Orientador: Lourenço Sbragia Neto / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-06T13:18:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bittencourt_DanielGuimaraes_D.pdf: 5225734 bytes, checksum: ea3f70896c1c0f195c224d7e3f6d2bcc (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Introdução: Gastrosquise é o defeito congênito de fechamento da parede abdominal, com herniação das alças intestinais. O contato prolongado do intestino com o líquido amniótico promove alterações inflamatórias, acarretando imaturidade e dismotilidade intestinal; além do retardo de crescimento intra-uterino. Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da administração materna de corticosteróide sobre o processo inflamatório intestinal de fetos de ratos com gastrosquise, através da análise morfológica, histológica e bioquímica. Materiais e Métodos: Utitízou-se o modelo experimental para a criação de gastrosquise em fetos de ratas Spreague-Dowley aos 18,5 dias de gestação (termo da gestação = 22 dias). Dois grupos de fetos foram estudados: com e sem administração materna de dexametasona. Cada grupo foi composto por fetos submetidos a gastrosquise e seus respectivos controles. Morfometria: Avaliou-se o peso fetal (PC), peso (PI) e comprimento intestinal (Cl). Histologia: Mediu-se o diâmetro das alças intestinais (DI), espessura da mucosa e submucosa (MU), das camadas musculares longitudinal (ML) e circular (MC) e serosa (SE). Bioquímica: Incluiu dosagens intestinais de proteína e das citocinas: interleucina (IL)-l, IL-6, IL-10, fator de necrose tumoral-alfa e interferon-gama. As diferenças entre os Grupos e subgrupos foram testadas pelo método ANOVA, com valores significativos de p<0,05. Resultados: Morfometria: Fetos com gastrosquise têm PC e Cl reduzidos e PI elevado (p<0.005). No grupo onde houve administração de dexametasona observou-se redução significativa (p<0.005) do PC e PI. Histologia: Fetos com gastrosquise apresentaram DI aumentado em ambos os grupos (P<0.0001). As quatro camadas da parede intestinal: MU, ML, MC e SE apresentaram-se mais espessas nos fetos com gastrosquise. Bioquímica: As dosagens de proteína intestinal estavam reduzidas nos fetos com gastrosquise. A administração de dexametasona elevou o conteúdo de proteína intestinal. As dosagens de citocinas intestinais não mostraram diferenças significativas entre fetos do mesmo grupo, tampouco em relação à administração de corticosteróide. Conclusões: Fetos de rato submetidos à gastrosquise experimental apresentaram PC reduzido, que foi acentuado pela administração de dexametasona. O PI elevado e Cl reduzido dos fetos com gastrosquise podem refletir o intenso processo inflamatório intestinal intra-uterino, sendo que a administração de dexametasona foi capaz de reduzir o PI. A histologia demonstrou que o aumento do PI nos fetos com gastrosquise foi relacionado ao aumento da espessura de todas as camadas da parede intestinal. As dosagens de proteína intestinal, reduzidas nos fetos com gastrosquise, podem sugerir uma baixa taxa de proliferação celular. A administração de dexametasona reduziu o déficit de proteína intestinal. Não houve um padrão distinto de ativação de citocinas intestinais para os fetos com gastrosquise / Abstract: Background: Gastroschisis is the congenital anomaly of the abdominal wall closure. The eviscerated bowel is exposed to the amniotic fluid, which leads to an intestinal inflammatory reaction. The goal in the treatment of gastroschisis is to prevent intestinal injury, as well as the motility, absorptive and infectious complications. Purpose: The author evaluated the effects of maternal corticosteroid administration on the intestines of rats submitted to fetal gastroschisis, through morphometrical, histological and biochemical analysis. Methods: A fetal gastroschisis rat model was used. Pregnant rats were submitted to surgery on day 18.5 of pregnancy (term = 22 days). Two groups were assessed: with and without maternal dexamethasone adnmristration. Each group was composed by gastroschisis, control and sham fetuses. Morphometry: Fetal body weight, intestinal weight and intestinal length were assessed. Histology: Analysis involved measures of intestinal loop diameter, total intestinal wall, mucosal and submucosal, both circular and longitudinal muscles layers and serosal thickness. Biochemics: The intestinal cytokine profile: EL-1, IL-6, IL-10, tumor necrosis factor, gamma- interferon and protein content were assessed. Differences between groups and subgroups were tested by the ANOVA method with a significant p value <0.05. Results: Dexamethasone promoted a decrease in all the morphometric data, except in the intestinal length. There was a decreased intestinal protein content in gastroschisis fetuses. Dexamethasone increased the intestinal protein content in gastroschisis, control and sham fetuses. In both groups, all histological parameters were increased in gastroschisis fetuses (p<0.0001). It could not be identified a particular profile of cytokine for gastroschisis fetuses. Conclusions: Rat fetuses submitted to experimental gastroschisis had decreased body weight and increased intestinal weight. Histological analysis demonstrated that the increased intestinal weight was related to an increased thickness of all intestinal wall layers in gastroschisis fetuses. Dexamethasone triggered a substantial decrease in intestinal weight, and increased the intestinal protein content in gastroschisis fetuses. It may be useful in managing the intestinal damage in gastroschisis / Doutorado / Cirurgia / Doutor em Cirurgia

Introdução: A incidência de defeitos do tubo neural é de cerca de 1/1000 nascimentos. Na mielomenngocele, o tratamento intra-uterino utilizando a técnica neurocirúrgica clássica, apresenta melhor prognóstico neurológico, do que o tratamento pós natal, mas está associado a complicações maternas e fetais. Novas técnicas de correção estão sendo estudadas para diminuir a morbidade materna e fetal. Objetivo: Comparar os efeitos sobre a medula de duas técnicas cirúrgicas de correção intra-uterina de um defeito semelhante à mielomeningocele , em fetos de ovelha. Métodos: Em 15 fetos foi criado um defeito semelhante à mielomeningocele (laminectomia e excisão de dura-máter) no 90° dia de gestação. O tipo de correção foi randomizado. No grupo 1, o defeito foi corrigido usando a técnica neurocirúrgica clássica, com a sutura de três camadas (dura-máter, músculo e pele), realizada por um neurocirurgião. No grupo 2, um especialista em Medicina Fetal, utilizou uma técnica simplificada, colocando um fragmento de celulose Biosintética sobre a medula e suturando apenas a pele sobre a celulose. Próximo ao termo da gestação (132° dias), os fetos foram sacrificados para análise anatomopatológica. Resultados: Ocorreram 1 morte materna, 3 casos de trabalho de parto precoce e 4 tardios. Um total de 10 casos foram viáveis para avaliação anatomopatológica 10 casos, 6 no grupo 1 e 4 no grupo 2. No grupo 1, todos os casos mostraram aderência da medula à cicatriz (meningoadesão) e perda da arquitetura medular por destruição do funículo posterior e 5 de 6 casos apresentaram perda da visualização da substância cinzenta. No grupo 2, observamos em todos os casos, a formação de uma neoduramater, separando o tecido nervoso do músculo adjacente, sendo que o funículo posterior e a substância cinzenta estavam preservados. Conclusão: A técnica simplificada foi superior à técnica neurocirúrgica, com maior preservação da medula e evitando as aderências do tecido nervoso. Nossos achados sugerem que a técnica utilizada atualmente na correção de mielomeningocele em fetos humanos deva ser reavaliada / Introduction: The incidence of neural tube defects is about 1/1000 births. In myelomeninocele, the intrauterine treatment with the classical neurosurgical technique suggest better neurological prognosis for the fetus, than postnatal treatment, but it is associated with maternal and fetal complications. New correction techniques are being studied to decrease maternal and fetal morbidity. Objective: To compare the effects on the medulla of two surgical techniques for intrauterine correction of myelomeningocele-like defect in sheep. Methods: In 15 pregnant sheep a myelomeningocele -like defect (laminectomy and dural excision) was created in the lumbar region in 90o day gestation. The type of correction was randomized. In group 1 the defect was corrected using the classic neurosurgical technique of three layers suture (dura-mater, muscle and skin closure) performed by a neurosurgeon. In group 2, a fetal medicine specialist used a biosynthetic cellulose patch to protect the medulla and only the skin was sutured above it. Near term (132o day gestation) fetuses were sacrificed for pathological analysis. Results: One maternal death occurred, early preterm labour, and late preterm labour occurred in 3 and 4 cases, respectively. A total of 10 cases were available for pathological analysis, 6 in group 1 and 4 in group 2. In group 1, all the cases showed a adherence of the medulla to the scar (meningoneural adhesion) and a destruction of the normal architecture of nervous tissue, whithout view of posterior funiculus and in 5 of 6 cases without view of grey matter. In group 2, in all the cases were observed a formation of an organized tissue involving the cellulose patch, a neoduramater, separating the nervous tissue of adjacent muscle, preserving the posterior funicullus and grey matter. Conclusion: The simplified new technique was better than the classical neurosurgical technique. It preserved the nervous tissued and avoided the adherence of the medulla to the scar. This suggests the current technique used for the correction of spina bifida in humans may need to be reassessed

Introdução: A incidência de defeitos do tubo neural é de cerca de 1/1000 nascimentos. Na mielomenngocele, o tratamento intra-uterino utilizando a técnica neurocirúrgica clássica, apresenta melhor prognóstico neurológico, do que o tratamento pós natal, mas está associado a complicações maternas e fetais. Novas técnicas de correção estão sendo estudadas para diminuir a morbidade materna e fetal. Objetivo: Comparar os efeitos sobre a medula de duas técnicas cirúrgicas de correção intra-uterina de um defeito semelhante à mielomeningocele , em fetos de ovelha. Métodos: Em 15 fetos foi criado um defeito semelhante à mielomeningocele (laminectomia e excisão de dura-máter) no 90° dia de gestação. O tipo de correção foi randomizado. No grupo 1, o defeito foi corrigido usando a técnica neurocirúrgica clássica, com a sutura de três camadas (dura-máter, músculo e pele), realizada por um neurocirurgião. No grupo 2, um especialista em Medicina Fetal, utilizou uma técnica simplificada, colocando um fragmento de celulose Biosintética sobre a medula e suturando apenas a pele sobre a celulose. Próximo ao termo da gestação (132° dias), os fetos foram sacrificados para análise anatomopatológica. Resultados: Ocorreram 1 morte materna, 3 casos de trabalho de parto precoce e 4 tardios. Um total de 10 casos foram viáveis para avaliação anatomopatológica 10 casos, 6 no grupo 1 e 4 no grupo 2. No grupo 1, todos os casos mostraram aderência da medula à cicatriz (meningoadesão) e perda da arquitetura medular por destruição do funículo posterior e 5 de 6 casos apresentaram perda da visualização da substância cinzenta. No grupo 2, observamos em todos os casos, a formação de uma neoduramater, separando o tecido nervoso do músculo adjacente, sendo que o funículo posterior e a substância cinzenta estavam preservados. Conclusão: A técnica simplificada foi superior à técnica neurocirúrgica, com maior preservação da medula e evitando as aderências do tecido nervoso. Nossos achados sugerem que a técnica utilizada atualmente na correção de mielomeningocele em fetos humanos deva ser reavaliada / Introduction: The incidence of neural tube defects is about 1/1000 births. In myelomeninocele, the intrauterine treatment with the classical neurosurgical technique suggest better neurological prognosis for the fetus, than postnatal treatment, but it is associated with maternal and fetal complications. New correction techniques are being studied to decrease maternal and fetal morbidity. Objective: To compare the effects on the medulla of two surgical techniques for intrauterine correction of myelomeningocele-like defect in sheep. Methods: In 15 pregnant sheep a myelomeningocele -like defect (laminectomy and dural excision) was created in the lumbar region in 90o day gestation. The type of correction was randomized. In group 1 the defect was corrected using the classic neurosurgical technique of three layers suture (dura-mater, muscle and skin closure) performed by a neurosurgeon. In group 2, a fetal medicine specialist used a biosynthetic cellulose patch to protect the medulla and only the skin was sutured above it. Near term (132o day gestation) fetuses were sacrificed for pathological analysis. Results: One maternal death occurred, early preterm labour, and late preterm labour occurred in 3 and 4 cases, respectively. A total of 10 cases were available for pathological analysis, 6 in group 1 and 4 in group 2. In group 1, all the cases showed a adherence of the medulla to the scar (meningoneural adhesion) and a destruction of the normal architecture of nervous tissue, whithout view of posterior funiculus and in 5 of 6 cases without view of grey matter. In group 2, in all the cases were observed a formation of an organized tissue involving the cellulose patch, a neoduramater, separating the nervous tissue of adjacent muscle, preserving the posterior funicullus and grey matter. Conclusion: The simplified new technique was better than the classical neurosurgical technique. It preserved the nervous tissued and avoided the adherence of the medulla to the scar. This suggests the current technique used for the correction of spina bifida in humans may need to be reassessed

Orientador: Lourenço Sbragia Neto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-12T14:56:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Goncalves_FrancesLilianLanhellas_M.pdf: 3789177 bytes, checksum: e9b1048e4d4f077e540d297c2a998419 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Gastrosquise é um defeito congênito da parede abdominal anterior no qual as alças intestinais ficam herniadas e em contato com o líquido amniótico (LA). Assim, a exposição ao LA resulta em várias disfunções intestinais pós-natal. Para reduzir o tempo de exposição ao LA em modelo animal, usou-se um hidrogel de N-isopropilacrilamida (NIPAAm) copolimerizado com ácido acrílico (Aac), que rapidamente intumesce na presença de LA. O hidrogel foi usado para cobrir as alças expostas até o fim da gestação. A gastrosquise foi induzida em fetos de ratas fêmeas da raça Sprague-Dawley através de um corte paramediano à direita do cordão umbilical para exposição parcial das alças com 18,5 dias de gestação. Os fetos foram separados em quatro grupos: controle (C), apenas gastrosquise (G), gastrosquise + cobertura das alças com adesivo de fibrina - Beriplast® (GA) e gastrosquise + cobertura das alças com adesivo de fibrina e aderido um pedaço de hidrogel seco (GAH). Os animais foram colhidos por cesárea com 21,5 dias de gravidez e o hidrogel foi cuidadosamente removido. Os fetos e as alças intestinais foram pesados e análise morfométrica foi realizada. Resultados mostraram que o hidrogel após intumescimento pesou 34X que seu peso seco; ele possui carga elétrica assim como a maioria das proteínas presentes no LA e sua retirada não provocou lesão à camada serosa do intestino exposto como visto na MEV. A comparação dos grupos C e GAH com os grupos G ou GA mostrou que o peso, o diâmetro, a espessura das camadas e da parede intestinais foi significativamente menor nos grupos C e GAH quando comparados aos grupos G e GA indicando processo inflamatório. Sendo assim, a aplicação do hidrogel aderido pelo adesivo de fibrina mostrou servir como uma efetiva proteção das alças herniadas, com uma redução significante da inflamação na gastrosquise. / Abstract: Gastroschisis is a congenital defect of the anterior abdominal wall which leads the fetal bowel to herniate into the amniotic cavity. There, exposition to amniotic fluid (AF), results in severe postnatal intestinal dysfunction. In order to reduce exposition time to AF in an animal model, has used a hydrogel of N-isopropylacrylamide (NIPAAm) copolymerized with acrylic acid (Aac), which undergoes rapid swelling in the amniotic fluid. The hydrogel was used to coat the bowel hernia until pregnance is completed. Gastroschisis was induced in the fetuses of female Sprague-Dawley rats by partial evisceration of the bowel through a right paramedian opening of the abdominal wall in day 18,5 of pregnancy. The fetuses were separated in four groups: control (C), gastroschisis alone (G), gastroschisis + coating of the bowel hernia with fibrin adhesive -Beriplast® (GA) and gastroschisis + coating of the bowel hernia with fibrin adhesive topped by a piece of adhered dry hydrogel (GAH). Animals were harvested by cesarean section at day 21.5 of pregnancy and the hydrogel was carefully removed. Fetuses and intestinal tract were weighed and morphometric analysis was performed. Results showed that the hydrogel weight was 34X heavier than its dry weight; its electric charge and also the AF charge were negative and there was no damage to serosa layer of the intestine exposed. Comparison of the C and GAH groups with G and GA showed that the bowel weight, diameter, the layers and wall thickness was significantly reduced in C and GAH compared to G and GA. Thus, application of the hydrogel bound onto the fibrin adhesive was shown to provide an effective protection of the herniated bowel, with a significant reduction of inflammation in gastroschisis. / Mestrado / Pesquisa Experimental / Mestre em Cirurgia