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Cellular immune responses to allografts and cytomegalovirus /

Engstrand, Mats, January 2003 (has links)
Diss. (sammanfattning) Uppsala : Univ., 2003. / Härtill 5 uppsatser.
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NK cell involvement in the induction of allograft tolerance /

Beilke, Joshua Nathan. January 2005 (has links)
Thesis (Ph.D. in Immunology) -- University of Colorado, 2005. / Typescript. Includes bibliographical references (leaves 133-151). Free to UCDHSC affiliates. Online version available via ProQuest Digital Dissertations;
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Synthèse, caractérisation physico-chimique et propriétés de transport des composés homologues (PbSe)5 (Bi2Se3)3m (m = 1, 2, 3) / Synthesis, characterization and transport properties of the homologous series of compounds (PbSe)5 (Bi2Se3)3m (m = 1, 2, 3)

Sassi, Selma 18 July 2017 (has links)
Les composés homologues de formule chimique (PbSe)5(Bi2Se3)3m avec m = 1, 2 et 3 se caractérisent par une structure lamellaire où alternent des couches de PbSe avec m couches de Bi2Se3. Ces composés, que l’on retrouve à l’état naturel, ont récemment suscité un intérêt pour la thermoélectricité en raison de leur remarquable aptitude à ne conduire que très faiblement la chaleur. L’objectif des travaux de cette thèse est d’étudier en détail le transport électrique et thermique de ces matériaux et de sonder leurs performances pour la génération d’électricité. Pour atteindre ces objectifs, des techniques de synthèse par métallurgie de poudres ont été mises en œuvre. Les matériaux résultants ont été ensuite caractérisés finement. Les caractérisations ont porté sur des analyses physico-chimiques mais aussi sur des mesures de propriétés électriques et thermiques aussi bien à basses températures (2 – 300 K) pour identifier les mécanismes microscopiques qui gouvernent le transport qu’à hautes températures (300 – 723 K) pour déterminer leur domaine d’application optimal. Une étude détaillée de leur structure cristalline a été menée en combinant des mesures de diffraction des rayons X sur monocristal et des analyses de microscopie électronique à transmission à haute résolution. Les mesures des propriétés physiques de ces composés ont confirmé leur potentiel pour des applications en génération d’électricité à températures moyennes. De nombreuses substitutions ont été entreprises afin de tenter d’optimiser davantage les performances de ces composés. Les éléments en substitution ont été choisi pour soit augmenter (m = 1) ou au contraire diminuer (m = 2 et 3) la concentration en électrons. Ces travaux ont permis de démontrer pour la première fois la possibilité de doper ces matériaux avec de nombreux éléments tels que l’iode, le sodium, l’argent ou le tellure. D’autre part, une étude détaillée des propriétés thermiques de ces matériaux a été réalisée par diffusion inélastique des neutrons sur poudre afin de dévoiler l’origine microscopique des très faibles valeurs de conductivité thermique de réseau mesurées / The homologous series of compounds of general chemical formula (PbSe)5(Bi2Se3)3m with m = 1, 2 et 3 is characterized by a lamellar crystal structure where PbSe layers alternate with m Bi2Se3 layers. These compounds, that can be found as minerals, have recently focused attention for thermoelectric applications owing to their remarkable ability to poorly conduct heat. In order to evaluate their thermoelectric performances, the present work dealt with their synthesis by powder metallurgy techniques followed by measurements of their transport properties not only at low temperatures (2 – 300 K) with the aim to identify the basic mechanisms governing the transport but also at high temperatures (300 – 723 K) to determine their optimum temperature range. A detailed study of their crystalline structure has been carried out by a combination of X-ray diffraction on high-quality single crystals and high-resolution transmission electron microscopy. Measurements of their transport properties have confirmed the potential of these materials for power generation applications at mid temperatures. Numerous substitutions have been studied to optimize further their thermoelectric performances. The elements in substitution have been chosen to either increase (m = 1) or decrease (m= 2 and 3) the electron concentration. This work has demonstrated for the first time the possibility to dope these materials with various elements such as iodine, sodium, silver or tellurium. Moreover, a detailed study of the thermal properties of these compounds has been performed by means of powder inelastic neutron scattering in order to unveil the microscopic origin of the very low lattice thermal conductivity values measured
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Padrão de cicatrização de defeitos de deiscência periodontal tratados com enxerto de tecido conjuntivo subepitelial ou matriz dérmica acelular: estudo histológico e histométrico em cães

Bonfante, Samara [UNESP] 21 July 2008 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-07-21Bitstream added on 2014-06-13T20:44:59Z : No. of bitstreams: 1 bonfante_s_dr_araca.pdf: 1718096 bytes, checksum: f842700dfddf9a4f0edab9314172252a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo do presente estudo foi avaliar histológica e histometricamente o padrão de cicatrização de defeitos de deiscência periodontal tratados com enxerto de tecido conjuntivo subepitelial (ETC) ou matriz dérmica acelular (MDA), cada qual comparado ao tratamento com Retalho posicionado Coronal (RPC). Foram utilizados 10 cães, divididos em dois grupo de 5. Defeitos de deiscência óssea (6x8 mm) foram criados nos caninos superiores e os grupos divididos seguindo um modelo de boca dividida de acordo com o tratamento. Em um grupo de 5 cães foi realizado o tratamento com ETC e no lado contralateral RPC e o outro grupo de 5 cães foi tratado com MDA e RPC no lado contralateral. Após 3 meses pós-operatórios os animais foram submetidos à eutanásia e os blocos processados para análise histológica e histométrica. Os parâmetros histométricos avaliados incluíram extensão de tecido epitelial (TE), nova inserção (NITC) e aposição de tecido conjuntivo (ATC), novo cemento (NC) e novo osso (NO). Os dados histométricos transformados em porcentagem, foram estatisticamente analisados pelo teste ANOVA, seguido pelo teste de Tukey... / The aim of the present study was to evaluate histologically and histometrically the healing pattern of periodontal dehiscence defects treated with Subepithelial Connective Tissue Graft (CTG) or Acellular Dermal Matrix (ADM), when compared to the Coronally Positioned Flap (CPF). Dehiscence bone defects (6x8mm) were created bilaterally in the maxillary canine area of dogs (n=10, divided in 2 groups). By means of a split mouth test design, a group of 5 dogs was randomly allocated to receive subepithelial connective tissue graft (CTG) in one of the sides and a coronally positioned flap (CPF) in the opposing side. The remaining 5 dogs had acellular dermal matrix graft (ADM) as a treatment in either one of the sides and CPF on the other side. Three months after surgery, dogs were euthanized and blocks of interest were processed. The histometric parameters for the latter included lenght of epithelial tissue (ET), new attachment (NACT) and connective tissue aposition (CTA), new cementum (NC), and new bone (NB). Histometric data were converted to percentage and statistically analyzed by ANOVA followed by Tukey test at a p<0.05. No significant difference was detected in the following parameters for both groups: ET yielding... (Complete abstract click electronic access below)
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Uso do silenciamento gênico mediado por RNA de interferência e de TAL effector nucleases para aumento de eventos gene targeting em células de cão / Use of RNAi-mediated gene silencing and TAL effector nucleases to enhance gene targeting events in dog cells

Raquel de Mello e Pinho 25 August 2014 (has links)
A inserção de DNA exógeno no genoma hospedeiro é conseguida principalmente através da utilização de vias de reparo como a junção de pontas não homólogas, que possui caráter aleatório, e a recombinação homóloga, que possibilita o gene targeting. Algumas ferramentas como as TAL Effector Nucleases (TALENs) e o RNA interferência (RNAi) podem ser utilizadas para aumentar a taxa de integração específica e assim melhorar a eficiência e o direcionamento da edição gênica. Nesse trabalho utilizamos o silenciamento gênico mediano por short interference RNA (siRNA) para inibição temporária dos genes ATF7IP uma metiltrasferase, EP300 uma acetiltransferase e KU70 (NHEJ) e um par de TALENs complementares a uma região do gene da distrofina canina. Células Caninas MDCK I foram transfectadas por lipofectamina 2000 (Invitrogen) com 320pmol de siRNAs para ATF7IP e Ep300; e 64 pmol do SiRNA para KU70 em diferentes grupos, 40 horas depois as células foram transfectadas com 15 &mu;g vetor molde derivado do pEGFP-N1 (Clonatech) e com 10 &mu;g dos RNAm das TALENs. A seleção se deu em meio DMEM high com 600&mu;g/ mL de G418 (Lonza) por 14-16 dias. As colônias coletadas através de biópsias foram analisadas por Polimerase Chain Reaction e sequenciamento gênico. Três pares de primers foram utilizados; um controle endógeno (GAPDH), um controle interno do inserto (Neo qPCR) e um para confirmação da recombinação homóloga (DMD3). Os grupos apresentaram grande variação na taxa de mortalidade celular e consequentemente no número de colônias: Com o grupo ATF7IP+Vetor (648c) apresentando maior número de colônias e o grupo EP300+Ku70+Vetor+TALENs o menor (1c). A maior taxa de recombinação ocorreu nos grupos no grupo ATF7IP +Ku70+Vetor+TALENs com 40% das células positivas para neomicina apresentado o evento gene targeting, um aumento considerável na taxa de recombinação quando comparada a porcentagem de 3,1% do controle transfectado somente com o vetor molde. Mostrando que o uso conjunto das TALENs com siRNAs foi um sucesso para o aumento de eventos de edição gênica direcionada. / The insertion of exogenous DNA into a host genome is achieved primarily through the use of DNA repair pathways such as Non-Homologous End Joining (NHEJ) and the Homologous Recombination (HR). The integration by NHEJ has a random feature and is much more common than HR insertions, which are more likely to produce gene targeting events . TAL effector nucleases (TALENs) and RNA interference (RNAi) can be used to increase the rate of specific integration and thus improving the efficiency of gene editing. In this work, we used short interference RNA (siRNA)-mediated gene silencing for transient inhibition of genes ATF7IP (implicated in histone methylation), EP300 (acetyltransferase) and Ku70 (essential to NHEJ) and a pair of TALENs RNAm complementary to canine muscle dystrophin (DMD) gene. MDCK I Canine Cells were transfected by lipofectamine 2000 (Invitrogen) with 320 pmol of siRNAs for ATF7IP and EP300; and 64 pmol of siRNA for Ku70 in different groups. After 40 hours cells were transfected with 15 &mu;g of a vector derived from pEGFP- N1 (Clontech) containing two regions homologous to the canine DMD gene (left arm length: 873 bp and right arm length: 1370 bp) and 10 &mu;g of TALEN mRNA. The cell selection was achieved with DMEM high glucose with 600&mu;g/ml G418 for 14-16 days. The colonies collected through biopsies were analyzed by polymerase chain reaction and gene sequencing. Three pairs of primers were used; an endogenous control (GAPDH) , an internal control of the insert (Neo qPCR) and a primer set to confirm the occurrence of homologous recombination events (DMD3). .Groups showed great variation in cell death rate and consequently in the number of colonies: ATF7IP+Vector had highest number of colonies (648c) and the group EP300+Ku70+Vetor+TALENs the lowest one (1c) The highest rate of homologous recombination was in ATF7IP +Ku70+Vetor+TALENs group that had 40% of the neomycin positives cells confirmed as gene targeting events, a considerable increase in the recombination rate compared to the 3.1% in the control group transfected only with the template vector. That shows that the combined use of siRNAs and TALENs was a success for increasing directed gene editing events.
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Metabolismo de serina: caracterização de serina hidroximetiltransferase de Trypanosoma cruzi. / Metabolism of serine: characterization of serine hydroxymethyltransferase of Trypanosoma cruzi.

Carlos Gustavo Baptista 29 March 2017 (has links)
A doença de Chagas é uma doença causada pelo protozoário parasita Trypanosoma cruzi, que afeta cerca de 10 milhões de pessoas, principalmente nas Américas. O T. cruzi utiliza aminoácidos como importante fonte de energia e em vários processos biológicos como diferenciação, resistência a condições de estresse e invasão de células hospedeiras. A serina está envolvida em muitas vias biosintéticas. Uma das funções relevantes da serina é a formação de compostos C1 para a biossíntese de nucleotídeos. O uso de serina para esse fim é iniciado pela Serina Hidroximetiltransferase, cuja atividade foi detectada em T. cruzi, mas seu papel na biologia do parasita permanece pouco explorado. Neste trabalho, identificamos um gene que codifica uma Serina Hidroximetiltransferase putativa com dupla localização (citoplasmática e mitocondrial). Por recombinação homóloga, obtemos parasitas knockouts heterozigotos nos quais um alelo de SHMT foi substituído pelo gene da neomicina fosfotransferase. Os parasitas knockouts não mostraram diferenças na taxa de crescimento das formas epimastigotas ou na metaciclogênese in vitro. Porém, os parasitas knockouts mostraram uma diminuição significativa tanto no índice de infecção como no número de tripomastigotas liberados de células CHO-K1 infectadas com formas metacíclicas knockout. / Chagas disease is a disorder caused by the protozoa parasite Trypanosoma cruzi, which affects about 10 million people, mainly in the Americas. T. cruzi uses amino acids as an important energy source and in several biological processes such as differentiation, resistance to stress conditions and in the host-cell invasion. Serine is involved in many biosynthetic pathways. One of the relevant functions of serine is the formation of C1 compounds for the biosynthesis of nucleotides. The use of serine for that purpose is initiated by Serine Hydroxymethyltransferase, whose activity was detected in T. cruzi but its role in the biology of parasite remains poorly explored. In this work we identified a putative gene encoding a SHMT with dual localization, cytoplasmic and mitochondrial. We generated a single knockout cell line by homologous recombination in which one allele of SHMT was replaced by the neomycin phosphotransferase gene. Knockout parasites showed no difference in epimastigote growth rate or in in vitro metacyclogenesis. However, knockout parasites showed a significant decrease in both, infection index and in the number of trypomastigotes released from CHO-K1cells infected with knockout metacyclic forms.
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Análise comparativa entre o aloenxerto ósseo liofilizado, aloenxerto ósseo congelado e enxerto autógeno: estudo histológico em coelhos / Comparative analysis of demineralized freeze-dried bone, fresh frozen bone allograft and autogenous bone graft: a histologic study in rabbits

Júlio Leonardo Oliveira Lima 06 December 2013 (has links)
Considerando as diferentes aplicações clínicas dos enxertos ósseos nas reconstruções alveolares e a dificuldade de se obter ganhos ósseos em altura, o presente estudo avaliou do ponto de vista histológico a integração do enxerto autógeno (AU), do aloenxerto ósseo liofilizado desmineralizado (ALD), do aloenxerto ósseo congelado mineralizado (ACM) e do coágulo sanguíneo (CO) em um modelo de regeneração óssea vertical. Foram utilizados nove coelhos, sendo um animal doador primário de enxertos ósseos e oito animais submetidos a um modelo de regeneração óssea guiada (ROG), onde 32 cilindros de titânio foram fixados na calota craniana e preenchidos aleatoriamente com AU, ALD, ACM e CO. Após 13 semanas, os animais sofreram eutanásia e o conteúdo dos cilindros submetido à avaliação histológica e histomorfometrica para quantificar a área total de tecido neoformado (AT), o osso neoformado (ON) e o remanescente do material enxertado (MR). Os dados foram submetidos aos testes t-Student e Mann-Whitney com nível de significância de 5%. Os resultados mostraram que em relação à AT os valores médios foram significantes para ACM e ALD e seguiram a seguinte relação: ACM = ALD > AU > CO. Para a variável neoformação óssea as intervenções ALD e ACM mostraram maior quantidade de tecido ósseo formado do que as que empregaram osso autógeno ou coágulo. Já em relação à MR, a média da variável obedeceu à relação: ACM > ALD = AU = CO (valores-p < 5%). Todas as intervenções apresentaram médias mais significativas de crescimento tecidual nas regiões mais próximas ao leito receptor. Foi possível concluir que os aloenxertos podem ser considerados soluções adequadas para o crescimento ósseo vertical. / Regarding different clinical applications for bone grafts in alveolar reconstructions and difficulties on achieving vertical osseous increase the present study performed a comparative histological evaluation of demineralized freeze-dried bone allograft (DFDBA), of fresh frozen bone allograft (FFBA), autogenous graft (AU) and blood clot (CO) on vertical guided bone regeneration (GBR) in rabbit calvarium. Nine rabbits were used, with one as the primary bone graft donor and eight that were subjected to a model of GBR, whereby 32 titanium cylinders were fixed to the calvaria and randomly filled with DFDBA, FFBA, AU, or CO. The animals were sacrificed 13 weeks later, and the content of the cylinders was subjected to hitomorphological and histomorphometric analysis to quantify the total area of neoformed tissue (AT), the new bone tissue (NB) and residual graft particles (RG). The results showed that mean values for AT were significant to DFDBA and FFBA and followed the relation DFDBA = FFBA > AU > CO. Considering new bone formation DFDBA and FFBA showed better results than the AU and CO. The amount of residual bone particles was larger in the DFDBA and followed the relation FFBA > DFDBA = AU = CO (pvalues < 5%). All interventions showed greater new tissue formation nearby the receptor site. It was possible to conclude that allografts DFDBA and FFBA can be considered good strategies for new bone formation in vertical increasing bone.
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Avaliação do paladar e das condições orais dos pacientes submetidos ao transplante de medula ossea / Taste and oral conditions in patients submitted to bone marrow transplantation

Boer, Camila Cominato, 1982- 10 September 2009 (has links)
Orientador: Carmino Antonio de Souza / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-14T17:03:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Boer_CamilaCominato_M.pdf: 2207695 bytes, checksum: 7b3343dfad702a44b23f1b6171662f86 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Pacientes submetidos ao transplante de células precursoras hematopoéticas (TCPH) apresentam queixas freqüentes de alterações ou perda do paladar e redução do fluxo salivar. O objetivo do estudo foi avaliar a percepção do paladar e sua associação com as condições orais de 61 pacientes adultos, submetidos ao TCPH na Unidade de TMO/Unicamp. Os pacientes foram divididos em três grupos, considerando o tempo pós-TCPH. Grupo I- n= 20) composto por pacientes com até 150 dias pós-TCPH, Grupo II-(n=20), entre 150 e 1094 dias, e Grupo III-(n= 21), acima de 1094 dias. No exame clínico oral foram coletados dados de saúde oral, Índices de CPOD (dentes cariados perdidos e obturados), IG (Índice Gengival) e IP (Índice de Placa), pelo ambulatório de Odontologia. A avaliação subjetiva de paladar foi realizada por meio de questionário, enquanto que a avaliação objetiva utilizou 5 ml de soluções líquidas de NaCl, sacarose, ácido cítrico, cafeína, em três diferentes concentrações cada. O estudo da saliva foi feito por avaliação clinica e pela coleta da saliva não estimulada. Os dados foram submetidos à análise estatística descritiva e testes paramétricos e não paramétricos. Dos 61 pacientes avaliados, 31 apresentaram DECHc (Doença do enxerto contra o hospedeiro) sendo que a DECHc oral ocorreu principalmente nos grupos II/III. A mediana do CPOD foi de 22±7,94 enquanto que o do IP e do IG foi de 1,0±0,63 e 0,75±0,50, respectivamente. 43/61 (89,58%) pacientes faziam uso de drogas relacionadas às alterações de paladar, em maior número para o grupo I. A avaliação subjetiva do paladar mostrou que 15 (24,6%) pacientes estavam com paladar mais sensível, e 22 (36,1%), menos sensível após o TCPH. Essas alterações de sensibilidade do paladar estavam associadas à presença de náusea (p= 0,03), alteração de olfato (p= 0,05), sensação de gosto anormal na boca (p= 0,03) e ao uso de medicações (p= 0,03). A avaliação objetiva do paladar mostrou que não houve diferença entre os grupos para a percepção dos sabores amargo e azedo. Os 3 grupos tiveram dificuldade para a discriminação do sabor da concentração fraca de cafeína e grupo I apresentou melhor percepção da intensidade fraca e forte da sacarose (p= 0,04 e p= 0,05). Para a concentração forte da sacarose e média da NaCl, os grupos II e III tiveram melhor percepção destas soluções (p= 0,08). Na avaliação salivar 42 (68,9%) pacientes apresentaram aderência da espátula de madeira à mucosa jugal, 35 (57,4%) ausência de lago salivar sublingual, 26 (42,6%) espessamento salivar e 26 (42,6%) ausência de secreção salivar à estimulação manual dos ductos das parótidas. Estas condições foram correlacionadas com a presença de DECHc oral e xerostomia (p=0,02). O fluxo salivar estava diminuído em 10 (16,4%) pacientes (0.01-1.35- SD 0.296), e hiposalivação foi mais intensa nos grupos II/III (p=0,007). Os resultados indicaram que as alterações de paladar foram observadas somente para os sabores: doce e salgado, nos pacientes com até 3 anos após TCPH. Não foi encontrado correlação dessas alterações com a condição da saúde oral, DECHc oral, hiposalivação. Portanto, as alterações de paladar podem ser consideradas como uma resposta individual do paciente ao TCPH. Palavras chaves: transplante alogênico, percepção do paladar, saliva. forte da sacarose e média da NaCl, os grupos II e III tiveram melhor percepção destas soluções (p= 0,08). Na avaliação salivar 42 (68,9%) pacientes apresentaram aderência da espátula de madeira à mucosa jugal, 35 (57,4%) ausência de lago salivar sublingual, 26 (42,6%) espessamento salivar e 26 (42,6%) ausência de secreção salivar à estimulação manual dos ductos das parótidas. Estas condições foram correlacionadas com a presença de DECHc oral e xerostomia (p=0,02). O fluxo salivar estava diminuído em 10 (16,4%) pacientes (0.01-1.35- SD 0.296), e hiposalivação foi mais intensa nos grupos II/III (p=0,007). Os resultados indicaram que as alterações de paladar foram observadas somente para os sabores: doce e salgado, nos pacientes com até 3 anos após TCPH. Não foi encontrado correlação dessas alterações com a condição da saúde oral, DECHc oral, hiposalivação. Portanto, as alterações de paladar podem ser consideradas como uma resposta individual do paciente ao TCPH. / Abstract: Patients submitted to allogeneic Hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) complain of loss or a change in taste perception and dry mouth. The aim of this study was to evaluate taste perception and salivary flow rate in three different groups of adults patients submitted to HSCT at the BMT Unit/UNICAMP. Patients were classified in three groups considering post-transplant timing. Group I (n= 20), up to 150 days after HSCT, Group II (n= 20), between 151-1094 days, and Group III (n= 21), above 1094 days. Taste acuity was measured with a questionnaire, and also by the taste thresholds for the four basic tastes using 5ml of 4 solutions, in 3 concentrations NaCl, sucrose, citric acid, caffeine. Hyposalivation was clinically evaluated by visual parameters, and, unstimulated saliva was collected. Statistical analysis was performed using parametric and non-parametric tests. From those 61 evaluated patients, 31 presented cGVHD (Graft Versus Host Disease) and oral cGVHD was more presented in Groups II/III. Oral health Results showed a median value of DMFT index was 22±7.94 and the median value of IP and IG indexes were respectively, 1.0±0.63 e 0.75±0.50. From the 61 patients 43 (89.58%), were regularly taking prescribed medications with a recognized influence on taste perception, especially those from grupo I. At the survey, 15 (24.6%) reported a subjective increase of taste perception, whereas 22 patients (36.1%), described a decrease in taste perception after HSCT. Those taste sensitivity's alterations were correlated to the presence of nausea (p= 0.03), changes in olfaction (p= 0.05), abnormal taste in oral cavity (p= 0.03) and to the use of drugs (p= 0.03). Results of taste thresholds showed that the sour and bitter perception was not different between the 3 groups. For the sweet solution, the high and low concentrations were a challenging to be determined for those patients. Perception for a medium concentration of salty solutions was better perceived by groups II and III (p= 0.08). None patients were sensitive for the low concentration of bitter solution (p=0.05), in any period of study. Salivary clinical evaluation showed that, 42 (68.9%) patients presented adherence of a wood spatula to the buccal mucosa, 35 (57.4%) absence of the sublingual lake, 26 (42.6%) mucous saliva and 26 (42.6%) lack of salivation on palpation of the Parotid's ducts. Those conditions were correlated to oral cGVHD and to the patients complain of xerostomia (p= 0.02). The saliva flow rate was diminished in 10/61 patients in all periods (1.36 (0.01-1.35- SD 0.296) and hyposalivation was more intense in the Groups II/III (p= 0.007). The results indicate that, taste alterations were only observed for the sweet and salty tastes even in patients up to 3 years post-HSCT. These results may indicate that taste alterations post-HSCT are not correlated to oral health, cGVHD and to hyposalivation but may be considered as an individual response of the HSCT. / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica
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Expressão de genes de arroz homólogos a genes de arabidopsis relacionados à produtividade de grão / Homologous genes expression in rice related to yield in arabidopsis

Oliveira, João Augusto Vieira de 06 August 2015 (has links)
Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-12-20T19:25:22Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - João Augusto Vieira de Oliveira - 2015.pdf: 2197476 bytes, checksum: a0f442732e28ba900f7bc82946206efa (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-12-26T14:15:33Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - João Augusto Vieira de Oliveira - 2015.pdf: 2197476 bytes, checksum: a0f442732e28ba900f7bc82946206efa (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-26T14:15:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - João Augusto Vieira de Oliveira - 2015.pdf: 2197476 bytes, checksum: a0f442732e28ba900f7bc82946206efa (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-08-06 / Evidences indicate that by 2030 an increase in 40% of rice production is necessary so that it can meet the demand of the world population. The aim of this study was to quantify the expression of rice genes homologs to Arabidopsis genes previously related to yield (RUBISCO, AVP1, DA1 and TOR) by RT-qPCR analysis. The genotypes used in the study were the upland rice cultivars BRSMG Curinga and Primavera, and the old variety Douradão, which were evaluated in a yield experiment under two soil fertility levels, in a factorial scheme, in completely randomized design with two replications. Plant tissue samples were collected in vegetative and reproductive stages, which were used for total RNA isolation and subsequent cDNA syntheses. The cDNA was then subjected to RT-qPCR to evaluate the expression of four genes studied. Significant differences were observed in the expression of RUBISCO gene in leaves of upland rice plants in the vegetative stage, where there was a higher expression in high-level fertility in the soil, while in the reproductive stage, there was a higher expression in the low fertility treatment. DA1 that negatively regulates cell proliferation was less expressed in the vegetative stage in the treatment with high level of fertility, suggesting the suppression of this gene. AVP1 was more expressed in the reproductive stage, probably in order to increase the availability of P in a fundamental phase for the formation of the grain. TOR was the most expressed gene in this work, with a greater expression in adequate conditions of fertility, confirming its action under favorable conditions of cultivation. This study indicates that even two species that diverged over 120 million years have conserved productivity related metabolic routes. Thus, genes previously studied and validated in the model species Arabidopsis and that are of interest to economically important crops such as rice, may be the starting point for the development of cultivars with higher performance and better agronomic traits. / Evidências indicam que, até 2030, será necessário um aumento em 40% da produção de arroz para que ele possa atender a demanda da população mundial. O objetivo desse estudo foi quantificar a expressão de genes de arroz homólogos a genes de Arabidopsis anteriormente relacionados à produtividade (RUBISCO, AVP1, DA1 e TOR) por meio da análise de RT-qPCR. Os genótipos usados no estudo foram as cultivares de arroz de sequeiro BRSMG Curinga e Primavera, e a cultivar antiga Douradão, as quais foram avaliadas em um experimento de rendimento sob dois níveis de fertilidade do solo, em esquema fatorial, em delineamento experimental inteiramente casualizado, com duas repetições. Amostras de tecido foliar foram coletadas nas fases vegetativa e reprodutiva, que foram utilizadas para o isolamento de RNA total e posterior síntese de cDNA. O cDNA foi, em seguida, submetido à RT-qPCR para avaliar a expressão dos quatro genes estudados. Foram observadas diferenças significativas na expressão do gene RUBISCO (Ribulose bifosfato Carboxilase/Oxigenase) em folhas de plantas de arroz de terras altas no estádio vegetativo, em que houve uma maior expressão em solo com fertilidade recomendada, enquanto que na fase reprodutiva, houve uma maior expressão no tratamento de baixa fertilidade. DA1 (Receptor de Ubiquitina), que regula negativamente a proliferação celular foi menos expresso no estádio vegetativo, no tratamento com elevado nível de fertilidade, sugerindo a supressão deste gene. AVP1(Arabidopsis Vacuolar Pirofosfatase) foi mais expresso no estádio reprodutivo, provavelmente para aumentar a disponibilidade de P em uma fase fundamental para a formação do grão. TOR (Alvo de rapamicina) foi o gene com maior nível de expressão, principalmente no solo com maior nível de fertilidade, confirmando sua ação em condições favoráveis de cultivo. Esse estudo indica que mesmo duas espécies que divergiram mais de 120 milhões anos, como é o caso de Arabidopsis e arroz, têm conservadas rotas metabólicas relacionadas à produtividade. Assim, os genes previamente estudados e validados na espécie modelo Arabidopsis e que são de interesse para as culturas economicamente importantes, como o arroz, podem ser o ponto de partida para o desenvolvimento de cultivares com maior desempenho e melhores características agronômicas.
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Protocolo de captação, processamento e transplante de enxertos osteocondrais homólogos a fresco na articulação do joelho / Protocol of procurement, processing and transplantation of fresh osteochondral allografts in the knee joint

Luís Eduardo Passarelli Tirico 07 April 2015 (has links)
O tratamento das lesões condrais e osteocondrais do joelho em pacientes jovens ainda permanece um desafio para os médicos ortopedistas. As técnicas de reparo destas lesões atualmente disponíveis no Brasil, como desbridamento, microfraturas e transplante osteocondral autólogo são insuficientes nos tratamentos das lesões condrais e osteocondrais maiores do que 4 cm2. O transplante osteocondral homólogo a fresco (TOF) na articulação do joelho vem sendo usado em outros países com excelentes resultados. Até o presente momento não existem relatos da utilização desta técnica no Brasil, fato que dificulta o tratamento de pacientes jovens ativos que necessitam de reparo biológico. Foram incluídos neste estudo oito pacientes de 15 a 45 anos portadores de lesões osteocondrais maiores que 4 cm2. Os enxertos a fresco foram obtidos de doadores de órgãos, sendo a articulação do joelho captada sem violação da cápsula articular e transportada ao Banco de Tecidos para processamento. O pareamento doador e receptor foi realizado conforme o tamanho, a localização e a prioridade em lista de espera de acordo com os tecidos captados, sendo os mesmos armazenados no meio de preservação Ham F-12 - GIBCO com glutamax (Invitrogen, Life Technologies, Estados Unidos) e com antibióticos. O procedimento cirúrgico foi realizado pelas técnicas de cilindro osteocondral e de superfície, sendo fixados quando necessário. Os pacientes foram avaliados através dos questionários de IKDC objetivo, IKDC subjetivo, KOOS e índice de Merle D\'Aubigne e Postel modificado. Foram realizados oito TOFs de março a outubro de 2012. A média de idade dos pacientes transplantados foi de 30,1 anos (17- 44 anos) e a média da área transplantada foi de 10,6 cm2 (4,6 - 22,4 cm2). O intervalo médio em dias entre captação e transplante foi de 15,3 (14 - 16 dias) e o número médio de cirurgias prévias ao TOF foi de 2 cirurgias (0-4 cirurgias). A pontuação na escala de IKDC objetiva no pré-operatório foi B em 12%, C em 25% e D em 63% dos pacientes; e 12% A e 88% B aos 18 meses de pós-operatório. A média da pontuação da escala IKDC subjetiva pré-operatória foi de 31,99 ± 13,4 e de 81,84 ± 9,25 em 18 meses de pós-operatório, e da escala KOOS pré-operatória foi de 46,8 ± 20,9 e de 89,58 ± 7,06 em 18 meses de pós-operatório, com melhora significativa ao longo do tempo (p < 0,01) pela análise da variância. A média da pontuação pelo índice de Merle D\'Aubigne e Postel modificado foi de 8,75 ± 2,25 no pré-operatório e de 16,75 ± 2,19 em 18 meses de pós-operatório. O resultado do teste de Friedman para amostras não-paramétricas demonstrou melhora significativa ao longo do tempo (p < 0,01). A padronização da captação, processamento e transplante de enxertos osteocondrais a fresco na articulação do joelho depende de um banco de tecidos altamente especializado e leva a excelentes resultados no tratamento de lesões osteocondrais grandes, sendo atualmente uma boa alternativa de tratamento biológico para pacientes jovens no Brasil / Treatment of chondral and osteochondral lesions of the knee in young patients is still a challenge for Orthopedic Surgeons. The techniques available nowadays in Brazil, as debridement, microfracture and autologous osteochondral transplantation are insufficient for the treatment of chondral and osteochondral lesions larger than 4 cm2. Fresh osteochondral allografts on the knee joint have been used in other countries with great success. Until the present days there are no reports of the utilization of this technique in Brazil, a fact that creates boundaries for the treatment of young active patients that need cartilage repair treatment. Eight patients with age ranging from 15 to 45 years old and osteochondral lesions larger than 4 cm2 were included in this study. Fresh grafts were obtained from organ donors and the knee joint was harvest without violation of synovium capsule and then was transported to the tissue bank for processing. Donor and receptor tissue matching occurred according to size, localization and priority on waiting list and tissue was preserved in Ham F-12 - GIBCO media with glutamax (Invitrogen, Life Technologies, United States) and antibiotics. Surgical procedure was achieved with osteochondral plugs or shell techniques, with additional fixation when needed. Patients were evaluated with IKDC objective, IKDC subjective, KOOS and modified Merle D\'Aubigne-Postel outcome scores. Eight fresh osteochondral allografts were performed from march to october, 2012. The average age was 30.1 years old (17-44) and mean graft surface area was 10.6 cm2 (4.6 - 22.4 cm2). Average time from harvest to transplantation was 15.3 days (14-16 days) and mean number of previous surgical procedures was 2 (0 - 4 procedures). Pre-operative objective IKDC score was B in 12%, C in 25% and D in 63% and was A in 12% and B in 88% in 18 months follow-up. Pre-operative IKDC subjective and KOOS score were 31.99 ± 13.4 and 46.8 ± 20.9; and in 18 months follow-up were 81.84 ± 9.25 and 89.58 ± 7.06, respectively, with a significant increase along time on variance analysis (p < 0.01). Pre-operative mean modified Merle D\'Aubigne-Postel scores were 8.75 ± 2.25 and 16.75 ± 2.19 in 18 months follow-up. Non-parametric Friedman test analysis showed a significant progression in follow-up (p < 0.01). Standards of procurement, processing and utilization of fresh osteochondral allografts in the knee joint relay on a high specialized tissue bank and promote excellent results on the treatment of large osteochondral lesions, being a good alternative of a biologic repair for young patients in Brazil

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