Orientador: Rafael Henrique Nóbrega / Resumo: A decisão se a gônada indiferenciada irá se desenvolver em um testículo ou um ovário é uma etapa crítica na diferenciação sexual dos vertebrados. Este processo consiste em uma complexa cascata gênica que culmina na diferenciação das células somáticas presente na gônada indiferenciada. Neste sentido, o hormônio anti-Mülleriano é um importante efetor nesta decisão. Estudos com o peixe medaka mutante hotei, no qual o receptor do Amh tipo 2 (amhrII) é mutado, mostram elevado índice gonadossomático, e reversão sexual de macho para fêmea. Com base nestas informações, acredita-se que o Amh possa regular o número de células germinativas e diretamente ou indiretamente este fato pode influenciar na decisão da gônada bipotencial em se tornar um testículo ou ovário. Sendo assim, o objetivo do presente trabalho foi de se avaliar a sinalização do Amh durante a diferenciação sexual no medaka. Para tanto, estudos de perda de função gênica foram empregados, no qual o gene amh foi deletado através do sistema CRISPR/Cas9. Também foi avaliada a expressão dos genes que atuam na janela de diferenciação sexual por RT-qPCR. Inicialmente, identificamos dois tipos de mutação nos animais heterozigotos (amh (-/+) da F1. A mutação mais interessante foi a deleção de 759 pares de base entre os exons 6 e 7 que compreende parte dos domínios Amh_N e TGF-β. Na geração F2, os mutantes homozigotos amh (-/-) machos XY apresentaram 100% de reversão sexual para fêmeas fenotípicas. Além disso os animais amh (-/-) ap... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The decision whether the undifferentiated gonad will develop in a testicle or an ovary is a critical step in the sexual differentiation of vertebrates. This process consists of a complex genetic cascade that culminates in the differentiation of the somatic cells present in the undifferentiated gonad. In this context, the anti-Müllerian hormone is an important effector in this decision. Studies with the medaka hotei fish, in which the Amh type 2 receptor (amhrII) is mutated, show high gonadosomatic index, and sexual reversion from male to female. Based on this information, it is postulated that the Amh regulates the number of germ cells, and directly or indirectly this fact may influence the decision of the bipotential gonad to become a testicle or ovary. Therefore, the objective of the present study was to evaluate the signaling of Amh during sexual differentiation in medaka. For that, studies of loss of gene function were employed, in which the amh gene was deleted through the CRISPR / Cas9 system. We also evaluated the expression of genes that act in the window of sexual differentiation by RT-qPCR. We initially identified two types of mutation in F1 heterozygous (amh -/+) animals. The most interesting mutation was the deletion of 759 base pairs between exons 6 and 7 which comprises part of the Amh_N and TGF-β domains. In the F2 generation, the homozygous amh (-/-) mutants XY males presented 100% of sexual reversion. In addition, the amh (-/-) animals presented gonadal hyper... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Renata Fracácio Francisco / Abstract: Metals are known for their toxic potential to the aquatic environment, as well as being bioaccumulative and persistent elements, which increases the concern with the concentration allowed by legislation, considering protection of biota Often, these compounds are released in the water bodies in concentrations which may not cause acute effects but may compromise the viability of biological systems in the long term, considering the continuous exposure to said elements and concentrations. In this context, liver is an important organ for the evaluation of metals toxicity due to its function of excretion and its potential to accumulate exogenous substances. In gonads metals can trigger disturbances in the production, release, transport, metabolism and action of natural hormones, which can lead to fecundity loss, males feminization and consequently imbalance to living organisms, compromising the viability of the species. Exogenous substances that act in this way are known as endocrine disrupters and their influences on individual organisms and aquatic life are not well established. One ways to identify them is through histological and histochemical analysis. Metals copper and nickel originate from natural and also artificial sources due to the generation of domestic and industrial waste, depending on the anthropic activities. They can be considered toxic or essential depending on the organism, the environment and its concentrations. In addition, they have the potential to be endocri... (Complete abstract click electronic access below) / Resumo: Os metais são conhecidos pelo seu potencial tóxico ao ambiente aquático, além de serem elementos bioacumulativos e persistentes, o que aumenta a preocupação com a concentração permitida pela legislação, considerando-se proteção da biota Muitas vezes, estes compostos são liberados nos corpos hídricos em concentrações subletais as quais não provocam efeitos agudo, mas , podem comprometer a viabilidade dos sistemas biológicos a longo prazo, considerando-se a contínua exposição aos referidos elementos e concentrações Nesse contexto, fígado é um importante órgão para avaliação da toxicidade de metais devido a sua função de excreção e seu potencial para acumular substâncias exógenas. Nas gônadas os metais podem desencadear perturbações na produção, liberação, transporte, metabolismo e ação dos hormônios naturais, que podem levar a perda de fecundidade, feminização de machos e consequentemente desequilíbrio aos organismos vivos, comprometendo a viabilidade das espécies. Substâncias exógenas que atuam dessa maneira são conhecidos como interferentes endócrinos e suas influências sobre os organismos individualmente e a vida aquática ainda não são bem estabelecidos. Uma das maneiras de identificá-los é através de análises em nível histológico e histoquímico. Os metais cobre e níquel originam-se de fontes naturais e também artificiais devido a geração de resíduos domésticos e industriais, em função das atividades antrópicas. Podem ser considerados tóxicos ou essenciais dependendo do orga... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-07-21T15:16:08Z No. of bitstreams: 1 Gyl Everson de Souza Maciel.pdf: 1066870 bytes, checksum: 5d3e6cb058a19d66e3669721aeb1a30a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-21T15:16:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gyl Everson de Souza Maciel.pdf: 1066870 bytes, checksum: 5d3e6cb058a19d66e3669721aeb1a30a (MD5) Previous issue date: 2013-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Pomacea lineata (Spix, 1827) during the dry season buries itself in the ground and survives thanks to its ability to aestivation. Studies have shown that during aestivation levels of carbohydrates and uric acid, may provide more accurate information about the activity of the gonads in response to environmental stress. Thus, we tested the hypothesis that variations in the levels of uric acid and carbohydrate during aestivation induced, can affect gonadal histology and gametogenesis in P. lineata. The snails underwent aestivation of three, five and 10 months. Testes and ovaries were collected and processed for histological analysis. The results showed significant increase in the levels of uric acid and carbohydrates in proportion to the period of aestivation, and histological changes in the gonads. Thus, we conclude that the metabolism of proteins is proportional to the period of aestivation for carbohydrate synthesis and excretion of uric acid, thereby ensuring the integrity of the reproductive tract. / Pomacea lineata (Spix, 1827)durante a época de estiagem se enterra no solo e sobrevive graças a sua capacidade de estivação. Estudos têm mostrado que durante a estivação os níveis de carboidratos e ácido úrico, podem fornecer informações mais precisas sobre a atividade das gônadas em resposta ao estresse ambiental. Assim, testou-se a hipótese de que as variações nos níveis de carboidratos e acido úrico, durante a estivação induzida, pode afetar a histologia gonadal e gametogênese em P. lineata. Os caramujos foram submetidos à estivação por três, cinco e 10 meses. Testículos e ovários foram coletados e processados para análises histológicas. Os resultados mostraram aumento significativo dos níveis de carboidratos e ácido úrico proporcionalmente ao período de estivação, além de alterações histológicas nas gônadas. Assim, concluímos que a metabolização de proteínas é proporcional ao período de estivação, para síntese de carboidratos e excreção de ácido úrico, garantindo assim, a integridade do aparelho reprodutor.

Made available in DSpace on 2017-07-10T18:13:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lucelia Tessaro.pdf: 2574631 bytes, checksum: ca57438c0aba9b691b6d844030fa8eb8 (MD5) Previous issue date: 2011-02-15 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / It was studied the effect of the different digestible energy levels (DE) on reproductive and animal performance and gonads and livers histological aspects of silver catfish broodstocks (Rhamdia quelen). The treatments were digestible energy levels of 2.850, 3.100, 3.350, 3.600 e 3.850 kcal.kg feed, in diets containing 30% digestible protein (DP. The animals were stocked in tanks of 16m2 under conditions of light and temperature natural. The temperature water of the tanks was monitored daily. pH and oxygen dissolved were measured biweekly. The fish were feed during 210 days and were evaluated, initial and final, length, weight, weight gain and condition factor, separately to males and females. For the reproductive parameters, from October 2009 to February 2010 the males were induce, monthly, by carp pituitary extract (2,5mg.kg male) for collect milt samples. In the reproductive session, the females were induced by carp pituitary extract (5,5mg.kg female) for evaluation to number of spawn females (%) and absolute and relative fecundity. In the same period, six males and six females in each treatment were killed to obtained, visceral, gonad and hepatossomatic index, and to histological characterization of maturation stages and hepatic aspects. The water quality remained in the levels recommended for the species. Animal performances to males and females were not affected by feed. In relation to the hepatic aspects, were observed cytoplasmic vacuolation and steatosis in females. For the males this hepatic alteration were not observed. For the reproductive parameters, males and females were not influenced. The Monthly variations on seminal parameters were observed and indicated a reproductive pike in the spring. The feds containing 30% of digestible protein and energy levels from 2,850 to 3,850 kcal.kg were not affect reproductive parameters to males or females, however, females feed on 3,100 to 3,600kcal.kg showed cytoplasmic vacuolation in hepatocytes. / O estudo avaliou diferentes níveis de energia digestível (ED) sobre o desempenho zootécnico, reprodutivo e aspectos histológicos do tecido hepático e gonadal de machos e fêmeas de jundiá (Rhamdia quelen). As rações testadas foram isoproteicas contendo 30% proteína digestível (PD) e 2.850, 3.100, 3.350, 3.600 e 3.850 kcal de energia digestível (ED) (kcal.kg ração-1) Os peixes foram alojados em tanques escavados sob condições de fotoperíodo e temperatura natural. A água dos tanques foi monitorada diariamente quanto a temperatura e quinzenalmente quanto pH e oxigênio dissolvido. Os animais foram acompanhados durante 210 dias e foram avaliados, separadamente por sexo, ao início e ao término do experimento, quanto ao comprimento padrão, peso médio, ganho de peso e fator de condição, este último apenas para os machos. Para os parâmetros reprodutivos, entre os meses de outubro a fevereiro, os machos mensalmente foram submetidos às análises seminais e espermáticas. Para tanto, os machos foram submetidos ao protocolo de indução hormonal empregando extrato pituitário de carpa em dose única de 2,5 mg.kg-1. Dentro do período reprodutivo, as fêmeas foram induzidas hormonalmente com protocolo semelhante, contudo utilizando 5,5 mg.kg-1. Após a indução foram avaliados o percentual de fêmeas desovantes e as fecundidades absoluta e relativa. No mesmo período em que as fêmeas foram submetidas a reprodução artificial, foram selecionados aleatoriamente e abatidos seis machos e seis fêmeas de cada tratamento. Os reprodutores foram dissecados para mensuração dos índices víscerossomático, hepatossomático e gonadossomático, bem como para caracterização histológica do estágio de maturação gonadal e do tecido hepático. A qualidade da água permaneceu dentro dos níveis recomendados para a espécie. Não foi verificado efeito (p>0,05) das rações para os parâmetros zootécnicos seja para machos ou fêmeas. Quanto aos aspectos hepáticos, foi verificada a ocorrência de vacúolos citoplasmáticos e esteatose nas fêmeas. O mesmo não foi observado nos machos. Para os aspectos reprodutivos, machos e fêmeas não foram influenciados pelos níveis energéticos testados (p>0,05). Os machos apresentaram, ao longo dos meses, características seminais e espermáticas que sugerem a ocorrência de um pico reprodutivo no final da primavera. Rações contendo 30% de proteína digestível e níveis de energia entre 2.850 e 3.850 kcal.kg de ração-1 não afetam os parâmetros reprodutivos de machos e fêmeas de jundiá, contudo, em fêmeas, rações contendo entre 3.100 e 3.600 kcal causam vacuolização nos hepatócitos, possivelmente pela deposição lipídica.