Completando 100 anos da descoberta da molestia, a Doenca de Chagas, causada pelo agente etiologico Trypanosoma cruzi, ainda e considerada nas Americas Central e do Sul um problema de saude publica, atingindo mais de 8 milhoes de individuos. Sua transmissao ocorre de distintas maneiras, como por vetores, transfusao sanguinea, transplante de orgaos, acidentes em laboratorios, via oral. O parasita e conhecido por sua heterogeneidade no genotipo e fenotipo, baseado em mutacoes cumulativas em diferentes sub-populacoes do parasita. A cepa CL Brener e uma cepa padrao para pesquisa com diversas peculiaridades interessantes como baixa infectividade em animais, resposta aos tratamentos existentes e seus marcadores geneticos serem estaveis. O clone CL B5 de T. cruzi e originado a partir da cepa CL Brener modificada geneticamente. A cepa possui um gene reporter, o LacZ de Escherichia coli que sintetiza uma enzima, a À-galactose que pode catalisar uma reacao colorimetrica com o substrato vermelho de clorofenol À-galactopiranosideo (CPRG). A atividade enzimatica e diretamente proporcional ao numero de parasita. No presente trabalho propomos a introducao de uma tecnica colorimetrica para caracterizacao de parametros para quantificacao do parasitismo tecidual e comparacao com a tecnica histologica e Real Time-PCR. Camundongos Balb/C machos foram divididos em grupos controle (nao infectado) e experimental variando a via de inoculacao, a saber, intraperitoneal (IP), subcutanea (SC) e oral (OR). As curvas parasitemicas foram realizadas por meio da coleta de sangue da cauda do animal. Apos morte dos mesmos, foram estudados os tecidos cardiaco, hepatico, esplenico, enterico e muscular (musculo esqueletico). Os orgaos foram retirados, divididos em tres porcoes equitativas para analise histologica, enzimatica e molecular. Na atividade enzimatica, comparando os tecidos em suas vias de inoculacao, o figado apresentou resultado significativo no grupo inoculado via IP. Tecido cardiaco apresentou diferenca estatistica (P<0,05) entre as vias de inoculacao OR e SC, apresentando maior atividade enzimatica na primeira, o que esta relacionado a uma maior quantidade de parasita tecidual. Nos cortes histologicos o grupo SC mostrou-se mais infectado com grande numero de ninhos de forma amastigota em praticamente todos os tecidos, enquanto nos demais grupos foram observados ninhos de amastigota em sua maioria no coracao e viii musculo esqueletico. A presenca do parasita nos demais tecidos foi confirmada pela eletroforese em gel de agarose 1,5% apos tecnica de PCR convencional. A Real Time-PCR nao se mostrou satisfatoria no trabalho devido a dificuldade na sua padronizacao. Concluindo, a metodologia enzimatica se mostrou favoravel e adequada na quantificacao parasitaria tecidual, podendo ser aperfeicoada para corroborar sua eficacia. / One hundred years after the discovery of Chagas Disease, an illness caused by blood born protozoan Trypanosoma cruzi, is still consider a public health problem. It is a major cause of morbidity and mortality in Central and South Americas where more than 8 million individuals are already infected. This illness can be contracted by different forms as vector transmission, blood transfusion, tissue transplant, laboratory accidents and oral route. The parasite has a heterogeneous genotype and phenotype due to accumulating mutation in their sub-populations. CL Brener is considered as a pattern strain due to some intrinsic characteristics as low infectivity, good response to therapy drugs and a stable genetic heritage. The CL B5 clone of T. cruzi was originated by a genetic modification of the CL Brener strain which has a reporter gene LacZ of Escherichia coli, which induces the syntesis of â-galactosidase which is able to catalyze a colorimetric reaction using the substrat Chlorophenol red-â-D-galactopyranoside (CPRG). The enzymatic activity is directly related with the number of the parasites. In this study we proposed a new colorimetric assay to quantify T. cruzi load in different animal tissues by comparing with other methodologies such histological and molecular assay (Real Time-PCR). Male Balb/C mice were separated into control and experimental groups according to the route of infection (IP-intraperitoneal, SC-subcutaneous, OR-oral). Parasitemic curves were made by collecting blood samples from the tail of experimental animals. Fifteen days after, animals were euthanized and their tissues removed (heart, liver, spleen, intestine and skeletal muscles) and divided in three portions for the colorimetric analyses, histopathology and molecular assay. The enzymatic activity was performed comparing the number of parasites in different tissues according to the route of infection. Comparing them, it was observed that heart and liver displayed the highest number of parasites as compared with the other studied tissues. In the liver, IP route triggered the highest number of parasites while in the heart OR and SC routes displayed enhanced parasites. The histopathology analysis revealed that SC group presented the highest number of amastigote nests. For IP and OR groups, nests were mostly observed in heart and skeletal muscles. T. cruzi DNA were detected using electrophoreses 1,5 % agarose gel after conventional PCR technique, displaying characteristic bands of DNA. The Real Time-PCR was not a satisfactory x assay for this study due to difficulties on its patronization. To conclude, the enzymatic methodology was advantageous and appropriated on quantifying tissue parasites. Some further experiments will be needed to improve methodology and its efficacy.

Hypothenemus hampei apresenta aspectos bioecológicos e comportamentais que dificulta o seu controle, como a sua natureza críptica, ficando dentro da semente de café a maior parte de seu ciclo de vida, por apresentar várias gerações por ano. Uma grande quantidade de frutos com H. hampei cai ao solo, constituindo uma excelente forma para sobrevivência do inseto na entressafra e como fonte para novas infestações. O controle de H. hampei deve então ser efetuado no período em que as fêmeas deixam o fruto onde nasceram até o momento em que colonizam novos frutos para reproduzirem. Biopesticida a base de Beauveria bassiana é uma opção disponível para o controle de H. hampei, no entanto, existem poucas evidências de sua eficiência em campo. Objetivou-se com está pesquisa avaliar estratégias para utilização de B. bassiana para manejo de populações de H. hampei por: i) pulverização aquosa com adjuvantes, ii) armadilha atrativa para auto-autocontaminação e iii) incorporação do patógeno no solo com fertilizantes quimícos. Pulverização direta de suspensões de conídios com o adjuvante Tween 80 resultou em menor mortalidade de H. hampei do que suspensões com os demais adjuvantes testados em laboratório. A eficácia dos adjuvantes com o fungo variou com o método de inoculação. As pulverizações diretas dos insetos resultaram em mortalidades reduzidas (23 - 53%), enquanto que a imersão e os métodos que permitiram que os insetos ficassem em contato com os conídios no substrato (fruto ou papel de filtro) após a pulverização resultaram em maiores mortalidades (63 - 98%). As imagens ultramorfológicas de H. hampei inoculados por diferentes métodos sugerem que a região ventral do abdome é o principal sítio de infecção do fungo, visto que, diferente dos outros métodos, na pulverização direta que resultou em mortalidades reduzidas, grande quantidade de conídios aderidos e germinados foram observados no élitro em comparação com a região ventral. Três modelos de armadilha de auto-inoculação foram comparadas em cafezal sombreado e a pleno sol e a captura de H. hampei foi superior em ESALQHh2. O manejo de H. hampei com a armadilha ESALQ-Hh2 foi avaliado em cafezal a pleno sol desde a fase de formação dos frutos até a colheita. Foi constatado em média 6,6% de H. hampei infectados por Beauveria sp. nas plantas distante 4 e 8 m das armadilhas e nenhum inseto infectado nas parcelas com as mesmas armadilhas, mas sem o fungo. Observou-se redução na concentração e viabilidade do patógeno nas armadilhas ao longo do tempo, porém as mortalidades de H. hampei expostos ao fungo foram elevadas (73 - 100%) durante os 148 dias de avaliação. Estudos conduzidos em laboratório revelaram que a capacidade de voo de H. hampei não é afetada pela carga de conídios aderidos ao seu corpo quando comparados aos insetos sem exposição ao fungo. Além disso, apenas 5% dos insetos expostos ao fungo conseguiram penetrar na semente de café, indicando baixo potencial de danos. A mistura de conídios de B. bassiana com fertilizantes químicos granulados em solo de cafezal resultou em reduções (34 e 50%) da infestação de H. hampei quando comparadas às parcelas somente com aplicação dos fertilizantes. Sugere-se que o manejo desta praga com B. bassiana apresenta maior potencial a curto prazo por pulverizações apenas no período de trânsito das fêmeas colonizadoras, e, à médio e longo prazo, pela aplicação do patógeno no solo conjuntamente com fertilizantes e com o uso de armadilha de auto-inoculação. / Hypothenemus hampei, presents bioecological and behavioral aspects that hinders its control, such as its cryptic nature, remaining inside the coffee bean most of its life cycle and for presenting several generations per year. A large number of coffee beans carrying H. hampei drop to the ground, providing an excellent way for insect survival in the off season and as a source for new infestations of berries. The control of H. hampei must thus be made in the period when the females leave the beans where they were born until the moment they colonize new fruits to reproduce. Biopesticide based with Beauveria bassiana is an option available for the control of H. hampei; however, there is little evidence of its effectiveness in the field. The objective of this study was to evaluate strategies to use B. bassiana in the management of H. hampei in three ways: i) aqueous spray with adjuvants, ii) attractive trap of autoinoculation and iv) inoculation of the pathogen into the soil with chemical fertilazers. Direct spraying of suspensions of fungal conidia with adjuvant Tween 80 resulted in lower mortality of H. hampei than suspensions with the other adjuvants tested in the laboratory. The effectiveness of the adjuvant with the fungus varied with the inoculation method. Direct sprays on the insects reduced mortalities (23 - 53%), while immersion and the methods that allowed the insects to have contact with the conidia in the substrate (fruit or filter paper) after spraying, resulted in greater mortality (63 - 98%). Ultramorphological images of H. hampei, inoculated by different methods, suggest that the ventral region of the abdomen is the primary site of infection of the fungus since, unlike the other methods, the direct spray that resulted in reduced mortality, large quantity of conidia adhered and germinated were observed in the elytron compared to the ventral region. Three models of autoinoculation traps were compared in a shaded coffee plantation and in the full sun. Capture of H. hampei was superior in ESALQHh2. The management of H. hampei with trap ESALQ-Hh2 was assessed at a coffee plantation under full sun from fruit formation until harvest. On average, 6.6% of H. hampei was infected by Beauveria sp. in plants 4 and 8 m distant from the traps and no insect was infected in the plots with the same traps, but without the fungus. There was a reduction in concentration and viability of the pathogen in the traps over time; however, mortality of H. hampei exposed to the fungus were high (73 - 100%) during the 148 days of evaluation. Studies conducted in laboratory revealed that the flight capacity of H. hampei was not affected by the load of conidia adhered to its body when compared to insects without exposure to the fungus. Furthermore, only 5% of insects exposed to the fungus managed to penetrate the coffee bean, indicating low potential damage. Inoculation of conidia of B. bassiana, along with granulated chemical fertilizers in the soil of the coffee plantation, reduced (34 and 50%) the infestation of H. hampei compared the plots with only the application of fertilizers. It is suggested that the management of this pest with B. bassiana presents greater potential in the short term by spraying only during the period of transit of colonizing females and in the medium and long term through the application of the pathogen to the soil together with fertilizers and autoinoculation traps.

Neste trabalho, foram comparadas a biodiversidade de fungod MA encontrada em bromélia terrestres e epífitas, e a resposta de plântulas derivadas de Aechmea nudicaulis (L.) Griseb., germinadas in vitro, com os efeitos de diferentes inóculos de fungos MA (ecofisiologia). O crescimento da planta, o contéudo de nutrientes e a colonização por fungos MA foram verificados em dois diferentes substratos. A diversidade de fungos MA encontrada nas raízes de 5 bromélias epífitas e 3 terrestres foi de 47 táxons de fungos MA sendo 36 identificados ao nível de espécies (acaulospora spp., 11; 4) e 11 ao nível de gênero com 2 espécies não identificadas para cada gênero, exceto Entrophospora, com 3 espécies. No mínimo, duas das espécies não identificados são ainda não descritas. Acaulospora foi o gênero dominante nas bromélias terrestres. As bromélias aparentemente não apresentam especificidade quanto aos fungos MA permitindo a colonização de qualquer fungo MA em suas raízes.Foram observados, pela primeira vez, fungos MA dentro de raízes adventícias e hifa externa colonizando extensivamente a casca da árvore que dava suporte para as bromélias epífitas. A inoculação com fungos endomicorrízicos causou tanto a redução (parasitismo) como o aumento(mutualismo) no crescimento, em relação ao controle, dependendo da espécie de fungo MA ou substrato usados. As diferenças de crescimento relativo ao controle, provavelmente, foram pelo balanço entre assimilação de P (positivo) ou perda de carboidratos (negativo), entre os dois parceiros na associação. Em casa de vegetação, a presença de E. colombiana ou a mistura de fungos MA, de um solo natural, em raízes de A. nudicaulis resultou em maior crescimento e acúmulo de P. A casca de Pinus no substrato propiciou o crescimento da planta micorrizada, uma vez que forneceu uma forma adicional de P e aumentou a drenagem e aeração do solo. Portanto, essas plantas colonizadas por fungos MA, apresentaram maiores taxas de crescimento na fase de aclimatação. / In this work, the biodiversity of AM fungi found associated with terrestrial and epiphytic bromeliads, and the response of Aechmea nudicaulis (L.) Griseb., germinated in vitroto inoculation with various AM fungi were compared (ecophysiology). Plant growth, nutrient content, and colonization by AM fundi were measured in two substrates. The diversity of AM fungi found in 5 and 3 terrestrial bromeliads roots included 47 taxos of AM fungis including 36 identified identified species (acaulospora spp.,11; Entrophospora spp., 2; gigaspora spp., 4; Glomus spp, 15; Scutellospora spp.4) and 11 non-identified species with two non-identified species in each genera, except Entrophospora, with 3 species). At least two of these fungi are new species that have never been described before. Acaulospora was dominant with epiphytic bromeliads, while Glomus was dominant with terrestrial bromeliads. Bromeliads, unlike other plant species appear not to have a specific preference for AM fungal species, but will allow any AM fungus present to colonize their roots. During this study, AM fungi within adventitious roots and external hyphae colonizing extensively the bark of trees supporting epiphytic bromeliads were observed. Inoculation with endomycorrhizal fungi caused either a growth reduction (parasitism) or a growth enhancement (mutualism)relative to the control depending on the species of AM fungus and the substrate used. The trend towards mutualism or parasitism relative to the control, was likely due to the balance between improved P inflow or excessive carbohydrate loss between the two partners in the association. Presence of E. colombiana or a mixture of fungi from a natural soil in the roots of A. nudicaulis resulted in superior growth and concentrations of P. Pine bark in the substrate was stimutatory to mycormizal plant growth sinco it provided an additional form of P enhanced drainage and soil deration. Therefore, these AM colonized plants showed higher growth rate in the acclimatization phase.

A dengue é doença causada pelo vírus dengue (DENV), que acomete cerca de 390 milhões de pessoas no mundo, representando uma ameaça à saúde pública mundial. Até o momento não se dispõe de tratamento específico ou de vacinas para a maioria da população. Um dos maiores obstáculos para o desenvolvimento de vacinas ou para a compreensão da biologia do vírus é a falta de modelos animais que mimetizem a doença vista em humanos. Neste trabalho, o principal objetivo foi a busca de modelos alternativos de infecção com um isolado clínico (JHA1) de DENV sorotipo 2 (DENV2) capaz de infectar camundongos imonocompetentes após administração pela via intracraniana. Foram testadas duas vias alternativas de inoculação viral (intraperitoneal e intravenosa) em camundongos adultos imunocompetentes, além da via intracraniana em camundongos C57BL/6. Por fim, tentativas de mapeamento de mutações relacionadas à neurovirulência do JHA1 em camundongos imunocompetentes. Os resultados obtidos contribuem para a caracterização do JHA1 e para a busca de modelos experimentais alternativos de DENV. / Dengue fever is a disease caused by the dengue virus (DENV), which affects around 390 million people worldwide, posing a threat to global public health. To date, there is no specific treatment or vaccination for the majority of the population. One of the major obstacles to vaccine development or understanding the biology of the virus is the lack of animal models that mimic the disease seen in humans. In this work, the main objective was to search for alternative models of infection with a clinical isolate (JHA1) of DENV serotype 2 (DENV2) capable of infecting immunocompetent mice after administration by the intracranial route. Two alternative routes of viral inoculation (intraperitoneal and intravenous) were tested in immunocompetent adult mice, in addition to the intracranial route in C57BL/6 mice. Finally, attempts to map mutations related to JHA1 neurovirulence in immunocompetent mice. The results obtained contribute to the characterization of JHA1 and to the search for alternative experimental models of DENV.

A fixação biológica de nitrogênio (FBN) apresenta-se como uma alternativa sustentável e viável, na produção de gramíneas, através do uso de bactérias do gênero Azospirillum, um microrganismo potencial promotor do crescimento das plantas. Neste sentido, o presente trabalho foi realizado com o objetivo de estudar o efeito do uso da bactéria diazotrófica Azospirillum brasilense, inoculada via sementes, em associação ou não com doses de nitrogênio, na entressafra, no teor e rendimento de óleo em genótipos de milho. Os ensaios foram realizados em duas épocas de semeadura em um delineamento experimental de blocos casualizados (DBC) com 30 tratamentos e três repetições. Em cada época, os tratamentos foram dispostos em um esquema fatorial 2x3x5, representado por dois processos de inoculação das sementes (com e sem inoculação das sementes), três genótipos de milho (Orion e Al Bandeirante, variedades de polinização aberta, e o Híbrido Duplo (AG-1051) e cinco doses de nitrogênio N (0, 50, 100, 150 e 200 kg ha-1) realizadas em cobertura. Foram avaliadas o teor de óleo dos grãos (%) e o rendimento de óleo (kg ha-1). Foi realizada análise de variância individual e, posteriormente, análise conjunta. O uso da bactéria Azospirillum brasilense, acompanhada ou não de doses de nitrogênio, promoveu aumento no teor e no rendimento de óleo nos grãos. A variedade Orion foi a que mais se destacou quando inoculada com a bactéria Azospirillum, sendo também a mais eficiente quando cultivada sob baixo nitrogênio. A adoção desta prática não substitui o uso de fertilizantes nitrogenados, mas poderá ser uma alternativa para reduzir os custos do produtor. / Biological nitrogen fixation (FBN) is presented as a viable and sustainable in the production of grasses, through the use of bacterium of the genus Azospirillum, microorganisms potential plant growth promoter. In this sense, the present work was to study the effect of using the diazotrophic bacterium Azospirillum brasilense, inoculated in seeds, in association or not with nitrogen, in the off season, the content and oil yield in corn genotypes. The tests were performed at two sowing times in a randomized complete block design (DBC) with 30 treatments and three replications. In every age, the treatments were arranged in a factorial 2x3x5, represented by two seed inoculation processes (with and without seed inoculation) Three genotypes (Orion and Al Bandeirante, open-pollinated varieties, and the Hybrid Double (AG-1051) and five doses of nitrogen N (0, 50, 100, 150 and 200 kg ha-1) held in coverage. The grain oil content were evaluated (%) and oil yield (kg ha-1). individual variance analysis was performed and subsequently pooled analysis. The use of bacterium Azospirillum brasilense, with or without nitrogen, promoted an increase in content and oil yield in grains. The variety Orion was the one that stood out when inoculated with Azospirillum bacterium, and is the most efficient when grown under low nitrogen. The adoption of this practice does not replace the use of nitrogen fertilizers, but can be an alternative to reduce producer costs.

Colletorichum acutatum é o agente causal da Podridão Floral dos Citros (PFC), doença que em determinadas condições ambientais constitui-se em fator limitante à produção citrícola em várias regiões produtoras do mundo. Além da PFC, esse fungo causa antracnose em outros hospedeiros, sendo um dos patógenos que mais acarreta danos em frutíferas tropicais, subtropicais e temperadas no mundo. O trabalho teve como objetivos estudar a especificidade patogênica e compatibilidade vegetativa entre isolados de C. acutatum dos citros e de outros hospedeiros como: goiaba, pimentão, morango e pêssego. Para os estudos de especificidade patogênica, foram realizadas inoculações cruzadas entre isolados de citros e dos outros hospedeiros visando verificar se os diferentes isolados são capazes de causar sintomas de PFC em flores de citros e antracnose em frutos. Foram também obtidos, a partir dos mesmos isolados, mutantes deficientes na absorção de nitrogênio (mutantes nit). Esses foram caracterizados fenotipicamente e pareados a fim de verificar por meio de estudos de compatibilidade vegetativa a capacidade de recombinação entre si, gerando heterocários com patogenicidade alterada. Para verificar a ocorrência de possíveis alterações na patogenicidade dos heterocários formados, foi feita a inoculação dos heterocários e dos isolados parentais nos seus respectivos hospedeiros de origem. Nos ensaios de inoculação cruzada, houve grande variação quanto à patogenicidade dos isolados inoculados. Isolados provenientes de citros e de goiaba causaram lesões em flores de citros, isso demonstra a ausência de especificidade entre isolados dos dois hospedeiros. Porém, isolados provenientes de pimentão, pêssego e morango não foram capazes de causar sintomas em flores de citros o que indica a existência de especificidade desses isolados. Os isolados provenientes dos citros e de outros hospedeiros foram capazes de causar antracnose em goiaba, morango e pêssego, mas apenas os isolados de pimentão causaram antracnose em pimentão. Alguns isolados de citros foram capazes de recombinar entre si e com isolados de goiaba, pimentão e morango. Dos heterocários formados, dois foram caracterizados quanto a sua patogenicidade, Het 3 e Het 5. Como resultado, o heterocário proveniente do isolado de citros com goiaba (Het 5) comportou-se de forma semelhante à um de seus parentais. O heterocário proveniente de citros com pimentão (Het 3), mostrou-se mais agressivo do que seus parentais quando inoculados em pimentão. Com esses estudos pode-se concluir que existe especificidade patogênica entre isolados de C. acutatum de diferentes hospedeiros, entretanto, isolados de diferentes hospedeiros podem recombinar entre si e gerar heterocários com características patogênicas alteradas. / Colletorichum acutatum is the causal agent of postbloom fruit drop (PFD).This disease is a limiting factor for citrus production under specifics environmental conditions in several regions of the world. In addition to the PFD, this fungus causes anthracnose on other hosts. It is one of the pathogens that cause more damage in tropical, subtropical and temperate fruit around the world. This work aimed to study the specificity pathogenic and vegetative compatibility among isolates of C. acutatum from citrus and other hosts: guava, pepper, strawberry and peach. For studies of pathogenic specificity, cross inoculations were performed among isolates from citrus and other hosts in order to verify whether different strains are capable of causing symptoms of PFD in citrus flowers and fruit anthracnose. Furthermore, it was obtained from the same isolates, nitrate-nonutilizing mutants (nit mutants). They were phenotypically characterized and paired to verify, by means of vegetative compatibility studies, the ability of recombination between them, generating heterokaryons with altered pathogenicity. In order to verify the occurrence of possible changes in the pathogenicity of the heterokaryons formed, parental isolates and heterokaryons were inoculated in their respective original hosts. In cross-inoculation tests, there was a great variation in the isolates pathogenicity. Isolates from citrus and guava caused lesions on citrus blossoms; this demonstrates the absence of pathogenic specificity between isolates of the two hosts. However, isolates from pepper, peach and strawberry were unable to induce symptoms on citrus flowers showing the existence of specificity of these isolates. The strains from citrus and other hosts were able to cause anthracnose on guava, strawberry and peach, but only isolates of pepper caused anthracnose on pepper. Some isolates from citrus were able to recombine among themselves and with isolates from guava, peppers and strawberries. From the heterokaryons obtained, two of them had their pathogenicity characterized: Het 3 and Het 5. As a result, the heterokaryon derived from citrus and guava (Het 5) behaved similarly to one of their parental isolates. The heterokaryon derived from citrus and pepper (Het 3) was more aggressive than their parental isolates when inoculated in pepper. With these results we can conclude that there is specificity between pathogenic strains of C. acutatum from different hosts. However, isolates from different hosts can recombine with each other and generate heterokaryons with altered pathogenic characteristics.

Entre as cucurbitáceas cultivadas no Brasil, a abobrinha de moita (Cucurbita pepo L.) apresenta grande importância econômica, notadamente no Estado de São Paulo, a maior área de plantio. No Brasil, já foram encontrados nove vírus capazes de infectar esta espécie. Os mais freqüentes e responsáveis por prejuízos significativos à produção da abobrinha de moita são os do mosaico do mamoeiro &#150; estirpe melancia (Papaya ringspot virus - type W &#150; PRSV-W) e do mosaico amarelo da abobrinha (Zucchini yellow mosaic virus &#150; ZYMV), devido principalmente à sua alta sensibilidade. A premunização das plantas com estirpes fracas vem sendo investigada há mais de 10 anos no Brasil e surge como uma alternativa interessante para controle destas viroses. A premunização de abobrinha de moita só foi estudada até o momento em plantas da variedade Caserta. O presente trabalho teve o objetivo de dar continuidade a estes estudos avaliando o efeito de estirpes premunizantes PRSV-W-1 e ZYMV-M na produção quantitativa e qualitativa de quatro variedades comerciais de C. pepo: Samira, Novita Plus, AF-2847 e Yasmin. Os resultados obtidos em experimentos conduzidos em estufa plástica mostraram que as plantas destas variedades infectadas com a estirpe fraca ZYMV-M, não exibiram sintomas foliares acentuados e não apresentaram alterações na produção quantitativa e qualitativa de frutos, quando comparada com a produção das plantas sadias. No entanto, as plantas dessas mesmas variedades infectadas com a estirpe PRSV-W-1, só ou em mistura com a estirpe ZYMV-M, exibiram sintomas acentuados de mosaico foliar e alteração significativa na qualidade dos frutos, caracterizada pelo escurecimento da casca. Não houve alteração significativa na quantidade de frutos produzidos por essas plantas e no peso médio dos frutos. Quando plantas dessas variedades foram infectadas somente com a estirpe fraca PRSV-W-1 e conduzidas paralelamente em condições de campo e estufa plástica, constatou-se intensificação dos sintomas nos frutos e nas folhas das plantas infectadas conduzidas principalmente em estufa, porém a produção quantitativa mais uma vez não foi alterada. A variedade Samira mostrou-se a mais sensível ao PRSV-W-1 em ambas as condições. Os resultados sugerem que fatores ambientais, além da interação da estirpe fraca com a variedade de abobrinha, parecem interferir na expressão de sintomas nos frutos das plantas infectadas com a estirpe PRSV-W-1. Também foi objeto de estudo desse trabalho a identificação da melhor hospedeira, entre algumas cucurbitáceas, para a multiplicação e manutenção das duas estirpes fracas, e a avaliação da eficiência dos afídeos Myzus nicotianae e M. persicae na transmissão da estirpe ZYMV-M. Os resultados mostraram que a estirpe ZYMV-M parece atingir as maiores concentrações em C. pepo cv. Caserta e em C. melo cv. Casca-de-Carvalho. Para a estirpe PRSV-W- 1, as melhores hospedeiras foram C. pepo cv. Caserta, seguida de C. lanatus cv. Crimson Sweet e C. sativus cv. Safira. M. nicotianae e M. persicae transmitiram a estirpe fraca ZYMV-M para 11,7% e 0% das plantas de abobrinha de moita cv. Caserta, respectivamente. Enquanto a estirpe severa foi transmitida para 47,0% e 80% das plantas teste, respectivamente. / Zucchini squash (Cucurbita pepo L.) is widely cultivated in Brazil, especially in the State of São Paulo, which is the major producer. Nine viruses capable to infect this species have already been described in Brazil. The most frequent and responsible for significant yield losses are the potyviruses Papaya ringspot virus - type W (PRSV-W) and Zucchini yellow mosaic virus (ZYMV), for which zucchini squash is highly susceptible and intolerant. Preimmunization with mild strains of both viruses have been investigated in Brazil for the last 10 years and appears as and interesting option for the control of these viruses. As preimmunization have been evaluated only for zucchini squash cv. Caserta, the purpose of the present work was to investigate the effect of the mild strains PRSV-W-1 and ZYMV-M on the quantitative and qualitative yield of four other commercial zucchini squash varieties: Samira, Novita Plus, AF-2847 e Yasmin. The results of an experiment carried out under plastic-house showed that mild strain ZYMV-M induced mild symptoms on the leaves of the plants of all varieties, but did not affect the yield of marketable fruits, as compared to those from the respective healthy controls. On the other hand, plants from all varieties exhibited accentuated mosaic and leaf malformation when infected with mild strain PRSV-W-1, alone or in mixture with ZYMV-M. The amount of fruits harvested (number and average weight) from these plants was similar to that from the respective healthy controls. However, the quality of the fruits was severely affected, since the mild strain PRSV-W-1 induced alteration on the texture and color of the skin. When plants infected only with mild strain PRSV-W-1 were grown simultaneously under field and plastic-house conditions, it was noticed that leaf and fruit symptoms were more intense on those maintained in the plastic-house. Once more the quantitative fruit yield was not affected by this mild strain. Zucchini squash cv. Samira was the most sensitive to PRSV-W-1 under both conditions. Together theses results suggest that environmental variables, besides the interaction between the variety and the mild strain, might influence the expression of symptoms shown by plants infected with PRSV-W-1. In addition to this, the present work also tried to identify the most appropriate host, among some cucurbit species/varieties, for multiplication of both mild strains, and the efficiency of two species of aphids (Myzus nicotianae and M. persicae) on the transmission of the mild strain ZYMV-M. The mild strain ZYMV-M attained the highest concentration in C. pepo cv. Caserta and Cucumis melo cv. Casca-de-Carvalho. The most appropriate hosts for multiplication of mild strain PRSV-W-1 were C. pepo cv. Caserta followed by Citrullus lanatus cv. Crimson Sweet and C. sativus cv. Safira. M. nicotianae and M. persicae transmitted the mild strain ZYMV-M to 11.7% and 0% of the test-plants of zucchini squash cv. Caserta. The transmission of the severe strain of ZYMV by both species of aphids occurred for 47% and 80% of the test-plants, respectively.

Orientador: Marcelo Carvalho Minhoto Teixeira Filho / Resumo: Devido ao alto custo dos fertilizantes nitrogenados e a conscientização em prol de uma agricultura sustentável e menos poluente, tem-se aumentado a utilização de inoculantes contendo bactérias diazotróficas, que além de propiciar a fixação biológica de nitrogênio (N) também possui ação fitohormonal, promovendo assim, maior desenvolvimento do sistema radicular, absorção de água e nutrientes, com reflexos positivos no crescimento e produtividade de grãos de milho. Objetivou-se avaliar o efeito da inoculação do milho cultivado na safra e safrinha, com seis espécies de bactérias promotoras de crescimento de plantas, aplicadas via sementes ou em jato dirigido na base da planta, sempre com redução de 25% na dose de N, sobre a absorção e exportação de nutrientes (N, P, K, Ca, Mg, S, B, Cu, Fe, Mn e Zn), componentes de produção e produtividade de grãos em região de Cerrado, além das alterações nos atributos químicos do solo na camada de 0-0,20 m. Os experimentos foram desenvolvidos em Selvíria - MS, em um LATOSSOLO VERMELHO Distrófico em sistema plantio direto e com espaçamento de 0,45 m entrelinhas. O delineamento experimental nos dois cultivos de milho foi em blocos ao acaso com quatro repetições, dispostos em um esquema fatorial 6 x 2 +3, sendo seis inoculações com A. brasilense, B. amyloliquefaciens, B. licheniformis, B. pumilus, B. subtilis e P. fluorescens, aplicadas via sementes ou em jato dirigido na base da planta no estádio V3 do milho, sendo todos estes tratamentos com red... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Due to the high cost of nitrogen fertilizers and the awareness of a sustainable and less polluting agriculture, the use of inoculants containing diazotrophic bacteria has been increased, which besides propitiating the biological fixation of nitrogen (N) also has phytohormonal action, promoting thus, greater root system development, water and nutrient absorption, with positive effects on maize grain growth and yield. The objective was to evaluate the effect of the inoculation of maize grown in the crop and in the second crop, with six species of plant growth promoting bacteria, applied via seeds or in a directed jet at the base of the plant, always with 25% reduction in dose (N, P, K, Ca, Mg, S, B, Cu, Fe, Mn and Zn), grain production and productivity components in the Cerrado region, as well as changes in nutrient uptake and soil chemical attributes in the 0-20 cm layer. The experiments were carried out in Selvíria - MS, in an RED OXISOL Dystrophic in no-tillage system with spacing of 0.45 m between rows. The experimental design in the two crops was in randomized blocks with four replicates, arranged in a factorial scheme 6 x 2 +3, being six inoculations with A. brasilense, B. amyloliquefaciens, B. licheniformis, B. pumilus, B. subtilis and P. fluorescens, applied by seed or in a directed spray at the base of the plant in the V3 stage of the corn, all of these treatments being 25% reduction in the N dose recommended in coverage; besides the control without inoculation and nit... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-12-22T13:48:31Z No. of bitstreams: 1 Marisangela Viana Barbosa.pdf: 782275 bytes, checksum: e0f60df2d84c34d378476085357848db (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-22T13:48:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marisangela Viana Barbosa.pdf: 782275 bytes, checksum: e0f60df2d84c34d378476085357848db (MD5) Previous issue date: 2013-02-28 / The use of agroforestry systems (SAF’s) has been an alternative to reduce environmental impacts and assist in the recovery of degraded areas. In this context, the aim of this study was to evaluate the effect of inoculation with rhizobia strains and arbuscular mycorrhizal fungi associated with legume trees intercropped with cowpea [Vigna unguiculata (L.) Walp] in SAF's. Seedling production was carried out in the greenhouse of UFRPE / UAST. Using seeds of leucaena (Leucaena leucocephala (Lam.) de Wit) and mimosa (Mimosa caesalpiniifolia Benth.). The seeds were disinfected and inoculated with strains of native rhizobia (S1LRJ and S1003) and recommended by EMBRAPA (Semia 6069 and BR 3405) for leucaena and mimosa respectively, sown in containers with soil. After 100 days of emergency were planted in an experimental area of IFPE, Campus Belo Jardim, PE. The plot was composed of eight trees with spacing of 4.0 x 2.5 m, half inoculated with Gigaspora margarita. The experimental design was in randomized block (DBC) in factorial 2x2x4(with and without mycorrhiza, native and recommended rhizobia, and four times of assessment) with 3 blocks in split plot, each species being assessed separately. Evaluations were performed at implantation, at 60, 120 and 180 days by determining: plant height (AP), stem diameter of plants (DC) and the ratio of the height and diameter (RAPDC). At 60 days, was planted cowpea (Vigna unguiculata (L.) Walp.) Cultivar IPA 206, inoculated with strain (BR 3267) at a spacing of 0.5 x 0.5 m. Assessing the effect of different treatments on beans in DBC with factorial 4x2x2 (two trees with native and recommended rhizobia, with and without mycorrhiza and with and without rhizobia strains to cowpea) in split split plot. Determined shoot dry mass (MSPA), yield (kg ha-1), shoot total N, soil microbial biomass (BMS) and organic carbon. Data were subjected to analysis of variance and means were compared by Tukey test at 5% probability. Was observed highest developing in mimosa seedlings, with no isolated effect of the treatments, occurring interaction to G. margarita and Rhizobium S1003. There wasno influence of treatments for yield, total N and MSPA of cowpea and soil organic C and BMS. This study shows the importance of understanding the interactions micro-organism/plant to optimize the application of biotechnology in crop production. / A utilização de sistemas agroflorestais (SAFs), tem sido uma alternativa para reduzir os impactos ambientais e auxiliar na recuperação de áreas degradadas. Neste contexto, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da inoculação de estirpes de rizóbios e fungos micorrizicos arbusculares associados a leguminosas arbóreas consorciadas com o feijão caupi [Vigna unguiculata (L.) Walp] em SAF’s. A produção de mudas foi realizada no viveiro da UFRPE/UAST. Utilizando sementes de leucena (Leucaena leucocephala (Lam.) de Wit) e sabiá (Mimosa caesalpiniifolia Benth.). As sementes foram desinfetadas e inoculadas com estirpes de rizóbios nativos (S1LRJ e S1003) e recomendados pela EMBRAPA (Semia 6069 e BR 3405) para leucena e sabiá respectivamente, semeadas em recipientes com solo. Após 100 dias de emergência foram plantadas em uma área experimental do IFPE, Campus de Belo Jardim, PE. A parcela foi composta por 8 arbóreas com espaçamento de 4,0 x 2,5 m, metade inoculada com Gigaspora margarita. O delineamento foi em blocos casualisados (DBC) em fatorial 2x2x4 (com e sem micorriza, rizóbios nativos e recomendados, e quatro épocas de avaliação) 3 blocos, em parcelas subdivididas, sendo avaliada cada espécie isoladamente. As avaliações foram realizadas na implantação, aos 60, 120 e 180 dias determinando: altura de planta (AP), diâmetro do colo das plantas (DC) e a relação da altura a planta pelo diâmetro RAPDC. Aos 60 dias, foi plantado o caupi (Vigna unguiculata (L.) Walp.) cultivar IPA 206, inoculada com a estirpe (BR 3267) em um espaçamento de 0,5 x 0,5 m. Avaliando o efeito dos diferentes tratamentos sobre o feijão em DBC com fatorial 4x2x2 (duas arbóreas, com e sem micorriza e com e sem estirpes de rizóbios) em parcela subsudivididas. Determinou-se a massa seca da parte aérea (MSPA), produtividade (Kg ha-1), N total da parte aérea, biomassa microbiana do solo (BMS) e carbono orgânico. Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5% probabilidade. Foi observado um maior desenvolvimento para as mudas de sabiá, não havendo efeito isolado dos tratamentos, observando-se interação para G. margarita e rizóbio S1003. Não houve influência dos tratamentos para produtividade, N total e MSPA do caupi e para o solo C orgânico e BMS. Este estudo mostra a importância do conhecimento das interações micro-organismo/planta, para otimizar a aplicação da biotecnologia na produção vegetal.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-21T14:43:15Z No. of bitstreams: 1 Domingos Eduardo Guimaraes tavares de Andrade.pdf: 1134828 bytes, checksum: b275aaaed4ce9ad14aa4a28ddd01f571 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-21T14:43:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Domingos Eduardo Guimaraes tavares de Andrade.pdf: 1134828 bytes, checksum: b275aaaed4ce9ad14aa4a28ddd01f571 (MD5) Previous issue date: 2004-03-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / This study aimed to verify the frequency of fungi associated to melon (Cucumis melo L.) roots with collapse symptoms and their correlation with physical, chemical and microbiologic characteristics of soils. It also aimed to analyze the influence of inoculum densities and strains of Monosporascus cannonballus on the melon collapse, evaluating suitable methods to quantify disease. Melon plants with collapse symptoms and soil samples were collected from 10 producing areas, located in the counties of Mossoró and Baraúna (State of Rio Grande do Norte) and Quixeré (State of Ceará). The isolation frequency (FI) of fungi was obtained for each area, while the soil samples were analyzed in relation to physical, chemical and microbiologic characteristics. Monosporascus cannonballus inoculum densities of 0.1, 0.5, 1, 5, 10, 25 and 50 cfu/g of soil were essayed for collapse severity (SD), plant length (CP), shoot fresh biomass (BFPA) and root fresh biomass (BFR), shoot dry biomass (BSPA) and root dry biomass (PSR), areas of first and second true leaves (A1FD and A2FD), accumulated leaf area (AFA), total volume of plant (VTP), total fresh biomass of plant (BFTP) and total dry biomass of plant (BSTP). In the variability essay were utilized 44 strains of M. cannonballus with inoculum density of 10 cfu/g of soil. In the FI survey, high prevalences were verified for Fusarium solani and Macrophomina phaseolina (100%), while lower values were verified for Rhizoctonia solani (40%), M. cannonballus (30%) and Sclerotium rolfsii (30%). Fusarium solani and M. phaseolina presented similar FI, ranging from 1.6 to 60.0%, while M. cannonballus showed FI from 0.0 to 71.1%, R. solani from 0.0 to 18.0% and S. rolfsii from 0.0 to 13.3%. The FI of F. solani and M. cannonballus were respectively higher in melon type Orange (57.1%) and Cantaloupe (40.9%), as well as in areas with one or two years (45.4%) andwith more than five years (48.2%) of cropping. The FI of F. solani and M. cannonballus were inversely correlated (r = -0.79), and were influenced by the amount of Bacillus spp. in the soil (r = -0.71 and 0.80, respectively). The FI of M. phaseolina correlated with phosphorus level (r = 0.68), the FI of R. solani with flocculation degree (r = 0.67), field capacity (r = -0.81), pH (r = -0.75), aluminum level (r = 0.85) and total acidity (r = 0.69). The FI of S. rolfsii correlated with the permanent wilting point (r = -0.78) and soil available water (r = 0.75). The progress curves of SD, CP, A1FD, A2FD and AFA, related to inoculum densities, were adjusted by non-linear logistic model. Low inoculum densities (0.1, 0.5 and 1 cfu/g of soil) produced high levels of SD, ranging from 15.6 to 53.1%. Densities from 20 to 50 cfu/g of soil did not substantially increase SD. In the essay with different M. cannonballus strains, the analyzed variables propitiated formation of threesimilarity groups and evidenced strain variability within and among areas. High coefficients of correlation and determination confirmed the fit of SD with A1FD, A2FD and AFA in two essays demonstrating potential use to quantify the melon collapse. / Este estudo teve como objetivos determinar a freqüência de fungos associados às raízes de meloeiro (Cucumis melo L.) com sintomas de colapso, relacionando-a com as características físicas, químicas e microbiológicas dos solos, e verificar a influência de densidades de inóculo e isolados de Monosporascus cannonballus sobre o colapso do meloeiro, avaliando metodologias adequadas para a quantificação da doença. Meloeiros com sintomas de colapso e amostras de solos foram coletados em 10 áreas produtoras, localizadas nos municípios de Mossoró e Baraúna (RN) e Quixeré (CE). A freqüência de isolamento (FI) de fungos foi obtida para cada área, enquanto as amostras de solo foram analisadas quanto às características físicas, químicas e microbiológicas. No ensaio de densidades de inóculo de M. cannonballus foram utilizadas as densidades de 0,1; 0,5; 1; 5; 10; 25 e 50 ufc/g de solo, avaliando-se a severidade do colapso (SD), comprimentoda planta (CP), biomassa fresca da parte aérea (BFPA) e da raiz (BFR), biomassa seca da parte aérea (BSPA) e da raiz (BSR), áreas da 1ª e 2ª folhas definitivas (A1FD e A2FD), área foliar acumulada (AFA), volume total da planta (VTP), biomassa fresca total (BFTP) e biomassa seca total da planta (BSTP). No ensaio de variabilidade foram utilizados 44 isolados de M. cannonballus, na densidade de inóculo de 10 ufc/g de solo. No levantamento da FI, prevalências elevadas (100%) foram constatadas para Fusarium solani e Macrophomina phaseolina, enquanto valores menores foram verificados para Rhizoctonia solani (40%), M. cannonballus (30%) e Sclerotium rolfsii (30%). Fusarium solani e M. phaseolina apresentaram FI similares, variando de 1,6 a 60,0%, enquanto M. cannonballus apresentou FI de 0,0 a 71,1%, R. solani de 0,0 a 18% e S. rolfsii de 0,0 a13,3%. As FI de F. solani e M. cannonballus foram respectivamente superiores em meloeiros dos tipos Orange (57,1%) e Cantaloupe (40,9%), assim como em áreas com um ou dois anos (45,4%) e com mais de cinco anos (48,2%) de cultivo. As FI de F. solani e M. cannonballus correlacionaram-se inversamente entre si (r = -0,79), sendo estas influenciadas pela quantidade de Bacillus spp. presente no solo (r = -0,71 e 0,80, respectivamente). A FI de M. phaseolina correlacionou-se com o teor de fósforo (r = 0,68), a FI de R. solani com o grau de floculação (r = 0,67), capacidade de campo (r = -0,81), pH (r = -0,75), teor de alumínio (r = 0,85) e acidez total (r = 0,69), enquanto a FI de S. rolfsii correlacionou-se com o ponto de murcha permanente (r = -0,78) e a água disponível no solo (r = 0,75). As curvas de progresso da SD, CP, A1FD, A2FD e AFA, em função das densidades de inóculo, foram ajustadas pelo modelo não-linear logístico dose-resposta. Baixas densidades de inóculo (0,1; 0,5 e 1 ufc/g de solo) produziram elevados níveis deSD, que variaram de 15,6 a 53,1%. Densidades entre 20 e 50 ufc/g de solo não aumentaram substancialmente a SD. No ensaio com diferentes isolados de M. cannonballus, o conjunto das variáveis analisadas propiciou a separação de três grupos de similaridade, ficando evidente a variabilidade dos isolados dentro de uma mesma área e entre áreas. Elevados coeficientes de correlação e determinação confirmaram o ajuste da SD com A1FD, A2FD e AFA nos dois ensaios, demonstrando o potencial de utilização destas variáveis para quantificar o colapso do meloeiro.