Orientador: Nelson Szpeiter / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Parana, Setor de Ciencias da Saude, Programa de Pós-Graduação em Medicina Interna / Resumo: Este trabalho foi efetuado para levantar a prevalência de pessoas portadoras do anticorpo contra o vírus da hepatite C. Foram estudadas 3 populações distintas: doadores de sangue, politransfundidos, e funcionários que trabalham na área da saúde. Em relação aos doadores de sangue foram testados 14.235, e destes 122 foram considerados reagentes (positivos), isto e, portadores de anticorpos contra o vírus da hepatite C, perfazendo um percentual de 0,85 %. Dos politransfundidos estudou-se 3 grupos de indivíduos, ou seja 110 hemofilicos com um total de 95 reagentes (positivos), e 15 negativos com um percentual de 86,36 %. A soroprevalencia entre os talassemicos e de 36,84 %, dos 19 testados 7 apresentam o anticorpo contra o vírus da hepatite C. Dos 7 falcemicos testados apenas 1 foi considerado positivo (reagente) com um percentual de 14,20 %. Dentre os 121 funcionários estudados todos apresentaram o teste anti-HCV ELISA negativo. Em detrimento do fato que a alta soroprevalência acomete principalmente os indivíduos submetidos a transfusão de sangue, e seus produtos fica como sugestão a feitura obrigatória do teste anti-HCV ELISA em bancos de sangue como triagem sorológica. Outra conclusão: a soroprevalencia entre doadores de sangue por nos encontrada de 0,85 % não difere da casuística mundial. A soroprevalencia entre os 121 profissionais da área de saúde foi de zero por cento, indicando que a hepatite do tipo C não parece estar relacionada ao tipo de atividade exercida por estes profissionais que neste trabalho foram estudados. / Abstract: The prevalence of hepatitis C virus antibodies was studied in the following populations: volunteers blood donors, multitmafused patients and health care workers. Among 14.235 blood donors tested in the Parana State, Brazil, 122 (=0,85%) were positive for anti-HCV test by second generation ELISA method. In the multitransfused population, three groups of patients were studied: haemophilics, thalassemics and patients with sickle cell anaemia. The prevalence of seropositivity in the 110 haemophilics studied was 95 (=86,36%), in 19 thalassemics tested was 7 (=36,84%) and 1 of 7 patients with sickle cell anaemia was positive (=14,20%). In the 121 health care workers tested, nobody were positive. Due to the high prevalence of anti-HCV in the multitransfused patients, the introduction of anti-HCV test for donor selection is needed. The low prevalence of anti-HCV positivity among health care workers indicate the low risk of infection.

Orientador: Elza Cotrim Soares / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-27T12:04:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_GiovanniFaria_M.pdf: 25354638 bytes, checksum: edbfafd4c6e9836173756355bf6b3fcf (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Os objetivos deste estudo foram pesquisar as associações entre os genótipos do VHC, e modos de transmissão da infecção por este vírus em uma população de doadores de sangue da região de Botucatu, São Paulo, estudar a associação entre estadiamento da doença e os genótipos encontrados, além de avaliar os fatores de risco envolvidos na progressão da doença. A população avaliada foi composta por 100 doadores de sangue consecutivos, portadores do anti-VHC positivo, em todos com posterior determinação do VHC por PCR. Foram estudados diversas variáveis: sexo, idade, comportamento sexual, idade à contaminação, tempo de infecção, e fatores de risco associados a infecção pelo VHC entre outros. A biópsia hepática foi realizada para avaliar o estadiamento da doença e atividade necro-inflamatória. Em 8 doadores, não se conseguiu a extração do RNA do VHC, em 3 não se conseguiu o c-DNA e em 78 deles foi permitida a biópsia hepática...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The goals of this study were to research the association between the genotypes of HCV and the ways of transmission of the disease and its staging, as to check which were the factors that were associated with progression of infection. The valued population was made up of 100 consecutive blood donors with the positive anti-HCV test. These patients were valued as regards the several risks factors, bioquimics exams, HCV genotypes, hepatic fibrosis staging and necro-inflammatory activities grading. In 89 the HCV genotypes was carried out, and in 78 the hepatic biopsy was performed...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Clinica Medica / Mestre em Clinica Medica

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T08:07:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 288161.pdf: 2268726 bytes, checksum: c46fb0c65fcf42995952f0d94e5cff20 (MD5) / A infecção pelo vírus da hepatite C (HCV) representa um importante problema de saúde pública. O tratamento da hepatite viral C crônica é complexo, envolvendo a aplicação semanal de alfapeginterferon, doses diárias de ribavirina, realização de exames laboratoriais periódicos para monitorização da terapêutica, elevada incidência de efeitos adversos e tempo prolongado de tratamento. O presente estudo objetivou descrever as oportunidades de intervenção farmacêutica no tratamento de pacientes com hepatite viral C crônica. Os dados referentes ao tratamento de pacientes com a hepatite viral C crônica, no município de Itajaí/SC, foram coletados por meio de um estudo transversal. A estruturação do serviço de assistência a estes pacientes foi analisada por meio de um estudo descritivo, e a evolução do tratamento farmacológico por intermédio de um estudo de acompanhamento farmacoterapêutico. Os resultados evidenciaram fatores relacionados ao paciente e à terapêutica, não observados em estudos anteriores. A incidência de efeitos adversos foi considerada a principal causa de redução de doses ou de interrupção do tratamento, sendo esta última por abandono do próprio paciente ou por intervenção médica. Desta maneira, constatou-se que o papel do farmacêutico como prestador de cuidados em saúde deve estar orientado na educação dos pacientes e no acompanhamento do processo logístico, além da prevenção e do manejo de efeitos adversos durante o tratamento. / Infection by hepatitis C virus (HCV) is an important public health problem. The treatment of chronic C viral hepatitis is complex, due the weekly use of interferon alfa peguylated, daily doses of ribavirin, periodical exams to monitoring the therapeutic, high incidence of adverse effects and long time of the treatment. This study aimed to describe the opportunity of pharmaceutical intervention in the treatment of patients with chronic C viral hepatitis. Data from the treatment of patients with chronic C viral hepatitis, in Itajaí/SC, were getting by a transversal study. The structure of the health care system to these patients was analyzed by a descriptive study and the evolution of the pharmaceutical treatment were identify through a preliminary study of pharmacotherapeutic monitoring. The results revealed factors related to patients and to therapeutic that are not reported before. The incidence of adverse effects was the mainly cause to dose reduction or interruption, been this last one by patient abandon or doctor interruption. Therefore, this study highlighted the role of pharmacist as a health care professional that must to be oriented for the patient education and for the monitoring of logistic process and also for prevention and management of adverse effects during the treatment.Infection by hepatitis C virus (HCV) is an important public health problem. The treatment of chronic C viral hepatitis is complex, due the weekly use of interferon alfa peguylated, daily doses of ribavirin, periodical exams to monitoring the therapeutic, high incidence of adverse effects and long time of the treatment. This study aimed to describe the opportunity of pharmaceutical intervention in the treatment of patients with chronic C viral hepatitis. Data from the treatment of patients with chronic C viral hepatitis, in Itajaí/SC, were getting by a transversal study. The structure of the health care system to these patients was analyzed by a descriptive study and the evolution of the pharmaceutical treatment were identify through a preliminary study of pharmacotherapeutic monitoring. The results revealed factors related to patients and to therapeutic that are not reported before. The incidence of adverse effects was the mainly cause to dose reduction or interruption, been this last one by patient abandon or doctor interruption. Therefore, this study highlighted the role of pharmacist as a health care professional that must to be oriented for the patient education and for the monitoring of logistic process and also for prevention and management of adverse effects during the treatment.

Orientador: Rogerio de Jesus Pedro / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-26T09:12:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lima_MariaPatelliJulianiSouza_D.pdf: 35315879 bytes, checksum: ecdaf1dfad33a9015ace9a0ecb41173b (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: O estudo realizado no Hospital Universitário da Pontifícia Universidade Católica (PUC) de Campinas entre janeiro de 1994 e julho de 1998 constou de duas partes: a primeira, sobre a soroprevalência do VHC entre parturientes, os fatores de risco envolvidos e o potencial de infectividade entre as mulheres com anti-VHC-EIA positivo, e a segunda, sobre a transmissão vertical do VHC. Na investigação da prevalência dessa infecção, participaram 6.995 mulheres que tiveram o sangue coletado na sala de parto e que responderam a uma entrevista padrão, realizada durante a internação, objetivando a pesquisa de antecedentes epidemiológicos relativos a microorganismos veiculados pelas vias sangüínea e (ou) sexual. Utilizaram-se análises de associação e modelos de regressão múltipla na relação da positividade do RIBA e da presença do RNA-VHC com as variáveis epidemiológicas. A prevalência anti-VHC pelo EIA-3 foi de 1,5% (104/6.995) e de 0,8% após o RIBA-3. Nessa população, obteve-se também a positividade do anti-HIV-EIA de 1,0% e de 0,9% segundo o "Western blot"; a positividade do HBsAg de 0,5% e do anti-HBc de 6,8%; 0,9% de positividade anú-T.pallidum (VDRL e FTA-ABS). Com o teste RT-PCR, pesquisou-se o RNA-VHC em 75 mulheres reativas ao anti- VHC-EIA, e 35 (46,7%) amostras foram positivas. Das 47 amostras com RIBA reagente, 20 (42,6%) apresentaram níveis alterados de ALT, com RNA-VHC em 90% delas, e nas 12 amostras indeterminadas, 2 (16,7%) tinham níveis alterados de ALT, com RNA presente em 50%. No modelo de regressão logística múltipla, as cinco variáveis preditoras da positividade do RIBA, marcador de infecção prévia pelo VHC, foram: uso de bebida alcoólica, transfusão de sangue, pertencer a raça negra, antecedente de DST e anti-HBc positivo. Não foi possível compor esse modelo com a variável uso de drogas injetáveis e VDRL positivo. Repetiu-se a análise multivariada, após controlar as variáveis relativas à transmissão parenteral do VHC, para explorar o potencial da via sexual na transmissão do VHC. Antecedente de DST, presença do anti-HBc, ter ou ter tido parceiro sexual com história de hepatite ou parceiro heterossexual promíscuo foram determinantes da positividade do RIBA. Procurou-se associar os resultados do teste RT-PCR às características do RIBA, aos níveis de ALT, à co-infecção pelo HIV ou VHB e às variáveis epidemiológicas estudadas. Na análise multivariada, as variáveis que estimaram a presença do RNA-VHC foram as interações das bandas cl00-3 - c33c e c22-3 - c33c. Na segunda parte deste estudo, referente à transmissão vertical do VHC, participaram 61 mulheres com anti-VHC-EIA positivo e os respectivos filhos, de 72 partos acompanhados seqüencialmente. Entre o 2° e o 18° mês de vida, coletou-se, no mínimo, uma amostra de sangue. Dessas 72 crianças, 45 tinham mães com RIBA positivo, 13 indeterminado e 14 negativo, sendo 42 delas filhas de mulheres com viremia (39 com RIBA positivo e 03 indeterminado). Dentre os 42 lactentes, incluindo 09 filhos de mães co-infectadas pelo HIV, um apresentou repetidamente o RNA-VHC aos quatro meses de idade, evoluindo com alterações nos níveis de ALT entre o 7º e 11° mês de vida. A positividade da sorologia anti-VHC (EIA e RIBA) desta criança manteve-se até o 18° mês de vida, atendendo ao critério diagnóstico proposto para infecção vertical pelo VHC. A taxa de transmissão foi de 2,4% (01 em 42) e de 3% ao se excluírem as crianças de mulheres co-infectadas pelo HIV (01 em 33). Este estudo demonstrou que a prevalência anti-VHC-EIA entre as mulheres grávidas é superior à dos doadores de sangue do mesmo hospital; que a exposição sexual pode ser um importante fator na disseminação do VHC; e que a transmissão vertical do VHC ocorre, porém, com freqüência baixa / Abstract: This study performed at the University Hospital of the Pontifícia Universidade Católica de Campinas (PUC-Campinas) between January of 1994 and July of 1998 was divided into two parts: the first was about the HCV prevalence among parturients, the risk factors involved in it and the infectivity potential among anti HCV-EIA positive women; the second one was about vertical transmission of the HCV. A total of 6995 women have participated in the HCV prevalence study. The women answered a standard questionnaire during their stay in the hospital and had their blood collected in the obstetric center. These two procedures were performed in order to study the epidemiological history related to pathogens of sexual or blood-borne transmission. Analyses of association and models of multiple regression were utilized in association of the RIBA and HCV RNA positivity with the epidemiological variables. The anti-HCV seroprevalence by EIA-3 was 1.5% (104/6995) and after RIBA-3 was 0.8%. It was obtained in this population anti-HIV-EIA seropositivity of 1.0% and 0.9% according to the Western blot; HBsAg positivity of 0.5% and anti-HBc of 6.8%; and 0.9% of the anti T.pallidum positivity (VDRL and FTA-abs). The HCV RNA was studied, utilizing RT-PCR, in 75 anti-HCV-EIA reactive women, resulting in 35 (46,7%) positive samples. Of the 47 RIBA-reactive samples, 20 (42,6%) showed abnormal alanine aminotransferase (ALT) levels with HCV RNA in 90% of them and, of the 12 eterminate samples, 2 (16,7%) had abnormal ALT levels with HCV RNA in 50% of them. In the model of multiple logistic regression, five independent predictors of RIBA positivity, the marker of previous HCV infection, were: alcohol use, blood transfusion, race (blacks), a history of STD and anti-HBc positivity. It was not possible to build this model with the variables - injectable drug use and positive VDRL . The model of multiple logistic regression was repeated, after controlling for parenteral exposure, in order to explore the potential of the sexual via in HCV transmission. A history of STD, anti-HBc positivity and having or having had promiscuous heterosexual partner or sex partner with a history of hepatitis were determinants of RIBA positivity. The results of RT-PCR test were tested in the association with the characteristics of RIBA results, with ALT levels, with HIV or VHB coinfection, and with the epidemiological variables studied. In the multivariate analysis, RNA HCV was estimated by interactions of the C100 - C33c and of the C22-3 - C33c bands. A total of 61 anti-HCV-EIA-positive women and their respective children, of 72 sequentially assisted deliveries, participated in the second part of this study, which was about HCV vertical transmission. Between the 2nd and the 18th month of age, at least oneblood sample was collected from mother-child. Forty-five out of these children had RIBA-positive mothers; 13 had indeterminate RIBA; and 14 had negative RIBA. Forty-two of them were children of women with viremia: 39 had RIBA-positive mothers and 3 indeterminate. Among the 42 infants there were 09 whose mothers were HIV coinfected. From this total of 42, one presented the RNA-HCV repeatedly at the fourth month of age and he also showed abnormal ALT levels between 7° and 11° month of age. Anti-HCV (EIA and RIB A) positivity of this child was kept until the 18th month of live, according to the proposed diagnostic criteria of vertical transmission. The transmission rate was 2.4% (1 in 42) and 3%, being excluded the children of the HIV-coinfected women (1 in 33). This study has demonstrated that anti-HCV-EIA prevalence was higher in pregnant women than in blood donors of the same hospital; that sexual exposure may be an important factor to the spreading of HCV; and that vertical HCV transmission occurs, but with a low frequency / Doutorado / Clinica Medica / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Elza Cotrim Soares / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-01T18:13:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Valerio_HelenaMariaGiordano_M.pdf: 17353439 bytes, checksum: ac45304e93c44f5484a8620142838d63 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A prevalência de anti-VHC positivo é mais alta em pacientes submetidos à diálise e transplantados renais do que na população geral. A infecção pelo VHC é a principal causa de doença hepática crônica em pacientes transplantados renais. Para esclarecer o dano hepático em receptores renais foram realizadas avaliações clínicas, laboratoriais e biópsias hepáticas. Casuística e Métodos: Pacientes transplantados renais com pelo menos cinco anos de imunossupressão foram submetidos às análises clínica e laboratorial detalhadas. Foram testados com sorologia para víruc C (ELISA 3) e pesquisa viral por PCR. Pacientes com anti-VHC(+) foram candidatos à biópsia hepática independente dos valores das transaminases. Resultados: Quarenta e cinco pacientes apresentaram anti-VHC positivo e quarenta e dois foram negativos. Dos 45 anti-VHC(+), 44 pacientes e 2/42 pacientes anti-VHC(-) apresentaram RNA-VHC(+) por PCR. Vinte e seis pacientes com anti-VHC-positivo e RNA-VHC-positivo foram submetidos à biópsia hepática. Setenta e três por cento dos pacientes apresentaram hepatite crônica, dos quais apenas um apresentava cirrose hepática. Somente 28% do grupo RNA-VHC(+) possuíam níveis elevados de ALT. Este grupo apresentou maior duração do tempo de hemodiálise e menor número de episódios de rejeição do que o grupo RNA-VHC (-) (p<0,05). Conclusões: Nesta série, a prevalência de anti-VHC positivo foi de 51.7% e de RNA-VHC por PCR foi de 53%. A maioria dos pacientes apresentou dano hepático histológico pelo VHC, mas o grau de fibrose 'e de atividade inflamatória foi leve ou muito leve na maioria, apesar de cerca de 10 anos de infecção pelo VHC e 6 anos de imunossupressão. A cirrose hepática foi encontrada em 4% dos pacientes. A realização de biópsias hepáticas seriadas e o longo seguimento dos doentes serão necessários para se esclarecer o impacto da infecção pelo VHC nos pacientes transplantados renais / Abstract: Background. The prevalence of anti-HCV positive is higher among patients in dialysis and in kidney recipients than in normal population. HCV infection is the main cause of chronic tiver disease in renal transplant patients. Liver biopsy and virological analysis were performed to clarify the liver damage in kidney recipients. Methods. Renal recipients patients with at least five years under ii.nmunosuppressionwere submitted to clinical and laboratorial detailed analyses. Patients who tested anti-HCV positive were candidates to tiver biopsy with no regard to transaminase levels. Results. Forty-five patients tested anti-HCV positive and 42 anti-HCV negative. Twenty-six anti-HCV and RNA-HCV positive patients were submitted to liver biopsy. Seventy-three percent ofthese patients presented chronic hepatitis, ftom these only one patient presented cirrhosis. Only 28% of anti-HCV positive group presented elevated ALT levels. Anti-HCV positive patients presented longer previous time on dialysis and less rejection episodes than group anti-HCV negative (p<O.O5).Ali patients anti-HCV positive, except one, tested RNA-HCV positive by PCR. Conclusions. In this series, the prevalence of anti-HCV positive is 51.7%. The most of the patients presented tiver damage in histology due HCV. But we found mild or minimal fibrosis and inflammatory activity grade, despite about 10 years of HCV infection and 6 years of immunosuppressive treatment. Only one patient presented cirrhosis (4%). Performing serialliver biopsies in a long term follow-up is needed to clarify the impact of HCV infection in renal transplant patients / Mestrado / Clinica Medica / Mestre em Clinica Medica

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-05-29Bitstream added on 2014-06-13T19:02:35Z : No. of bitstreams: 1 moraes_cfv_dr_botfm.pdf: 589173 bytes, checksum: c968ecfb4e13b9f57ab7e0f45cc65f43 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A Hepatite C é uma das principais causas de doença crônica hepática. A combinação entre o interferon peguilado e a ribavirina tem sido considerado o padrão-ouro de tratamento para Hepatite C. A resposta ao tratamento vem sendo associada a fatores ambientais, do vírus e também do paciente, tais como polimorfismos genéticos dos antígenos leucocitários humanos (HLA), da interleucina-10 e do fator de necrose tumoral-a. Plaquetas possuem em suas membranas glicoproteínas que expressam segmentos protéicos polimórficos, os quais são chamados de antígenos plaquetários humanos (HPA). Os sistemas HPA-1, -3, -4 e -5 residem em integrinas, proteínas que possuem interações com interferon. O objetivo desse estudo foi avaliar a associação entre freqüência dos HPA-1, -3, -4 e -5 e a resposta ao tratamento, em 138 pacientes tratados para Hepatite C. A genotipagem dos HPA-1, -3 e -4 foi realizada pela técnica de PCR-SSP e do HPA-5 pela PCR-RFLP. A genotipagem do HCV foi realizada através do Kit comercial INNO-LiPA® v.1.0 (Innogenetics, Ghent, Belgium), segundo as instruções do fabricante. Os pacientes foram divididos em grupos e subgrupos de acordo com o esquema terapêutico, a resposta ao tratamento e o genótipo do HCV. Os pacientes que possuíam o genótipo do HCV não-1 e que foram tratados com IFN-a+RBV, com falha terapêutica, apresentaram uma diferença estatística significante (p<0.05) nas freqüências alélicas e genotípicas do sistema HPA-3, com aumento do alelo 3b. O sistema HPA-3 está localizado em uma integrina que se liga a fibronectina, um receptor de interferon. Nesse contexto, a alteração conformacional glicoprotéica decorrente da presença do alelo HPA-3b, poderia estar associada à falha ao tratamento com IFN-a+RBV em pacientes portadores de genótipo viral não-1. / Hepatic fibrosis leading cirrhosis in 20 to 30% of patients with chronic hepatitis C virus (HCV) infection. Rapid progression to fibrosis has been related to environmental, viral and host factors. However, genetic polymorphisms have recently been associated with this progression, including the expression of integrins. Platelet membrane glycoproteins express several polymorphic antigenic determinants on their surface, which are called human platelet antigens (HPA). HPA-1, -3, -4 and -5 reside in integrins. The association between HPA antigens and stage of fibrosis can determine if HPA is related to progression of fibrosis. Thus, the goal of this study was to determine the association between the HPA-1, -3, -4 and -5 and the liver fibrosis stage in 175 HCV-infected patients. HPA-1, -3 and -4 genotyping was performed by PCR-SSP and, HPA-5 by PCR-RFLP. Fibrosis progression was evaluated using the METAVIR scoring system. There were no significant differences (p>0.05) in allelic and genotypic frequency distribution of HPA-1, -3 and -5, residing in integrins.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-19Bitstream added on 2014-06-13T18:50:20Z : No. of bitstreams: 1 ariede_jr_me_botfm.pdf: 465481 bytes, checksum: 176c1868eb3cbd83f7fadce9ed496bcc (MD5) / A detecção do RNA viral do VHC tem sido documentada em outros compartimentos biológicos além do soro e plasma de pacientes infectados pelo vírus, como nas plaquetas. No entanto, sua influência na terapia antiviral é desconhecida. Poucos estudos têm sido realizados na tentativa de avaliar a quantificação do RNA viral em outros compartimentos biológicos e a significância deste achado no resultado da terapia antiviral. Considerando que o VHC é carreado pelas plaquetas na circulação, a avaliação quantitativa do RNA viral neste compartimento biológico pode se mostrar distinta da observada no plasma.Realizar a avaliação comparativa in vitro do RNA do VHC plasmático e do RNA do VHC carreado à plaqueta e, realizar a avaliação comparativa da quantificação do RNA viral do VHC em plasma e plaquetas de pacientes com recidiva ao tratamento antiviral.Amostras de sangue periférico provenientes de pacientes infectados pelo VHC foram utilizadas para realização de dois experimentos. Experimento in vitro (repetido em triplicata) consistiu na separação de quatro alíquotas da mesma amostra, as quais foram submetidas a incubação a 37oC por 30xg por diferentes intervalos de tempo (0, 48, 96, 144h) e, posteriormente separadas para obtenção de plasma e pellet de plaquetas. A partir de cada uma destas frações foi extraído RNA viral, o qual foi utilizado como fonte para qPCR. Experimento in vivo: Foram acompanhados pacientes que iniciaram e finalizaram a terapêutica entre janeiro de 2011 a julho de 2012 e, dentre estes, os que apresentaram recidiva virológica ao tratamento antiviral estabelecido. Dos pacientes em recidiva virológica foram processadas amostras para a obtenção do plasma e pellet de plaquetas em dois momentos: no momento da recidiva virológica e, no momento imediatamente anterior (12 semanas anteriores... / Treatment for chronic hepatitis C is effective in about 50% of patients treated with exogenous interferon, which induces interferon-stimulated genes leading to endogenous interferon production. Integrins are involved in interferon production and structural modifications of them can be associated with altered function. Some integrins, expressed on the platelet membrane, show polymorphic antigenic determinants called human platelet antigens (HPA). The association between HCV infection and HPA-5b has already been demonstrated, in the same way the HPA profile could be associated with therapeutic response. This study aimed evaluates the association between the HPA-1, -3, -5 frequencies and therapy response in HCV-infected patients. HPA genotyping was performed in 168 HCV-infected patients by PCRSSP or PCR-RFLP. The patients were on interferon- (48.8%: 43.9% carriers of HCV genotype 1 and 56.1% non-1) or peginterferon (51.2%; 87.2% carriers of HCV genotype 1 and 12.8% non-1), both combined with ribavirin. Statistical analysis was performed using the proportional odds model. The genotypic frequency of HPA-1a/1b was significantly higher in the patients with therapeutic failure (odds ratio=3.58, 95% CI -1.18 – 10.82). The results suggest that the HPA-1a/1b genotype is associated with therapy failure... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Fernando Ferreira Costa / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-23T00:34:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Goncales_NeivaSellanLopes_D.pdf: 4155293 bytes, checksum: 36e63708c0b3ae4e06c3c227420d5165 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: No Brasil, previne-se a transmissão por transfusão sangüínea do vírus da hepatite C com a triagem dos doadores de sangue realizada por meio da pesquisa do anti VHC pelo método de EIA e dosagem dos níveis séricos da ALT. A especificidade da triagem do anti-VHC por EIA, em populações de baixa soroprevalência, tem sido questionada. Assim, para avaliar-se a eficácia desta triagem, pesquisou-se a presença, com o uso da RT-PCR, do RNA viral em amostras de doadores de sangue, procurando-se, também, estabelecer as associações entre os resultados desta reação e os testes de EIA e RIBA. Procurou-se, ainda, detectar marcadores teciduais para o VHC, com a utilização de Um anticorpo monoclonal específico, pela técnica de imuno-histoquímica eimunofluorescência em cortes de tecido hepático parafinado. Foram estudadas 196 amostras de soro, coletadas no período de janeiro de 1994 a dezembro de 1995. Entre estas, 178 foram selecionadas de uma população de doadores de sangue voluntários do Centro de Hematologia e Hemoterapia da UNICAMP e, 18 de pacientes atendidos no Ambulatório do Grupo de Estudos das Hepatites da Disciplina de Doenças Infecciosas e Parasitárias da Faculdade de Ciências Médicas desta Universidade. Dos 178, 147 (82,6%) apresentaram-se à triagem com resultados repetidamente reagentes para o anti- VHC e não-reagentes para o HBsBAg, anti-HBc, anti-lllV1/2, anti-HTL VI/IT, além de serem negativos para marcadores da Doença de Chagas e Sífilis. Os 31 (17,4%) restantes eram repetidamente negativos para todos os marcadores sorológicos acima citados e apresentavam níveis de AL T nonnais (grupo controle). As 18 amostras de pacientes estudadas eram negativas para a pesquisa do anti-HIV1/2 e foram investigadas sorologicamente para os diferentes tipos de hepatites, de acordo com a avaliação clínica. Os 14 T doadores foram subagrupados de acordo com os critérios baseados nas leituras das densidades ópticas das amostras em relação ao "cutoff' (DO/C) do teste de ElA para o anti-VHC e o nível de ALT. A seqüência do RNA do VHC foi detectada pela RT- "nested" PCR, utilizando-se "primers" da região 5' não-transcrita, que é a mais conservada do genoma viral. O ensaio de "imunnoblot" recombinante (RIBA-2) também foi realizado nas mesmas amostras. No subgrupo considerado ElA fortemente reagente, 95,4% apresentaram aumento nos níveis séricos de ALT, enquanto que no sub-grupo ElA fTacamente reagente apenas, 47,1% tiveram níveis de ALT elevados. No subgrupo ElA fortemente reagente houve 96,9% de co-positividade com o teste de RIBA. A realização deste mostrou-se necessária para definir a condição sorológica dos indivíduos EIA fracamente reagente, uma vez que apenas 53% confirmaram a positividade inicial, permanecendo 23,5% como indeterminados e 23,5% como negativos. Observou-se uma relação direta entre a reatividade contra o antígeno do core do VHC (c22.3) e a presença de partículas virais no soro. Entre os RIBA indeterminados (reativos apenas para o c22.3), 87,5% apresentaram positividade para a RT-PCR. Em 91,5% dos indivíduos com EIA fortemente reagente, detectou-se o RNA do VHC pela RT-PCR contra apenas 17,6% no subgrupo EIA fracamente reagente. A concordância entre os resultados positivos de RIBA e RT-PCR foi de 85,9%. Por estes achados conclui-se que os dois testes devam ser aplicados isolada ou seqüencialmente para confirmar a infecção pelo VHC, principalmente em populações com baixas prevalências da mesma, como é o caso dos doadores de sangue. Entre os indivíduos com hepatite crônica histologicamente confirmada não se encontrou nenhum caso com resultado de RIBA negativo. Em 92,3% deste grupo observou-se positividade para o RNA do VHC pela RT-PCR. Os testes de ElA e RIBA utilizados neste estudo apresentaram alta sensibilidade e especificidade, considerando-se como população positiva aqueles indivíduos com diagnósticos histopatológicos de hepatites crônicas, com positividade para aRT-PCR. Assim, conclui-se que a triagem sorológica, em nosso serviço, para prevenir a transmissão do VHC, na transfusão de sangue, mostrou-se eficiente e capaz de selecionar os doadores infectados, principalmente se for usada como critério a relação DO/C no teste de ELA. A utilização do anticorpo monoclonal específico, TORDJI-22, em tecido hepático parafinado pela técnica de imuno-histoquímica ou imunofluorescência não permitiu evidenciar a presença do VHC neste tecido em nossa casuística. Os testes de triagem sorológica (ELA e RIBA) associados ao método de RTPCR e ao diagnóstico anátomo-patológico propiciarão ao clínico manipular melhor as interrelações e as variáveis envolvidas na infecção pelo vírus C / Abstract: The transmission of hepatitis C virus in Brazil is currently monitored either by an anti-HCV enzyme-immunoassay (ElA) or by the deterrnination of ALT serum levels. However specificity of the anti-HCV ElA in low seroprevalence populations has been questioned. ln order to evaluate the efficiency of this test, blood samples were screened for the presence of viral RNA using RT -PCR and the results then compared with those of the ElA and recombinant protein immunoblot assay (RIBA) tests. lmmunohistochemistry and immunofluorescence of paraffin embedded hepatic tissue were employed to detect HCV tis sue markers using a specific monoclonal antibody. A total of 178 serum samples obtained ITom voluntary blood donors at the Hematology and Hemotherapy Center (UNICAMP) and 18 samples from patients who were attended by the Hepatitis Group of the lnfectious and Parasitic Diseases Unit were studied between January, 1994 and December 1995. One hundred and forty-seven samples (82.6%) consistently reacted with antiHCV antibody but not with HBsBAg, anti-HBc, anti-HIV1/2, or anti-HTL VIlII antibodies; these samples were negative for syphilis and the Chagas' disease. The remaining 31 samples (17.4%) were consistently negative for all of the above serological markers and showed normal ALT levels (control group). The 18 samples obtained from hepatitis patients were negative for anti-HIV1/2 antibody. The 147 positive donors were divided into subgroups based on the outoff (C) for the optical density readings (OD) of the anti-HCV ElA test and on their ALT levels. The RNA sequence of HCV was detected by RT-nested PCR using primers from the 5' non-transcribted region which is the most conserved of the viral genome. A RIBA-2 was also performed on these samples. The majority (95.4%) of the samples that gave a strongly reactive EIA result also showed an increase in the serum AL T levels while only 47.1 % of the weakly reactive EIA subgroup had elevated serum AL T levels. The co-positivity of the EIA test with the RIBA test in the strongly reactive EIA subgroup was 96.9%.The RIBA test proved to be important and necessary in defining the serological status of the weakly reactive EIA subgroup; thus, 53% of the samples were EIA positivite, 23.5% were negative and in 23.5% was not determined. There was a direct positive relationship between the reactivity to the HCV core (c22.3) and the presence of serum viral particles. Among indeterminate RIBA results (reactive only to c22.3) 87.5% were positive by RT-PCR. HCV-RNA was detected in 91.5% of the strongly reactive EIA samples compared to only 17.6% observed in the weakly reactive EIA group. There was a high level of agreement 85.9% between the RIBA results and RT-PCR test. Based on this findings these two tests may be used either separately or sequentially to conflrm an HCV infection, particularly in populations whese the prevalence ofthis infection is low (as in the case ofblood donors). There were no RIBA negative results in individual with histologically conflrmed chronic hepatitis. Using RTPCR, RNA-HCV was detected in 92.3% of this group. Our results showed a high sensitivity and specificity for EIA and RIBA tests in individuaIs with a histopathological diagnosis ofchronic hepatitis and who were positive by the RT-PCR test. In conclusion, the serological screening as performed in our laboratory for HCV transmission in blood transfusions is efficient and capable of detecting infected donors, particularly if the OD/C report of the EIA test is used as a criterion. The specific monoclonal antibody TORDll-22 was unable to detect the presence of HCV in the hepatic tissue evaluated by immunohistochemical br immunofluorescent techniques. The EIA and RIBA tests, association with RT-PCR method and anatomicopathological diagnosis, may be useful in evaluating the relationships and parameters involved HCV infections / Doutorado / Anatomia Patologica / Doutor em Ciências Médicas

Orientador: Mario Hiroyuki Hirata / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-26T02:58:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Verlengia_Rozangela_D.pdf: 5111418 bytes, checksum: a1316bcb3d2aaf4caa88f93aad39b0e2 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: No presente estudo foi otimizado uma metodologia de nested-PCR em tubo único para a detecção do RNA-HCV. As condições da nested-PCR em tubo único foram estabelecidas utilizando um controle recombinante, produzido pela amplificação da região 5'-UTR do genoma do HCV, clonado no vetor pBluescript KS-, do qual removeu-se 72 nucleotídeos da região interna do fragmento clonado através da digestão com a enzima PpuM I. A amplificação de um único fragmento ao término da reação da nested-PCR em tubo único foi alcançado quando foram utilizadas as seguintes concentrações: 2 mM de 'MgCI IND. 2+', 5 nM e 200 nM de primers externos e internos respectivamente, e temperaturas de hibridação de 72°C e 46°C para a primeira e segunda etapas da reação. Foram utilizados 20 ciclos para a primeira etapa e 35 ciclos para a segunda etapa da reação. Ensaios de sensibilidade usando diferentes números de cópias do controle recombinante (pB-HCV-2), detectaram um mínimo de 900 cópias, que comparado com a nested-PCR convencional mostrou sensibilidade 10 vezes inferior. A diferença na sensibilidade observada entre as duas metodologias não interferiu na detecção do RNA-HCV quando amostras biológicas foram testadas. Nossos dados indicam que a nested-PCR em tubo único desenvolvida pode ser empregada para a detecção do RNA-HCV mostrando potencialidade para o uso na clínica, como um método alternativo par.a a detecção do RNA-HCV / Abstract: In the present study a methodology was optimized to a nested-PCR in single tube for the detection of RNA-HCV. The sequences of primers were chosen allowing different optimum annealing temperature between the first and second PCR reaction in single tube. PCR conditions were established using an control produced by amplification of 5' NCR from genome that is highly conserved deleting 72 nucleotides with the enzyme PpuM I and cloned into pBluescript KS vector. The amplification of a single fragment at the end of a single tube reaction in the nested-PCR was reached when concentrations of 2 mM of 'MgCI. Ind 2', 5 nM and 200 nM of external and internal prímers, were used respectively. The temperature of annealing used was 72°C and 46°C for the first and second stage of the nested PCR reaction, with 20 and 35 cycle of al!lplification respectively. Sensibility tests, using different numbers of copies of the control (pB-HCV-2) were able to detect about 900 copies using our method. The conventional nested-PCR showed sensibility 10 times higher, detecting 90 copies. The difference in the sensibility observed between the two methodologies didn't interfere in the detection of RNA HCV when biological samples were tested. Our data indicated that the nested PCR in single tube developed can be used for the detection of RNA-HCV as an alternative method for the detection of RNA-HCV in clinical samples / Doutorado / Doutor em Biologia e Patologia Buco-Dental

Orientador: Fernando Lopes Gonçales Junior, Neiva Sellan Lopes Gonçales / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T11:37:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_JosianeSilveiraFelix_D.pdf: 10131136 bytes, checksum: ab351928cb803d0e20ef10f92513bc45 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A elevada porcentagem de positividade para o anti-HBc pode resultar em excessiva perda de doadores em uma determinada região geográfica, podendo afetar o suprimento de sangue. Como a realização do anti-HBc foi introduzida nos bancos de sangue como marcador indireto da hepatite C, que hoje possui um teste específico, passou-se a questionar a necessidade dessa obrigatoriedade. Alguns estudos mostram a correlação entre a presença de anti-HBc no doador e infecção pelo VHB no receptor. Recentemente, com o desenvolvimento de técnicas de biologia molecular, tomou-se possível a determinação do DNA do VHB, que de certa maneira auxilia a investigação dos pacientes anti-HBc isoladamente reagentes. Como os pacientes anti-HBc reagentes podem apresentar infecção oculta pelo VHB, procuramos avaliar a ocorrência da mesma nos nossos doadores e por existir um potencial de transmissão do VHB procuramos avaliar se a vacinação seria capaz de levar os pacientes com DNA-VHB positivo a eliminar esse VHB residual, pois podem soroconverter quando recebem a vacina contra a hepatite B. Essa conduta poderia ser usada para diminuir a transmissão do VHB em áreas altamente endêmicas. Sabe-se também que a infecção oculta pelo VHB ocorre em altas freqüências entre pacientes com HVC crônica. Por isso avaliamos também uma amostra com esses pacientes. Ao final, comparamos os resultados das prevalências de infecção oculta pelo VHB, de soroconversão para o anti-HBs e de negativação do DNA-VHB, em grupos com diferentes graus de risco para aquisição da HVB. Neste trabalho foram avaliados 587 doadores de sangue provenientes do Hemocentro Campinas bloqueados na triagem de sangue do serviço de hemoterapia por apresentarem positividade para o anti-HBc quando da primeira doação de sangue. Todos eram negativos para o anti-HCV e anti-HIV. Foram identificados, responderam a um questionário específico e tiveram amostras de sangue coletadas para a realização de testes bioquímicos, uma nova pesquisa dos marcadores da hepatite B e uma pesquisa do DNA do VHB pela PCR. Convocamos os pacientes com o resultado anti-HBc reagente/anti-HBs não reagente a retomarem ao Ambulatório para serem vacinados Ao final, obtivemos três grupamentos: um de doadores de sangue anti-HBc não reagente, provavelmente falso-positivos (grupo A); um constituído por doadores de sangue anti-HBc reagentes/anti-HBs reagentes (grupo B); e outro por doadores de sangue anti-HBc reagente/anti-HBs não reagente (grupo C). Nestes foi realizada a pesquisa do DNA do VHB utilizando o soro da primeira coleta pela técnica da PCR "in house". As amostras positivas foram submetidas a nova pesquisa quantitativa do DNA-VHB com o teste Amplicor HBV Monitor (Roche Diagnostic Systems, Branchburg, NJ). Em 50 pacientes do grupo B, também foi realizada a pesquisa do DNA do VHB pela PCR "in house". Quando do retomo dos pacientes do grupo C, fazíamos a primeira dose (DI) da vacina Engerix B 'MARCA REGISTRADA¿. Na época da segunda dose (D2) da vacina, cerca de 30 dias após DI, e da terceira dose (D3), cerca de 5 meses após D2 coletávamos nova amostra de sangue para a realização de novas pesquisas do anti-HBs e do DNA-VHB. Foi selecionado também um grupo HBsAg negativo, anti-HBc reagente/anti-HBs não reagente/HCV reagente, constituído por 50 pacientes. 22 deles (10 DNA-VHB + e 12 DNA-VHB -) receberam as três doses da vacina e pesquisou-se a soroconversão e a negativação do DNA-VHB (grupo D). Para efeito de comparação com o grupo D, selecionamos um grupo de 26 pacientes HBsAg negativo/anti-HBc não reagentes/HCV reagentes (grupo E)... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: A high percentage of positivity for anti-HBc can result in excessive loss of donors in some geographic regions, and consequently could affect blood supplies. As anti-HBc testing was originally implemented in blood banks as an indirect marker of hepatitis C, which now has a specific test, there are now questions about the necessity for including this test. Some studies have shown a correlation between anti-HBc in the donor and infection with HBV in the receptor. Recently, with the advent of molecular biology techniques, it has become possible to detect HBV DNA, which can help in the investigation of patients that are anti-HBc reactive alone. Since anti-HBc reactive patients can present occult infection with HBV, we decided to evaluate the occurrence of this condition in our blood donors. As there individuaIs with anti-HBc alone can potentially transmit HBV, we evaluated via PCR if vaccination is capable of eliminating this residual HBV in patients who are HBV-DNA positive, as they can seroconvert when they are vaccinated against hepatitis B. This could be a strategy to reduce the transmission of HBV in highly endemic areas. It is also known that occult infection with HBV occurs at high frequencies among patients with chronic HCV. Consequently, we also evaluated a cohort of these patients. Finally, we compared the results on prevalence of occult infection with HBV, seroconversion to anti-HBs, and negativation of HBV-DNA, in groups with different degrees of risk for acquiring HBV. We made an ambulatory study of 587 blood donors attended at the Campinas Blood Center, who were rejected by blood screening as they were positive for anti-HBc at the time of the first donation. All of them were negative for anti-HCV and anti-HlV. In this first stage of the study, the blood donors were identified and they responded to a specific questionnaire. Also, on the day of the first visit, blood samples were collected to make biochemical tests, to retest for hepatitis B markers and investigation of HBV DNA with PCR. We had three groups; there was a group ofblood donors who were anti-HBc non-reactive, based on the new tests done at our service. These were probably false positives (group A). Group B was constituted of individuaIs who were anti-HBc reactive /anti-HBs reactive. Group C was constituted of blood donors who were anti-HBc reactive /anti HBs non-reactive. An investigation for HBV DNA was done on these individuaIs, using serum from the first blood collection, via "in house" PCR. The samples that were positive were then evaluated quantitatively for HBV DNA, using a commercial test (Amplicor HBV Monitor, Roche Diagnostic Systems, Branchburg, NJ). HBV DNA was also tested for in 50 randomly selected group B patients, via "in house" PCR. When the group C patients returned, we gave them the first dose (D1) of the vaccine Engerix B 'MARCA REGISTRADA¿. At the time of the second dose (D2) of vaccine, about 30 days after DI, we took another blood sample to test again for anti-HBs and for HBV DNA. The patients who seroconverted after DI did receive additional doses of vaccine. The second dose was administered approximateIy one month after DI and a third dose (D3), five months after D2. Another group of 50 HBsAg negative, anti-HBc reactive /anti-HBs non reactive /HCV reactive patients was also included in the study, to investigate if there was occult infection with hepatitis B vírus. Among these 50, 22 patients (10 HBV DNA + e 12 HBV DNA - ) were vaccinated for hepatitis B, and seroconversion and negativation of HBV-DNA were then investigated. These patients were given the three doses of vaccine (group D). For comparison with group D, we selected a group of 26 patients HbsAg negative/anti-HBc non-reactive /HCV reactive, who were also being studied in our ambulatory clinic (group E)... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Ciencias Basicas / Doutor em Clínica Médica