Orientador: Marlene Tiduko Ueta / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-15T11:53:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Correa_LincolnLima_M.pdf: 1163732 bytes, checksum: 5fe7ecad7d270d89129854e53cdaf3b0 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Este estudo teve como objetivo a associação entre os índices hematológicos de Hoplias malabaricus (traíra), o parasitismo por monogeneas e outras espécies de metazoários e os fatores ambientais. O estudo ocorreu nas lagoas do CEPTA/ICMBio, localizada no município de Pirassununga, SP (21º55'55"S e 47º22'37"W), no período de fevereiro de 2008 a março de 2009 em 187 traíras. Verificou-se que os parâmetros sanguíneos não sofreram alterações significativas em relação ao estágio de maturação, sexo, período de coleta e intensidade de infecção de monogeneas. Porém, os peixes apresentaram valores significativamente positivos para biometria peso/comprimento (r=0,89 e p<0,0001) e os parâmetros ambientais pH/temperatura (r=0,71 e p<0,0001). Verificou-se que os monogeneas não atuaram como indicador ambiental nas lagoas, porém os parâmetros hematológicos revelaram uma maior sensibilidade ao ambiente. Em relação à análise dos outros metazoários, verificou-se uma diferença significativa em relação ao estágio de maturação e intensidade de infecção na Lagoa I (p=0,002) e na Lagoa II não houve diferença. Houve correlação significativa entre peso do peixe e intensidade de infecção na Lagoa I (r=0,50; p<0,001) e entre comprimento e a intensidade de infecção dos metazoários (r=0,42; p<0,001). Contudo, a intensidade média de parasita diferiu significativamente entre as lagoas estudadas. Os metazoários presentes em H. malabaricus também não atuaram como indicador ambiental. / Abstract: This study aimed at the association between blood indexes of Hoplias malabaricus (betrayed), the parasitism by monogeneans and other metazoan species and environmental factors. The study took place in ponds CEPTA / ICMBio, located in the city of Pirassununga, SP (21 º 55'55 "S and 47 º 22'37" W), from February 2008 to March 2009 in 187 traíras. It was found that the blood parameters did not change significantly in relation to the stage of maturation, sex, time of collection and intensity of infection of monogeneans. But the fish had significantly positive for biometrics weight / length (r = 0.89 and p <0.0001) and the environmental parameter pH and temperature (r = 0.71 and p <0.0001). It was found that the monogeneans not acted as an environmental indicator in the lakes , but the haematological parameters showed a greater sensitivity to the environment. On the analysis of the Metazoa, there was a significant difference in the stage of ripeness and intensity of infection in the Lake I (p = 0.002) and in Lake II there was no difference. There was significant correlation between weight of fish and intensity of infection in the Lake I (r = 0.50, p <0.001) and between length and intensity of infection of metazoan (r = 0.42, p <0.001). However, the mean intensity of parasites differed significantly between the lakes studied. The metazoan present in H. malabaricus also did not act as an environmental indicator. / Mestrado / Mestre em Parasitologia

A obesidade é um grave problema de saúde pública, adquirindo características de epidemia mundial. A saúde bucal é agravada pela presença da obesidade e da síndrome metabólica. A perda dentária prejudica a função mastigatória, condição essencial para o paciente que será submetido à cirurgia bariátrica. Este estudo teve por objetivo avaliar parâmetros epidemiológicos e laboratoriais relacionados à função mastigatória, em pacientes candidatos à cirurgia bariátrica, de classes socioeconômicas distintas, a fim de identificar fatores de risco e influência da condição socioeconômica para a mesma. Trata-se de um estudo observacional transversal, com amostra constituída por dois grupos de pacientes, com condições socioeconômicas distintas, um pertencente ao sistema público de saúde (GSUS) e outro à clínica privada (GCP), candidatos à cirurgia bariátrica. Foram analisadas as condições gerais de saúde, incluindo dados antropométricos, comorbidades presentes (hipertensão arterial, diabetes mellitus, apneia do sono, dislipidemias e artropatias) e uso de medicamentos (anti-hipertensivos, hipoglicemiantes orais, insulina, sinvastatinas, diuréticos, vasodilatadores e antiagregantes plaquetários). Dados de exames laboratoriais (hemoglobina, ferritina, proteínas totais, albumina, colesterol total, glicemia, triglicérides), dos hábitos (tabagismo e etilismo) e o número de unidades funcionais dentárias presentes foi analisado (função mastigatória). Os testes adotados foram Qui-quadrado, ANOVA, Goodman, Regressão Logística Múltipla e Bonferroni. Os grupos GSUS e GCP foram homogêneos quanto ao gênero e faixa etária. Quanto à média de unidades funcionais dentárias, foi maior no grupo privado (p<0,001). A função mastigatória prejudicada foi mais presente no grupo público feminino (p<0,001). Quanto aos exames laboratoriais, a glicemia de jejum foi mais frequentemente alterada no GSUS feminino (p<0,001). Ter origem no serviço público de saúde (OR: 8,420 - p=0,003), maior idade (OR: 1,186 p<0,001), ser do gênero feminino (OR: 0,153, p=0,029), portador de diabetes mellitus (OR: 2,545, p=0,045) e tabagista (OR: 2,951, p=0,043) foram fatores de risco independentes para ter função mastigatória prejudicada. A saúde geral e bucal de pacientes obesos do GSUS foram piores e a ausência dentária foi maior em mulheres deste sistema, ressaltando como fator de risco a condição socioeconômica. / Obesity can be labeled as a worldwide outbreak thus, it has led to a serious public health problem. Oral health can be worsened if it is combined with obesity and metabolic X syndrome. The tooth loss usually harms masticatory function, essential status to whom will be submitted to bariatric surgery. This study aimed to assess epidemiologic parameters and blood tests concerning the number of dental functional units, in patients applying to bariatric surgery, who belong to distinct socioeconomic class range, in order to recognize hazard factors and the bias of this condition over them. Observational cross-section study, with samples comprised by two groups of patients, with distinct socioeconomic class range, one of them belonging to public health system (SUSG) and the other to private clinic (CPG), applicants to bariatric surgery. It was assessed the general healthy conditions, including anthropometric data, comorbidities (hypertension, diabetes mellitus, sleep apnea, dyslipidemias and arthropathy) and medicines usage (antihypertensive, oral hypoglycemic agents, insulin, simvastatin, diuretics, vasodilators and platelet antiaggregant). Blood tests data (hemoglobin, ferritin, protein, albumin, total cholesterol, glycaemia, triglycerides), habits (smoking and alcoholism) and the number of dental functional units presents (masticatory function). The tests applied were Chi-Square, ANOVA, Goodman, Multivariable Logistic Regression e Bonferroni. The groups SUSG and CPG were homogeneous taking into account gender and age range. Regarded as the number of dental functional units, was higher in the private group (p<0.001). The impaired masticatory function was rather present among female public group (p<0.001). Regarded as blood tests, fasting glycaemia were mainly above in female SUSG patients (p<0,001). The following hazard factors have corroborated to have patients rated as impaired masticatory function: Belong to public service (OR: 8.420, p=0.003), higher aging (OR: 1.186, p<0.001), female gender (OR: 0.153, p=0.029), with diabetes mellitus (OR: 2.545, p=0.045) and smoking (OR: 2.951, p=0.043). The general and oral health of obese SUSG patients were worse and the tooth loss was higher in female patients in this same group, highlighting as hazard factor the socioeconomic condition.

A obesidade é um grave problema de saúde pública, adquirindo características de epidemia mundial. A saúde bucal é agravada pela presença da obesidade e da síndrome metabólica. A perda dentária prejudica a função mastigatória, condição essencial para o paciente que será submetido à cirurgia bariátrica. Este estudo teve por objetivo avaliar parâmetros epidemiológicos e laboratoriais relacionados à função mastigatória, em pacientes candidatos à cirurgia bariátrica, de classes socioeconômicas distintas, a fim de identificar fatores de risco e influência da condição socioeconômica para a mesma. Trata-se de um estudo observacional transversal, com amostra constituída por dois grupos de pacientes, com condições socioeconômicas distintas, um pertencente ao sistema público de saúde (GSUS) e outro à clínica privada (GCP), candidatos à cirurgia bariátrica. Foram analisadas as condições gerais de saúde, incluindo dados antropométricos, comorbidades presentes (hipertensão arterial, diabetes mellitus, apneia do sono, dislipidemias e artropatias) e uso de medicamentos (anti-hipertensivos, hipoglicemiantes orais, insulina, sinvastatinas, diuréticos, vasodilatadores e antiagregantes plaquetários). Dados de exames laboratoriais (hemoglobina, ferritina, proteínas totais, albumina, colesterol total, glicemia, triglicérides), dos hábitos (tabagismo e etilismo) e o número de unidades funcionais dentárias presentes foi analisado (função mastigatória). Os testes adotados foram Qui-quadrado, ANOVA, Goodman, Regressão Logística Múltipla e Bonferroni. Os grupos GSUS e GCP foram homogêneos quanto ao gênero e faixa etária. Quanto à média de unidades funcionais dentárias, foi maior no grupo privado (p<0,001). A função mastigatória prejudicada foi mais presente no grupo público feminino (p<0,001). Quanto aos exames laboratoriais, a glicemia de jejum foi mais frequentemente alterada no GSUS feminino (p<0,001). Ter origem no serviço público de saúde (OR: 8,420 - p=0,003), maior idade (OR: 1,186 p<0,001), ser do gênero feminino (OR: 0,153, p=0,029), portador de diabetes mellitus (OR: 2,545, p=0,045) e tabagista (OR: 2,951, p=0,043) foram fatores de risco independentes para ter função mastigatória prejudicada. A saúde geral e bucal de pacientes obesos do GSUS foram piores e a ausência dentária foi maior em mulheres deste sistema, ressaltando como fator de risco a condição socioeconômica. / Obesity can be labeled as a worldwide outbreak thus, it has led to a serious public health problem. Oral health can be worsened if it is combined with obesity and metabolic X syndrome. The tooth loss usually harms masticatory function, essential status to whom will be submitted to bariatric surgery. This study aimed to assess epidemiologic parameters and blood tests concerning the number of dental functional units, in patients applying to bariatric surgery, who belong to distinct socioeconomic class range, in order to recognize hazard factors and the bias of this condition over them. Observational cross-section study, with samples comprised by two groups of patients, with distinct socioeconomic class range, one of them belonging to public health system (SUSG) and the other to private clinic (CPG), applicants to bariatric surgery. It was assessed the general healthy conditions, including anthropometric data, comorbidities (hypertension, diabetes mellitus, sleep apnea, dyslipidemias and arthropathy) and medicines usage (antihypertensive, oral hypoglycemic agents, insulin, simvastatin, diuretics, vasodilators and platelet antiaggregant). Blood tests data (hemoglobin, ferritin, protein, albumin, total cholesterol, glycaemia, triglycerides), habits (smoking and alcoholism) and the number of dental functional units presents (masticatory function). The tests applied were Chi-Square, ANOVA, Goodman, Multivariable Logistic Regression e Bonferroni. The groups SUSG and CPG were homogeneous taking into account gender and age range. Regarded as the number of dental functional units, was higher in the private group (p<0.001). The impaired masticatory function was rather present among female public group (p<0.001). Regarded as blood tests, fasting glycaemia were mainly above in female SUSG patients (p<0,001). The following hazard factors have corroborated to have patients rated as impaired masticatory function: Belong to public service (OR: 8.420, p=0.003), higher aging (OR: 1.186, p<0.001), female gender (OR: 0.153, p=0.029), with diabetes mellitus (OR: 2.545, p=0.045) and smoking (OR: 2.951, p=0.043). The general and oral health of obese SUSG patients were worse and the tooth loss was higher in female patients in this same group, highlighting as hazard factor the socioeconomic condition.

Introdução: O risco de transmissão de agentes infeciosos por transfusão sangüínea é maior nos países em desenvolvimento. A hemoterapia na América Latina, embora tenha conquistado grandes avanços tecnológicos e políticos nos últimos anos, ainda apresenta diversos problemas que comprometem a qualidade dos resultados dos testes de triagem sorológica de doadores. A confiabilidade dos resultados emitidos pelos laboratórios que realizam testes de triagem sorológica de bancos de sangue pode ser determinada através de programas de avaliação externa, utilizando multipainéis específicos. Objetivos: Objetivou-se produzir multipainéis específicos para programas de avaliação externa em testes de triagem sorológica de bancos de sangue e determinar a qualidade dos resultados obtidos em 21 centros de referência da América Latina. Resultados: A seleção criteriosa da matéria-prima e a caracterização das amostras foram etapas importantes na determinação das características dos soros que constituíram os Multipainéis. Foram analisados os resultados de 5 programas, realizados no período de 1997 a 2000. A média da taxa de resultados falso-negativos (RFN) foi de 0,7% para anti-HIV, 2,89% para HBsAg, 4% para anti-H Bc, 10,7% para anti-HTLVI/II, 1,07% para anti-HCV, 3,22% para doença de Chagas e 6,25% para Sífilis. A média da taxa de resultados falsopositivos (RFP) variou de 0,73% para doença de Chagas a 5,28 % para antiHCV. Os resultados foram analisados sob diversos prismas, o desempenho de cada centro de referência, a concordância nos resultados das amostras, os \"kits\" utilizados e os parâmetros. Conclusão: Um programa sistemático como o aqui apresentado mostrou pontos importantes dentro do processo de triagem sorológica e auxiliou a elucidar algumas causas de erros. Houve uma melhora gradativa na qualidade dos resultados obtidos nos programas, do ano de 1997 para 1999. Quanto maior a proporção de amostras positivas, maior é a chance de laboratórios cometerem erros, como foi observado no multipainel do quinto programa, que teve aumento da taxa de RFN e RFP, evidenciando a existência de falhas no processo. A participação contínua nesses programas pareceu ser importante para o monitoramento das atividades realizadas no processo de triagem sorológica de doadores. / Background: In developing countries, the risk of acquiring infectious disease through blood transfusion is higher than developed countries. Although in the last 10 years, blood safety has improved in Latin America in terms of technology and politics, several problems remained unsolved that compromise the quality of the results obtained by the laboratories that perform infectious diseases screening tests. Externai evaluation program, using specific multipanel, may be an important tool to evaluate a laboratory that perform serological screening tests. Externai quality control program for blood bank serological test had not been previously performed in Latin America. Objectives: To develop the technology to produce panel of sera reactive to blood born infectious diseases and to determine the quality of the results of 21 reference centers of Latin America. Results: The criteria to select the raw material and to characterize the sample were important to determine the overall quality of the pane!. Using the Multipanel, tive Externai Quality Control programs were organized during 1997 to 2000 with 21 reference laboratories in 16 countries in Latin America. The mean rate of the false negative results was 0,7% for ant-HIV test, 2.89% for HBsAg, 4% for ant-HBc, 10.7% for ant-HTLVI/II, 1.07% for ant-HCV, 3.22% for Chagas diseases, and 6.25% for Syphilis. The mean rate of false positive results varied from 0.73% for Chagas diseases to 5.28% to ant-HCV. The results were also analyzed in terms of performance of each reference center and by the manufacture of the kits used. Conclusion: The program could provide clues about sources of common errors and was an important tool to validate the laboratory screening processo The quality of the results improved from the 1 st to the 4th programo The chance of doing errors was higher, when the proportion of positive samples were higher, as observed in the 5th program that registered elevated index of false positive and false negative results. The continuing participation in this kind of program seemed to be important to monitor the activities performed by the blood bank screening laboratory.

Introdução: O risco de transmissão de agentes infeciosos por transfusão sangüínea é maior nos países em desenvolvimento. A hemoterapia na América Latina, embora tenha conquistado grandes avanços tecnológicos e políticos nos últimos anos, ainda apresenta diversos problemas que comprometem a qualidade dos resultados dos testes de triagem sorológica de doadores. A confiabilidade dos resultados emitidos pelos laboratórios que realizam testes de triagem sorológica de bancos de sangue pode ser determinada através de programas de avaliação externa, utilizando multipainéis específicos. Objetivos: Objetivou-se produzir multipainéis específicos para programas de avaliação externa em testes de triagem sorológica de bancos de sangue e determinar a qualidade dos resultados obtidos em 21 centros de referência da América Latina. Resultados: A seleção criteriosa da matéria-prima e a caracterização das amostras foram etapas importantes na determinação das características dos soros que constituíram os Multipainéis. Foram analisados os resultados de 5 programas, realizados no período de 1997 a 2000. A média da taxa de resultados falso-negativos (RFN) foi de 0,7% para anti-HIV, 2,89% para HBsAg, 4% para anti-H Bc, 10,7% para anti-HTLVI/II, 1,07% para anti-HCV, 3,22% para doença de Chagas e 6,25% para Sífilis. A média da taxa de resultados falsopositivos (RFP) variou de 0,73% para doença de Chagas a 5,28 % para antiHCV. Os resultados foram analisados sob diversos prismas, o desempenho de cada centro de referência, a concordância nos resultados das amostras, os \"kits\" utilizados e os parâmetros. Conclusão: Um programa sistemático como o aqui apresentado mostrou pontos importantes dentro do processo de triagem sorológica e auxiliou a elucidar algumas causas de erros. Houve uma melhora gradativa na qualidade dos resultados obtidos nos programas, do ano de 1997 para 1999. Quanto maior a proporção de amostras positivas, maior é a chance de laboratórios cometerem erros, como foi observado no multipainel do quinto programa, que teve aumento da taxa de RFN e RFP, evidenciando a existência de falhas no processo. A participação contínua nesses programas pareceu ser importante para o monitoramento das atividades realizadas no processo de triagem sorológica de doadores. / Background: In developing countries, the risk of acquiring infectious disease through blood transfusion is higher than developed countries. Although in the last 10 years, blood safety has improved in Latin America in terms of technology and politics, several problems remained unsolved that compromise the quality of the results obtained by the laboratories that perform infectious diseases screening tests. Externai evaluation program, using specific multipanel, may be an important tool to evaluate a laboratory that perform serological screening tests. Externai quality control program for blood bank serological test had not been previously performed in Latin America. Objectives: To develop the technology to produce panel of sera reactive to blood born infectious diseases and to determine the quality of the results of 21 reference centers of Latin America. Results: The criteria to select the raw material and to characterize the sample were important to determine the overall quality of the pane!. Using the Multipanel, tive Externai Quality Control programs were organized during 1997 to 2000 with 21 reference laboratories in 16 countries in Latin America. The mean rate of the false negative results was 0,7% for ant-HIV test, 2.89% for HBsAg, 4% for ant-HBc, 10.7% for ant-HTLVI/II, 1.07% for ant-HCV, 3.22% for Chagas diseases, and 6.25% for Syphilis. The mean rate of false positive results varied from 0.73% for Chagas diseases to 5.28% to ant-HCV. The results were also analyzed in terms of performance of each reference center and by the manufacture of the kits used. Conclusion: The program could provide clues about sources of common errors and was an important tool to validate the laboratory screening processo The quality of the results improved from the 1 st to the 4th programo The chance of doing errors was higher, when the proportion of positive samples were higher, as observed in the 5th program that registered elevated index of false positive and false negative results. The continuing participation in this kind of program seemed to be important to monitor the activities performed by the blood bank screening laboratory.

O diagnóstico da infecção pelo vírus da hepatite C (HCV) é obtido através de testes de triagem para anti-HCV pelo ELISA e para confirmar os positivos, por teste suplementar mais específico, o immunoblot (IB). A infecção ativa é determinada pelas técnicas moleculares como por exemplo a PCR. Os testes sorológicos são métodos indiretos, baseados na detecção de anticorpos específicos, estando portanto, sujeito a vários fatores que limitam a sua eficiência diagnóstica, podendo gerar resultados inespecíficos. Um dos objetivos deste trabalho foi o de avaliar a eficiência diagnóstica dos testes para o diagnóstico da infecção pelo HCV, em condições de rotina diagnóstica, em um grande número de amostras de doadores de sangue e analisar o custo benefício de três diferentes algoritmos, recentemente propostos pelo Centro de Controle de Doenças e Prevenção (EUA). Foram estudadas 692 amostras de soros provenientes de doadores de sangue, sendo 522 positivas e 170 inconclusivas pelo ELISA de triagem (ELlSA-T) realizado no momento da doação. Esses doadores retornaram à Fundação PróSangue/ Hemocentro de São Paulo para a coleta da segunda amostra de sangue para confirmação dos resultados obtidos na doação. Em todas as amostras de retorno foram realizadas ELISA (ELISA-R) e a PCR, o IB somente nas positivas ou indeterminadas no ELISA-R. A concordância global de resultados entre ELlSA-T e ELlSA-R foi de 64,5%, sendo 77,6% (405/522) entre os positivos e 24,1 % (41/170) entre os inconclusivos. Em amostras positivas nos dois ELlSAs, o IB foi positivo (aqui denominadas de sorologicamente positivas) em 69,6% (282/405) e PCR em 61,2% (248/405). Entre as 282 amostras sorologicamente positivas, viremia foi detectada em 87,6% (247/282). A ausência de viremia em 12,4% (37/282) dessas amostras pode representar amostras de indivíduos que tiveram a infecção no passado e que eliminaram espontaneamente o HCV. A avaliação de bandas individuais no IB mostrou a alta freqüência das bandas do core (C1C2 e C3C4). Entretanto sua distribuição entre as amostras de doadores virêmicos e não virêmicos foi bastante semelhante. A intensidade da reação, expressa como graduação da coloração das bandas no IB, demonstrou que C1C2 e NS3 fortemente reativas eram as mais associadas à positividade no IB e na PCR e a banda NS4 somente com a PCR. A análise dos resultados do teste de ELISA anti-HCV de doadores de sangue indicou que a relação DO/CO, aqui denominada de índice de reatividade (IR), poderia ser utilizada como preditivo de positividade no teste suplementar. O IR de todas as amostras foram estratificados em 6 grupos sendo o IR &#8805; 6 o que melhor correlacionou-se com a positividade no IB (IR de corte). Os três algoritmos para o diagnóstico da infecção pelo HCV, propostos pelo CDC foram avaliados, sendo dois novos (a e b) e o outro, o algoritmo convencional (c). a) Resultados de ELISA com IR &#8805; 6,0 é considerado positivo sem a necessidade de teste suplementar. Para amostras IR < 6,0, de preferência o IB, seria realizado; b) Teste molecular (NAT) deve ser feito para todas as amostras positivas no teste de triagem, seguido de IB naquelas negativas no NAT; c) IB realizado para todas as amostras positivas na triagem. Esses algoritmos foram aplicados em todas as amostras, com resultados muito semelhantes entre si: 287, 287 e 285 positivos, respectivamente para a, b e c. Um total de 283 amostras foi positivo nos três algoritmos e quatro, com resultados divergentes, foram analisadas separadamente. A análise do custo benefício mostrou que o algoritmo a é o mais econômico e prático podendo ser recomendado para os laboratórios com condições econômicas limitadas; o b é o mais completo para fins de decisão médica, fornecendo informações precoces sobre a presença ou a ausência da viremia; o c é importante para determinar o status imunológico e para a população de baixa prevalência da infecção pelo HCV. O custo estimado dos três algoritmos baseou-se na tabela de 2004 da Associação Médica Brasileira. Esses custos mostraram ser o algoritmo a, 40% mais econômico e o b, 18,2% mais oneroso do que o c. Os algoritmos a e c foram complementados pela realização da PCR, nas amostras indeterminadas provenientes desses algoritmos. Duas amostras resultaram em PCR positivas, as mesmas já consideradas positivas inicialmente pelo algoritmo b. Os três algoritmos estudados, puderam ser validados para o diagnóstico laboratorial da infecção pelo HCV, podendo a escolha depender do interesse clínico ou da prevalência dessa infecção na população. / The diagnosis of hepatitis C (HCV) infection is usually undertaken stepwise by screening with ELISA and confirming the positive results in screening with a more specific assay, the immunoblot (IB). Active infection by hepatitis C virus should be confirmed by molecular techniques such as PCR. Serological tests are indirect methods based on specific antibody detection. Therefore, they may be influenced by many factors which limit their diagnostic efficiency, producing false-positive results. The aim of this work was to evaluate the real diagnostic efficiency of anti-HCV screening tests, in routine condition, in a large serum sampling, and to analyze the cost-benefit of three different algorithms recently proposed by the Center for Diseases Control and Prevention. 692 serum samples were studied. The samples consisted of 522 sera from blood donors, positive in ELISA, with the sample collected by the time of donation (ELlSA-T), and of 170 inconclusive sera. Those donors returned to Fundação PróSangue Hemocentro de São Paulo to have a second sample of blood collected to confirm the former results. ELlSA-R and PCR were carried out in all second samples and all the positive and inconclusive samples were submitted to IB. The global concordance of results between ELlSA-T and ELlSA-R was 64,5%, in that 77,6%(405/522) were obtained among the positives results and 24,1% (41/170) among inconclusive. For samples positive in both ELlSAs, IB was positive (serologically positive) in 69,6% (282/405) and PCR in 61,2% (248/405). Among 282 serologically positive samples, viremia was detected in 87,6% (247/282) and it was absent in 12,4% (37/282) of the sera, which could represent samples from individuals who were infected by HCV in the past and who have spontaneously cleared the virus. Evaluation of each antigenic band of IB showed high frequency of core (C1C2 and C3C4). Their distribution among viremic and non-viremic donors was similar. The reaction intensity, expressed by the color score of the bands, demonstrated that the strongly reactive bands of C1C2 and NS3 were associated with positiveness in IB and PCR and of NS4 only with PCR positive. Analysis of anti-HCV ELISA results from blood donors indicated that the signal-to-cut-off ratio (DO/CO), named as reactive index (IR) in this study, could be used to predict supplemental test positive results for anti-HCV. IR from all samples was classified in 6 groups, being IR &#8805; 6, the index better correlated with positive on IB (cut-off IR). The CDC has recently proposed three algorithms for HCV diagnosis, in which two were new (a and c) and one was a conventional algorithm (c). a) screening-test-positive samples with IR &#8805; 6,0 can be reported as anti-HCV positive without supplemental testing. IR < 6,0 should have refiex supplemental testing performed, preferably IB; b) reflex supplemental testing in all specimens screening-test-positive by performing NAT followed by IB for specimens with NAT negative results; c) reflex supplemental testing (IB) in all specimens screening-test-positive. These algorithms were applied to all samples and resulted in very similar positive results: 287, 287 and 285, respectively for a, b and c. A total of 283 samples were positive in three algorithms. Four samples showed divergent results and were analyzed separately. Cost-benefit - The algorithm a is the most economical and practical and it could be recommended for laboratory with limited conditions and for population with a high prevalence of HCV infection; b is the most complete for medical decision providing early information about the presence or absence of viremia; c is suitable for determining immune status and for HCV infection low prevalence population. The cost of the three algorithms was estimated based on the 2004 Brazilian Medical Association Table. These costs were 40% lower than c for algorithm a, and 18,2% higher for b. The algorithm a and c were complemented by performing PCR to solve indeterminate results. This complementary test detected two samples PCR positive which were already positive by algorithm b. Therefore we could validate those algorithms for HCV infection laboratory diagnosis. Laboratories and blood banks may choose the algorithm depending on the clinical interest or on the prevalence of HCV infection in the population.

O diagnóstico da infecção pelo vírus da hepatite C (HCV) é obtido através de testes de triagem para anti-HCV pelo ELISA e para confirmar os positivos, por teste suplementar mais específico, o immunoblot (IB). A infecção ativa é determinada pelas técnicas moleculares como por exemplo a PCR. Os testes sorológicos são métodos indiretos, baseados na detecção de anticorpos específicos, estando portanto, sujeito a vários fatores que limitam a sua eficiência diagnóstica, podendo gerar resultados inespecíficos. Um dos objetivos deste trabalho foi o de avaliar a eficiência diagnóstica dos testes para o diagnóstico da infecção pelo HCV, em condições de rotina diagnóstica, em um grande número de amostras de doadores de sangue e analisar o custo benefício de três diferentes algoritmos, recentemente propostos pelo Centro de Controle de Doenças e Prevenção (EUA). Foram estudadas 692 amostras de soros provenientes de doadores de sangue, sendo 522 positivas e 170 inconclusivas pelo ELISA de triagem (ELlSA-T) realizado no momento da doação. Esses doadores retornaram à Fundação PróSangue/ Hemocentro de São Paulo para a coleta da segunda amostra de sangue para confirmação dos resultados obtidos na doação. Em todas as amostras de retorno foram realizadas ELISA (ELISA-R) e a PCR, o IB somente nas positivas ou indeterminadas no ELISA-R. A concordância global de resultados entre ELlSA-T e ELlSA-R foi de 64,5%, sendo 77,6% (405/522) entre os positivos e 24,1 % (41/170) entre os inconclusivos. Em amostras positivas nos dois ELlSAs, o IB foi positivo (aqui denominadas de sorologicamente positivas) em 69,6% (282/405) e PCR em 61,2% (248/405). Entre as 282 amostras sorologicamente positivas, viremia foi detectada em 87,6% (247/282). A ausência de viremia em 12,4% (37/282) dessas amostras pode representar amostras de indivíduos que tiveram a infecção no passado e que eliminaram espontaneamente o HCV. A avaliação de bandas individuais no IB mostrou a alta freqüência das bandas do core (C1C2 e C3C4). Entretanto sua distribuição entre as amostras de doadores virêmicos e não virêmicos foi bastante semelhante. A intensidade da reação, expressa como graduação da coloração das bandas no IB, demonstrou que C1C2 e NS3 fortemente reativas eram as mais associadas à positividade no IB e na PCR e a banda NS4 somente com a PCR. A análise dos resultados do teste de ELISA anti-HCV de doadores de sangue indicou que a relação DO/CO, aqui denominada de índice de reatividade (IR), poderia ser utilizada como preditivo de positividade no teste suplementar. O IR de todas as amostras foram estratificados em 6 grupos sendo o IR &#8805; 6 o que melhor correlacionou-se com a positividade no IB (IR de corte). Os três algoritmos para o diagnóstico da infecção pelo HCV, propostos pelo CDC foram avaliados, sendo dois novos (a e b) e o outro, o algoritmo convencional (c). a) Resultados de ELISA com IR &#8805; 6,0 é considerado positivo sem a necessidade de teste suplementar. Para amostras IR < 6,0, de preferência o IB, seria realizado; b) Teste molecular (NAT) deve ser feito para todas as amostras positivas no teste de triagem, seguido de IB naquelas negativas no NAT; c) IB realizado para todas as amostras positivas na triagem. Esses algoritmos foram aplicados em todas as amostras, com resultados muito semelhantes entre si: 287, 287 e 285 positivos, respectivamente para a, b e c. Um total de 283 amostras foi positivo nos três algoritmos e quatro, com resultados divergentes, foram analisadas separadamente. A análise do custo benefício mostrou que o algoritmo a é o mais econômico e prático podendo ser recomendado para os laboratórios com condições econômicas limitadas; o b é o mais completo para fins de decisão médica, fornecendo informações precoces sobre a presença ou a ausência da viremia; o c é importante para determinar o status imunológico e para a população de baixa prevalência da infecção pelo HCV. O custo estimado dos três algoritmos baseou-se na tabela de 2004 da Associação Médica Brasileira. Esses custos mostraram ser o algoritmo a, 40% mais econômico e o b, 18,2% mais oneroso do que o c. Os algoritmos a e c foram complementados pela realização da PCR, nas amostras indeterminadas provenientes desses algoritmos. Duas amostras resultaram em PCR positivas, as mesmas já consideradas positivas inicialmente pelo algoritmo b. Os três algoritmos estudados, puderam ser validados para o diagnóstico laboratorial da infecção pelo HCV, podendo a escolha depender do interesse clínico ou da prevalência dessa infecção na população. / The diagnosis of hepatitis C (HCV) infection is usually undertaken stepwise by screening with ELISA and confirming the positive results in screening with a more specific assay, the immunoblot (IB). Active infection by hepatitis C virus should be confirmed by molecular techniques such as PCR. Serological tests are indirect methods based on specific antibody detection. Therefore, they may be influenced by many factors which limit their diagnostic efficiency, producing false-positive results. The aim of this work was to evaluate the real diagnostic efficiency of anti-HCV screening tests, in routine condition, in a large serum sampling, and to analyze the cost-benefit of three different algorithms recently proposed by the Center for Diseases Control and Prevention. 692 serum samples were studied. The samples consisted of 522 sera from blood donors, positive in ELISA, with the sample collected by the time of donation (ELlSA-T), and of 170 inconclusive sera. Those donors returned to Fundação PróSangue Hemocentro de São Paulo to have a second sample of blood collected to confirm the former results. ELlSA-R and PCR were carried out in all second samples and all the positive and inconclusive samples were submitted to IB. The global concordance of results between ELlSA-T and ELlSA-R was 64,5%, in that 77,6%(405/522) were obtained among the positives results and 24,1% (41/170) among inconclusive. For samples positive in both ELlSAs, IB was positive (serologically positive) in 69,6% (282/405) and PCR in 61,2% (248/405). Among 282 serologically positive samples, viremia was detected in 87,6% (247/282) and it was absent in 12,4% (37/282) of the sera, which could represent samples from individuals who were infected by HCV in the past and who have spontaneously cleared the virus. Evaluation of each antigenic band of IB showed high frequency of core (C1C2 and C3C4). Their distribution among viremic and non-viremic donors was similar. The reaction intensity, expressed by the color score of the bands, demonstrated that the strongly reactive bands of C1C2 and NS3 were associated with positiveness in IB and PCR and of NS4 only with PCR positive. Analysis of anti-HCV ELISA results from blood donors indicated that the signal-to-cut-off ratio (DO/CO), named as reactive index (IR) in this study, could be used to predict supplemental test positive results for anti-HCV. IR from all samples was classified in 6 groups, being IR &#8805; 6, the index better correlated with positive on IB (cut-off IR). The CDC has recently proposed three algorithms for HCV diagnosis, in which two were new (a and c) and one was a conventional algorithm (c). a) screening-test-positive samples with IR &#8805; 6,0 can be reported as anti-HCV positive without supplemental testing. IR < 6,0 should have refiex supplemental testing performed, preferably IB; b) reflex supplemental testing in all specimens screening-test-positive by performing NAT followed by IB for specimens with NAT negative results; c) reflex supplemental testing (IB) in all specimens screening-test-positive. These algorithms were applied to all samples and resulted in very similar positive results: 287, 287 and 285, respectively for a, b and c. A total of 283 samples were positive in three algorithms. Four samples showed divergent results and were analyzed separately. Cost-benefit - The algorithm a is the most economical and practical and it could be recommended for laboratory with limited conditions and for population with a high prevalence of HCV infection; b is the most complete for medical decision providing early information about the presence or absence of viremia; c is suitable for determining immune status and for HCV infection low prevalence population. The cost of the three algorithms was estimated based on the 2004 Brazilian Medical Association Table. These costs were 40% lower than c for algorithm a, and 18,2% higher for b. The algorithm a and c were complemented by performing PCR to solve indeterminate results. This complementary test detected two samples PCR positive which were already positive by algorithm b. Therefore we could validate those algorithms for HCV infection laboratory diagnosis. Laboratories and blood banks may choose the algorithm depending on the clinical interest or on the prevalence of HCV infection in the population.