Dietas hiperlipídicas e a esteatose hepática são condições extremamente prevalentes. Trabalhos anteriores mostraram que a esteatose está associada a um aumento na geração de espécies reativas de oxigênio (ERO), e que isso pode mediar danos no fígado. Neste trabalho nós investigamos os possíveis mecanismos que desencadeiam os aumentos nas taxas de geração de ERO por meio da administração de dietas hiperlipídicas. Nós descobrimos que mitocôndrias de animais sujeitos a dietas hiperlipídicas não apresentaram diferenças significativas quanto a capacidade respiratória máxima e acoplamento, mas eram capazes de gerar mais ERO especificamente quando usados substratos do metabolismo de ácidos graxos. Além disso, foi observado que muitas isoformas de acil-CoA desidrogenases estavam mais expressas nos fígados de animais alimentados pela dieta hiperlipídica. No entanto, quando realizados ensaios de atividade enzimática apenas a acil CoA desidrogenase de cadeia longa (VLCAD) foi mais ativa. Estudos conduzidos com mitocôndrias permeabilizadas e expostas a grupos acil-CoA de diferentes tamanhos sugerem que a VLCAD pode ser uma fonte da produção aumentada de ERO em animais submetidos a dietas hiperlipídicas. Esta produção foi estimulada pela ausência de NAD+. Concluindo, nossos estudos descobriram uma nova fonte importante na geração de ERO estimulada por dietas hiperlipídicas, a VLCAD / High fat diets and accompanying hepatic steatosis are highly prevalent conditions. Previous work has shown that steatosis occurs concomitantly with enhanced reactive oxygen species (ROS) generation, which may mediate further liver damage. Here we investigated mechanisms leading to enhanced ROS generation following high fat diets (HFD). We found that mitochondria from HFD livers present no differences in maximal respiratory rates and coupling, but generate more ROS specifically when fatty acids are used as substrates. Indeed, many acyl-CoA dehydrogenase isoforms were found to be more highly expressed in HFD livers, although only the very long chain acyl-CoA dehydrogenase (VLCAD) was more functionally active. Studies conducted with permeabilized mitochondria and different chain length acyl-CoA derivatives suggest that VLCAD is a source of enhanced ROS production in mitochondria from HFD animals. This production is stimulated by the lack of NAD+. Overall, our studies uncover VLCAD as a novel, diet-sensitive, source of mitochondrial ROS

O aumento da obesidade infantil tem sido correlacionado com a prevalência da puberdade precoce. Em animais pré-puberes verifica-se que a administração da dieta hiperlipídica induz a antecipação da puberdade. Estudos sugerem que a leptina pode influenciar o eixo reprodutivo por meio de sua ação em neurônios que expressam kisspeptina, no hipotálamo. Uma subpopulação de neurônios kisspeptidérgicos do núcleo arqueado coexpressa a dinorfina e neuroquinina B, que exercem uma ação autorreguladora sobre a secreção de kisspeptina. Considerando que a leptina, a kisspeptina, neuroquinina B e dinorfina são apontados como reguladores do início da puberdade e da função reprodutiva, este trabalho investigou como a dieta hiperlípidica (HFD) pode influenciar esses moduladores ao longo do início do desenvolvimento puberal e após a maturação sexual. Camundongos fêmeas Kiss1-hrGFP foram tratadas com a HFD ou dieta controle a partir do desmame e foram decapitadas aos 28, 32 e 63 dias (Diestro II) e o sangue coletado para dosagem plasmática de leptina, LH e estradiol. Um segundo grupo de fêmeas, tratadas com HFD ou dieta controle, receberam com 32 e 63 dias (Diestro I) uma injeção intraperitoneal de leptina (0,5 mg/kg) ou de veículo, 45 minutos após a injeção foram anestesiadas e submetidas à perfusão cerebral. Cortes hipotalâmicos foram utilizados para realização da técnica de imunoistoquímica para dupla marcação: Kiss1-p-STAT3/ p-STAT3-CART/ Kiss1-Dyn e Kiss1-NKB. Verificamos que a HFD administrada após o desmame, quando comparada à dieta controle, antecipou a abertura vaginal, o primeiro estro e o ínicio da ciclicidade em fêmeas Kiss1-hrGFP. Como indicativo de ativação do eixo reprodutivo neste grupo, foi observado aumento do peso do útero e ovário, aos 32 dias. Esses efeitos estiveram associados com: a) o aumento da concentração plasmática de leptina; b) aumento da ativação de p-STAT3 no núcleo arqueado (ARC) e c) aumento de p-STAT3 em neurônios Kiss1-hrGFP e em neurônios CART do ARC em resposta ao estímulo da leptina. A HFD não afetou a colocalização entre Kiss1-Dyn e Kiss1-NKB em fêmeas no início do desenvolvimento puberal. Em fêmeas Kiss1-hrGFP (63 dias) a administração da HFD por 6 semanas não alterou a regularidade do ciclo estral, houve elevação da leptina plasmática associada com diminuição da expressão da p-STAT3 no ARC em resposta ao estímulo com leptina, sem alterar a responsividade dos neurônios Kiss1-hrGFP a este hormônio. Em conclusão, 9 os resultados demonstram que a antecipação da puberdade induzida pela HFD está associada com o aumento da ação central da leptina, que ao estimular o sistema kisspeptidérgico, direta ou indiretamente, por meio de neurônios CART, pode aumentar o tônus excitatório sobre o eixo reprodutivo. A administração da HFD após o desmame (6 semanas) promoveu uma redução à resposta da leptina no ARC na vida adulta, porém não afetou a responsividade dos neurônios Kiss1-hrGFP a este hormônio e nem a regularidade do ciclo estral nas fêmeas Kiss1-hrGFP. Em conjunto, esses resultados indicam que as ações da leptina nesses neurônios foram preservadas, mesmo com a resistência parcial de suas ações no ARC. Estudos adicionais deverão ser realizados para se avaliar os efeitos a longo prazo da HFD sobre o eixo reprodutivo. / The increase of childhood obesity has been correlated with the early onset of puberty. In prepubertal animals it appears high fat diet (HFD) induces anticipation of puberty. Several studies have indicated that the effect of leptin on reproductive axis can be mediated by its action on Kiss1 neurons in the hypothalamus.A subpopulation of Kiss1 neurons in the arcuate nucleus also shows co-expression of neurokinin B and dynorphin A,presenting a self-regulatory action kisspeptin secretion. Since leptin, kisspeptin, neurokinin B and dynorphin are identified as regulators of puberty onset and reproductive function, this study investigated the influence of high fat diet on these modulators along puberty onset and after sexual maturation. A group of Kiss1-hrGFP-female mice received the HFD or regular chow after weaning. The Kiss1-hrGFP females were decapitated at 28, 32 and 63 days old (Diestrus II) and blood was collected for measurement of plasma leptin, LH and estradiol. A second group of females, treated with HFD or chow after weaning, received at 32 and 63 days old (Diestrus I) an intraperitoneal injection of leptin (0.5 mg / kg) or vehicle, and 45 minutes after they were anesthetized and subjected to cerebral perfusion. Immunohistochemistry was performed for double labeling: Kiss1-p-STAT3/ p-STAT3-CART/ Kiss1-Dyn and Kiss1-NKB in the hypothalamus. It was found that, compared to controls; the HFD anticipated the vaginal opening, the first estrus and the beginning of cyclicity in Kiss1-hrGFP females. An increase in the uterine weight and ovaries, confirmed the activation of reproductive axis in the HFD group at 32 days old. These effects were associated with: a) an increase in plasma leptin concentration; b) the activation of p-STAT3 in the arcuate nucleus (ARC) and c) the increase of p-STAT3 in Kiss1-hrGFP neurons and in CART neurons of the ARC in response to the stimulus of leptin. HFD didnt affect colocalization between Kiss1-Dyn and Kiss1-NKB in females mice at hte pubertal onset . Kiss1-hrGFP female mice (63 days old), exposed to HFD for 6 weeks,exhibited regular estrous cycles, increased plasma levels of leptin associated with a decreased p-STAT3 expression in the ARC after leptin stimulation, with no changes in the responsiveness of Kiss1-hrGFP neurons to this hormone, compared to controls. In conclusion, 11 the results demonstrate that the early puberty induced by the HFD is associated with increased central leptin action, by stimulating the kisspeptidergic system, directly or indirectly, through CART neurons that can increase the excitatory tone in the reproductive axis. The administration of HFD after weaning (6 weeks) induced a decrease on the response to leptin in the ARC in adulthood, but without changes in the responsiveness of Kiss1-hrGFP neurons to this hormone and the regularity of the estrous cycle in Kiss1-hrGFP females. Taken together, these results indicate that the actions of leptin in kisspeptin neurons were preserved after 6 weeks of HFD, despite the partial resistance to this hormone in the ARC. Additional studies should be conducted to evaluate the long-term effects of HFD in the reproductive axis.

O estudo avaliou os efeitos da fototerapia na cicatrização de úlceras cutâneas e sua relação com estresse oxidativo experimental em ratos. Foram selecionados 80 ratos Wistar que foram divididos aleatoriamente em dois grupos de acordo com a dieta, controle e hiperlipídica (50% gordura) durante 45 dias. Posteriormente, foram avaliadas as concentrações séricas de glicemia, colesterol total, triglicérides, HDL e adiponectina, além da avaliação clínica e histopatológica dos fígados dos animais. Os animais normolipídicos (NL) e hiperlipídicos (HL) foram distribuídos em grupos (n=20) conforme tratamento fototerápico, a saber: aparelho desligado (sham) e ligado (laser diodo, 660 nm, 2 J, 70 J/cm&sup2, 100 mW) sendo designados NLL-, HLL-, NLL+ e HLL+ respectivamente. Duas úlceras cutâneas foram realizadas com punch 15 mm e irradiadas 3 vezes por semana durante 14 dias. As úlceras foram fotografadas e analisadas por meio do programa ImageJ e calculado os índices de cicatrização das úlceras (ICUs) no 2º, 7° e 14° dias, além da dosagem de hidroxiprolina para avaliação da colagênese e avaliação histopatológica (HE) qualitativa do processo cicatricial. Foram coletadas biópsias das lesões nos dias de seguimento para dosagens de mieloperoxidase (MPO), malondialdeído (MDA), peróxidos de hidrogênio (FOX), glutationa reduzida (GSH) para avaliar o estresse oxidativo tecidual. Os resultados mostraram que após o período de dieta, os animais hiperlipídicos apesar de não apresentarem aumento na massa corporal, apresentaram aumento da glicemia (p=0,0001), colesterol total (p=0,0002), triglicérides (p=0,0001) e diminuição nos níveis de adiponectina (p=0,003) comparado ao grupo normolipídico. Além disso, apresentaram fígados com alterações clínicas e histopatológicas compatíveis com quadro de esteatose hepática. Em relação ao estudo da cicatrização, no 14º dia o grupo hiperlipídico apresentou atraso na reepitelização das úlceras (p=0,0001), diminuição da colagênese (p=0,0001), e na análise histopatológica qualitativa do 14º dia evidenciou pequena formação de epiderme, poucos fibroblastos e colágeno desorganizado em relação aos normolipídicos. Quanto ao estresse oxidativo, no 2º dia os animais hiperlipídicos apresentaram aumento nos níveis de MPO (p=0,0001), MDA no 2º e 14º dia (p=0,0003 e p=0,0001), FOX no 2º e 14º dia (p=0,01 respectivamente) e GSH no 2º dia (p=0,009) em relação aos normolipídicos. Em relação aos grupos irradiados, no 2º dia o grupo NLL+ apresentou maiores ICUs em relação ao HLL- (p<0,05) e o HLL+ apresentou maiores ICUs em relação aos controles NLL- e HLL- (p<0,05). No 14º dia o grupo NLL+ apresentou novamente maiores ICUs em relação ao HLL- e o grupo HLL+ apresentou maiores ICUs em comparação com o HLL- e NLL+ (p<0,05). Quanto à colagênese, no 7º dia o NLL+ apresentou aumento em relação aos demais grupos (p<0,05) e no 14º dia o NLL+ continuou apresentando aumento em comparação com os outros grupos e o HLL+ apresentou aumento em relação ao HLL- (p<0,05). Em relação ao estresse oxidativo, no 2º dia o grupo NLL+ apresentou aumento de MPO em relação aos grupos NLL- e HLL+ (p<0,05). No 7º dia o grupo NLL+ apresentou diminuição nos níveis de MPO em comparação ao NLL- e o HLL+ apresentou diminuição em relação aos controles NLL- e HLL- (p<0,05). As dosagens de MDA no 2º dia mostraram que o grupo HLL+ apresentou menores índices em comparação ao HLL- e no 14º dia o NLL+ apresentou diminuição nos índices em relação ao HLL- (p<0,05). De acordo com as dosagens de FOX no 2º dia o NLL+ mostrou níveis elevados em comparação com os grupos NLL- e HLL+, e o grupo HLL+ mostrou níveis mais baixos em relação ao HLL- e NLL+ (p<0,05). Quanto as dosagens de GSH no 7º dia o grupo HLL+ apresentou níveis elevados em comparação aos demais grupos (p<0,05). Os resultados evidenciaram a influência negativa da dieta hiperlipídica nas concentrações séricas de glicemia, perfil lipídico, adiponectina e no fígado. Essas alterações metabólicas causaram ambiente de estresse oxidativo e diminuição da colagênese e atraso da reepitelização das úlceras cutâneas. Quanto à fototerapia, o grupo hiperlipídico irradiado acelerou a cicatrização de úlceras cutâneas por meio da modulação do estresse oxidativo em comparação ao grupo hiperlipídico não irradiado e aos grupos normolipídicos, sugerindo que efeitos benéficos similares podem ser encontrados em pacientes com alterações metabólicas. / The study evaluated the effects of phototherapy in the healing of skin ulcers and their relationship with oxidative stress in experimental rats. Eighty Wistar rats were divided were selected randomly into two groups according to diet, control diet and hyperlipidemic diet (50% fat) for 45 days. Subsequently, serum glucose concentrations were evaluated, cholesterol, total triglycerides, HDL and adiponectin, in addition to clinical and histopathological evaluation of liver animals. The normolipidemic (NL) and hyperlipidemic (HL) animals were divided into groups (n = 20) as phototherapy, namely laser off (sham) and laser on (laser diode, 660 nm, 2 J, 70 J/cm&sup2, 100 mW) being designated NLL-, HLL-, NLL+ and HLL+, respectively. Two skin ulcers were performed with a punch 15 mm and irradiated three times per week for 14 days. The ulcers were photographed and analyzed using the ImageJ program and calculated the rates of healing of ulcers in the 2nd, 7th and 14th days, besides the determination of hydroxyproline to evaluate collagenesis and histopathological evaluation (HE) qualitative healing process. Biopsies was collected on days of followup for determination of myeloperoxidase (MPO), malondialdehyde (MDA), hydrogen peroxide (FOX), reduced glutathione (GSH) to assess tissue oxidative stress. The results showed that after the diet period, the hyperlipidemic animals spite of not showing an increase in body mass, showed increased blood glucose levels (p = 0.0001), total cholesterol (p = 0.0002), triglycerides (p = 0.0001) and a decrease in adiponectin levels (p = 0.003) compared to normolipidemic group. Furthermore, livers presented with clinical and histopathological changes consistent with acute hepatic steatosis. Regarding the study of healing, on the 14th day hyperlipidemic group showed delay in re-epithelialization of ulcers (p = 0.0001), decreased collagenesis (p = 0.0001) , and qualitative histopathological analysis of the 14th day showed a small neo epidermis, few fibroblasts and disorganized collagen in relation to normolipidemic rats. Regarding oxidative stress, on the 2nd day the hyperlipidemic animals showed increased levels of MPO (p = 0.0001), MDA in the 2nd and 14th day (p = 0.0003 and p = 0.0001), FOX in the 2nd and 14th day (p = 0.01, respectively) and GSH on day 2 (p = 0.009) compared to normolipidemic. Regarding the irradiated groups, on the 2nd day the NLL+ group had higher WHR compared to HLL- (p < 0.05) and HLL+ WHR were higher compared to NLL- and HLL- (p < 0.05) control groups. On the 14th day the NLL + group showed higher again ICUs compared to HLL and HLL-+ group had higher ICUs compared with HLL and NLL + (p <0.05). Regarding collagenesis, on the 7th day the NLL+ showed an increase compared to the other groups (p < 0.05), on day 14 the NLL+ continued to show an increase compared with the other groups and HLL+ showed an increase compared to HLL- (p < 0.05). In relation to oxidative stress, on the 2nd day the NLL+ group showed increased MPO in relation to HLL+ and NLL- (p <0.05) groups. On the 7th day the NLL+ group showed a decrease in MPO levels in compared to the NLL-, and HLL+ showed a decrease compared to NLL+ and HLL- (p < 0.05) controls. Dosages of MDA on day 2 showed that the HLL+ group had lower rates compared the HLL- and on day 14 the NLL+ showed a decrease in rates compared to HLL- (p < 0.05). Of according to FOX dosages on the 2nd day the NLL+ showed high levels compared with HLL+ and NLL- groups and HLL+ showed lower levels compared to the HLLand NLL+ (p < 0.05). As the dosage of GSH on the 7th day the HLL+ group showed high levels compared to other groups (p < 0.05). The results showed the negative influence of high-fat diet on serum glucose, lipid profile, adiponectin and liver. Those metabolic changes caused oxidative stress, decreased collagenesis and delay in reepithelialization of cutaneous wounds. As for phototherapy, the group hyperlipidic irradiated accelerated the healing of skin ulcers by modulating oxidative stress in comparison to hyperlipidemic non-irradiated group and normolipidemic groups, suggesting that similar beneficial effects can be found in patients with metabolic disorders.

Breast cancer is a persistent public health problem. Interesting hypothesis suggests that its risk can be modulated in early life periods, a phenomenon known as fetal programming. In this context, most fetal programming studies focus on maternal influence, due to the greater interaction between mother and fetus in both fetal and lactation periods. However, recent studies show that paternal preconception diet has also a major role in the offspring\'s susceptibility to metabolic chronic non-communicable diseases. Therefore, this direct doctoral project aimed to assess whether the paternal consumption of different high fat diets during the development period of the reproductive system of male rats increased the susceptibility of female offspring to mammary carcinogenesis. In addition we sought to evaluate which mechanisms could be involved in this process. We used male rats of the Sprague-Dawley strain (n = 20/group) that consumed high fat diet with 60% of calories from lipids from lard (LB group) or corn oil (CB group), or AIN-93G control diet (CO group) for nine weeks, during development and sexual maturation periods. These rats were mated with females who consumed only commercial diet in 1:1 ratio. Their 50 days old offspring were subjected to mammary carcinogenesis model using 7,12-dimethylbenz[a]anthracene (50mg/kg). Paternal consumption of high fat diet of animal or plant source had opposite effects, with the paternal consumption of diet with high content of saturated fatty acids (LB) increasing and consumption of diet with high content of n-6 polyunsaturated fatty acids (CB) reducing the risk of breast cancer development in female offspring. These effects were due to changes in the expression of 89 miRNAs in the father\'s sperm and 23 miRNAs in the offspring\'s mammary gland, with overlapping of three miRNAs (miR-1897-5p, miR- 219-1-3p and miR-376a #) that were altered in both tissues. Additionally, female offspring of males fed diets with high content of saturated fatty acids showed less differentiation of the mammary gland, higher levels of cell proliferation, lower levels of apoptosis and altered expression of keys proteins that regulate important cellular functions, such as epithelial to mesenchymal transition. Finally, these females had also altered lipid profile of the fat pad similar to their male parent as well as epigenetic changes that may be related to the etiology of breast cancer. Thus, we conclude that the high-fat preconception paternal diet programmed the susceptibility of female offspring to mammary carcinogenesis, but this effect was dependent on the type of fatty acid consumed and the observed effects possibly results from changes in miRNA expression profile. / O câncer de mama é um persistente problema de saúde pública. Hipótese intrigante sugere que a suscetibilidade à doença pode ser modulada em períodos precoces da vida, fenômeno conhecido como programação fetal. Nesse sentido, a maior parte dos estudos de programação fetal refere-se à influência materna, dada a intensa interação existente entre mãe e feto tanto no período fetal, quanto na lactação. Entretanto, estudos recentes mostram que a dieta paterna pré-concepcional também tem um papel de grande importância na suscetibilidade da prole à uma série de doenças crônicas não-transmissíveis de origem metabólica. Portanto, o presente projeto de doutorado direto teve como objetivo avaliar se o consumo paterno de diferentes dietas hiperlipídicas, durante o período de desenvolvimento do sistema reprodutivo de ratos machos, aumentaria a suscetibilidade da prole feminina à carcinogênese mamária. Adicionalmente buscou-se avaliar quais mecanismos poderiam estar envolvidos nesse processo. Utilizaram-se ratos machos da linhagem Sprague-Dawley (n=20/grupo) que consumiram dieta hiperlipídica com 60% de calorias provenientes de lipídeos de banha (grupo LB) ou óleo de milho (grupo CB), ou dieta controle AIN-93G (grupo CO), por nove semanas, durante os períodos de desenvolvimento e maturação sexual. Esses ratos foram acasalados com fêmeas, que consumiram apenas dieta comercial, na proporção 1:1. Sua prole de 50 dias foi submetida ao modelo de carcinogênese mamária com o uso de 7,12-dimetil-benza[a]antraceno (50mg/kg). O consumo paterno de dietas hiperlipídicas de origem animal ou vegetal conferiram efeitos opostos, com o consumo de dieta com alto teor de ácidos graxos saturados (LB) aumentando e o consumo de dieta com alto teor de ácidos graxos poli-insaturados n-6 (CB) diminuindo o risco de desenvolvimento de câncer de mama na prole feminina. Esses efeitos foram associados à alteração da expressão de 89 miRNAS no espermatozoide dos pais e 23 miRNAs na glândula mamária da prole, com sobreposição de 3 miRNAs (miR-1897-5p, miR-219-1-3p e miR-376a#) que estavam alterados em ambos tecidos. Adicionalmente, a prole feminina de machos que consumiram dieta com alto teor de ácidos graxos saturados apresentou menor diferenciação da glândula mamária, maior nível de proliferação celular, menor nível de apoptose e alteração da expressão de proteínas chaves da regulação celular, como na transição epitélio-mesenquimal. Finalmente, essas fêmeas também apresentaram perfil lipídico alterado semelhante à do seu progenitor masculino, bem como modificações epigenéticas que podem estar relacionadas à etiologia do câncer de mama. Assim, concluímos que a dieta paterna hiperlipídica pré-concepcional programou a suscetibilidade da prole feminina à carcinogênese mamária, porém esse efeito é dependente do tipo de ácido graxo consumido e os efeitos observados possivelmente decorrem de alterações no perfil de expressão de miRNAs.

Made available in DSpace on 2016-04-28T14:59:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008 - Fernanda Nascimento de Godoi.pdf: 4576086 bytes, checksum: a3f0dc242c634f23a23c384810cb8ae4 (MD5) Previous issue date: 2008-02-14 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / This work aimed to evaluate intake in athletic horses fed diets with soybean oil inclusion and the effects of apparent digestibility of nutrients, digestive kinetics, faeces characters and physiologic, hematological and biochemical parameters and. In first essay, fifteen horses were used in a completely randomized design with three diets and five repetitions. Diets used were: diet without soybean oil inclusion (control); diet with inclusion of 8.5% soybean oil; diet with inclusion of 19.5% soybean oil. Trial had 34 days of duration, 30 days to adaptation of diets and four days to samples collection. Kinetics of liquid phase of digesta was estimated by LIPE? (Isolated Lignin Purified Enriched) in liquid form. The LIPE? was given only one time by oral infusion in 30th day of essay and faeces samples were collected at 2, 4, 8, 12, 16, 20, 24, 30, 36, 42, 48, 54, 60, 66, 72 and 78 hours after. Faeces characteristics were evaluate on 33th and 34th day of essay. Blood samples were taken before and at 34th day. Data were submitted to variance analysis and means compared by Student Newman-Keuls test, at 5% of significance. In secund essay, twelve horses were used in a completely randomized design with two diets and six repetitions. Diets used were: diet without soybean oil inclusion (control); diet with inclusion of 10% soybean oil. The trial had 82 days of duration, with three physical effort tests before, at 60th and at 82th day of trial. Heart frequency and body temperature were evaluation and blood samples for analyze of hematological and biochemical parameters were taken in five moments in function of physical effort tests. The first data collection, before the test, with horses at rest, and immediately after the test, and 10, 20 and 120 minutes after the physical effort tests. Data were submitted to non parametric analysis, at 5% of significance. There was a significant reduction of dry matter intake in horses fed high fat diet. Apparent digestibility of fat increased in high fat diets (P<0.05) and apparent digestibility of cellulose decrease (P>0.05) in diet with 19.5% soybean oil inclusion. Apparent digestibility of others nutrients, except crude protein, digestive kinetics and faeces characteristics were not affecting (P>0.05) in horses fed diets with soybean oil inclusion. Horses fed high fat diet increased (P<0.05) in blood level of erythrocytes, hemoglobin and triglycerides and reduction of mean corpuscular volume. Soybean oil in diets did not affect physiological, hematological and biochemical parameters along the time intake time and in function physical effort tests. High fat diets were palatable and safety without any colic or diarrheas cases. The soybean oil can used in diet for horses, reducing dry matter intake and increasing energy density of diets that is interesting to athletic horses / Objetivou-se avaliar o consumo de dietas com diferentes n?veis de inclus?o de ?leo de soja por eq?inos atletas e os efeitos na digestibilidade aparente dos nutrientes, cin?tica digestiva, caracter?sticas fecais, nos par?metros fisiol?gicos, hematol?gicos e bioqu?micos. No primeiro ensaio foram utilizados quinze eq?inos em delineamento experimental inteiramente casualizado com tr?s dietas e cinco repeti??es. As dietas utilizadas foram: dieta sem inclus?o de ?leo de soja (controle); dieta com inclus?o de 8,5% de ?leo de soja; dieta com inclus?o de 19,5% de ?leo de soja. O ensaio teve dura??o de 34 dias, sendo 30 dias de adapta??o dos eq?inos ?s dietas e quatro dias de coleta de amostras. A cin?tica da fase l?quida da digesta foi estimada pelo LIPE? (Lignina Isolada, Purificada e Enriquecida) na forma l?quida, fornecido no 30? dia de ensaio, em dose ?nica, e as amostras fecais foram coletadas nos tempos 0, 2, 4, 8, 12, 16, 20, 24, 30, 36, 42, 48, 54, 60, 66, 72 e 78 horas ap?s o fornecimento. As caracter?sticas fecais foram avaliadas no 33? e 34? dia e, as coletas das amostras sang??neas no in?cio e 34? dia do ensaio. Os resultados foram submetidos ? an?lise de vari?ncia e as m?dias comparadas pelo teste Student Newman-Keuls, com n?vel de signific?ncia de 5%. No segundo ensaio foram utilizados doze eq?inos em delineamento experimental inteiramente casualizado com duas dietas e seis repeti??es. As dietas utilizadas foram: dieta sem inclus?o de ?leo de soja (controle); dieta com inclus?o de 10% de ?leo de soja. O ensaio teve a dura??o de 82 dias, com a realiza??o de tr?s testes de esfor?o f?sico ao in?cio, 60? e 82? dia. Nesses testes foram avaliadas freq??ncia card?aca e temperatura corporal e coletadas amostras de sangue para an?lises hematol?gicas e bioqu?micas. A primeira coleta de dados ocorreu antes do teste, com os eq?inos em repouso e, imediatamente, 10, 20 e 120 minutos ap?s o t?rmino dos testes de esfor?o f?sico. Os valores m?dios dos par?metros fisiol?gicos, hematol?gicos e bioqu?micos foram submetidos ? an?lise n?o param?trica, a 5% de signific?ncia. Houve redu??o significativa no consumo de mat?ria seca das dietas com a inclus?o de ?leo de soja. O coeficiente de digestibilidade aparente do extrato et?reo aumentou (P<0,05) nas dietas hiperlipid?micas e o coeficiente de digestibilidade da celulose reduziu com a inclus?o de 19,5% de ?leo de soja. A digestibilidade dos demais nutrientes, exceto da prote?na bruta, a cin?tica da digesta no trato gastrointestinal e as caracter?sticas fecais n?o foram alteradas (P>0,05) pela inclus?o de ?leo nas dietas. Os eq?inos consumindo as dietas hiperlipid?micas apresentaram aumento (P<0,05) nos n?veis sang??neos de eritr?citos, hemoglobina e triglicer?dios e redu??o no volume corpuscular m?dio. N?o houve altera??o nos par?metros fisiol?gicos, hematol?gicos e bioqu?micos dos eq?inos alimentados com a dieta hiperlipid?mica ao longo do tempo de consumo das dietas e em fun??o dos testes de esfor?o f?sico. As dietas mostraram-se palat?veis e seguras, sem ocorr?ncia de casos de c?licas ou diarr?ias. O ?leo de soja pode ser utilizado nas dietas de eq?inos atletas visando suprir a demanda energ?tica e reduzir o consumo de mat?ria seca, desej?vel em eq?inos da modalidade esportiva Concurso Completo de Equita??o.

Introdução A obesidade está associada a um quadro de inflamação crônica e de baixa intensidade, que predispõe à resistência à ação da insulina e ao desenvolvimento do diabetes mellitus (DM) tipo 2. O aumento da concentração sanguínea de ácidos graxos não esterificados e de citocinas pró-inflamatórias eleva a expressão hepática de quinases (quinase do inibidor do fator nuclear kappa B (IKK)- e a c-jun N-terminal quinase (JNK)) que aumentam a resposta inflamatória e prejudicam a via de sinalização da insulina. A erva-mate (Ilex paraguariensis) contém compostos bioativos que apresentam a capacidade de reduzir a expressão de genes envolvidos na resposta inflamatória. Objetivo Investigar o efeito da ingestão do extrato aquoso de erva-mate (EAEM) sobre a resposta inflamatória e via de sinalização da insulina no fígado de ratos alimentados com ração hiperlipídica (HL). Métodos Ratos Wistar, machos, foram submetidos à dieta controle (CON) (n= 18) ou HL (n= 18) durante 12 semanas. Após esse período, seis animais de cada grupo foram eutanasiados, enquanto o restante dos animais foi distribuído em grupos que receberam, ou não, por gavagem, o EAEM (1 g/kg massa corporal/dia) durante quatro semanas. Após esse período, todos os animais foram eutanasiados e determinou-se as concentrações de glicose, insulina, colesterol total, HDL-colesterol, LDL-colesterol, VLDL-colesterol, triacilgliceróis (TAG), leptina, adiponectina, TNF-, IL-6, inibidor do ativador do plasminogênio-1 (PAI-1) e a MCP-1 e a atividade sérica das enzimas alanina aminotransferase (ALT) e aspartato aminotransferase (AST). Foi realizada análise histológica para verificação da infiltração de lipídios. Foi avaliada também a composição corporal dos animais. Para a análise da expressão das proteínas JNK, IKK-, AKT e IRS-1 nas suas formas totais e fosforiladas, e da proteína NF-B, na sua forma fosforilada, um grupo de animais (n = 36) foi submetido ao mesmo protocolo experimental, porém neste foi realizada a infusão de insulina previamente ao momento da eutanásia. Todos os animais foram submetidos ao teste oral de tolerância à glicose (oGTT) e ao teste de tolerância intraperitoneal à insulina (ipITT) na 1 ª, 12 ª e 16 ª semana do protocolo experimental. Resultados Após 12 semanas de protocolo experimental, os animais submetidos à ração HL apresentaram maior consumo alimentar, no entanto, isocalórico em comparação àquele dos animais do grupo CONBL (p < 0,05). O grupo HLBL teve aumento significativo do ganho de peso; do peso coxim adiposo retroperitoneal e do fígado; da glicemia de jejum; da glicemia quando submetidos ao oGTT, em todos os tempos do teste, e ao ipITT no tempo 0, 5, 30 e 40; da concentração sérica de colesterol total, LDL-colesterol, PAI-1 e PCR, em relação ao grupo CONBL (p < 0,05). Apenas 1/3 dos animais HLBL apresentaram degeneração micro e macrogoticular discreta. O consumo da dieta HL diminuiu a fosforilação da AKT em relação aos animais que consumiram a ração CON (p <0,05). No que se refere aos efeitos do EAEM, observou-se que esta intervenção não alterou o consumo alimentar, sendo que os animais submetidos à ração HL, com ou sem a administração do EAEM, ingeriram significantemente menor quantidade em relação aos seus respectivos grupos controles (p < 0,05), todavia, o consumo energético novamente mostrou-se isocalórico (p < 0,05). A administração do EAEM reverteu o quadro de ganho de peso nos grupos que consumiram a ração HL e, ainda, reduziu o percentual de lipídios da carcaça nos animais que consumiram a ração CON, em relação aos respectivos grupos sem a intervenção (p <0,05). O grupo CONEM apresentou aumento do percentual de massa magra e redução da glicemia no ipITT nos tempos após 5 e 10 minutos do início do tese, quando comparado ao seu grupo controle (p <0,05). O EAEM reduziu as concentrações séricas de colesterol total no grupo alimentado com ração HL em relação ao grupo CON (p < 0,05). O grupo HLEM apresentou menor razão da expressão da IKK- fosforilada pela total, fosforilação do NFB, bem como maior razão da expressão da AKT fosforilada pela total em relação ao grupo HL (p < 0,05). Conclusões O consumo de ração HL induziu no fígado perfil pró-inflamatório e quadro de intolerância à glicose Sendo assim, o consumo de ração HL pode ser considerado um fator relevante na etiologia da obesidade e no desenvolvimento das doenças crônicas não-transmissíveis (DCNT), em especial, do DM tipo 2. A intervenção com o EAEM modulou a resposta inflamatória e diminuiu a intolerância à glicose hepática Todos esse fatores, em conjunto, indicam que a erva-mate possa ter um efeito positivo na redução do risco e tratamento das DCNT. / Introduction Obesity is associated with a chronic low-grade inflammation that predisposes to insulin resistance and to the development of type 2 diabetes. The augmentation of plasmatic nonesterified fatty acids and proinflammatory cytokines increases the hepatic expression of some kinases (inhibitor of kappa B kinase (IKK-) and c-jun N-terminal kinase (JNK)) that increases the inflammatory response and impairs the insulin signaling. Yerba mate (Ilex paraguariensis) contains bioactive compounds, which have the ability to reduce the expression of genes involved in inflammatory response. Objective This aim of this project was to investigate the effect of yerba mate aqueous extract (YMAE) intake on the inflammatory response and insulin signaling regulation in the liver of Wistar rats submitted to adjusted high-fat diet (HFD). Methods Male Wistar rats were fed with a control diet (n=18) or a HFD (n=18) for 12 weeks. After this, six animals of each group were euthanized and the rest of the animals were distributed in groups that received, or not, by gavage, YMAE (1g/kg body weight/day) for four weeks. Then, all the animals were euthanized and was determined the glucose, insulin, total cholesterol, HDL-cholesterol, LDL-cholesterol, VLDL-cholesterol, triacylglycerol (TAG), leptin, adiponectin, TNF-, IL-6, C-reactive protein (CPR), plasminogen activator inhibitor (PAI)-1 and MCP-1 concentration, and the alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) plasma activity. Histological analysis was performed for the evaluation of lipid infiltration. The body composition of the animal was also evaluated. To expression evaluation of the JNK, IKK-, NF-B, IRS-1 and AKT, a group of animals (n = 36) underwent the same experimental protocol, however, insulin infusion were done previously to moment of euthanasia. All animal were submitted to the oral glucose tolerance test (oGTT) and the intraperitoneal insulin tolerance test (ipITT) in the first, twelfth and sixteenth weeks of the experimental protocol. Results After 12 weeks of experimental protocol, HLBL group had higher feed intake, however, isocaloric intake when compared to the CONBL group (p < 0,05). The HLBL group had a significant increase of weight gain; retroperitoneal adipose deposit and liver weight; fasting glycaemia; glycaemia when submitted to oGTT in all times of the test and upon ipITT at time 0, 5, 30 and 40; serum total cholesterol, LDLcholesterol; PAI-1 and CRP in relation to CONBL (p < 0.05). Only one third of the HLBL animals presented micro and macrogoticular discrete degeneration. The consumption of HFD decreased the hepatic AKT phosphorylation compared to animals fed with the CON diet (p < 0,05). As regards to the YMAE effects, it was observed that this intervention did not alters food consumption, because the animals submitted to the HFD, with or without YMAE administration, ingested significantly lower quantity in relation to their respective control groups (p < 0.05). However, energy consumption again proved to be isocaloric (p < 0.05). The administration of YMAE reversed the weight gain in the groups fed with HFD and also reduced the percentage of carcass fat in the animals fed with the CON diet in relation to the respective groups without intervention (p < 0.05). The CONEM group presented an increased percentage of lean mass and reduction in blood glucose concentration in the ipITT after 5 and 10 minutes from the beginning of the test when compared to the control group (p < 0.05). The YMAE reduced serum total cholesterol concentration in the group fed with the HFD compared to CON group (p < 0,05). The HLEM group presented lowest ratio of expression of phosphorylated by total IKK-, NFB phosphorylation, as well as the major ratio of the expression of phosphorylated by total AKT than HFD group (p < 0,05). Conclusions HFD intake induced liver proinflammatory profile and glucose intolerance. Thus, HFD intake can be considered a relevant factor in the etiology of obesity and the development of chronic non-comunicable diseases, in particular, the type 2 diabetes. The intervention with YMAE modulates the inflammatory response and decreased glucose intolerance. All these factors together indicate that yerba mate may have a positive effect on risk reduction and treatment of chronic diseases.

Introdução A obesidade está associada a um quadro de inflamação crônica e de baixa intensidade, que predispõe à resistência à ação da insulina e ao desenvolvimento do diabetes mellitus (DM) tipo 2. O aumento da concentração sanguínea de ácidos graxos não esterificados e de citocinas pró-inflamatórias eleva a expressão hepática de quinases (quinase do inibidor do fator nuclear kappa B (IKK)- e a c-jun N-terminal quinase (JNK)) que aumentam a resposta inflamatória e prejudicam a via de sinalização da insulina. A erva-mate (Ilex paraguariensis) contém compostos bioativos que apresentam a capacidade de reduzir a expressão de genes envolvidos na resposta inflamatória. Objetivo Investigar o efeito da ingestão do extrato aquoso de erva-mate (EAEM) sobre a resposta inflamatória e via de sinalização da insulina no fígado de ratos alimentados com ração hiperlipídica (HL). Métodos Ratos Wistar, machos, foram submetidos à dieta controle (CON) (n= 18) ou HL (n= 18) durante 12 semanas. Após esse período, seis animais de cada grupo foram eutanasiados, enquanto o restante dos animais foi distribuído em grupos que receberam, ou não, por gavagem, o EAEM (1 g/kg massa corporal/dia) durante quatro semanas. Após esse período, todos os animais foram eutanasiados e determinou-se as concentrações de glicose, insulina, colesterol total, HDL-colesterol, LDL-colesterol, VLDL-colesterol, triacilgliceróis (TAG), leptina, adiponectina, TNF-, IL-6, inibidor do ativador do plasminogênio-1 (PAI-1) e a MCP-1 e a atividade sérica das enzimas alanina aminotransferase (ALT) e aspartato aminotransferase (AST). Foi realizada análise histológica para verificação da infiltração de lipídios. Foi avaliada também a composição corporal dos animais. Para a análise da expressão das proteínas JNK, IKK-, AKT e IRS-1 nas suas formas totais e fosforiladas, e da proteína NF-B, na sua forma fosforilada, um grupo de animais (n = 36) foi submetido ao mesmo protocolo experimental, porém neste foi realizada a infusão de insulina previamente ao momento da eutanásia. Todos os animais foram submetidos ao teste oral de tolerância à glicose (oGTT) e ao teste de tolerância intraperitoneal à insulina (ipITT) na 1 ª, 12 ª e 16 ª semana do protocolo experimental. Resultados Após 12 semanas de protocolo experimental, os animais submetidos à ração HL apresentaram maior consumo alimentar, no entanto, isocalórico em comparação àquele dos animais do grupo CONBL (p < 0,05). O grupo HLBL teve aumento significativo do ganho de peso; do peso coxim adiposo retroperitoneal e do fígado; da glicemia de jejum; da glicemia quando submetidos ao oGTT, em todos os tempos do teste, e ao ipITT no tempo 0, 5, 30 e 40; da concentração sérica de colesterol total, LDL-colesterol, PAI-1 e PCR, em relação ao grupo CONBL (p < 0,05). Apenas 1/3 dos animais HLBL apresentaram degeneração micro e macrogoticular discreta. O consumo da dieta HL diminuiu a fosforilação da AKT em relação aos animais que consumiram a ração CON (p <0,05). No que se refere aos efeitos do EAEM, observou-se que esta intervenção não alterou o consumo alimentar, sendo que os animais submetidos à ração HL, com ou sem a administração do EAEM, ingeriram significantemente menor quantidade em relação aos seus respectivos grupos controles (p < 0,05), todavia, o consumo energético novamente mostrou-se isocalórico (p < 0,05). A administração do EAEM reverteu o quadro de ganho de peso nos grupos que consumiram a ração HL e, ainda, reduziu o percentual de lipídios da carcaça nos animais que consumiram a ração CON, em relação aos respectivos grupos sem a intervenção (p <0,05). O grupo CONEM apresentou aumento do percentual de massa magra e redução da glicemia no ipITT nos tempos após 5 e 10 minutos do início do tese, quando comparado ao seu grupo controle (p <0,05). O EAEM reduziu as concentrações séricas de colesterol total no grupo alimentado com ração HL em relação ao grupo CON (p < 0,05). O grupo HLEM apresentou menor razão da expressão da IKK- fosforilada pela total, fosforilação do NFB, bem como maior razão da expressão da AKT fosforilada pela total em relação ao grupo HL (p < 0,05). Conclusões O consumo de ração HL induziu no fígado perfil pró-inflamatório e quadro de intolerância à glicose Sendo assim, o consumo de ração HL pode ser considerado um fator relevante na etiologia da obesidade e no desenvolvimento das doenças crônicas não-transmissíveis (DCNT), em especial, do DM tipo 2. A intervenção com o EAEM modulou a resposta inflamatória e diminuiu a intolerância à glicose hepática Todos esse fatores, em conjunto, indicam que a erva-mate possa ter um efeito positivo na redução do risco e tratamento das DCNT. / Introduction Obesity is associated with a chronic low-grade inflammation that predisposes to insulin resistance and to the development of type 2 diabetes. The augmentation of plasmatic nonesterified fatty acids and proinflammatory cytokines increases the hepatic expression of some kinases (inhibitor of kappa B kinase (IKK-) and c-jun N-terminal kinase (JNK)) that increases the inflammatory response and impairs the insulin signaling. Yerba mate (Ilex paraguariensis) contains bioactive compounds, which have the ability to reduce the expression of genes involved in inflammatory response. Objective This aim of this project was to investigate the effect of yerba mate aqueous extract (YMAE) intake on the inflammatory response and insulin signaling regulation in the liver of Wistar rats submitted to adjusted high-fat diet (HFD). Methods Male Wistar rats were fed with a control diet (n=18) or a HFD (n=18) for 12 weeks. After this, six animals of each group were euthanized and the rest of the animals were distributed in groups that received, or not, by gavage, YMAE (1g/kg body weight/day) for four weeks. Then, all the animals were euthanized and was determined the glucose, insulin, total cholesterol, HDL-cholesterol, LDL-cholesterol, VLDL-cholesterol, triacylglycerol (TAG), leptin, adiponectin, TNF-, IL-6, C-reactive protein (CPR), plasminogen activator inhibitor (PAI)-1 and MCP-1 concentration, and the alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) plasma activity. Histological analysis was performed for the evaluation of lipid infiltration. The body composition of the animal was also evaluated. To expression evaluation of the JNK, IKK-, NF-B, IRS-1 and AKT, a group of animals (n = 36) underwent the same experimental protocol, however, insulin infusion were done previously to moment of euthanasia. All animal were submitted to the oral glucose tolerance test (oGTT) and the intraperitoneal insulin tolerance test (ipITT) in the first, twelfth and sixteenth weeks of the experimental protocol. Results After 12 weeks of experimental protocol, HLBL group had higher feed intake, however, isocaloric intake when compared to the CONBL group (p < 0,05). The HLBL group had a significant increase of weight gain; retroperitoneal adipose deposit and liver weight; fasting glycaemia; glycaemia when submitted to oGTT in all times of the test and upon ipITT at time 0, 5, 30 and 40; serum total cholesterol, LDLcholesterol; PAI-1 and CRP in relation to CONBL (p < 0.05). Only one third of the HLBL animals presented micro and macrogoticular discrete degeneration. The consumption of HFD decreased the hepatic AKT phosphorylation compared to animals fed with the CON diet (p < 0,05). As regards to the YMAE effects, it was observed that this intervention did not alters food consumption, because the animals submitted to the HFD, with or without YMAE administration, ingested significantly lower quantity in relation to their respective control groups (p < 0.05). However, energy consumption again proved to be isocaloric (p < 0.05). The administration of YMAE reversed the weight gain in the groups fed with HFD and also reduced the percentage of carcass fat in the animals fed with the CON diet in relation to the respective groups without intervention (p < 0.05). The CONEM group presented an increased percentage of lean mass and reduction in blood glucose concentration in the ipITT after 5 and 10 minutes from the beginning of the test when compared to the control group (p < 0.05). The YMAE reduced serum total cholesterol concentration in the group fed with the HFD compared to CON group (p < 0,05). The HLEM group presented lowest ratio of expression of phosphorylated by total IKK-, NFB phosphorylation, as well as the major ratio of the expression of phosphorylated by total AKT than HFD group (p < 0,05). Conclusions HFD intake induced liver proinflammatory profile and glucose intolerance. Thus, HFD intake can be considered a relevant factor in the etiology of obesity and the development of chronic non-comunicable diseases, in particular, the type 2 diabetes. The intervention with YMAE modulates the inflammatory response and decreased glucose intolerance. All these factors together indicate that yerba mate may have a positive effect on risk reduction and treatment of chronic diseases.

<p>Obesity is a globally increasing disease particularly in developing countries and among children. It is mainly caused by intake of diets high in fat and the lack of physical activity. Obesity is a risk factor for diseases such as type II diabetes, high blood pressure, high cholesterol and certain cancers. Prediabetes is a condition where blood glucose levels are above normal but have not&nbsp / reached those of diabetes. It is difficult to diagnose, as there are no signs or symptoms. Some type II diabetes patients bear no symptoms at all and the disease is discovered late. Proteomics is a field that can provide opportunities for early diagnosis of diseases through biomarker discovery. The early diagnosis of diabetes can assist in the prevention and treatment of diabetes. Therefore there is a need for the early diagnosis of diabetes. Twenty Wistar rats were used. The rats were initially fed a CHOW diet, which is the standard balanced diet for rats, for 4 weeks. The rats were then divided into 2 groups of 10 where 1 group was fed CHOW and another was fed a high fat (HF) diet in order to induce obesity. The two groups were fed their respective diets for 18 weeks. Rats were weighed. Rats were placed in metabolic chambers and 24 hour urine samples were collected. Ketone levels were measured by Ketostix. Urine proteins were precipitated by acetone, quantified and separated on both the 1D SDS-PAGE and the 2D SDS-PAGE. Protein expression changes between CHOW and HF fed rats were determined and identified using MALDI-TOF mass spectrometry. Protein spots intensities increased and decreased between the CHOW and HF fed rats. Transducin (beta)-like 3 was identified as the only differentially expressed protein, which might serve as a potential biomarker for prediabetes.</p>

<p>Obesity is a globally increasing disease particularly in developing countries and among children. It is mainly caused by intake of diets high in fat and the lack of physical activity. Obesity is a risk factor for diseases such as type II diabetes, high blood pressure, high cholesterol and certain cancers. Prediabetes is a condition where blood glucose levels are above normal but have not&nbsp / reached those of diabetes. It is difficult to diagnose, as there are no signs or symptoms. Some type II diabetes patients bear no symptoms at all and the disease is discovered late. Proteomics is a field that can provide opportunities for early diagnosis of diseases through biomarker discovery. The early diagnosis of diabetes can assist in the prevention and treatment of diabetes. Therefore there is a need for the early diagnosis of diabetes. Twenty Wistar rats were used. The rats were initially fed a CHOW diet, which is the standard balanced diet for rats, for 4 weeks. The rats were then divided into 2 groups of 10 where 1 group was fed CHOW and another was fed a high fat (HF) diet in order to induce obesity. The two groups were fed their respective diets for 18 weeks. Rats were weighed. Rats were placed in metabolic chambers and 24 hour urine samples were collected. Ketone levels were measured by Ketostix. Urine proteins were precipitated by acetone, quantified and separated on both the 1D SDS-PAGE and the 2D SDS-PAGE. Protein expression changes between CHOW and HF fed rats were determined and identified using MALDI-TOF mass spectrometry. Protein spots intensities increased and decreased between the CHOW and HF fed rats. Transducin (beta)-like 3 was identified as the only differentially expressed protein, which might serve as a potential biomarker for prediabetes.</p>

Background Obesity is currently one of the major causes of ill health and it is clear that overeatingis the cause of obesity. However, the actions of many endogenous factors that contribute to overeating are still not well understood. Gamma-aminobutyric acid (GABA)-ergic transmission has been shown to be of great importance for food intake regulation. The progesterone metabolite allopregnanolone is a potent positive GABAA receptor modulating steroid (GAMS) and in humans, elevated allopregnanolone levels have been suggested to be involved in increased food intake, and also with overweight and obesity. GABAA receptors that express the α2 and α3 subunits are proposed to be the main subtypes involved in food intake regulation. Therefore, the aims of the work in this thesis were to further investigate the effect of allopregnanolone on food intake, feeding behaviour, possible effects on weight gain and also to characterize a possible antagonist at α2β3γ2and α3β3γ2 GABAA receptors. Methods Allopregnanolone effects on food intake of different food items were recorded in male Wistar rats. Feeding patterns were analyzed. Food preference tests were also conducted and rats were repeatedly exposed to allopregnanolone under different feeding conditions to elucidate possible effects on body weight gain. To deeper investigate GABAA receptor subtypes suggested to be involved in food intake regulation, electrophysiological whole-cell patch-clamp recordings were performed to identify the specificity of the GAMS antagonist UC1020, at human α2β3γ2 and α3β3γ2 GABAA receptors expressed in HEK293-cells. Results Allopregnanolone increased the intake of standard chow, cookies and a high fat diet in male Wistar rats. Preferentially, allopregnanolone increased the rats´intake of the more calorie dense food type. Allopregnanolone reduced feeding latency and prolonged feeding duration. The increased chow intake induced by allopregnanolone was more pronounced at the beginning of the rats´ active period compared to the inactive. Repeated allopregnanolone administration during 5 consecutive days led to an increased body weight gain, more evident in schedule fed rats on a high fat diet. Both obesity prone and obesity resistant rats gained significantly more weight with repeated allopregnanolone exposure and the increased body weight gain correlated with increased food intake. The compound UC1020 was a potent antagonist of GAMS-enhanced GABA evoked currents at human α3β3γ2 GABAA receptors, whereas it had no effect at α2β3γ2 GABAA receptors. Conclusions Our findings indicate that allopregnanolone induced hyperphagia may be one of the endogenous factors involved in weight gain, especially when the diet is energy-rich. The compound UC1020 may prove useful for investigating the involvement of the α2 and α3 GABAA receptor subtypes in GAMS-induced hyperphagia.