Orientadora: Prof. Dr. Julio Cezar Uili Coelho / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciencias da Saúde, Programa de Pós-Graduaçao em Medicina Interna. Defesa : Curitiba,13/05/1994 / Bibliografia: fls. 33-39 / Resumo: o objetivo do presente estudo é avaliar a nossa experiência com a laparoscopia associada à biópsia hepática no diagnóstico das doenças hepáticas. Este procedimento foi realizado em 211 pacientes, sendo que 84 (39,8%) eram do sexo feminino e 127 (60,2%) do sexo masculino. A idade dos pacientes variou entre 20 e 80 anos, com idade média de 50 anos. Foram consideradas as manifestações clinicas e os exames laboratoriais e de imagem como base para as hipóteses diagnósticas pré-Iaparoscópicas. A hipertensão portal foi a hipótese pré-Iaparoscópica mais freqüente (21 ,0%). A cirrose hepática foi a afecção predominante nos laudos anátomo-patológicos (21 ,8%). A cirrose hepática com hipertens o portal constituiu-se no principal diagnóstico definitivo (19,9%). Todas as laparoscopias foram real izadas sob anestesia local , tendo sido utilizado ar ambiente para a real ização do pneumoperitônio. Após a introdução de cânulatrocáter- ótica procedia-se à exploração da cavidade abdominal e, subseqüentemente, à realização da biópsia hepática sob visão direta, com agulha de Menghini, Vim Sylvermann ou Tru Cut. As complicações ocorreram em 10 pacientes (4,3%), com registro de um caso (0,47%) de óbito. A complicação mais freqüente fOI a hemorragia (2 ,84%). Conclui-se deste estudo que, a laparoscopia associada à biópsia hepática, permite o estabelecimento do diagnóstico na maioria dos pacientes com hepatopatia , com uma taxa e complicações baixa. / Abstract: The objeclive of lhe presenl sludy is lo evaluale our experience wilh laparoscopic liver biopsy in lhe diagnosis ofhepalic diseases. The procedure was performed in 211 palienls, 84 (39.8%) female and 127 (60.2%) male. The palienls'age varied from 2010 80 years, wilh an average of 50 years.The diagnoslic hypolheses eslablished before laparoscopy were based on clinicai findings, laboralory lesls and imaging exams. Portal hypertension was lhe mosl common pre-Iaparoscopic diagnoslic hypolhesis (21 'lo). Hepalic cirrhosis was lhe mosl frequenl disease observed on palhologic exams (21.8%). Hepalic cirrtlOsis associaled wilh portal hypertension was lhe mosl common final diagnosis (19,9%). Ali laparoscopies were perforrned under local aneslhesia. Room airwas employed lo oblain pneumopenloneum. After inserting lhe laparoscope and xamining lhe periloneal cavily, lhe liver biopsy was performed wilh needle of Menghini, VimSylvermann or Iru-cut. Complicalions occurred in 10 palienls (4.73%), wilh one dealh (0.47%). The mosl frequenl complicalion was hemorrhage (2 .84%). II is concluded from Ihis sludy Ihal laparoscopy wilh liver biopsy is a safe procedure and allow lo eslablish lhe diagnosis in lhe majorily oflhe palienls wilh liver disease.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-05-04Bitstream added on 2014-06-13T19:28:18Z : No. of bitstreams: 1 leme_jaca_me_rcla.pdf: 614425 bytes, checksum: bf0825069c6f13243a70965f900b9372 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Para investigar os efeitos do treinamento físico aeróbio nas concentrações de IGF-I em ratos diabéticos, ratos wistar foram distribuídos em quatro grupos: controle sedentário, controle treinado, diabético sedentário e diabético treinado. O diabetes foi induzido por aloxana (32 mg/kg) e o protocolo de treinamento consistiu de natação 1 hora/dia, 5 dias/semana, durante 8 semanas e suportando 5% do peso corporal. Durante o período experimental foram registrados semanalmente o peso, ingestão de água e comida. Na 7ª semana foram determinadas a glicemia e insulinemia em jejum para cálculo do índice Homa. Ao final deste período, os ratos foram sacrificados e o sangue foi coletado para determinação da glicose, insulina, albumina, triglicerídeos séricos e hematócrito. Amostras dos músculos gastrocnêmio e sóleo foram coletadas para determinação do glicogênio. Amostras do miocárdio foram utilizadas para determinar glicogênio e triglicerídeos e do fígado para determinar as concentrações de glicogênio, triglicerídeos, proteína, DNA e IGF-I. O diabetes aumentou a glicemia em jejum e em estado alimentado, triglicerídemia, glicogênio e triglicerídeos cardíacos além do DNA hepático. A doença ainda reduziu insulinemia em jejum e em estado alimentado, razão proteína/DNA hepática e concentrações de IGF-I no sangue e fígado. O protocolo de treinamento físico reduziu nos animais diabéticos a glicemia em jejum e em estado alimentado, trigliceridemia, glicogênio e triglicerídeos cardíaco além do DNA hepático. O treinamento, por outro lado, aumentou glicogênio muscular e recuperou a razão proteína/DNA hepático e IGF-I hepático e sérico nos animais diabéticos. Em conclusão, treinamento físico moderado melhora as condições metabólicas e endócrinas, particularmente no eixo GH-IGF, em ratos diabéticos. / To investigate the influence of aerobic physical training on IGF-I concentrations in diabetic rats, male wistar rats were allocated into four groups: sedentary control, trained control, sedentary diabetic and trained diabetic. Diabetes was induced by Alloxan (32 mg/kg b.w.) and training protocol consisted of swimming 1hour/day, 5 days/week, during 8 weeks, supporting 5% b.w. During the experimental period, rats weight, water and food ingestion were weekly colected. In the 7th week, blood was collected for glicose and insulin in fasting to Homa index determination. At the end of this period, rats were sacrificed and blood was collected for determinations of serum glucose, insulin, albumin, triglycerides, IGF-I and hematocrit. Gastrocnemius and soleus muscle samples were collected for glycogen determination. Samples of myocardium were used to determine glycogen and triglyceride contents and of liver to determine glycogen, triglyceride, protein, DNA and IGF-I concentrations. Diabetes increased fasting and fed state glycemia, triglyceridemia, cardiac glycogen and triglyceride younder hepatic DNA. The disease still reduced fasting and fed state insulinemia, hepatic ratio protein/DNA and IGF-I concentrations in blood and liver. Physical training protocol was able to reduce fasting and fed state serum glucose, triglyceridemia, cardiac glycogen and trygliceride and hepatic 92 DNA, to increase gastrocnemius muscle glycogen and to recover hepatic ratio protein/DNA and blood and hepatic IGF-I concentrations in diabetic animals. In conclusion, moderate physical training improved the metabolic and endocrine conditions, particulary in GH-IGF axis, in diabetic rats.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-04-07Bitstream added on 2014-06-13T20:51:48Z : No. of bitstreams: 1 gryninger_g_me_botfm.pdf: 272447 bytes, checksum: 5ed6892f68f886811597fca3fd900973 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O vírus da hepatite C é uma das principais causas de doença hepática no mundo inteiro. O estudo histopatológico é de grande importância no prognóstico e indicação de tratamento. A coinfecção com o vírus da hepatite B oculta pode agravar a lesão hepática e diminuir a resposta ao tratamento. As citocinas IL-2, INF, TNF- induzem lesão hepática e fibrose. A IL-10 apresenta atividade antiinflamatória e o TGF- induz o desenvolvimento e depósito de matriz extracelular causando fibrose. Este estudo avaliou, em pacientes com HCC, a presença da hepatite B oculta, a dosagem das citocinas IL-2, INF, TNF , TGF e IL-10, correlacionando com o estágio de fibrose em pacientes tratados e não tratados com interferon, comparando também com indivíduos saudáveis. Foram estudados 55 pacientes com HCC crônica, atendidos na Faculdade de Medicina de Botucatu, excluindo-se pacientes imunossuprimidos e gestantes. O grupo controle foi constituído de 20 indivíduos doadores de sangue. O vírus da hepatite B oculto foi pesquisado por de PCR in house, segundo técnica de Kaneno, com limite de detecção menor que 100 cópias/ml. A dosagem de citocinas foi determinada por método de Elisa. A avaliação da fibrose hepática seguiu aquela proposta pela Sociedade Brasileira de Patologia. Os resultados mostraram predominância do gênero masculino, adulto jovem, 36,4% foram usuários de drogas endovenosas e 41,8% haviam sido hemotransfundidos. Nenhum paciente apresentou coinfecção pelo vírus da hepatite B oculto. Na biópsia hepática predominou fibrose leve ou ausência de fibrose (47,2%). As citocinas analisadas não discriminaram o grau de fibrose nos indivíduos com HCC crônica, mesmo quando separados em pacientes que foram submetidos ao tratamento e pacientes que não receberam o tratamento. Não houve também discriminação das citocinas... / The Hepatitis C virus is one of the major causes of hepatic diseases worldwide. Histopathological analyses play a leading role in determining disease outcome and treatment. Co-infection with occult Hepatitis B can aggravate liver injury and diminish treatment response. Cytokines such as IL-2, INF and TNF- induce liver injury and fibrosis. IL-10 has an antiinflamatory action and TGF- induces extracellular matrix development and deposition causing fibrosis. In this study, the presence of occult Hepatitis B and the expression of IL-2, INF, TNF , TGF and IL-10 were assessed in HCC patients and correlated with fibrosis stage in patients treated and non-treated with interferon, as well as healthy individuals. A total of 55 patients with chronic HCC seen at Botucatu Medical School were included. Immunosuppressed or pregnant patients were excluded. The control group consisted of 20 blood donors. The occult Hepatitis B virus was detected by in-house PCR according to the technique of Kaneno with a detection limit < 100 clones/ml. Cytokine levels were determined by the Elisa method. Hepatic fibrosis was assessed as proposed by the Brazilian Society of Pathology. The results showed a predominance of male young adults of whom 36.4% had used endovenous drugs and 41.8% had been hemotransfused. No patient showed occult Hepatitis B co-infection. Hepatic biopsy revealed that fibrosis was either absent or mild in most cases (47.2%). The cytokines under study did not correlate with fibrosis stage in individuals with chronic HCC no matter whether they had or not received treatment. In addition, no correlations with cytokine levels were observed when VHC patients were separated into groups of individuals treated and non-treated with interferon . However, cytokine expressions were significantly increased in all cases in comparison with the control group.

Orientador: Jussara Marcondes Machado / Banca: Sueli Aparecida Calvi / Banca: Maria Cassia Jacintho Mendes Correa / Resumo: O vírus da hepatite C é uma das principais causas de doença hepática no mundo inteiro. O estudo histopatológico é de grande importância no prognóstico e indicação de tratamento. A coinfecção com o vírus da hepatite B oculta pode agravar a lesão hepática e diminuir a resposta ao tratamento. As citocinas IL-2, INF, TNF- induzem lesão hepática e fibrose. A IL-10 apresenta atividade antiinflamatória e o TGF- induz o desenvolvimento e depósito de matriz extracelular causando fibrose. Este estudo avaliou, em pacientes com HCC, a presença da hepatite B oculta, a dosagem das citocinas IL-2, INF, TNF , TGF e IL-10, correlacionando com o estágio de fibrose em pacientes tratados e não tratados com interferon, comparando também com indivíduos saudáveis. Foram estudados 55 pacientes com HCC crônica, atendidos na Faculdade de Medicina de Botucatu, excluindo-se pacientes imunossuprimidos e gestantes. O grupo controle foi constituído de 20 indivíduos doadores de sangue. O vírus da hepatite B oculto foi pesquisado por de PCR in house, segundo técnica de Kaneno, com limite de detecção menor que 100 cópias/ml. A dosagem de citocinas foi determinada por método de Elisa. A avaliação da fibrose hepática seguiu aquela proposta pela Sociedade Brasileira de Patologia. Os resultados mostraram predominância do gênero masculino, adulto jovem, 36,4% foram usuários de drogas endovenosas e 41,8% haviam sido hemotransfundidos. Nenhum paciente apresentou coinfecção pelo vírus da hepatite B oculto. Na biópsia hepática predominou fibrose leve ou ausência de fibrose (47,2%). As citocinas analisadas não discriminaram o grau de fibrose nos indivíduos com HCC crônica, mesmo quando separados em pacientes que foram submetidos ao tratamento e pacientes que não receberam o tratamento. Não houve também discriminação das citocinas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Hepatitis C virus is one of the major causes of hepatic diseases worldwide. Histopathological analyses play a leading role in determining disease outcome and treatment. Co-infection with occult Hepatitis B can aggravate liver injury and diminish treatment response. Cytokines such as IL-2, INF and TNF- induce liver injury and fibrosis. IL-10 has an antiinflamatory action and TGF- induces extracellular matrix development and deposition causing fibrosis. In this study, the presence of occult Hepatitis B and the expression of IL-2, INF, TNF , TGF and IL-10 were assessed in HCC patients and correlated with fibrosis stage in patients treated and non-treated with interferon, as well as healthy individuals. A total of 55 patients with chronic HCC seen at Botucatu Medical School were included. Immunosuppressed or pregnant patients were excluded. The control group consisted of 20 blood donors. The occult Hepatitis B virus was detected by in-house PCR according to the technique of Kaneno with a detection limit < 100 clones/ml. Cytokine levels were determined by the Elisa method. Hepatic fibrosis was assessed as proposed by the Brazilian Society of Pathology. The results showed a predominance of male young adults of whom 36.4% had used endovenous drugs and 41.8% had been hemotransfused. No patient showed occult Hepatitis B co-infection. Hepatic biopsy revealed that fibrosis was either absent or mild in most cases (47.2%). The cytokines under study did not correlate with fibrosis stage in individuals with chronic HCC no matter whether they had or not received treatment. In addition, no correlations with cytokine levels were observed when VHC patients were separated into groups of individuals treated and non-treated with interferon . However, cytokine expressions were significantly increased in all cases in comparison with the control group. / Mestre

Orientador: Ismael Forte Freitas Júnior / Banca: Rômulo Araújo fernandes / Banca: Dorotéia Rossi Silva Souza / Resumo: Objetivo: Avaliar o efeito do treinamento concorrente sobre fatores de risco para a doença gordurosa não alcoólica do fígado (DGNAF) em adolescentes obesos. Metodologia: A amostra foi formada por 38 indivíduos com idade entre 12 e 15 anos. Inicialmente, classificados como obesos pelo Índice de Massa Corporal (IMC) e, posteriormente submetidos à exames bioquímicos de sangue, ultrassonografia e avaliação da composição corporal. Todas as avaliações foram realizadas antes e ao final do estudo. Os sujeitos do estudo sofreram intervenção durante 20 semanas. A Intervenção consistiu de treinamento concorrente com frequência semanal de três vezes, uma hora/dia. A análise estatística foi realizada por meio do software SPSS, versão 17.0, com significância estatística fixada em 5%. Resultados: Após a intervenção, foram observadas melhoras significantes no IMC, percentual de gordura corporal (%GC), massa gorda (MG)(kg), massa livre de gordura (MLG), Percentual de gordura de tronco (%GTronco), triglicérides (TG), colesterol total (COL), LDL-colesterol (LDL), lobo direito e esquerdo do fígado, insulinêmia... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Nonalcoholic Fatty Liver Disease (NAFLD), in obese adolescents. Methodology: The sample was composed by 38 individuals aged 12 to 15 years. Initially the obesity was classified according Body Mass index and, subsequently, blood biochemical tests, ultrasonography and measurement of body composition were assessed. All evaluations were performed before and at in the final of the intervention. They were submitted to an intervention during 20 weeks, that consisted of concurrent training, three times per week, one hour/day. Statistical analysis was performed using the SPSS software, version 17.0, with statistical significance set at 5%. Results: The BMI,% BF, MG (kg), FFM, BFtrunk%, triglycerides, total cholesterol... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Os conhecimentos atuais têm mostrado que a Esteato-Hepatite não alcoólica (EHNA), é a mais importante forma epidemiológica e clínica da Doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA). Até o momento não existe terapia comprovada e conclusiva para o tratamento da EHNA. As estatinas são uma importante classe de agentes para tratar dislipidemia, mas ainda há relutância de usar esse medicamento em pacientes com doenças crônicas estabelecidas ou suspeita de doença hepática, EHNA inclusive. Objetivo: Avaliar o efeito da sinvastatina (SIM) sobre o tecido hepático em camundongos C57BL6 com EHNA, induzida por dieta MCD, na tentativa de elucidar a ação desse fármaco sobre as complicações desse modelo experimental. Métodos: Foram utilizados camundongos machos C57BL/6 com 8 semanas. Os animais foram divididos em 4 grupos (n=13): CO+V (I – ração controle + veículo de carboximetilcelulose), SIM 4 (II- ração controle + 4mg/Kg de SIM), EHNA+V (III- dieta MCD mais veículo), EHNA+SIM 4 (IV- dieta MCD mais sinvastatina). As dietas foram administradas por 4 semanas e a SIM (na dose de 200 μL, intragastricamente) durante as 2 últimas semanas. Foram realizadas análises séricas de aspartato aminotransferase (AST), alanina aminotransferase (ALT), colesterol e triglicerídeos, teste anatomopatológico, avaliação do dano ao DNA através do ensaio cometa, avaliação da lipoperoxidação (substâncias que reagem ao ácido tiobarbitúrico- TBARS) e da atividade das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (SOD) e glutationa peroxidase (GPx), bem como os parâmetros moleculares de estresse oxidativo e reticular, dano celular, inflamação, disfunção endotelial e fibrose através da expressão proteica de NQO1, KEAP1, Nrf2, ATF6, GRP78, TGF- β , eNOS, iNOS, IL-12, HSF1 e HSP70 respectivamente, por Western blotting, avaliando o efeito da SIM. Resultados: Após o tratamento com sinvastatina observou-se melhora na integridade hepática e diminuição nos lipídios hepáticos. No teste anatomopatológico todos os animais doentes apresentam inflamação, esteatose microvacuolar e macrovacuolar além de balonização hepatocelular e a sinvastatina foi capaz de reduzir significativamente esta alteração. Quanto ao dano ao DNA, o ensaio cometa revelou que a dose de 4mg/Kg de sinvastatina não foi capaz de induzir dano ao DNA. Constatou-se também uma redução do dano oxidativo e às enzimas antioxidantes mantiveram seus valores semelhantes aos controles. A SIM ativou enzimas antioxidantes via Nrf2 e inibiu o estresse do retículo endoplasmático além de reduzir a fibrose, melhorar a função endotelial, diminuir a inflamação e o dano celular. Conclusão: Os resultados obtidos sugerem que a administração da sinvastatina, após estabelecimento da EHNA, desempenhou um papel protetor no fígado a julgar pelos parâmetros analisados, possivelmente devido as suas propriedades antioxidantes e anti-inflamatórias. / Current knowledge have shown that non-alcoholic steatohepatitis (NASH) is the most important epidemiological and clinic nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD). So far there is no proven efficient therapy for the treatment of NAFLD. Statins are an important class of agents to treat dyslipidemia, but there is still reluctance to use this drug in patients with established or suspected chronic liver disease, including NASH. Objective: To evaluate the effect of simvastatin (SIM) on liver tissue in C57BL6 mice with NASH induced by MCD diet in an attempt to elucidate the action of this drug on the complications of this experimental model. Methods: Male C57BL/6 mice were used at 8 weeks. The animals were divided into 4 groups (n=10): CO+V (I- control diet + vehicle carboxymethylcellulose), SIM 4 (II-control diet + 4mg/kg SIM), NASH+V (IIIMCD diet plus vehicle), NASH+SIM 4 (IV-MCD diet plus simvastatin). The diets were administered for 4 weeks and the SIM (200 μl, intragastrically) for the last 2 weeks. Analyzes of serum aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), cholesterol and triglycerides, pathology testing, assessment of DNA damage by comet assay, assessment of lipid peroxidation (substances that react to TBARSthiobarbituric acid) and activity of the antioxidant enzymes superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GPx), as well as the molecular parameters of oxidative and reticular stress, fibrosis, endothelial dysfunction, inflammation and cellular injury through the expression protein of NQO1, KEAP1, Nrf2, ATF6, GRP78, TGF- β, eNOS, iNOS, IL-12, HSF1 and HSP70 respectively, for Western blotting, assessing the effect of the SIM. Results: After treatment with simvastatin was observed an improvement in liver integrity and decrease in hepatic lipids. Pathology test all sick animals exhibit inflammation, micro and macrovesicular steatosis, hepatocellular ballooning. SIM was able to significantly reduce this change. For the DNA damage, the comet assay revealed that the dose of 4mg/kg simvastatin was unable to induce DNA damage. We also observed a reduction of oxidative damage and antioxidant enzymes maintained their values similar to controls. SIM activated antioxidant enzymes via Nrf2 and inhibited endoplasmic reticulum stress, reduce the fibrosis, improve endothelial function, inflammation and reduce cellular damage. Conclusion: The results suggest that the administration of simvastatin after establishment of NASH, played a protective role in the liver according the parameters, possibly due to its antioxidant and anti-inflammatory properties.

Introdução: A doença hepática gordurosa não alcoólica é uma das formas mais comuns de doença hepática crônica no mundo ocidental. A taurina é um aminoácido que apresenta atividade antioxidante e, por isso, pode ser uma terapia promissora nessa hepatopatia. Objetivo: Avaliar o efeito da taurina na esteatose hepática induzida por tioacetamida em Danio rerio. Métodos: Os animais foram divididos em 4 grupos (n=288): controle (Ctrl - 20 μL de solução salina), taurina (TAU – 1000 mg/kg), tiaoacetamida (TAA – 300 mg/kg) e com coadministração de taurinatioacetamida (TAU+TAA – 1000 mg/kg + 300 mg/kg). A TAA foi injetado por via intraperitoneal, 3 vezes por semana, durante 2 semanas. A expressão de mRNA, histologia, lipoperoxidação e atividade de enzimas antioxidantes foram avaliadas no tecido hepático e o conteúdo de triglicerídeos foi medido no soro. Resultados: A injeção de TAA induziu esteatose, a qual foi confirmada por métodos histológicos. A lipoperoxidação mostrou ser maior no grupo TAA (0.89 ± 0.06 nmol/mg de proteína) em comparação com o grupo TAU+TAA (0.50 ± 0.01 nmol/mg de proteína) (P<0.001). A atividade da superóxido dismutase (SOD) no grupo TAU+TAA (5.95 ± 0.40 U SOD/mg de proteína) foi aumentada quando comparada com o grupo TAA (4.14 ± 0.18 U SOD/mg de proteína) (P<0.001). A atividade da catalase e os triglicerídeos séricos não apresentaram alteração. A expressão de mRNA da Sirtuína 1 (0,5 vezes) e do receptor 2 de adiponectina (0,39 vezes) foram menores nos grupos TAA do que no grupo Ctrl (P<0.05). A expressão de mRNA do TNF-α foi 6,4 vezes maior no grupo TAA que no grupo Ctrl. A expressão de Sirtuina1 foi 2,6 vezes maior na TAU+TAA do que no grupo TAA. Conclusão: A taurina parece melhorar a esteatose hepática, reduzindo o estresse oxidativo e aumentando a expressão da Sirtuina 1. / Background: Nonalcoholic fatty liver disease is one of the most prevalent forms of chronic liver disease in the Western world. Taurine is a amino acid with antioxidants proprieties that may be a promising therapy for treating this disease. Aim: To evaluate the effect of taurine on hepatic steatosis induced by thioacetamide in Danio rerio. Methods: Animals were divided into 4 groups (n=288): control (20 μl of saline solution), taurine (1000 mg/kg), thioacetamide (300 mg/kg) and with coadministration of taurine-thioacetamide group (1000 mg/kg plus 300 mg/kg). Thioacetamide was injected intraperitoneally three times a week for 2 weeks. The mRNA expression, lipoperoxidation, antioxidant enzymatic activity and histological analyses were evaluated in the liver and the triglyceride content was assessed in the serum. Results: Thioacetamide injection induced steatosis, as indicated by histological analyses. The lipoperoxidation showed significant lipid damage in the thioacetamide group (0.89 ± 0.06 nmol/mg of protein) compared to the taurinethioacetamide group (0.50 ± 0.01 nmol/mg of protein) (P < 0.001). Superoxide dismutase (SOD) activity in the taurine-thioacetamide group (5.95 ± 0.40 SOD/mg of protein) was significantly increased compared to the thioacetamide group (4.14 ± 0.18 U SOD/mg of protein) (P < 0.001). The mRNA expression of SIRT1 (0.5-fold) and Adiponectin receptor 2 (0.39-fold) were lower in the thioacetamide group than the control (P < 0.05). TNF-α mRNA expression was 6.4-fold higher in the thioacetamide group than control (P < 0.05). SIRT1 mRNA expression was 2.6-fold higher in the taurine-thioacetamide group than in the thioacetamide group. Conclusion: Taurine seems to improve hepatic steatosis by reducing oxidative stress and increasing SIRT1 expression.

Introdução: A doença hepática gordurosa não alcoólica é uma das formas mais comuns de doença hepática crônica no mundo ocidental. A taurina é um aminoácido que apresenta atividade antioxidante e, por isso, pode ser uma terapia promissora nessa hepatopatia. Objetivo: Avaliar o efeito da taurina na esteatose hepática induzida por tioacetamida em Danio rerio. Métodos: Os animais foram divididos em 4 grupos (n=288): controle (Ctrl - 20 μL de solução salina), taurina (TAU – 1000 mg/kg), tiaoacetamida (TAA – 300 mg/kg) e com coadministração de taurinatioacetamida (TAU+TAA – 1000 mg/kg + 300 mg/kg). A TAA foi injetado por via intraperitoneal, 3 vezes por semana, durante 2 semanas. A expressão de mRNA, histologia, lipoperoxidação e atividade de enzimas antioxidantes foram avaliadas no tecido hepático e o conteúdo de triglicerídeos foi medido no soro. Resultados: A injeção de TAA induziu esteatose, a qual foi confirmada por métodos histológicos. A lipoperoxidação mostrou ser maior no grupo TAA (0.89 ± 0.06 nmol/mg de proteína) em comparação com o grupo TAU+TAA (0.50 ± 0.01 nmol/mg de proteína) (P<0.001). A atividade da superóxido dismutase (SOD) no grupo TAU+TAA (5.95 ± 0.40 U SOD/mg de proteína) foi aumentada quando comparada com o grupo TAA (4.14 ± 0.18 U SOD/mg de proteína) (P<0.001). A atividade da catalase e os triglicerídeos séricos não apresentaram alteração. A expressão de mRNA da Sirtuína 1 (0,5 vezes) e do receptor 2 de adiponectina (0,39 vezes) foram menores nos grupos TAA do que no grupo Ctrl (P<0.05). A expressão de mRNA do TNF-α foi 6,4 vezes maior no grupo TAA que no grupo Ctrl. A expressão de Sirtuina1 foi 2,6 vezes maior na TAU+TAA do que no grupo TAA. Conclusão: A taurina parece melhorar a esteatose hepática, reduzindo o estresse oxidativo e aumentando a expressão da Sirtuina 1. / Background: Nonalcoholic fatty liver disease is one of the most prevalent forms of chronic liver disease in the Western world. Taurine is a amino acid with antioxidants proprieties that may be a promising therapy for treating this disease. Aim: To evaluate the effect of taurine on hepatic steatosis induced by thioacetamide in Danio rerio. Methods: Animals were divided into 4 groups (n=288): control (20 μl of saline solution), taurine (1000 mg/kg), thioacetamide (300 mg/kg) and with coadministration of taurine-thioacetamide group (1000 mg/kg plus 300 mg/kg). Thioacetamide was injected intraperitoneally three times a week for 2 weeks. The mRNA expression, lipoperoxidation, antioxidant enzymatic activity and histological analyses were evaluated in the liver and the triglyceride content was assessed in the serum. Results: Thioacetamide injection induced steatosis, as indicated by histological analyses. The lipoperoxidation showed significant lipid damage in the thioacetamide group (0.89 ± 0.06 nmol/mg of protein) compared to the taurinethioacetamide group (0.50 ± 0.01 nmol/mg of protein) (P < 0.001). Superoxide dismutase (SOD) activity in the taurine-thioacetamide group (5.95 ± 0.40 SOD/mg of protein) was significantly increased compared to the thioacetamide group (4.14 ± 0.18 U SOD/mg of protein) (P < 0.001). The mRNA expression of SIRT1 (0.5-fold) and Adiponectin receptor 2 (0.39-fold) were lower in the thioacetamide group than the control (P < 0.05). TNF-α mRNA expression was 6.4-fold higher in the thioacetamide group than control (P < 0.05). SIRT1 mRNA expression was 2.6-fold higher in the taurine-thioacetamide group than in the thioacetamide group. Conclusion: Taurine seems to improve hepatic steatosis by reducing oxidative stress and increasing SIRT1 expression.

Os conhecimentos atuais têm mostrado que a Esteato-Hepatite não alcoólica (EHNA), é a mais importante forma epidemiológica e clínica da Doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA). Até o momento não existe terapia comprovada e conclusiva para o tratamento da EHNA. As estatinas são uma importante classe de agentes para tratar dislipidemia, mas ainda há relutância de usar esse medicamento em pacientes com doenças crônicas estabelecidas ou suspeita de doença hepática, EHNA inclusive. Objetivo: Avaliar o efeito da sinvastatina (SIM) sobre o tecido hepático em camundongos C57BL6 com EHNA, induzida por dieta MCD, na tentativa de elucidar a ação desse fármaco sobre as complicações desse modelo experimental. Métodos: Foram utilizados camundongos machos C57BL/6 com 8 semanas. Os animais foram divididos em 4 grupos (n=13): CO+V (I – ração controle + veículo de carboximetilcelulose), SIM 4 (II- ração controle + 4mg/Kg de SIM), EHNA+V (III- dieta MCD mais veículo), EHNA+SIM 4 (IV- dieta MCD mais sinvastatina). As dietas foram administradas por 4 semanas e a SIM (na dose de 200 μL, intragastricamente) durante as 2 últimas semanas. Foram realizadas análises séricas de aspartato aminotransferase (AST), alanina aminotransferase (ALT), colesterol e triglicerídeos, teste anatomopatológico, avaliação do dano ao DNA através do ensaio cometa, avaliação da lipoperoxidação (substâncias que reagem ao ácido tiobarbitúrico- TBARS) e da atividade das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (SOD) e glutationa peroxidase (GPx), bem como os parâmetros moleculares de estresse oxidativo e reticular, dano celular, inflamação, disfunção endotelial e fibrose através da expressão proteica de NQO1, KEAP1, Nrf2, ATF6, GRP78, TGF- β , eNOS, iNOS, IL-12, HSF1 e HSP70 respectivamente, por Western blotting, avaliando o efeito da SIM. Resultados: Após o tratamento com sinvastatina observou-se melhora na integridade hepática e diminuição nos lipídios hepáticos. No teste anatomopatológico todos os animais doentes apresentam inflamação, esteatose microvacuolar e macrovacuolar além de balonização hepatocelular e a sinvastatina foi capaz de reduzir significativamente esta alteração. Quanto ao dano ao DNA, o ensaio cometa revelou que a dose de 4mg/Kg de sinvastatina não foi capaz de induzir dano ao DNA. Constatou-se também uma redução do dano oxidativo e às enzimas antioxidantes mantiveram seus valores semelhantes aos controles. A SIM ativou enzimas antioxidantes via Nrf2 e inibiu o estresse do retículo endoplasmático além de reduzir a fibrose, melhorar a função endotelial, diminuir a inflamação e o dano celular. Conclusão: Os resultados obtidos sugerem que a administração da sinvastatina, após estabelecimento da EHNA, desempenhou um papel protetor no fígado a julgar pelos parâmetros analisados, possivelmente devido as suas propriedades antioxidantes e anti-inflamatórias. / Current knowledge have shown that non-alcoholic steatohepatitis (NASH) is the most important epidemiological and clinic nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD). So far there is no proven efficient therapy for the treatment of NAFLD. Statins are an important class of agents to treat dyslipidemia, but there is still reluctance to use this drug in patients with established or suspected chronic liver disease, including NASH. Objective: To evaluate the effect of simvastatin (SIM) on liver tissue in C57BL6 mice with NASH induced by MCD diet in an attempt to elucidate the action of this drug on the complications of this experimental model. Methods: Male C57BL/6 mice were used at 8 weeks. The animals were divided into 4 groups (n=10): CO+V (I- control diet + vehicle carboxymethylcellulose), SIM 4 (II-control diet + 4mg/kg SIM), NASH+V (IIIMCD diet plus vehicle), NASH+SIM 4 (IV-MCD diet plus simvastatin). The diets were administered for 4 weeks and the SIM (200 μl, intragastrically) for the last 2 weeks. Analyzes of serum aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), cholesterol and triglycerides, pathology testing, assessment of DNA damage by comet assay, assessment of lipid peroxidation (substances that react to TBARSthiobarbituric acid) and activity of the antioxidant enzymes superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GPx), as well as the molecular parameters of oxidative and reticular stress, fibrosis, endothelial dysfunction, inflammation and cellular injury through the expression protein of NQO1, KEAP1, Nrf2, ATF6, GRP78, TGF- β, eNOS, iNOS, IL-12, HSF1 and HSP70 respectively, for Western blotting, assessing the effect of the SIM. Results: After treatment with simvastatin was observed an improvement in liver integrity and decrease in hepatic lipids. Pathology test all sick animals exhibit inflammation, micro and macrovesicular steatosis, hepatocellular ballooning. SIM was able to significantly reduce this change. For the DNA damage, the comet assay revealed that the dose of 4mg/kg simvastatin was unable to induce DNA damage. We also observed a reduction of oxidative damage and antioxidant enzymes maintained their values similar to controls. SIM activated antioxidant enzymes via Nrf2 and inhibited endoplasmic reticulum stress, reduce the fibrosis, improve endothelial function, inflammation and reduce cellular damage. Conclusion: The results suggest that the administration of simvastatin after establishment of NASH, played a protective role in the liver according the parameters, possibly due to its antioxidant and anti-inflammatory properties.

Orientadores: Neusa Julia Pensardi, Elza Cotrim Soares / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-24T04:42:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Caruy_CristinaAparecidaArrivabene_D.pdf: 5962151 bytes, checksum: 7c173d0e5904df141ebe1587ed72960d (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Altas doses de paracetamol podem causar efeitos tóxicos no figado. Os anestésicos voláteis também podem causar hepatotoxicidade, por efeito direto ou através dos metabólitos que produzem. Neste trabalho, procurou-se avaliar os efeitos da associção dos voláteis, halotano, isoflurano e sevoflurano, com o paracetamol, em ratos não subp1etidos à hipoxia e mantidos em ventilação espontânea. Foram incluídos no estudo 94 ratos machos adultos, da linhagem Wistar, com peso entre 260 e 290 g. Destes, 38 foram utilizados na determinação dos valores e intervalos de referência laboratoriais. Os demais foram distribuídos em sete grupos de oito animais cada. Nos grupos um, dois e três, foram administradas, respectivamente, uma CAM (concentração alveolar -mínima) de halotano, de isoflurano e de sevoflurano. Esses anestésicos foram vaporizados em oxigênio a 100%, durante 60 minutos, por cinco dias consecutivos. Nos grupos quatro, cinco e seis, após mesmo procedimento com halotano, isoflurano e sevoflurano, respectivamente, foi administrado paracetamol na dose diária de 500 mg/kg de peso, através de sonda orog~ca, por cinco dias consecutivos. No grupo sete, administrou-se paracetamol isoladamente, em dose d$i.a única de 500 mg/kg. No quinto dia de acompanhamento, os ratos foram anestesiados com tiopental sódico endovenoso (20 mg/kg). Após laparotqmia, 3 ml de sangue foram coletados da aorta, para dosagens das enzimas (aspartato aminotransferase - AST, alanina aminotransferase - ALT, fosfatase alcalina - FA e gama-glutamiltransferase - GGT) e para determinação das concentrações plasmáticas de paracetamol. Fragmentos de :flgado foram fIxados em formalina para posterior estudo histológico. Na análise clínica dos re~ultados, observou-se a ocorrência de alterações enzimáticas isoladas em todos os grupos estudados, quando os intervalos de referência laboratoriais foram utilizados como parâmetros. Estatisticamente, a associação halotano e paracetamol aumentou a AST e a ALT, mas não alterou a FA. Houve aumento da GGT, devido ao efeito isolado do halotano. Não houve aumento da necrose nem da reação inflamatória portal. O aumento da vacuolização citoplasmática foi devido ao efeito isolado do halotano. Houve aumento da congestão, da reação inflamatória lobular e da concentração plasmática de paracetamol. A associação isoflurano e paracetamol aumentou a ALT, mas não alterou a FA. Houve aumento da AST e da GGT, devido ao efeito isolado do isoflurano. Não houve aumento da necrose nem das reações inflamatórias lobular e portal. Houve aumento da vacuolização citoplasmática, devido ao efeito isolado do isoflurano. Houve aumento da congestão e da concentração plasmática de paracetamol. A associação sevoflurano e paracetamol não alterou as enzimas estudadas. Não houve aumento da necrose nem das reações inflamatórias lobular e portal. Houve aumento da vacuolização citoplasmática, devido ao efeito isolado do sevoflurano. Houve aumento da congestão, mas não da concentração plasmática de paracetamol / Abstract: Large doses ofparacetamol can cause hepatic toxic effects. Volatile anesthetics can also cause hepatotoxicity directly or through their metabolites. ln this study, we have tried to evaluate the effects of the association of volatile anesthetics, halothane, isoflurane and sevoflurane with paracetamol, in rats which were not submitted to hypoxia and remained with spontaneous ventilation. Ninety four adult male Wistar rats, weighing 260 - 290 g, were used. Thirty eight of them were used to estabilish reference values and intervals. The rest was divided into seven groups with eight rats each one. ln groups one, two and three the rats were anesthetized one hour a day, for tive consecutive days with one MAC (minimum alveolar concentration) ofhalothane, isoflurane and sevoflurane, respectively, vaporized in one hundred per cent oxygen. In groups faur, tive and six, afier one hour a day of anesthesia with halothane, isoflurane and sevoflurane (1 MAC), respectively, paracetamol (500 mg/Kg) Was administered with a stomach tube, for tive consecutive days. ln group seven, only paracetamol was administered (500 mg/kg) with a stomach tube for tive consecutive days. On the fifth day, afier the normal daily treatment, the rats were ~esthetized with thiopental sodium (20 mg/kg, intravenously). Afier laparotomy, three mililiters of blood were collected :ltom the aorta, for enzymatic (aspartate aminotransferase - AST , alanine aminotransferase - ALT, alkaline phosphatase - AP and gamma-glutamyltransferase - OGT) and paracetamol plasmatic doses. Then, the histological study was done. The clinical analyses ofthe results, showed the ocurrence af isolated enzymatic alterations in alI the groups, when the reference intervals were used as parameters. There was an increase in AST in groups one, two, four and tive. ln the saroe groups, GGT increased to the superior limit of the reference intervalo AL T increased in groups four, tive and seven, but AP did not altero StatisticalIy, the association of halothane and paracetamol increased the AST and ALT, but did not alter alkaline phosphatase. There was an increase in GGT due to the effect of just halothane. There was no increase of necrosis and portal intlammatory reaction. The increase of vacuolation was due to the effect of just halothane. There was also an increase in the congestion, lobular inflammatory reaction and in the paracetamol plasmatic concentration. The association ofisotlurane and paracetamol increased ALT, but did not alter aIkaline phosphatase. There was an increase in AST and in GGT due to the effect of only isotlurane. There was no increase of necrosis, lobular and portal inflammatory reactions. However, there was an increase of the vacuolation due to the effect of isotlurane. An increase of congestion and in the plasmatic concentration of paracetamol was observed. The association of sevotlurane and paracetamol caused no alteration in any of the enzymes studied. Nor was there any increase in necrosis, lobular and portal reactions. The increase in vacuolation was due to the effects of only sevotlurane. There was an increase ofthe congestion, but the paracetamol plasmatic concentration did not altero / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica