Made available in DSpace on 2014-06-12T22:59:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo434_1.pdf: 3417021 bytes, checksum: 184104d0cd76fcb3a12d5dc185de229e (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O presente trabalho pretende aportar informações sobre a biologia dos agulhões negro (Makaira nigricans) e branco (Tetrapturus albidus) capturados no oceano atlântico sul e equatorial. Os exemplares examinados foram adquirido por observadores de bordo do Programa de Observadores de Bordo da Frota Atuneira Arrendada no Brasil. Todos os espécimens foram identificados a bordo, mensurando-se, imediatamente após o embarque, o comprimento da mandíbula inferior até a forquilha (MIF). Em seguida, os mesmos foram, então, eviscerados, coletando-se as gônadas, a nadadeira anal e os estômagos. Para o estudo da biologia reprodutiva e determinação dos estádios de maturação sexual, para as duas espécies, as gônadas foram analisadas macroscopicamente e histologicamente através de microscopia óptica. Para o cálculo do Índice Gonadal (IG), foi utilizada a seguinte equação: IG = PG x 105/MIFb. Para a estimativa do L50, utilizaou-se a freqüência relativa (%) de indivíduos adultos em cada classe de MIF, a partir de uma curva logística, utilizando a seguinte fórmula: Mf = 1/(1+e(a-b)*MIF). Para o estudo da idade e crescimento apenas do Makaira nigricans (agulhão negro), foi utilizado o segundo espinho da nadadeira anal, do qual mensurou-se a largura máxima do côndilo, cortando-se os mesmos, em seguida com um arco de serra, a uma distância de 5 cm medidos a partir da mesma. Em seguida foram realizadas três secções transversais de 0,45mm de espessura, utilizando-se uma Serra Metalográfica ISOMET, as quais foram analisadas através de imagem capturada por uma lupa com câmera CCD (Charge Coupled Device). Os anéis de crescimento foram analisados, utilizando-se o programa computacional SigmaScan Pro 5, tendo sido mensurados as distâncias entre o centro dos espinhos e a extremidade da borda de cada secção, definida como o raio do espinho (R), a distância do centro do espinho à borda da vascularização, definida como raio da vascularização (V), e a distância entre o centro do mesmo e os anéis de crescimento, definido como o raio dos anéis (ri). Os estômagos foram analisados em laboratório, identificando-se os itens alimentares até o menor táxon possível. Em seguida, o peso (g) e o comprimento total (cm) (quando possível) de cada presa foram aferidos, observando-se, também, as porcentagens em número (%N), peso úmido em grama (%P) e freqüência de ocorrência (%F.O.), utilizados para o cálculo do Índice de Importância Relativa (IIR), como segue: IIR= (%P + %N) x %F.O. Para o estudo da biologia reprodutiva do agulhão negro foi amostrado um total de 418 gônadas, sendo 260 machos e 158 fêmeas, com uma proporção sexual entre machos e fêmeas de 1,6:1,0. O comprimento (MIF) das fêmeas variou de 104 cm a 345 cm, com uma moda na classe de 205 cm a 220 cm. Para os machos, o comprimento variou de 100 cm a 267 cm, com uma moda na classe de 175 cm a 190 cm. A escala microscópica elaborada para o agulhão negro foi composta por 6 estágios maturacionais (imatura, em matruação, em maturação avançada, madura, esvaziada e em repouso) para as fêmeas e 4 para os machos (imaturo, em maturação, em maturação avançada e maduro). O tamanho médio de primeira maturação sexual para as fêmeas foi estimado em 183,5 cm e em 150,1 cm para os machos. A média mensal do índice gonadal (IG) para as fêmeas, foi mais elevado no mês de abril e nos meses de setembro e outubro. Para os machos, os maiores valores foram observados em abril e maio, no 1º semestre, e nos meses de agosto, setembro e outubro, no 2º semestre, em época similar às fêmeas. O tipo de desova observado foi parcelada, com a costa nordeste brasileira podendo ser caracterizada como uma área de maturação e repouso, e não de desova. A fecundidade em fêmeas com 272 cm a 290 cm (MIF) variou de 2.151.000 a 6.769.060 ovócitos hidratados. Para o estudo da biologia reprodutiva do agulhão branco foram analisados 924 indivíduos, sendo 656 fêmeas e 268 machos. O comprimento das fêmeas variou de 83 a 236 cm, enquanto nos machos o comprimento variou de 90 a 220 cm. As fêmeas foram mais abundantes do que os machos, apresentando diferença estatisticamente significativa (p=2,2-16). As fêmeas foram classificadas em cinco estágios de maturação sexual diferentes (imaturas, em maturação, maduras, desovadas e em repouso). Os machos, por sua vez, foram classificados em quatro estágios de desenvolvimento maturacional diferentes (imaturos, em maturação, maduros e gasto). Os machos apresentaram sua maior atividade reprodutiva durante o período de abril a agosto, quando foi observada a maior freqüência de indivíduos em maturação e maduro (80%). A média mensal do IG das fêmeas variou de 0,35 a 0,87, apresentando seus maiores valores no período de abril a junho. Nos machos, a média mensal do IG variou de 0,94 a 5,92. O tamanho de L50 para as fêmeas foi estimado em 144,9 cm e para os machos em 138,5 cm. Para o estudo da idade e crescimento foram amostrados 599 indivíduos de agulhão negro,dos quais foram observados os anéis de crescimento em 429 (71,6%) machos e 170 (28,4%) fêmeas, numa proporção sexual de 2,5:1,0. As médias mensais da taxa de incremento marginal (IM), para as idades agrupadas, apresentaram os menores valores no mês de junho, tanto para os machos (0,57) como para as fêmeas (0,51). As médias mensais não diferiram significativamente entre machos e fêmeas (ANOVA, p > 0,05). Os resultados do IM indicam que um anel de crescimento é formado a cada ano, provavelmente entre maio e junho para ambos os sexos. As médias do retrocálculo do MIF por idade, ajustadas pelo modelo de von Bertalanffy, indicam que apesar dos machos e das fêmeas apresentarem a mesma idade (16 anos), as fêmeas (394,7 cm) atingiram tamanhos maiores do que os machos(299,7cm). Um total de 257 estômagos do agulhão branco (Tetrapturus albidus), sendo 60 (23,3%) machos e 197 (76,7%) fêmeas, foram examinados. A estabilização de itens alimentares ocorreu com 54 itens e 150 estômagos, demonstrando que o número de estômagos amostrados foi suficiente para a análise do hábito alimentar da espécie. Do total de estômagos analisadas 220 (85,6%) apresentavam conteúdo e apenas 37 (14,4%) estavam vazios. Foram identificados 58 itens alimentares, incluindo 35 teleósteos, 20 cefalópodes e 2 crustáceos. De acordo com o IIR, com exceção dos ítens teleósteos e cefalópodes, o Dactylopterus volitans, foi o item de maior importância. O segundo mais importante foi o Ornithoteuthis antillarum, com 21,2% de ocorrência. Em 226 estômagos de agulhão negro analisados, foram identificados 44 itens, sendo 31 de peixes e 13 de cefalópodes. Em setenta exemplares os estômagos estavam vazios (23,6%), A estabilização de itens alimentares ocorreu com 45 itens em 110 estômagos. De acordo com o IIR a espécie tem preferência alimentar por teleósteos, principalmente o Katsuwonus pelamis e cefalópodes

Orientador: Frederico Ozanam Papa / Banca: José Antônio Dell'Aqua Junior / Banca: Márcio Teoro do Carmo / Resumo: Métodos de processamento espermático são rotineiramente utilizados para otimização do sêmen de garanhões. As biotecnologias aplicadas a reprodução permitem que animais geneticamente superiores disseminem suas características. Apesar disso, mesmo em garanhões clinicamente sadios, o sêmen criopreservado possui taxas de fertilidade inferiores quando comparado ao sêmen fresco, em decorrência do estresse químico e físico gerados pela preservação através do frio. Tal, condição pode ser intensificada em animais que apresentam alterações no trato reprodutivo que comprometam a qualidade seminal, como por exemplo, a presença de sangue no ejaculado, denominado hemospermia. Esta afecção geralmente é observada em decorrência de lesões na uretra, processo uretral, pênis e vesícula seminal. O efeito dos componentes sanguíneos sobre a qualidade do sêmen ainda não está bem estabelecido. A manipulação do sêmen por meio da centrifugação com gradientes de densidade além de proporcionar a seleção das células espermáticas, possivelmente permite a separação das hemácias do ejaculado em casos de hemospermia. Em virtude da escassez de informações sobre a viabilidade do sêmen na presença do sangue, visto que os ejaculados com quadro de hemospermia são descartados e a possibilidade de separar as hemácias do ejaculado apresentam dificuldades no aproveitamento do sêmen, mais estudos são necessários acerca do assunto para minimizar as dúvidas da utilização ou não do ejaculado. / Abstract: Sperm processing methods are routinely used for stall optimization of stallions. Biotechnology applied to reproduction allows genetically superior in animals to be better harvested, to disseminate their characteristics through generations. Despite this, even in clinically healthy stallions, cryopreserved semen has lower fertility rates when compared to fresh semen, due to the stress generated by cryopreservation. Such a condition can be intensified in animals that present pathologies in the reproductive tract that compromise seminal quality, such as the presence of blood in the ejaculate, called hemospermia. This condition is usually seen as a result of injuries to the urethra, urethral process or penis. It is unknown what amount of blood in an ejaculate leads to subfertility. The manipulation of semen by centrifugation with density gradients in addition to providing the selection of the spermatic cells possibly allows the separation of the red blood cells from the ejaculate in cases of hemospermia. Due to the scarcity of information on the viability of semen in the presence of blood and the possibility of separating red blood cells from ejaculate more studies are needed on the subject. / Mestre

Orientador: Marion Burkhardt de Koivisto / Banca: Gisele Mingoti / Banca: Cássia Orlandi / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar o empacotamento da cromatina e morfometria da cabeça de espermatozoides criopreservados de touros Bos taurus indicus da raça Nelore de diferentes idades e a influência do grau de compactação da cromatina na produção in vitro de embriões (PIV). Foram utilizados 40 animais mantidos em centro de coleta e processamento de sêmen (CCPS) e distribuídos em três grupos: Grupo Jovens (entre 1,8 e 2 anos), Grupo Adultos (entre 3,5 e 7 anos) e Grupo Senis (entre 8 e 14,3 anos). Os ejaculados foram congelados de acordo com os padrões pré-estabelecidos do CCPS. Utilizou-se a coloração de azul de toluidina, que permite a avaliação simultânea da cromatina e morfometria da cabeça espermática, a cromomicina A3 (CMA3) para analisar a protaminação espermática e a PIV para o desenvolvimento embrionário. O azul de toluidina foi avaliado pela microscopia óptica e a CMA3 pelo citômetro de fluxo. Na PIV foram realizadas quatro repetições por grupo, com 25 a 30 oócitos em cada repetição. A análise seminal revelou que espermatozoides de touros jovens obtiveram maiores valores de área (A), perímetro (P) e largura (L) quando comparados a adultos e senis (Jovens: A=1848,5±119,79, P=10,23±0,29, L=1,95±0,1; Adultos: A=1672,9±104,46, P=9,86±0,33, L=1,81±0,06; Senis: A=1723,1±124,41, P=9,97±0,33, L=1,83±0,09; P<0,0001) e apresentaram maior deficiência de protaminação quando analisado pela CMA3 (Jovens: 1,57±0,76; Adultos: 1,09±0,63, Senis: 0,90±0,59; P<0,05). Da mesma forma, variáveis de tamanho (A, P, L) e protaminação espermática, avaliado pela CMA3, obtiveram correlação negativa com a idade e positiva com a elipsidade (P<0,05). Espermatozoides com anormalidades na cromatina obtiveram maior área quando comparado àqueles sem alteração de cromatina (P<0,0001). Não houve diferença significativa na PIV quando sêmen com maior e menor parcela de alteração de cromatina foi ... / Abstract: The aim of this study was to evaluate chromatin condensation and sperm head morphometry of cryopreserved semen samples from Bos taurus indicus bulls of different ages and the influence of the degree of chromatin condensation on in vitro embryo production (IVP). A total of 40 animals kept in an Artificial Insemination Centre were divided into three groups: Young Group (1.8 to 2 years), Adult Group (3.5 to 7 years) and Senile Group (8 to 14.3 years). The ejaculates were frozen in accordance with established standards of the Artificial Insemination Centre. The thawed semen samples were evaluated with toluidine blue, which analyzes the chromatin condensation and sperm head morphometry simultaneosly, chromomicin A3 (CMA3) to analyze the protamination and in vitro embryo production to analyze the embryonic development. The toluidine blue was evaluated by optical microscopy and the CMA3 by flow cytometry. Semen analyses revealed that spermatozoa of young bulls had higher values of area (A), perimeter (P) and width (W) when compared to adults and senile (Young: A = 1848.5 ± 119.79, P = 10. 23 ± 0.29, W = 1.95 ± 0.1; Adults: A = 1672.9 ± 104.46, P = 9.86 ± 0.33, W = 1.81 ± 0.06; Senile: A = 1723.1 ± 124.41, P = 9.97 ± 0.33, W = 1.83 ± 0.09; P<0.0001) and had higher protamination deficiency when analyzed with CMA3 (Young: 1.57 ± 0.76, Adults: 1.09 ± 0.63, Senile: 0.90 ± 0.59, P<0.05). Variable size (A, P, W) and sperm protamination evaluated by CMA3 showed negative correlation with age and a positive with ellipticity (P<0.05). Spermatozoa with abnormal chromatin obtained larger area when compared to those with normal chromatin (P<0.0001). There was no significant difference in IVP using semen with higher and lower altered chromatin condensation, evidencing that the proportion of spermatozoa with abnormal chromatin (4 to 16.15%) did not affect the embryonic development. Our results indicate that sperm head of young bulls are ... / Mestre

Orientador: Oduvaldo Câmara Marques Pereira / Banca: Eliana Milanesi Rubio / Banca: Débora Cristina Damasceno / Banca: Daniela Cristina Ceccatto Gerardin / Banca: Fernanda Klein Marcondes / Resumo: Aproximadamente um terço da população mundial é tabagista. Devido ao fato de ser um carcinógeno que causa mutações nas células somáticas, o tabaco pode afetar a saúde reprodutiva masculina. No homem o tabagismo é um fator de risco para o desenvolvimento de diversas enfermidades urológicas, embora o mecanismo exato de atuação seja ainda desconhecido. Por outro lado, ao analisarmos os aspectos reprodutivos, verificamos que o zinco é essencial para a espermatogênese como um co-fator de metaloenzimas envolvidas na transcrição do DNA, na expressão dos receptores esteróides e na síntese protéica, bem como apresenta ação anti-oxidante e anti-apoptótica. Com base nestas informações, o objetivo do presente trabalho consistiu em analisar o papel do zinco sobre a fertilidade e função testicular de ratos expostos ao tabaco. Ratos Wistar com 60 dias de idade (n=10/grupo) foram divididos em quatro grupos G1 (grupo controle), G2 (expostos a fumaça do tabaco-20 cigarros/dia), G3 (grupo controle suplementado com zinco-20mg/Kg cloreto de zinco diariamente por gavagem) e G4 (expostos a fumaça do tabaco e suplementados com zinco). A duração do tratamento foi de oito semanas. Ao final do experimento foram avaliados os seguintes parâmetros: massa corporal, peso úmido dos órgãos da reprodução e da glândula adrenal, concentração plasmática de testosterona, função testicular (análise seminal e produção diária de espermatozóides), fertilidade e comportamento sexual. As respostas farmacológicas da musculatura lisa genital acessória masculina (vesícula seminal e ducto deferente) a drogas autonômicas e danos no DNA do espermatozóide foram também avaliados. Os resultados foram comparados entre si pela análise de variância não-paramétrica, para modelo com dois fatores, complementada com teste de comparações múltiplas de Tukey, p<0,05... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: About one-third of the world's male population smokes tobacco daily. Considering the larger number of men worldwide who smoke, and that cigarette is a known somatic cells mutagen and carcinogen, there is a major concern that smoking may adversely affect male reproductive health. For men the smoking is a risk factor for the development of a variety of urological diseases, although the exact mechanism of action is still unknown. Furthermore, when we look at the reproductive issues, we found that zinc is essential for spermatogenesis as a cofactor of metalloenzyme involved in the transcription of DNA, the expression of steroid receptors and protein synthesis. In addition, zinc presents anti-oxidant and anti-apoptotic actions. Based on this information, the purpose of this study was to examine the role of zinc on fertility and testicular function in rats exposed to tobacco. Male Wistar rats were divided into four groups (10/group): Control (G1), Cigarette smoke (G2), Zinc (G3: Zn 20mg/kgdaily by gavages) and Zinc/cigarette (G4). The treatment was applied during eight weeks. After finishing the treatment, the following parameters were analyzed: body weight, wet weight of the reproductive organs and the adrenal gland; plasma testosterone concentration, testicular function (seminal analysis and daily production of spermatozoa); fertility and sexual behavior. The pharmacological responses of male accessory genital smooth muscle (vas deferens and seminal vesicle) to autonomic drugs and DNA damage in the spermatozoa were also evaluated. The results were compared by non-parametric analysis of variance, for model with two factors, and the test for multiple comparisons of Tukey was applied when necessary , p<0.05. The exposure to cigarette smoke decreased the concentration of testosterone parallel to a decrease in the concentration, morphology, and motility of spermatozoa. As a result of these... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientadora: Elisabeth Criscuolo Urbinati / Resumo: Os hormônios tireoideanos são hormônios metabólicos envolvidos nos processos de desenvolvimento inicial de muitas espécies de vertebrados. Em peixes, sua ação ainda é contraditória. O tratamento hormonal de ovos e larvas pode ser um meio prático de melhorar as técnicas de cultivo de peixes de importância comercial O presente estudo avaliou o efeito da adição de triiodotironina em ovos de piau verdadeiro (Leporinus elongatus), através da hidratação dos mesmos, durante a fertilização, sobre o desenvolvimento inicial da espécie. O experimento foi realizado na Estação de Hidrobiologia e Piscicultura de Três Marias, CODEVASF, em Três Marias, MG, de fevereiro e março de 2000. Foram utilizados ovos de 3 fêmeas (4 repetições por fêmea), fertilizados a seco, com o sêmen de um macho por fêmea. A hidratação dos ovos foi feita com soluções de triiodotironina, preparadas com água das incubadoras, durante 35 minutos. As soluções constituíram os tratamentos: Controle/Tr1 (0,0 ppm T3); Tr2 (0,01 ppm T3); Tr3 (0,05 ppm T3) e Tr4 (0,1 ppm T3). Após hidratação, os ovos foram transferidos para incubadoras de 20L, com condição fisico-química monitorada. Determinou-se: taxa de fertilização, ao final da gastrulação (9 h após fertilização); duração da embriogênese (à eclosão); comprimento total das larvas e volume do saco vitelino (12 e 24 hs após a eclosão) e taxa de malformação (zero, 12 e 24 hs após eclosão). Os dados foram analisados por ANOVA e as médias comparadas pelo teste de Tukey. O método de adição de hormônio durante a hidratação dos ovos, na fertilização, se mostrou de fácil execução e repetibilidade, mesmo em trabalho de campo. A adição de T3 aos ovos de Leporinus elongatus, nas doses e condições testadas... / Abstract: In teleostean fish, thyroid hormones have been implicated in early development, although available data are still contradictory. Hormonal treatments may offer a practical means of improving rearing techniques. The present study assessed the effects of triiodothyronine (T3) added to eggs of Leporinus elongatus by hydration during the fertilization process on the early development of the species. The experiment was carried out at Estação de Hidrobiologia e Piscicultura de Três Marias, CODEVASF, in Três Marias, MG, from February to March of 2000. Eggs from 3 females were dry fertilized with milt (one male for each female) and hydrated with T3 water solutions, during 35 minutes. Solutions constituted the treatments: Control/Tr1 (0.0 ppm T3); Tr2 (0.01 ppm T3); Tr3 (0.05 ppm T3) and Tr4 (0.1 ppm T3). After hydration, eggs were maintained in 20L incubators, with constant water flow and water conditions monitored. Fertilization rate (9 h after fertilization), embryogenesis time (at hatching), total length, yolk sac volume (12 and 24 h after hatching) and abnormality rate (zero, 12 and 24 h after hatching) were determined. Data were analyzed by ANOVA and Tukey test. The T3 addition by egg hydration during the fertilization process showed to be a practical and reproducible method to test hormones effect on fish early development. T3 addition to Leporinus elongatus eggs decreased fertilization rate and prolonged embryogenesis time, in the tested dosis. It neither altered the larvae growth nor induced abnormalities. The species might present circulating levels of thyroid hormones that make exogenous hormone unnecessary to the improvement of its early development / Mestre

Orientador: José Luiz Moraes Vasconcelos / Banca: Lindsay Unno Gimenes / Banca: Ocilon Gomes de Sá Filho / Banca: Ricardo Maria dos Santos / Banca: Ky Pohler / Abstract: Study 01- Our hypothesis was that fertility could be increased in a timed AI (TAI) protocol based on estradiol (E2) and progesterone (P4) by combining GnRH with E2-benzoate at the start of the protocol to increase circulating P4 concentration during preovulatory follicle development and by using two prostaglandin (PGF) treatments at the end to decrease circulating P4 concentration near TAI. Lactating Holstein cows (n = 1,808) were randomly assigned during the cool or hot seasons of the year to receive TAI (d0) following one of three treatments: I. Control: CIDR + 2 mg of E2-benzoate on d -11, PGF on d -4, CIDR withdrawal + 1.0 mg of E2-cypionate on d -2, and TAI on d 0; II. 2PGF: Identical to Control protocol with addition of a second PGF treatment on d -2; III. GnRH: Identical to 2PGF protocol with addition of 100 μg GnRH treatment on d -11. Pregnancy diagnoses were performed d32 and d60 after TAI. The GnRH protocol increased percentage of cows with CL (Control = 56.9%; 2PGF = 55.8%; GnRH = 70.5%) and circulating P4 concentration at PGF (Control = 3.28 ± 0.22; 2PGF = 3.35 ± 0.22; GnRH = 3.70 ± 0.21 ng/mL), compared to Control and 2PGF protocols. The positive effects of GnRH treatment on P/AI were only detected during the cool season (GnRH = 50.9%; 2PGF = 44.2%; Control = 41.0%) and not during the hot season. In addition, the effect of GnRH was only observed in cows with low circulating P4 concentration (<3ng/mL) at the start of the protocol and not in cows that began the protocol with high P4. Further, there was an interaction for presence of CL at PGF with follicle diameter such that cows with a CL at PGF had greater P/AI if they ovulated larger rather than smaller follicles near TAI.Season had major effects on many reproductive measures with cool season greater than hot season in percentage of cows with CL at PGF (62.9 vs. 56.2%), ovulatory follicle diameter (15.7 vs. 14.8 mm), expression of ... / Doutor

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-06-30Bitstream added on 2015-04-09T12:48:26Z : No. of bitstreams: 1 000815808.pdf: 368367 bytes, checksum: 730f4d89fb923e167df061884d63fd71 (MD5) / O objetivo deste estudo foi avaliar o empacotamento da cromatina e morfometria da cabeça de espermatozoides criopreservados de touros Bos taurus indicus da raça Nelore de diferentes idades e a influência do grau de compactação da cromatina na produção in vitro de embriões (PIV). Foram utilizados 40 animais mantidos em centro de coleta e processamento de sêmen (CCPS) e distribuídos em três grupos: Grupo Jovens (entre 1,8 e 2 anos), Grupo Adultos (entre 3,5 e 7 anos) e Grupo Senis (entre 8 e 14,3 anos). Os ejaculados foram congelados de acordo com os padrões pré-estabelecidos do CCPS. Utilizou-se a coloração de azul de toluidina, que permite a avaliação simultânea da cromatina e morfometria da cabeça espermática, a cromomicina A3 (CMA3) para analisar a protaminação espermática e a PIV para o desenvolvimento embrionário. O azul de toluidina foi avaliado pela microscopia óptica e a CMA3 pelo citômetro de fluxo. Na PIV foram realizadas quatro repetições por grupo, com 25 a 30 oócitos em cada repetição. A análise seminal revelou que espermatozoides de touros jovens obtiveram maiores valores de área (A), perímetro (P) e largura (L) quando comparados a adultos e senis (Jovens: A=1848,5±119,79, P=10,23±0,29, L=1,95±0,1; Adultos: A=1672,9±104,46, P=9,86±0,33, L=1,81±0,06; Senis: A=1723,1±124,41, P=9,97±0,33, L=1,83±0,09; P<0,0001) e apresentaram maior deficiência de protaminação quando analisado pela CMA3 (Jovens: 1,57±0,76; Adultos: 1,09±0,63, Senis: 0,90±0,59; P<0,05). Da mesma forma, variáveis de tamanho (A, P, L) e protaminação espermática, avaliado pela CMA3, obtiveram correlação negativa com a idade e positiva com a elipsidade (P<0,05). Espermatozoides com anormalidades na cromatina obtiveram maior área quando comparado àqueles sem alteração de cromatina (P<0,0001). Não houve diferença significativa na PIV quando sêmen com maior e menor parcela de alteração de cromatina foi ... / The aim of this study was to evaluate chromatin condensation and sperm head morphometry of cryopreserved semen samples from Bos taurus indicus bulls of different ages and the influence of the degree of chromatin condensation on in vitro embryo production (IVP). A total of 40 animals kept in an Artificial Insemination Centre were divided into three groups: Young Group (1.8 to 2 years), Adult Group (3.5 to 7 years) and Senile Group (8 to 14.3 years). The ejaculates were frozen in accordance with established standards of the Artificial Insemination Centre. The thawed semen samples were evaluated with toluidine blue, which analyzes the chromatin condensation and sperm head morphometry simultaneosly, chromomicin A3 (CMA3) to analyze the protamination and in vitro embryo production to analyze the embryonic development. The toluidine blue was evaluated by optical microscopy and the CMA3 by flow cytometry. Semen analyses revealed that spermatozoa of young bulls had higher values of area (A), perimeter (P) and width (W) when compared to adults and senile (Young: A = 1848.5 ± 119.79, P = 10. 23 ± 0.29, W = 1.95 ± 0.1; Adults: A = 1672.9 ± 104.46, P = 9.86 ± 0.33, W = 1.81 ± 0.06; Senile: A = 1723.1 ± 124.41, P = 9.97 ± 0.33, W = 1.83 ± 0.09; P<0.0001) and had higher protamination deficiency when analyzed with CMA3 (Young: 1.57 ± 0.76, Adults: 1.09 ± 0.63, Senile: 0.90 ± 0.59, P<0.05). Variable size (A, P, W) and sperm protamination evaluated by CMA3 showed negative correlation with age and a positive with ellipticity (P<0.05). Spermatozoa with abnormal chromatin obtained larger area when compared to those with normal chromatin (P<0.0001). There was no significant difference in IVP using semen with higher and lower altered chromatin condensation, evidencing that the proportion of spermatozoa with abnormal chromatin (4 to 16.15%) did not affect the embryonic development. Our results indicate that sperm head of young bulls are ...

Orientadora: Elizabeth Romagosa / Banca: José Augusto Senhorini / Banca: Maria Inês Borella / Resumo: Nos meses de janeiro de 2001 e 2002, as fêmeas de cachara, Pseudoplatystoma fasciatum, de 1ª e 2ª maturação gonadal (2 anos e 7 meses e 3 anos e 7 meses), respectivamente, mantidas em cativeiro, foram selecionadas pela associação da característica externa anatômica, com internas, apresentando distribuições de freqüência porcentual dos diâmetros dos ovócitos com uma única moda de 937,5 μm; 82,5% dos núcleos centrais e 17,5% excêntricos. Histologicamente, pôde-se observar que a maioria dos ovócitos encontravam-se em fase de maturação final. Nove fêmeas de 1ª maturação, receberam 2 doses de extrato de hipófise de carpa (HC), 0,5 mg/Kg e 5,0 mg/Kg (T1); 7, com 2 doses de hCG, 5 e 10 IU/g (T2); 5, com 0,5 mg/Kg HC e 5 IU/g hCG/g (T3); 4 com solução salina 0,9% (T4). As 9 fêmeas do T1 e 7 do T2, no momento da liberação dos ovócitos, apresentaram ovócitos com o mesmo diâmetro; 100% com quebra da vesícula germinativa e taxas de fertilização de: 53,44 + 18,3 e 54,81 + 11,8 %; número de larvas de 165.330 + 94,1 e 158.570 + 20,6, respectivamente. As 5 fêmeas do T3 não responderam ao tratamento hormonal. As fêmeas do T4 pertenciam ao grupo controle. Em janeiro/02, das 15 fêmeas selecionadas, que se encontravam no 2º ciclo, 6 receberam o T1, 5 o T2 e 4 T4, apresentando diâmetros dos ovócitos semelhantes às de 1ª maturação. Nas 3as amostras, as fêmeas do T1 apresentaram deslocamento das modas para à direita, diâmetro modal de 1062,5 μm e as do T2, com diâmetros de 937,5 a 1125,0 μm, taxas de fertilização de 56,08 + 30,9 e 81,90 + 17,3 % e 334.547 + 244 e 633.129 + 190 larvas, respectivamente. Em microscopia de luz, notou-se que os ovócitos eram semelhantes aos da fase anterior. Pôde-se constatar maior eficiência do T2, nas fêmeas de 2ª maturação, quanto às taxas de fertilização e número de larvas obtidos durante o período estudado / Abstract: In the months of January 2001 and January 2002, females of cachara, Pseudoplatystoma fasciatum, were selected during their first and second gonadal maturation (2 years and 7 months old and 3 years and seven months old, respectively) according to the association between the external anatomic characteristics and internal, showing distribution of oocyte diameter frequency with a single mode of 937.5 mm; 82.5 % of central nuclei and 17.5 % of eccentric nuclei. Histologically, it was observed that the majority of oocytes were in final maturation. Nine females in first maturation received 2 doses of carp pituitary extract (CPE), 0.5 mg/kg and 5.0 mg/kg (T1); seven received 2 doses of hCG, 5 and 10 IU/g (T2); five received doses of carp pituitary extract 0.5 mg/kg and hCG 5IU/g (T3); four received 0.9 % saline (T4). Nine females from T1 and seven from T2 presented oocytes with the same diameter at the moment of oocyte release; 100 % with germinal vesicle breakdown and fertilization rate of 53.44 + 18.3 and 54.81 + 11.8 %; larvae number of 165,330 + 94.1 and 158,570 + 20.6, respectively. The five females from T3 didn't respond to the hormonal treatment. The four females from T4 belonged to the control group. In January 2002, 6 of the 15 selected females that were going through the second cycle received T1; 5 received T2; and 4 received T4, showing oocyte diameters similar to the ones in the first maturation. On the third samples, the females from T1 showed mode shift to the right and modal diameter of 1062.5mm; the females from T2 presented diameters ranging from 937.5mm to 1125.0mm; fertilization rates of 56.08 + 30.9 and 81.90 + 17.3 %; 364,547 + 244 and 633,129 + 190 larvae, respectively. Under light microscopy, it was noticed that the oocytes were similar to the ones at the previous stage. A better efficiency of T2 was verified on the second maturation females, considering the fertilization rates ... / Mestre

A Doença de Machado-Joseph (DMJ) ou Ataxia Espinocerebelar 3 (SCA3) é uma doença neurodegenerativa, herdada de modo autossômico dominante. Está associada a uma expansão (CAG)n na região codificadora do gene MJD1, localizado na região cromossômica 14q32.1. A idade de início dos sintomas, entre pacientes brasileiros, ocorre em média aos 32 (12) anos, geralmente após o início da vida reprodutiva; deste modo, a maioria dos portadores tem sua prole antes de manifestarem os sintomas da doença. Para avaliar a capacidade de um determinado genótipo em produzir descendência, criou-se o conceito de valor adaptativo genético, que é uma medida simples de sucesso reprodutivo. Quanto maior a prole de um genótipo, mais fácil seria a sua manutenção no pool gênico da população. O objetivo deste trabalho foi analisar o valor adaptativo genético das famílias com DMJ e compará-lo com dados obtidos a partir do Censo de 2000 do Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística (IBGE). A amostra estudada compreendeu 828 indivíduos (415 afetados) de 82 famílias com diagnóstico molecular de DMJ, originárias do Rio Grande do Sul (RS), com história reprodutiva conhecida e nascidos a partir de 1903. A prevalência estimada da doença foi de 3,5:100.000 habitantes na nossa região. O número médio de filhos das mulheres da população do RS e das mulheres com DMJ, em 2000, foi 1,90 e 2,93 ± 2,3, respectivamente, e esta diferença foi estatisticamente significativa (p<0,001). Se o valor adaptativo da população for considerado 1,0, o da DMJ seria de 1,54. Entretanto, a melhor alternativa para analisar o valor adaptativo é a que avalia o número médio de filhos das mulheres eméritas – com mais de 45 anos ou já falecidas – pois essas já completaram seu período reprodutivo. Embora o número médio de filhos das eméritas com DMJ fosse de 3,89±2,52 e o das mulheres eméritas da população geral fosse de 3,52 filhos, essa diferença não foi significante. Ao contrário, quando se comparou o número médio de filhos das mulheres afetadas com o de suas parentes assintomáticas, houve diferença estatisticamente significativa (p<0,001): tanto na comparação independentemente da idade – 2,93±2,3 e 1,66±1,6, respectivamente – quanto entre as mulheres eméritas – 3,89±2,5 e 2,68±2,0,respectivamente. Se o valor adaptativo das consangüíneas assintomáticas, aos 45 anos, for considerado 1,0, o das portadoras de DMJ, aos 45 anos, seria de 1,45. Esses resultados demonstram um aumento no valor adaptativo genético dos pacientes com DMJ, tanto quando comparados com a população do estado do RS, como com seus parentes assintomáticos. A ausência de significância estatística na comparação entre as mulheres eméritas com DMJ e as da população pode ter decorrido do pequeno tamanho amostral no grupo de doentes (n=112); ou pode indicar um aumento da fecundidade no início da vida reprodutiva das DMJ, característica que desapareceria posteriormente. O aumento da fecundidade encontrado em pacientes com DMJ foi semelhante ao já descrito anteriormente nas portadoras de Doença de Huntington (DH) e na Ataxia Espinocerebelar 1 (SCA1), também doenças neurodegenerativas, quando foram comparadas às suas parentes não portadoras. Especulamos a possibilidade de haver pleiotropismo antagonístico nos genes envolvidos por essas mutações. Esse conceito sugere que um gene pode conferir efeitos benéficos no início da vida (desenvolvimento e maturação sexual rápidos, com aumento da fecundidade e do valor adaptativo do indivíduo que o porta), trazendo efeitos deletérios em fases mais tardias (como os sintomas de uma doença neurodegenerativa e a apoptose neuronal). Em conclusão, a presença da mutação DMJ conferiu um valor adaptativo aumentado às suas portadoras eméritas, quando comparadas às suas parentes não portadoras eméritas, a mesma tendência aparecendo nas comparações feitas com a população geral. / Machado-Joseph Disease (MJD), also known as Spinocerebellar Ataxia 3 (SCA3) is an autosomal dominant neurodegenerative disorder. MJD is associated to a (CAG)n expansion at the MJD1 gene coding region, located at chromosome region 14q32.1. The average age of onset is 32 (12) years among Brazilian patients, usually after the start of their reproductive period, so that most carriers have their offspring before the disease starts. In order to evaluate the capacity of a determined genotype in producing descendants, the genetic fitness concept was created, which is a simple measure of reproductive success. The larger the offspring of a genotype, the easier it would be to maintain itself in the genic pool of a certain population. The aim of the present work was to analyze the genetic fitness of MJD families and to compare it to data obtained from the 2000 Brazilian Census, provided by the Brazilian Institute of Geography and Statistics (IBGE). 824 individuals (415 affected) were studied, belonging to 82 families with a molecular diagnosis of MJD, and proceeding from the state of Rio Grande do Sul (RS). Only individuals with known reproductive history, and born after 1903 were included. From the obtained data, the disease prevalence was estimated at 3.5:100,000 inhabitants in our region. The average number of children (NC) from the women’s population in RS and MJD families, in 2000, were of 1.90 and 2.93 ± 2.3, respectively, with a statistically significant difference (p<0.001). If the population fitness is considered as 1,0, MJD fitness would be 1.54. However, the best alternative to analyze fitness is by evaluating the average NC from emeritus women, with more than 45 years or deceased: in other words, from individuals who have already completed their reproductive period. Although the average NC of emeritus women with MJD was 3.89±2.52 and of emeritus women from the population was 3.52 children, this difference was not significant. In contrast, when the mean NC from affected women was compared with the one of their asymptomatic relatives, a statistically significant difference was found (p<0.001), such as in the comparison independent of age: 2.93±2.3 and 1.66±1.6, respectively. Among the emeritus women, the average NC were of 3.89±2.5 and 2.68±2.0, in affected and asymptomatic groups, respectively (p<0.001). If the fitness of the asymptomatic relatives, at 45 years, is considered as 1,0, that of MJD carriers, at the same age, would be 1.45. These results showed an increase in genetic fitness of MJD patients, when compared with their asymptomatic relatives. The absence of statistical significance in a comparison between emeritus, MJD and population women, could have occurred due to the smallness of the sample size from the affected group (n=112), or it could indicate an increased fecundity at the beginning of MJD reproductive life, a characteristic that would disappear later. The increased fitness found in MJD patients was similar to that described before in Huntington Disease (HD) and Spinocerebellar Ataxia 1 (SCA1) carrier women, also neurodegenerative disorders, when compared to their non-carrier relatives. We speculate the possibility of antagonistic pleotropism acting in genes with these mutations. This concept suggests that a gene can, at the beginning of life, confer benefits (fast development and sexual maturation, with a heightened fecundity and fitness of the affected individual), and still bring deleterious effects in more delayed phases (as the symptoms of a neurodegenerative disease and neuronal apoptosis). In conclusion, the presence of the MJD mutation conferred an increased fitness to the emeritus carriers, when compared to their non-carrier relatives, and the same trend appeared in the comparisons made with the population of our State.

Submitted by Alessandra Portugal (alessandradf@ioc.fiocruz.br) on 2013-09-17T12:41:29Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao de Mestrado - Gabriel Sylvestre Ribeiro.pdf: 1533452 bytes, checksum: 8d2db7800d46ef716ec2f56b355c2d8e (MD5) / Made available in DSpace on 2013-09-17T12:41:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao de Mestrado - Gabriel Sylvestre Ribeiro.pdf: 1533452 bytes, checksum: 8d2db7800d46ef716ec2f56b355c2d8e (MD5) Previous issue date: 2012-03-23 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / O vírus da dengue é transmitido nas Américas por mosquitos Aedes aegypti. Este é adquirido através da picada em um hospedeiro em viremia e passa por intensa replicação em diferentes tecidos do inseto até tornar-se transmissível, após as partículas virais atingirem a luz das glândulas salivares. A partir deste momento o vírus pode ser inoculado, juntamente com a saliva, em todos os hospedeiros suscetíveis nos quais a fêmea se alimentar. Supõe-se que o vírus da dengue gere efeitos negativos sobre a biologia do mosquito, diminuindo o fitness dos indivíduos infectados. Apesar dos avanços recentes no conhecimento acerca de sua capacidade vetorial, ainda existem muitas lacunas na interação mosquito-vírus no par Ae. aegypti/dengue. Desta maneira, nosso objetivo é avaliar o impacto da infecção por DENV-2 no hábito alimentar do mosquito Ae. aegypti e, adicionalmente, monitorar a sobrevivência, longevidade, sucesso de oviposição e fecundidade de insetos infectados e controles. Duas populações foram testadas: Paea, confinada em laboratório desde 1994, e uma população de campo, coletada com o uso de ovitrampas em Tubiacanga (RJ). Fêmeas das duas populações foram aleatoriamente selecionadas para receber sangue infectado com 2x10-8 partículas de DENV-2 ou sangue com sobrenadante de cultura de célula livre de vírus, constituindo o grupo controle. Após a infecção oral, as fêmeas que estavam visualmente ingurgitadas foram confinadas individualmente em tubos de plástico. Ao longo de cinco semanas monitoramos aspectos de sua biologia e capacidade vetorial, tais como sua sobrevivência, fecundidade e cinco parâmetros do comportamento alimentar: tempo de início, o tempo gasto na localização do hospedeiro (camundongo anestesiado); o número de provas, quantas vezes a fêmea insere e retira sua probóscide do corpo do hospedeiro; tempo de prova, que termina quando notamos a inflação abdômen; o tempo de ingestão, que vai até a repleção total e retirada da probóscide do corpo do hospedeiro; tempo total de alimentação, a soma dos tempos de início, prova e ingestão. Utilizando uma análise de risco, fomos capazes de observar que a infecção pelo DENV-2 não modificou o hábito alimentar das fêmeas de Ae. aegypti. Por outro lado, a sobrevivência e a fecundidade foram menores quando a fêmea estava infectada com DENV-2. Através de uma ANOVA, observamos a influência da infecção na longevidade (F = 20,75 , gl = 1, P = 0,0001). A curva de sobrevivência das fêmeas infectadas apresentou queda significativamente mais intensa que a dos seus pares não-infectados (χ2 = 16,5, gl = 1, P < 0,001). Em relação à fecundidade, fêmeas infectadas têm menor sucesso de oviposição, ou seja, menor probabilidade de colocar ovos (χ2 = 14,40, gl = 3, p = 0,0024). Além disso, as fêmeas infectadas fazem a postura de um número significativamente menor de ovos do que seus pares não infectados. / Dengue virus is transmitted in the Americas by Aedes aegypti mosquitoes. This virus is acquired from an infected host through the bite and undergoes intense replication in different tissues of the insect becoming transmissible only after the viral particles reach the lumen of salivary glands. From this moment on the virus can be inoculated with saliva into all susceptible hosts the female will eat. It is assumed that the dengue virus generates negative effects on the mosquito’s biology, decreasing the fitness of infected individuals. Despite recent advances in knowledge of the Ae. aegypti vectorial capacity, there are still many gaps in the knowledge of the interaction between Ae. aegypti / dengue. Thus, our goal is to evaluate the impact of infection with DENV-2 in the feeding habits of the mosquito Ae. aegypti and additionally monitor the survival, longevity, oviposition success and fecundity of infected and control insects. Two populations were tested: Paea, confined in the laboratory since 1994, and one from the field, collected using ovitraps in Tubiacanga (RJ). Females of both populations were randomly selected to receive blood infected with 2x10-8 particules of DENV-2 or blood culture supernatant from virus-free cells, constituting the control group. After oral infection, the visually engorged females were separated individually in plastic tubes. We have monitored, over five weeks, aspects of their biology and vectorial capacity, such as survival, fecundity and five parameters of their feeding behavior: start time, the time spent in locating the host (anesthetized mice); the number of probes, how many times the female inserts and takes off her proboscis; probing time, that ends when we notice the abdomen inflation; ingestion time, that goes until the total repletion and proboscis withdrawal from the mouse’s body; total feeding time, the sum of start, probing and ingestion times. Using a failure-time analysis, we were able to observe that infection with DENV-2 did not change the feeding habits of Ae. aegypti. Moreover, the survival and fecundity were lower when the female was infected with DENV-2. Using an ANOVA, we observed the influence of infection on longevity (F = 20.75, df = 1, P = 0.0001). The survivorship of infected females showed a significantly more intense mortality than that of their non-infected counterparts (χ2 = 16.5, df = 1, P <0.001). Regarding fecundity, infected females had a low oviposition success, i.e., they were less likely to lay eggs (χ2 = 14.40, df = 3, p = 0.0024). Moreover, the postures of infected females had significantly lower numbers of eggs than the ones from their uninfected peers.