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Actividad antioxidante y citotoxica de las fisalinas y de los flavonoides presentes en las hojas de Physalis peruviana L.Hernández Peves, María Martha January 2015 (has links)
Objetivo: Determinar la actividad antioxidante y citotóxica de fisalinas y flavonoides presentes en las hojas de Physalis peruviana L. Diseño: Experimental. Lugar: Laboratorio del Instituto de Química Orgánica de la Facultad de Farmacia y Bioquímica y Laboratorio de Biología Celular de la Facultad de Biología de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos; Laboratorio de Investigación y Desarrollo “Abraham Vaisberg Wolach” de la Universidad Peruana Cayetano Heredia. Materiales: Fisalinas y flavonoides de las hojas de Physalis peruviana L; embriones de Tetrapygus niger; líneas celulares tumorales humanas H-460, HuTu80, DU145, MCF-7, M-14, HT-29, K562 y fibroblastos normales de ratón 3T3. Intervenciones: La evaluación de la actividad antioxidante se realizó utilizando el método del radical DPPH; la actividad citotóxica se realizó mediante el bioensayo en erizos de mar y líneas celulares tumorales. Principales medidas de resultados: Actividad antioxidante y actividad citotóxica. Resultados: El porcentaje de inhibición del radical DPPH fue de 95,0% y 26,6% para los flavonoides y las fisalinas, respectivamente; las fisalinas y los flavonoides demostraron actividad citotóxica a partir de la concentración de 10 ppm en el bioensayo con erizos de mar; se halló el porcentaje de crecimiento celular para cada dilución en cada línea celular, la concentración inhibitoria de crecimiento medio CI50 para cada línea celular de las fisalinas fue1.53, 0.54, 1.75, 0.63, 0.45, 0.48, 0.28 y 0.57 μg/mL, la concentración inhibitoria con flavonoides fue 62.24, 22.35, 86.77, 45.08, 25.32, 25.01, 21.68 y 15.93 μg/mL para H-460, HuTu80, DU145, MCF-7, M-14, HT-29, K562 y 3T3, respectivamente. Los índices de selectividad de las fisalinas y de los flavonoides estuvieron entre 0.16 a 17.3 y 345.27 a 1382.0, respectivamente. Conclusiones: Las fisalinas de las hojas de Physalis peruviana L con el método del radical DPPH demostraron menor actividad antioxidante que los flavonoides; las fisalinas tuvieron mayor actividad citotóxica que los flavonoides en los bioensayos de erizo de mar y líneas celulares in vitro. Palabras clave: fisalinas, flavonoides, Physalis peruviana L., actividad antioxidante, actividad citotóxica. / --- Objective: To determine the antioxidant and citotoxic activity of the physalins and flavonoids Physalis peruviana L leaves. Design: Experimental. Setting: Faculty of Pharmacy and Biochemistry and Faculty of Biology, San Marcos Major National University; Laboratory of Research and Development “Abraham Vaisberg Wolach”, Cayetano Heredia Peruvian University. Materiales: Physalins and flavonoids of Physalis peruviana L leaves; embryos Tetrapygus niger; human tumoral cells lines H-460, HuTu80, DU145, MCF-7, M-14, HT-29, K562 and 3T3 fibroblasts. Interventions: Antioxidant activity was determined with DPPH radical scavenging method and cytotoxic activity was observed by black sea urchin bioassay and tumoral cells lines. Main outcome measures: Antioxidant and cytotoxic activities. Results: we found the percentages of radical-scavenging DPPH were 95,0% and 26,6% for physalins and flavonoids respectively; physalins and flavonoids showed cytotoxic activity starting from concentration of 10 ppm on black sea urchin bioassay; we found the percentage of cellular growth for every dilution in ever cellular line, the inhibiting concentration of average growth for each cellular line from physalins was 1.53, 0.54, 1.75, 0.63, 0.45, 0.48, 0.28 y 0.57 µg/mL, the inhibiting concentration with flavonoids was 62.24, 22.35, 86.77, 45.08, 25.32, 25.01, 21.68 y 15.93 µg/mL for H-460, HuTu80, DU145, MCF-7, M-14, HT-29, K562 and 3T3, respectively; the physalins and flavonoids selectivity index were between 0.16 to 17.32 and 345.27 to 1382.02, respectively. Conclusions: The Physalis peruviana leaves physalins showed lower antioxidant activity than flavonoids on DPPH radical scavenging method; the physalins showed greater citotoxic activity tan flavonoids on black sea urchin bioassay and cell lines in vitro. Key words: Physalins, flavonoids, Physalis peruviana L., antioxidant activity, citotoxic activity. / Tesis
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Efeito inibitório de quinolinas e fisalina F em células de indivíduos infectados pelo HTLV-1Pinto, Lorena Ana January 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / A proliferação espontânea de linfócitos é um marcador da infecção pelo Vírus Linfotrópico de Célula T Humana do tipo 1 (HTL V -l)o Esta é mais elevada em pacientes com paraparesia espástica tropical/mielopatia associada ao HTL V
(HAMJTSP) que em indivíduos assintomáticos. Embora o seu papel na patogênese da HAM/TSP ainda seja desconhecido, a identificação de drogas capazes de modular a
proliferação espontânea pode ser relevante para o tratamento da HAM/TSP. Neste estudo nós avaliamos os efeitos dos derivados quinoIínicos BS373, Ql e Q2 e da
fisalina F em culturas de células mononucleares do sangue periférico (PBMC) de indivíduos infectados pelo HTL V com HAM/TSP. Estes compostos inibiram, ex vivo, a proliferação espontânea em culturas de PBMC, conforme avaliado pela incorporação de
3H-timidina. Além disso, a produção espontânea, ex vivo, de citocinas inflamatórias foi
significativamente inibida pelo composto BS373 (25 j.tM) e pela tlsahna F (10 j.tM). A expressão da proteína viral Tax foi reduzida cerca de 80% após incubação de PBMC
com BS373 (25 uM). BS373 e fisalina F induziram um aumento na porcentagem de células em apoptose, como demonstrado por análise da marcação do PBMC com anexina V por citometri~ de fluxo. A análise ultraestrutural de células cultivadas na presença destes compostos mostrou vacúolos apresentando membranas de mielina, que se assemelham a compartimentos autofágicos. Em conclusão, as quinolinas e a fisalina
F foram capaz de inibir a proliferação espontânea de células de indivíduos infectados pelo HTL V-I. Outros estudos são necessários para compreendermos os mecanismos pelos quais estes compostos agem no PBMC de indivíduos infectados pelo HTL V-I. / Spontaneous lymphocyte proliferation, a hallmark ofHuman- T Lymphocyte Virus Type 1 (HTL V -1) infection, is particular1y high in HTL V -associated myelopathy/tropical
spastic paraparesis (HAM/TSP) patients compared to asymptomatic carriers. Although its role in the pathogenesis of HAM/TSP is stiH unknown, the identification of drugs
capable of modulating the spontaneous proliferation may be reievant for the treatment ofHAM/TSP. Here we evaluated the effects ofthe quinoline derivative BS373, Q1 and Q2 and physalin F in cultures of peripheral blood mononuclear ceHs (PBMC) obtained
from HTL V-infected subjects with HAM/TSP. Compounds inhibited of spontaneous
proliferation in PBMC cultures, as assessed by 3H-thymidine incorporation. Additionally, the spontaneous production of inflammatory cytokines by PBMC was
significantly inhibited by BS373 (25 flM) and physalin F (10 flM). The expression of the viral transcription factor Tax was reduced about 80% after incubation of PBMC
with 8S373 (25 I-tM). BS373 and physalin F induced an increase in the percentage of
apoptotic cells, as shown by flow cytometry analysis of annexin V-stained PBMC. Ultrastructural analysis of cultured cells in the presence of compounds showed vacuoles presented with myelin-like membranes, resembling autophagic vacuole-like compartments. In conc1usion, quinolines and physalin F was able to inhibit the spontaneous proliferation of cells from HTL V -l-infected individuaIs. Further studies
are required to understand the mechanisms by which the compounds affect HTL V -1 PBMC.
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Caracteriza????o anat??mica e fitoqu??mica da Physalis angulata L. e seu efeito sobre c??lulas de indiv??duos com mielopatia associada ao HTLV-1Ferreira, L??a Maria dos Santos Lopes 24 July 2018 (has links)
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Previous issue date: 2018-07-24 / Physalis angulata L. ?? uma planta da fam??lia Solanaceae amplamente utilizada na medicina popular. Metab??litos secund??rios com potencial farmacol??gico, incluindo fisalinas que exibem atividades anti-inflamat??rias, imunomoduladoras e antiparasit??rias, foram identificados nesta esp??cie. Poucos estudos investigaram os locais de armazenamento de metab??litos secund??rios na planta e o efeito dos bioativos na linfoprolifera????o causada pelo v??rus linfotr??pico de c??lulas T humanas (HTLV-1). Objetivos: Caracterizar as estruturas anat??micas vegetais, o perfil fitoqu??mico dos extratos e avaliar o efeito da Physalis angulata em linf??citos de indiv??duos infectados pelo HTLV-1 Material e m??todos: Foram empregadas t??cnicas de microscopia eletr??nica e ??ptica convencional para a caracteriza????o anat??mica dos ??rg??os da P. angulata (folha, raiz, caule e frutos). Extratos metan??licos de folhas, ra??zes, caule e frutos foram qualitativamente caracterizados pela presen??a de esteroides, terpenoides, taninos, alcaloides, saponinas, flavonoides, antraquinonas, cumarinas, teor de compostos fen??licos totais e conte??dos de flavonoides. A capacidade antioxidante desses extratos foi determinada pela atividade de sequestro de radicais livres do DPPH. Para avaliar o efeito do extrato da P. angulata e Fisalina F sobre a linfoprolifera????o, c??lulas de tr??s indiv??duos infectados pelo HTLV-1 e tr??s controles n??o infectados foram cultivadas em presen??a de dilui????es seriadas do extrato e da Fisalina F por 5 dias. As c??lulas foram pulsadas por 18h com 1??Ci 3H- Timidina. Al??m disso, foi realizado a an??lise do ciclo celular, na presen??a ou aus??ncia da Fisalina F e do extrato. Resultados: Os est??matos anisoc??ticos localizados na face abaxial foram mais abundantes que os est??matos na face adaxial. Tricomas foram evidenciados mais abundantes ao longo das nervuras do pec??olo, caules, al??m da margem nas s??palas e p??talas e dispersos no ov??rio. Esteroides e terpenoides estiveram presentes nas folhas, caules e frutos de P. angulata. Saponinas eram exclusivas nos frutos. A triagem fitoqu??mica n??o detectou flavonoides, antraquinonas e alcaloides em todas os extratos metan??licos das partes testadas da planta. As maiores capacidades antioxidantes foram identificadas nos extratos foliares e frut??feros, possivelmente devido ?? presen??a de compostos fen??licos nesses ??rg??os. O IC50 encontrado para Fisalina F foi 3,0 ??M e o IC50 do extrato etan??lico do caule de P. angulata foi de 7,0 ??g. A Fisalina F e o extrato da P. angulata inibiram a prolifera????o espont??nea de c??lulas infectadas de HTLV-1 e reduziram o n??mero de c??lulas em processo de mitose. Conclus??o: Este estudo descreveu as caracter??sticas anat??micas e bioqu??micas de P angulata e identificou ??rg??os do indiv??duo abundantes em antioxidantes (folhas e frutos) e esteroides (possivelmente fisalinas; folhas). Fisalina F e extrato de P. angulata apresentaram um efeito inibit??rio sobre c??lulas de indiv??duos infectados pelo HTLV-1, diminuindo a propor????o de c??lulas em divis??o celular.
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Estudo da interação da fisalina F com o receptor da vitamina D / Estudo da interação da fisalina F com o receptor da vitamina DVilar, Vanessa Lima Souza January 2010 (has links)
Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-09-04T17:42:37Z
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Vanessa Lima Souza Vilar Estudo da interaão de fisalina F....pdf: 1393743 bytes, checksum: 1dd12e24922cdabadb9ab093b671a667 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-09-04T17:42:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Vanessa Lima Souza Vilar Estudo da interaão de fisalina F....pdf: 1393743 bytes, checksum: 1dd12e24922cdabadb9ab093b671a667 (MD5)
Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / As fisalinas são seco-esteróides isolados de espécies do gênero Physalis que apresentam diversas atividades biológicas. Em estudos in vitro e em modelos de doenças mediadas pelo sistema imune, foi demonstrado que a fisalina F possui potente atividade imunossupressora, independente da ativação do receptor de glicocorticóide. Neste trabalho foi avaliado se a ação deste esteróide está relacionada à ativação do receptor de vitamina D (VDR), que é um fator de transcrição ativado pela vitamina D3. Inicialmente foi realizado um ensaio de translocação do VDR utilizando células COS-7 transfectadas com plasmídeo codificante para a proteína de fusão YFP-VDR, formada pelo VDR associado à proteína fluorescente amarela. As células transfectadas foram tratadas com 100 ηM da fisalina F e também da fisalina D, que não possui atividade imunossupressora, dexametasona e vitamina D3. Observou-se por microscopia de fluorescência o mesmo padrão de translocação do VDR do citoplasma para o núcleo em células tratadas com a fisalina F e com a vitamina D3, mas não com dexametasona ou fisalina D. Para comprovar a atividade do VDR como fator de transcrição sob ação da fisalina F, células COS-7 foram transfectadas com pTA-LUC (plasmídeo controle) ou pVDR-LUC que codifica a proteína luciferase sob o controle de elementos responsivos ao VDR. Após a transfecção, as células foram incubadas com os mesmos estímulos e na mesma concentração do ensaio de translocação ou apenas com veículo. As atividades da luciferase nos grupos tratados com fisalina F e vitamina D3 foram semelhantes e também superiores às do grupo tratado com veículo, fisalina D e dexametasona. Foi realizada a expressão do VDR em Escherichia coli BL21 (DE3) Rosetta utilizando o plasmídeo HS_VDR_EC1-pQE-T7, o qual codifica o VDR associado a uma cauda de 6 histidinas. Nas condições testadas, a proteína expressada encontrava-se em corpos de inclusão. Esta proteína purificada poderá ser utilizada em futuros estudos de interação entre VDR e fisalinas. Em conclusão, nossos resultados sugerem que a fisalina F interage com o VDR e que as atividades destas fisalinas podem ser atribuídas, ao menos em parte, à ativação deste receptor nuclear. / Physalins are secosteroids isolated from species of the genus Physalis endowed with several biological activities. Studies in vitro and in models of immune-mediated diseases have shown that physalin F has potent immunosuppressive activity independent of the glucocorticoid receptor. in this study we evaluated whether the action of this steroid is related to activation of the vitamin D receptor (VDR), which is a transcription factor activated by vitamin D3. Initially we evaluated the translocation of the VDR using COS-7 cells transfected with plasmid encoding a fusion protein YFP-VDR formed by VDR associated with yellow fluorescent protein. The transfected cells were treated with 100 ηM of physalins F and D, dexamethasone, and vitamin D3. We observed by fluorescence microscopy the translocation of VDR from the cytoplasm to the nucleus in cells treated with physalin F and with vitamin D3, but not with dexamethasone or physalin D. To prove the transcription factor activity of VDR under the action of physalin F, COS-7 cells were transfected with PTA-LUC (plasmid control) or pVDR-LUC that encodes the protein luciferase under de control of VDR responsive elements. After transfection, cells were incubated with vehicle or physalins F and D, dexamethasone and vitamin D3 at the same concentration of translocation test. The luciferase activity of cells treated with vitamin D3 and physalin F were similar, and higher than group treated with vehicle, dexamethasone or physalin D. The VDR expression was done in Escherichia coli BL21 (DE3) Rosetta. For this, we used the plasmid PQE-HS_VDR_EC1-T7, which encodes the VDR protein associated with a tail of 6 histidines. Under the conditions tested, the expressed protein was in inclusion bodies. This purified protein can be used in future studies of interaction between VDR and physalins. Our results suggest that physalin F interacts with the VDR and the activities of this physalin can be attributed at least in part to activation of this nuclear receptor.
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Efeito da fisalina e, isolada da Physalis angulata, em modelos de dermatite de contato induzida por tpa e oxazolona em camundongos / The effects of physalin e, isolated from Physalis angulata, on tpa and oxazolone induced contact dermatitis in miceNatÃlia Bità Pinto 01 December 2009 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A Fisalina E (FIS E), isolada das partes aÃreas da Physalis angulata (Solanaceae), foi avaliada em modelos de dermatite de contato induzida por 12-O-tetradecanoilforbol-13-acetato (TPA) e por oxazolona (OXA) em camundongos. A dermatite de contato irritativa aguda foi induzida pela administraÃÃo tÃpica de TPA (2,5μg/orelha) e avaliada apÃs 4h. A FIS E(0,125;0,25 e 0,5 mg/orelha,por via tÃpica) reduziu de forma significativa o edema de orelha induzido por TPA em 33,1; 38,7; 39%, respectivamente, e dexametasona(0,05 mg/orelha,por via tÃpica) reduziu em 95,2%. Nas mesmas doses, a FIS E assim como a Dexa, reduziram em 45,7; 52,5; 67,6 e 83,4 %, respectivamente, a atividade da mieloperoxidase (MPO) tecidual. FIS E (3, 10 e 30 mg/kg,por via oral) e Dexa (1mg/kg,por via oral) reduziram o edema de orelha em 34,8; 40,7, 47,3 e 46,6% respectivamente. Nas mesmas doses, a FIS E assim como a Dexa, reduziram em 39,3; 46,7 e 54,3 e 81,7 %, respectivamente, a atividade da mieloperoxidase (MPO) tecidual. A FIS E (0.5 mg/orelha) foi capaz de reduzir os nÃveis teciduais de TNF-α de 8,711.18 pg/ml (veÃculo) para 2,950.81 pg/ml e a dexametasona (0,05 mg/orelha) para 2,350.94 pg/ml, representando uma reduÃÃo de 66,2 e de 73 %, respectivamente. A administraÃÃo de Mifepristone (25 mg/kg,s.c), antagonista esteroidal, reverteu os efeitos da FIS E e da Dexa, por via oral e tÃpica, sobre a reduÃÃo do edema, atividade da mieloperoxidase e nÃveis de TNF-α. Na marcaÃÃo imunohistoquÃmica para TNF-α e NF-κB, a FIS E (0,5 mg/orelha) e a dexametasona (0,05 mg/orelha) reduziram a intensidade de marcaÃÃo do TNF-α e NF-κB, e o Mifepristone, reverteu esse efeito. A aÃÃo antiinflamatÃria da FIS E no modelo da dermatite aguda induzida por TPA foi confirmada pelos achados histopatolÃgicos, com a reduÃÃo do edema, infiltrado inflamatÃrio de mono e polimorfonucleares. Na dermatite crÃnica foi induzida pela aplicaÃÃo tÃpica de 20 Âl de uma soluÃÃo de TPA (2,5Âg/orelha) em dias alternados durante 10 dias, a FIS E, por via tÃpica, nas doses 0,125; 0,25 e 0,5 mg/orelha, reduziu, de forma significativa, o edema de orelha, em 19, 23 e 30,3%, respectivamente, enquanto a Dexa (0,05mg/orelha) reduziu em 32,6 %. FIS E (0,125;0,25 e 0,5 mg/orelha,por via tÃpica) e a Dexa(0,05mg/orelha) reduziram a atividade tecidual da MPO em 30; 38,8; 50,8 e 56,6%, respectivamente. A administraÃÃo oral da FIS E (3, 10 e 30 mg/kg), reduziu, de forma significativa, o edema de orelha crÃnico, em 8; 14,8; 17 %, respectivamente, e a Dexa (1 mg/kg) reduziu em 20,7 %.Nas mesmas doses, a FIS E e a Dexa reduziram a atividade da MPO em 43,1; 54,5 ;59,3 e 65 %,respectivamente. O modelo de dermatite de contato induzida por oxazolona (OXA, 1%/orelha), provocou uma hiperplasia epidÃrmica onde o INF-γ teve papel crucial. A FIS E, por via oral e tÃpica, reduziu de forma significativa, a hiperplasia epidÃrmica do 7Â ao 19Â dia de observaÃÃo. A FIS E (0.5 mg/orelha, por via tÃpica) diminuiu os nÃveis de IFN-γ em 43,5% e a Dexa (0.05 mg/orelha, via tÃpica) em 37,5%.Os resultados encontrados, comprovados pelo estudo histolÃgico, demonstram o efeito antiinflamatÃrio da Fisalina no modelo de dermatite de contato alÃrgica crÃnica. ConcluÃmos que a Fisalina E demonstrou atividade antiinflamatÃria, por via tÃpica e oral, nos modelos de dermatite de contato induzida por TPA e oxazolona em camundongos, possivelmente atravÃs da interaÃÃo com receptores de glicocorticÃides. / The physalin E (PHY E), isolated from the aerial parts of Physalis angulata (Solanaceae), was assessed in models of contact dermatitis induced by 13-acetate-12-o-tetradecanoyl-phorbol (TPA) and oxazolone (OXA) in mice. The irritant contact dermatitis was induced by acute topical administration of TPA (2,5 mg/ear) and evaluated after 4h. The PHY E topically applied to ear at 0,125;0,25 and 0,5 mg/ear and dexamethasone (Dexa), topically, a dose of 0,05 mg/ear, reduced significantly the edema ear induced by TPA in 33,1; 38,7; 39 and 95,2%, respectively. In the same doses, PHY E as well as Dexa, reduced by 45,7; 52,5; 67,6 and 83,4%, respectively, the activity of myeloperoxidase (MPO) in tissue. Oral administration of PHY E (3,10 and 30 mg/kg) and DEXA (1 mg/kg) decreased the ear edema by 34,8; 40,7;47,3 and 46,6% respectively. The same doses, PHY E as well as Dexa, reduced by 39,3; 46,7;54,3% and 81,7%, respectively, the activity of myeloperoxidase (MPO) tissue. The PHY E (0,5 mg/ear) was able to reduce the tissue levels of TNF-α of 8,711.18 pg/ml (vehicle) to 2,950.81 pg/ml and dexamethasone (0,05 mg/ear) to 2,350.94 pg/ml, showing a reduction of 66.2 and 73%, respectively.The administration of mifepristone (25 mg/kg,sc),a steroid antagonist, reversed the effects of PHY E and Dexa, orally and topically, on reducing the edema,myeloperoxidase activity and levels of TNF-α. In the immunohistochemical analysis for TNF-α and NF-κB, PHY E (0,5 mg/ear) and dexamethasone (0,05 mg/ear) reduced the intensity of marking the TNF-α and NF-κB, and mifepristone reversed this effect. The anti-inflammatory action of the PHY E in the model of the dermatitis TPA-induced were confirmed by histopathological findings, with the reduction of edema and inflammatory infiltration of mono and polymorphonuclear. The chronic dermatitis was induced by application of 20 Âl solution of TPA (2,5 mg/ear) was applied topically every other day for 10 days, PHY E topically applied (0,125, 0,25 and 0,5 mg/ear) reduced significantly the edema of the ear, 19; 23; 30,3%,and Dexa (0,05 mg/ear) decreased by 32,6%.In the same doses, PHY E and Dexa reduced tissue activity of MPO in 30; 38,8;50,8 and 56,6%, respectively. Oral administration. PHY E (3, 10 and 30 mg/kg) reduced significantly the ear edema chronic in 8, 14,8 and 17%, respectively, and Dexa (1 mg/kg) reduced in 20.7%. In the same doses,PHY E and Dexa reduced activity of MPO in 43.1, 54.5, 59.3 and 65% respectively The model of contact dermatitis induced by oxazolone (OXA, 1%/ear) caused an epidermal hyperplasia where the INF-γ played crucial role. PHY E oral and topical, has significantly reduced the epidermal hyperplasia of 7 th to 19 th day of observation Physalin E (0,5 mg/ear topically) decreased levels of IFN-γ in 43,5% and Dexa (0,05 mg/ear topically) to 37,5% when compared to vehicle. Our results, as evidenced by histological study, demonstrate the anti-inflammatory effect of physalin in the model of contact dermatitis allergic. In conclusion, the results obtained showed that PHY E presented anti-inflammatory activity either when was used by oral and topical route in the models of contact dermatitis TPA and Oxazolone-induced in mice, possible trought the interaction with glucocorticoids receptors.
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