Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2006. / Submitted by Thaíza da Silva Santos (thaiza28@hotmail.com) on 2009-10-10T00:14:21Z No. of bitstreams: 1 2006_Omesina Maroja Limeira.pdf: 416006 bytes, checksum: d32d5f56de83e456eda1006a8965d1c5 (MD5) / Approved for entry into archive by Gomes Neide(nagomes2005@gmail.com) on 2010-07-22T17:37:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_Omesina Maroja Limeira.pdf: 416006 bytes, checksum: d32d5f56de83e456eda1006a8965d1c5 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-07-22T17:37:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_Omesina Maroja Limeira.pdf: 416006 bytes, checksum: d32d5f56de83e456eda1006a8965d1c5 (MD5) Previous issue date: 2006 / Estudo descritivo transversal de serie de casos com dados clínicos e laboratoriais correlacionando as variáveis: concordância de índices ML FLOW com baciloscopia, sexo e faixas etárias. Realizado no Hospital Universitário de Brasília, entre março e outubro de 2006 em que foram analisados, 174 indivíduos divididos em três grupos: 46 pacientes hansenianos multibacilares(G1), 37 pacientes reacionais pós alta ( G2) e 91 contatos domiciliares (G3). As faixas etárias avaliadas foram de 0 a 14 anos, 15 a 40 anos e maiores que 40 anos. A concordância da soropositividade com demais variáveis foi analisada através do índice Kappa. A soropositividade média de 39, 1% foi superior ao índice baciloscópico de 35,6%. Homens jovens entre 15 a 40 anos corresponderam 53,4% da análise corroborando os dados da literatura. Foram detectados 17 casos novos, correspondendo a 18,68% dos contatos e 48,68% dos reacionais pós alta, indicando a necessidade de maior controle epidemiológico desta endemia. ___________________________________________________________________________________ ABSTRACT / This is a descriptive transversal study of serial cases with clinical and laboratorial data on Hansen´s disease correlating the variables: agreement between ML FLOW and baciloscopy, sex and age stripe’s .This study carried out from March to October 2006 on the Brasilia’s Universitary Hospital , to evaluate 174 individuals shared among three groups: 46 multibacillars leprosy patients (G1), 37 reational leprosy patients (G2) and domiciliars contacts. The age stripe’s analysed were from 0 to 14 years old, 15 to 40 years, and over 40 years old. The soropositiviness’ agreement with other variables were evaluated through Kappa index. The average soropositiviness of 39,1% was major than the baciloscopy index of 35, 6% . Young men between 15 to 40 years old were prevallent , confirming the literature data´s. Seventen new cases were detected, corresponding to 18,68% of contact group and 48,68% of reactional patients had seral positivity by the ML FLOW test , indicating a bigger need of management of this endemy.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Enfermagem, 2016. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2016-10-06T15:34:06Z No. of bitstreams: 1 2016_MariaLuizaRêgoBezerra.pdf: 1954020 bytes, checksum: 2f06b2b2ad954008a895cc7e7409751d (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-11-21T13:59:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_MariaLuizaRêgoBezerra.pdf: 1954020 bytes, checksum: 2f06b2b2ad954008a895cc7e7409751d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-21T13:59:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_MariaLuizaRêgoBezerra.pdf: 1954020 bytes, checksum: 2f06b2b2ad954008a895cc7e7409751d (MD5) / Este estudo objetivou analisar o perfil diagnóstico de enfermagem de usuários acometidos pela hanseníase, em um hospital de ensino do Distrito Federal, conforme a Taxonomia II da NANDA-I, à luz do construto de autocuidado de Orem. Estudo descritivo, quantitativo de delineamento transversal, realizado entre os meses de janeiro a março de 2016, e contemplou uma amostra por conveniência de 40 indivíduos acometidos pela hanseníase atendidos em um ambulatório especializado em hanseníase. A maioria dos participantes era homens (26; 65%), com idade entre 56-66 anos (14; 35%), de cor parda (24; 60%), estado civil casado (18; 45%), religião católica (55%; 22) e nível de instrução ensino fundamental completo (9; 23%). A renda familiar mais referida foi a correspondente de até 1 salário mínimo (16; 40%). Aposento por idade foi a ocupação mais ocorrente nos participantes do estudo (7; 18%) e 68% (27) dos mesmos apresentaram como condicionantes de saneamento básico e acesso à saúde água tratada, rede de esgoto, rua asfaltada e televisão. No que concerne a procedência a maioria dos indivíduos era de regiões administrativas do Distrito Federal como: Planaltina (20%; 8), Riacho Fundo I (3; 8%), São Sebastião (3; 8%) e Santa Maria (2%; 5); os demais corresponderam ao Plano Piloto (2;5%) e a outros estados como Goiás (45%; 18), Minas Gerais (3; 8%) e Piauí (1; 3%). Dezoito (45%) dos participantes da pesquisa foram caracterizados com outras formas clínicas, tendo igual referência para as baciloscopias de raspado intradérmico com resultado positivo e não informado (16; 40%). Poliquimioterapia (PQT) de 6 a 12 meses (18; 45%), classificação operacional (40; 100%) e PQT comum (26; 65%) foram os achados em relação ao tratamento poliqmuioterápico. A maioria dos indivíduos era caso novo de hanseníase (29; 73%), com uma cicatriz de BCG (19; 48%) e com o sintoma mais referido neuralgia de membros (8; 20%). Foram listados no estudo 637 diagnósticos de enfermagem, sendo ao todo 37 rótulos diagnósticos evidenciados, dos quais 44,6% (284) foram com foco no problema, 49% (309) diagnósticos de risco ou vulnerabilidade e apenas 7 % (44) enquadraram-se na classificação de promoção da saúde. Com frequência acima de 50% estão os seguintes diagnósticos: Dor crônica (40; 100%), Proteção ineficaz (40; 100%), Risco de constipação (40; 100%) , Risco de função hepática prejudicada (40; 100%), Risco de lesão (40; 100%), Risco de lesão térmica (40; 100%), Risco de infecção (40; 100%), Risco de baixa autoestima situacional (38; 95%), Estilo de vida sedentário (34; 85%), Conhecimento deficiente (33; 83%), Atividade de recreação deficiente (29; 73%), Distúrbio na imagem corporal (29; 73%), Risco de olho seco (26; 65%), Disposição para processos familiares melhorados (26; 65%) e Fadiga (26; 65%). Os diagnósticos de enfermagem Integridade da pele prejudicada (17; 43%), Integridade tissular prejudicada (4; 10%) e Risco de integridade da pele prejudicada (19; 48%) também foram destacados e discutidos no estudo diante da relevância, dado ao acometimento cutâneo da hanseníase. Em suma evidenciou-se a relevância dos diagnósticos de enfermagem para o planejamento, implementação e avaliação do processo de cuidar em enfermagem à luz da Teoria do Autocuidado de Orem em indivíduos acometidos pela hanseníase. ________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / This study was intended to analyze the nursing diagnosis profile of users affected by leprosy, in a teaching hospital of the Federal District, according to NANDA-I Taxonomy II, based on the Orem’s construct of self-care. This is a descriptive and quantitative study, with a cross-sectional design, performed between the months of January and March 2016, which encompassed a convenience sample of 40 individuals affected by leprosy and assisted in an outpatient clinic specialized in leprosy. Most participants were men (26; 65%), aged between 56 and 66 years (14; 35%), with brown color (24; 60%), married (18; 45%), Catholics (55%; 22) and with a schooling level equivalent to the complete elementary school (9; 23%). The most referred family income was the one corresponding to up to one minimum wage (16; 40%). Retirement due to age was the most recurrent occupation in the study participants (7; 18%), and 68% (27) of them reported conditions such as basic sanitation and access to health, treated water, sewage system, paved street and television. Concerning the origin, most individuals were from administrative regions of the Federal District such as: Planaltina (20%; 8), Riacho Fundo I (3; 8%), São Sebastião (3; 8%) and Santa Maria (2%; 5). The others corresponded to the Plano Piloto (2;5%) and other Brazilian states such as Goiás (45%; 18), Minas Gerais (3; 8%) and Piauí (1; 3%). Eighteen (45%) of the research participants were characterized with other clinical forms, with equal reference to skin smears of intradermal scraping with positive result and unanswered (16; 40%). Multidrug therapy (MDT) from 6 to 12 months (18; 45%), operational classification (40; 100%) and common MDT (26; 65%) were the findings with respect to the polychemotherapic treatment. Most individuals were new cases of leprosy (29; 73%), with a BCG scar (19; 48%), and the most referred symptom was the neuralgia in members (8; 20%). The study listed 637 nursing diagnoses, and to all 37 labels evidenced diagnostics, of which 44.6% (284) were Focused on the problem, 49% (309) Vulnerability diagnoses, and only 7% (44) framed, in Health promotion classification. Often above 50 % are the following diagnoses: Chronic pain (40; 100%), Ineffective protection (40; 100%), Risk for constipation (40; 100%), Risk for impaired liver function (40; 100%), Risk for injury and Risk for thermal injury (40; 100%), Risk for infection (40; 100%), Risk for situational low self-esteem (38; 95%), Sedentary lifestyle (34; 85%); Knowledge deficit (33; 83%), Deficit in recreational activities (29; 73%), Disturbed body image (29; 73%), Risk for dry eye (26; 65%), Willingness to improved family processes (26; 65%) and Fatigue (26; 65%) were the most frequent nursing diagnoses displayed. Impaired skin integrity (17; 43%), Impaired tissue integrity (4; 10%) and Risk for impaired skin integrity (19; 48%) were also emphasized and discussed in the study because of the relevance given to the cutaneous involvement of leprosy. In summary, it has highlighted the relevance of the nursing diagnoses for the planning, implementation and assessment of the process of caring for in nursing on the basis of the nursing theory “Orem’s Theory of Self-Care” in individuals affected by leprosy. ____________________________________________________________________ RESUMEN / Este estudio tuvo como objetivo analizar el perfil de diagnóstico de enfermería de usuarios afectados por la lepra, en un hospital de enseñanza del Distrito Federal, de acuerdo con la Taxonomía II de la NANDA, a la luz del constructo de autoatención de Orem. Estudio descriptivo y cuantitativo, con diseño transversal, efectuado entre los meses de enero y marzo de 2016, que incluyó un muestreo por conveniencia de 40 individuos afectados por la lepra atendidos en un dispensario médico especializado en lepra. La mayoría de los participantes eran hombres (26; 65%), con edades entre 56 y 66 años (14; 35%), de color pardo (24; 60%), casados (18; 45%), católicos (55%; 22) y con nivel de escolaridad equivalente a la enseñanza fundamental completa (9; 23%). El ingreso familiar más referido fue aquel que corresponde hasta 1 salario mínimo (16; 40%). La jubilación por edad fue la ocupación más recurrente en los participantes del estudio (7; 18%), y 68% (27) de ellos presentaron condiciones tales como saneamiento ambiental y acceso a la salud, agua tratada, red de alcantarillado, calle asfaltada y television. En relación con al origen, la mayoría de los individuos provenían de regiones administrativas del Distrito Federal como Planaltina (20%; 8), Riacho Fundo I (3; 8%), São Sebastião (3; 8%) y Santa Maria (2%; 5). Los remanecientes correspondieron al Plano Piloto (2;5%) y otros estados brasileños como Goiás (45%; 18), Minas Gerais (3; 8%) y Piauí (1; 3%). Dieciocho (45%) de los participantes de la investigación se caracterizaron con otras formas clínicas, teniendo referencia igual para las baciloscopias de rascado intradérmico con resultado positivo y no informado (16; 40%). Poliquimioterapia (PQT) de 6 a 12 meses (18; 45%), clasificación operacional (40; 100%) y PQT común (26; 65%) fueron los hallazgos con respecto al tratamiento poliquimioterápico. La mayoría de los individuos eran nuevos casos de lepra (29; 73%), con una cicatriz de BCG (19; 48%), y el síntoma más referido fue la neuralgia de las extremidades (8; 20%). Fueron listados 637 duagnósticos de enfermería , y todo el 37 etiquetas evidenciaron diagnósticos , de los cuales el 44,6 % ( 284 ) se han centrado en el problema , el 49% (309) diagnósticos de riesgo o vulnerabilidad , y sólo el 7 % ( 44 ) enmarcados , en la clasificación de promoción de la salud . A menudo por encima del 50 % son los siguientes diagnósticos: Dolor crónico (40; 100%), Protección ineficaz (40; 100%), Riesgo de estreñimiento (40; 100%), Riesgo de deterioro de la función hepática (40; 100% ), Riesgo de lesión y Riesgo de lesión térmica (40; 100%), Riesgo de infección (40; 100%), Riesgo de baja autoestima situacional (38; 95%), Estilo de vida sedentario (34; 85%); Déficit de conocimientos (33; 83%), Déficit de actividades recreativas (29, 73%), Alteración de la imagen corporal (29; 73%), Riesgo de ojo seco (26; 65%), Disposición para mejorar los procesos familiares (26; 65%) y Fatiga (26; 65%) fueron los más frecuentes diagnósticos de enfermería señalados. Deterioro de la integridad de la piel (17; 43%), Integridad tisular prejudicada (4; 10%) y Riesgo de deterioro de la integridad de la piel (19; 48%) también fueron señalados y discutidos en el estudio delante de la relevancia asignada a la afección cutánea de la lepra. Resumiendo, hemos subrayado la relevancia de los diagnósticos de enfermería para el planeamiento, implementación y evaluación del proceso de atención de enfermería a la luz de la teoría de enfermería “Teoría de la Autoatención de Orem” en los individuos afectados por la lepra.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2006. / Submitted by mariana castro (nanacastro0107@hotmail.com) on 2009-09-27T18:15:47Z No. of bitstreams: 1 2006_Joaquim Dias da Mota Longo.pdf: 556788 bytes, checksum: 446b2f12f2dd38ec9a876c4b628d6606 (MD5) / Approved for entry into archive by Gomes Neide(nagomes2005@gmail.com) on 2010-11-03T14:56:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_Joaquim Dias da Mota Longo.pdf: 556788 bytes, checksum: 446b2f12f2dd38ec9a876c4b628d6606 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-11-03T14:56:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_Joaquim Dias da Mota Longo.pdf: 556788 bytes, checksum: 446b2f12f2dd38ec9a876c4b628d6606 (MD5) Previous issue date: 2006-12 / Este estudo objetiva contribuir ao conhecimento da dinâmica da transmissão da hanseníase em Campo Grande, visualizando os aspectos clínicos e epidemiológicas dos pacientes atendidos no período de janeiro de 1994 a julho de 2005, no Ambulatório do Hospital Universitário, e também dos casos-índice e dos comunicantes de hanseníase atendidos em uma Unidade Básica de Saúde em Campo Grande, Mato Grosso do Sul, no período 2002-2003. Entre 192 novos pacientes atendidos no Ambulatório do Hospital Universitário no período de janeiro de 1994 a julho de 2005, observou-se a predominância de casos no sexo masculino (62,5%), de formas multibacilares (67,2%) e da forma clínica dimorfa (35,9%). Constatou-se que setenta e três (73%) por cento dos casos foram avaliados em relação à incapacidade ao início do tratamento, encontrandose 66,7% desses casos sem nenhum problema com mãos, pés ou olhos e 33,3% com incapacidade ou deformidade. Do total de 90 pessoas (17 casos-índice e 73 comunicantes) cadastradas no Centro de Saúde São Francisco, foram encontrados 7 comunicantes positivos, o que corresponde a uma taxa de detecção de 9,6%, resultado expressivo quando comparado a outros estudos. Pelos resultados, entende-se que o fraco controle dos comunicantes pode colaborar para a manutenção da constante taxa de detecção em Campo Grande nos últimos seis anos (1998 a 2003), a despeito da reduçãoda taxa de prevalência em função do tratamento efetivo dos doentes. Nesse sentido, as ações de saúde desenvolvidas para o controle da hanseníase precisam ser direcionadas para quebrar a cadeia de transmissão familiar, seja através de campanhas de conscientização, diagnóstico precoce e tratamento dos casos, seja, principalmente, de atenção com a evasão dos contatos familiares do programa de controle da hanseníase.Os achados deste trabalho reforçam a necessidade da realização de estudos regionais para conhecer melhor a distribuição local da doença, levantando aspectos que podem contribuir para ações de prevenção, diagnóstico e tratamento precoce, evitando as incapacidades e deformidades da hanseníase. Esses estudos devem possibilitar a construção de indicadores epidemiológicos seguros da real dimensão e da tendência da hanseníase em Campo Grande e no estado de Mato Grosso do Sul, contribuindo para um efetivo controle da doença. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The goal of this study is to contribute to knowledge of the leprosy transmission in Campo Grande, being the clinical and epidemiological characteristics of patients assisted at Hospital Universitário between January 1994 and July 2005, and also the index-cases and contact holders assisted at a Health Basic Unit (Unidade Básica de Saúde) in Campo Grande, Mato Grosso do Sul, in the period 2002-2003. The data of the 192 new patients assisted at Hospital Universitário from January 1994 to July 2005 showed that they were mostly male (62.5%); and multibacillary (67.2%) and dimorphous clinical form (35.9%) were prevalent. Seventy-three per cent of the cases were evaluated in relation to incapacity at the beginning of treatment; among these, 66.7% presented no problem with hands, feet or eyes and 33.3% presented incapacity or disfigurement. Among 90 people (17 index-cases and 73 contact holders) registered at São Francisco Health Basic Unit, 7 were positive contacts, which corresponds to a rate of detection of 9.6%, a significant result when compared with other studies. The results showed that the poor control of contact holders contribute to the steady detection rate in Campo Grande in the last six years (1998 a 2003), in spite of a reduction in the prevalence rate due to the effective treatment of the patients. Thus, health actions developed to control Hansen’s disease must be guided towards a halt in household transmission chain, either through awareness campaigns, early diagnosis and treatment of cases, or, and mostly, through attention given to the evasion of household contacts from the disease control program. The findings of this study reinforce the need for regional research, so that the local spread of the disease may be better known, taking into account aspects which may contribute to prevention actions, early diagnosis and treatment., and which may avoid incapacities and disfigurement. Those studies should enable the construction of safe epidemiological indicators of the actual dimension and trend of the disease not only in Campo Grande but also in Mato Grosso do Sul State, contributing to its effective control.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Early diagnosis of leprosy is an important contribution to reducing the incidence of the disease. For its early detection, the development of new platforms that include the mapping of antigens with potential to be used in immunodiagnostic is of great interest. Among these antigens, the PGL-1 and epitopes derived from specific bacillus proteins have received great attention. Alternatively, due to their versatility to perform the same functions as the protein and non-protein natural antigens, mimetic peptides are considered an important tool. Thus, our goal was to produce mimetic peptides of Mycobacterium leprae antigens that are promising as serological markers, which will be explored in new diagnostic platforms. To produce peptide mimetics, phage display technology was used. In the first case, we used a monoclonal anti-PGL-1 (CS-38) aiming to obtain peptides that mimics the PGL-1. In the second case, the peptides were obtained having purified IgGs from patients with leprosy as target. The sequences of the selected peptides expressed on the phage surface were chemically synthesized. The synthetic peptides were validated by ELISA (case 1 and 2) and by an immunosensor based on Surface Plasmon Resonance (case 1). Aiming to confirm and identify the targets of the mimetic peptides, scFv antibodies were produced by reverse engineering. The PGL-1-M3 peptide that mimics the native PGL-1 had a sensitivity of 89.11% and specificity of 100.00% in the IgM detection, with positivity of 100% in lepromatous (LL). The IgG detection had positivity of 60% for tuberculoid (TT) and 39% for household contacts (HC). This peptide was used in assembling one biophotonics platform, which allowed the differentiation of all forms of leprosy (p <0.05). The anti-scFv-M3 PGL-1 recognized native PGL-1 and accurately detected the M. leprae in immunohistochemistry tests. The MPML11, MPML14 and MPML12 peptides that mimics M. leprae antigens detect IgG and IgA in patients and HC. In IgG detection, MPML11 peptide showed positivity in 52.2% of TT and 35% of HC, and is also a promising marker of type 2 reaction. MPML12 and MPML14 peptides showed a very similar behavior to the PGL-1, with positivity of 100% and 92.85% in LL, respectively. The three peptides detected IgA in the serum of patients, especially multibacillary (MBs); and IgA in saliva of MBs and HC which index case was multibacillary. Mimetic peptides obtained in this work were confirmed as true mimetics of M. leprae antigens and can be applied in the diagnosis of leprosy in different platforms. / O diagnóstico precoce da hanseníase representa uma contribuição importante para diminuir a incidência da doença. Para isso é fundamental o desenvolvimento de novas plataformas, que incluam o mapeamento de antígenos com potencial para o imunodiagnóstico. Dentre estes destaca-se o PGL-1 e epítopos obtidos de proteínas específicas do bacilo. Alternativamente, peptídeos miméticos apresentam-se como uma importante ferramenta, pela versatilidade em desempenhar as mesmas funções que os antígenos naturais proteicos e não-proteicos. Dessa forma, nosso objetivo foi produzir peptídeos miméticos a antígenos do Mycobacterium leprae e que sejam promissores como marcadores sorológicos, os quais serão explorados em novas plataformas diagnósticas. Para produzir os peptídeos miméticos foi utilizada a tecnologia phage display. No primeiro processo utilizou-se um anticorpo monoclonal anti-PGL-1 (CS-38) para obter peptídeos miméticos ao PGL-1. No segundo processo, os peptídeos foram produzidos tendo como alvo IgGs purificadas de pacientes com hanseníase. As sequências dos peptídeos expressos nos fagos foram sintetizadas quimicamente. Os peptídeos sintéticos foram validados por ELISA (processo 1 e 2) e imunosensor baseado em Ressonância Plasmônica de Superfície (processo 1). Por meio de engenharia reversa, anticorpos scFv foram produzidos para confirmar e identificar alvos dos peptídeos miméticos. O peptídeo PGL-1-M3 mimético ao PGL-1 nativo apresentou sensibilidade de 89,11% e especificidade de 100,00% na detecção de IgM, com positividade de 100% em lepromatosos (LL), bem como títulos de IgG detectaram positividade de 60% para tuberculóides (TT) e 39% para contatos domiciliares (HC). Com este peptídeo foi montada uma plataforma biofotônica, que diferencia todas as formas clínicas de hanseníase (p<0,05). O scFv anti-PGL-1-M3 reconheceu PGL-1 nativo e detectou com precisão o M. leprae na imuno-histoquímica. Os peptídeos MPML11, MPML12 e MPML14 miméticos de antígenos do M.leprae detectam IgG e IgA em pacientes e HC. Na detecção de IgG, MPML11 apresentou positividade de 52,2% em TT e 35% em HC e também é um promissor marcador de reação tipo 2. MPML12 e MPML14 apresentaram um comportamento muito similar ao PGL-1, tendo 100% e 92,85% de positividade em LL, respectivamente. Os três peptídeos detectaram IgA nos soros de pacientes, especialmente multibacilares (MBs); bem como IgA na saliva de MBs e HC cujo caso índice era multibacilar. Os peptídeos miméticos obtidos nesse trabalho foram confirmados como miméticos verdadeiros de antígenos do M. leprae e podem ser aplicados no diagnóstico da hanseníase em diferentes plataformas. / Doutor em Genética e Bioquímica

CHAPTER II: Objective: Our aim was to compare the performance of three serological assays in leprosy patients and their household contacts utilizing two quantitative ELISA tests using native PGL-I (PGL-1 ELISA), synthetic ND-O-HSA (ND-O-HSA ELISA), and the semi-quantitative lateral flow test (ML-Flow). Methods: Compare the performance of three immunological assays, PGL-I ELISA, ND-O-HSA ELISA, and ML-Flow were evaluated in 156 leprosy patients and 191 household contacts. Results: The sensitivity results of the PGL-1, ND-O-HSA, and ML-Flow were 68.83%, 63.65%, and 60.65%, respectively. The native and synthetic PGL-I ELISA assays detected antibodies in 22.73%, 31.82% of the paucibacillary (PB) patients, and the ML Flow test did not detect antibodies in this group. The ML-Flow test was able to discriminate patients into PB and multibacillary (MB) forms, while the native PGL-I and ND-O-HSA correlated with the bacillary load and the Ridley-Jopling clinical forms. In household contacts, the native PGL-I, ND-O-HSA, and ML-Flow assays detected seropositivity of 25%, 17%, and 10%, respectively. Conclusions: The use of ELISA and ML-Flow tests are thus recommended as additional tools in the diagnosis and classification of the clinical forms, aiding in prescribing the correct treatment regimen to prevent subsequent nerve damage and disability. CHAPTER III: Host pathogen interactions are mainly mediated by specialized molecules of the cell envelope. One of these essential mycobacterial cell wall components is the lipoarabinomannan (LAM). LAM has immunomodulatory roles, but its heterogeneity may be responsible for the differential immune response in leprosy patients and contacts. The research to structural motifs that could contribute as virulence factors and/or protective epitopes, and thereby derive effective biomarkers for diagnosis, drugs and/ or vaccines against leprosy has been very developed. Therefore, our aim was to develop specific mimetic peptides to this lipoglycan by using Phage Display of a random heptamer peptide library that may recognize a differential response in patients and contacts. We have used the anti-LAM CS-35 monoclonal antibody as a target for three rounds of selection. After sequencing and translation, peptides were pre-validated by ELISA and compared to the synthetic LAM-BSA antigen. The most reactive and repetitive peptide motif (A9) was subsequently tested against serum from 54 leprosy patients and 27 endemic controls by ELISA. The A9 phage-displayed peptide clone presented high levels of IgG antibodies in paucibacillary patients, from which 50% of them presented highly reactive sera. This reactivity has also been detected in tuberculoid, borderline-borderline and lepromatous patients. High levels of IgG1 were most frequent in endemic controls and reactional patients. On the other hand, the IgG profile and its subclasses in patients presented high levels of IgG and IgG2 and low levels of IgG1. The A9 clone presented a significant correlation with the synthetic LAM-BSA, for the IgG1 response. The highly reactive IgG response against the A9 clone was associated with the tuberculoid clinical form diagnosis, and detection of both IgG1 and IgG3 against this clone was associated with protection in endemic controls. CHAPTER IV: Heat Shock Proteins (HSPs), GroES and GroEL, are targets of strong human T-cell response, and a third of the cells responsive to M. leprae, recognize these proteins. Monoclonal antibodies mAbs CS-01 and CS-44 selected mimetic peptides that are ligands of their Fab portions, by phage display technique. Sera from 54 patients, 48 household contacts and 27 endemic controls were submitted to ELISA with B2 and A1 mimetic clones of the GroES and GroEL proteins, respectively, for detection of IgG and its subclasses. Using the mimetic clone of B2 GroES, the ELISA detected IgG antibodies present in sera of patients, contacts and endemic controls. The IgG antibodies were abundant in sera from multibacillary patients, especially in lepromatous (LL). A decline of IgG1 was found in patients and household contacts that became sick with leprosy and a raise of this subclass was present in sera of household contacts that did not develop the disease. With the mimetic clone of GroEL A1, the reactive antibodies were abundant in multibacillary patients, with a correlation with the bacillary load. In this study we observed that IgG antibodies against GroEL and GroES can be detected in the diagnosis of leprosy in serological tests produced with clones mimetics of these proteins. And the subclasses of IgG antibodies to GroES can demonstrate a targeting of antigenic molecules that induce the production of protective antibodies. / CAPÍTULO III: Objetivo: O objetivo do trabalho foi comparar a performance de três testes sorológicos em pacientes e seus contatos domiciliares utilizando dois testes quantitativos ELISA, um com o antígeno PGL-1 nativo (ELISA PGL-1), com o antígeno ND-O-HSA sintético (ELISA ND-O-HSA), e o teste semi-quantitativo do fluxo lateral (ML-FLow). Métodos: Os três testes imunológicos ELISA PGL-I, ELISA ND-O-HSA, e ML-Flow foram realizados utilizando soros de 156 pacientes com hanseníase e 191 contatos domiciliares. Resultados: Os resultados da sensibilidade dos testes ELISA PGL-1, ND-O-HSA e ML-FLow foram de 68.83%, 63.65%, e 60.65%, respectivamente. Os testes ELISA PGL-1 nativo e sintético detectaram anticorpos em 22,73% e 31,82% dos soros de pacientes paucibacilares (PB),e o teste ML-FLow não apresentou reatividade em nenhum soro. O ML-Flow foi capaz de discriminar entre os pacientes com as formas PB e multibacilares (MB), enquanto que o ELISA PGL-1 e ND-O-HSA correlacionaram com a carga bacilar e as formas clínicas de Ridley-Jopling. Em contatos domiciliares, os testes ELISA PGL-1 nativo, ND-O-HSA e Ml-FLow detectaram soropositividade de 25%, 17%, e 10%, respectivamente. Conclusões: O uso do teste ELISA e ML-Flow são recomendados no diagnóstico e classificação das formas clínicas, auxiliando na prescrição do tratamento correto e na prevenção do dano neural e da incapacidade. CAPÍTULO IV: Interação patógeno-hospedeiro é mediada principalmente por moléculas especializadas do envelope celular. Um dos componentes essenciais da parede celular das micobactérias é a lipoarabinomanana (LAM). A LAM tem um papel imunomodulador, mas a sua heterogeneidade pode ser responsável pela resposta imune diferenciada em pacientes com hanseníase e contatos. Espera-se que a pesquisa por motivos estruturais de M. leprae possam contribuir, como fatores de virulência ou epítopos de proteção, e assim, derivar biomarcadores eficazes para o diagnóstico, drogas e vacinas contra a hanseníase. Portanto, nosso objetivo foi desenvolver peptídeos miméticos específicos à LAM utilizando Phage Display de uma biblioteca aleatória de peptídeos heptameros que possam reconhecer uma resposta diferencial em pacientes com hanseníase e contatos. Nós utilizamos o anticorpo monoclonal anti-LAM, CS-35, como um alvo de três rodadas de seleção. Após seqüenciamento e tradução, os peptídeos foram pré-validados por ELISA e comparados com o antígeno sintético LAM-BSA. O motivo peptídeo mais reativo e repetitivo (A9) foi posteriormente testado contra o soro de 54 pacientes com hanseníase e 27 controles endêmicos por ELISA. O clone mimético A9 apresentou altos níveis de anticorpos IgG em pacientes paucibacibacilares (PB), sendo que 50% destes soros foram altamente reativos. Esta reação também ocorreu em pacientes tuberculóides, dimorfo-dimorfo e virchowiano. Controles endêmicos e pacientes reacionais apresentaram altos níveis de IgG1 no soro. Por outro lado, o perfil de IgG e suas subclasses em pacientes apresentou altos níveis de IgG e IgG2 e baixos níveis de IgG1. O clone A9 apresentou uma correlação positiva significativa com o antígeno LAM-BSA sintético para a resposta IgG1. A resposta de IgG altamente reativa contra o clone A9 foi associada com o diagnóstico da forma clínica tuberculóide, e a detecção de ambos, IgG1 e IgG3, contra esse clone foi associado à proteção nos controles endêmicos. CAPÍTULO V: Interação patógeno-hospedeiro é mediada principalmente por moléculas especializadas do envelope celular. Um dos componentes essenciais da parede celular das micobactérias é a lipoarabinomanana (LAM). A LAM tem um papel imunomodulador, mas a sua heterogeneidade pode ser responsável pela resposta imune diferenciada em pacientes com hanseníase e contatos. Espera-se que a pesquisa por motivos estruturais de M. leprae possam contribuir, como fatores de virulência ou epítopos de proteção, e assim, derivar biomarcadores eficazes para o diagnóstico, drogas e vacinas contra a hanseníase. Portanto, nosso objetivo foi desenvolver peptídeos miméticos específicos à LAM utilizando Phage Display de uma biblioteca aleatória de peptídeos heptameros que possam reconhecer uma resposta diferencial em pacientes com hanseníase e contatos. Nós utilizamos o anticorpo monoclonal anti-LAM, CS-35, como um alvo de três rodadas de seleção. Após seqüenciamento e tradução, os peptídeos foram pré-validados por ELISA e comparados com o antígeno sintético LAM-BSA. O motivo peptídeo mais reativo e repetitivo (A9) foi posteriormente testado contra o soro de 54 pacientes com hanseníase e 27 controles endêmicos por ELISA. O clone mimético A9 apresentou altos níveis de anticorpos IgG em pacientes paucibacibacilares (PB), sendo que 50% destes soros foram altamente reativos. Esta reação também ocorreu em pacientes tuberculóides, dimorfo-dimorfo e virchowiano. Controles endêmicos e pacientes reacionais apresentaram altos níveis de IgG1 no soro. Por outro lado, o perfil de IgG e suas subclasses em pacientes apresentou altos níveis de IgG e IgG2 e baixos níveis de IgG1. O clone A9 apresentou uma correlação positiva significativa com o antígeno LAM-BSA sintético para a resposta IgG1. A resposta de IgG altamente reativa contra o clone A9 foi associada com o diagnóstico da forma clínica tuberculóide, e a detecção de ambos, IgG1 e IgG3, contra esse clone foi associado à proteção nos controles endêmicos. / Doutor em Genética e Bioquímica

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Nos casos índices, a PCR positiva prevaleceu na faixa etária de 40-59 anos (35,0%); na forma MB (80,0%); casos com 7 a 9 lesões de pele (35,0%) e com ausência de nervos espessados (40,0%). Todos os casos índices positivos para a PCR evidenciaram sinais e sintomas de hanseníase (34,5%) e a maioria não possuía cicatriz de BCG (65,0 %). Entre os contatos, a PCR positiva incidiu no sexo feminino (63,9 %); na faixa etária de 20 a 39 anos (44,4 %); renda familiar de um salário mínimo (47,2 %); ocupação de estudante (33,3 %) e no ensino médio completo (36,1 %). A maior evidência de positividade da PCR nos casos índices e contatos foi na forma multibacilar, respectivamente (37,2 % e 25,6 %). Comprova-se uma concordância altamente significante entre os sinais e sintomas clínicos com a PCR na secreção nasal dos contatos multibacilares, indicando que se estes vierem a adoecer há maior probabilidade de reproduzirem a mesma forma operacional dos casos índices. O maior percentual de PCR positiva foi nos contatos com ausência de cicatriz de BCG (25,8 %). A associação entre os sinais e sintomas e a PCR indica que os contatos com PCR positivo têm 07 vezes mais chance de apresentar sinais e sintomas de hanseníase. Ao estimar o risco potencial para o desenvolvimento da hanseníase nos contatos identificou-se 22 (14,3%) em risco intermediário e 06 (3,9 0%) no alto risco. Cento e quarenta e quatro (144) contatos referiram convívio diário com o caso índice (93,5 %) e destes 36 (25,0 %) foram positivos para a PCR. Verifica-se que com a evolução do tratamento dos casos índices há redução da positividade da PCR, em ambas as formas operacionais. Na correlação entre a PCR e o grau de incapacidade dos casos índices, o grau 1 foi mais prevalente (55,0 %). A detecção do DNA do M. leprae na secreção nasal de contatos intradomiciliares, por PCR, em associação com a avaliação dermatoneurológica eleva a efetividade do diagnóstico precoce na hanseníase, contribuindo com o controle da doença na comunidade. / The purpose of this study was to apply the technique of molecular biology in nasal secretion sample from household contacts of leprosy patients, in combination with dermatological and neurological assessments, improving the early diagnosis of leprosy. The study was conducted in health municipal units of Belém-PA, from February 2013 to April 2015. The sample consisted of 154 household contacts and 58 index cases of leprosy, totaling 212 subjects. Data collection was through epidemiological record, dermatologic and neurological evaluations and BCG scar examination. A nasal secretion sample from each subject for the PCR was collected. In index cases, positive PCR was in the age group of 40-59 years (35.0%), in multibacillary (MB) form (80,0%); cases with 7 to 9 skin lesions (35.0%) and with no enlarged nerves (40.0%). All positive index PCR cases show signs and symptoms of leprosy (34.5%) and most do not have BCG scar (65.0%). Among the contacts, positive PCR prevailed in females (63.9%); in the age group 20-39 years (44.4%); family income of a minimum wage (47.2%); student occupation (33.3%) and completed high school (36.1%). The strongest evidence of positive PCR in index cases and contacts was in multibacillary, respectively (37.2% and 25.6%). Proves to be a highly significant correlation between clinical signs and symptoms with PCR in nasal secretion of multibacillary contacts, indicating that if they get sick are more likely to reproduce the same operating way of index cases. The highest percentage of positive PCR was in contact with the absence of BCG scar (25.8%). The association between the signs, symptoms and PCR indicates that contacts with positive PCR have 07 times more likely to show signs and symptoms of leprosy. In estimating the potential risk for the development of leprosy in contacts, we identified 22 (14.3%) at intermediate risk and 06 (3.9% 0) at high risk. One hundred and forty-four (144) contacts said that they have daily contact with the index case (93.5%) and of these 36 (25.0%) were positive for PCR. The treatment of index cases led to a reduction of PCR positivity in both modes of operation. The correlation between PCR and the degree of disability of the index cases, grade 1 was more prevalent (55.0%). M. leprae DNA detection in the nasal secretion of household contacts for PCR, in association with dermatological and neurological assessments, raises the effectiveness of early diagnosis of leprosy, contributing to the control of the disease in the community.