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Desenvolvimento de um método de solubilização de nanotubos de carbono e sua aplicação em imunoensaios

Pereira, Stefane Reis 30 September 2016 (has links)
Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-03-08T11:59:37Z No. of bitstreams: 4 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação Parcial - Introdução.pdf: 125017 bytes, checksum: f6034259b28f1b1484d7e6328f8839cb (MD5) Dissertação Parcial - Rev.Literatura.pdf: 277213 bytes, checksum: 5f755a4079de103d9bffa8b0eaa87e40 (MD5) Dissertação Parcial - Conclusão.pdf: 116246 bytes, checksum: d050e092639e22f51708c08c27d25c80 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-03-08T11:59:57Z (GMT) No. of bitstreams: 4 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação Parcial - Introdução.pdf: 125017 bytes, checksum: f6034259b28f1b1484d7e6328f8839cb (MD5) Dissertação Parcial - Rev.Literatura.pdf: 277213 bytes, checksum: 5f755a4079de103d9bffa8b0eaa87e40 (MD5) Dissertação Parcial - Conclusão.pdf: 116246 bytes, checksum: d050e092639e22f51708c08c27d25c80 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-03-08T12:01:01Z (GMT) No. of bitstreams: 4 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação Parcial - Introdução.pdf: 125017 bytes, checksum: f6034259b28f1b1484d7e6328f8839cb (MD5) Dissertação Parcial - Rev.Literatura.pdf: 277213 bytes, checksum: 5f755a4079de103d9bffa8b0eaa87e40 (MD5) Dissertação Parcial - Conclusão.pdf: 116246 bytes, checksum: d050e092639e22f51708c08c27d25c80 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-08T12:01:01Z (GMT). No. of bitstreams: 4 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação Parcial - Introdução.pdf: 125017 bytes, checksum: f6034259b28f1b1484d7e6328f8839cb (MD5) Dissertação Parcial - Rev.Literatura.pdf: 277213 bytes, checksum: 5f755a4079de103d9bffa8b0eaa87e40 (MD5) Dissertação Parcial - Conclusão.pdf: 116246 bytes, checksum: d050e092639e22f51708c08c27d25c80 (MD5) Previous issue date: 2016-09-30 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Since they were discovered, the carbon nanotubes have attracted the interest of many researchers due to their physical, chemical and electronic properties that allow its application in different areas of knowledge, including biomedical applications. Carbon nanotubes may be used as nanosensors and used as pathogens detection sensor. However, for application in immunoassays there must be a good solubilization of these carbon nanotubes. The problem for a good solubilization is aggregation of carbon nanotubes which reduces the important properties of these materials, proposals for a single nanotube. This study sought a method for solubilization of carbon nanotubes and their application in lateral flow systems. For this they used recombinant proteins ( "protein 2" rich in Histidine, HRP2) already obtained in previous work. In addition, the physical characteristics of carbon nanotubes was obtained through analysis by Raman spectroscopy, absorption spectroscopy in the ultraviolet-visible region (UV-Vis) spectroscopy in the infrared Fourier transform (FTIR) was performed. And its dispersion and functionalization was measured by flow cytometry. This work showed that methodology dispersion of carbon nanotubes allows their use in lateral flow systems. What makes it interesting not only for the detection of malarial antigens demonstrated in this study, but also for other applications in detection methods. This carbon nanotube solubilization methodology makes these nanotubes applicable in Immunoassays, chromatography and molecular tests. / Desde que foram descobertos, os nanotubos de carbono têm despertado o interesse de muitos pesquisadores devido às suas propriedades físicas, químicas e eletrônicas que possibilitam sua aplicação nas mais diversas áreas de conhecimento, incluindo aplicações biomédicas. Os nanotubos de carbono podem ser utilizados como nanosensores e ser utilizado como sensor de detecção de patógenos. Contudo, para sua aplicação em imunoensaios é preciso que haja uma boa solubilização destes nanotubos de carbono. O problema para uma boa solubilização é a agregação de nanotubos de carbono que reduz as importantes propriedades desses materiais, propostas para um único nanotubo. Este trabalho buscou desenvolver nanotubos de carbono solúveis aplicáveis em sistemas de fluxo lateral. Para isso foram utilizadas proteínas recombinantes (“Proteína 2” rica em Histidina, HRP2) obtidos em trabalhos anteriores. Além disso, foi realizada a caracterização física dos nanotubos de carbono através das análises por espectroscopia Raman, espectroscopia de absorção na região do ultravioleta-visível (UV-Vis), espectroscopia na região do infravermelho com transformada de Fourier (FTIV). Sua capacidade de dispersão e funcionalização foi medida por citometria de fluxo. Este trabalho mostrou que esta metodologia de solubilização de nanotubos de carbono permite sua utilização em sistemas de fluxo lateral, o que o torna interessante não só pela detecção de antígenos maláricos demonstrados neste estudo, mas também por outras aplicações em métodos de detecção. Esta metodologia de solubilização de nanotubos de carbono torna estes materiais aplicáveis em imunoensaios, cromatografias e testes moleculares.
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Polímeros biomiméticos nanomagnéticos com acesso restrito (RAMIP magnéticos) obtidos por síntese semicovalente e não covalente visando aplicação em imunossensores e imunoensaios / Nanomagnetic biomimetic polymers with restricted access (magnetic RAMIP) obtained by semicovalente and non-covalent synthesis aiming application in immunoassays and immunosensors

Pupin, Rafael Rovatti [UNESP] 04 August 2017 (has links)
Submitted by Rafael Rovatti Pupin null (rafaelpupin@hotmail.com) on 2017-08-29T13:22:26Z No. of bitstreams: 1 Dissertação vs Final_Rafael R Pupin.pdf: 10462297 bytes, checksum: 951bd5aafaf22295492104d7289dc376 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-08-29T18:21:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 pupin_rr_me_araiq.pdf: 10462297 bytes, checksum: 951bd5aafaf22295492104d7289dc376 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-29T18:21:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 pupin_rr_me_araiq.pdf: 10462297 bytes, checksum: 951bd5aafaf22295492104d7289dc376 (MD5) Previous issue date: 2017-08-04 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A biotina (vitamina B7) pode ser acoplada a diferentes tipos de moléculas e, ainda assim, ser reconhecida seletivamente pelas proteínas avidina e estreptavidina devido à alta constante de afinidade que existe entre elas (Ka = 1,0×1015 L mol-1). Assim, essa interação proporciona excelente aumento na sensibilidade de várias análises; o que leva ao desenvolvimento métodos analíticos para determinação de diferentes compostos que são biotinilados. O uso de materiais biológicos, como anticorpos ou proteínas, em análises de rotina se torna muitas vezes dispendioso e, devido à baixa estabilidade das biomoléculas em condições adversas às mesmas, iniciou-se a síntese de materiais que possam mimetizar as interações biológicas de reconhecimento; o que vem sendo feito com sucesso pelos polímeros molecularmente impressos (MIP). Esses polímeros apresentam vantagens em relação às biomoléculas por possuirem baixo custo, fácil preparação e alta resistência mecânica e térmica. Assim, esta dissertação aborda a síntese, caracterização, otimização e aplicação de diferentes MIP que possuem biotina como molécula alvo. Os estudos iniciais focaram na síntese do MIP magnético (MMIP) com acesso restrito (RAMIP) para realizar exclusão proteica pela modificação do polímero com albumina do soro bovino (BSA) e polietileno glicol (PEG). Enquanto o RAMIP recoberto com BSA não apresentou bons resultados nos experimentos, o RAMIP recoberto com PEG, após otimização, apresentou resultados altamente satisfatórios na exclusão proteica (com valores na faixa de 98 até 99,4 % de exclusão) e bons resultados na religação da biotina (2,0 mg de biotina por grama de polímero). A segunda parte do trabalho foi focada no estudo da influência do tipo de impressão molecular (não covalente e semicovalente) na capacidade do reconhecimento seletivo dos MMIP. Para isso, foi sintetizado previamente o complexo analito-monômero (por meio de uma ligação covalente entre a biotina e o álcool alílico como monômero funcional). Esse MMIP foi submetido aos ensaios de reconhecimento da biotina utilizando-se interações não covalente, sendo denominado de MMIP semicovalente; cujos resultados foram comparados com MMIP para biotina não covalente otimizado previamente. O MMIP semicovalente apresentou uma constante de afinidade pela biotina de 5,9×104 L mol-1, enquanto para o MMIP não covalente foi de 2,4×103 L mol-1. Finalmente, o MIP e o MMIP para biotina (sintetizados via não covalente) foram aplicados em ensaios biomiméticos utilizando as técnicas de ELISA e Fluxo Lateral. Nos ensaios ELISA avaliou-se a capacidade de reconhecimento do MMIP pela biotina-HRP e DNA biotinilado (das bactérias E. coli e Salmonella). Para biotina-HRP, o MMIP apresentou retenção (na faixa de 5,0 até 2500 ng mL-1), e uma alta intensidade de sinal. Para o DNA biotinilado, de ambas bactérias, o MMIP mostrou maior retenção do amplicon quando comparado ao NIP. A aplicação do MIP nos dispositivos de Fluxo Lateral é inédita. Assim, após a otimização de todos os parâmetros para desenhar a linha de teste contendo MIP (como solvente, massa, soluções, etc.), avaliou-se a resposta do sistema para diferentes moléculas biotiniladas: para BSA-biotina e o corante Atto 655-biotina os resultados não foram satisfatórios; para biotina-HRP, biotina 4-fluoresceína e os amplicons, MIP apresentou boa resposta no reconhecimento seletivo. Assim, os MIP mostraram-se promissores no desenvolvimento de ensaios biomiméticos. / Biotin (vitamin B7) can be attached with different types of molecules and still be selectively recognized by avidin/streptavidin proteins due to the high affinity constant between them (Ka = 1,0×1015 L mol-1). Thus, this interaction provides an excellent increase in the sensitivity of analyzes; which leads to the development of analytical methods for the determination of different biotinylated compounds. The use of biological materials, such as antibodies or proteins, in analyzes is often expensive and has low stability of biomolecules under adverse conditions, which has led to the synthesis of materials that can mimic the biological interactions of recognition; which has been successfully made by molecularly printed polymers (MIP). These polymers have advantages over biomolecules because they have low cost, easy preparation and high mechanical and thermal resistance. Thus, this dissertation explores the synthesis, characterization, optimization and application of different MIP that has biotin as the target molecule. Initial studies focused on the synthesis of magnetic MIP (MMIP) with restricted-access (RAMIP) to evaluate protein exclusion by modifying the polymer with bovine serum albumin (BSA) and polyethylene glycol (PEG). While RAMIP coated with BSA didn’t present good results in the experiments, the RAMIP coated with PEG, after optimization, presented highly satisfactory results in protein exclusion (with values ranging from 98 to 99.4% of protein exclusion) and good results in the rebiding of biotin (2.0 mg of biotin per gram of polymer). The second part of the work was focused on the study of influence of molecular imprinting (non-covalent and semi-covalent) on the capacity of the selective recognition of MMIP. For this, the analyte-monomer complex was previously synthesized (by a covalent bond between biotin and allyl alcohol as functional monomer). This MMIP was submitted to the biotin recognition assays using non-covalent interactions, being nominated as semi-covalent MMIP; whose results were compared with non-covalent biotin MMIP previously optimized. The semi-covalent MMIP had an affinity constant for biotin of 5,9×104 L mol-1, while for non-covalent MMIP it was 2,4×103 L mol-1. Finally, MIP and MMIP for biotin (synthesized via non-covalent) were applied in biomimetic assays using ELISA and Lateral Flow techniques. In the ELISA assays, it was evaluated MMIP recognition capacity by biotin-HRP and biotinylated DNA (of E. coli and Salmonella bacteria). For biotin-HRP, MMIP showed good retention results (in the range of 5.0 to 2500 ng mL-1), and good signal intensity. For biotinylated DNA of both bacteria, MMIP showed higher retention of the amplicon when compared to MNIP. The application of MIP in Lateral Flow devices it wasn’t reported before. Thus, after optimizing all the parameters to design the test line containing MIP (as solvent, mass, solutions, etc.), the system's response to different biotinylated molecules was evaluated: for BSA-biotin and Atto 655-biotin dye the results were not satisfactory; for biotin-HRP, biotin 4-fluorescein and the amplicons MIP showed good selective recognition response. Thus, the imprinted polymers are promising materials in the development of biomimetic assays. / FAPESP: 2015/04367-1 / FAPESP: 2016/07250-0
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Desenvolvimento de um sistema em fluxo lateral para o diagnóstico de malária causada por Plasmodium falciparum

Mariúba, Luis André Morais 10 September 2010 (has links)
Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-09-20T13:09:53Z No. of bitstreams: 1 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-09-20T13:10:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-09-20T13:10:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-20T13:10:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Previous issue date: 2010-09-10 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Traditionally, confirmatory diagnosis of malaria is made by microscopic examination of blood. Therefore, the diagnosis of the disease may be complicated by the lack of people or equipment necessary to obtain a fast and reliable diagnosis, especially in areas of difficult access. For these and other reasons, rapid, practical and sensitive methods have been developed, such as immunochromatographic strips. Therefore, this work aimed to develop a lateral flow system for the diagnosis of malaria caused by Plasmodium falciparum. So, polyclonal and monoclonal antibodies against the protein HRP2 (Histidine rich protein 2) of Plasmodium falciparum were produced using a recombinant protein that it fused to a glutathione-S-transferase (rHRP2-GST, obtained in previous work). After hibridomas production, only 20 responded against the protein rHRP2-GST, and of these only four showed some react ivity against the native protein. The monoclonal antibody that reacted better on this last ELISA test and in an immunofluorescence was used on a lateral flow system standardized here. For this standardization, the system was first mounted in lateral flow competitive format followed by a sandwich system using polyclonal anti-rHRP2-GST. In assays using red blood cells parasitized by P. falciparum, positive results were obtained (detection of the infection in the immunochromatographic strip) using polyclonal antibodies. The system was stable within the test period, thus demonstrating that possibly in a controlled product ion environment, this lateral flow system could remain stable for a time suitable for marketing / Tradicionalmente, o diagnóstico confirmatório da malária é feito pelo exame microscópico do sangue. Logo, o diagnóstico da doença pode ser complicado com a falta de pessoas ou equipamentos necessários para a obtenção de um diagnóstico confiável e rápido. Por esta e outras razões, métodos rápidos, práticos e sensíveis vêm sendo desenvolvidos, como, por exemplo, as fitas imunocromatográficas. Este trabalho teve como objetivo o desenvolvimento de um sistema em fluxo lateral para o diagnóstico de malária causada por Plasmodium falciparum. Logo, anticorpos policlonais e monoclonais contra a proteína HRP2 (“Histidine rich protein 2”) de Plasmodium falciparum foram produzidos utilizando para isso uma proteína recombinante desta fusionada a uma cauda de glutationa-S-transferase (rHRP2-GST, obtida em trabalhos anteriores). Após a obtenção dos hibridomas, apenas 20 responderam contra a proteína rHRP2-GST, e dentre estes apenas 4 apresentaram alguma reatividade contra a proteína nativa. O anticorpo monoclonal que melhor reagiu a este ultimo ELISA e em um ensaio de imunofluorescencia foi utilizado em um sistema de fluxo lateral padronizado nesta tese. Para esta padronização, foi montado primeiramente um sistema em fluxo lateral em formato competitivo seguido de um sistema em sanduíche utilizando anticorpos policlonais anti-rHRP-GST. Nos ensaios utilizando hemácias parasitadas por P. falciparum, foram obtidos resultados positivos (detecção da infecção na fita imunocromatográfica) usando os anticorpos policlonais. O sistema apresentou estabi l idade dentro do período de teste, demonstrando assim que possivelmente, em um ambiente de produção controlado, este sistema em fluxo lateral poderia permanecer estável por um tempo satisfatório para sua comercialização.
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Desenvolvimento e valida??o de testes de fluxo lateral para a detec??o de cultivares geneticamente modificados e de aflatoxinas em produtos agr?colas

Evangelista, Vanessa Olinto dos Santos 03 December 2015 (has links)
Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-07-06T20:16:17Z No. of bitstreams: 1 VanessaOlintoDosSantosEvangelista_TESE.pdf: 5760623 bytes, checksum: 180f27b8cf175c05011adf038ebd2e0b (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-07-07T21:00:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 VanessaOlintoDosSantosEvangelista_TESE.pdf: 5760623 bytes, checksum: 180f27b8cf175c05011adf038ebd2e0b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-07T21:00:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 VanessaOlintoDosSantosEvangelista_TESE.pdf: 5760623 bytes, checksum: 180f27b8cf175c05011adf038ebd2e0b (MD5) Previous issue date: 2015-12-03 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / A expans?o agr?cola utilizando cultivares geneticamente modificados (GM) ? fen?meno mundial. Esse fato tem impulsionado a implementa??o de legisla??es regulat?rias para monitorar ? presen?a de variedades GM em culturas agr?colas. Outra importante demanda mundial est? relacionada ao consumo de alimentos contaminados por aflatoxinas. Essas mol?culas constituem um classe de compostos extremamente t?xicos que causam efeitos danosos para a sa?de humana e animal. Por isso, a seguran?a e qualidade dos produtos agr?colas s?o essenciais para os consumidores. Os testes de fluxo lateral s?o m?todos alternativos promissores que podem ser utilizados tanto para a detec??o de prote?nas transg?nicas expressas em culturas GM quanto para a detec??o de compostos t?xicos em alimentos. Essa t?cnica apresenta vantagens adicionais quando comparado aos m?todos convencionais, como: simplicidade, rapidez e baixo custo. Nesse estudo foram desenvolvidos dois testes de fluxo lateral, um para a identifica??o das prote?nas Cry1Ac e Cry8 Ka5 expressas em cultivares de algod?o GM e o outro, para a detec??o de aflatoxinas em produtos agr?colas. O teste, para a detec??o dos cultivares transg?nicos, foi desenvolvido no formato sandwhich. Esse teste foi desenvolvido utilizando os anticorpos monoclonais 1B1 e 5H4, produzidos contra a prote?na Cry1Ac, mas que apresentaram rea??o cruzada para a prote?na Cry8Ka5. O monoclonal anti-Cry1B1 foi conjugado com nanopart?culas de ouro coloidal (40 nm) e utilizados como reagente de detec??o. O monoclonal 5H4 foi adsorvido na membrana de nitrocelulose, na regi?o denominada de linha teste e utilizado como reagente de captura do teste. Na linha controle, foi adsorvido o anticorpo anti-mouse IgG. Esses testes foram validados utilizando amostras de folhas de plantas de algod?o GM ( Bollgard I ? e Planta 50- produzida em nosso laborat?rio) e folhas provenientes de cultivares n?o GM ( Cooker 312). Os resultados demonstraram que esse teste foi capaz de distinguir eficientemente amostras GM de n?o GM. Al?m disso, tamb?m apresentou elevada sensibilidade, sendo capaz de detectar 0,06 ?g das prote?nas respectivas nos cultivares transg?nicos. O teste para a detec??o de aflatoxinas foi desenvolvido no formato competitivo. O anticorpo ?-AFLA 3B6, produzido contra AFB1, apresentou reatividade cruzada contra as aflatoxinas AFB2, AFG1, AFG2 e AFM1 e por isso, foi utilizado para o desenvolvimento das fitas-testes. Nesse teste o anticorpo 3B6 foi conjugado com ouro coloidal (40 nm) e utilizado como reagente de detec??o. O ant?geno AFB1 foi adsorvido na linha teste e utilizado como reagente de captura e o anti-mouse IgG foi imobilizado na linha controle do teste. Para a valida??o, gr?os de soja contaminados com o fungo Aspergillus flavus, foram utilizados. Esses testes tamb?m foram avaliados quanto ? habilidade de detec??o de aflatoxinas em amostras alimentares, incluindo leite e prote?na texturizada de soja. Os resultados demonstraram que a fita eficientemente identificou amostras contendo aflatoxinas. Al?m disso, apresentou sensibilidade de 0,5 ng/mL ou 0,5 ?g/Kg. Os resultados obtidos sugerem que as fitas testes desenvolvidas podem ser utilizadas como m?todo r?pido e de baixo custo para o screening de cultivares GM, expressando as prote?nas Cry1Ac e Cry8Ka5, quanto para a detec??o de aflatoxinas em amostras alimentares. / The expansion of cultivated areas with genetically modified crops (GM) is a worldwide phenomenon, stimulating regulatory authorities to implement strict procedures to monitor and verify the presence of GM varieties in agricultural crops. With the constant growing of plant cultivating areas all over the world, consumption of aflatoxin-contaminated food also increased. Aflatoxins correspond to a class of highly toxic contaminants found in agricultural products that can have harmful effects on human and animal health. Therefore, the safety and quality evaluation of agricultural products are important issues for consumers. Lateral flow tests (strip tests) is a promising method for the detection both proteins expressed in GM crops and aflatoxins-contaminated food samples. The advantages of this technique include its simplicity, rapidity and cost-effective when compared to the conventional methods. In this study, two novel and sensitive strip tests assay were developed for the identification of: (i) Cry1Ac and Cry8Ka5 proteins expressed in GM cotton crops and; (ii) aflatoxins from agricultural products. The first strip test was developed using a sandwhich format, while the second one was developed using a competitive format. Gold colloidal nanoparticles were used as detector reagent when coated with monoclonal antibodies. An anti-species specific antibody was sprayed at the nitrocellulose membrane to be used as a control line. To validate the first strip test, GM (Bollgard I? e Planta 50- EMBRAPA) and non-GM cotton leaf (Cooker 312) were used. The results showed that the strip containing antibodies for the identification of Cry1Ac and Cry8Ka5 proteins was capable of correctly distinguishing between GM samples (positive result) and non-GM samples (negative result), in a high sensitivity manner. To validate the second strip test, artificially contaminated soybean with Aspergillus flavus (aflatoxin-producing fungus) was employed. Food samples, such as milk and soybean, were also evaluated for the presence of aflatoxins. The strip test was capable to distinguish between samples with and without aflatoxins samples, at a sensitivity concentration of 0,5 ?g/Kg. Therefore, these results suggest that the strip tests developed in this study can be a potential tool as a rapid and cost-effective method for detection of insect resistant GM crops expressing Cry1Ac and Cry8Ka5 and aflatoxins from food samples.
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Processo de transferência da tecnologia de produção do teste rápido de HIV-1 e HIV-2 em Bio-Manguinhos: um modelo para a incorporação de novas tecnologias

Ferreira, Antonio Gomes Pinto January 2005 (has links)
Submitted by Priscila Nascimento (pnascimento@icict.fiocruz.br) on 2012-11-09T13:57:11Z No. of bitstreams: 1 antonio-gomes-pinto-ferreira.pdf: 3200920 bytes, checksum: 45691c2f346703ac5db93dd4465b77f3 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-11-09T13:57:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 antonio-gomes-pinto-ferreira.pdf: 3200920 bytes, checksum: 45691c2f346703ac5db93dd4465b77f3 (MD5) Previous issue date: 2005-03 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / Nesta dissertação apresentamos o modelo utilizado pelo Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos, Bio-Manguinhos, Fiocruz, para absorver uma nova tecnologia de produção de reativos para diagnóstico, de alta complexidade (imunocromatografia e fluxo lateral) e estratégico para a área de saúde de nosso país. Inicialmente, porque permitirá a produção de um Kitde diagnóstico (“Teste Rápido HIV-1/2 – Bio-Manguinhos”), de alto impacto social, indispensável para ampliar as ações de saúde pública em DST/Aids e, emseguida porque será capaz de democratizar o diagnóstico da infecção pelo HIV no Brasil. A absorção desta nova tecnologia redundará em uma economia de divisas para o Brasil com a conseqüente interrupção de grandes compras de Kits importados, além de gerar um potencial a ser futuramente usado no desenvolvimento e produçãode Kits para o diagnóstico de outras importantes enfermidades que acometem a população brasileira, com baixo custo. Finalmente, devido às repercussões positivasem outros setores relacionados à produção, melhorando e fortalecendo a área de Reativos para Diagnóstico de Bio-Manguinhos. Estes são argumentos significativos para a implementação deste projeto baseado em transferência de tecnologia. Bio-Manguinhos estabeleceu as articulações necessárias junto ao Ministério da Saúde, especialmente junto ao PNDST/Aids, utilizando a “demanda do setor público brasileiro”, por um período de três anos, como contrapartida nas negociações com a empresa cedente da tecnologia, evitando, desta forma, qualquer gasto adicional de recursos públicos para absorver as referidas tecnologias. A Aids, ou SIDA, ainda é um dos maiores problemas de saúde pública no mundo, apresentando números absolutamente alarmantes – cerca de 40 milhões de pessoas infectadas pelo HIV, 5 milhões de novos casos por ano e 3,5 milhões de óbitos em 2004. No Brasil, apesar de ser adotada uma boa política de assistência e tratamento, que vem sendo citada como exemplo no mundo inteiro, ainda convivemos com uma epidemia que continua a se alastrar em ritmo preocupante, com estimativa de 600.000 brasileiros infectados. Atualmente, estamos presenciando uma revolução científica e tecnológica impar e, neste contexto, Bio-Manguinhos vem tendo como missão “contribuir para a melhoria dos padrões de saúde pública brasileira, através da pesquisa tecnológica e da produção de imunobiológicos necessários para atender à demanda gerada pelo quadro epidemiológico do país”. Assim, esta Instituição vem investindo, intensamente, em projetos de pesquisa e desenvolvimento (P&D), bem como na aquisição e incorporação de novas tecnologias para a produção, em escala industrial, de produtos capazes de suprir as demandas dos programas nacionais de saúde pública do Ministério da Saúde. Neste contexto, vem seguindo as tendências na área de Reativos para Diagnóstico laboratorial que estão voltadas, principalmente, para uma melhor orientação da conduta terapêutica com diagnósticos mais precisos, diferenciais e mais precoces na detecção das doenças, maior rapidez nos resultados e realização dos testes afins nos próprios locais de atendimento de pacientes. / This dissertation describes the model adopted by Bio-Manguinhos in the incorporation of a brand-new technology (immunochromatography and lateral flow) for the production of reagents for diagnosis. This technology is strategic and extremely valuable for the country, as it allows for the production of a low-cost diagnostic kit (Rapid Test HIV-1/2 – Bio-Manguinhos) that will, in turn, promote the dissemination of more extensive public health measures in the prevention and control of STD/Aids, including the socialization of HIV diagnosis in Brazil. Also, the substitution of large bulks of imported tests by their nationally produced equivalent will result in great, monetary savings by the Brazilian Ministry of Health and that the technological platform applied in such tests can also be used in the development of rapid tests designed for the diagnosis of other endemic diseases that afflict the Brazilian population. Finally, due to the positive repercussions it may have on other production sectors, this initiative will ameliorateand strengthen the area of Reagents for Diagnosis in Bio-Manguinhos. All of these arguments, represented strong incentives for the establishment of the partnership, being essential for the implementation of the technology transfer process. Bio-Manguinhos undertook the necessary negotiationswith MoH, especially with the National Program for STD/Aids, offering a share of the Brazilian public market for a period of three years in exchange for the technology to be transferred by the American company that detains it, thus avoidingany extra use of public funds by the Brazilian government. Aids is still one of the biggest public health problems in the world today, presenting impacting figures: approximately 40 million people are infected with HIV worldwide, with 5 million new cases diagnosed per year and 3.5 million deaths being reported in 2004. Despite Brazil´s policy for universal Aids treatment and assistance coverage – which is considered an example for the rest of the world – the country, with its estimated 600,000 HIV positive citizens, still deals with an epidemic that continues to spread at alarming rates. Certainly, much is yet expected to result from today´s scientific and technological revolution. Within this context, Bio-Manguinhos, whose mission is to “contribute to the improvement of the Brazilian public health standards through technological research and development and the production of immunobiologicals necessary for the fulfillment of the demands generated by the country´s epidemiological status”, has been investing heavily in R&D projects as well as in the acquisition and incorporation of new technologies for the large scale manufacture of products that will feed MoH´s national public health programs. One of the new tendencies in the field of reagents for laboratorial diagnosis is geared toward guiding a better therapeutic approach and calls for a more precise, differential and early disease diagnosis. The time required to obtain results also tends to be shorter and the tests, designed in much simpler formats, can beperformed faster, without need for extensive professional expertise or fully – equipped facilities.

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