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Murcha de Fusarium em Heliconia spp.: ocorrência, variabilidade e resistência genética em espécies ornamentais cultivadas em Pernambuco, Alagoas e SergipeCASTRO, Neilza Reis 22 February 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-02-22 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Heliconias are flowers most cultivated inside world floriculture tropical in Brazil northeast, but its yield has being affected by Fusarium wilt caused by Fusarium oxysporum f.sp. cubense. The present study had as objective to verify disease occurrence, to evaluate inoculation methods, characterize isolates considering morphology, aggressivety and genetical diversity, identify resistance sources, to verify efficiency of fungical filtrate in distinction of resistance and susceptibility and, at the end, involvement of structural mechanisms in pathogen-host interaction. The disease occurrence was evaluated in 28 farms at Pernambuco, Alagoas and Sergipe, Brazil. After isolates obtaintion, were tested inoculation methods by injection on bottom of pseudo stem, “meia lua” method, depositing inoculants around plant and “dipping”, where roots are wounded, immersed in suspension and replanted after. The plants were evaluated by external and internal symptoms, considering disease index with variation of 1 to 6. For morphological characters, isolates were incubated for five days in microculture, after observed with optical microscopy. Micro and macroconidia were measured by micrometric lents, with increase of 40X. The aggressivity of isolates was determined colony disks in stems of H. psittacorum cv. Alan carle detached and perfured. Stems were incubated in humid chamber during five days. The evaluation was according with vascular darking in stem diameter and was based in index disease with notes variation of 1 a 4. Genetical diversity was verified bymolecular analysis and vegetative compatibility agroupment technique. For molecular analysis, it was realized Polymerase Chain Reaction (PCR) using 37 oligonucleotides of Inter-simple Sequence Repeat (ISSR) and eletrophoretical run in agarosis gel (2%). Binary data were analyzed by GENES 2.0 program. VCG was determined by nit mutants obtaintion, by complete medium (CM), potato-dextrose-clorate (PDC) and minimum medium (MM) sequence. For groupment formation Mutants were pared for complementary test by observation of heterocarion. For identification of resistance sources, 12 species of heliconia were inoculated by injection with isolate considering higher aggressivity and, after 40 days were done evaluations based on disease index. Fungical extract was obtained after fungus incubation during 24 days in Czapek medium, being used concentrations of 25, 50, 75 and 100%. Aliquots of 1mL were deposited on detached leaves of resistant plants of Heliconia psittacorum cv. Golden Torch, and of susceptible H.psittacorum cv. Alan Carle. Leaves inoculated were in humid chamber condition for 24, 48 and 72 hours. Structural mechanisms involved in interaction were observed by histological cuts on roots of used species at resistance sources studies and treatments wereinoculated and no inoculated with F.oxysporum f.sp. cubense. It was observed Fusarium wiltoccurrence in 88% of farms of tropical flowers production, where were obtained 31 isolates of F. oxysporum f.sp. cubense. Injection method showed be more efficient, with characteristics disease symptoms in lower time interval, at 36 days. Macroconidia showed variation of 25,56 μm x 3,7 μm to 33,92 μm x 3,39 μm and microconidia variation of 6,23 μm x 2,01 μm to 10,3 μm x 3,35 μm, dimension obtained for conidia were with variation for specie. It was observed distinction of three groups for aggressivity, where 15 isolates were considered intermediary aggressivity, eight lower aggressivity isolates. Methods used for genetical diversity showed genetical variability. At molecular analysis was formed five groups considering a genetical distance of 70% and genetical similarity varying of 0,51 to 0,94. At VCG study was observed formation of three groups, but 71% of isolates did not belong none group. Both of techniques determined high genetical diversity and not geographical correlation among isolates of the same area. Species H. bihai, H. psittacorum cv. Golden Torch, H. psittacorum cv. Golden Torch Adrian, H. rostrata, H. stricta Capri, H. psittacorum cv. Sassy and H. caribea were considered resistant to Fusarium wilt. Species moderally resistant were H. latispatha and H. wagneriana. Heliconia. psittacorum cv.Alan Carle and H. chartacea cv. Sexy Pink were susceptible while H. stricta Fire Bird was highly susceptible. Fungical filtrate concentrate in 50 % was the mostefficient of resistance distinction and susceptibility on cultivars. In structural mechanisms it was observed that there is not relation between diameter and lignification of celular wall with pathogen resistance, because in some resistant species did not show increase of diameter or lignin accumulation. / As helicônias são as flores mais cultivadas dentro da floricultura tropical no Nordeste brasileiro, porém sua produção vem sendo afetada pela murcha de fusário, causada pelo fungo Fusarium oxysporum f.sp. cubense. O presente estudo objetivou verificar a ocorrência da doença, avaliar métodos de inoculação, caracterizar os isolados quanto a morfologia, agressividade e diversidade genética, identificar fontes de resistência, verificar a eficiência do filtrado fúngico na distinção de resistência e suscetibilidade e, por fim, o envolvimento de mecanismos estruturais na interação patógeno-hospedeiro. A ocorrência da doença foi avaliada em vinte e oito propriedades nos estados de Pernambuco, Alagoas e Sergipe. Após a obtenção dos isolados, foram testados os métodos de inoculação de injeção na base do pseudocaule, método de “meia lua”, depositando-se o inóculo em torno da planta e “dipping”, onde as raízes das plantas são feridas, imersas na suspensão e depois replantadas. As plantas foram avaliadas pelos sintomas internos e externos, com base em escala de notas que variavam de 1 a 6. Para os caracteres morfológicos, os isolados foram incubados por cinco dias em microcultura e, em seguida, observados com auxílio de microscópio ótico. Os macroconídios e os microconídios foram medidos através da lente micrométrica com aumento de 40X. A agressividade dos isolados foi determinada por inoculação de discos de colônia em colmos de Heliconia psittacorum cv. Alan carle destacados e perfurados. Os colmos foram incubados sob condição de câmara úmida por cinco dias. A avaliação foi de acordo com o escurecimento vascular no diâmetro do colmo e baseou-se na escala denota variando de 1 a 4. A diversidade genética foi verificada através da análise molecular e da técnica de grupamento de compatibilidade vegetativa (VCG). Para análise molecular, realizou-se a Polymerase Chain Reaction (PCR) utilizando-se trinta e sete oligonucleotídeos de Inter-simple Sequence Repeat (ISSR) e a corrida eletroforética em gel de agarose (2%). Os dados binários foram analisados pelo programa Genes 2.0. O VCG foi determinado através da obtenção de mutantes nit, pelas seqüências nos meios completo (MC), batata-dextrose-clorato (BDC) e meio mínimo (MM). Para a formação de grupamentos, os mutantes foram pareados para o teste de complementariedade através da observação da formação do heterocárion. Na identificação de fontes de resistência, doze espécies de helicônia foram inoculadas por injeção com o isolado considerado de maior agressividade e após quarenta dias foram feitas as avaliações baseada na escala de notas. O filtrado fúngico foi obtido após o cultivo do fungo por vinte e quatro dias em meio Czapeksendo utilizadas as concentrações de 25, 50, 75 e 100%. Alíquotas de 1 mL foram depositadas sobre a superfície de folhas destacadas das plantas resistentes de Heliconia psittacorum cv.Golden torch, e das suscetíveis H. psittacorum cv. Alan carle. As folhas inoculadas ficaram em condição de câmara úmida por 24, 48 e 72 horas. Os mecanismos estruturais envolvidos na interação foram observados por cortes histológicos nas raízes das espécies utilizadas no estudo de fontes de resistência e os tratamentos foram inoculados e não inoculados com F. oxysporum f.sp. cubense. Foi constatada a ocorrência da murcha de fusário em 88% das propriedades visitadas, de onde foram obtidos trinta e um isolados do fungo. O método de injeção mostrou ser o mais eficiente, apresentando os sintomas característicos da doença em menor intervalo de tempo, aos trinta e seis dias. Os macroconídios apresentaram variação de 25,56 μm x 3,7 μm a 33,92 μm x 3,39 μm e os microconídios a variação de 6,23 μm x 2,01 μm a 10,3 μm x 3,35 μm. Observou-se a distinção de três grupos quanto à agressividade, onde quinze isolados foram enquadrados com de agressividade intermediária, oito foram de maior agressividade e oito foram de menor agressividade. As técnicas utilizadas no estudo de diversidade genética apresentaram alta variabilidade genética. Na análise molecular formaram-se cinco grupos considerando uma distância genética de 70% e uma dissimilaridade genética variando de 0,51 a 0,94. No estudo de VCG observou-se a formação de três grupos, porém 71% dos isolados não fizeram parte de nenhum grupo. Ambas as técnicas determinaram uma alta diversidade genéticae a não correlação geográfica entre os isolados pertencentes a uma mesma região. As espécies Heliconia bihai, H. psittacorum cv. Golden Torch, H. psittacorum cv. Golden Torch Adrian, H. rostrata, H. stricta cv. Capri, H. psittacorum cv. Sassy e H. caribea foram consideradas resistentes à murcha de fusário. As espécies moderadamente resistentes foram H. latispatha e H. wagneriana. Heliconia psittacorum cv. Alan Carle e H. chartacea cv. Sexy Pink foram as suscetíveis enquanto que a H. stricta cv. Fire Bird foi altamente suscetível. O filtrado fúngico concentrado em 50% foi o mais eficiente na distinção de resistência e suscetibilidade nas cultivares. Na avaliação dos mecanismos estruturais observou-se que não há relação entre a espessura e lignificação da parede celular com a resistência ao patógeno, pois em algumas espécies resistentes não constatou-se o aumento de espessura ou acúmulo de lignina.
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Eficiência da inoculação na fixação de N2 e na produtividade do feijão-caupi (Vigna unguiculata L. (Walp)) na região semiárida de PernambucoALVES, Michelle Justino Gomes 26 July 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-07-26 / Using the inoculation has been an alternative to reduce the impacts to the environment by the use of polluting agricultural inputs, as well as reduce expenses, since these inputs are considered expensive. Cowpea (Vigna unguiculata (L.) Walp.), Is a legume that has ability to form nodules with nitrogen fixing bacteria and N2 fixation. What is very important in the study on symbiosis between these two bodies in order to produce potential inoculants effective and competitive with native bacteria. In this context, the objective of this study was to evaluate the effect of different inoculants in yield of cowpea crop, produced from isolated nodules formed under different land uses in the city of Serra Talhada, semiarid region of Pernambuco. Two experiments were conducted, one pot in full sun and others in the field, with completely randomized design. The experiment vessel was mounted in a factorial 4 x 3, four different land use systems (caatinga area preserved, fallow area, agroforestry, and area of cowpea monoculture). It used three cowpea cultivars (Sempre verde, Paulistinha and Canapu Roxo), used by local farmers, with 5 repetitions. Soil samples were collected at various points in different areas in the city of Serra Talhada, which were placed in pots with 9kg capacity, being filled with 7 kg of soil was used as bait plant for 35 days. The nodules from vessels in this experiment were ground and mixed starch gum for the production of homemade inoculant or nodules extract to be used in the field experiment. The field experiment was formed by four inoculants resulting from isolated from experimental nodules pot, treatment with nitrogen fertilization 50 kg N as urea, a treatment with inoculant with the BR 3267 strain and without inoculation control and without nitrogen fertilization, with 4 repetitions. The cultivar used in this experiment was the Paulistinha. The plants were collected and evaluated at 35 days and at the end of the crop cycle. The data were submitted to the F test and means were compared by Tukey test at 5% probability. There have been isolated effects between cultivars and different areas with different land use, as well as interaction to the characteristics number of leaves per plant, dry weight of roots, number of nodules and nodular efficiency. The cowpea cultivars showed positive responses to biological nitrogen fixation, easily nodulated in the areas of savanna preserved and agroforestry. Homemade inoculants provided increases in cowpea yields when compared to other treatments. Homemade inoculants generally provided good nodulation, dry matter production and accumulation of N in the shoot, as well as grain production, when compared to the control, the inoculant and the nitrogen treatment, meaning good responses from BNF. However, the symbiotic relationships are highly dependent on soil and climatic conditions, especially in places of research areas. This study shows the importance of knowledge of the interactions between plants and microorganisms native to each region, can the same be a germplasm source to be used in the production of inoculants. / O uso da inoculação com bactérias tem sido uma alternativa para reduzir os impactos causados ao ambiente pela utilização de insumos agrícolas poluentes, como também, reduzir gastos, uma vez que esses insumos são considerados onerosos. O feijão-caupi (Vigna unguiculata (L.) Walp.), é uma leguminosa que possui capacidade de formar nódulos com bactérias diazotróficas e fixar N2. O que representa grande importância no estudo sobre simbiose entre esses dois organismos, com a finalidade de produzir inoculantes potenciais com bactérias nativas, eficazes e competitivas. Neste contexto, o objetivo do trabalho foi avaliar o efeito de diferentes inoculantes caseiros no rendimento da cultura do feijão-caupi, produzidos a partir de isolados dos nódulos formados em raízes de feijão-caupi cultivado em diferentes usos de terra, no município de Serra Talhada, região semiárida do Estado de Pernambuco. Foram realizados dois experimentos, um em vaso a pleno sol e outro em campo, com o delineamento inteiramente casualisado. O experimento em vaso foi montado em esquema fatorial 4 x 3, com quatro diferentes sistemas de uso da terra (área de caatinga preservada, área de pousio, sistema agroflorestal, e área de monocultivo de feijão-caupi), e três cultivares de feijão-caupi (Sempre verde, Paulistinha e Canapu Roxo), usadas pelos agricultores locais, com 5 repetições. As amostras de solos foram coletadas em vários pontos, nas diferentes áreas, no município de Serra Talhada, as quais foram colocadas em vasos com capacidade de 9 kg, sendo preenchidos com 7 kg de solo, e cultivadas as plantas iscas, por 35 dias. Os nódulos provenientes desse experimento em vasos foram triturados e misturados à goma de amido para a produção do inoculante caseiro ou de extrato de nódulos, a ser usado no experimento em campo. O experimento em campo foi formado por quatro inoculantes, sendo resultantes dos isolados dos nódulos do experimento em vaso, um tratamento com adubação nitrogenada com 50 kg de N na forma de ureia, um tratamento com inoculante comercial com a estirpe BR 3267 e um controle sem inoculação e sem adubação nitrogenada, com 4 repetições. A cultivar utilizada, nesse experimento, foi a Paulistinha. As plantas foram coletadas e avaliadas aos 35 dias e no final do ciclo da cultura. Os dados foram submetidos ao teste F e as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. No experimento com vasos ocorreram efeitos isolados entre as cultivares e as áreas com diferentes usos da terra, como também, interação para as características número de folhas por planta, massa seca de raízes, número de nódulos e eficiência nodular. As cultivares de feijão-caupi apresentaram respostas positivas a fixação biológica do nitrogênio, sendo facilmente noduladas nas áreas de caatinga preservada e agrofloresta. Observou-se no experimento de campo que os tratamentos com inoculantes caseiros proporcionaram aumento nos rendimentos de feijão-caupi, quando comparado aos demais tratamentos. Os inoculantes caseiros, de modo geral, proporcionaram boa nodulação, produção de massa seca e acumulo de N na parte aérea, além de produção de grãos, quando comparadas ao controle, ao inoculante comercial e ao tratamento nitrogenado, significando boas respostas da FBN. Contudo, as relações de simbiose são bastante dependentes das condições edafoclimáticas, principalmente nos locais das regiões de pesquisa. Este estudo mostra a importância do conhecimento das interações entre planta e micro-organismos nativos de cada região, podendo os mesmos serem uma fonte de germoplasma a ser empregada na produção de inoculantes comerciais.
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Avaliação do tratamento alopático e homeopático de mastite bovina em animais inoculados com Staphylococcus aureus / Evaluation of allopathic and homeopathic treatments of bovine mastitis in inoculated animals with Staphylococcus aureusLeslie Avila do Brasil Almeida 26 October 2004 (has links)
A mastite bovina é considerada a doença que causa os maiores prejuízos à produção leiteira, reduzindo em quantidade e qualidade o leite e os derivados lácteos. Especialmente na mastite clínica, ocorre aumento no risco de resíduos de antimicrobianos no leite, portanto além do prejuízo diretamente relacionado ao processo inflamatório, acrescenta-se o custo com medicamentos, aumento do labor da mão-de-obra e tempo de descarte do leite após tratamento, até a total eliminação os resíduos de antibióticos utilizados. A expansão dos sistemas de produção pecuária orgânica aumenta a necessidade de utilizar métodos diferentes daqueles conhecidos convencionalmente.A homeopatia é uma terapêutica que tem sido cada vez mais utilizada em animais de produção com resultados bastante satisfatórios. No Brasil a produção orgânica é regulamentada pela Lei No10.831 de 23 de dezembro de 2003 e lá há orientação para o uso de medicamentos homeopáticos, assim como fitoterapia e acupuntura na terapêutica animal, em lugar dos medicamentos convencionais, que têm seu uso muito restrito e em certos casos proibido. Para realização deste trabalho foi feita uma inoculação intramamária experimental com estirpes de Staphylococcus aureus em 36 quartos mamários de 18 vacas mestiças de Holandesas e Gir pertencentes ao Campo Experimental de Coronel Pacheco/MG da Embrapa/CNPGL, com o objetivo de comparar o tratamento de animais acometidos com a utilização de medicamentos homeopáticos (Phytolacca decandra 6CH, Calcarea carbonica 6CH e Silicea terra 6CH) e com antibiótico (Cefoperazone Sódico), usando como parâmetros para este estudo: os sinais clínicos, a prova de CMT, as contagens de células somáticas , tanto eletrônicas quanto ópticas e culturas microbiológicas, além da avaliação do custo dos dois tratamentos. No presente estudo não houve diferença estatisticamente significante quanto à intensidade do processo inflamatório avaliados pelo CMT e contagens de células somáticas, quanto ao número de unidades formadoras de colônias isoladas do leite das glândulas mamárias inoculadas e entre período de convalescença dos dois tratamentos. O custo de aquisição dos medicamentos para o tratamento de mastite aguda utilizando homeopatia foi muito inferior ao mesmo tratamento realizado com antibiótico intramamário / The bovine mastitis is considered the illness that causes most losses in milk production, reducing the quantity and quality of milk and dairy products. Especially in clinical mastitis there is an increase on the risk of antimicrobials in milk. Therefore, beyond the losses directly related with the inflammatory process, there is also the expense with drugs, an increase in the animal handling and a discard of milk after the antibiotics treatment, up until the totally elimination of the drug residues. The expansion of organic animal production systems increases the necessity of using different methods of those already conventionally known. Homeopathy is a therapeutically method that has been more used in livestock with satisfactory results. In Brazil, organic production is regulated by the law number 10.831 of December 23rd of 2003, where there is an orientation for using homeopathic medicines as well as phytotherapy and acupuncture in animal health instead of conventional medicines which are restricted in many cases and sometimes even forbidden. In order to develop this research it was done an experimentally intramammary inoculation with a strain of Staphylococcus aureus in 36 mammary gland quarters of 18 cows cross-bred with Holstein and Gir from the Experimental Fields of Coronel Pacheco/MG of Embrapa/CNPGL. The purpose was to compare the treatment of the inoculated animals with homeopathy (Phytolacca decandra 6CH, Calcarea carbonica 6CH and Silicea terra 6CH) and antibiotic (Sodic Cefoperazone). The parameter used for this study were clinical signs, CMT, counting of somatic cells electronically in as much as using the optical method and microbiological cultures. It was also estimated the costs of both treatments. At the present study there was no statistical difference in intensity of the inflammatory process evaluated by the CMT and somatic cell counts, by the number of CFU isolated from milk of the inoculated mammary glands and between the times of convalescence in both treatments. The cost of acquisition of medicines for the treatment of acute mastitis using homeopathy was very lower when compared with the same treatment done with intramammary antibiotics
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Refino de grão das ligas do sistema cobre-estanho. / Grain refinement of the alloys of the copper-tin system.Juan Marcelo Rojas Arango 28 April 2016 (has links)
As ligas de cobre têm grande importância na fabricação de produtos metálicos que necessitam de boa resistência à corrosão e/ou alta condutividade térmica e elétrica. A sua estrutura de grãos bruta de solidificação define diversas propriedades requeridas em serviço/processamento e o refino desta estrutura pode ser realizado a partir da inoculação do banho metálico antes do início da solidificação, aumentando o número de núcleos sólidos formados. A inoculação e os mecanismos de refino de grão em ligas de cobre foram pouco investigados e não são entendidos suficientemente para permitir o projeto de inoculantes. O presente trabalho tem como principal objetivo identificar os mecanismos fundamentais de inoculação e refino de grão das ligas do sistema Cu-Sn a partir de adições de Zr aos banhos líquidos antes da solidificação. Amostras cilíndricas foram produzidas a partir da solidificação das ligas a uma taxa de resfriamento de ~ 0,8 ?C/s. Estas amostras foram analisadas por diferentes técnicas: (a) observação da macroestrutura de grãos; (b) análise térmica das curvas de resfriamento obtidas durante a solidificação; (c) análise química; (d) exame da microestrutura em microscopia óptica, microscopia eletrônica de varredura (MEV) com emissão de campo (FEG), microscopia eletrônica de transmissão (MET) com e sem o feixe de íons (FIB) e (e) microanálise por espectroscopia de energia dispersiva (EDS). Observa-se que adições de Zr na faixa de 0,04 a 0,4% a banhos da liga Cu-8%Sn com cobertura de pó de grafita reduzem o tamanho médio de grão em até 90%, mas não causam efeito significativo sem a cobertura de grafita. Este efeito da diminuição do tamanho de grão com a adição de Zr torna-se significativo somente para teores de Sn >=4%. Esta redução de tamanho médio de grão é acompanhada do aparecimento de partículas facetadas na microestrutura, identificadas como ZrC a partir de padrões de difração de elétrons e microanálises EDS. Uma análise teórica mostra desajustes entre os reticulados do ZrC e do Cu? tão pequenos quanto 1,9%, indicando que estas partículas podem funcionar como centros efetivos para a nucleação heterogênea e causar o refino de grão em ligas de Cu. Parâmetros extraídos da recalescência das curvas de resfriamento, como a diferença entre as temperaturas mínima e máxima da recalescência, apresentaram boa correlação com o tamanho médio de grão final, indicando a possibilidade do controle do tamanho de grão em ligas Cu-Sn com adições de Zr a partir da análise térmica. / Copper alloys are important to the production of metallic parts with good corrosion resistance and high thermal and electrical conductivity. The as-cast grain structures of these alloys are closely related to the properties required in service or during processing. The refining of the grain structure can be achieved by inoculation of the metallic melt, before the beginning of solidification, increasing the number of solid nuclei. The inoculantion and grain refining of copper alloys have been poorly investigated and are not sufficiently understood to enable the design of inoculants. The objective of the present work is to identify the fundamental mechanisms underlying the inoculation and grain refining of Cu-Sn alloys by additions of Zr to the melt prior to solidification. Cylindrical samples of these alloys were cast at a cooling rate of ~0,8 ?C/s. These samples were analyzed using different techniques: (a) observation of the grain macrostructure; (b) thermal analysis of the cooling curves collected during solidification; (c) chemical analysis; (d) observation of the microstructure in the optical microscope, scanning electron microscope (SEM) with field emission gun (FEG), trasmission electron microscope (TEM) with and without the focused ion beam (FIB) for sample preparation and (e) energy dispersive spectroscopy (EDS) microanalysis. The results show that additions of Zr in the range between 0,04 and 0,4% to melts of a Cu-8%Sn alloy with a graphite powder cover decrease the average grain size by up to 90%, but have no effect without the graphite cover. The decrease in grain size obtained with Zr additions become significant only for alloys with %Sn >==4 and is followed by the appearance of faceted particles in the microstructure, identified as ZrC after examining electron difraction patterns and EDS microanalyses of the particles.
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Influência do regime hídrico na infecção de plantas cítricas jovens por Xylella fastidiosa / Influence of water regime in the infection of young citrus plants by Xylella fastidiosaCristiane Ramos da Veiga Lima Cava 26 February 2007 (has links)
Cerca de 38% das árvores cítricas do Estado de São Paulo são afetadas pela Clorose Variegada dos Citros - CVC, causando perdas anuais de cerca de 100 milhões de dólares para as indústrias citrícolas. O agente causal da CVC é uma bactéria gram-negativa, fastidiosa e habitante dos vasos de xilema denominada Xylella fastidiosa, transmitida por cigarrinhas pertencentes à família Cicadellidae, subfamília Cicadellinae. Já foi observado que laranjas doces jovens, na faixa de 3 a 4 anos de idade, são mais sensíveis à CVC do que as plantas adultas. A doença é mais severa em regiões onde estresses adicionais ocorrem, como alta demanda atmosférica por água (decorrente do aumento da temperatura e do déficit de pressão de vapor) e déficit hídrico no solo. Os mecanismos fisiológicos e químicos que caracterizam o estabelecimento da CVC ainda não foram totalmente compreendidos, especialmente sob condições de estresse. Sendo assim, estudos que consideram a interação entre época do ano, regime hídrico e o estabelecimento da CVC em plantas jovens são necessários para auxiliar na elaboração de programas de manejo da doença. O presente trabalho avaliou a sobrevivência de infecções iniciais de X. fastidiosa em plantas cítricas jovens no campo, mantidas com e sem irrigação, 6, 12 e 18 meses após inoculações mecânicas realizadas no verão (mês de janeiro) e inverno (mês de julho). Visando analisar a influência do regime hídrico isoladamente foram realizadas, na época do outono (final de maio e início de junho), inoculações mecânicas e inoculações com as cigarrinhas vetoras Bucephalogonia xanthophis e Dilobopterus costalimai em plantas cítricas jovens mantidas em capacidade de campo e déficit hídrico em casa-de-vegetação; as plantas inoculadas mecanicamente foram avaliadas 5 meses após a data de inoculação, enquanto que as plantas inoculadas com insetos foram avaliadas 10 meses após a data de inoculação. Em condições naturais, foram observadas, 6 meses da data de inoculação, maiores taxas de sobrevivência de infecções iniciais de X. fastidiosa em plantas jovens inoculadas na época de inverno na ausência de estresse hídrico; no entanto, 12 meses da data de inoculação, as plantas inoculadas mantidas com e sem irrigação apresentavam médias populacionais bacterianas estatisticamente iguais. As plantas mantidas em casa-devegetação e inoculadas mecanicamente apresentaram resultados semelhantes àqueles obtidos 6 meses da data de inoculação em condições naturais; no caso da inoculação com cigarrinhas vetoras, foi detectada a presença da bactéria apenas em plantas em capacidade de campo. Estes resultados indicam que o déficit hídrico é um fator desfavorável para o estabelecimento de infecções primárias de X. fastidiosa em plantas cítricas jovens. Os resultados obtidos 12 meses após a inoculação mecânica em condições naturais, logo após a estação de chuva, indicam que, uma vez retirado o estresse hídrico, tal influência negativa deixa de existir e a bactéria readquire sua capacidade de infecção e colonização do hospedeiro. / In Brazil, about 38% of the citric trees of the São Paulo State are affected by the Citrus Variegated Chlorosis - CVC, causing annual losses of about 100 million dollars for the citrus industries. The causal agent of CVC is a gram-negative, fastidious bacterium inhabitant of the xylem vessels called Xylella fastidiosa. It is vectored by sharpshooter leafhoppers pertaining to family Cicadellidae and subfamily Cicadellinae. It was observed that young citrus plants, between 3 and 4 years of age, are more susceptible to CVC than adult plants. The disease is more severe in regions where additional stresses occur, such as high atmospheric demand (due to the increase of temperature and vapor pressure deficit) and water deficit in the soil. The physiological and chemical mechanisms that characterize the establishment of CVC within the host have not yet been totally understood, especially under conditions of stress. Therefore, studies that consider the interaction between seasons, water regime and the establishment of CVC in young plants are necessary in the elaboration of more efficient management programs. The survival of initial infections of X. fastidiosa in young citrus plants mechanically inoculated during the summer and winter, and kept in the field with and without irrigation, were evaluated 6, 12 and 18 months after mechanical inoculations. To analyze the influence of water regime separately, an experiment was carried through during the autumn (final of May and beginning of June) in a greenhouse. Young citrus plants kept in field capacity and water deficit were mechanically inoculated and inoculated with sharpshooter leafhoppers Bucephalogonia xanthophis and Dilobopterus costalimai. The mechanically inoculated plants were evaluated 5 months after the date of inoculation, whereas the plants inoculated with insect vectors were evaluated 10 months after the date of inoculation. In natural conditions, 6 months of the date of inoculation, higher survival rates of initial infections of of X. fastidiosa were detected in inoculated young plants during winter in the absence of water deficit; however, 12 months after inoculation, the young citrus plants kept with and without irrigation presented statistically equal bacterial population averages. The mechanically inoculated plants kept in the greenhouse presented similar results to those kept in natural conditions and analyzed 6 months after mechanical inoculation. In the case of inoculation with sharpshooter leafhoppers, the presence of the bacterium was detected only in plants kept in field capacity. The results demonstrate that the water deficit is unfavorable for the establishment of primary infections of X. fastidiosa in young citrus plants. The results obtained 12 months after mechanical inoculation in natural conditions, right after the rainy season, indicate that, once the water deficit is removed, its negative influence ceases to exist and the bacterium reacquires its capacity of infection and colonization of the host.
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Alterações na atividade e no perfil eletroforético da enzima peroxidase em mesocótilos e folhas de milho (Zea mays L.) em resposta á inoculação com Helminthosporium maydis Nisik. E Miy., Raça O, Helminthosporium carbonum Ullstrup, Raça 1 e à injúria mecânica / Changes in activity and electrophoretic pattern of peroxidase in maize (Zea mays L.) mesocotyls and leaves after inoculation with (Helminthosporium maydis Nisik. & Miy., Race O, (HeIminthosporium carbonum Ullstrup, Race 1 and mechanical injuryMarcos Fernando de Godoy Lusso 21 March 1990 (has links)
O trabalho foi desenvolvido com o objetivo de se verificar o papel da enzima peroxidase nas respostas de plantas de milho ao ferimento com carborundo e à inoculação com H.carbonum (interação de resistência) ou H. maydis (interação de suscetibilidade). Os estudos basearam-se na atividade da enzima in vitro e nas alterações do perfil isoenzimático de extratos obtidos das plantas feridas ou inoculadas. A análise dos extratos mostrou um aumento na atividade da peroxidade em respostas à inoculação com H. maydis ou a ferimento. No material inoculado com H. maydis, a máxima atividade enzimática ocorreu ao redor de 48 h após a inoculação. Em relação ao ferimento observou-se nos mesocóticos um máximo de atividade ao redor de 48 h enquanto que nas folhas esse máximo ocorreu ao redor de 24 h após a injúria. Por sua vez, o material inoculado com H. carbonum apresentou atividade enzimática menor quando comparado a H. maydis e próxima aos valores encontrados para os tecidos controle. No tocante ao perfil isoenzimático, observou-se nos extratos de tecidos foliares tratados o aparecimento de duas e o desaparecimento de três isoperoxidases no material extraído 12 h após os tratamentos. Esses mesmos resultados foram observados em extratos obtidos em 24 e 48 h. Finalmente, os resultados sugerem que as alterações da peroxidase, tanto em relação ao aumento da atividade quanto ao perfil isoenzimático, mostram-se comuns ao ferimento causado por um agente abrasivo bem como à infecção por fungos / The role of the enzyme peroxidase on maize plants after wounding with carborundum or inoculation with the fungi H.carbonum (resistant interaction) or H.maydis (susceptible interaction) was studied. The work was carried out based upon enzyme activity in vitro as well as on isoenzimatic patterns in extracts obtained from wounded or inoculated tissues. Results showed an increase in peroxidase activity after inoculation with H.maydis or wounding. In maize tissues inoculated with H.maydis the highest level of enzyme activity was observed 48 h after inoculation. In tissues wounded with carborundum, the highest enzyme activity was observed to occur 48 h in mesocotyls and leaves inoculated with H.carbonum exhibited an enzyme activity smaller than that observed in tissued inoculated with H.maydis, and the level of activity was close to the values observed for uninoculated tissues. Regarding the isoenzimatic studies, two new isoenzymes were observed in extracts obtained from wounded or inoculated leaves 12 h after the treatments. At the same time, it was observed the desappearance of three others isoenzymes in the same material. The same results were observed in leaf extracts obtained 24 and 48 h after wounding or inoculation. Finally, the results suggest that changes in peroxidase, based upon enzyme activity and isoenzyme patterns, are common responses of maize tissues to wounding by abrasion and to fungal infection
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Produção de mudas cítricas em viveiro: uso de substrato alternativo e inoculação com Xylella fastidiosa. / Production of citrus seedlings in nursery: use of alternative substratum and inoculation with Xylella fastidiosa.Ronaldo Alberto Duenhas Cabrera 20 May 2004 (has links)
Substratos alternativos têm sido usados para promover um melhor estabelecimento de plantas em viveiros, de forma a assegurar que plantas sadias sejam transferidas ao campo. No caso do Citrus spp. Esta preocupação é real pela possibilidade do campo poder apresentar um histórico de doenças na área, tal como a Clorose Variegada do Citros causada pela Xylella fastidiosa (X.f.). Este estudo avaliou a adição de vermicomposto a um substrato comercial e o desenvolvimento de plântulas de quatro variedades de citros inoculadas ou não com X.f. em condições de casa-de-vegetação, por um período de 450 dias. Medidas biométricas do crescimento da planta e o uso de indicadores do balanço nutricional usando o programa DRIS - Diagnosis and Recommendation Integrated System foram aplicadas em plantas de 9 meses de idade. As variáveis estudadas foram: substrato vermicomposto (100%, 50%, 0%) , variedade (Baia, Pêra, Natal e Escape) e inoculação (com ou sem X.f.) em um total de 24 tratamentos (variedade x substrato x inoculação), com seis repetições. Quanto ao desenvolvimento das plantas, avaliou-se o diâmetro do caule, a altura da planta, a produção de biomassas das raízes e partes aéreas, a taxa de infecção natural por fungos micorrízicos naturais do solo, a concentração de macro e micronutrientes na parte aérea. Quando se usou vermicomposto (100% or 50%), efeitos positivos foram observados nos parâmetros de desenvolvimento das plantas. Por outro lado, a infecção micorrízica e DRIS foram inversamente correlacionadas indicando estar ocorrendo um desbalanço nutricional neste estádio de desenvolvimento das plantas. Não foi observado um efeito significativo da inoculação com X.f. no desenvolvimento das plantas ou mesmo nos parâmetros biométricos, exceto para os teores foliares de nitrogênio e fósforo, onde nas plantas inoculadas o teor foliar de nitrogênio (1,46%) foi maior em relação às plantas não inoculadas (1,30%) e para fósforo ocorreu o oposto (0,32% e 0,40%, respectivamente). / Alternative substrates have being used for a better establishment of plants at nursery stages, thus ensuring that healthier plants will be transferred to the field. In the case of Citrus, this is a concern especially when there is a past history of diseases at field conditions, such as Citrus Variegated Chlorosis caused by Xylella fastidiosa (X.f.). This study evaluated the addition of vermicompost to a commercial substrate and the performance of seedlings of four citrus varieties inoculated or not with X. f. at greenhouse condition, for a period of 450 days. Biometric measurements of plant growth and nutritional balance indicators using DRIS - Diagnosis and Recommendation Integrated System were performed in 9 month-old plants. Mycorrhizal infection by native vesicular-arbuscular fungi was also evaluated in all plants. The studied variables were: vermicompost substrate (100%, 50%, 0%), variety (Baia, Pêra, Natal and Escape) and inoculation (with or without X.f.), in a total of 24 treatments (variety x substrate x inoculation) with 6 replicates each. Growth development evaluated stem diameter, plant height, shoot and root biomass accumulations, arbuscular mycorrhizal infection, and macro and micronutrient concentration in the shoot. When using vermicompost (100% or 50%), positive effects were observed in the plant growth parameters. On the other hand, mycorrhizal infection and DRIS were inversely correlated to the substrate addition, indicating that nutrient imbalances may be occurring at this plant growth stage. No significant effect of X.f. inoculation was observed on the plant growth and the biometric parameters studied, except for increased foliar nitrogen content - 1,46% for inoculated and 1,30% for uninoculated plants, and decreased foliar phosphorus content - 0,32% for inoculated and 0,40% for uninoculated plants.
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Efeito da inoculação de uma bactéria endofítica fixadora de nitrogênio (Acinetobacter sp. ICB117) no desenvolvimento da cana-de-açucar (Saccharum sp. variedade SP791011). / Effect of a nitrogen-fixing endophytic bacterium (Acinetobacter sp.) in sugarcane (Saccharum sp.) growth.Carolina Krebs Kleingesinds 15 December 2010 (has links)
O presente estudo teve por objetivo analisar os efeitos da inoculação de Acinetobacter sp. ICB117 no desenvolvimento da cana-de-açúcar variedade SP791011. As plantas foram cultivadas a partir de toletes com uma gema e fornecidas pelo Centro de Tecnologia Canavieira. Aos 30 dias de idade, foram submetidas aos seguintes tratamentos: controle (C) sem inoculação e solução de Hoagland sem nitrogênio; nitrato (N) sem inoculação e solução de Hoagland com nitrato (15 mM); bactéria (B) inoculação bacteriana e solução de Hoagland sem nitrogênio; bactéria + nitrato (BN) inoculação bacteriana e solução de Hoagland com nitrato (15 mM). Antes da realização da inoculação, foi inserido em ICB117 um plasmídio que contém um gene de expressão para o GFP. O material vegetal foi coletado mensalmente (2 coletas), sendo os seguintes parâmetros analisados: altura, nº de folhas, massa seca, composição de aminoácidos na seiva xilemática, razão C/N das raízes e folhas, atividade da nitrato redutase foliar, assimilação máxima de CO2 e estimativa da população endofítica de ICB117. / Acinetobacter sp. ICB117 is a nitrogen-fixing bacterium isolated from Brazilian sugarcane (Saccharum sp. variety SP791011) which releases amino acids, polyamines and indole-3-acetic acid (IAA) when grown in vitro. The present study aimed to evaluate the effects of Acinetobacter sp. ICB117 (a diazotrophic endophytic bacterium) inoculation on the growth of Saccharum sp. variety SP791011 (sugarcane). Sugarcane plants were obtained from stools with one bud, provided by CTC (Centro de Tecnologia Canavieira). Plants with 30 days old were submitted to the following treatments: control (C) - no bacterium inoculation and Hoagland solution without nitrogen; nitrate (N) - no bacterium inoculation and Hoagland solution with nitrate (15 mM); bacteria (B) - bacterium inoculation and Hoagland solution without nitrogen; Bacteria + nitrate (BN) - bacterial inoculation and Hoagland solution with nitrate (15 mM). Previously to the inoculation procedure, Acinetobacter sp. ICB117 was transformed with plasmid containing a gene that expresses the Green Fluorescent Protein (GFP). Plant material were sampled monthly (2 sampling times) in order to evaluate the following parameters: hight, number of leaves, dry mass, amino acids composition on xylem sap, leaf and root nitrogen and carbon content, leaf nitrate reductase activity, photosynthetic CO2 assimilation and ICB117 endophytic population estimative. The results showed a very similar pattern along experimental period: inoculation with bacterium increased plant total dry mass (evidenced by roots), number of leaves and the assimilation of CO2, but it did not influece significantly the shoot size of the plants and the leaf nitrate reductase activity. The endophytic ICB117 population was larger in plants treated without nitrate than in plants with nitrate inputs. Among the different treatments, alterations were not verified in the amino acids composition on xylem sap prevailing arginine in the sap of all the plants. In the roots, the carbon nitrogen (C/N) ratio was smaller in the plants treated with nitrate (N and BN); in the leaves, the C/N ratio was smaller only in the plants treated with nitrate without inoculation (N).
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FEIJOEIRO INOCULADO COM Rhizobium tropici, ASSOCIADO À APLICAÇÃO DE NITROGÊNIO EM COBERTURA / COMMON BEAN INOCULATED WITH Rhizobium tropici, ASSOCIATED WITH APPLICATION OF NITROGEN IN COVERRebeschini, Antonio Carlos 19 June 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-06-19 / Bean represents an important protein source in the human diet in developing countries of tropical and subtropical regions. It is one of the major components of the Brazilian diet and an important protein source. Regarding the nitrogen supply for the bean, we can mention the use of mineral fertilizers and biological fixation of N2. The fixation efficiency is variable, ranging from 2 to 100 kg N ha-1. Thus it is justified the researches that involve the use of mineral nitrogen fixation with N. The objective of this study was to evaluate doses of nitrogen in the bean cultivation in field conditions, associated with seed inoculation. The study was conducted under field conditions in two traditional bean cultivation area in Paraná northern. The experiment was consisted by plots with or without inoculation of Rhizobium tropici in the seeds and use five N rates (0, 20, 40, 60 and 80 kg ha-1) in cover. The experimental design employed was randomized blocks, being the factorially treatments disposed in five levels of nitrogen with and without inoculation. Evaluations were made about the nodulation, N content in leaves, shoot dry matter, N uptake, number of pods per plant and grain yield. The results showed that application of nitrogen coverage or use of the inoculant did not provide income gains in the bean. Nodulation was affected by the application of mineral nitrogen coverage. The performance of bean differed in the two cultivated areas, which may have been influenced by climatic conditions and management at the sites studied. / O feijão representa uma importante fonte protéica na dieta humana dos países em desenvolvimento das regiões tropicais e subtropicais. No Brasil, o feijão é um dos componentes básicos da dieta alimentar da população e importante fonte de proteína. Com relação ao fornecimento de nitrogênio (N) para o feijoeiro pode ser destacado o uso de fertilizantes minerais e a fixação biológica de N2. A eficiência da fixação biológica é muito variável, oscilando de 2 a 100 kg de N ha-1. Desta forma justificam-se trabalhos que busquem associar o uso do nitrogênio mineral com a fixação biológica de N. O objetivo deste trabalho foi o de avaliar doses de nitrogênio em cobertura no cultivo do feijão em condições de campo, associado a inoculação de sementes. O estudo foi conduzido em condições de campo em duas áreas de cultivo tradicional de feijoeiro, na região norte do Paraná. O experimento foi constituído por parcelas com ou sem inoculação de Rhizobium tropici nas sementes e utilização de cinco doses de N (0, 20, 40, 60 e 80 kg ha-1) em cobertura. O delineamento experimental empregado foi de blocos ao acaso sendo os tratamentos arranjados fatorialmente em 5 doses de nitrogênio com e sem inoculante. Foram feitas avaliações quanto a nodulação, teor de N nas folhas, matéria seca da parte aérea, N acumulado, número de vagens por planta e rendimento de grãos. Os resultados encontrados revelaram que a aplicação do nitrogênio em cobertura ou utilização do inoculante não proporcionou ganhos de rendimento no feijoeiro. A nodulação foi afetada pela aplicação de nitrogênio mineral em cobertura. O desempenho do feijoeiro diferenciou-se nas duas áreas cultivadas, o que pode ter sido influenciado pelas condições climáticas e de manejo nos locais estudados.
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FEIJOEIRO INOCULADO COM Rhizobium tropici, ASSOCIADO À APLICAÇÃO DE NITROGÊNIO EM COBERTURA / COMMON BEAN INOCULATED WITH Rhizobium tropici, ASSOCIATED WITH APPLICATION OF NITROGEN IN COVERRebeschini, Antonio Carlos 19 June 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-06-19 / Bean represents an important protein source in the human diet in developing countries of tropical and subtropical regions. It is one of the major components of the Brazilian diet and an important protein source. Regarding the nitrogen supply for the bean, we can mention the use of mineral fertilizers and biological fixation of N2. The fixation efficiency is variable, ranging from 2 to 100 kg N ha-1. Thus it is justified the researches that involve the use of mineral nitrogen fixation with N. The objective of this study was to evaluate doses of nitrogen in the bean cultivation in field conditions, associated with seed inoculation. The study was conducted under field conditions in two traditional bean cultivation area in Paraná northern. The experiment was consisted by plots with or without inoculation of Rhizobium tropici in the seeds and use five N rates (0, 20, 40, 60 and 80 kg ha-1) in cover. The experimental design employed was randomized blocks, being the factorially treatments disposed in five levels of nitrogen with and without inoculation. Evaluations were made about the nodulation, N content in leaves, shoot dry matter, N uptake, number of pods per plant and grain yield. The results showed that application of nitrogen coverage or use of the inoculant did not provide income gains in the bean. Nodulation was affected by the application of mineral nitrogen coverage. The performance of bean differed in the two cultivated areas, which may have been influenced by climatic conditions and management at the sites studied. / O feijão representa uma importante fonte protéica na dieta humana dos países em desenvolvimento das regiões tropicais e subtropicais. No Brasil, o feijão é um dos componentes básicos da dieta alimentar da população e importante fonte de proteína. Com relação ao fornecimento de nitrogênio (N) para o feijoeiro pode ser destacado o uso de fertilizantes minerais e a fixação biológica de N2. A eficiência da fixação biológica é muito variável, oscilando de 2 a 100 kg de N ha-1. Desta forma justificam-se trabalhos que busquem associar o uso do nitrogênio mineral com a fixação biológica de N. O objetivo deste trabalho foi o de avaliar doses de nitrogênio em cobertura no cultivo do feijão em condições de campo, associado a inoculação de sementes. O estudo foi conduzido em condições de campo em duas áreas de cultivo tradicional de feijoeiro, na região norte do Paraná. O experimento foi constituído por parcelas com ou sem inoculação de Rhizobium tropici nas sementes e utilização de cinco doses de N (0, 20, 40, 60 e 80 kg ha-1) em cobertura. O delineamento experimental empregado foi de blocos ao acaso sendo os tratamentos arranjados fatorialmente em 5 doses de nitrogênio com e sem inoculante. Foram feitas avaliações quanto a nodulação, teor de N nas folhas, matéria seca da parte aérea, N acumulado, número de vagens por planta e rendimento de grãos. Os resultados encontrados revelaram que a aplicação do nitrogênio em cobertura ou utilização do inoculante não proporcionou ganhos de rendimento no feijoeiro. A nodulação foi afetada pela aplicação de nitrogênio mineral em cobertura. O desempenho do feijoeiro diferenciou-se nas duas áreas cultivadas, o que pode ter sido influenciado pelas condições climáticas e de manejo nos locais estudados.
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