v It was found that most of the classical scrapie genotypes belong to R3 risk group, whereas atypical scrapie genotypes belonging to zero (0) and one (1) risk groups were frequently seen in sheep analyzed. In other words, Turkish sheep is found to have intermediate risk of classical scrapie and low atypical scrapie risk, in general. The data from the current study may help to establish a breeding program for classical scrapie control in Turkey and will be beneficial for both the animal and public health in the country. In addition, the outcomes of the study will fill the gap which is present in the geographic distribution data of PrP gene polymorphisms in Eurasia.Scrapie is an infectious fatal disease of sheep and goats which affects the central nervous system. In the present study, samples of 14 native Turkish sheep breeds (n=655) were analyzed with respect to their polymorphisms of PrP gene (at codons: 136, 141, 154 and 171) and their classical and atypical scrapie risk levels were identified. Turkish sheep are found to have the highest PrP genetic variability with 13 classical scrapie alleles and 14 atypical scrapie alleles compared to all previous studies. Classical scrapie-susceptible and wild-type ARQ allele was found as the most frequent allele in Turkish sheep examined. The most classical scrapie-susceptible allele, VRQ was detected at low frequencies in 5 of the breeds (&Ccedil / ine &Ccedil / apari, Dagli&ccedil / , Kivircik, Karayaka and G&ouml / k&ccedil / eada). One novel allele (TL141HQ) was observed in Sakiz breed for the first time in this study.

Erkinis encefalitas (EE) – pati dažniausia ir sunkiausia virusinė nervų sistemos infekcija Lietuvoje, kuria per metus vidutiniškai suserga 400 žmonių. Užsikrėtus EE virusu (EEV), galima besimptomė arba klinikinius požymius sukelianti ligos eiga, turinti platų požymių spektrą – nuo lengvos, meningitinės ligos formos iki sunkaus encefalito. Nors mirštamumas nuo EE yra nedidelis, svarbiausia problema – ilgai trunkantis sveikimo laikotarpis ir ilgalaikiai liekamieji reiškiniai, kurie būdingi 26–46 proc. persirgusiųjų. Neaišku, kodėl užsikrėtę identiško virulentiškumo virusu, vieni žmonės perserga besimptome arba lengva EE forma, o kitiems atsiranda sunkus nervų sistemos pažeidimas. Manoma, kad didelę reikšmę turi žmogaus genetiniai veiksniai. Nesant specifinio priešvirusinio EE gydymo, šios sunkios centrinės nervų sistemos infekcijos patogenezės ir genetinių rizikos veiksnių tyrimai yra ypač svarbūs, siekiant nustatyti galimas veiksmingo gydymo paieškos kryptis ateityje. Šio darbo tikslas – nustatyti CCR5 ir TLR3 genų polimorfizmų paplitimą tarp EE sirgusių asmenų ir šių genų polimorfizmų reikšmę polinkiui sirgti EE bei skirtingoms EE klinikinėms formoms išsivystyti. Šis darbas yra didžiausias iki šiol atliktas genetinių veiksnių reikšmės EEV infekcijos metu tyrimas ir pirmasis tokio pobūdžio vaikų tyrimas. Tyrimo rezultatai patvirtino hipotezę, kad nefunkcionuojantis CCR5 ir funkcionuojantis TLR3 yra reikšmingi simptominės EE formos išsivystymo veiksniai, užsikrėtus EEV. / Tick-borne encephalitis (TBE) is the most common and severe viral infection of the central nervous system in Lithuania, with the average number of 400 cases per year. The clinical spectrum of TBE virus infection varies considerably from asymptomatic to mild meningitis or severe encephalitis. Although the mortality of TBE is relatively low, as many as 26–46% of the patients experience long-lasting sequelae. No specific treatment for TBE exists. A most intriguing question is why certain individuals respond with seve¬re clinical symptoms after infection with TBEV while the majority either remains asymptomatic or develops only mild disease. Studies of host genetic susceptibility to infectious diseases aim to in¬crea¬se our understanding of why some individuals are more susceptable than others. Knowledge of genetic susceptibility may be used in develope¬ment of new therapeutic means and also to recognize individuals who are at increased risk of severe symptoms if infected with a pathogen. The aim of this study – to establish the prevalence of the polymorphisms in CCR5 and TLR3 genes in TBE patients and their role in susceptibility to clinical TBE and disease severity. This study is the largest study on the host genetic risk factors predis¬posing to TBEV infection, and the first study of such kind performed in the pediatric population. The results of this study confirmed that a non¬func¬tional CCR5 protein and a functional TLR3 receptor are associated with the clinical expression... [to full text]

Darbo tikslas: Nustatyti nerujojančių ir neapsivaisinančių paršavedžių leptino geno (LEP) polimorfizmą ir leptino koncentraciją kraujyje bei įvertinti jų įtaką lytinį ciklą reguliuojantiems veiksniams. Darbo uždaviniai: 1. Nustatyti normalių (NP) ir nerujojančių bei neapsivaisinančių (NNP) paršavedžių leptino geno įvairovę. 2. Nustatyti leptino geno polimorfizmo (LEP) įtaką paršavedžių lašinių storiui po paršelių atjunkymo. 3. Įvertinti leptino geno polimorfizmo įtaką gimstančių paršelių gyvybingumui bei išsaugojimui. 4. Nustatyti leptino geno polimorfizmo įtaką paršavedžių brokavimo priežasčiai. 5. Nustatyti ir palyginti leptino koncentraciją skirtingų leptino genotipų paršavedžių kraujyje. 6. Įvertinti ir palyginti leptino geno polimorfizmo įtaką paršavedžių kraujo biocheminiams rodikliams. 7. Įvertinti dėl nerujojimo arba neapsivaisinimo išbrokuotų paršavedžių kiaušidžių funkcinę būklę atsižvelgiant į leptino geno polimorfizmą. 8. Nustatyti leptino geno polimorfizmo įtaką NNP paršavedžių gonadotropinių ir lytinių hormonų sekrecijai. 9. Nustatyti leptino geno polimorfizmo įtaką kiaušidžių morfologijai. 10. Nustatyti leptino koncentracijos kraujyje įtaką kiaušidžių morfologijai. Mokslinis darbo naujumas: Pirmą kartą buvo nustatytas leptino (LEP) geno polimorfizmas neapsivaisinančioms ir nerujojančioms (NNP) paršavedėms ir nustatyta šio geno įtaka šių paršavedžių reprodukcinių savybių sutrikimo pasireiškimui. Įvertinta leptino (LEP) geno polimorfizmo ir leptino koncentracijos... [toliau žr. visą tekstą] / The aim of the study: Define anoestrous repeat-breading sows’ leptin gene (LEP) polymorphism and leptin concentration in blood as well as evaluate its influence to the factors regulating oestrus cycle. Goalsof the study: 1. Define a diversity of leptin gene in normal sows (NS) and in anoestrous repeat-breading sows (NNS). 2. Define an influence of leptin gene (LEP) polymorphism to sows’ fat thickness after weaning. 3. Evaluate the influence of leptin gene polymorphism to newborn piglet viability and survival. 4. Define causal relationship of leptin gene polymorphism on sows culling rate. 5. Define and compare leptin concentration in blood of different leptin genotypes sows. 6. Evaluate and compare the influence of leptin gene polymorphism on sows’ blood biochemical parameters. 7. Evaluate the functional ovarian status of sows, culled due to anoestrous or failure to conceive, considering leptin gene polymorphism. 8. Define an influence of leptin gene polymorphism to secretion of NNS sows’ gonadotropin hormones and sex hormones. 9. Define an influence of leptin gene polymorphism on ovarian morphology. 10. Define an influence of leptin concentration in blood on ovarian morphology. Research novelty: For the first time leptin gene (LEP) polymorphism was determined for non-conceiving and anoestrous sows (NNS) as well as the influence of this gene on reproductive disorders in sows. We also assessed the effect of leptin gene (LEP) polymorphism and leptin concentration on NNS sows’... [to full text]

Orientador: Raquel Mantuaneli Scarel-Caminaga / Banca: Andrea Marcia Marcaccini / Banca: Ricardo Della Coletta / Banca: Carlos Rossa Junior / Banca: Joni Augusto Cirelli / Resumo: A Doença Periodontal (DP) tem caráter multifatorial, com influência de fatores como a presença de microrganismos periodontopatogênicos, reação do sistema imune, suscetibilidade genética do hospedeiro, hábito de fumar, stress e presença de doenças sistêmicas. O tecido periodontal inflamado produz várias citocinas, dentre elas a interleucina 4 (IL-4). Estudos realizados por este grupo identificaram que indivíduos carregando os polimorfismos -590(T/C), +33(T/C) e VNTR(I/D) no gene IL4 formando o haplótipo TCI/CCI são 5 vezes mais suscetíveis à DP (Odds Ratio ajustado= 5,3; 95% Intervalo Confiança = 2,2 -12,9), enquanto o haplótipo TTD/CTI conferiu proteção contra o desenvolvimento da DP, Odds Ratio ajustado= 0,18 (95% Intervalo Confiança = 0,04 - 0,88). Assim, para verificar a funcionalidade dos haplótipos no gene IL4, o objetivo deste estudo foi investigar possíveis diferenças na resposta imune frente a estímulos inflamatórios e de bactérias periodontopatogênicas em células coletadas do sangue de pacientes que carregam tais diferentes haplótipos. A funcionalidade dos referidos haplótipos no gene IL4 foi também investigada por meio da regulação da expressão do gene repórter presente em plasmídeos recombinantes construídos artificialmente (constructos). Foram coletados sangue periférico de 5 pacientes de cada haplótipo e estimulados com mediadores inflamatórios e bactérias periodontopatogênicas para se avaliar a expressão gênica (mRNA, RT-qPCR), proteínas secretadas (Multiplex) e... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Periodontal disease (PD) is multifactorial, with the influence of factors such as the presence of periodontopathogenic micro-reaction of the immune system, genetic susceptibility of the host, smoking, stress and presence of systemic diseases. The inflamed periodontal tissue produces various cytokines, among which interleukin 4 (IL- 4). Studies by this group found that subjects carrying the -590 polymorphism (T/C) +33 (T/C) and VNTR (I/D) in the IL4 gene haplotype forming the TCI/CCI are 5 times more susceptible to PD (ORadjusted= 5.3; 95% CI = 2.2 - 12.9), while the TTD/CTI haplotype conferred protection against the development of PD (ORadjusted= 0.18; 95% CI = 0.04- 0.88). So, to check the functionality of the haplotypes in the IL4 gene, the aim of this study is to investigate possible differences in the immune response against inflammatory and periodontal bacteria stimuli in collected blood cells from patients with different haplotypes. The functionality of these haplotypes in the IL4 gene will also be investigated by means of regulation of expression of the reporter gene present in the recombinant plasmids constructed artificially (constructs). Peripheral blood was collected from 5 patients of each haplotype and stimulated with inflammatory mediators and periodontal bacteria to assess the gene expression (mRNA RT-qPCR), secreted proteins (Multiplex) and intracellular proteins featuring cellular phenotypic profile (flow cytometry). Constructs containing each haplotype were ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

In our study, we examined the polymorphism of gene Ser2 from domesticated silkmoth Bombyx mori and its closest wild relative B. mandarina. As a starting material for our work, we used the restriction map of allele C isolated from hybrid lineages 200 and 300 of European silkmoth B. mori (Michaille et al. 1990a). We also used the published sequence of allele D which was isolated from {\clq}qDaizo`` p50 strain of B. mori (Kludkiewicz et al 2009). Based on the published sequence, we designed PCR primers and performed sequence analysis of 4 different alleles of gene Ser2, including the almost complete genomic sequence of allele C (except for two short regions containing repetitive DNA). We then compared the sequences and found that the alleles differ significantly not only in intron lengths and the sizes of exon 9, but also in exon arrangements. While the allele C contains 12 exons (1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8a, 9, 10, 11, 8b), the alelle D and other alleles analysed have 13 exons (1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9a, 10a, 9b, 10b, 11). Allele C showed very unique arrangement of exons, which suggested that it may represent an ancestral form of Ser2 gene. We analysed the arrangment of exons located at the 3´end of the Ser2 gene by PCR and electrophoresis in 70 available strains of B. mori and B. mandarina. We also tried to find a similar allele to the allele C and we amplified and sequenced 2 kb region from 55 Bombyx strains. Phyllogenetic analysis of gene Ser2 gene suggested that the C allele of now probably extinct European silkmoth hybrids 200 and 300 does not seem to be an ancestral form of Ser2 gene, but it rather seems to be the result of complex secondary rearrangements.

A ATP-binding cassette transporter A1 (ABCA1) é uma proteína transmembrana responsável pelo efluxo celular de colesterol e fosfolipídeos, que é um passo essencial para o transporte reverso do colesterol e para a biogênese da HDL. Polimorfismos do gene ABCA1 foram associados com risco de doença arterial coronariana, variações no perfil lipídico e diferenças na resposta a fármacos hipolipemiantes. Com a finalidade de avaliar os efeitos de polimorfismos do ABCA1 sobre a expressão gênica e a resposta a vastatinas, foram selecionados indivíduos normolipidemicos (NL, n=143) e hipercolesterolêmicos (HC, n=224). A resposta a atorvastatina (10 mg/dia/4 semanas) foi avaliada pelo perfil lipídico sérico em 141 indivíduos do grupo HC (ATORVA). DNA e RNA total foram extraídos de amostras de sangue periférico. Os polimorfismos de nucleotídeo único (SNP) G70943A (R219K), C-14T e C-105T, uma variante nova do ABCA1, foram detectados por PCR-RFLP e confirmados por seqüenciamento de DNA. A expressão de RNAm do ABCA1 em células mononucleares do sangue periférico (CMSP) foi analisada por PCR-duplex e PCR em tempo real, utilizando o gene GAPD como referência endógena. A freqüência do alelo -105T foi 1,4% em NL e 2,0% em HC. O alelo 70943A (genótipos GA+AA) foi associado com maior concentração sérica basal de apoAI (NL), de HDL-c (ATORVA) e com menores concentrações basais de triglicerídeos e VLDL-c e menor índice TG/HDL-c (HC e ATORVA) em comparação com o genótipo 70943GG (p<0,05). O polimorfismo C-105T está em desequilíbrio de ligação com o SNP C-14T (p=0,006). Portadores do alelo -105T (genótipos CT+TT), quando comparados aos portadores do genótipo -105CC, tiveram menores valores basais de triglicerídeos e VLDL-c, maior concentração de HDL-c e menor índice TG/HDL-c nos grupos HC e ATORVA e também maiores concentrações de apoAI e menor índice apoB/apoAI no grupo ATORVA (p<0,05). Nos grupos HC e ATORVA, os portadores do haplótipo -14CT+TT/-105CT+TT tiveram menores valores de triglicerídeos e VLDL-c basais, maiores concentrações de HDL-c e menor índice TG/HDL-c quando comparados aos portadores dos outros haplótipos (p<0,05). A expressão basal do ABCA1 foi menor nos HC que nos NL independentemente da taxa de expressão alta (GM1) ou baixa (GM2). Este efeito foi associado com os SNPs C-14T e G70943A SNPs. Após o tratamento com atorvastatina, a expressão de RNAm foi reduzida nos HC portadores do alelo - 14T em comparação com os portadores de alelo -14C. Esses resultados são sugestivos de que ABCA1 SNPs estão envolvidos na variação do perfil lipídico sérico e na expressão de RNAm em resposta a atorvastatina. / The ATP-binding cassette transporter A1 (ABCA1) is a transmembrane protein involved on cholesterol and phospholipid cellular efflux, which is an essential step for the reverse cholesterol transport and HDL biogenesis. Single nucleotide polymorphisms (SNPs) in the ABCA1 gene have been associated with increased risk of coronary heart disease, differences on serum lipid profile and response to lowering-cholesterol drugs. We have evaluated the influence of ABCA1 SNPs on mRNA expression and lipid-lowering response to atorvastatin. Normolipidemic (NL, n=143) hypercholesterolemic (HC, n=224) individuals were enrolled in this study and the response to atorvastatin (10 mg/day/4 weeks) was evaluated in HC individuals (ATORVA, n=141). Blood samples were collected for biochemical analyses, genomic DNA and total RNA extraction. SNPs G70943A (R219K), C-14T and C-105T, a novel variant of ABCA1, were detected by PCR-RFLP and confirmed for DNA sequencing. ABCA1 mRNA expression in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) was analysed by PCR-duplex and Real Time PCR, using the GAPD as the endogenous reference. In HC and NL, the frequency of -105T allele was 2.0% and 1.4%, respectively. The 70943A allele (genotypes GA+AA) was associated with higher basal concentrations of apoAI (NL) and HDL-c (ATORVA) and lower triglyceride and VLDL-c and TG/HDL-c ratio (HC and ATORVA) than the 70943GG genotype (p<0.05). We found a linkage disequilibrium between C-14T and C-105T SNPs in HC group (p=0.006). Individuals carrying -105T allele (CT/TT genotypes), when compared with -105CC carriers, had lower basal concentrations of triglyceride and VLDL-c, higher concentration of HDL-c and lower TG/HDL-c ratio in HC and ATORVA groups and also higher concentration of apoAI and lower apoB/apoAI ratio in ATORVA group (p<0.05). In HC and ATORVA, individuals with -14CT+TT/-105CT+TT haplotype had lower basal values of triglyceride and VLDL-c, higher concentration of HDL-c and lower TG/HDL-c ratio than carries of others haplotypes (p<0,05). ABCA1 mRNA basal expression was lower in HC when compared to NL independently of high (GM1) or low (GM2) basal expression rate. This effect was associated with C-14T and G70943A SNPs. After atorvastatin treatment, mRNA expression was reduced in HC individuals carrying -14T allele in comparison with the -14C allele carriers. These results are sugestive that ABCA1 SNPs are involved on variation of serum lipid profile and mRNA expression in response to atorvastatin.

京都大学 / 0048 / 新制・課程博士 / 博士(医学) / 甲第18852号 / 医博第3963号 / 新制||医||1007(附属図書館) / 31803 / 京都大学大学院医学研究科医学専攻 / (主査)教授 伊達 洋至, 教授 中原 俊隆, 教授 山田 亮 / 学位規則第4条第1項該当 / Doctor of Medical Science / Kyoto University / DFAM

Alterações macro e microvasculares ocorrem no Diabetes Mellitus (DM). A Retinopatia Diabética (RD) é uma complicação bem prevalente do DM e resulta de microangiopatia generalizada no tecido retiniano que, em diferentes estágios da doença, se observa como edema local, exsudatos, formação de neovasos e hemorragias, sendo a principal causa de cegueira na faixa etária de 20 a 74 anos. Alguns fatores angiogênicos são apontados como possíveis mediadores no desenvolvimento das alterações microvasculares no DM. Dentre eles, a Eritropoietina (EPO), hormônio glicoproteico, possui expressão mediada por alelos específicos do gene EPO. Determinados perfis genéticos para três SNPs-single nucleotide polymorphisms do gene EPO (rs1617640, rs507392, rs551238) encontram-se associados com maiores concentrações de EPO no humor vítreo de pacientes diabéticos com RD, o que pode ser indicativo da relação entre determinado genótipo de risco (TTA) e o desenvolvimento de tal comorbidade. O presente trabalho pretendeu investigar a associação entre o genótipo considerado de risco para o desenvolvimento de RD e alterações funcionais na visão de cores de pessoas com diagnóstico de DM. Tal estudo contou com uma amostra de 95 diabéticos (49 mulheres e 46 homens, média de idade: 48,33 anos; DP: 16,90), com um total de 31 DM tipo 1 e 64 tipo 2 e 114 controles (73 mulheres e 41 homens, média de idade: 38,38 anos; DP: 12,81). Foi realizada avaliação através de teste psicofísico (Cambridge Colour Test CCT), que visou medir o limiar de discriminação nos três eixos de confusão de cores e sequenciamento genético, a partir de amostras de sangue. Para os diabéticos, no eixo de confusão protan, os resultados mostraram uma piora de desempenho para o genótipo TTA/GCC (p= 0,048), com relação aos controles. No eixo de confusão deutan, não houve diferença para qualquer dos genótipos (p= 0,0207), enquanto que para o eixo tritan, o genótipo TTA/GCC esteve associado a uma piora de desempenho (p=0,014). Para os controles, não houve diferença entre os genótipos. Assim, os resultados mostraram uma piora na visão de cores de pacientes DM, associada ao haplótipo TTA/GCC / Diabetic Retinopathy (DR), a prevalent complication of diabetes, is the leading cause of blindness among those aged 20-74 years. Micro and macrovascular changes occur in Diabetes Mellitus (DM) with DR being the most common among these vascular complications, resulting in generalized retinal microgangiopathy. At different stages of the disease, localized edema, exudates and hemorrhages occur. Several pro-angiogenic factors have been suggested as possible mediators in the development of these microvascular changes. Among them is erythropoietin (EPO), a glycoprotein hormone whose expression is mediated by specific alleles of the EPO gene. Specific genetic profiles for three single nucleotide polymorphisms (SNPs) in the EPO gene (rs1617640, rs507392, rs551238) are associated with larger EPO concentrations in the vitreous humor of diabetic patients with RD. This association indicates a possible relationship between the identified genotypes (TTA) and the comorbidity´s development. This work aimed to investigate the association between genotypes considered at risk for the development of DR and functional changes in color vision among individuals diagnosed with DM. Thus, this study included a sample of 95 diabetic patients (49 women and 46 men, average age: 48.33 years; SD: 16.90), with a total of 31 DM type 1 and 64 type 2 and 114 controls (73 women and 41 men, average age: 38.38 years; SD: 12.81). Evaluation was performed using a psychophysical test (Cambridge Colour Test -CCT), to measure the discrimination threshold in three-color confusion axes in addition to genetic sequencing. In the protan axis of confusion color, performance among diabetics with the TTA/GCC genotype was significantly lower (p=0.048) than those in the control group. The results showed a poorer performance among those with the TTA / GCC genotype (p = 0.048), compared to controls. In deutan axis confusion, there was no difference among any of the genotypes (p = 0.0207), while for the tritan axis, the TTA / GCC genotype was associated with a poorer performance (p = 0.014). For the controls, there was no difference between genotypes. Thus, the results showed a worsening in color vision among DM patients associated with TTA / GCC haplotype

Na Anemia Falciforme em situações de baixa tensão de oxigênio, a hemoglobina mutante S (HbS) sofre polimerização promovendo a falcização das hemácias, que podem aderir ao endotélio vascular, causando a oclusão de vasos (VO) e isquemia tecidual (crises dolorosas) que caracterizam o quadro clínico da doença. Além disso, os pacientes falciformes apresentam outras manifestações clínicas como o priapismo, alterações ósseas, certas complicações pulmonares entre outros. Além das células eritróides, células endoteliais, leucócitos e plaquetas também desempenham um papel fundamental na fisiopatologia da anemia falciforme. A hidroxiuréia (HU), na anemia falciforme, aumenta a produção de hemoglobina fetal (HbF) em células eritróides, reduzindo a polimerização da HbS, diminuindo os sintomas clínicos dos pacientes. O aumento da HbF, no entanto, não implica necessariamente na melhora clínica, indicando desta forma a potencial ação da HU sobre outros processos. Estudos recentes vêm relacionando priapismo e asma com elevados níveis de adenosina. Devido a esta importância da adenosina relacionada a patologias comuns a AF, tivemos como objetivo identificar polimorfismos em genes de receptores de adenosina e na adenosina deaminase e verificar a possível associação entre as manifestações clínicas, além de investigar o papel da HU na modulação de marcadores envolvido na síntese e degradação da adenosina. Foram analisados diversos sítios polimórficos nos genes que codificam ADORA1, ADORA 2b, ADORA 3 e ADA, seguindo com a genotipagem em pacientes com AF, comparando afetados e não afetados. Em adição foi avaliada a expressão diferencial de mRNA de ADA pela HU em monócitos destes pacientes, comparando tratados e não tratados e também avaliamos por citometria de fluxo a modulação de marcadores de superfície CD39, CD73 e CD26, pela HU. As análises estatísticas foram realizadas utilizando os softwares GenePop 3.4 para análises de associação, cálculo do HWE, GraphPad Prism 5, Arlequin para identificação de desequilíbrio de ligação, haplótipos, heterozigozidade e SAS 9.13 para associação dos haplótipos as características. Os resultados mostraram que os pacientes sob tratamento com HU apresentaram um aumento da expressão de mRNA de ADA, aumento da expressão de CD26 em monócitos e diminuição de CD39 em linfócitos. Sem alterações significativas em relação a CD73. Encontramos também um aumento da freqüência do alelo T do SNP (rs1685103) presente no gene de ADORA 1 associado com pacientes afetados com síndrome torácica aguda. Apesar de não ter sido estatisticamente significante, concorda com dados da literatura. No gene ADORA 2B, verificamos associação do SNP 1007 C>T no desenvolvimento de STA indicando o alelo T como fator de risco e o alelo C para alterações ósseas. Para o SNP 968 G>T houve associação com alterações ósseas. Na análise haplotípica entre os SNPs 968 G>T e 1007 C>T encontramos associação dos haplótipos ht2 e ht3 com STA, como fator de risco, ht2 para hipertensão pulmonar. ht1 para priapismo, alterações ósseas e estenose/AVC. Os haplótipos formados pelos três SNPs 968 G>T, 1007 C>T e rs16851030, encontramos associação entre ht1, ht3 e ht4 entre os afetados com priapismo, caracterizando-o como haplótipo de risco e também ht1 e ht6 associados à estenose/AVC. Concluímos, que a hidroxiuréia participa na modulação da expressão da adenosina deaminase, de CD26 em monócitos e CD39 em linfócitos. Além disso, mostrou-se a importância de sítios polimórfico presente no gene ADORA 2B e ADORA1 envolvido na fisiopatologia das manifestações clínicas da doença falciforme. Associações dos SNPs em ADORA 1 e ADA, devem ser melhor estudados em um número maior de pacientes. A determinação destes polimorfismos associados com diferentes características clínicas pode levar a um melhor entendimento dos processos fisiopatológicos da anemia falciforme, levando à identificação de pacientes de risco, possibilitando um manejamento racional dos mesmos, em termos de cuidados específicos, ou mesmo à determinação de alvos para o desenvolvimento de terapias alternativas. / In sickle cell disease in low oxygen tension, mutant hemoglobin S (HbS) undergoes polymerization promoting sickling of red blood cells that can adhere to vascular endothelium, causing vessel occlusion (VO) and tissue ischemia (painful crises) that characterize the clinical disease. In addition, sickle cell patients have other clinical manifestations such as priapism, bone disorders, certain pulmonary complications among others. In addition to the erythroid cells, endothelial cells, white cells and platelets also play a key role in the pathophysiology of sickle cell anemia. Hydroxyurea (HU) in sickle cell anemia, increases the production of fetal hemoglobin (HbF) in erythroid cells, reducing the HbS polymerization, reducing the clinical symptoms of patients. The increase in HbF, however, does not necessarily imply clinical improvement, thus indicating the potential effects of HU on other processes. Recent studies relating asthma and priapism with high levels of adenosine. Due to this importance of adenosine-related pathologies common to AF, we aimed to identify gene polymorphisms in adenosine receptors and adenosine deaminase and verify the possible association between clinical manifestations, and to investigate the role of HU in the modulation of markers involved synthesis and degradation of adenosine. We analyzed several polymorphic sites in genes that encode ADORA1, ADORA 2b, 3 and ADORA ADA, according to the genotype in patients with AF, comparing affected and unaffected. In addition we assessed the differential expression of ADA mRNA by HU in monocytes of these patients, comparing treated and untreated, and also evaluated by flow cytometry modulation of surface markers CD39, CD73 and CD26 by HU. Statistical analysis was performed using the software GenePop 3.4 for association analysis, calculation of HWE, GraphPad Prism 5, Arlequin for identification of linkage disequilibrium, haplotypes, heterozygosity and SAS 9.13 for association of haplotypes features. The results showed that patients treated with HU showed an increase in mRNA expression of ADA, increased expression of CD26 on monocytes and decreased CD39 on lymphocytes. No significant changes in relation to CD73. We also found an increased frequency of allele T (SNP rs1685103) present in a gene associated with ADORA affected patients with acute chest syndrome. Although not statistically significant, agrees with literature data. ADORA 2B gene, we found association of the SNP 1007 C> T in the development of STA indicating the T allele as a risk factor for the C allele and bone changes. For the SNP 968 G> T was associated with bone disorders. In haplotype analysis between SNPs 968 G> T and 1007 C> T found association of haplotypes ht2 and HT3 with STA as a risk factor for pulmonary hypertension ht2. ht1 for priapism, stenosis and bone disorders / stroke. The three haplotypes formed by SNPs 968 G> T, 1007 C> T and rs16851030, we found association between ht1, HT3 and HT4 among those affected with priapism, characterizing it as a risk haplotype and also ht1 ht6 associated with renal and / AVC. We conclude that hydroxyurea participates in modulating the expression of adenosine deaminase of CD26 on monocytes and CD39 on lymphocytes. Moreover, he showed the importance of polymorphic sites in this gene and ADORA 2B ADORA1 involved in the pathophysiology of clinical manifestations of sickle cell disease. Associations of SNPs in ADORA 1 and ADA should be better studied in a larger number of patients. The determination of these polymorphisms associated with different clinical characteristics can lead to a better understanding of the pathophysiological processes of sickle cell anemia, leading to the identification of patients at risk, enabling a rational handling of the same in terms of specific care, or even the determination of targets for the development of alternative therapies.

Introdução: Os glicocorticoides (GCs) estão envolvidos na regulação e adaptação da resposta ao estresse, exercendo seus efeitos através de seus receptores. Variações polimórficas no gene do receptor de glicocorticoide (GR) têm sido caracterizadas funcionalmente. O polimorfismo A3669G do gene do GR está relacionado a modificações na sensibilidade aos GCs e mudanças no perfil metabólico. Concentrações fisiológicas de GCs estimulam a ingestão calórica e, na presença de insulina, modificam a preferência alimentar. A variante A3669G do gene do GR parece levar a um menor risco para diabetes, em pacientes com Síndrome de Cushing, e para o tabagismo, quando associado a um polimorfismo do gene do receptor de mineralocorticoide, sugerindo uma modulação na via de recompensa. O objetivo deste trabalho é avaliar a associação de variantes do polimorfismo A3669G do gene do GR com o comportamento alimentar e parâmetros metabólicos em uma amostra de estudantes, correlacionando com dados de neuroimagem funcional. Métodos: A amostra provém de alunos de 6 escolas de Porto Alegre, avaliados em 2008 e em 2013. Em 2008, 131 indivíduos apresentavam o protocolo completo de avaliação e, destes, 74 retornaram em 2013. A avaliação incluiu genotipagem, antropometria, exames laboratoriais, comportamento alimentar e um paradigma avaliando a ativação cerebral em resposta a visualização de imagens de alimentos palatáveis, não palatáveis e de objetos neutros. A análise da associação com os fenótipos foi realizada através do teste t de Student e Chi quadrado; os dados do estudo longitudinal foram analisados por meio de Equações de Estimatição Generalizada. Resultados: A variante G do polimorfismo A3669G do gene do GR foi encontrado em 17,6% em 2008 e em 14,9% da amostra em 2013. Não houve diferença entre os grupos de carreadores do alelo G e não carreadores quanto a diferentes confundidores; a comparação entre as médias dos dois grupos sobre o consumo calórico proveniente de proteínas, carboidratos e gorduras em 2008 não revelou diferenças significativas; nesta etapa, as análises evidenciaram maior consumo de açúcares e de calorias totais no grupo não carreador do alelo G. Em 2013, estes indivíduos não carreadores do alelo G do polimorfismo A3669G apresentaram maior insulinemia e além de aumento no índice de resistência à insulina, sem diferenças no consumo alimentar. Os dados de neuroimagem funcional indicaram que a visualização de imagens de alimentos palatáveis pelo grupo não carreador do alelo G ativou o giro occipital médio, uma região implicada no processamento visual, mostrando menor ativação em giro pré central e nas áreas de Brodmann 4 e 6, relacionadas ao planejamento motor e sensibilidade ao sabor. Conclusão: Os resultados mostram que os indivíduos não carreadores da variante G do polimorfismo A3669G do gene do GR apresentaram menor sensibilidade à insulina, precedidos pela modulação na preferência alimentar. Os achados em neuroimagem funcional indicam maior saliência de incentivo aos alimentos palatáveis e predisposição à impulsividade no grupo não carreador do alelo G. Sugere-se que a redução na sensibilidade em nível celular aos GCs relacionada à presença do alelo G, afete a ingestão alimentar, reduzindo o consumo de alimentos palatáveis, diminuindo o risco para doenças metabólicas. / Introduction: Glucocorticoids are involved in regulation and adaptation of the stress response, exerting effects through its receptors. Variations on the glucocorticoid receptors genes have been characterized functionally. The A3669G polymorphism of the glucocorticoid receptor gene is related to a change in the tissue sensitivity to glucocorticoids and altered metabolic profile. Physiological concentrations of glucocorticoids stimulate food intake and in the presence of insulin affect food preferences. The G variant of the A3669G polymorphism appears to lead to a lower risk for diabetes, in patients with Cushing's syndrome, and smoking, when associated with a polymorphism of the mineralocorticoid receptor gene, suggesting a modulation in reward pathways. The objective of this study is to evaluate the association of A3669G polymorphism variants with feeding behavior and metabolic parameters in a sample of students correlating with functional neuroimaging data. Methods: The sample includes students of 6 schools in Porto Alegre, evaluated at two occasions 2008 and in 2013. In 2008, 131 individuals had complete protocol assessment and, from these, 74 returned in for re- evaluation in 2013. The evaluation included genotyping, anthropometry, laboratory tests, feeding behavior and a functional MRI paradigm to verify brain activation in response to the visualization of palatable, non- palatable foods and neutral items. The association with phenotypes was performed using Student's t test and Chi-square; longitudinal study data were evaluated using Generalized Estimating Equations. Results: The variant of the A3669G polymorphism was found in 17.6% of the students in 2008 and 14.9% of the sample in 2013. There was no difference between groups in the sample composition; the comparison between groups of the mean caloric intake originating from proteins, carbohydrates and fats in 2008 revealed no significant differences; at this time, analysis showed lower consumption of sugars and total calories in the G carrier group. In 2013, these individuals showed a reduction in insulin level and resistance, with no differences in food intake. The fMRI data indicated that viewing a food palatable image by the wild-type allele carrier group activated a region involved in visual processing (middle occipital gyrus) and deactivated an area related to motor planning and sensitivity to taste (pre central gyrus). Conclusion: The results showed that G carriers of the A3669G polymorphism of glucocorticoid receptor gene had lower insulin resistance levels, preceded by modulation of their food preference. The findings in functional neuroimaging showed increased incentive salience on viewing palatable food images and a predisposition for impulsivity in noncarriers. Data suggest that reduction in glucocorticoids sensitivity at a cellular level affects food intake, by reducing consumption of palatable foods, possibly decreasing the risk for metabolic diseases.