Dissertação de Mestrado apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Ciência e Engenharia de Materiais da Universidade do Extremo Sul Catarinense - UNESC, como requisito à obtenção do título de Mestre em Ciência e Engenharia de Materiais. / Este trabalho apresenta a síntese e caracterização de um composto formado por grupos doadores de elétrons (anéis tetrazóis alquilados) ligados ao aceptor de elétrons (2,1,3-benzotiadiazol) por um sistema _-conjugado (D-_-A-_-D) com potencial aplicação em células solares orgânicas entre outros dispositivos opto-eletrônicos. O esquema sintético planejado apresentou baixo rendimento na etapa final, com o objetivo de melhorar o rendimento na síntese, uma rota sintética alternativa foi utilizada, obtendo o composto de interesse com propriedades fotoluminescentes com rendimento de 95%. Os intermediários e o composto de interesse foram caracterizados quanto as suas estruturas químicas e propriedades térmicas, sendo o composto de interesse, também caracterizado quanto as suas propriedades fotofísicas, eletroquímica e morfológica em filmes. Esse composto absorve radiação eletromagnética em solução nas regiões do UV-Vis, entre 265 a 470 nm (_ _ 4,0 x 104 L mol-1 cm-1) e band gap de 2,72 eV, apresenta fluorescência em solução na região do verde no espectro eletromagnético (______ = 502 nm) e deslocamento de Stokes de 82 nm com rendimento quântico de _F = 0,45. O composto de interesse é solúvel em clorofórmio e diclorometano, apresenta a formação de filmes por spin coating, e estabilidade térmica até aproximadamente 235 oC em atmosfera inerte e 254 oC em atmosfera oxidante. Os resultados obtidos serão discutidos ao longo desta dissertação e demonstram que o material apresenta potencial aplicação na indústria eletrônica.

Dissertação de Mestrado apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Ciência e Engenharia de Materiais da Universidade do Extremo Sul Catarinense - UNESC, como requisito à obtenção do título de Mestre em Ciência e Engenharia de Materiais. / Nesse trabalho são apresentados o desenvolvimento e a caracterização de filmes orgânicos de resina acrílica aditivados com 8 moléculas fotossensíveis doadoras de elétrons da classe diazol e aceptores da classe tetrazol. Os filmes foram processados utilizando-se a técnica de spin coating. A caracterização óptica dos filmes foi realizada pelas técnicas de espectroscopia de fluorescência e UV-Vis. A estabilidade térmica foi avaliada por análise termogravimétrica, sendo que a estabilidade fotoquímica foi analisada por infravermelho com transformada de Fourier. Os compostos em solução e impregnados em resina apresentaram fluorescência. A energia dos orbitais de fronteira foi analisada por estudo eletroquímico apresentando 3,18eV a 4,66eV para o band gap. A morfologia dos filmes foi caracterizada por microscopia de força atômica. Observou-se grande estabilidade dos filmes dopados obtidos, assim como, uma sensível redução da fotoconversão. As análises de absorção e emissão dos filmes dopados apresentaram significativa redução quando comparado com compostos puros em solução, apesar de utilizar as mesmas concentrações na solução e em filmes. Para determinar a eficiência de transição eletrônica, o rendimento quântico dos filmes foi determinado. O filme, dopado com a molécula 5, apresentou as melhores propriedades para utilização em dispositivos fotovoltaicos.

Dissertação de Mestrado apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Ciência e Engenharia de Materiais da Universidade do Extremo Sul Catarinense - UNESC, como requisito à obtenção do título de Mestre em Ciência e Engenharia de Materiais. / Cristais líquidos com geometria molecular em forma de disco ("disk like") possuem uma ampla gama de aplicações em eletrônica molecular, como por exemplo: fotocondutores, OLEDs, células solares fotovoltaicas e sensores químicos, devido a sua elevada organização, excelente transporte de cargas e estabilidade térmica. Na presença de agentes externos, como temperatura e campos elétricos, a orientação dos cristais líquidos é afetada, produzindo um sinal óptico que pode ser facilmente visualizado por técnicas empregues em sensores ópticos: absorção óptica e emissão/luminescência. Neste contexto, compostos contendo como centro [1,3,5]-triazinas foram projetados de maneira a exibir propriedades luminescentes e semicondutoras, bem como fases líquido-cristalinas, sendo bons candidatos para emprego em materiais funcionais discóticos. Neste trabalho é apresentada a síntese e caracterização de compostos baseados no heterociclo tris-[1,2,4]-triazolo-[1,3,5]-triazina (TTT) proposto como centro para cristais líquidos discóticos, obtidos de um novo bloco de construção o qual pode ser utilizado para obtenção de diversos materiais discóticos em apenas uma etapa. A estrutura química desse heterociclo foi inteiramente caracterizada por técnicas de FTIR (espectroscopía de infravermelho por transformada de Fourier), RMN (ressonância magnética nuclear) de 1H e 13C e EM (espectroscopía de massas). As propriedades térmicas foram avaliadas por TGA (análise termogravimétrica), DSC (calorimetria diferencial de varredura) e por MOLP (microscopia óptica de luz polarizada). Membranas foram preparadas por técnicas de “spin coating” e as propriedades ópticas foram obtidas por análises de espectroscopia de absorção (UV). Os compostos sintetizados exibiram forte fluorescência azul em solução. A condutividade iônica foi determinada por eletroquímica e os resultados obtidos demonstram um grande potencial para a aplicação destes materiais como sensores ópticos.

Orientador: Fábio Simões de Vicente / Banca: Agnaldo Aparecido Freschi / Banca: Tomaz Catunda / Resumo: O processo sol-gel permite a produção de materiais Híbridos Orgânicos/Inorgânicos para aplicações em óptica e fotônica. Materiais Híbridos de Sílica/orgânico unem propriedades da Sílica e dos polímeros orgânicos e permitem a incorporação de diversas moléculas orgânicas na matriz, possibilitando a obtenção de materiais fotoativos avançados. Destas moléculas destacam-se os corantes lasers, como a Rodamina-B, que possui comprimento de onda de emissão bem definido e alta eficiência quântica. Neste trabalho preparamos materiais híbridos de sílica/orgânico via processo sol-gel utilizando como precursores os alcóxidos de silício 3-glicidoxipropiltrimetoxisilano (GPTS) e tetraetilortosilicato (TEOS). Amostras ainda na fase de sol foram dopadas com Rodamina-B em concentrações variando de 0,01 a 5 mmol/L. A fluorescência das amostras foi caracterizada mostrando dependência entre as características da emissão e a concentração de dopante. Os espectros de fluorescência sofrem um deslocamento para a região do vermelho com o aumento da concentração do dopante, enquanto a intensidade de emissão apresenta maior valor para a amostra com concentração de 0,5 mmol/L. Também foram determinados os coeficientes de absorção óptica, que apresentaram comportamento linear com a concentração. A partir das amostras (sol) foram produzidos xerogéis com concentrações de Rodamina-B de 0,0386 a 19,3 mmol/L. Os espectros de fluorescência destes xerogéis também apresentaram deslocamento para a região do vermelho... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Organic-Inorganic Hybrid Materials prepared by sol-gel process have applications in different areas such as optics and photonics. Silica/organic hybrid materials combine the properties from the silica and the organic polymers and can be doped with organic molecules with different optical properties, allowing preparation of advanced photoactive materials. In the wide range of photoactive organic materials one of interest is the Rhodamine-B, a laser dye which presents tunable emission and high quantum yield. In this work we have produced hybrid silica/organic samples derived from 3-glycidoxypropyltrimethoxysilane (GPTS) and tetraethylorthosilicate (TEOS) by sol-gel process. Silica/organic sols were doped with Rhodamine-B concentrations ranging from 0.01 to 5 mmol/L. The fluorescence spectra of the samples were characterized and a relationship between emission characteristics and dopant concentration has been observed. A red shift in the wavelength emission was observed, as the dopant concentration increased and the maximum emission intensity was achieved for the sample with concentration of 0.5mmol/L. Were determined the optical absorption coefficients that showed a linear relation with the concentration. The sol samples were dried and xerogels were obtained and the new concentrations of Rhodamine-B in the solid matrix were determined, ranging from 0.0386 to 19.3 mmol/L. The fluorescence spectra of the xerogels were characterized, showing a red shift as the dopant concentration increased and the maximum emission intensity was achieved for the xerogel with concentration of 6.56 mmol/L. The optical absorption coefficients of these xerogels showed a linear behavior with the dopant concentration. Random laser action for the xerogel with concentration of 19.3 mmol/L was measured using an pulsed laser (532 nm, 8ns), ... (Complete abstract electronic access below) / Mestre

Atualmente os maiores gastos da citricultura concentram-se na sanidade do pomar. Os custos fitossanitários, juntamente com fertilizantes, ultrapassam 60% do custo da produção. O controle de doenças como a Morte Súbita dos Citros (MSC), Declínio e o Greening, também conhecida como Huanglongbing, são feitos de forma visuais os que conferem ao método um elevado grau de subjetividade e imprecisão. O presente trabalho teve por finalidade desenvolver uma metodologia rápida e segura de diagnóstico para as doenças acima citadas utilizando espectroscopia de fluorescência e fluorescência induzida por laser (FIL). Foram utilizados neste estudo dois porta-enxertos, Cravo e Cleópatra, e quatro variedades de copa, Pêra, Natal, Valência e Hamilim. As doenças estudadas também foram classificadas em diferentes níveis de severidade. O índice 1 foi utilizado para baixa severidade da MSC, e 2 para o estágio mais avançado da doença. Para o Greening fez-se uma distinção entre folhas sintomáticas e assintomáticas. A doença Declínio dos Citros também fez parte deste estudo em função dos sintomas serem muito parecidos aos da fase inicial de MSC, sendo este um problema sério para as avaliações de contaminação no campo. Inicialmente, foram realizados estudos a respeito da emissão de fluorescência dos pigmentos fotossintéticos provenientes dos extratos de folhas doentes e sadias através de um fluorímetro de bancada. Para as análises foliares utilizou-se um sistema portátil de espectroscopia de fluorescência induzida por laser desenvolvido no LOLEIA. O estudo dos extratos revelaram que as maiores variações ocorrem nas concentrações de clorofila a e b e que os pigmentos acessórios como ? e ?- caretonos não fluorescem no comprimento de onda estudado. De uma maneira geral, é possível dizer que plantas doentes sofrem uma diminuição das clorofilas a e b. Os resultados das folhas foram analisados por um método estatístico de Análises de Componentes Principais (PCA) para facilitar a observação das alterações espectrais. Através da metodologia desenvolvida foi possível a identificação e a distinção das doenças com nível de acerto superior a 93%. Contudo, estes resultados contribuíram para o desenvolvimento de uma metodologia para diagnóstico das doenças de citros de uma forma rápida, precisa e economicamente viável. / Currently the largest portion of money applied to citriculture focus on health of the orchard. The phytosanitary costs, along with fertilizers, exceed 60% of the production cost. The control of diseases such as Sudden Death of Citrus (SDC), Decline and Greening, also known as Huanglongbing, is done by visual inspection, which confers to the method a high level of subjectivity and imprecision. This work was intended to develop a quick and safe methodology of diagnosis for the diseases mentioned above using fluorescence spectroscopy and laser-induced fluorescence (LIF). It was used in this study two rootstocks, Cravo and Cleopatra, and four varieties of crown: Pera, Natal, Valencia and Hamlin. The diseases studied were also classified into different levels of severity. The index 1 was used for low severity SDC, and 2 for a more advanced stage of this disease. For Greening has been made a distinction between symptomatic and asymptomatic leaves. The Decline of Citrus disease was also part of this study because its symptoms are very similar to those in the initial phase of SDC, and this is a serious problem for the evaluation of contamination in the field. Initially, studies have been made on the fluorescence of photosynthetic pigments from the extracts of ill and healthy leaves using a non-portable fluorimeter. For the leaf analyses we used a portable system of laser-induced fluorescence spectroscopy developed in LOLEIA. The study of extracts revealed that the largest cariations occur in the concentrations of chlorophyll a and b, and that acessory pigments like ? and ?-carotones do not fluoresce in the wavelength used. In general, it is possible to say that ill plants have a decrease of chlorophylls a e b. The leaf results were analyzed through the statistical method Principal Component Analysis (PCA) in order to facilitate the observation of spectral changes. Through the developed methodology it was possible to identify and distinguish the diseases with efficiency greater than 93%. However, these results contributed for the development of a methodology for diagnosis of citrus diseases in a quick, accurate and economically viable way.

Submitted by ANA KARLA MIRANDA PRADO null (karlinhamprado@hotmail.com) on 2017-04-24T20:41:26Z No. of bitstreams: 1 DissertaçãoAnaCorrecao final.pdf: 2950511 bytes, checksum: 267c66c96725c6306041b2f73554ba8d (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-04-26T13:59:46Z (GMT) No. of bitstreams: 1 prado_ak_me_sjrp.pdf: 2950511 bytes, checksum: 267c66c96725c6306041b2f73554ba8d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-26T13:59:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 prado_ak_me_sjrp.pdf: 2950511 bytes, checksum: 267c66c96725c6306041b2f73554ba8d (MD5) Previous issue date: 2017-03-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Corynebacterium pseudotuberculosis é uma bactéria gram-positiva causadora da Linfadenite Caseosa (LC) em caprinos e ovinos. A LC é uma doença infectocontagiosa crônica que prejudica a produção de carne, leite e lã em vários países, incluindo o Brasil. Uma vez que o tratamento da doença é muitas vezes inviável e ineficaz, a eliminação dos animais infectados no rebanho tem sido uma das principais medidas de contenção da enfermidade. Vários grupos de pesquisa vem se dedicando ao estudo de C. pseudotuberculosis visando a identificação de fatores moleculares envolvidos na virulência e patogenicidade durante a infecção. Embora alguns destes componentes já tenham sido descritos, como a fosfolipase D, novos estudos são necessários para que seja possível compreender as diversas interações regulatórias que são intrínsecas a esse microrganismo, assim muitos grupos de pesquisas produzem de forma recombinante a enzima transaldolase de C. pseudotuberculosis, envolvida na glicólise e no metabolismo das pentoses-fosfato a fim de buscar inibidores que possam controlar sua ação enzimática. Nesse contexto, os flavonoides são compostos polifenólicos encontrados nas plantas e, em alguns casos, atuam como inibidores de infecções por microrganismos. Assim, a motivação deste trabalho consistiu em identificar e quantificar uma possível interação do flavonoide morina com a enzima transaldolase, a fim de bloquear a atividade de replicação e infecção de LC. Deste modo os objetivos desse estudo foram realizar a expressão, purificação, a caracterização da estrutura secundária e estabilidade térmica por dicroísmo circular e verificação de interação entre transaldolase e morina por espectroscopia de fluorescência da proteína transaldolase. Os resultados da expressão mostram que a proteína transaldolase com 40kDa foi purificada em cromatografia de afinidade seguida de cromatografia de exclusão molecular. A sua estrutura secundária apresentou 74% de alfa hélice, 0% de folha beta, 7,9% de alças e 18,1 % de estruturas aleatórias. A análise da desnaturação térmica mostrou que a temperatura de melting foi de 48°C, indicando que a proteína é estável. A interação entre Morina e Transaldolase apresentou mecanismo de supressão estáticodinâmico, com uma constante de associação moderada e um sítio de interação. A análise termodinâmica mostrou que o processo de interação é espontâneo ∆G<0, endotérmico ∆H>0 e entrópico ∆S<0. Assim, sabendo-se que a proteína Transaldolase é a proteína chave no processo das infecções por Corynebacterium pseudotuberculosis e considerando as propriedades antibacterianas e antiproliferativas do flavonoide morina, sugere-se que este composto possa ser investigado para os seus usos específicos. Sugere-se que a interação da transaldolase com a Morina possa exercer um papel de carreador ou seja, uma forma pela qual a proteína leva a molécula para o local que ela atua, e, assim, a Morina consiga realizar sua função antiproliferativa e bloquear as infecções. / Corynebacterium pseudotuberculosis is a gram-positive bacterium which causes Caseous Lymphadenitis (CL) in small ruminants. CL is a chronic infectious disease which impairs meat, whool and milk production in many countries including Brazil. Once the treatment for CL is not efficient, removing affected animals from herds represents one of the major strategies to prevent the disease from spreading. Many research groups have been looking for molecular components in C. pseudotuberculosis that are involved in virulence and infection, among which phospholipase D stands out as the major one described so far. However, new studies are necessary for the understanding of the microorganism’s biology, including its intrinsic regulation mechanisms. The object of study of this work was the enzyme transaldolase involved in glycolysis and in the metabolism of pentoses-phosphate, necessary for the formation of nucleic acids that the bacterium uses to replicate in order to find inhibitors that can control its enzymatic action. In this context, flavonoids are polyphenolic compounds found in plants and, in some cases, act as inhibitors of infections by microorganisms. Thus, the purpose of this work is to identify and quantify a possible interaction of the flavonoid morin with the enzyme transaldolase, in order to block LC´s replication activity and infection. The objectives of this study included expression and purification of C. pseudotuberculosis´s transaldolase protein, the characterization of the secondary structure and thermal stability by circular dichroism and the study of the interaction between transaldolase and morin by fluorescence spectroscopy. The transaldolase protein, with approximately 40kDa, was purified on affinity chromatography followed by molecular exclusion chromatography. Its secondary structure had 74% of alpha helix, 0% of beta sheet, 7.9% of loops (turn) and 18.1% of random structures. The thermal denaturation analysis showed that the melting temperature is 48 °C, indicating that the protein is stable. The interaction between Morina and Transaldolase presented a static-dynamic suppression mechanism, with a moderate association constant and one interaction site. The thermodynamic analysis showed that the interaction process is spontaneous ΔG <0, endothermic ΔH> 0 and entropic ΔS <0. Thus, with the knowledge that Transaldolase protein is the key protein in the process of Corynebacterium pseudotuberculosis infections and considering the antibacterial and antiproliferative properties of the flavonoid morine, it is suggested that this compound can be investigated for its specific uses. It is suggested that the interaction of transaldolase with Morina may play a role of carrier, that is, a way in which the protein takes the molecule to the place it acts, and thus Morina can perform its antiproliferative function and block the Infections.

Orientador: Rita de Cassia Loiola Cordeiro / Coorientador: Jonas de Almeida Rodrigues / Banca: Lourdes Aparecida dos Santos Pinto / Banca: Michele Baffi Diniz / Resumo: O objetivo da presente pesquisa foi avaliar o desempenho dos métodos baseados na captação de fluorescência induzida por luz (DIAGNOdent (DD) , DIAGNOdent Pen (DDP), câmera Vista Proof (VP) e Quantitative Light-induced Fluorescence (QLF) na detecção de lesões de cárie residual após a remoção de tecido cariado dentinário. Foram utilizados 94 terceiros molares humanos hígidos. Foram excluídos aqueles que apresentavam, áreas hipoplásicas, restaurações, selantes ou manchas. O esmalte oclusal foi seccionado horizontalmente e a superfície dentinária subjacente foi polida a fim de remover restos de esmalte remanescente e alisar a superfície. Os ápices radiculares foram preenchidos com resina composta e todo o restante do dente recoberto por resina epóxi e verniz ácido-resistente deixando uma janela de dentina onde foi desenvolvido a lesão de cárie artificial utilizando um protocolo microbiológico in vitro desenvolvido para esse fim. Todos os espécimes foram avaliados por dois examinadores independentes, utilizarando o método de inspeção visual-tátil para determinar a presença ou ausência de lesão de cárie. Os espécimes foram aleatoriamente divididos em dois grupos (n=47) de acordo com o método de remoção da lesão: fresa em baixa rotação convencional e escavação manual. A quantidade de tecido removido foi determinada de acordo com os parâmetros determinados pelos exames visual e tátil. As lesões também foram examinadas pelos métodos de indução de fluorescência: DD; DDpen; VP e QLF, antes do desenvolvimento da lesão, com o dente cariado e após a remoção, para determinar a presença ou ausência de lesão cariosa e de remanescente após a remoção. Após todas as avaliações, os dentes foram seccionados perpendicularmente ao longo eixo, no sentido mesio-distal, e essas secções de dentes foram observadas e fotografados em lupa estereoscópica... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to evaluate the performance of light-induced fluorescence methods (DIAGNOdent (DD), DIAGNOdent Pen (DDP), Proof camera View (PV) and Quantitative Light-induced Fluorescence (QLF) to detect residual caries. 94 human molars were used . Teeth with those who had, hypoplastic areas, fillings, sealants or stains were excluded. The occlusal enamel was sectioned perpendicular to the long axis of the tooth using a low-speed diamond saw under water cooling (Isomet, Buehler Ltd, Lake Bluff, IL, USA) to expose adjacent dentin. The dentin surface was wet ground flat with 180 and 400 grit silicon carbide abrasive paper until all enamel had been removed. Samples were covered with acid-resistant nail varnish leaving an uncoated window in the center of the dentin surface for caries development. All specimens were evaluated by two independent observers,in use the method of visual-tactile inspection to determine the presence or absence of caries. The specimens were randomly divided into two groups (n = 47) according with the method of removal of the lesion: at low speed and conventional hand excavation. The amount of removed tissue was determined in accordance with the parameters determined by visual and tactile examinations. The lesions were also examined by fluorescence methods: DD; DDpen, VP and QLF, at baseline, after induction lesion of caries like lesion and after caries removal to determine the presence or absence of carious lesion and remaining after the removal. After all evaluations, the teeth were sectioned perpendicular to the long axis in the mesio-distal direction, and those sections of teeth were observed and photographed under a stereomicroscope with 30x increase by an examiner independent. Was determined by the visual inspection of images of the magnifying glass and also with the aid of an explorer, the presence or absence of caries, to determining the gold standard... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Rita de Cássia Loiola Cordeiro / Banca: Lourdes Aparecida Martins dos Santos-Pinto / Banca: Silvio Issao Myaki / Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar o desempenho de sistemas de diagnóstico óptico para detecção de lesões de cárie. No estudo in vitro, a viabilidade da transiluminação com laser infravermelho próximo (TI-NIR) para o diagnóstico de lesões iniciais de cárie foi avaliada. Dois examinadores avaliaram 94 sítios na superfície oclusal de molares e pré-molares humanos recém extraídos, classificados com escore 0, 1, 2 ou 3 ICDAS, utilizando um protótipo TI-NIR, a radiografia (RX), o DIAGNOdent Pen (DDPen) e o Quantitative Light-induced Fluorescence (QLF). Para validação, a análise histológica foi considerada como o padrão ouro. A reprodutibilidade intra e interexaminador foi avaliada com o coeficiente Kappa. Concluiu-se que o desempenho da TI-NIR bom, e constitui-se como uma alternativa válida e confiável para o diagnóstico de lesões iniciais na superfície oclusal de dentes permanentes. No segundo estudo, in vivo, o objetivo foi avaliar o desempenho do exame visual com os critérios Nyvad (EV), radiografia interproximal (RX), dispositivo de fluorescência a laser (DIAGNOdent Pen - DDPen) e suas associações no diagnóstico de lesões proximais em dentes decíduos. Para isso, foram selecionadas 45 crianças (n=59 superfícies) de ambos os sexos com idades entre 5 e 9 anos que apresentavam molares deciduos com sinais sugestivos da presença de lesão de cárie ou hígidos. As superfícies foram avaliadas clinicamente e codificadas segundo os critérios Nyvad, e logo depois com o DDPen. O exame radiográfico foi realizado apenas naquelas superfícies codificadas com os escores Nyvad 2, 3, 5 ou 6. Lesões de cárie ativas e/ou com superfície descontinuada foram restauradas, considerando-se a profundidade da lesão como padrão de referência. O desempenho do exame visual, radiográfico e DDpen e suas associações... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to evaluate the performance of optical diagnostic systems for detection of caries lesions. In the in vitro study, the viability of the near infrared laser transillumination (TI-NIR) for diagnosis of incipient carious lesions was evaluated. Two examiners evaluated 94 sites in occlusal surface of molars and premolars freshly extracted, selected with score 0, 1, 2 or 3 ICDAS using the TI-NIR prototype, bitewing radiographs (RX), the DIAGNOdent Pen (DDPen) and Quantitative Light-induced Fluorescence (QLF). For validation, histological analysis was considered as the gold standard. The performance of TI-NIR was good, and its constitutes as a reliable and valid alternative for the diagnosis of early lesions in the occlusal surface of permanent teeth. In the second study, in vivo, the performance of the visual examination with the criteria Nyvad (EV), radiographs (RX), laser fluorescence device (DIAGNOdent Pen - DDPen) and their associations in the diagnosis of proximal lesions in deciduous teeth was evaluated. Were selected 45 children (n = 59 surfaces) of both sexes aged between 5 and 9 years who had deciduous molars with signs suggestive of the presence of caries or sound. The surfaces were evaluated clinically and scored with the Nyvad criteria, and DDPen. Radiographic examination was performed only on those surfaces scored with Nyvad 2, 3, 5 or 6. Caries active and / or discontinued surface were restored, considering the depth of the lesion as a reference standard. The performance of visual examination, and radiographic DDpen and their associations was good, but the use of the criteria NYVAD proved sufficient for the diagnosis of interproximal lesions. It could be observed that optical technologies appear to contribute positively in the diagnosis process in the diagnosis of caries. However, they should be considered as adjuncts to conventional methods in this process / Mestre

Orientador: Reinaldo Marchetto / Banca: Saulo Santesso Garrido / Banca: Vani Xavier de Oliveira Júnior / Resumo: O sistema ParE-ParD, identificado no plasmídeo RK2 de uma ampla gama de hospedeiros, é um sistema toxina-antitoxina (TA), sendo ParE (103 aminoácidos) a toxina e ParD (83 aminoácidos) a antitoxina. ParD é capaz de neutralizar a ação de ParE pela formação de um complexo estável, que também é eficaz na auto-repressão do operon parDE. ParE possui atividade citotóxica na replicação do DNA por interferir no mecanismo de ação da DNA girase. Diversos estudos demonstraram que ParD consiste de duas regiões estruturalmente distintas: uma N-terminal, bem ordenada que consiste no sitio de ligação do DNA e outra C-terminal, não estruturada, onde sugere-se ocorrer a ligação da toxina. Em relação à ligação com a toxina, um modelo atual de reconhecimento e ligação em sistemas TA invoca uma transição de fases desordenada-ordenada, na parte C-terminal da antitoxina, porém faltam dados que confirmem se este modelo de transição de fases desordenada-ordenada também pode ser aplicado para o sistema ParE-ParD. Neste sentido, este trabalho objetivou o design, a síntese e o estudo de interação de peptídeos derivados da toxina ParE, com peptídeos derivados da antitoxina ParD. Com base nas informações estruturais destas proteínas, sequências peptídicas derivadas de ParE e ParD foram projetadas, com o propósito de encontrar a estrutura mínima de ParD capaz de neutralizar a ação tóxica de ParE. As sequências peptídicas foram sintetizadas pela metodologia de fase sólida, purificadas e analisadas por HPLC e caracterizadas por espectrometria de massas. Os estudos de interação dos peptídeos foram realizados através de ensaios de cromatografia de afinidade e supressão de fluorescência. A fluorescência intrínseca dos peptídeos denominados ParEAC2 e ParEAC3 foi suprimida pelos derivados de ParD, evidenciando a formação de complexos estáveis entre as espécies, resultados... / Abstract: The ParE-ParD system represents a toxin-antitoxin module of the broad host range plasmid RK2. ParE (103 amino acids) is the toxin, whereas ParD (83 amino acids) constitutes the antidote able to neutralize ParE by forming a stable complex that is also effective in the autorepression of the parDE operon. The ParE toxin inhibits DNA gyrase activity and thereby blocks DNA replication. Several studies have shown that ParD consists of two structurally distinct regions: an N-terminal, orderly, consisting of the DNA binding site and another C-terminus, unstructured, where it is suggested to occur toxin binding. For binding with toxin, a current model of recognition and binding in TA systems invokes a disorder-to-order transition in the antitoxin. Specifically, a disordered region of the free antitoxin is organized into a well-defined secondary structure upon binding to its cognate toxin. But, no available data that proves the application of disorder-to-order transition model for ParE-ParD system. Therefore, this work aims to study the interaction of the ParE protein and its analogues with peptides from ParD antitoxin. Based on the structural information's of these proteins, peptide sequences derived from ParE and ParD were designed in order to find the minimal ParD structure able to neutralize the toxic effect of ParE. The peptide sequences were synthesized by solid phase methodology, purified and analyzed by HPLC and characterized by mass spectrometry. The interaction studies were performed by affinity chromatography and fluorescence quenching assays. The intrinsic fluorescence of the denominated ParEAC2 and ParEAC3 peptides was quenched by ParD derivatives, evidencing complex formation, results confirmed by affinity chromatography assays. Molecular Docking studies demonstrated that the interaction mode of ParEAC3-ParDAC3 complex was consistent with the obtained crystallographic complex ParE-ParD of... / Mestre

Orientador: Osmir Batista de Oliveira Junior / Banca: Andrea Abi-Rached Dantas / Banca: Michele Baffi Diniz / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar o desempenho clínico da câmera de fluorescência VistaProof, da câmera intraoral digital Vista Cam e do critério ICDAS para detecção de cárie oclusal. Cento e sete dentes posteriores de pacientes adultos foram examinados visualmente e por meio de radiografias digitais por dois examinadores, que os classificaram de acordo com a presença ou ausência de cárie oclusal, em dois momentos, a fim de determinar a reprodutibilidade intra e interexaminadores. Esta avaliação foi considerada padrão-ouro. Os dentes foram então avaliados pelo critério visual ICDAS, fluorescência e imagem digital ampliada por outros dois examinadores, em dois momentos. Para estudo da efetividade estimou-se a sensibilidade, especificidade, razão de verossimilhança positiva e negativa. Construiu-se a curva ROC e estimou-se sua área (AUROC). A concordância intra e interexaminadores para a microcâmera intraoral e para o ICDAS foi ótima (κ˃0,81) e no mínimo boa para a câmera VistaProof (κ˃0,63). Houve excepcional capacidade discriminante para a imagem intraoral (AUROC=0,93) e para o ICDAS (AUROC=0,91) e diferença estatística não significativa entre eles (z= 0,35; p=0,73). A fluorescência apresentou capacidade discriminante aceitável (AUROC=0,78), porém menor que os demais. A razão de verossimilhança positiva encontrada para a fluorescência foi de apenas 2,32, enquanto que para a imagem intraoral foi 20,58 e para o ICDAS, 58,11. Pode-se concluir que a reprodutibilidade intra e interexaminadores para o ICDAS e para os métodos de detecção de cárie utilizados foi considerada adequada. Os três apresentaram adequado desempenho clínico, sendo este melhor para o ICDAS e para a imagem intraoral. / Abstract: The aim of this study was to evaluate the clinical performance of the VistaProof fluorescence camera, Vista Cam digital intraoral camera and ICDAS criterion for occlusal caries detection. One hundred and seven posterior teeth of adult patients were examined visually and by means of digital radiographs by two examiners who rated them according to the presence or absence of occlusal caries in two stages in order to determine the reproducibility intra and interexaminers. This evaluation was considered the gold standard. The teeth were then evaluated by the visual criterion ICDAS, fluorescence and digital image magnified by two other examiners, on two occasions. The effectiveness of the methods was estimated by sensitivity, specificity, positive and negative likelihood ratio. For each method was constructed ROC curve and its area (AUROC) was estimated. The intra and interexaminer agreement for the intraoral camera and the ICDAS was excellent (κ˃0.81) and at least good for the VistaProof camera (κ˃0.63). There was exceptional discrimination capacity for intraoral image (AUROC=0.93) and for ICDAS (AUROC=0.91) and no significant statistical difference between them (z=0.35, p=0.73). The fluorescence showed acceptable discrimination capacity ROC (AUROC=0.78), but lower than the others. The positive likelihood ratio found for the fluorescence was only 2.32, while for intraoral image was 20.58 and the ICDAS, 58.11. It can be concluded that the reproducibility intra and interexaminer to ICDAS and for caries detection methods utilized was considered adequate. The three had good clinical performance, which is better for the ICDAS and for intraoral image. / Mestre