Orientador: Maria Aparecida Custodio Domingues / Resumo: As neoplasias testiculares constituem aproximadamente 1% dos cânceres masculinos. Dentre eles, os tumores que têm origem nas células germinativas (TTCG) são os mais frequentes. Por sua natureza, esses tumores têm padrão morfológico variado, sendo distribuídos em dois subgrupos: os seminomas e os não-seminomas. Esses últimos, por sua vez, são classificados em carcinomas embrionários, tumores do seio endodérmico, coriocarcinomas, teratomas e tumores mistos de células germinativas. Há consenso na literatura de que a invasão vascular verificada histologicamente no tumor primário é o melhor indicador preditivo de progressão da doença e recidiva. Estudos recentes demonstram o papel dos fatores de crescimento e seus receptores para avaliação prognóstica dos TTCG, no que o uso da imuno-histoquímica é fundamental. O presente estudo procurou avaliar pela técnica imuno-histoquímica à ocorrência da expressão do receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR), do Her2 e do c-Kit em uma série de TTCG não-seminomas primários de testículo. Além disso, explorou a possível relação entre a expressão desses marcadores com a evolução dos pacientes após terapêutica convencional. A série foi constituída de amostras parafinadas existentes no Laboratório de Anatomia Patológica e Citologia do Hospital Amaral Carvalho de Jaú, totalizando 103 pacientes que receberam o diagnóstico de tumor testicular de células germinativas não-seminomas (TTCGNS) no período 1996-2010. Dentre os 103 casos, predominaram... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Testicular neoplasms constitute approximately 1% of male cancers. Among these, germ cell tumors (TGCT) are the most prevalent. These tumors show varied morphological patterns and are distributed into two subgroups: seminomas and non-seminomas. The latter, in turn, are classified as embryonal carcinomas, endodermal sinus tumors, choriocarcinomas, teratomas and mixed germ cell tumors. The consensus in the literature is that histological verification of vascular invasion (VI) in the primary tumor is the best predictor of disease progression and recurrence. However, recent studies have highlighted the role of growth factors and their receptors for prognostic evaluation of TGCT, in which the use of immunohistochemistry is fundamental. This study sought to evaluate the occurrence of epidermal growth factor receptor (EGFR), Her2 and c-Kit in a series of primary non-seminoma TGCTs. In addition, possible relationships between the expression of these markers and patient evolution following conventional therapy was investigated. The series consisted of paraffin-embedded samples from the Laboratory of Anatomical Pathology and Cytology of Amaral Carvalho Hospital in Jaú, SP, Brazil, of 103 patients diagnosed with testicular non-seminoma germ cell tumor (NSGCT) over a 15-year period (1996-2010). Among the 103 cases, testicular NSGCT predominated (57.3%), and among these, staining for EGFR and c-Kit predominated. EGFR was expressed when the choriocarcinoma component was predominant, and c-K... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Submitted by FRANCISCO CARLOS QUEVEDO null (fcqjau@gmail.com) on 2017-09-15T16:19:40Z No. of bitstreams: 1 _TTCG FINAL 260715 FCQ [2].pdf: 2024513 bytes, checksum: 9e2b5af27bf3e7a02eb1625af9c3c0fc (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-09-15T16:27:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 quevedo_fc_dr_bot.pdf: 2024513 bytes, checksum: 9e2b5af27bf3e7a02eb1625af9c3c0fc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-15T16:27:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 quevedo_fc_dr_bot.pdf: 2024513 bytes, checksum: 9e2b5af27bf3e7a02eb1625af9c3c0fc (MD5) Previous issue date: 2017-08-25 / As neoplasias testiculares constituem aproximadamente 1% dos cânceres masculinos. Dentre eles, os tumores que têm origem nas células germinativas (TTCG) são os mais frequentes. Por sua natureza, esses tumores têm padrão morfológico variado, sendo distribuídos em dois subgrupos: os seminomas e os não-seminomas. Esses últimos, por sua vez, são classificados em carcinomas embrionários, tumores do seio endodérmico, coriocarcinomas, teratomas e tumores mistos de células germinativas. Há consenso na literatura de que a invasão vascular verificada histologicamente no tumor primário é o melhor indicador preditivo de progressão da doença e recidiva. Estudos recentes demonstram o papel dos fatores de crescimento e seus receptores para avaliação prognóstica dos TTCG, no que o uso da imuno-histoquímica é fundamental. O presente estudo procurou avaliar pela técnica imuno-histoquímica à ocorrência da expressão do receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR), do Her2 e do c-Kit em uma série de TTCG não-seminomas primários de testículo. Além disso, explorou a possível relação entre a expressão desses marcadores com a evolução dos pacientes após terapêutica convencional. A série foi constituída de amostras parafinadas existentes no Laboratório de Anatomia Patológica e Citologia do Hospital Amaral Carvalho de Jaú, totalizando 103 pacientes que receberam o diagnóstico de tumor testicular de células germinativas não-seminomas (TTCGNS) no período 1996-2010. Dentre os 103 casos, predominaram os TTCGMNS (57,3%). Nestes, observou-se o predomínio de marcação para EGFR e c-Kit. O EGFR foi expresso quando o componente coriocarcinoma era predominante e o c-Kit no componente epitelial do teratoma. A hipótese do estudo, que os casos positivos para os marcadores analisados estariam correlacionados com sobrevida menor, não foi confirmada pela analise estatística de Kaplan-Meier; seria necessário um maior número de casos para se chegar a uma conclusão quanto à sobrevida. Superexpressão, amplificação gênica e mutações ativadoras são frequentes em tumores testiculares germinativos; deste modo, o uso da técnica de Hibridização Fluorescente in situ (FISH) foi utilizada para avaliação dos eventos gênicos relativos a imunoexpressão proteica, observada pelos resultados encontrados no estudo imuno-histoquímico. Somente um caso, classificado como TTCGM, apresentava amplificação para gene EGFR. Este caso apresentou bom prognóstico. Considerou-se que, a ausência de amplificação observada na maioria dos casos, deve-se a qualidade inadequada do material parafinado e estocado. Conclui-se que, na série estudada, os TTCGNS expressam os marcadores EGFR, Her2 e c-Kit, a depender do subtipo histológico; entretanto, estas proteínas não tiveram impacto prognostico. A amplificação gênica para o EGFR pode ocorrer de forma isolada, porem devido a condições técnicas restritivas, não foi possível observa-la nos demais casos positivos para EGFR pela técnica de imuno-histoquímico. / Testicular neoplasms constitute approximately 1% of male cancers. Among these, germ cell tumors (TGCT) are the most prevalent. These tumors show varied morphological patterns and are distributed into two subgroups: seminomas and non-seminomas. The latter, in turn, are classified as embryonal carcinomas, endodermal sinus tumors, choriocarcinomas, teratomas and mixed germ cell tumors. The consensus in the literature is that histological verification of vascular invasion (VI) in the primary tumor is the best predictor of disease progression and recurrence. However, recent studies have highlighted the role of growth factors and their receptors for prognostic evaluation of TGCT, in which the use of immunohistochemistry is fundamental. This study sought to evaluate the occurrence of epidermal growth factor receptor (EGFR), Her2 and c-Kit in a series of primary non-seminoma TGCTs. In addition, possible relationships between the expression of these markers and patient evolution following conventional therapy was investigated. The series consisted of paraffin-embedded samples from the Laboratory of Anatomical Pathology and Cytology of Amaral Carvalho Hospital in Jaú, SP, Brazil, of 103 patients diagnosed with testicular non-seminoma germ cell tumor (NSGCT) over a 15-year period (1996-2010). Among the 103 cases, testicular NSGCT predominated (57.3%), and among these, staining for EGFR and c-Kit predominated. EGFR was expressed when the choriocarcinoma component was predominant, and c-Kit when the epithelial component of the teratoma was predominant. The initial hypothesis that positive cases for any marker would be correlated to lower survival was not confirmed by Kaplan-Meier survival probability studies. A larger number of cases is required to reach any conclusions concerning survival. Gene overexpression and amplification and activating mutations are common in testicular germinal tumors, thus fluorescent in situ hybridization (FISH) was used to validate the genic events results obtained in the immunohistochemical study. Only one case, classified as mixed TGCT, showed EGFR gene amplification, and this case presented good prognosis. The lack of amplification observed in most cases was due to the inadequate quality of the stored, paraffinembedded materials. In conclusion, in the series studied, testicular NSGCT expressed EGFR, Her2 and c-Kit markers depending on the histological subtype; however, these proteins had no prognostic impact. Gene amplification for EGFR may occur in isolation, but due to the limited technical conditions, it was not observed in the other cases positive for EGFR using immunohistochemistry.

Submitted by Kamila Costa (kamilavasconceloscosta@gmail.com) on 2015-06-10T21:05:08Z No. of bitstreams: 1 Tese-Cylles Z dos R Barbosa.pdf: 1619084 bytes, checksum: a4e34330ec2aabc4f71f03f36d92fba5 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-06-11T17:56:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese-Cylles Z dos R Barbosa.pdf: 1619084 bytes, checksum: a4e34330ec2aabc4f71f03f36d92fba5 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-06-11T17:59:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese-Cylles Z dos R Barbosa.pdf: 1619084 bytes, checksum: a4e34330ec2aabc4f71f03f36d92fba5 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-06-11T17:59:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese-Cylles Z dos R Barbosa.pdf: 1619084 bytes, checksum: a4e34330ec2aabc4f71f03f36d92fba5 (MD5) Previous issue date: 2015-01-15 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Byrsonima crassifolia (L.) Kunth, Byrsonima coccolobifolia Kunth and Byrsonima verbascifolia (L.) DC. of the family Malpighiaceae stand out as one of the commonest in the group of savannas vegetation of the “Rio Branco-Rupununie” landscape complex. The “Rio Branco-Rupununie” landscape complex lies in the state of Roraima and is one of the largest blocks of savannas in South America and in the largest area of savannas in Brazilian Amazonia. Morphological and technological studies of the reproductive organs of the native species of savannas area of Brazilian Amazonia are unknown. In Malpighiaceae, despite the unassailable economic and medicinal importance of the species of the genus Byrsonima the studies as to these aspects are few. So, it was intended to investigate morphological aspects of the pyrenes and seedling of B. crassifolia (L.) Kunth, B. coccolobifolia Kunth and B. verbascifolia (L.) DC. of an Amazonian savannas of Boa Vista, Roraima, as well as technological aspects of the pyrenes of three species of Byrsonima. For this purpose, weekly collections between the months of April to July of 2012 were conducted for the obtaining of the pyrenes coming from ripe fruits collected from 12 individuals of natural populations of an area of savannas, in the Água Boa Campo Experimental, of Embrapa Roraima, municipality of Boa Vista-RR. The pyrenes of the three species studied are similar, but, B. crassifolia presented pyrenes with greater diameter while B. coccolobifolia greater length and weight and B. verbascifolia lower weight and seeds with greater length, breadth and thickness in relation to the other two species investigated. The seedlings of the three species present distinct morphological pattern, B. crassifolia have phanerocotyledonary, epigeous and foliaceous seedlings, whereas B. coccolobifolia and B. verbascifolia present phanerocotyledonary, hypogeous and foliaceous seedlings. Other traits ranged among the species, the subsequent epicotyl and the internodes on seedlings of B. verbascifolia are reduced while the development of the plumule is lateral in relation to the cotyledons of B. coccolobifolia. The species B. coccolobifolia and B. verbascifolia present cryptogeal germination, underground plumule, cotyledonary node below soil level and fusion of the cotyledonary petioles as a way of keeping themselves protected from fire which is recurrent on areas of savannas. Pyrenes of B. crassifolia, B. verbascifolia and B. coccolobifolia present physiological dormancy and the method with immersed pyrenes in gibberellic acid solution at a concentration of 500 mg L-1 for 48 hours and integers was more efficient in overcoming seed dormancy of the three species of Byrsonima. / Byrsonima crassifolia (L.) Kunth, Byrsonima coccolobifolia Kunth e Byrsonima verbascifolia (L.) DC. da família Malpighiaceae destacam-se como uma das mais comuns nos grupos de vegetação de savanas do complexo paisagístico“Rio Branco-Rupununie”. O complexo paisagístico “Rio Branco-Rupununie” encontra-se localizado no estado de Roraima, e constitui-se em um dos maiores blocos de savanas da América do Sul e na maior área de savanas da Amazônia Brasileira. Estudos morfológicos e tecnológicos dos órgãos reprodutivos da maioria das espécies nativas de área de savanas da Amazônia Brasileira são desconhecidos. Em Malpighiaceae, apesar da incontestável importância econômica e medicinal das espécies do gênero Byrsonima são poucos os estudos quanto a estes aspectos. Assim, objetivou-se estudar aspectos morfológicos do pirênio e plântula de B. crassifolia (L.) Kunth, B. coccolobifolia Kunth e B. verbascifolia (L.) DC. de uma savana amazônica de Boa Vista, Roraima, bem como aspectos tecnológicos dos pirênios das três espécies de Byrsonima. Para isto, coletas semanais, entre os meses de abril a julho de 2012, foram realizadas para a obtenção dos pirênios provindos de frutos maduros colhidos de 12 indivíduos de populações naturais de uma área de savana, no Campo Experimental de Água Boa, da Embrapa Roraima, município de Boa Vista-RR. Os pirênios das três espécies estudadas são similares, entretanto, B. crassifolia apresentou pirênios com maior diâmetro, enquanto que B. coccolobifolia maior comprimento e peso, e B. verbascifolia menor peso e sementes com maior comprimento, largura e espessura em relação às outras duas espécies estudadas. As plântulas das três espécies apresentam padrão morfológico diferenciado, B. crassifolia possuem plântulas fanerocotiledonares, epígeas e foliáceas, enquanto que B. coccolobifolia e B. verbascifolia plântulas fanerocotiledonares, hipógeas e foliáceas. Outros caracteres variaram entre as espécies, o epicótilo e os entrenós subseqüentes em plântulas de B. verbascifolia são reduzidos, enquanto que o desenvolvimento da plúmula é lateral em relação aos cotilédones de B. coccolobifolia. Ambas as espécies B. coccolobifolia e B. verbascifolia apresentam germinação criptógea, plúmula subterrânea, nó cotiledonar abaixo do nível do solo e fusão dos pecíolos cotiledonares como forma de se manter protegida do fogo que é recorrente em área de savanas. Os pirênios de B. crassifolia, B. verbascifolia e B. coccolobifolia apresentam dormência fisiológica e o método com pirênios imersos em solução de ácido giberélico na concentração de 500 mg L-1, durante 48 horas e íntegros foi mais eficientes na superação da dormência das sementes das três espécies de Byrsonima.

The objective of this work was to evaluate the influence of the fruit maturation stage in the physical attributes and germination of Schefflera morototoni pyrenes subjected to pre-germination treatments. Fruits with green and purplish green coloration were collected from 14 individuals, pulped in running water, the hollow pyrenes were discarded after counting, together with those presenting retracted and oxidized endosperm, using the uniforms (with the greenish endosperm occupying the whole cavity of the pyrene). The experiment was conducted in completely randomized design in a 2 x 5 factorial (stages of fruit maturation and pre-germination treatments), with four repetitions in plots containing 25 pyrenes. For greater capacity and germination speed of the pyrenes, fruits should be harvested when they present a purplish green coloration, discarding those with hollow pyrenes, with retracted or oxidized endosperm. The germination capacity of the pyrenes with uniform endosperm varied between 50 and 60%, with the beginning of the process at about 40 days after sowing and extending for up to 60 days in vermiculite. Pulped pyrenes, dried and soaked in water at 60ºC for 5 minutes, followed by soaking in water at room temperature for 12 hours begin the germination process in less time, in relation to those pulped, dried, scarified and soaked for 6 hours. The fruit endocarp is permeable and rigid; however, it presents a natural opening when soaked. The objective was to evaluate the variability in seedling emergence measures of Schefflera morototoni from pyrenes of different individuals. Fruits of 14 individuals were pulped and pyrenes with uniform endosperm were selected. The experiment was conducted in completely randomized design with 14 treatments (individuals) and 11 repetitions in parcels containing 50 pyrenes with uniform endosperm treated by immersion in water at 60 ºC for 5 minutes and then soaked at room temperature for 12 hours. The substrate used was a mixture in proportion 2:1:1:1/2 (v/v) soil, commercial substrate Bioplant®, coarse sand and vermicompost, with pyrenes sown at 1 cm depth in expanded polystyrene trays, maintained in a nursery with 50% reduction in luminosity at average temperatures of 19.3ºC minimum and 30.2 ºC maximum and daily irrigation. Daily counting of seedlings evaluated capacity, time, rate, uniformity and synchrony of emergence, besides the distribution of frequency of emergence in relation to time. The emergence of seedlings is slow, irregular and asynchronous, taking more than 80 days for stabilization of the emergence. The percentage of seedlings can reach up to 57%, but even when the endosperm occupies the whole cavity of the pyrene and is greenish, the emergence of seedlings may not occur. There is variability in seedling emergence measurements from pyrenes of different Schefflera morototoni individuals. / CAPÍTULO II: O objetivo do trabalho foi avaliar a influência do estádio de maturação dos frutos nos atributos físicos e de germinação de pirênios de Schefflera morototoni submetidos a tratamentos pré-germinativos. Frutos com coloração verde e verde-arroxeada foram coletados de 14 indivíduos, despolpados em água corrente, descartando-se, após contabilização, os pirênios chochos, com endosperma retraído e oxidado, utilizando-se os uniformes (com endosperma esverdeado ocupando toda a cavidade do pirênio). O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado em esquema fatorial 2 x 5 (estádios de maturação dos frutos e tratamentos pré-germinativos), com quatro repetições em parcelas contendo 25 pirênios. Verificou-se que para maior capacidade e velocidade de germinação dos pirênios, os frutos devem ser colhidos quando apresentarem coloração verde-arroxeada, descartando-se àqueles com pirênios chochos, endosperma retraído ou oxidado. A capacidade de germinação dos pirênios com endosperma uniforme varia entre 50 e 60%, com início do processo em cerca de 40 dias após semeadura, se estendendo por até 60 dias em vermiculita. Pirênios despolpados, secos e embebidos em água a 60oC por 5 minutos, seguida da embebição em água à temperatura ambiente por 12 horas iniciam o processo de germinação em menor tempo, em relação aos despolpados, secos, escarificados e embebidos por 6 horas. O endocarpo dos frutos é permeável e rígido, no entanto, apresenta abertura natural quando embebido. CAPÍTULO III: O objetivo foi avaliar a variabilidade nas medidas de emergência de plântulas de Schefflera morototoni provenientes de pirênios de diferentes indivíduos. Frutos de 14 indivíduos foram despolpados, selecionando-se pirênios com endosperma uniforme. O experimento de emergência foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado com 14 tratamentos (indivíduos) e 11 repetições em parcelas contendo 50 pirênios com endosperma uniforme imersos em água a 60 ºC por 5 minutos e posteriormente embebidos em água destilada à temperatura ambiente por 12 horas. O substrato utilizado foi uma mistura na proporção 2:1:1:1/2 (v/v) de solo, substrato comercial Bioplant®, areia de textura grossa e vermicomposto, com pirênios semeados a 1 cm de profundidade em bandejas de poliestireno expandido, mantidas em viveiro com sombrite de 50% de redução luminosa e médias de temperaturas de 19,3 ºC a mínima e 30,2 ºC a máxima e irrigadas diariamente. Das contagens diárias das plântulas emergidas foram avaliadas medidas de capacidade, tempo, velocidade, uniformidade e sincronia de emergência, além da distribuição de frequência percentual de emergência em relação ao tempo. A emergência das plântulas é tardia, irregular e assíncrona, gastando mais de 80 dias para estabilização do estande. A porcentagem de plântulas emergidas pode atingir até 57%, porém mesmo quando o endosperma ocupa toda a cavidade do pirênio e está esverdeado, a emergência das plântulas pode não ocorrer. Há variabilidade nas medidas de emergência de plântulas quando obtidas de pirênios de indivíduos distintos de Schefflera morototoni. / Mestre em Agronomia