos um redução significativa nos níveis desta citocina nos animais apenas inoculados com TAE. Por outro lado, houve uma reversão deste quadro quando os animais foram tratados com as doses de 20, 50 e 100 mg/Kg. Os níveis da citocina TNF-a revelaram um aumento significativo desta citocina em relação ao grupo apenas inoculado com TAE. Estes resultados são encorajadores, uma vez que favorecem a utilização do extrato de WS em combinações terapêuticas com outros quimioterápicos visando reduzir a mielotoxicidade e suplementar a eficácia tumoricida desta planta / Abstract: Cancer is not only one of the most important diseases in Brazil, yet worldwide too. Nowadays, radiotherapy and chemotherapy have been the first choice treatment against this disease, both characterized for their non-selective toxicity that leads to serious adverse effects, amongst which are inhibition of the immunological response and mielosupression. New drug development seeking more efficient therapy is increasing search for plant-derived drugs to cancer treatment. Withania somnifera (Ashwagandha) is quite used in Ayurvedic medicine due to its effectiveness in a great variety of diseases. This plant possesses diversified synonymes, being known as Cherry of Winter, Ashwagandha, Ginseng Indian, among other names. It grows in subtropical areas of India, as well as in some areas of Africa and west Asia. Withania somnifera was extensively investigated during the last three decades and the studies involving individuals of different age groups and both sexes demonstrated potent therapeutic action with minimum poisonous effects. In this sense, we investigated Withania somnifera¿s actions on the growth and differentiation of hematopoietic precursors [granulocyte/macrophage colony cell formation (CFU-GM)] of normal animals and TAE bearers, which were treated with different doses of Withania somnifera (20, 50 or 100 mg/kg/dia). We also evaluated the presence of colony stimulatory factors in the animals sera, as well as their survival. Furthermore, we analysed lymphocytes proliferation, specific NK cell lysis, IL-1, IL-6 and IL-10 cytokines, IFN-g and TNF-a concentrations in treated bearing mice, as well as the presence of bone marrow erytrocyte micronucleus of mice treated with the extract of the plant and cyclophosphamide. We also studied the extract¿s citotoxicity in HL-60, K-562 and MOLT-4 leukemic lineages. Our results demonstrated Withania somnifera¿s effectiveness on hematopoietic precursors growth and differentiation in marrow and spleen TAE-bearing mice. As it was already expected, TAE produced myelossupression and increased CFU-GM spleen number concomitantly. The treatment of TAE-bearing animals with WS (20, 50 and 100 mg/Kg) produced dose-dependent increase in myelopoiesis, an increase in life time and a reduction in spleen colony number and in spleen weight. All this happened parallel to survival. As to lymphocytes proliferation and specific NK cell lysis, they were also dose-dependent in treated bearing animals. Likewise, we observed that the treated-bearing animals blocked Th2 immune response polarization detected in the TAE-bearing group. Evaluations of IL-1 levels revealed that the administration of 20, 50 and 100 mg/Kg of WS¿s extract for 10 consecutive days in normal mice produced a significant increase (P <0,001) compared to control and inoculated groups within 24 and 48 hours of incubation. Results obtained from IL-6 production showed statisically higher levels compared to the non-treated bearing group. A pronounced increase (P <0,001) in IL-10 levels was also observed in TAE-bearing animals (24 and 48 hours). Significant reductions were observed in cytokine levels within 24 and 48 hours of incubation after treating the animals with all the stated doses compared to the non-treated bearing group (P <0,001). On the other hand, IL-10 levels in normal animals were not altered by the treatment with the same doses of WS. Concerning IFN-g levels, we observed a significant reduction in non-treated bearing mice, however this picture was reversed when the same group was treated with 20, 50 and 100 mg/kg doses. Levels of TNF-g of treated bearing mice significally increased when compared to the non-treated bearing group. These results are encouraging, once they favor WS extract¿s use in combined quimiotherapies that seek mielotoxicity reduction and incresase the plant¿s tumoricid effectiveness / Doutorado / Doutor em Farmacologia