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Desenvolvimento de métodos de diagnóstico, silenciamento gênico e caracterização molecular do vírus herpes simples tipo 1 e herpesvírus humano tipo 6 em pacientes imunocomprometidos do Rio de JaneiroSilva, Amanda Perse da January 2015 (has links)
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Previous issue date: 2016-02-23 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A família Herpesviridae abriga um grande número de vírus que infectam animais e o homem. Nove herpesvirus foram identificados que possuem o homem como hospedeiro primário e descritos através da análise filogenética foram classificados em três subfamília: Alfaherpesvirinae, Betaherpesvirinae e Gamaherpesvirinae. A família Herpesviridae agrupa vírus de genoma DNA e que estão associados a infecções latentes e a manifestações clínicas recorrentes. As infecções por herpesvírus podem se manifestar de forma assintomática ou sintomática, podendo causar diferentes síndromes clínicas. Estes vírus normalmente são benigno, sendo o aparecimento de lesões nas mucosas a forma mais comum da doença, podendo causar doenças neurológicas severas principalmente em pacientes imunocomprometidos. A incidência e severidade podem ser exacerbadas entre indivíduos imunocomprometidos. A presente tese é composta por três manuscritos, sendo dois trabalhos publicados e um submetido. Estes estudos se propuseram a padronizar métodos de silenciamento gênico, otimizar e comparar métodos para o diagnóstico e realizar a caracterização genotípica do herpes simples tipo 1 (HSV-1) e herpesvírus humano tipo 6 (HHV-6). Os estudos foram realizados em paciente imunocomprometidos do estado do Rio de Janeiro
No primeiro artigo \201CRNA interference inhibits herpes simplex vírus type 1 isolated from saliva samples and mucocutaneos lesions\201D, foi possível realizar a comparação da sensibilidade para detecção do HSV-1 por isolamento viral e pela metodologia da reação de PCR em tempo real em amostras de lesão, saliva e cultura celular . Além disso, neste estudo foi possível obter-se a inibição de mais 99% da replicação viral do HSV-1 in vitro utilizando a técnica de RNA de interferência. No segundo estudo \201CGenotypic characterization of herpes simplex vírus type 1 isolates in immucompromised patients from Rio de Janeiro, Brazil\201D realizamos a primeira caracterização genotípica do HSV-1 no Rio de Janeiro. Os resultados demonstraram a existência de um único genótipo viral circulando nas amostras de pacientes imunocomprometidos. Além disso, as amostras brasileiras apresentam um alto grau de identidade estamos agrupadas no mesmo clado. No terceiro artigo \201CAcute liver failure in an immunocompetent patient\201D, foi possível a detecção do HHV-6B no soro e no fígado de paciente com hepatite fulminante. Neste estudo, foi possível mostrar a contribuição do HHV-6B na hepatite aguda fulminante sem etiologia definida. Esses estudos contribuem para o conhecimento das características clínicas e genéticas do HSV-1 e do HHV-6 circulantes em pacientes imunocomprometidos do Rio de Janeiro, Brasil / The Herpesviridae family has
a la
rge number of virus widespread
in
animal
s and
human
. Nine herpesvirus a
re identified that have hum
a
ns as their
primary host and
described by phylogenetic analysis were classified into three subfamily
:
Alfaherpesvirinae, Betaherpesvirinae and Gammaherpesvirinae.
The family
Herpesviridae is
family of DNA virus and that are associated with latent infections and
recurrent clinical manifestations. Herpesvirus infections can manifest themselves in
asymptomatic or symptomatic form, may cause different clinical syndromes. These
viruses are usually
benign and the appearance of mucosal lesions are more common,
but
severe neur
ological diseases can occurred
especially in immunocompromised patients.
The incidence and severity may be exacerbated among immunoc
ompromised
individuals. This thesis consists o
f three manuscripts, two published papers and
submitted. These studies set out to standardize methods of gene silencing, optimize and
compare methods for the diagnosis and the genotypic characterization of herpes simplex
type 1 (HSV
-
1) and human herpesviru
s
type
6 (HHV
-
6). The studies were conducted in
immunocompromised patient Rio de Janeiro. In the first article "RNA interference
inhibits herpes simplex virus type 1 isolated from saliva samples and mucocutaneous
lesions", the comparison of sensitivity for
detection of HSV
-
1 for viral isolation and
PCR methodology in real time is possible for different types of samples. Furthermore,
in this study it was possible to obtain the most 99% inhibition of viral replication of
HSV
-
1
in vitro
using RNA interference
technique. In the second study "Genotypic
characterization of herpes simplex virus type 1 isola
tes in immucompromised patients
from Rio de Janeiro, Brazil" held the first genotypic characterization of HSV
-
1 in Rio
de Janeiro. The results demons
trated the
existence of a unique
viral genotype circulating
in the samples of immunocompromised patients. Furthermore, viruses of the isolates
show a high degree of identity and form a single clade. In the third article "Acute liver
failure in an immunocompetent pati
ent," HHV
-
6B detection in serum and liver of
patients with fulminant hepatitis was possible. In
this study, we show the HHV
-
6B
contribution to acute fulminant hepatitis of unknown etiology. These studies contribute
to the kn
owledge of clinical
and genetic
HSV
-
1 and HHV
-
6 circulating in
immunocompromised patients in Rio de Janeiro, Brazil.
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Pesquisa de herpesvírus 6 em amostras de tecido cerebral de pacientes submetidos à cirurgia como tratamento para epilepsiaAndreatta, Rafaela Manfro Rorato January 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011 / Human herpesvirus 6 (HHV-6) is a Betaherpesvirus associated with Roseola Infantum (Exanthema Subitum) in primary infection. Due to its neurotropic characteristic and latency in the central nervous system, many reports associate HHV-6 with epilepsy, febrile seizures, multiple sclerosis and others neurologic diseases. In this study, HHV-6 DNA was investigated in 42 hippocampal samples from 14 patients with mesial temporal lobe epilepsy (MTLE) submitted to amygdalohippocampectomy (AH) or anterior temporal lobectomy (ATL) surgeries using a nested polymerase chain reaction (PCR). Three samples from each patient were collected and analyzed: from hippocampal head, body and tail. HHV-6 was detected in twelve of fourteen patients (85. 7%) with MTLE. Analyzing the samples resulting positive for HHV-6, all three samples were positive in three patients, in four patients two samples were positive and in five patients only one sample was positive. According to the origin of samples, seven samples from hippocampal head were positive, eight from hippocampal body and seven from hippocampal tail, showing no preferential site for viral establishment. HHV-6 positivity found in patients of the present study is higher then data found in the literature. A possible explanation would be differences in the study design, with three samples collected from each patient, which could be more representative than only one sample. Our results corroborate the hypothesis of a possible role of HHV-6 infection in epilepsy. / O Herpesvírus Humano tipo 6 (HHV-6) é um vírus da família Herpesviridae associado ao desenvolvimento de roséola infantil ou exantema súbito, doença caracterizada por febre alta, rash cutâneo e ocasionalmente convulsões febris. A prevalência mundial de infecção por HHV-6 é alta. Estima-se que cerca de 83% das crianças até 13 meses e mais de 95% das com idade até 2 anos já entraram em contato com o vírus. Existem duas variantes do HHV-6 já identificadas, as variantes A e B, sendo o HHV-6B o agente principal relacionado aos casos de roséola infantil. Epilepsia é um termo aplicado a um grupo de patologias crônicas caracterizadas, principalmente, pela ocorrência de crises epilépticas. As epilepsias representam em torno de 1% dos distúrbios neurológicos que afetam a população mundial. As crises são provocadas por uma disfunção da atividade elétrica cerebral associada a anormalidades estruturais e metabólicas causadas, em alguns casos, pela presença de vírus no sistema nervoso central. Por apresentar características como neurotropismo e latência no sistema nervoso central, procuramos relacionar o HHV-6 com a epilepsia do lobo temporal mesial (ELTM). Através de reação em cadeia da polimerase (PCR), pesquisamos a presença do vírus em 42 amostras de hipocampo de 14 pacientes com epilepsia do lobo temporal mesial (ELTM) submetidos a amígdalo-hipocampectomia (AH) ou lobectomia temporal anterior (LTA) como tratamento para a epilepsia. Três amostras de cada paciente foram analisadas: cabeça, corpo e cauda do hipocampo. O DNA do HHV-6 foi detectado em 12 dos 14 pacientes (85,7%) com ELTM. Três pacientes foram positivos em todas as três amostras, 4 pacientes foram positivos em duas amostras e 5 em apenas uma amostra. Com relação à origem das amostras, 7 foram positivas na cabeça do hipocampo, 8 no corpo do hipocampo e 7 na cauda do hipocampo, demonstrando não haver um sítio de preferência para o estabelecimento do vírus. A positividade para HHV-6 encontrada nos pacientes deste estudo é maior do que os dados encontrados na literatura. Uma possível explicação para esta elevada positividade poderia ser as diferenças na concepção do estudo, com três amostras coletadas de cada paciente, o que II pode ser mais representativo do que a coleta de apenas uma amostra. Nossos resultados reforçam a hipótese de um possível papel da infecção pelo HHV-6 na epilepsia.
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Pesquisa de herpesv?rus 6 em amostras de tecido cerebral de pacientes submetidos ? cirurgia como tratamento para epilepsiaAndreatta, Rafaela Manfro Rorato 31 March 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-03-31 / O Herpesv?rus Humano tipo 6 (HHV-6) ? um v?rus da fam?lia Herpesviridae associado ao desenvolvimento de ros?ola infantil ou exantema s?bito, doen?a caracterizada por febre alta, rash cut?neo e ocasionalmente convuls?es febris. A preval?ncia mundial de infec??o por HHV-6 ? alta. Estima-se que cerca de 83% das crian?as at? 13 meses e mais de 95% das com idade at? 2 anos j? entraram em contato com o v?rus. Existem duas variantes do HHV-6 j? identificadas, as variantes A e B, sendo o HHV-6B o agente principal relacionado aos casos de ros?ola infantil. Epilepsia ? um termo aplicado a um grupo de patologias cr?nicas caracterizadas, principalmente, pela ocorr?ncia de crises epil?pticas. As epilepsias representam em torno de 1% dos dist?rbios neurol?gicos que afetam a popula??o mundial. As crises s?o provocadas por uma disfun??o da atividade el?trica cerebral associada a anormalidades estruturais e metab?licas causadas, em alguns casos, pela presen?a de v?rus no sistema nervoso central. Por apresentar caracter?sticas como neurotropismo e lat?ncia no sistema nervoso central, procuramos relacionar o HHV-6 com a epilepsia do lobo temporal mesial (ELTM). Atrav?s de rea??o em cadeia da polimerase (PCR), pesquisamos a presen?a do v?rus em 42 amostras de hipocampo de 14 pacientes com epilepsia do lobo temporal mesial (ELTM) submetidos a am?gdalo-hipocampectomia (AH) ou lobectomia temporal anterior (LTA) como tratamento para a epilepsia. Tr?s amostras de cada paciente foram analisadas: cabe?a, corpo e cauda do hipocampo. O DNA do HHV-6 foi detectado em 12 dos 14 pacientes (85,7%) com ELTM. Tr?s pacientes foram positivos em todas as tr?s amostras, 4 pacientes foram positivos em duas amostras e 5 em apenas uma amostra. Com rela??o ? origem das amostras, 7 foram positivas na cabe?a do hipocampo, 8 no corpo do hipocampo e 7 na cauda do hipocampo, demonstrando n?o haver um s?tio de prefer?ncia para o estabelecimento do v?rus. A positividade para HHV-6 encontrada nos pacientes deste estudo ? maior do que os dados encontrados na literatura. Uma poss?vel explica??o para esta elevada positividade poderia ser as diferen?as na concep??o do estudo, com tr?s amostras coletadas de cada paciente, o que II pode ser mais representativo do que a coleta de apenas uma amostra. Nossos resultados refor?am a hip?tese de um poss?vel papel da infec??o pelo HHV-6 na epilepsia.
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Detecção do DNA viral dos herpesvirus 5 e 6 em biopsias hepaticas de transplantados de figado / Detection of human herpesvirus 5 and 6 in liver transplant patientsSilva, Ana Carolina Guardia da, 1980- 12 August 2018 (has links)
Orientador: Sandra Cecilia Botelho Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-12T05:17:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2008 / Resumo: O Citomegalovírus (CMV) e o Herpesvírus humano 6 são vírus universais pertencentes à subfamília dos betaherpesvírus. Esses vírus permanecem latentes, podendo ser reativados por um período de imunossupressão, como acontece em pacientes submetidos a transplantes de fígado. O CMV é um importante patógeno oportunista, que influencia negativamente esses pacientes. O HHV-6 é um vírus linfotrópico, alem de infectar outras células como monócitos e células endoteliais, usando o receptor celular CD-46. A reativação do HHV-6 tem sido associada com a do CMV e rejeição do enxerto. Nos transplantados de fígado a reativação do HHV-6 tem aparecido junto com a infecção do CMV. O CMV tem sido associado como importante causa de mortalidade e morbidade nos transplantados de órgãos sólidos. Esses vírus podem causar disfunção no enxerto, supressão da medula e pré-disposição para a doença por CMV. Este estudo detectou o DNA do CMV e HHV-6 em 41 transplantados de fígado usando a Nested- PCR. Este método foi escolhido por ser mais sensível e possibilitar a genotipagem. Também analisamos a co-infecção e o impacto clínico desses vírus nos transplantados hepáticos. 145 biópsias foram analisadas (41 - biópsias de doador e 104 - biópsias pós-transplante). 23 (15.8%) das 145 foram positivas para o CMV e 53 (36.5%) positivas para o HHV-6. 19 (13%) tiveram a co-infecção na mesma amostra. 21 pacientes tiveram rejeição ao enxerto e desses 16 tiveram infecção viral. A presença desses vírus observado, nas biópsias hepáticas dos doadores e no pós- transplante, sugere que as infecções no pré-transplante são importante via de transmissão desses vírus aos receptores, causando episódios de rejeição. / Abstract: Cytomegalovirus (CMV), Human Herpesvirus-6 (HHV-6), belong to the ß-herpesvirus subfamily. These viruses can be reactivated from latency during immunosuppression. period especially after liver transplantation, CMV has been the most important opportunistc infection that negatively influences the outcome of patients. HHV-6 is a lymphotropic virus, but it may also infect other cells, such as monocytes and epithelial cells, using the CD46-molecule as a cellular receptor. HHV-6 reactivations are often seen associated with CMV infection and allograft rejection. In liver transplant patients, HHV-6 reativations are frequently found together with CMV infection. CMV has been implicated as an important causes of morbidity and mortality among solid organ transplant patients. Both have been related to graft dysfunction, bone morrow suppression, and predisposition to CMV disease. In this study, CMV and HHV-6 DNA were detected in 41 liver transplant patients, using nested polymerase chain reaction (PCR). This method was chosen because increase the sensibility and with the products we can be classified into CMV genotypes. We also evaluate the co-infection and the clinical impact between those virus in liver transplant patients. 145 biopsies were tested, (41 - liver donor biopsies and 104 - liver post- transplant), Twenty three (15,8%) of 145 liver biopsies were CMV- PCR positive and fifty three (36,5%) of 145 were positive HHV-6- PCR. Nineteen (13%) of 145 biopsies were both CMV and HHV-6 positive. 21 patients had allograft rejection and 16 had infection for this virus. With the presence of the viruses observed in the samples of the donor and post-transplant, suggests that pre-transplant HHV-6 and CMV infection may be a risk factor post-transplant. They had associated with allograft refection. / Mestrado / Mestre em Farmacologia
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Prevalência das infecções causadas por herpesvírus humanos em portadores do HIV através de diagnóstico diferencialLopes, Amanda de Oliveira January 2016 (has links)
Submitted by Angelo Silva (asilva@icict.fiocruz.br) on 2016-07-13T18:45:42Z
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Previous issue date: 2016 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Os herpesvírus humanos (HHV) (herpes simples 1 e 2, varicella-zoster, Epstein-Barr, citomegalovírus humano, herpesvírus humanos 6A, 6B, 7 e 8) estão associados à diversas doenças, porém são nos indivíduos portadores do vírus da imunodeficiência humana (HIV) que estes herpesvírus causam infecção grave e duradoura, podendo levá-los ao óbito. Contudo, no Brasil, pouco é conhecido sobre a verdadeira prevalência das infecções causadas por HHV nesses indivíduos devido a poucos estudos realizados no país. Portanto, este trabalho visou determinar a prevalência desta co-infecção HIV/Herpesvírus humanos através de um diagnóstico diferencial que detecta simultaneamente as nove espécieis de HHV (Pan-herpesvírus). Este método é baseado na amplificação, por reação em cadeia da polimerase (PCR) Nested, de uma região altamente conservada (DPOL) do genoma desses vírus e na identificação da espécie viral por sequenciamento do genoma viral. Além disso, este estudo visou avaliar possíveis fatores associados com a prevalência desta co-infecção, como sexo, idade e taxas de linfócitos T CD4+ (LT CD4+), e destinou-se comparar a prevalência das infecções causadas por HHV entre indivíduos HIV reagentes (grupo teste) e indivíduos não reagentes para este vírus (grupo controle). Para isso, 241 amostras de soro de indivíduos portadores do HIV coletadas durante os anos de 2012 (95 amostras), 2013 (89 amostras) e 2014 (57 amostras), e 94 amostras de soro de indivíduos HIV não reagentes coletadas durante o ano de 2013 foram testadas através de PCR Nested
As amostras amplificadas foram sequenciadas para a identificação da espécie viral. Com isso, neste estudo foi encontrada prevalência da co-infecção HIV/HHV de 14,1% (34/241), sendo 13% (31/241), 0,8% (2/241) e 0,4% (1/241) relacionado às co-infecções HIV/HSV-1, HIV/HHV-6 e HIV/HHV-8, respectivamente. Também foi observada diminuição estatisticamente significativa (p-valor < 0,0001) da prevalência da co-infecção HIV/HHV durante os anos estudados. Já o grupo controle obteve menor prevalência da infecção causada por HHV (1,1%; 1/94) e foi referente à infecção causada por HHV-6. Ademais, foi verificada associação estatisticamente significativa da detecção da co-infecção HIV/HSV-1 com as taxas de LT CD4+, evidenciando que a taxa LT CD4+ <500 células/mm³ é um fator de risco para infecções causadas por HSV-1 em indivíduos HIV reagentes (p-valor < 0,0327/ p-valor <0,0186). A partir disto, foi verificado que o Pan-herpesvírus foi eficiente na detecção das co-infecções HIV/HSV-1, HIV/HHV-6 e HIV/HHV-8. Sendo assim, este trabalho contribuiu para a investigação da prevalência das infecções causadas por herpesvírus humanos em indivíduos HIV reagentes no Rio de Janeiro/Brasil / The human herpesviruses (HHV) (herpes simplex 1 and 2, varicella-zoster, Epstein-Barr virus, human cytomegalovirus, human herpesviruses 6A, 6B, 7 and 8) are associated with several diseases, but these herpesviruses cause serious and lasting infection in individuals infected by the human immunodeficiency virus (HIV) and can lead to death. However, in Brazil few is known about the true prevalence of human herpesviruses infection in these individuals because of few studies in the country. Therefore, this study aimed to determine the prevalence of co-infection HIV/human herpesviruses through a differential diagnosis that simultaneously detects nine HHV species (Pan-herpesviruses). This method is based on amplification a highly conserved region (DPOL) genome of these viruses by Nested polymerase chain reaction (PCR) and on viral species identification by sequencing of the viral genome. In addition, this study aimed to evaluate possible factors associated with the prevalence of co-infection, such as sex, age and T CD4+ lymphocytes rates (LT CD4+), and aimed to compare the prevalence of infections caused by HHV among individuals HIV reagents and no reagents for this virus (control group). For this, 241 serum samples from individuals with HIV collected during the years 2012 (95 samples), 2013 (89 samples) and 2014 (57 samples), and 94 serum samples from individuals without HIV collected during the year 2013 were tested by Nested PCR
The amplified samples were sequenced for identification of the viral species. This study found prevalence of co-infection HIV/HHV 14,1% (34/241), in which 13% (31/241), 0,8% (2/241) and 0,4% (1/241) were related with the co-infections HIV/HSV-1, HIV/HHV-6 and HIV/HHV-8, respectively. A decrease statistically significant (p-value <0,0001) in the prevalence of co-infection HIV/HHV was observed during the years of study. The control group had lower prevalence of infection caused by HHV (1,1%; 1/94) and was related with the infection caused by HHV-6. In addition, there was a statistically significant association between detection of co-infection HIV/HSV-1 with LT CD4+ rates, showing that LT CD4+ rate <500 cells/mm³ is a risk factor for infections caused by HSV-1 in individuals HIV reagents (p-value <0,0327 / p-value <0,0186). From this, was verified that the Pan-herpesviruses was efficient in the detection of co-infections HIV/HSV-1, HIV/HHV-6 and HIV/HHV-8. Therefore, this study contributed to the investigation of the prevalence of infections caused by human herpesviruses in people living with HIV in Rio de Janeiro/Brazil
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Detecção e monitorização do Herpesvirus humano 7 (HHV-7) em transplantados hepaticos : impacto clinico e associação com Citomegalovirus e Herpesvirus humano 6 / Detection and monitoring of human herpesvirus 7 (HHV-7) in liver recipients : clinical impact and association with cytomegalovirus and human herpesvirus 6Thomasini, Ronaldo Luís, 1978- 22 May 2007 (has links)
Orientador: Sandra Cecilia Botelho Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-08T20:07:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2007 / Resumo: Neste estudo, 29 pacientes adultos, transplantados de fígado foram monitorados (até 180 dias pós-transplante) para infecções ativas por HCMV, HHV-6 e HHV-7 usando Nested-PCR (N-PCR). O protocolo de imunossupressão foi baseado na combinação de esteróides e ciclosporina e profilaxia com ganciclovir não foi usada. Aciclovir foi usado como profilaxia para o Herpes simples. Um grupo controle foi estudado, N-PCR em DNA extraído de PBL e soro de 53 indivíduos sadios foram realizados. Destes indivíduos, 8 amostras de saliva foram coletadas para isolamento do HHV-7 e produção de controle positivo. DNA do HHV-7 foi detectado em 87,5% de saliva, em 28,3% de PBL e 0% de soro. Isolamento do vírus mostrou ser 100% correlato com N-PCR. Soro foi considerado a amostra de escolha para detectar infecção ativa por HHV-7. DNA do HHV-6, HHV-7 e HCMV foram, frequentemente, detectados em pacientes após transplante hepático (65,5%, 51,7% e 48,2%, respectivamente). A maioria dos pacientes com infecção ativa por mais que um vírus é infectado de forma seqüencial e não concorrente. Infecção ativa por HHV-7 ocorreu em muitos casos antes da infecção ativa por HCMV e/ou HHV-6 indicando que ele poderia ser um fator para reativação daqueles vírus. Nested-PCR para HCMV teve valor preditivo positivo de 50% e valor preditivo negativo de 100% para infecção sintomática. Neste estudo, o HCMV foi relacionado disfunção do enxerto, HHV-6 foi associado com pneumonite, encefalite, disfunção e rejeição do enxerto e predisposição para infecção oportunista. Em pacientes livres de HCMV e/ou HHV-6, nenhuma manifestação clínica nem achados laboratoriais significativos foram relacionados ao HHV-7. O tratamento antiviral com ganciclovir foi considerado satisfatório para o HCMV, mas para o HHV-6 e HHV-7, os dados não foram conclusivos. O aciclovir poderia ter demonstrado uma limitada atividade contra o HHV-7 / Abstract: In this study, 29 adult liver transplant patients were monitored (until day 180th posttransplantation) for HCMV, HHV-6 e HHV-7 active infections using Nested-PCR (N-PCR). Immunosuppression protocol was based on combinations of steroids and cyclosporine and no ganciclovir prophylaxis was used. Aciclovir was employed as Herpes simplex prophylaxis. A control group was studied; N-PCR in DNA extracted from PBL and serum of 53 healthy individuals was carried out. From these individuals, 8 samples of saliva were collected to design a positive control to N-PCR. HHV-7 DNA was detected in 87.5% of saliva, in 28.3% of PBL and 0% of serum. Virus isolation showed to be 100% correlated with N-PCR. Serum was considered to be the sample of choice to detect HHV-7 active infection. HHV-6, HHV-7 and HCMV DNA were frequently detected in patients after liver transplant (65.5%, 51.7% and 48.2%, respectively). The results show that few patients remain negative to active infection with betaherpesviruses after liver transplantation. Most of the patients with active infection with more than one virus were infected sequentially and not concurrently. HHV-7 active infection occurred in most of cases prior HCMV and HHV-6 active infections indicating that it could be a factor to reactivation of these viruses. HCMV Nested-PCR presented positive predictive value of 50% and negative predictive value of 100%. In this study, HCMV was related with graft dysfunction, HHV-6 was associated with pneumonitis, encephalitis, liver dysfunction, graft rejection and predisposition to opportunist infections. In HCMV and/or HHV-6 free patients, no clinical manifestation nor significant laboratory findings was related to HHV-7. Ganciclovir Antiviral treatment was considered satisfactory to HCMV symptomatic infections but to HHV-6 and HHV-7, no conclusive data was found. Aciclovir could be a limited activity against HHV-7 / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Farmacologia
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Citomegalovírus, herpesvírus humano 6, herpesvírus humano 7 e perfil imunofenotípico do infiltrado inflamatório na periodontite crônica marginal / Cytomegalovirus, human herpesvirus 6, human herpesvirus 7 and immunophenotypic profile of inflammatory infiltrate in marginal chronic periodontitisThomasini, Ronaldo Luís, 1978- 11 April 2011 (has links)
Orientador: Sandra Cecília Botelho Costa / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-19T10:22:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2011 / Resumo: Periodontite humana crônica é um processo inflamatório caracterizado por denso acúmulo de células imunes no tecido periodontal. A periodontite pode levar a perda do dente no paciente e a patogênese desta doença não é completamente conhecida. Este estudo testou a hipótese de que as células do infiltrado inflamatório podem abrigar betaherpesviruses e estes vírus estão ligados á subpopulação específicas de linfócitos. Fragmentos de tecido periodontal foram obtidas de pacientes afetados por periodontite e de indivíduos saudáveis. Imuno-histoquímica foi realizada para a contagem de células CD19+, céulas CD3+ e células CD4+ e CD8+. Reação em cadeia da polimerase e imuno-histoquímica foram realizados para detectar citomegalovírus, herpesvirus humanos 6 e 7 nas amostras. Como esperado, os tecidos coletados de indivíduos saudáveis não apresentaram nível significativo de infiltrado inflamatório e, portanto, foram excluídos dos procedimentos de imunofenotipagem. Os resultados mostraram que células CD19+ foram discretamente predomiantes sobre as células CD3+ no tecido periodontal afetado, mas estatisticamente não significativo. A subpopulação CD4+ de linfócitos estava significativamente em maior número que a subpopulação CD8+ de linfócitos (P=0,004), nas amostras. Citomegalovírus e herpesvírus humano 7 foram encontrados em locais afetados, mas não no tecido coletado de indivíduos saudáveis (P=0,04 e P=0,04, respectivamente). Herpesvirus humano 6 foi raramente detectado. Foi encontrado correlação entre citomegalovírus com menor relação de CD19+/CD3+ (P=0,003) e herpesvirus humano 7 com menor relação CD19+/CD3+ (P=0,003) e maior relação de CD4+/CD8+ ( P=0,002). Imuno-histoquímica foi negativa para citomegalovírus, herpesvirus humano 6 e herpesvirus humano 7 em todas as amostras. Este estudo mostra que citomegalovírus e herpesvírus humano 7 podem estar presentes em regiões afetadas pela periodontite, mas são incomuns em regiões saudáveis. Além disso, este estudo sugere que citomegalovírus pode ser relacionado ao infiltrado inflamatório, com predomínio de células CD3+ e, herpesvirus humano 7 pode estar relacionado ao infiltrado inflamatório com predomínio de células CD4+. Os dados sugerem que citomegalovírus e herpesvírus humano 7 podem estar presentes no infiltrado inflamatório, em estado de latência. No entanto, outros métodos deveriam ser realizados para confirmar esta hipótese / Abstract: Human chronic periodontitis is an inflammatory process characterized by dense accumulation of immune cells in the periodontal tissue. The periodontitis can lead to loss of teeth in the patient and the pathogenesis of this disease is not completely known. This study tested the hypothesis that cells within inflammatory infiltrate can harbor betaherpesviruses and these viruses are linked to specific lymphocyte subpopulation. Biopsies of periodontal tissue were taken from periodontitis affected and from healthy subjects. Immunohistochemistry was performed to count CD19+ cells, CD3+ cells, CD4+ and CD8+ cell subsets. Polymerase chain reaction and immunohistochemistry were performed to detected cytomegalovirus, human herpesvirus 6 and 7 in the samples. As expected, tissues collected from healthy subjects presented no significant level of inflammatory infiltration and therefore were excluded from immunostaining procedures. The results showed that CD19+ cells had discrete predominance over CD3+ cells in the periodontitis affected tissue but not statistically significant. CD4+ lymphocyte subset were significantly higher then CD8+ lymphocyte subset (P=0.004) in the samples. Cytomegalovirus and human herpesvirus 7 were found in affected sites but not in tissue collected from healthy subjects (P=0.04 and P=0.04, respectively). Human herpesvirus 6 was rarely detected. We found a correlation between cytomegalovirus with lower CD19+/CD3+ ratios (P=0.003) and human herpesvirus 7 with lower CD19+/CD3+ ratio (P=0.003) and higher CD4+/CD8+ ratios (P=0.002). Imunohistochemistry was negative for cytomegalovirus, human herpesvirus 6 and human herpesvirus 7 in the total of samples. This study shows that cytomegalovirus and human herpesvirus 7 can be present in periodontitis affected sites but are uncommon in healthy sites. Moreover, this study suggests that cytomegalovirus can be related to inflammatory infiltrate with predominance of CD3+ cells and, human herpesvirus 7 can be related to inflammatory infiltrate with predominance of CD4+. The data suggest that cytomegalovirus and human herpesvirus 7 could be present in the inflammatory infiltrate in latent state. However, different methods should be performed to confirm this hypothesis / Doutorado / Ciencias Basicas / Doutor em Clínica Médica
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Infecção ativa por herpesvírus em pacientes com lúpus eritematoso sistêmico (LES) / Herpesvirus active infection in patients with systemic lupusPeigo, Murilo de Freitas, 1987- 24 August 2018 (has links)
Orientadores: Sandra Cecília Botelho Costa, Sandra Helena Alves Bonon / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-24T11:43:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2012 / Resumo: O Lúpus Eritematoso Sistêmico (LES) é uma patologia sistêmica do tecido conjuntivo, que se apresenta de maneira variada na dependência do órgão afetado, da gravidade de seu acometimento e da idade do paciente, tendo influência de fatores raciais, de padrões imunológicos e ambientais. Pacientes lúpicos têm grande predisposição para desenvolver infecções graças à imunossupressão induzida pela própria doença como pelo uso de vários medicamentos em seu tratamento. Infecções causadas por herpesvírus, principalmente o Citomegalovírus Humano (CMV) e o Epstein-Barr (EBV), têm sido implicadas em várias doenças autoimunes graves, incluindo o LES. A reativação dos herpesvírus 6 e 7 (HHV-6 e HHV-7) geralmente ocorre em pacientes imunodeprimidos, mas seus papéis ainda são pouco estudados. As infecções por herpesvírus têm influência tanto no início do processo autoimune quanto na exacerbação da progressão da doença. A identificação de pacientes com alto risco de desenvolver doença pelos herpesvírus pode ser realizada utilizando técnicas de detecção de infecção ativa, como a Reação em Cadeia da Polimerase (Nested-PCR) e a detecção do antígeno pp65 do CMV (Antigenemia). Dependendo do caso, estes pacientes podem receber tratamento com antivirais. Diante do exposto, os objetivos deste estudo foram: monitorizar os pacientes com LES em relação à infecção ativa por CMV, EBV, HHV-6 e HHV-7, utilizando as técnicas de Nested-PCR e de antigenemia, bem como avaliar o impacto clínico dessas infecções. Foram incluídos neste trabalho, amostras de sangue de 71 pacientes em seguimento no Departamento de Reumatologia da Faculdade de Ciências Médicas ¿ UNICAMP, com diagnóstico de LES confirmado, sendo que 20/71 (28%) estavam com o lúpus ativo (SLEDAI ? 8) e 51/71 (72%) dos pacientes não tinham atividade lúpica (SLEDAI < 8). Das amostras de sangue pesquisadas, 10/71 (14%) foram positivas para os herpesvírus estudados, sendo que 90% destes pacientes com infecção ativa apresentavam o lúpus em atividade (p?0,006). Infecção ativa pelo CMV ocorreu em 4 pacientes (5,6%). HHV-7 foi detectado em 4 amostras (5,6%). Dois outros pacientes apresentaram dupla infecção por CMV e HHV-7 (2,8%). Infecção ativa pelo EBV e HHV-6 não foi detectada em nenhuma das amostras analisadas. Dois pacientes foram a óbito, sendo que um deles evoluiu com sepse de foco pulmonar (provável doença por CMV) e o outro com sepse por Psedomonas aeruginosa. Diante dos resultados obtidos, podemos observar que a infecção ativa pode ocorrer nos pacientes com LES, principalmente naqueles com a doença em atividade. Poucos estudos têm avaliado o impacto destas infecções no cuidado diário dos pacientes com LES. Acreditamos que este trabalho seja pioneiro e será de fundamental importância, contribuindo com este grupo de pacientes. Entretanto, futuros estudos deverão ser implementados com um número maior de pacientes e de coletas/paciente, principalmente naqueles com LES em atividade, que foram demonstrados com aqueles com fator de risco aumentado / Abstract: Systemic lupus erythematosus (SLE) is a connective tissue systemic pathology that presents itself in several ways, depending on the organ affected, the seriousness of the disease and patient¿s age, being influenced by racial factors, immunologic and environmental patterns. SLE patients have great predisposition to develop infections due to the immunosuppression induced by the disease itself and by the use of medicine in the treatment. Infections caused by herpesvirus, especially Human Cytomegalovirus (CMV) and Epstein-Barr (EBV), have been developed into several serious autoimmune diseases, including SLE. Herpesvirus 6 and 7 (HHV-6 and HHV-7) reactivation generally occurs in immunodepressed patients, but their roles are unclear. Herpesvirus infections have influence both on the beginning of the autoimmune process and on the aggravation of the disease progression. The patients that present high risks of developing herpesvirus related diseases can be identified using active infection detection techniques, such as the Nested polymerase chain reaction (Nested-PCR) and the CMV pp65 antigen detection (antigenemia). Depending on the case, the patients can receive treatment with antivirals. Face to the exposed, the objectives of this study were: to monitor the patients with SLE with regard to active infection by CMV using Nested-PCR and antigenemia techniques, and EBV, HHV-6, HHV-7 in serum, as well as to evaluate the clinic impact to these infections. There were included in this work blood samples of 71 patients that are being treated at the Department of Rheumatology, Faculty of Medical Sciences ¿ University of Campinas - UNICAMP, with a confirmed SLE diagnosis, given that 20/71 (28%) had active lupus (SLEDAI ? 8) and 51/71 (72%) of the patients didn¿t present lupic activity (SLEDAI < 8). Considering the blood samples researched, 10/71 (14%) were positive for the studied herpesvirus, and 90% of the patients with active infection presented lupus in activity (p ? 0,006). Active infection by CMV was observed in 4 patients (5,6%). HHV-7 was detected in 4 samples (5,6%). Two other patients presented double infection by CMV and HHV-7 (2,8%). Active infection by EBV and HHV-6 was not detected in any of the analyzed samples. Two patients have deceased, whose conditions developed into pulmonary sepsis (probable disease by CMV) and into Psedomonas aeruginosa sepsis, respectively. After analyzing the achieved results, we observe that active infection can appear in patients with SLE, especially in those with the disease in activity. Few studies have evaluated the impact of these infections on the daily care of patients with SLE. In this sense, we believe that this work is pioneer and that it will be of fundamental importance, contributing to this group of patients. However, future studies should be implemented, with a larger number of patients and samples, especially those with SLE in activity, which are the ones with increased risk factor as shown / Mestrado / Clinica Medica / Mestre em Clinica Medica
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