Em bovinos, o desenvolvimento embrionário é caracterizado pelo surgimento de duas camadas de células distintas, o trofectoderma e a massa celular interna. Esta última sofrerá diferenciação para formar o disco embrionário constituído pelo epiblasto e hipoblasto. Os trabalhos de caracterização morfológica do epiblasto e hipoblasto em bovinos são necessários uma vez que podem ajudar a elucidar as causas de perdas gestacionais, principalmente nos casos de embriões derivados de produção in vitro. Assim, o objetivo deste estudo foi caracterizar ultraestruturalmente o embrião bovino em diferentes fases do desenvolvimento com ênfase nas células do hipoblasto. Para isso, os embriões bovinos com 7, 14 e 16 dias de gestações derivados de técnicas de produção in vitro foram fixados para processamento e realização de microscopia eletrônica de transmissão. De acordo com os resultados obtidos observou-se que os embriões derivados de transferência nuclear de células somáticas e de partenogênese apresentaram grandes modificações na estrutura macro e microscópica. Nestes embriões, o tamanho estava reduzido, a massa celular interna não se apresentou de forma definida. Além disso, as organelas destes embriões, responsáveis por processos de absorção, comunicação, crescimento e metabolismo celular estavam em menor quantidade e tinham modificações quanto à forma, quando comparados aos resultados vistos nos embriões derivados de fertilização in vitro. Assim, verificamos que os blastocistos D7 derivados de transferência nuclear e partenogênese apresentaram graves modificações morfológicas, assim como verificou-se também nas células do hipoblasto dos embriões D14 e D16. / In cattle, the embryo development is characterized by the apperance of two distinct cell layers, the trophectoderm and the inner cell mass. This latter one will siffer a differentiation to form the embryonic disc constituted by the epiblasto and hypoblast. The works on the morphological characterization of the epiblasto and hypoblast in cattle are needed because they may help to elucidate the causes of pregnancy loss, especially in cases of embryos derived from in vitro production. Considering this, the objective of this study was to characterize ultrastrcturally the bovine embryo at different stages of development with emphasis on the hypoblast cells. To do so, bovine embryos at 7, 14 and 16 days of pregnancies derived from in vitro production techniques were fixed for processing and performing transmission electron microscopy. According to the results observed that embryos derived from the nuclear transfer of somatic cells and from parthenogenesis showed significant changes in the macroscopic and microscopic structure. In these embryos, the size was reduced, the inner cell mass has not show a defined shape. Furthermore, the organelles from such embryos, responsible for the absorption processes, communication, growth and cellular metabolism were fewer in number and have changes in shape, when compared to the results seen in embryos derived from in vitro fertilization. Thus, we observed that the blastocyst D7 derived from nuclear transfer and from the parthenogenesis, showed severe morphological changes, as well as for the hypoblastic cells in the D14 and D16 embryos.

O diagnóstico das lesões incipientes de erosão em esmalte é difícil de ser realizado e, em situações clínicas, poderá ocorrer a colagem de braquetes em superfícies erodidas. Este trabalho in vitro avaliou a adesão de braquetes ortodônticos ao esmalte dentário bovino hígido e previamente erodido, utilizando dois materiais para colagem. Os fatores em estudo foram condição prévia do esmalte em 2 níveis (com e sem erosão) e tipo de material de colagem em 2 níveis (Transbond XT e Fuji Ortho LC). A amostra foi composta por 160 coroas de incisivos bovinos, sendo metade dela submetida a desafio erosivo para formação de lesões artificiais de erosão e a outra metade permaneceu hígida. Na ciclagem erosiva as coroas foram imersas 8X/dia em Coca-cola® (10 min), seguido da imersão em saliva artificial (2 h), durante 5 dias. A outra metade da amostra ficou em saliva artificial por 5 dias. Braquetes de incisivo central superior foram colados às coroas hígidas (H) e erodidas (E), seguindo orientações dos fabricantes de cada material. As variáveis de resposta foram resistência ao cisalhamento e índice de remanescente adesivo (IRA). Os dados de resistência ao cisalhamento foram analisados por ANOVA 2 critérios e Teste de Tukey (p<0,05). Os resultados, expressos em megapascal, não mostraram diferenças na resistência ao cisalhamento entre esmalte erodido e hígido, tanto no grupo colado com resina (RH = 15,25 +3,72; RE = 15,79 +4,41) quanto colado com ionômero (IH = 10,70 +3,73; IE = 11,26 +3,70). A resina apresentou resistência à colagem superior ao ionômero. Na comparação do índice de remanescente adesivo, por meio do teste de Mann Whitney, o esmalte erodido apresentou valores mais altos para o IRA, evidenciando uma maior quantidade de material remanescente no esmalte, tanto no grupo colado com resina (p=0,044) quanto com ionômero (p<0,001). Conclui-se que a presença da lesão de erosão não interfere na resistência ao cisalhamento de braquetes colados ao esmalte tanto com resina quanto com cimento de ionômero de vidro. No entanto, independentemente do material de colagem, o índice de remanescente adesivo evidenciou uma maior adesão ao esmalte com erosão. / The diagnosis of initial erosion lesions on enamel is difficult and in some clinical situations, the professional bonds brackets to eroded surfaces without noting.This in vitro study evaluated the bond strength of orthodontic brackets bonded to eroded and sound bovine enamel with two different materials. The factors under study were enamel condition in two levels (with and without erosion) and type of bonding material in two levels (Transbond® XT and Fuji Ortho LC). The sample consisted of 160 bovine lower incisor teeth, half of the specimens was subjected to erosive challenge to form artificial erosive lesions and the other half remained sound. In the erosive cycling tooth crowns were immerged 8x/day in Coca-cola® (10 min), followed by immersion in artificial saliva for (2 h), for 5 days. The other half of the sample was maintained in artificial saliva for 5 days. At sequence, brackets were bonded to eroded (E) and sound (S) enamel, according to manufacturing recommendations of each material. The response variables were shear bond strength and adhesive remnant index (ARI). Shear bond strength data were analyzed by Two-way ANOVA and Tukeys test (p<0,05). The results, expressed in megapascal, did not show any difference between eroded and sound enamel, in both composite resin (RS = 15,25 +3,72; RE = 15,79 +4,41) and glass ionomer (IS = 10,70 +3,73; IE = 11,26 +3,70) groups. Composite resin showed higher shear bond strength compared to glass ionomer cement. In the comparison of adhesive remnant index using Mann Whitney test, eroded enamel presented higher scores for ARI, showing greater amount of material remaining on enamel, in both resin (p=0,04) and ionomer (p<0,001) groups. It was concluded that the presence of erosion lesions did not interfere on shear bond strength of brackets bonded to enamel with composite resin or glass ionomer cement. However, independently of the bonding material, adhesive remnant index showed higher bond strength to eroded enamel.

Não consta resumo na publicação. / Abstract not available.

Ao longo da história da humanidade, os produtos naturais oriundos de plantas, vêm sendo investigados e utilizados no tratamento de inúmeras doenças. Os alcaloides do gênero Corydalis, do tipo tetrahidroprotoberberina e, em especial a govaniadina, foram identificados como uma nova categoria de ligantes dopaminérgicos e responsáveis por atividades analgésica, antimalárica, leishmanicida e antiurease. A partir destes dados, objetivou-se investigar o perfil farmacocinético, o metabolismo e a permeabilidade intestinal in vitro do alcaloide govaniadina. Como resultado geral para o metabolismo in vitro, empregando fração microssomal animal e humana, foram obtidos cinco metabólitos: um O-desmetilado (M1); um di-hidroxilado (M2); um mono-hidroxilado (M3) e dois glicuronidados (M4 e M5). Um método por CLUEEM/ EM foi desenvolvido e validado para investigação do perfil farmacocinético da govaniadina em plasma de ratos, após a administração intravenosa. A análise das curvas de decaimento plasmático versus tempo de coleta indicam que os dados se ajustam ao modelo bicompartimental, com meia-vida de distribuição = 9,2 ± 8,9 min, clearance = 41,7 ± 30,4 mL min-1 kg-1 e meia-vida de eliminação = 55,1 ± 37,9 min. Com relação aos estudos de viabilidade celular, a govaniadina apresentou efeitos citotóxicos moderados frente às linhagens celulares Hep G2, HeK-T-293 e CCFSTTG1 em concentrações até 100 ?mol L-1. Estudo de permeabilidade intestinal in vitro em modelo Caco-2, sugere transporte por difusão passiva, com coeficiente de permeabilidade aparente de 20,6 ± 3,9 × 10-6 cm/s e taxa de efluxo de 0,55. Estes resultados serão importantes para direcionar os experimentos futuros no que tange ao desenvolvimento farmacêutico da govaniadina / Throughout humankind history, natural products from plants have been investigated and have been used in the treatment of countless diseases. Tetrahydroprotoberberine alkaloids from the Corydalis, in particular govaniadine, has been identified as a new category of dopaminergic ligands and responsible for analgesic, antimalarial, leishmanicidal and antiurease properties. Taking these data into account, the aim of this work was to investigate the pharmacokinetic profile, the in vitro metabolism and the intestinal permeability of the alkaloid govaniadine. As a general result for the in vitro metabolism, employing animal and human microsomal fraction, five metabolites were obtained: one O-demethylated (M1); one dihydroxylated (M2); one monohydroxylated (M3) and two glucuronidated (M4 and M5). A LC-MS/MS method was developed and validated for the investigation of the govaniadine pharmacokinetic profile in rat plasma following intravenous administration. The mean plasma concentration versus time profile was best fitted to a two-compartmental model, with a distribution half-life = 9.2 ± 8.9 min, clearance = 41.7 ± 30, 4 mL min-1 kg-1 and an elimination half-life = 55.1 ± 37.9 min. Regarding cell viability studies, govaniadine showed moderate cytotoxic effects against Hep G2, HeK-T-293 and CCF-STTG1 cell lines at concentrations up to 100 ?mol L-1. In vitro intestinal permeability study in Caco-2 model, suggests passive diffusion transport, with an apparent permeability value of 20.6 ± 3.9 × 10-6 cm/s and an efflux rate of 0.55 . These results will be important to guide future experiments concerning govaniadine pharmaceutical development

O diagnóstico das lesões incipientes de erosão em esmalte é difícil de ser realizado e, em situações clínicas, poderá ocorrer a colagem de braquetes em superfícies erodidas. Este trabalho in vitro avaliou a adesão de braquetes ortodônticos ao esmalte dentário bovino hígido e previamente erodido, utilizando dois materiais para colagem. Os fatores em estudo foram condição prévia do esmalte em 2 níveis (com e sem erosão) e tipo de material de colagem em 2 níveis (Transbond XT e Fuji Ortho LC). A amostra foi composta por 160 coroas de incisivos bovinos, sendo metade dela submetida a desafio erosivo para formação de lesões artificiais de erosão e a outra metade permaneceu hígida. Na ciclagem erosiva as coroas foram imersas 8X/dia em Coca-cola® (10 min), seguido da imersão em saliva artificial (2 h), durante 5 dias. A outra metade da amostra ficou em saliva artificial por 5 dias. Braquetes de incisivo central superior foram colados às coroas hígidas (H) e erodidas (E), seguindo orientações dos fabricantes de cada material. As variáveis de resposta foram resistência ao cisalhamento e índice de remanescente adesivo (IRA). Os dados de resistência ao cisalhamento foram analisados por ANOVA 2 critérios e Teste de Tukey (p<0,05). Os resultados, expressos em megapascal, não mostraram diferenças na resistência ao cisalhamento entre esmalte erodido e hígido, tanto no grupo colado com resina (RH = 15,25 +3,72; RE = 15,79 +4,41) quanto colado com ionômero (IH = 10,70 +3,73; IE = 11,26 +3,70). A resina apresentou resistência à colagem superior ao ionômero. Na comparação do índice de remanescente adesivo, por meio do teste de Mann Whitney, o esmalte erodido apresentou valores mais altos para o IRA, evidenciando uma maior quantidade de material remanescente no esmalte, tanto no grupo colado com resina (p=0,044) quanto com ionômero (p<0,001). Conclui-se que a presença da lesão de erosão não interfere na resistência ao cisalhamento de braquetes colados ao esmalte tanto com resina quanto com cimento de ionômero de vidro. No entanto, independentemente do material de colagem, o índice de remanescente adesivo evidenciou uma maior adesão ao esmalte com erosão. / The diagnosis of initial erosion lesions on enamel is difficult and in some clinical situations, the professional bonds brackets to eroded surfaces without noting.This in vitro study evaluated the bond strength of orthodontic brackets bonded to eroded and sound bovine enamel with two different materials. The factors under study were enamel condition in two levels (with and without erosion) and type of bonding material in two levels (Transbond® XT and Fuji Ortho LC). The sample consisted of 160 bovine lower incisor teeth, half of the specimens was subjected to erosive challenge to form artificial erosive lesions and the other half remained sound. In the erosive cycling tooth crowns were immerged 8x/day in Coca-cola® (10 min), followed by immersion in artificial saliva for (2 h), for 5 days. The other half of the sample was maintained in artificial saliva for 5 days. At sequence, brackets were bonded to eroded (E) and sound (S) enamel, according to manufacturing recommendations of each material. The response variables were shear bond strength and adhesive remnant index (ARI). Shear bond strength data were analyzed by Two-way ANOVA and Tukeys test (p<0,05). The results, expressed in megapascal, did not show any difference between eroded and sound enamel, in both composite resin (RS = 15,25 +3,72; RE = 15,79 +4,41) and glass ionomer (IS = 10,70 +3,73; IE = 11,26 +3,70) groups. Composite resin showed higher shear bond strength compared to glass ionomer cement. In the comparison of adhesive remnant index using Mann Whitney test, eroded enamel presented higher scores for ARI, showing greater amount of material remaining on enamel, in both resin (p=0,04) and ionomer (p<0,001) groups. It was concluded that the presence of erosion lesions did not interfere on shear bond strength of brackets bonded to enamel with composite resin or glass ionomer cement. However, independently of the bonding material, adhesive remnant index showed higher bond strength to eroded enamel.

Orientadores: Ricardo Barini, Isabela Nelly Machado / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-11-27T10:51:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Klimesch_Yvonne_M.pdf: 1424571 bytes, checksum: a70b152ae87de0a973c2d34af4320957 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Introdução: As altas taxas de falha de implantação embrionária vêm sendo uma das principais causas no insucesso dos ciclos de fertilização in vitro. A incompatibilidade imunológica entre o embrião e a decídua materna gera uma ineficiência na produção de anticorpos bloqueadores com um aumento no predomínio de citocinas do tipo Th1 que são prejudiciais ao processo da gestação. A imunoterapia com linfócitos paternos surge como tratamento adjuvante com a função de reverter essa alteração imunológica para um predomínio do tipo Th2 favorecendo assim a tolerância imunológica permitindo a implantação embrionária e posterior desenvolvimento gestacional aumentando as taxas nos ciclos de fertilização assistida. Objetivos: Avaliar o tratamento de imunização com linfócitos paternos, os resultados maternos fetais e perinatais dos casais que tiveram falhas de implantação em ciclos de fertilização in vitro (FIV/ICSI). Materiais e métodos: Através de busca ativa pelos prontuários médicos foram incluídos no estudo 52 casais que apresentavam pelo menos duas falhas nos ciclos de fertilização previamente a imunoterapia. A imunização com linfócitos paternos foi administrada via intradérmica a cada 21 dias, totalizando 3 doses. Após 3 semanas da última dose realizou-se o teste de crossmatch, cujo percentual aceito é superior a 75% para ser considerado positivo e assim indicando a sensibilização da paciente com antígenos de histocompatibilidade do esposo. Resultados: Dos 52 casais incluídos no estudo, 20 casais não conseguiram uma gestação e 32 casais conseguiram uma gestação. No grupo que engravidou, a taxa de gravidez clínica foi de 61,5% (32/52) e a taxa de gravidez viável foi de 57,7% (30/52). Das 32 gestações, 30 evoluíram para parto e duas evoluíram para aborto de primeiro trimestre. A taxa de prematuridade foi de 53%. Conclusão: A imunoterapia com linfócitos paternos pode aumentar as taxas de gestação em mulheres que tiveram falhas prévias nos ciclos de fertilização assistida / Abstract: Introduction: High rates of embryo implantation failures have been a major cause of failure in IVF cycles. The immunological incompatibility between the embryo and the maternal decidua produces inefficiency in the production of blocking antibodies with an increase in the predominance of Th1-type cytokines that are detrimental to the process of gestation. Immunotherapy with paternal lymphocytes appears as adjuvant treatment with immune function reverse this change to a predominance of Th2 thus promoting immune tolerance allowing embryonic development and subsequent gestational increasing implantation rates in assisted fertilization cycles.Objective: To evaluate the treatment of immunization with paternal lymphocytes, fetal and perinatal maternal outcomes of couples who had implantation failure in in vitro fertilization cycles (IVF / ICSI). Material and Methods: Through active search for medical records were included in the study 52 couples with at least two flaws in fertilization cycles prior to immunotherapy. The immunization with paternal lymphocytes was administered intradermic every 21 days, totaling 3 doses. 3 weeks after the last dose was held for the crossmatch test, which is accepted percentage above 75% to be considered positive, thus indicating awareness of patient histocompatibility antigens husband.Results: Of the 52 couples in the study, 20 couples failed gestation and 32 couples achieved a pregnancy. In the group who became pregnant, the clinical pregnancy rate was 61.5% (32/52) and the viable pregnancy rate was 57.7% (30/52). Of the 32 pregnancies, 30 evolved into childbirth and two progressed to first trimester abortion. The prematurity rate was 53%.Conclusions: Immunotherapy with paternal lymphocytes can increase pregnancy rates in women who had previous failures in assisted fertilization cycles / Mestrado / Saúde Materna e Perinatal / Mestra em Ciências da Saúde

Orientador: Joaquim Mansano Garcia / Coorientador: Naiara Zoccal Saraiva / Banca: César Roberto Esper / Banca: Simone Cristina Méo Niciura / Resumo: Este estudo objetivou avaliar a influência do fluido folicular (FF) e da proteína recombinante humana GDF9 adicionados ao meio de maturação sobre a qualidade de embriões bovinos produzidos in vitro. Foram realizados três experimentos utilizando o meio TCM199 como meio básico de maturação. No primeiro experimento, os oócitos foram maturados em cinco diferentes meios (0%, 25%, 50%, 75% ou 100% de FF) em quatro tempos de maturação (22, 24, 26 ou 28 h). No segundo experimento, os oócitos foram maturados nos mesmos meios utilizados no primeiro experimento e fecundados em três diferentes tempos (24, 26 ou 28 h). No terceiro experimento, foram utilizados dois meios: controle (sem FF) ou com 25% de FF e quatro níveis de suplementação (0, 25, 100 ou 200 ng/mL) com GDF9. O FF promoveu retardo da progressão meiótica, afetando a maturação nuclear e a migração de grânulos corticais para a periferia dos oócitos. O FF em altas concentrações influenciou negativamente as taxas de clivagem e de blastocisto. O GDF9, com (25%) ou sem FF, não influenciou as taxas de clivagem e de blastocisto, no entanto, interferiu positivamente sobre o percentual de embriões considerados superiores. O percentual mais elevado (82,22%) de embriões classificados como superiores foi obtido com o uso de 200 ng de GDF9 em meio de maturação acrescido de 25% de FF. Em conclusão, a adição do fluido folicular (75% e 100%) ao meio de maturação in vitro retarda a progressão meiótica, sincronizando a maturação nuclear com a citoplasmática e a suplementação do meio de maturação com proteína recombinante humana GDF9 melhora a qualidade de embriões bovinos produzidos in vitro, baseando-se na avaliação da proporção do número de células da massa celular interna (MCI) em relação ao número total de células / Abstract: This study aimed to evaluate the effects of follicular fluid (FF) and recombinant human GDF9 added to the maturation media on the quality of in vitro produced bovine embryos. Three experiments using TCM199 medium as basic maturation media were performed. In the first experiment oocytes were matured in five different media (0%, 25%, 50%, 75% or 100% of FF) during four maturation times (22, 24, 26 or 28 h). In the second experiment, the oocytes were matured in the same five media used in the first experiment and fertilized at three different times (24, 26 or 28 h). In the third experiment were used two media: control (without FF) or with 25% FF combined with four levels of supplementation (0, 25, 100 or 200ng/mL) with GDF9. The FF promoted delay of the meiotic progression, affecting nuclear maturation and cortical granules migration to the oocyte periphery. In addition FF influenced the cleavage and blastocyst rates. GDF9, without or added to FF did not affect the cleavage and blastocyst rates, however, a positive influence on the percentage of embryos considered superior was observed. The highest percentage (82.22%) of embryos considered superior was obtained with maturation media added with 25% of FF and supplemented with 200 ng of GDF9. In conclusion, addition follicular fluid (75% and 100%) to the in vitro maturation media delays meiotic progression, synchronizing nuclear to cytoplasmic maturation, and supplementation of maturation media with recombinant human GDF9 improves the quality of bovine embryos in vitro produced, based on inner cell mass cells (ICM) proportion, relative to the total cell number / Mestre

Este trabalho pretende avaliar o efeito da salinomicina no consumo de feno coast cross e sal proteinado, na digestibilidade total, ruminal in situ e in vitro, taxas de produção de gases e taxas de fermentação. Para a avaliação da digestibilidade e degradabilidade in situ foram utilizados 4 novilhos Holandeses com peso médio de 350 kg ± 43 kg. O delineamento experimental utilizado foi o quadrado latino com 4x4. No ensaio in vitro foram utilizados 4 substratos *8 inóculos *2 corridas com delineamento em blocos e arranjo fatorial. Os tratamentos estudados foram: 0; 0,1; 0,2; 0,3 mg de salinomicina /kg de peso vivo. Não foram encontradas diferenças significativas (p>0,05) no consumo de MS(1,92; 1,73; 1,60; 1,63 %PV), digestibilidade aparente da MS (81,79; 80,32; 80,32 e 80,49), na degradação in situ da MS (52; 51,25; 49,20 e 51,38) e na degradação in vitro da MS (45,31; 45,64; 45,77; 45,03) entre os vários tratamentos. Os únicos parâmetros onde foram identificadas alterações significativas entre os tratamentos foram no volume final de gases in vitro e nas curvas de taxas de fermentação. Os valores encontrados de para o volume final de gases foi de 231,8; 204; 168 e 157,78 ml /g de MS para a dose de 0; 0,1; 0,2 e 0,3 mg de salinomicina/ kg de PV, respectivamente. O tratamento 3 foi o que teve menores perdas de energia. / This experiment was conducted to evaluate the effect of graded levels of salinomycin on feed intake, apparent di estibility, gas production and fermentation rate, degradability in situ and in vitro of cynodon hay supplemented with proteic salt with 0, 0.1, 0.2 and 0,3mg of salynomicin per kg LW. Intake , digestibility and degradabilty studies were analysed as a latine square design 4x4 and in vitro trials followed the block randomized design with a two factors (inocula and substrate). No differences (p>)0,05) were found between the treatments for DM intake (1.92, 1.73, 1.60, 1.63 per % LW), DM digestibility (81.79, 80.32, 80.32 and 80.49), DM in situ degradability (52, 51.25, 49.20 and 51.38) and in vitro DM degradability (45.31, 45.64, 45.77 and 51.38). Differences between treatments were found only for potencial gas production in vitro (231.8, 204, 168 and 157.78 ml/g DM) for 0, 0.1, 0.2 and 0,3 mg of salinomycin/kg LW. Therefore, wasting energy was minimized at treatment 3.

O desenvolvimento da técnica de transferência embrionária no oviduto mediante videolaparoscopia e a avaliação de produtividade da punção folicular laparoscópica (LOPU) associada à transferência embrionária laparoscópica e/ou por laparotomia videoassistida, ambas no oviduto, foram os objetivos do presente trabalho. Foram utilizados 53 animais, sendo as punções foliculares para obtenção dos oócitos realizadas em 9 ovelhas adultas estimuladas hormonalmente, chamadas doadoras. Os oócitos foram obtidos através de LOPU repetidamente com intervalo mínimo de um mês entre os procedimentos nas mesmas doadoras. Os oócitos puncionados foram maturados, fertilizados e mantidos em cultivo por até três. Os embriões clivados foram transferidos no segundo dia após a fertilização in vitro (FIV) em ovelhas receptoras com cio sincronizado. A transferência dos embriões (TE) foi realizada primeiramente em 10 receptoras por laparoscopia e em 34 receptoras por laparotomia videoassistida, sendo esta última dividida em duas etapas cronológicas. Para a realização da TE por videolaparoscopia, foi introduzido, inicialmente, um trocarte de 5 mm na linha média ventral próximo à glândula mamária para passagem da óptica. Um segundo portal, crânio-lateral ao primeiro, foi criado para introdução de pinça de manipulação de ovário. Confirmada a existência de corpo lúteo (CL) em um dos ovários, um trocarte foi inserido no lado oposto a esse para passagem de cateter de Foley. Sua função foi auxiliar na exposição e abertura da fímbria. Um cateter urinário, contendo os embriões foi então introduzido na porção inicial do oviduto para deposição dos mesmos. Obteve-se 8 fetos resultantes da transferência por laparoscopia (10 receptoras), 10 fetos resultantes da primeira etapa da transferência por laparotomia (14 receptoras) e 30 fetos resultantes da segunda etapa da laparotomia (20 receptoras). A média de fetos por sessão de LOPU foi de 1 para transferência laparoscópica, 1,3 na primeira etapa da transferência por laparotomia e 3,3 na segunda etapa de laparotomia. A transferência embrionária videolaparoscópica de embriões clivados no oviduto mostrou resultado positivo na produção de fetos, podendo ser considerada técnica promissora. Quando associada à LOPU, a transferência embrionária no oviduto por laparoscopia / laparotomia videoassistida, apresentou resultados superiores aos relatados na literatura com a transferência intra-uterina de embriões FIV. / The development of the technique of embryo transfer in oviduct through video-assisted laparoscopy and the demonstration of productive association between laparoscopic follicle aspiration (LOPU) and embryonic transfer laparoscopy and / or open surgery (video-assisted laparotomy)both in oviduct was the goal of the work. From the 53 animals used in the study, follicular puncture was used to obtain oocytes from 9 adult ewes for super-ovulated with hormonally stimulation, referred to as the donors. The oocytes were obtained through repeated LOPU with minimum intervals of one month from the same donor. The retrieved oocytes were matured, fertilized with frozen semen and cultured in vitro for up to two days after IVF. The cleaved embryos were transferred on the second day after IVF into synchronized receptor ewes. The transfer of embryos was first done in 10 receptors through laparoscopy and then in 34 receptors through video-assisted laparotomy, the latter being divided into two chronological stages. For the development of ET by video-assisted laparoscopy, a 5mm trocar was initially introduced ventral midline near the mammary gland for passage of the laparoscope. A second portal, in a craniolateral position was used for passage of another 5 mm trocar for introduction of forceps to manipulate the ovary. After confirming the existence of CL in one of the ovaries, a trocar was inserted on the opposite side for passage of the Foley catheter, to assist in the exposure and opening of the fimbria. A urinary catheter, containing the embryo, was then introduced into the initial portion of the oviduct for deposition of the embryos. There were 8 fetuses resulting from the transfer by laparoscopy (10 receptors), 10 fetuses resulting from the first stage of the transfer by laparotomy (14 receptors) and 30 fetuses resulting from the second stage of the laparotomy (20 receptors). The average number of fetuses per session of LOPU was 1 for laparoscopic transfer, 1.3 for the first stage of the transfer by laparotomy and 3.3 in the second stage of laparotomy. The technique of embryo transfer through video-assisted laparoscopy with cleaved embryos in oviduct was thus shown to a positive fetus\'s result of production, and will be promising. When associated with LOPU, the transfer of embryos in oviduct by laparoscopy / video-assisted laparotomy presented better results then other authors when compare intrauterine IVF embryo transfer.

Magistro darbe tiriami tuopų genties medžių tarprūšiniai hibridai, jų morfologiniai ir genotipiniai skirtumai. Darbo objektas. Tuopų genties hibridinių medžių: Populus alba x Populus tremula (Nr. 21), P. tremuloides x P. tremula (Nr.3) bendri palikuonys. Darbo tikslas. Atlikti tuopų genties tarprūšinių hibridų palikuonių pirminį įvertinimą. Darbo metodai: hibridizacijos, audinių kultūrų, DNR žymenų, statistiniai, tyrimo duomenų analizės, testavimo, skaičiavimo. Darbo metodika. Hibridizacija atlikta laboratorijos sąlygomis – mot. P. alba × P. tremula × tėv. P. tremuloides × P. tremula. Mezginės su nesubrendusiais gemalais subrandinamos ir sudaiginamos naudojant 3 skirtingus maitinamųjų terpių variantus. Užauginami hibridų mikroūgliai ir adaptuojami aplinkos sąlygoms specialioje patalpoje (pirminė adaptacija). Po 6 mėnesių įvertinami adaptuotų hibridų kiekybiniai požymiai. Hibridiniai medeliai perkeliami auginti į medelyną lauko sąlygomis (antrinė adaptacija) ir po metų atliekamas fenotipinių požymių įvertinimas. Darbo rezultatai ir išvados. Gauti rezultatai rodo, kad didesnė koncentracija citokininų klasės fitohormono slopino gemalų organogenezę, kai tuo tarpu maitinamoji terpė be fitohormonų sudarė palankiausias sąlygas augalų pilnam išsivystymui pirmame kultivavimo etape. Tolimesni tyrimai parodė, kad 0,5 mg/l BA( Benzyladenino) teigiamai veikė gemalų ( nesudygusių pirmame etape) organogenezę tolimesniuose kultivavimo etapuose. Atlikti regenerantų aukščio matavimai, kurių... [toliau žr. visą tekstą] / In this research work the morphologic and genotypic differences of s were investigated. Research object. The common offsprings of hybrid poplar trees: Populus alba x Populus tremula (No. 21) and P. tremuloides x P. tremula (No. 3). Research aim. Primary assessment of the offsprings obtained after crossing of interspecific Populus hybrids. Research methods: hybridization, tissue culture, DNA markers, statistics, analysis of research data, testing, computation. Research proceedings. Hybridization of P. alba x P. tremula (maternal tree) x P. tremuloides x P. tremula (paternal tree) was done under laboratory conditions. The ovaries with immature embryos were maturated and germinated using 3 different variants of nutrient medium. The hybrid microshoots were grown and later adapted under environmental conditions in the special room (primary adaptation). After 6 months the quantitive features of adopted hybrids were estimated. Young hybrid trees were transferred to the nursery for cultivation under nature conditions. (secondary adaptation). A year later the estimation of phenotypic features was done. Research results and conclusions. The obtained results indicate that higher concentration of cytokinin class phytohormone repressed organogenesis of the embryos, whereas nutrient medium without phytohormones provided the most favourable conditions for the full plant development during the first cultivation stage. The invetigations during following cultivation stages revealed that 0,5... [to full text]