Made available in DSpace on 2017-05-12T14:48:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ionete Lucia Milani Barzotto.pdf: 417240 bytes, checksum: e5dbf1481e59ec3d55e125fe1dd6cedf (MD5) Previous issue date: 2010-07-02 / The Paraguay tea (Ilex paraguariensis) is a plant of economic importance to Brazil, mainly to the southern states, where most production and consumption. The leaves are industrialized aiming at preparing tea, mate, soluble powder, and the obtaining of active pharmaceuticals and cosmetics. The Gyropsylla spegazziniana (Hemíptera: Psyllidae) is considered a pest of Paraguay tea, since it causes hypertrophy of new leaves, giving rise to a symptom known as "Paraguay tea bulb , a structure that houses the nymphs, which feed this site until close to adulthood. The damaged leaves usually fall and reduce crop yield. As the Paraguay tea is consumed practically 'in natura', the use of chemicals is not recommended. The use of insecticidal plants is an alternative for pest control of this culture as it does not pose risks to the environment or to humans. The objective of this study was to test the efficiency of extracts of Eucalyptus spp., Azadirachta indica, Melia azedarach, Cymbopogon citratus, Chrysanthemum spp, Trichilia pallida, Leucaena leucocephala, Chenopodium ambrosioides and Annona squamosa for the control of G. spegazziniana in laboratory conditions. In order to do an initial screening were tested ethanol extracts of 25% aqueous to 20%, and a commercial product based on neem seed (Organic Neem ®), 10%, and selected the ones that caused at least 50 % mortality. The control does not receive any treatment. The extracts were sprayed prior and subsequent to infestation of insects on test plants or twigs of Paraguay tea. In the first stage, the only effective treatment in prior spray was 20% aqueous extract of Chrysanthemum spp (85%). The alcoholic extracts of 25%, using the same method showed better results: A. squamosa (93.6%), T. pallida (90.4%), C. citratus (58.2%), Eucalyptus spp (51.6%) and M. azedarach (64.5%). In the method of spraying later, Eucalyptus spp, and M. azedarach aqueous, with 77.7% and 70.5% respectively, showed potential for insect control. L. leucocephala (100%), Chrysanthemum spp 85.5%), C. citratus (55.5%), A. squamosa (51.6%), C. ambrosioides (55.5%) alcoholics were more effective. After dilution to 10%, only the extract of C. citratus alcoholic and the commercial product, with the method of spraying later showed potential insecticidal, with a mortality rate above 50%. / A erva-mate (Ilex paraguariensis) é uma planta de importância econômica para o Brasil, principalmente para os estados da região Sul, onde se concentram a produção e consumo. As folhas são industrializadas visando ao preparo de chás, chimarrão, pó solúvel, bem como à obtenção de princípios ativos farmacêuticos e cosméticos. A Gyropsylla spegazziniana (Hemíptera: Psyllidae) é considerada uma das principais pragas da erva-mate, pois causa hipertrofia de folhas novas, dando origem ao sintoma conhecido com ampola-da-erva-mate , estrutura que abriga as ninfas, que se alimentam neste local, até próximo da fase adulta. As folhas danificadas geralmente caem e reduzem o rendimento da cultura. Sendo a erva-mate consumida praticamente in natura, o uso de agroquímicos não é recomendado. O emprego de plantas inseticidas é alternativa para o controle das pragas desta cultura, já que não oferecem riscos ao ambiente nem ao ser humano. Assim, o objetivo do presente trabalho foi testar a eficiência de extratos de Eucalyptus spp., Azadirachta indica, Melia azedarach, Cymbopogon citratus, Chrysanthemum spp., Trichilia pallida, Leucaena leucocephala, Chenopodium ambrosioides e Annona squamosa no controle de G. spegazziniana, em condições de laboratório. Para fazer uma seleção inicial, foram testados extratos etanólicos a 25%, aquosos a 20%, e um produto comercial à base de sementes de neem (Organic neem®), a 10% e foram selecionados os que causaram, no mínimo, 50% de mortalidade. O controle não recebeu tratamento algum. Os extratos foram pulverizados prévia e posteriormente à infestação dos insetos-teste nas mudas ou galhos de erva-mate. Na primeira etapa, o único tratamento eficiente, na pulverização prévia foi o extrato aquoso a 20% de Chrysanthemum spp. (85%). Os extratos alcoólicos a 25%, com a utilização do mesmo método demonstraram melhores resultados: A. squamosa (93,6%), T. pallida (90,4%), C. citratus (58,2%), Eucalyptus spp (51,6%) e M. azedarach (64,5%). No método de pulverização posterior, o Eucalyptus spp, e a M. azedarach aquosos, com 77,7% e 70,5% respectivamente, demonstraram potencial para controle do inseto. A L. leucocephala (100%), Chrysanthemum spp 85,5%), C. citratus (55,5%), A. squamosa (51,6%), C. ambrosioides (55,5%) alcoólicos foram os mais eficazes. Após a diluição a 10%, apenas o extrato de C. citratus alcoólico e o produto comercial, com o método de pulverização posterior, demonstraram potencial inseticida, com mortalidade acima de 50%.

L'utilisation de pesticides conventionnels, en particulier les pesticides chimiques de synthèse, a considérablement réduit les pertes de récoltes et a connu un succès commercial. Cependant, l'utilisation excessive de pesticides chimiques qui manquent de toxicité spécifique a provoqué une série de problèmes environnementaux et de santé publique. L'intérêt de la recherche vers de nouveaux biopesticides naturels avec de nouveaux modes d'actions vise à un meilleur équilibre entre l'efficacité des pesticides et la réduction des méfaits possibles pour l'environnement et les humains. Les plantes sont une source importante de biopesticides. Les acides chlorogéniques (CQA), isolés à partir de diverses plantes et présentent in vivo et in vitro un large spectre d'activités biologiques, ont attiré l'attention avec un potentiel comme biopesticides basé sur la toxicité brevetée de l'acide 3,5-di-O-caféoylquinique contre les larves de Myzus persicae. L'étude des propriété insecticides notamment la mode d'action et l'étude de certaines relations structure-activité pourrait bénéficier de la synthèse de différents dérivés et analogues de CQA. Des analogues des acides 4-désoxy-3,5-dicinnamoy quiniques et 3,4- et 4,5-dicinnamoylquiniques naturels ont été synthétisés. Sept analogues dans la série 4-désoxy ont été soumis à des essais insecticides et deux composés présentent une activité insecticide plus élevée que l'acide 3,5-dicaféoylquinique naturel. Comme perspectives à ce travail, confirmer l'activité des composés synthétisés sur d'autres espèces de pucerons d'importance agronomique pourrait être réalisé. De plus, d’autres collaborations avec des biologistes pourraient être établies afin d’évaluer d'autres activités des composés synthétisés ou les utiliser comme outils pour étudier des mécanismes de biosynthése. / The use of conventional pesticides, especially the synthetic chemical pesticides, has greatly reduced the crop losses and gained a commercial success. However, the excessive use of pesticides lacking toxic specificity has caused a series of environmental and public health problems. The research interest toward new naturally-occurring biopesticides with novel modes of actions aims at a better balance between the efficiency of pesticide and reducing possible harms to environment and humans. Botanicals are an important source of biopesticides. Cinnamoyl quinic acids (CQA), isolated from various plants and shown to exhibit in vivo and in vitro a wide spectrum of biological activities, have attracted the attention with potential as biopesticides based on the patented toxicity of 3,5-di-O-caffeoylquinic acid against the larvae of Myzus persicae. The investigation of the insecticidal activity of CQA including their mode of action and the study of some structure-activity relationships could benefit from the synthesis of different CQA derivatives and analogs. A series of natural CQA derivatives natural 3,4- and 4,5-dicinnmamoylquinic acid derivatives but also analogs like 4-deoxy-3,5-dicinnamoylquinic acids were so synthesized. Seven targeted 4-deoxy CQA analogs were subjected to insecticidal assays, and two compounds were found to exhibit higher insecticidal activities than natural 3,5-dicaffeoylquinic acid. As perspectives to this work, confirming the activity of the synthesized compounds on other aphid species of agronomic importance could be performed. Furthermore, other collaborations could be established with biologists dedicated to measure other bioactivities of the synthesized compounds or use them as tools to investigate various biological pathways.

Les propietats insecticides d’una sèrie d’esters d’al•lil va ésser avaluada en diferents insectes mitjançant diferents modes d’aplicació. L’acció per aplicació tòpica va variar en funció de l’ester d’al•lil aplicat. El cinamat i el naftoat d’al•lil van ser els compostos més actius front a ous i larves neonates de C. pomonella, G. molesta i L. botrana, mentre que el salicilat d’al•lil no va produir mortalitat a la major dosi assajada (10 mg/mL). El cinamat d’al•lil va ser l’únic ester actiu per aplicació tòpica en adults de A. pisum, mentre que tots els esters d’al•lil testatsvan ser actius en adults de T. castaneum. Els esters d’al•lil assajats van produir una pèrdua de la viabilitat cel•lular en les línees cel•lulars d’insectes quan va èsser mesurda mitjançant dos metodologies diferents (MTT i Blau de tripà), degut a una disrupció de les membranes cel•lulars. El cinamat d’al•lil va ser el compost més actiu i les cèl•lules procedents de l’aparell digestiu de Choristoneura fumiferana (Lepidòpter) les més sensibles. L’acció insecticida per ingestió va ser confirmada en larves de S. littoralis i C. pomonella, i en nimfes de A. pisum, senyalant l’aparell digestiu com a principal punt d’acció dels esters d’al•lil. Els corresponents àcids i dicloropropilesters van mostrar una menor o igual acció insecticida que els corresponents esters d’al•lil, deguda també, a una acció en la membrana cel•lular. Les diferències en l’acció dels compostos seria deguda a diferències en les propietats lipofíliques dels compostos i la seva interacció amb les membranes cel•lulars. Pel que fa a l’efecte dels esters d’al•lil en la comunicació química dels insectes, aquesta va tenir lloc en T. castaneum però no en A. pisum, el que es podria utilitzar per a mantenir els productes enmagatzemats lliures de T. castaneum. Pel que fa a C. pomonella i a L. botrana, tots els esters d’al•lil assajats van produir una resposta en les antenes dels mascles de C. pomonella, però tan sols el cinamat d’al•lil la va provocar en les femelles de C. pomonella i en mascles i femelles de L. botrana. Aquesta acció no es va veure reflexada en un increment de l’atracció de mascles cap a fonts amb l’ester d’al•lil i feromona en assajos en túnel de vent, però si en l’atracció de femelles. Aquest fet podria utilitzar-se per a incrementar el nombre de captures de femelles en trampes de feromona. Aquests resultats suggereixen un paper dels esters d’al•lil en el control de plagues, especialment del cinamat d’al•lil. / La acción insecticida de varios esteres de alilo fue testada en diversos insectos y mediante distintos modos de aplicación. La actividad por aplicación tópica varió en función del éster de alilo. El cinamato de alilo y el naftoato de alilo fueros los compuestos más activos en huevos y larvas neonatas de C. pomonella, G. molesta y L. botrana, mientras que el salicilato de alilo no produjo mortalidad a la dosis más alta testada (10 mg/mL). El cinamato de alilo fue el único éster activo por aplicación tópica en A. pisum mientras que todos los esteres testados lo fueron para T. castaneum. Los esteres de alilo estudiados produjeron pérdida de viabilidad celular en todas las líneas celulares de insectos cuando dicha viabilidad fue analizada mediante dos metodologías distintas (MTT y Azul de Tripano), y siendo ésta debida a la disrupción de la membrana celular. El cinamato de alilo fue el producto más activo, y las células del aparato digestivo de Choristoneura fumiferana (Lepidoptera) las más sensibles. La acción insecticida por ingestión en larvas de S. littoralis y C. pomonella, y en ninfas de A. pisum, fue confirmada y el aparato digestivo fue señalado como principal punto de acción de los esteres de alilo. Los correspondientes ácidos y dicloropropilesteres presentaron una menor o igual acción insecticida que los esteres de alilo siendo dicha acción también debida a un efecto en la membrana celular. Las diferencias en la acción de los distintos compuestos podrían ser debidas a diferencias en las propiedades lipofílicas de los compuestos y su interacción con las membranas celulares. Los esteres de alilo produjeron un efecto en la comunicación química de T. castaneum pero no en A. pisum, lo que podría utilizarse para mantener los productos almacenados libres de T. castaneum. En cuanto a C. pomonella y L. botrana, todos los esteres de alilo probados produjeron una respuesta en las antenas de los machos de C. pomonella, mientras que tan solo el cinamato de alilo la produjo en las antenas de hembras de C. pomonella y en machos y hembras de L. botrana. Esta respuesta no se tradujo en un aumento de la atracción de machos hacia cebos con mezclas de ester de alilo y feromona en ensayos de túnel de viento, pero si aumentó el número de hembras atraídas. Este hecho podría utilizarse par incrementar el número de hembras capturadas en trampas de feromona. Estos resultados, sugieren el papel de los esteres de alilo en el control de plagas, especialmente del cinamato de alilo.

Le moustique tigre Aedes albopictus, pur produit de la mondialisation, s’est installé en Europe dans les années 1970s, et en région PACA en 2004, grâce au transport intercontinental de ses œufs, capables de résister à la dessiccation et d’effectuer une diapause. Ce moustique est capable de transmettre 27 virus comme la dengue, zika et chikungunya. Le premier objectif du présent travail a été l’étude des aspects biologique d’Ae. albopictus dans son milieu naturel dans une région où il s’est implanté depuis plus de 10 ans, à Nice au sud-est de la France. Nous avons utilisé différentes méthodes de captures : les pièges pour adultes BGs ®, les pièges pondoirs avec une infusion de foin pour la récolte des œufs ainsi que la capture sur Homme, afin d’apprécier la densité de ce moustique, ses fluctuations spatiotemporelles et les taux de parturité des femelles. Les deux années de l’étude de la dynamique saisonnière ont montrés un début d’activité des moustiques au mois d’avril atteignant un pique d’activité en Juillet-Août et diminuant par la suite jusqu'à ce que l'activité a cessé au mois de novembre. Nous avons enregistré des taux de parturité élevées qui se sont stabilisés entre 0,52 et 0,71 entre le mois de juin et octobre respectivement. Ces taux de parturités indiquent un taux de survie élevé qui pourrait être encore supérieur à cause du comportement de skip oviposition des femelles Ae. albopictus. De plus nous avons mis en évidence un taux important de femelles gravides (jusqu’à 44 %) capturées sur Homme indiquant une prise de repas multiples durant un même cycle gonotrophique. L'objectif principal de ce travail a été d'évaluer l'efficacité des pulvérisations spatiales d’Ultra Bas Volume (UBV) d’insecticides, la principale méthode utilisée dans le cas de foyers urbains. La population locale d’Ae. albopictus a montré une forte sensibilité à la deltaméthrine (le seul insecticide homologué pour lutter contre les moustiques adultes en France) bien que les mâles ont été beaucoup plus sensible que les femelles. Une comparaison des résultats par application topique et par les tests en tube OMS a confirmé que cette différence a été due à la plus petite taille des mâles par rapport aux femelles. Durant six essais sur le terrain, on n’a obtenu aucun impact significatif des traitements UBV de deltaméthrine sur les femelles, bien qu'il y ait eu une réduction significative des mâles. En revanche, le traitement par thermonébulisation autour d’un petit groupe de maisons a permis une quasi-élimination (95%) des moustiques mâles et femelles. Ces résultats apportent un élément de réponse sur les stratégies à mener en santé publique. Enfin, l'efficacité de plusieurs formulations de peintures insecticides issues de la technologie de microencapsulation ont été testée dans des conditions de laboratoire et de terrain. Les résultats ont été encourageants et les tests ont démontré que les peintures à base d’organophosphorés ont une rémanence de 2 ans. Le but ultime était d'utiliser des pièges pondoirs traités avec ces peintures insecticides comme une méthode de contrôle: en théorie, cette méthode vise l’exploitation du comportement de skip oviposition qui oblige les femelles à déposer leurs œufs sur plusieurs gîtes différents augmentant la probabilité pour que celles-ci rencontrent un piège pondoir traité avec un insecticide. Dans un petit essai sur le terrain, cependant, aucun impact sur la population sauvage n’a été observé. Nous discutons de cette méthode ainsi que de son intérêt face à la menace toujours grandissante liée à la propagation continuelle d’Ae. albopictus à travers le monde. / The Asian Tiger mosquito, Aedes albopictus, first appeared in Europe in the 1970s,almost certainly a result ofintercontinental transport of its dessication-resistant eggs. In the laboratory,the species is capable of transmitting 27 viruses including Yellow Fever, dengue, chikungunya and zika, although in the field it is not considered an efficient vector because it is not host-specific.The first objective of our studies was to monitor aspects of the biology of the species in Nice (southeastern France), where it has been established for more than 10 years. Infusion-baited ovitraps, B-G® adult traps and human landing captures were used to reveal seasonal population fluctuations, parous rates and other parameters. In two complete years of study, adult mosquitoes began to appear in April, reached a plateau in July-August and declined thereafter until activity ceased in November. Parous rates were stable from June to October (0,52 to 0,71%) indicating a balance between recruitment (eclosion) and mortality. During this period, daily survival probability was high although this may be an underestimate if the duration of the gonotrophic cycle is extended by skip oviposition. Up to 44% of females captured by landing capture were gravid, confirmation of multiple blood-meals per gonotrophic cycle.The main focus of the work was an assessment of the efficacy of Ultra-low Volume (ULV) space sprays, the principal method used in the event of urban outbreaks. The local population proved highly susceptible to deltamethrin (the only insecticide approved for adult mosquito control in France) although femaleswere significantly less susceptible than males. A comparison of results by topical application and by the WHO tube test confirmed this difference is a function of size. In six separate field trials,there was no evidence of any impact of ULVdeltamethrin on females although there was a significant reduction of males. By contrast, outdoor treatment of a small cluster of homes with a portable thermal fogger gave virtual elimination (ca. 95%) of both sexes.These results are clearly of public health significance.Lastly, the efficacy of several slow-release formulations of microencapsulated insecticide in paint was tested in laboratory and semi-field conditions. Results were encouraging and tests demonstrated that the paints remained effective for 24 months on plastic surface. The ultimate goal was to use paint-treated ovitraps as a control method: in theory, skip ovipositon should ensure a high probability that ovipositing females will make contact with a treated trap on their rounds of suitable oviposition sites. In a small field trial, however, no impact on the wild population was observed. This may have been because too few treated traps were deployed; further studies along these lines could prove worthwhile.

BEZERRA, Walderly Melgaço. Expressão de uma proteína YD de Chromobacterium violaceum em sistemas heterólogos: potencial no controle de pragas e fungos. 2008. 53 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2008. / Submitted by Eric Santiago (erichhcl@gmail.com) on 2016-07-19T11:44:51Z No. of bitstreams: 1 2008_dis_wmbezerra.pdf: 488580 bytes, checksum: 8867bb56552a329eb81d971c78c66730 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-08-02T20:26:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_dis_wmbezerra.pdf: 488580 bytes, checksum: 8867bb56552a329eb81d971c78c66730 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-02T20:26:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_dis_wmbezerra.pdf: 488580 bytes, checksum: 8867bb56552a329eb81d971c78c66730 (MD5) Previous issue date: 2008 / Chromobacterium violaceum is a free-living betaproteobacterium, which is found in the water and soil environments of tropical and subtropical regions. C. subtsugae, another species of the same genus, is toxic towards insects belonging to several orders. Among the genes that may be involved in the insecticidal activity displayed by these bacteria are those that encode chitinases. In addition to these chitinases, a protein containing YD repeats with potential insecticidal activity, encoded by the gene cv2776, was also identified in the genome of C. violaceum ATCC 12472. Similar proteins have also been found in the genomes of Xenorhabdus bovienii and Photorhabdus luminescens. The YD motif comprises 20 amino acids, with the consensus sequence Gx3-9YxYDx2GR(L, I or V)x3-10G, where x represents any amino acid. The protein TccC, from P. luminescens, has nine YD repeats in its sequence, as well as the protein SepC, from Serratia entomophila. SepC, along with two other toxins, SepA and SepB, are able to cause the "amber" disease in Costelytra zealandica (Coleoptera: Scarabaeidae). In the present work, the DNA coding seuquence of the gene cv2776 of C. violaceum ATCC 12472 was cloned in two different heterologous systems. In Escherichia coli, the coding sequence was expressed under control of the promoter araBAD, induced by L-arabinose. The protein rCV2776 was detected by imunoblotting in the insoluble fraction of induced E. coli cells. The rCV2776 present in the total insoluble cell fraction caused the death of Callosobruchus maculatus larvae, reducing the number of emerged adults in 78% and also decreasing the average weight of the insects. The E. coli cell fraction containing the recombinant protein also affected the vegetative growth of the phytopatogenic fungi Macrophomina phaseolina, Rhizoctonia solani and Sclerotium rolfsii. When the fraction containing rCV2776 was incorporated at 1.% (w/v) in the medium, the inhibition percentages of the mycelium growth were 38.5% (R. solani), 60.7% (M. phaseolina) and 71.1% (S. rolfsii). In the yeast Pichia pastoris, the coding sequence was expressed under the control of the promoter PAOX, which is induced by methanol as the sole carbon source. When expressed in P. pastoris, the recombinant protein was apparently degraded by endogenous proteases and could not be detected by SDS-PAGE or Western Blotting, even when 8 mg of protein was loaded into the gel. In conclusion, the recombinant protein CV2776 present in the insoluble fraction of induced E. coli cells was effective in controlling the emergence of the cowpea weevil, as well as slowing the growth of M. phaseolina and S. rolfsii / Chromobacterium violaceum é uma betaproteobactéria de vida livre encontrada em regiões tropicais e subtropicais. C. subtsugae, bactéria do mesmo gênero, possui atividade tóxica contra insetos de diversos gêneros. Entre os genes que podem estar envolvidos no potencial inseticida dessa bactéria, destacam-se aqueles que codificam quitinases. Em adição, identificou-se também no genoma de C. violaceum ATCC 12472 uma proteína contendo repetições YD com potencial atividade inseticida, codificada pelo gene cv2776, similar àquelas produzidas por Xenorhabdus bovienii e Photorhabdus luminescens. O motivo YD compreende 20 aminoácidos, com sequência consenso Gx3-9YxYDx2GR(L, I ou V)x3-10G (x representa qualquer aminoácido). A proteína TccC, de P. luminescens, possui 9 repetições YD, assim como a proteína SepC, de Serratia entomophila. SepC, juntamente com outras duas toxinas, SepA e SepB, são suficientes para causar a doença “âmbar” em Costelytra zealandica (Coleoptera: Scarabaeidae). No presente trabalho, a região codificadora do gene cv2776 de C. violaceum ATCC 12472 foi clonada em dois diferentes sistemas de expressão heteróloga. Em Escherichia coli, o gene foi expresso sob controle do promotor araBAD, induzido por L-arabinose. A proteína rCV2776 foi detectada por ensaio de imunoblotting na fração insolúvel das células de E. coli induzidas. A rCV2776 presente na fração insolúvel das células dessa bactéria teve efeito letal sobre larvas de Callosobruchus maculatus, diminuindo em até 78% o número de insetos adultos emergidos, além de diminuir o peso médio desses insetos. Além disso, a fração celular de E. coli contendo rCV2776 mostrou-se capaz de inibir o crescimento vegetativo de três fungos fitopatogênicos, Macrophomina phaseolina, Rhizoctonia solani e Sclerotium rolfsii. Quando incorporada no meio de cultura em uma concentração de 1% (m/v), essa fração causou percentuais de inibição de crescimento do micélio de 38.5% (R. solani), 60.7% (M. phaseolina) e 71.1% (S. rolfsii), respectivamente. Na levedura Pichia pastoris, a região codificadora foi expressa sob controle do promotor PAOX, que é induzido na presença de metanol como única fonte de carbono. Quando expressa em P. pastoris, a proteína recombinante foi aparentemente degradada por proteases endógenas, e não pôde ser detectada em análises de SDS-PAGE ou Western Bloting, mesmo quando foram aplicados 8,0 mg do sobrenadante concentrado e liofilizado no gel de eletroforese. Em conclusão, a proteína rCV2776 presente na fração insolúvel das células de E. coli induzidas foi efetiva em controlar a emergência do caruncho do feijão-de-corda, bem como em retardar o crescimento de M. phaseolina e S. rolfsii

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-12-03Bitstream added on 2014-06-13T20:14:46Z : No. of bitstreams: 1 marucci_sc_me_jabo_parcial.pdf: 42548 bytes, checksum: 705ccf6a74fac7e11f4cb25dc8fb9403 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-01-16T10:37:51Z: marucci_sc_me_jabo_parcial.pdf,Bitstream added on 2015-01-16T10:38:35Z : No. of bitstreams: 1 000638549.pdf: 1096070 bytes, checksum: 93634385c53868612602ba315f79ea43 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Como uma alternativa para diminuir as agressões constantes que o ecossistema vem sofrendo, devido à grande quantidade de produtos químicos utilizados no controle de pragas, pesquisas envolvendo microrganismos capazes de promover o controle biológico tem se intensificado. Dentre estes microrganismos a bactéria Bacillus thuringiensis tem se destacado. Essa bactéria caracteriza-se pela produção de proteínas tóxicas a representantes de diversas ordens de insetos. Em particular, as proteínas Vip3A, estão em amplo estudo devido a sua especificidade, alto potencial ativo e como alternativa para o controle da resistência de insetos às proteínas Cry. Diante disto, o objetivo deste trabalho foi selecionar, a partir de 1080 isolados de diferentes regiões brasileiras, aqueles portadores de genes vip3A e obter a sequência de nucleotídeos completa dos mesmos. As linhagens padrão B. thuringiensis var. kurstaki HD1, B. thuringiensis var. tolworthi HD125 e o isolado I187 tiveram seus DNAs amplificados com oligonucleotídeos baseados na sequência de genes vip3A, descritos no banco de dados de B. thuringiensis e, a partir dos amplicons obtidos, a sequência completa de nucleotídeos dos mesmos foi determinada, utilizando-se da estratégia de “primer walking”. A proteína Vip3Aa43 (GenBank: [HQ594534]) da linhagem HD1 demonstrou ser 100% idêntica às proteínas Vip3Aa já descritas. Já as proteínas Vip3Aa42 (GenBank: [HQ587048]) da linhagem HD125 e Vip3Ag5 (GenBank: [HQ542193]) do isolado I187 demonstraram similaridade de 99% com as proteínas descritas Vip3Aa35 e Vip3Ag2, respectivamente, demonstrando serem duas novas proteínas Vip3A, devido às substituições de aminoácidos ocorridas. Os três genes vip3A obtidos poderão ser utilizados na produção de plantas Bt, piramidadas ou não, visando ao manejo da resistência dos insetos praga / As an alternative to decrease the constant aggressions that the ecosystem has suffered due to the large amount of chemical products used in pest control, researches involving microorganisms able to promoting biological control have been intensified. Among these microorganisms the bacterium Bacillus thuringiensis has been stood out. This bacterium is characterized by the production of toxic proteins to representatives of several insect orders. In particular, the Vip3A proteins are in large study due to its specificity, and high active potential as an alternative to control of insect's resistance to Cry proteins. According to this, the aim of this work was to select from 1080 isolates in different Brazilian regions, those carrying vip3A genes and obtain the complete nucleotide sequence of the same. The standard strains B. thuringiensis var. kurstaki HD1, B. thuringiensis var. tolworthi HD125 and the isolate I187 had their DNA amplified with primers based on vip3A gene sequence described in database of B. thuringiensis, and from the amplicons obtained, the full sequence of nucleotides was determined, by the use of the strategy of primer walking. The protein Vip3Aa43 (GenBank: [HQ594534]) of HD1 strain showed to be 100% identical to Vip3Aa proteins already described. However, the proteins Vip3Aa42 (GenBank: [HQ587048]) of HD125 strain and Vip3Ag5 (GenBank: [HQ542193]) of the isolate I187 showed 99% similarity with the Vip3Aa35 and Vip3Ag2 proteins described, respectively, showing been two new Vip3A proteins due to amino acid substitutions occurred. The three vip3A genes obtained can be used in the production of Bt crops, pyramidal or not, aiming to resistance management of pest insects

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:34:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-11-23Bitstream added on 2014-06-13T21:06:55Z : No. of bitstreams: 1 silva_ms_dr_botfca_parcial.pdf: 108164 bytes, checksum: d68001729db5053bed2b159ba207c838 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-02-04T11:39:25Z: silva_ms_dr_botfca_parcial.pdf,Bitstream added on 2015-02-04T11:40:11Z : No. of bitstreams: 1 000704452.pdf: 484663 bytes, checksum: 5f24424ed15ce2f1afdf1664ac21e877 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / As formigas-cortadeiras são insetos sociais de grande importância agrícola devido ao seu ataque danoso aos diversos sistemas produtivos. Pertencem à tribo Attini e cultivam um fungo simbionte utilizado como alimento, a qual é considerada uma grande comunidade microbiana. Entretanto, estudos sobre o efeito da aplicação de ingredientes ativos em operárias isoladas e colônias de A. sexdens rubropilosa têm sido frequentes, mas não tem apresentado resultados satisfatórios para serem empregados no controle destes insetos. Sendo assim, o trabalho teve como objetivos: (1) avaliar o efeito de ingredientes ativos de formicidas comerciais sobre a micota de A. sexdens rubropilosa; (2) avaliar a toxicidade tópica de novos ingredientes ativos em operárias de A. sexdens rubropilosa; (3) avaliar a mortalidade de operárias de A. sexdens rubropilosa após o processo de fotólise de diafentiuron; (4) avaliar o efeito de diafentiuron adicionado em isca granulada após o processo de fotólise em colônias de A. sexdens rubropilosa. Foram utilizadas colônias de laboratório submetidas aos diferentes experimentos com aplicação de ingredientes ativos. Desta forma, obtiveram-se os seguintes resultados: (1) houve prevalência do fungo simbionte, demostrando que não ocorre o sinergismo quando se aplica isca formicida; (2) diafentiuron apresentou ação tópica retardada, mostrando-se um ingrediente ativo promissor para iscas tóxicas; (3) após o processo de fotólise, diafentiuron apresentou mortalidade de operárias acima de 80% entre o terceiro e quinto dia após a aplicação; (4) tratamentos contendo diafentiuron (2h e 6h) conseguiram reduzir o corte de folhas e a massa do jardim de fungo, mas não levaram as colônias de A. sexdens rubropilosa à morte / Leaf-cutting ants are social insects of agricultural importance due to its damaging attack to the various production systems. These insects Attini and cultivate a symbiotic fungus for food, which is considered a major microbial community. However, studies on the effect of active ingredients in isolated workers and colonies of A. sexdens rubropilosa have been frequent, but have not shown satisfactory results to be used to control these insects. Thus, the study aimed to: (1) evaluate the effect of active ingredients of formicides commercials on the mycota of A. sexdens rubropilosa, (2) evaluate the toxicity of new active topical ingredients on workers of A. sexdens rubropilosa, (3) evaluate the mortality of A. sexdens rubropilosa workers after the process of photolysis of diafenthiuron, (4) evaluate the effect of diafenthiuron added to granulated bait after the process of photolysis in A. sexdens rubropilosa colonies. We used laboratory colonies submitted to different experiments with application of active ingredients. Thus, the following results were obtained: (1) there was prevalence of symbiotic fungus, demonstrating that no synergism occurs when applying formicidal bait; (2) diafenthiuron showed topical delayed action , showing a promising active ingredient for toxic baits; (3) after the process of photolysis, diafenthiuron show mortality of workers above 80% between the third and fifth day after application; (4) treatments containing diafenthiuron (2 and 6h) managed to reduce the cutting leaves and mass of the fungus garden, but led the colonies of A. sexdens rubropilosa to death

Made available in DSpace on 2015-04-01T14:16:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 5234352 bytes, checksum: 404f7b4f1ab797fa6090d6cd85ee8163 (MD5) Previous issue date: 2013-08-16 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Plants are sessile organisms susceptible to biotic and abiotic stresses. Insect herbivore attacks are factors that affect their survival and development. To defend themselves, plants produce and release chemical compounds, such as non protein amino acids, that negatively affect the development processes of their attackers, as well as use phytohormones that regulate defense responses against herbivory. In the present work, we seek to understand in depth the insecticidal activity related to ConM, a lectin isolated from beach bean seeds (Canavalia maritima Aub.), through their crystal structure analysis in complex with the non protein amino acid GABA (gamma-aminobutyric acid) and adenine, a nitrogen base-precursor of cytokinins, phytohormones involved in defense responses against insect herbivores. In this way, we co-crystallized ConM with GABA and soaked the derived crystals into an adenine 5mM solution. It was viewed through ConM monomeric model that GABA stabilization occurs through interactions displayed with amino acid residues that participate in the coordination of its isomer alpha-aminobutyric acid (Abu). In the other hand, adenine molecule displays interactions with amino acid residues from ConM Carbohydrate Recognition Domain due ahydrophobic pocket adjacently localized to this ligand-binding site and formed from a secondary non repetitive structure of β-bulge. A dimeric model of ConM reveals that lectin insecticidal activity is related to conformational changes of Gln132, resulting in GABA release without quaternary structure change. Hence, the presented results might contribute to greater understanding of lectins interactions with different chemical ligands, helping their application as biotechnological tools. / Plantas são organismos sésseis que encontram-se susceptíveis a estresses bióticos e abióticos. O ataque de insetos herbívoros é um fator que afeta sua sobrevivência e seu desenvolvimento. Como defesa, estes organismos são capazes de produzir e liberar compostos químicos, como aminoácidos não proteicos, que interferem no desenvolvimento dos insetos agressores, e utilizam fitohormônios para regular suas respostas de defesa. No presente trabalho, buscamos entender o papel inseticida da ConM, uma lectina isolada de sementes do feijão-de-praia (Canavalia maritima Aub.), a partir da análise de sua estrutura tridimensional em complexo com o aminoácido não proteico GABA (ácidogama-aminobutírico) e com a base nitrogenada adenina, precursora das citocininas, fitohormônios envolvidos com processos de defesa contra insetos herbívoros. Para tanto, resolvemos a estrutura cristalográfica da ConM co-cristalizada com o GABA e soaked com a adenina 5mM. O modelo monomérico da lectina mostrou que o GABA encontra-se coordenado por interações com resíduos de aminoácidos previamente reportados como sendo participantes da estabilização do ácido alfaaminobutírico (Abu). A adenina, por outro lado, é estabilizada por interações com resíduos constituintes do domínio de reconhecimento a carboidrato da ConM, o que pode ser explicado pela presença de uma região hidrofóbica adjacente a este sítio, formada por uma estrutura secundária não repetitiva do tipo β-bulge. Um modelo dimérico da ConM revela que a atividade inseticida de lectinas está relacionada com mudanças conformacionais da Gln132, permitindo que o GABA seja liberado sem alteração da estrutura quaternária. Assim, os resultados aqui apresentados podem contribuir para um maior entendimento acerca da capacidade de interação de lectinas vegetais com diferentes tipos de ligantes, facilitando sua utilização como ferramenta biotecnológica.

Orientador: Luiz Carlos Forti / Coorientador: Nilson Satoru Nagamoto / Banca: Carlos Gilberto Raetano / Banca: Andre Rodrigues / Banca: Maria Aparecida Castellani / Banca: Vania Maria Ramos / Resumo: As formigas-cortadeiras são insetos sociais de grande importância agrícola devido ao seu ataque danoso aos diversos sistemas produtivos. Pertencem à tribo Attini e cultivam um fungo simbionte utilizado como alimento, a qual é considerada uma grande comunidade microbiana. Entretanto, estudos sobre o efeito da aplicação de ingredientes ativos em operárias isoladas e colônias de A. sexdens rubropilosa têm sido frequentes, mas não tem apresentado resultados satisfatórios para serem empregados no controle destes insetos. Sendo assim, o trabalho teve como objetivos: (1) avaliar o efeito de ingredientes ativos de formicidas comerciais sobre a micota de A. sexdens rubropilosa; (2) avaliar a toxicidade tópica de novos ingredientes ativos em operárias de A. sexdens rubropilosa; (3) avaliar a mortalidade de operárias de A. sexdens rubropilosa após o processo de fotólise de diafentiuron; (4) avaliar o efeito de diafentiuron adicionado em isca granulada após o processo de fotólise em colônias de A. sexdens rubropilosa. Foram utilizadas colônias de laboratório submetidas aos diferentes experimentos com aplicação de ingredientes ativos. Desta forma, obtiveram-se os seguintes resultados: (1) houve prevalência do fungo simbionte, demostrando que não ocorre o sinergismo quando se aplica isca formicida; (2) diafentiuron apresentou ação tópica retardada, mostrando-se um ingrediente ativo promissor para iscas tóxicas; (3) após o processo de fotólise, diafentiuron apresentou mortalidade de operárias acima de 80% entre o terceiro e quinto dia após a aplicação; (4) tratamentos contendo diafentiuron (2h e 6h) conseguiram reduzir o corte de folhas e a massa do jardim de fungo, mas não levaram as colônias de A. sexdens rubropilosa à morte / Abstract: Leaf-cutting ants are social insects of agricultural importance due to its damaging attack to the various production systems. These insects Attini and cultivate a symbiotic fungus for food, which is considered a major microbial community. However, studies on the effect of active ingredients in isolated workers and colonies of A. sexdens rubropilosa have been frequent, but have not shown satisfactory results to be used to control these insects. Thus, the study aimed to: (1) evaluate the effect of active ingredients of formicides commercials on the mycota of A. sexdens rubropilosa, (2) evaluate the toxicity of new active topical ingredients on workers of A. sexdens rubropilosa, (3) evaluate the mortality of A. sexdens rubropilosa workers after the process of photolysis of diafenthiuron, (4) evaluate the effect of diafenthiuron added to granulated bait after the process of photolysis in A. sexdens rubropilosa colonies. We used laboratory colonies submitted to different experiments with application of active ingredients. Thus, the following results were obtained: (1) there was prevalence of symbiotic fungus, demonstrating that no synergism occurs when applying formicidal bait; (2) diafenthiuron showed topical delayed action , showing a promising active ingredient for toxic baits; (3) after the process of photolysis, diafenthiuron show mortality of workers above 80% between the third and fifth day after application; (4) treatments containing diafenthiuron (2 and 6h) managed to reduce the cutting leaves and mass of the fungus garden, but led the colonies of A. sexdens rubropilosa to death / Doutor

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-28T15:28:48Z No. of bitstreams: 1 NicolleRibeiro.pdf: 712752 bytes, checksum: ab82a73b9089c03e3b07ca085fd8630b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-28T15:28:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 NicolleRibeiro.pdf: 712752 bytes, checksum: ab82a73b9089c03e3b07ca085fd8630b (MD5) Previous issue date: 2010-02-01 / The cultures of agronomic interest suffer with great infestations of whitefly, species Bemisia tabaci biotype B. Those infestations have been promoting economic losses due to the direct and indirect damages. The direct damages are characterized by the appearance of physiologic anomalies with alterations in the vegetative and reproductive development of the cultures. On the other hand, the indirect damages show for the appearance of fungus saprophytic that interfere in the process photosynthetic of the plants, besides presenting the capacity to transmit diseases you turn, as the geminivirus. With relationship to the damages provoked by the whitefly biotype B, several control strategies have been adopted objectifying to minimize the agricultural losses. Seeking an alternative to the synthetic insecticides, the use of products of vegetable origin has been revealing a promising source for the control of B. tabaci biotype B. Among those vegetable products, the essential oils have been presenting promising results with relationship to the effects in the repellence, inhibition of the feeding and of the growth, alterations in the sexual behavior, the adults' sterilization, mortality in the immature or adult phase, amongother characteristics for the control of the pest. This work objectified to evaluate the insecticide potential of the essential oil of the peel of six species of Citrus, cultivated in Santana of Mundaú - AL, on B. tabaci biotype B. The oil of C. limon promoted 97% of mortality in the concentrationof 4.5μL/L of air. The values of the CL50 of the oils of Citrus and eugenol varied of 0.20 to 5.80 μL/L of air. The minimum concentrations of oil tested to promote the oviposition deterrence were: 1.0; 3.0; 3.5; 3.7 and 7.0μL/L of air of the oil of C. reticulata, C. sinensis x C. reticulata, C. aurantium, C. limon and C. sinensis, respectively. With base in the biological potential of the oils of Citrus, the accomplishment of investigative studies facilitated to verify that the activity fumigant of those oils essential is promising for the control of the B. tabaci. / As culturas de interesse agronômico sofrem com grandes infestações de mosca-branca, espécie Bemisia tabaci biótipo B. Essas infestações têm promovido perdas econômicas devido aos danos diretos e indiretos. Os danos diretos se caracterizam pelo aparecimento de anomalias fisiológicas com alterações no desenvolvimento vegetativo e reprodutivo das culturas. Por outro lado, os danos indiretos se manifestam pelo aparecimento de fungos saprófitas que interferem no processo fotossintético das plantas, além de apresentar a capacidade de transmitir doenças virais, como o geminivírus. Com relação aos danos provocados pela mosca-branca biótipo B, várias estratégias de controle têm sido adotadas objetivando minimizar as perdas agrícolas. Visando uma alternativa aos inseticidas sintéticos, o uso de produtos de origem vegetal tem se revelado uma fonte promissora para o controle de B. tabaci biótipo B. Entre esses produtos vegetais, os óleos essenciais têm apresentado resultados promissores quanto aos efeitos na repelência, inibição da alimentação e do crescimento, alterações no comportamento sexual, esterilização dos adultos, mortalidade na fase imatura ou adulta, entre outras características para o controle dapraga. Este trabalho objetivou avaliar o potencial inseticida do óleo essencial da casca de seis espécies de Citrus, cultivados em Santana do Mundaú - AL, sobre B. tabaci biótipo B. O óleo de C. limon promoveu 97% de mortalidade na concentração de 4,5μL/L de ar. Os valores das CL50dos óleos de Citrus e eugenol variaram de 0,20 a 5,80μL/L de ar. As concentrações mínimas de óleo testado para promover a deterrência de oviposição foram: 1,0; 3,0; 3,5; 3,7 e 7,0μL/L de ar do óleo de C. reticulata, C. sinensis x C. reticulata, C. aurantium, C. limon e C. sinensis, respectivamente. Com base no potencial biológico dos óleos de Citrus, a realização de estudos investigativos possibilitou verificar que a atividade fumigante desses óleos essenciais são promissores para o controle da B. tabaci.