O uso de inseticidas em um agroecossistema pode interferir na densidade e ação dos inimigos naturais e comprometer a eficácia do controle biológico dentro de um programa de manejo integrado de pragas. Dessa forma, objetivou-se avaliar, em laboratório, os efeitos letal e subletais de inseticidas reguladores de crescimento sobre larvas e adultos com até 24 h de idade do predador Ceraeochrysa cubana (Hagen, 1861). Para isso, larvas recém-eclodidas foram submetidas à pulverização de 2 mL de calda, do respectivo tratamento, em torre de Potter ajustada para deposição de 1,8 ± 0,1 mg cm-2. Os inseticidas e doses (g i.a. L-1) avaliados foram: piriproxifem 0,2 (Tiger 100 EC), buprofezina 0,5 (Applaud 250), tebufenozida 0,22 (Mimic 240 SC), metoxifenozida 0,75 (Intrepid 240 SC), diflubenzurom 0,12 (Micromite 240 SC), lufenurom 0,05 (Match EC). Água destilada foi utilizada como tratamento controle. A mortalidade de larvas, pupas e adultos e o número de ovos depositados pelas fêmeas foram avaliados a cada 24 h. A viabilidade de ovos foi determinada a partir da terceira oviposição das fêmeas utilizando 100 ovos de cada indivíduo. Os efeitos letais foram observados em larvas tratadas com diflubenzurom, lufenurom e piriproxifem. Os inseticidas piriproxifem, tebufenozida, metoxifenozida e buprofezina causaram redução na fecundidade de 20 a 40% e na fertilidade de no máximo 10%, sendo considerados levemente nocivos (30<E<=79 de redução), enquanto que, diflubenzurom e lufenurom causaram 100% de mortalidade de larvas de C. cubana e foram considerados nocivos ao predador (E>99%). Não houve diferenças significativas entre os tratamentos quanto aos parâmetros taxa líquida de reprodução (Ro), taxa intrínseca de crescimento (rm) e taxa finita de aumento (?). No entanto, diferenças significativas foram constatadas no tempo médio entre gerações (T), sendo que os menores valores foram constatados nos insetos expostos aos inseticidas tebufenozida e metoxifenozida. No bioensaio com adultos, lufenurom, diflubenzurom reduziram significativamente a fecundidade e fertilidade, enquanto que, tebufenozida, metoxifenozida e buprofezina não diferiram do controle. Piriproxifem reduziu significativamente a fecundidade total, porém, não afetou a fertilidade e a longevidade. Embora inseticidas reguladores de crescimento sejam comumente considerados como seletivos, afetaram a sobrevivência e reprodução de C. cubana em condições de laboratório. Todos os inseticidas testados devem ser submetidos a ensaios de semi-campo o para confirmação dos resultados, entretanto, tebufenozida, metoxifenozida, buprofezina e piriproxifem foram considerados levemente nocivos e, consequentemente, mais indicados para utilização dentro de programas de manejo integrado de pragas envolvendo C. cubana ou outras espécies de crisopídeos. / The use of pesticides within an agricultural system can interfere with the density and functionality of natural enemies, thus endangering the efficacy of biological control in the Integrated Pest Management program. Hence, this study evaluated the lethal and sublethal effects of six Insect Growth Regulators (IGR) insecticides over the larvae and adults of Green Lacewing Ceraeochrysa cubana (Hagen, 1861) under laboratory conditions. Neonate larvae and newly-emerged adults were sprayed with the respective treatments with the aid of a Potter Tower (2 mL of spray solution, 1.8 ± 0.1 mg cm-2 of deposition). The insecticides and rates (g a.i. L-1) evaluated were: pyriproxyfen 0.2 (Tiger 100 EC), buprofezin 0.5 (Applaud 250), tebufenozide 0.22 (Mimic 240 SC), methoxyfenozide 0.75 (Intrepid 240 SC), diflubenzuron 0.12 (Micromite 240 SC), lufenuron 0.05 (Match EC) and for control, distilled water. The mortality of larvae, pupa and adults and the number of eggs laid were registered daily. The viability was assessed by observing the percentage of eclosion from 100 eggs. Lethal effects were observed in larvae treated with diflubenzurom, lufenuron and pyriproxyfen. The insecticides pyriproxyfen, tebufenozide, methoxyfenozide and buprofezin reduced fecundity from 20 to 40% and fertility at highest 10%, being considered slightly harmful (30%<E<79%), whereas diflubenzuron and lufenuron caused 100% of larvae mortality and were considered harmful (E>99%). No significant differences were found among treatments for net reproduction rate (Ro), intrinsic growth rate (rm) and finite rate of increase (?). However, significant differences were found in mean generation time (T) for methoxyfenozide and tebufenozide. For adult bioassay, lufenuron and diflubenzuron reduced significantly the fecundity and fertility, whereas tebufenozide, methoxyfenozide and buprofezin did not differ from control. Pyriproxyfen significantly reduced the fecundity, but, did not affect fertility and longevity. Although IGRs are commonly taken as selective insecticides, they reduced the survivorship and reproduction of C. cubana in laboratory conditions. All products must be directed for semi-field studies for confirmation of results, however, tebufenozide, methoxyfenozide and buprofezin were considered slightly harmful for larvae and, consequently more appropriate to use in Integrated Pest Management programs whenever C. cubana as well as other lacewing species are present.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-21T16:34:48Z No. of bitstreams: 1 Alicely Araujo Correia.pdf: 855643 bytes, checksum: 24d919a750b0f3a0eea3a19c45fac7da (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-21T16:34:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alicely Araujo Correia.pdf: 855643 bytes, checksum: 24d919a750b0f3a0eea3a19c45fac7da (MD5) Previous issue date: 2012-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / In search for efficient and low environmental impact alternatives for control of Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae), major corn insect pest, the use of botanical insecticides and insect growth regulators combined or not with biological control have been standing out. Therefore, this study tested different concentrations of the insecticides lufenuron (Match®), methoxyfenozide (Intrepid®), azadirachtin (AzaMax®), spinosad (Tracer®) and deltamethrin (Decis®), in order to evaluate the effects on S. frugiperda biology and embryology and on the egg parasitoid, Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae). All insecticides were promising for controlling S. frugiperda. Since, in general, caused mortality; reduction in larval period, pupal period, pupal weight, longevity, fecundity and fertility. In addition, S. frugiperda larvaes have presented deformities and morphological abnormalities, such as retention of larval morphological characters and constrictions of abdominal segments. Azadirachtin, lufenuron and deltamethrin, even at low concentrations, showed effect on embryo development of S. frugiperda and on egg parasitoid T. pretiosum. They have reduced the number of S. frugiperda parasited eggs, parasitism percentage and parasitoid emergence and longevity. But, the period of development from egg to adult and sex ratio of T. pretiosum were not affected. The light and scanning electron microscopy evaluation showed S. frugiperda eggs spherically shaped, slightly flattened at the poles, with chorion, yolk, vitelline membrane and embryo formation. Nevertheless, in both the microscopic analysis, after treatment with azadirachtin, lufenurom and deltamethrin, the eggs showed up deformed and unviable, preventing embryo formation. Azadirachtin, lufenuron, methoxyfenozide and spinosad at concentrations below the recommeded may be alternative to the use of pyrethroids in the control of S. frugiperda. However, azadirachtin and lufenuron are not selective to the parasitoid T. pretiosum. / Na busca de alternativas eficientes e de baixo impacto ambiental para controle de Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae), principal praga do milho, o uso de inseticidas botânicos e reguladores de crescimento associados ou não ao controle biológico vêm se destacando. Assim, a presente pesquisa testou diferentes concentrações dos inseticidas lufenurom (Match®), metoxifenozide (Intrepid®), azadiractina (AzaMax®), espinosade (Tracer®) e deltametrina (Decis®), visando avaliar os efeitos sobre a biologia e embriologia de S. frugiperda e no parasitóide de ovos, Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae). Todos os inseticidas apresentaram-se promissores no controle de S. frugiperda. Uma vez que, em geral, ocasionaram mortalidade; redução no período larval, período pupal, peso das pupas, longevidade, fecundidade e fertilidade. Além disso, as lagartas de S. frugiperda apresentaram deformidades e anormalidades morfológicas, como retenção dos caracteres morfológicos larvais e constricções dos segmentos abdominais. Azadiractina, lufenurom e deltametrina, mesmo em baixas concentrações, apresentaram efeito sobre o desenvolvimento embrionário de S. frugiperda e no parasitóide de ovos T. pretiosum. Eles reduziram a quantidade de ovos de S. frugiperda parasitados, porcentagem de parasitismo, emergência e longevidade dos parasitóides. Porém, a duração do ciclo ovo-adulto e a razão sexual de T. pretiosum não foram afetadas. A avaliação em microscopia de luz e eletrônica de varredura mostrou ovos de S. frugiperda com formato esférico, ligeiramente achatado nos polos, com córion, vitelo, membrana vitelínica e formação do embrião. No entanto, em ambas as análises microscópicas, após tratamento com azadiractina, lufenurom e deltametrina, os ovos apresentaram-se deformados e inviáveis, impedindo a formação do embrião. Azadiractina, lufenurom, metoxifenozide e espinosade, mesmo em concentrações abaixo do recomendado, podem ser alternativas ao uso dos piretróides, no controle de S. frugiperda. Todavia, azadiractina e lufenurom não são seletivos ao parasitóide T. pretiosum.

Submitted by Irene Nascimento (irene.kessia@ufpe.br) on 2016-09-12T17:52:19Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação Priscila Rafaela Leão Soares.pdf: 2736692 bytes, checksum: e5e6dccbb19782134f0827b7361fb245 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-12T17:52:19Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação Priscila Rafaela Leão Soares.pdf: 2736692 bytes, checksum: e5e6dccbb19782134f0827b7361fb245 (MD5) Previous issue date: 2016-02-25 / Capes / O lufenuron é um inseticida benzoilureia e uma substância tóxica que interfere na síntese de quitina nos insetos. Apesar do lufenuron ser um inseticida amplamente utilizado na agricultura e aquicultura, estudos relacionados aos possíveis efeitos tóxicos em diferentes grupos de animais são escassos na literatura. Este trabalho teve por objetivo avaliar os efeitos tóxicos agudo e crônico do pesticida benzoilureia (lufenuron) sobre os parâmetros biológicos de Colossoma macropomum (Tambaqui). Para realização do teste agudo, juvenis de tambaqui foram divididos em um grupo controle e cinco grupos experimentais com exposição de 0,1 a 0,9 mg/L de lufenuron por 96 h, com replicata (n = 120). Os animais também foram submetidos a teste de toxicidade crônica por quatro meses em concentrações de 0,1 e 0,3 mg/L de lufenuron, e também um grupo controle (n = 60). A última concentração corresponde a 50% da CL50 96 h (0,58 mg/L) determinada no teste agudo. A presença de hemorragias foi observada nos olhos (hifema), nas nadadeiras e nos opérculos dos peixes expostos a 0,7 e 0,9 mg/L de lufenuron no teste agudo. Análises histológicas mostraram alterações na morfologia das brânquias dos peixes submetidos ao teste de toxicidade aguda, como aneurisma lamelar e congestionamento de sangue nas lamelas. No teste crônico, a análise de glicose no sangue e os parâmetros morfométricos não apresentaram diferenças significativas pelo teste de Tukey (p > 0,05). Em geral, C. macropomum exibiram comportamentos associados ao estresse quando exposto ao lufenuron em ambos os testes. O lufenuron promoveu danos na retina dos peixes como na capacidade de responder aos estímulos nas células fotorreceptoras e ON-bipolares no teste agudo. Deste modo, o lufenuron apresentou vários efeitos tóxicos em relação aos parâmetros biológicos em C. macropomum. Esta preocupação com o uso e descarte do lufenuron indica a exigência de ações ambientais, com a mitigação, para prevenir a bioacumulação e/ou biomagnificação. / Lufenuron is a benzoylurea insecticide and a toxic substance that interfere in chitin synthesis in insects. Although lufenuron is an insecticide widely used in agriculture and aquaculture, rare are studies described in the literature that relates to possible toxic effects on different groups of animals. This work aimed to evaluate acute and chronic toxic effects of benzoylurea pesticide (lufenuron) on biological parameters of Colossoma macropomum (Tambaqui). To do the acute test, Tambaqui juveniles were divided into a control group and five experimental groups with exposure to from 0.1 to 0.9 mg/L of lufenuron for 96 h, with replicate (n = 120). Animals were also submitted to chronic toxicity test for four months in concentrations of 0.1 and 0.3 mg/L of lufenuron, also a control group was done (n = 60). This last concentration corresponded to 50% of LC50 96 h (0.58 mg/L) determined in the acute test. The presence of hemorrhages was observed in eyes (hyphema), fins and operculum of fish exposed to 0.7 and 0.9 mg/L of lufenuron in acute test. Histological analysis showed changes in the morphology of fish gills submitted to acute toxicity test, as lamellar aneurysm and blood congestion inside lamellae. In chronic test, blood glucose analysis and morphometric parameters showed no significant differences by Tukey test (p > 0.05). In general, C. macropomum exhibit behaviors associated with stress when exposed to lufenuron in both tests. Lufenuron promoted damage in fish retina as in ability to respond to stimuli in photoreceptors and in ON-bipolar cells in acute test. Thus, lufenuron showed several toxic effects in relation to biological parameters in C. macropomum. This concern about the use and discard of lufenuron indicates the requirement of environmental actions, as mitigation, to prevent bioaccumulation and/or biomagnification.

Orientador: Ana Maria Lima de Azeredo-Espin / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-16T10:06:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalho_RenatoAssisde_D.pdf: 2025643 bytes, checksum: 24641039150d3a87bfa143c90c98fc64 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: A mosca-da-bicheira, Cochliomyia hominivorax, é uma das principais moscas causadoras de miíases da América do Sul, sendo responsável por severos prejuízos à pecuária através da mortalidade e redução da produtividade dos animais infestados. No Brasil, o seu controle tem sido realizado principalmente através da aplicação de inseticidas organofosforados (OF). Porém, o uso indevido e/ou prolongado desses agentes químicos pode provocar seleção de indivíduos resistentes, devido à alteração do sítio alvo ou à desintoxicação metabólica do inseticida antes de atingir o sítio alvo. Nesse sentido, o objetivo desse estudo foi investigar as bases moleculares da resistência a inseticidas OF na mosca da bicheira, através da caracterização da carboxilesterase E3, do sítio alvo acetilcolinesterase (AChE) e da expressão diferencial de enzimas metabólicas (caiboxilesterases, P450 e GST) em indivíduos resistentes. A seqüência predita da enzima carboxilesterase E3 em C. hominivorax apresentou domínios altamente conservados dentre as carboxil/colinesterases que contribuem para o mecanismo catalítico do sítio ativo. Duas mutações, já descritas em outras espécies, foram encontradas, a G137D, associada com resistência principalmente aos dietil-OPs, e a W251S, associada com resistência aos dietil-OPs e piretróides. A freqüência dessas mutações foi investigada em períodos distintos de diferentes populações do Uruguai, indicando uma correlação da freqüência de cada mutação com a classe de inseticida utilizada no controle da espécie. A região codificante da acetilcolinesterase foi sequenciada em C. hominivorax possibilitando a investigação, em populações naturais, de mutações já caracterizadas por conferir resistência a OF em outras espécies (I298V, G401A, F466Y). Apenas 2/135 indivíduos apresentaram uma das mutações (F466Y). Em contraste, a mutação G137D na carboxilesterase E3, que confere resistência metabólica aos inseticidas OF, foi encontrada em mais de 50% dos indivíduos na maioria dessas populações, indicando ser um dos principais mecanismos de resistência nessa espécie. Para a identificação de genes diferencialmente expressos em indivíduos resistentes foi gerado um banco de dados através da caracterização do transcriptoma utilizando uma das técnicas de sequenciamento de nova geração (Roche 454). Ao todo, foram obtidas 548.940 seqüências, resultando em 36.650 "contigs" e 782 "singlets" Após a anotação desses transcritos, foram selecionados genes candidatos pertencentes às famílias de enzimas de detoxificação metabólica (carboxilesterases, monooxigenases P450 e GSTs) para terem sua expressão comparada entre os indivíduos que sobreviveram ao tratamento (CL90) com o inseticida diclorvos (dimetil-OF) e um grupo controle (sem tratamento). Apenas um gene foi diferencialmente expresso, ortólogo ao CYP6GJ, e estudos futuros serão necessários para determinar a associação da expressão dessa P450 e resistência ao inseticida OF. Em ambos os grupos, o gene da AChE não se encontrou alterado. Já o gene da carboxilesterase E3 apresentou a mutação W251S em todos os indivíduos do grupo resistente (n=44), enquanto que no grupo controle (n-40) 13 indivíduos apresentaram a mutação, confirmando a associação dessa mutação com resistência aos dimetil-OP. Assim, a identificação das mutações nesse gene em populações naturais da mosca-da-bicheira pode ser uma ferramenta importante de monitoramento da resistência ao longo da atual distribuição geográfica da espécie, contribuindo para a implementação de estratégias mais efetivas de controle por meio da escolha apropriada dos produtos químicos. / Abstract: The New World Screwworm (NWS) fly Cochliomyia hominivorax is one of most important myiasis-causing flies in the Neotropics. It is responsible for severe losses to the livestock industry through both mortality and loss of productivity of infested animals. In Brazil, it has been controlled by the application of chemical insecticides, mainly the organophosphate (OP) compounds. However, the intensive use of these compounds over many years may select resistant individuals which have the potential to compromise the efficacy of current control strategies. Major mechanisms of insecticide resistance in insects involve either mutation in the target site of the insecticide, or an alteration in the rate of insecticide detoxification. Therefore, the aim of this study was to investigate the molecular basis of resistance to organophosphate insecticides in NWS throughout characterization of the carboxylesterase and acetylcholinesterase genes and expression evaluation of detoxification enzymes. The predicted amino sequence of the E3 gene showed highly conserved domains within carboxyl/cholinesterases involved in the catalytic mechanism of active site. Two mutations previously described in other dipteran species were found, G137D, associated mainly with diethyl-OP hydrolysis, and W251S, associated with dimethyl-OP and pyrethroid hydrolysis. The frequency of these mutations was analyzed in different Uruguayan regions in 2003 and 2009, indicating a correlation between each mutation and the insecticide class used for NWS control. The entire coding sequence of acetylcholinesterase was sequenced allowing surveying of mutations previously known for conferring insecticide resistance (I298V, G401A, F466Y). Only 2/135 individuals from NWS natural populations showed one of these mutations (F466Y). In contrast, G137D mutation in carboxylesterase E3. that also confers resistance to OP insecticides, was found in a high frequency in the same populations, suggesting this is one of the most important resistance mechanisms and that metabolic resistance has been preferentially selected rather altered target site in this species. Differentially expressed genes in resistant NWS individuals were analyzed throughout candidate gene expression evaluation. For this, NWS transcriptome was sampled by deep sequencing of polyadenilated transcripts using 454 sequencing technology, which generated a total of 548,940 sequences resulting in 37,432 unigenes (36,650 contigs and 782 singlets). Following functional annotation, gene expression of candidate genes belonging to detoxification enzyme families (carboxylesterases, monooxygenases P450 and GSTs) were evaluated in NWS resistant individuals surviving bioassays (1X90) with the active ingredient dichlorvos (dimethyl-OP) and from a control group (without treatment). No genes over expressed were found in the resistant group, and the ortholog to CYP6G1 was down-regulated in this group, requiring further studies to determine the association between reduced expression of a P450 gene and OP resistance. In both groups the target site was not altered. In contrast, E3 gene showed W251S mutation in all resistant individuals (44), while 13 individuals showed such mutation in the control group (40). This result corroborates the association between this mutation and the dimethyl-OP resistance in this species. Therefore, identification of mutations in carboxylesterase gene in NWS natural populations can be an important tool in monitoring insecticide resistance. The selection of appropriate chemicals for NWS control may contribute to implement more effective control strategies. / Doutorado / Genetica Animal e Evolução / Doutor em Genetica e Biologia Molecular

Orientador: Ana Maria Lima de Azeredo-Espin / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-08T11:52:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalho_RenatoAssisde_M.pdf: 3247018 bytes, checksum: a5b7660e4e89972955d72629cfd7e2ca (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: A pecuária bovina tem significativa importância no contexto sócio-econômico para o país, sendo responsável pela produção anual de mais de 2 milhões de toneladas de carne, uma das principais fontes de proteína animal da dieta do consumidor brasileiro. A alta produtividade deve estar sempre acompanhada de um controle sanitário eficiente desses animais. Os prejuízos econômicos provocados por ecto e endoparasitas estão entre os principais fatores limitantes da produção animal. Dentre os ectoparasitas de maior importância na pecuária nacional e considerada uma das principais pragas, está a Cochliomyia hominivorax (Coquerel), conhecida no Brasil como a mosca da bicheira. Os prejuízos causados pelas infestações dessa espécie vêm através da redução da qualidade do couro e da produção de leite, na perda de peso e fertilidade do hospedeiro, e mortalidade dos animais infestados. No Brasil, o seu controle tem sido realizado principalmente através da aplicação de inseticidas organofosforados (OP). Porém, o uso indevido e/ou prolongado desses agentes químicos pode provocar a seleção de indivíduos resistentes. Com a recém introdução de outros princípios ativos, como os piretróides, nas formulações dos inseticidas para controle da C. hominivorax, associada ao fato de que a espécie L. cuprina (Calliphoridae), causadora de miíases em ovelhas, adquiriu resistência ao inseticida OP em menos de 10 anos de uso de tal inseticida, torna-se evidente a importância da investigação da resistência a inseticidas OP em C. hominivorax. Através da amplificação heteróloga com 'primers¿ previamente construídos para L. cuprina, e com 'primers¿ construídos especificamente para C. hominivorax, o gene da esterase E3 foi amplificado e seqüenciado nesta espécie. Foram identificadas as mesmas mutações (Gly137/Asp e Trp251/Ser) responsáveis por conferir resistência a inseticidas organofosforados em L. cuprina e Musca domestica. Além da caracterização dessas mutações, foi desenvolvido um método rápido e eficiente para identificação da principal mutação relacionada com resistência a OP. Toda a região codificante da carboxilesterase E3 foi amplificada e seqüenciada em C. hominivorax, permitindo sua caracterização nesta espécie. Através da realização de um bioensaio utilizando inseticidas organofosforados, a principal mutação (Gly137/Asp) foi associada com a resistência a tal classe de inseticidas em C. hominivorax. A caracterização deste gene nas populações naturais da mosca da bicheira permitirá a realização de uma análise da freqüência de indivíduos resistentes nas diferentes regiões do Brasil, o que possibilitará o uso mais apropriado e eficiente dos agentes químicos nas propriedades com atividade pecuária, contribuindo para uma maior produtividade animal e menor dano ambiental / Abstract: The cattle breeding is very important to the social-economic context of Brazil. It is responsible for annual production of more than 2 million ton of meat, one of the essential sources of animal protein on Brazilian diet. The large productivity should be always accomplished by an efficient sanitary control of the animals. The economic losses caused by internal and external parasites are the main limiting factors of meat production. Cochliomyia hominivorax (Calliphoridae) is one of the most important myiasis-causing flies and it is responsible for severe economic losses, mainly by reducing the quality of leather and the production of milk and meat. In Brazil, C. hominivorax has been controlled by applying insecticides, particularly organophosphate (OP)-based compounds. However, the improper and continuous use of these chemicals can lead to the selection of OP-resistant strains. Changes in a specific carboxylesterase (E3) activity have been associated with OP resistance in Lucilia cuprina, one important myiasis-causing fly in sheep in Australia and also a member of the Calliphoridae family. The recent introduction of other insecticides for C. hominivorax control, associated with the development of OP resistance in L. cuprina in less than ten years, shows the importance of resistance investigation in C. hominivorax. Based on foregoing studies, the same mutations responsible for conferring OP resistance in L. cuprina and Musca domestica (Muscidae) were identified in C. hominivorax. Besides characterization of these mutations, a rapid and efficient method for identifying the major mutation related to OP resistance (Gly137/Asp) was developed. Moreover, the entire codifying region of carboxylesterase E3 was amplified and sequenced, allowing its characterization in this species. Using a bioassay, the major mutation (Gly137/Asp) was associated with OP resistance in C. hominivorax. The characterization of this gene in natural populations can be an important tool for surveying resistance to insecticides in different regions of Brazil. This will provide information for the selection and for the implementation of more effective pest management programs / Mestrado / Genetica Animal e Evolução / Mestre em Genética e Biologia Molecular

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-11-07T11:40:53Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Laurindo Camilo de Castro Júnior - 2008.pdf: 744212 bytes, checksum: 54bc98384ca53eb5c272a0d02e1d0e7f (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-11-07T12:13:47Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Laurindo Camilo de Castro Júnior - 2008.pdf: 744212 bytes, checksum: 54bc98384ca53eb5c272a0d02e1d0e7f (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-07T12:13:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Laurindo Camilo de Castro Júnior - 2008.pdf: 744212 bytes, checksum: 54bc98384ca53eb5c272a0d02e1d0e7f (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2008-09-15 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The control and combat culicines have presented difficuties related to the emergence of resistant mosquito populations, ostensibly occasioned by the use of current synthetic insecticides. This reality creates the necessity of looking for new substances insecticide and constant development of new formulations. Face to this situation, phytochemical studies have demonstrated that plants are an abundant source of new active principles. In this work, a quantitative and qualitative review was carried out, between the period of 1970 and 2010, looking for plants that had presented insecticidal effect on culicines, with importance to public health. There were found 174 botanical species, distributed in 56 families, with bigger concentration of species in the Lamiaceae (15 species), Fabaceae (12 species), Asteraceae (12 species), Cucurbitaceae (9 species) and Myrtaceae (9 species) families. The main insecticidal effects founded in the related articles were: larvicidal action, mosquitocidal action, growth inhibition and repellency effect. About the insecticide activity, the Copaifera reticulata and Piper nigrum were the plants that presented the larger potentials for Culicinae. The diterpenoide, acid 3-ß-acetoxylabdan-8(17)-13-dien-15-oico, isolated of C. reticulata, it was more active substance against Aedes aegypti and Culex quinquefasciatus, following by the substances isolated of P. nigrum: piperina, pellitorine, piperecida, guineensina and retrofractamida that active against Ae. aegypti, Ae. togoi, Cx. quinquefasciatus and Cx. pipiens pallens. / O controle e o combate de culicíneos têm apresentado dificuldades relacionadas ao surgimento de populações de mosquitos resistentes, ocasionadas pelo emprego ostensivo dos atuais inseticidas sintéticos. Na busca de alternativas de baixa toxicidade e menor impacto ambiental, vários investigadores têm estudado os produtos de origem botânica na procura de novas substâncias inseticidas. Frente a esta situação, estudos fitoquímicos têm demonstrado que as plantas são fontes abundantes de novos princípios ativos. Neste contexto, uma revisão da literatura pertinente a esse assunto foi realizada entre os períodos de 1970 a 2010, sobre plantas que apresentaram efeito toxicológico sobre culicíneos de importância para a saúde pública. Foram encontradas 174 espécies de plantas, distribuídas em 56 famílias, com maior concentração de espécies nas famílias Lamiaceae (15 espécies), Fabaceae (12 espécies), Asteraceae (12 espécies), Cucurbitaceae (9 espécies) e Myrtaceae (9 espécies). Os principais efeitos verificados foram ações larvicida, adulticida, efeito inibidor do crescimento e repelência. Com relação à atividade inseticida, a Copaifera reticulata e Piper nigrum, foram as plantas que apresentaram potenciais maiores para culicíneos. O diterpenoide, ácido 3- - acetoxylabdan-8(17)-13-dien-15-óico, isolado de C. reticulata, foi a substância mais ativa contra Aedes aegypti e Culex quinquefasciatus, seguidas das substâncias isoladas do óleo de P. nigrum: piperina, pellitorine, pipericida, guineensina e retrofractamida que se mostraram ativas para Aedes aegypti, Ae. togoi, Cx. quinquefasciatus e Cx. pipiens pallens.

Submitted by Edineia Teixeira (edineia.teixeira@unioeste.br) on 2018-03-05T14:57:33Z No. of bitstreams: 2 Camila_Santana2017.pdf: 541138 bytes, checksum: 853f9769c196d162cfb57486117ffe0d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-05T14:57:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Camila_Santana2017.pdf: 541138 bytes, checksum: 853f9769c196d162cfb57486117ffe0d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-05-29 / The products of secondary plant metabolism have aroused great economic interest in their chemical diversity and biological activities. The objective of this work was to determine the chemical composition of Myrcia oblongata extracts, to evaluate the antioxidant potential of these extracts, to test the antimicrobial activity against eleven standard microorganisms and ten serotypes of Salmonella spp. Of poultry origin, as well as to evaluate the potential mortality of extracts and essential oil on Alphitobius diaperinus. Saponins, steroids, triterpenoids, tannins and flavonoids have been identified. The extracts presented activity for all microorganisms tested, except for the methanolic extract that did not show activity for P. mirabilis and S. Enteritidis. The hexane extract, ethyl acetate and acetone have antioxidant activity. The essential oil and extracts of hexane, ethanolic, methanolic and ethyl acetate showed high mortality rates on A. diaperinus larvae. For adults, the best results were obtained for essential oil, with a mortality greater than 80%. The results point to the importance of studies to understand the potential and action of plant extracts and essential oils, aiming at reducing the impacts caused by the extensive use of antimicrobials and synthetic antioxidants and by the undue use of chemical substances for pest control. / Os produtos do metabolismo secundário das plantas têm despertado grande interesse econômico pela sua diversidade química e atividades biológicas. Diante disto, o objetivo deste trabalho foi determinar a composição química dos extratos vegetais de Myrcia oblongata, avaliar o potencial antioxidante destes extratos, testar a atividade antimicrobiana frente a onze microrganismos padrões e dez sorotipos de Salmonella spp. de origem avícola, bem como avaliar o potencial de mortalidade dos extratos e óleo essencial sobre Alphitobius diaperinus. Foram identificados saponinas, esteróides, triterpenóides, taninos e flavonóides. Os extratos apresentaram atividade para todos os microrganismos testados, com exceção do extrato metanólico que não demonstrou atividade para P. mirabilis e S. Enteritidis. O extrato hexânico, acetato de etila e acetona possuem atividade antioxidante. O óleo essencial e os extratos de hexano, etanólico, metanólico e de acetato de etila apresentaram elevados índices de mortalidade sobre a larva de A. diaperinus. Para os adultos os melhores resultados foram obtidos para o óleo essencial, com mortalidade superior a 80%. Os resultados direcionam a importância de estudos para compreender o potencial e a ação de extratos vegetais e óleos essenciais, visando à diminuição de impactos causados pelo uso extensivo de antimicrobianos e antioxidantes sintéticos e pelo uso indevido de substâncias químicas para o controle de pragas.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Propriedades inseticidas e farmacológicas presentes em espécies vegetais são exploradas atualmente pela necessidade de produtos com objetivo de controle de pragas, combate a insetos vetores ou no tratamento de doenças humanas. Uma das espécies exploradas biotecnologicamente, nativa da Ásia e presente em regiões tropicais, é o nim (Azadirachta indica A. Juss). Trabalhos demostram compostos químicos presentes na espécie capazes de interferir no desenvolvimento de outros organismos vivos, como artrópodes e protozoários. O inseto Aedes aegypti e o protozoário Plasmodium falciparum são organismos que causam problemas sociais mundialmente, principalmente em regiões tropicais. O primeiro é vetor da febre amarela e do vírus da dengue e o segundo é responsável por uma das principais doenças causadora de mortes nos seres humanos, a malária. Estes provocam graves problemas de saúde pública nas regiões tropicais, incluindo o Brasil e estão presentes no município de Boa Vista, estado de Roraima que possui características edafoclimáticas favoráveis para o desenvolvimento de organismos e espécies vegetais, assim como o nim que se faz presente no estado. O presente estudo teve como objetivo verificar a atividade de extratos e frações de A. indica, introduzida no município de Boa Vista, RR contra o mosquito A. aegypti e o protozoário P. falciparum. Os testes preliminares realizados mostram que para estabelecer CL50 contra larvas de A. aegypti as concentrações devem ser &#8805;5000 &#956;g/mL nos copos, e das partes do vegetal utilizados para extração, apenas os extratos obtidos das folhas EMF e EAF mostraram atividade de inibição ao desenvolvimento de P. falciparum, in vitro com 100 e 80,79 % de inibição do crescimento do parasita, respectivamente na concentração de 50 &#956;g/mL. Tais resultados mostram que extratos metanólicos e metanol/água obtidos de nim presentes no município de Boa Vista, RR apresentam atividade biológicas contra o vetor do arbovírus da dengue e o protozoário causador da malária humana P. falciparum, em ensaios in vitro. / Insecticidal and pharmacological properties of plant species are currently exploited because of the need for products for pest control, fighting insect vectors or treatment of human diseases. One of the biotechnologically exploited species, a native to Asia and found in tropical regions, is neem (Azadirachta indica A. Juss). Previous work has demonstrated that chemical compounds present in the species can affect the development of other living organisms such as arthropods and protozoa. The insect Aedes aegypti and protozoan Plasmodium falciparum are organisms that cause social problems worldwide, especially in tropical regions. The former is a vector of yellow fever and dengue virus and the latter is responsible for a major disease causing death in humans, malaria. These three diseases represent severe public health problems in tropical countries. These diseases occur in Brazil, and are present in Boa Vista municipality in Roraima State that has favorable soil and climatic characteristics for the development of organisms and plant species, as well as neem that is present in this State. The present study aimed to verify the activity of extracts and fractions of A. indica, introduced in the municipality of Boa Vista against the A. aegypti mosquito and parasite P. falciparum. Preliminary tests show that to establish LC50 against larvae of A. aegypti concentrations should be &#8805; 5000 mg/mL in the cups, and the parts of the plant used for extraction, only the extracts from the leaves and EMF EAF showed inhibitory activity development P. falciparum in vitro with 100 and 80.79% inhibition of parasite growth, respectively, at a concentration of 50 mg/mL. These results show that methanol and methanol/water extracts obtained from neem present in Boa Vista municipality exhibit biological activity against the dengue vector and the human malaria parasite P. falciparum in an in vitro assay.

Com a crescente expansão de cultivos agrícolas no Brasil, tem sido bastante comum o sistema de produção de algodão e milho em uma mesma região. Como uma possível conseqüência deste sistema de cultivo, os problemas com Spodoptera frugiperda (J. E. Smith) têm aumentado nestas duas culturas nos últimos anos. Assim, para o estabelecimento de um manejo mais efetivo desta praga, foi levantada a hipótese de que as mesmas populações de S. frugiperda atacam as culturas do algodão e milho em uma determinada região. Para testar esta hipótese, foram realizados os seguintes estudos: 1) a avaliação a suscetibilidade ao piretróide deltametrina em populações de S. frugiperda, e 2) a estimativa da similaridade e da estrutura genética em populações de S. frugiperda com o uso de marcadores moleculares RAPD e AFLP. A avaliação da suscetibilidade a deltametrina das populações de S. frugiperda foi realizada mediante bioensaio de aplicação tópica. Além disso, foi avaliada a resposta à seleção com deltametrina em uma população de S. frugiperda em condições de laboratório. As populações de S. frugiperda coletadas na cultura do algodão foram significativamente menos suscetíveis a deltametrina do que as populações coletadas no milho. Estes resultados poderiam ser entendidos como uma conseqüência da pré-seleção de indivíduos resistentes a deltametrina A população de S. frugiperda selecionada em laboratório apresentou uma razão de resistência a deltametrina de &#8776;14 vezes. Pela técnica de RAPD, os dendrogramas (Simple Matching e Jaccard) classificaram as populações da praga em grupos proximamente relacionados com a região geográfica de coleta dos insetos. Não foi identificado nenhum ramo capaz de separar e associar as populações de S. frugiperda a nenhuma das duas plantas hospedeiras avaliadas. Estes resultados sugeriram que as populações da praga em algodão e milho em uma determinada região do Brasil apresentam um nível significativo de fluxo gênico. Os resultados da técnica AFLP foram organizados em um dendrograma UPGMA (índice de Jaccard), o qual também não classificou as populações da praga em grupos relacionados às plantas nas quais os insetos foram coletados. Não foi detectada correlação significativa entre a dissimilaridade genética e distância geográfica nas populações testadas. Foi detectada variação molecular entre as populações da praga atribuída à origem geográfica dos insetos. A análise molecular de variância indicou que 7% da variação molecular total poderiam ser atribuídos à divisão das populações de S. frugiperda em grupos de insetos coletados no Brasil e na Argentina. Além disso, foi detectado 0% de variação genética, e um valor de fluxo gênico Nm=1,32 entre os grupos de populações da praga coletadas nas culturas do algodão e do milho. Assim, as infestações de S. frugiperda que ocorrem em campos de milho e algodão podem ser consideradas como subunidades potencialmente intercruzantes de uma mesma população. Portanto, conclui-se que há necessidade de um planejamento bastante estratégico nos plantios de algodão e de milho, no delineamento de programas de manejo de S. frugiperda no Brasil. / Due to the expansion of the cultivated areas in Brazil, it has been very common to find the cultivation of cotton and maize in the same region. As a potential consequence to this cultivation system, the problems with Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) have increased for the last years at both crops. In order to provide elements to the establishment of a more effective management of this pest it was hypothesized that the same populations of S. frugiperda attack the cotton and maize crops in Brazil. To test this hypothesis the following studies were conducted: 1) the evaluation the susceptibility to the pyrethroid deltamethrin in S. frugiperda populations and 2) the assessment of the molecular variability and genetic structure in S. frugiperda populations by using RAPD and AFLP molecular markers. The evaluation of the susceptibility to deltamethrin in S. frugiperda populations was conducted by using topical application bioassays. Furthermore, the response of this pest to the selection pressure with the insecticide was evaluated under laboratory conditions. The insect populations collected in the cotton crop were significantly less susceptible to deltamethrin than the ones collected in the maize crop. These results might be consequence of a pre-selection of deltamethrin-resistant individuals. The deltamethrin-resistant population selected under laboratory conditions had the resistance ratio of &#8776;14 fold. The dendrograms obtained by using RAPD markers (Simple Matching and Jaccard) classified the populations into clusters related to the geographical origin of the samples. Any branch of the dendrograms underpinned a molecular association of S. frugiperda with neither of the two host plants. These results suggested the existence of considerable gene flow between cotton and maize populations of S. frugiperda collected at the same region in Brazil. The AFLP results were organized in a UPGMA dendrogram (Jaccard index) which also did not classify the populations of S. frugiperda into clusters related to the host plant in which the insects were collected. It was not found a significant correlation between genetic dissimilarity and geographical distances. It was detected genetic variation attributable to the geographical origin of the populations. The analysis of molecular variance highlighted 7% of the variation due to the division of the S. frugiperda populations into Brazilian and Argentine groups. Also, no molecular variation (0%) and a gene flow rate equal to Nm=1.32 were estimated between fall armyworm group of populations collected at maize and cotton fields in Brazil. The same populations of S. frugiperda infest cotton and maize crops in Brazil and could be considered as interbreeding subunits of the same population. Therefore, there is a need of strategic action plans to the planting of cotton and maize crops for designing of management programs of S. frugiperda in Brazil.

O controle químico de pragas, para muitas culturas agrícolas é uma das principais táticas em programas de manejo integrado de pragas (MIP), trazendo benefícios reais e diminuindo as perdas por insetos-praga, além do aumento na produção de alimentos e fibras, proteção de produtos armazenados e proteção de pragas e doenças de seres humanos. O controle de pragas em soja e milho tem sido realizado, em sua maioria, utilizando-se plantas Bt e produtos químicos, este último, além das diversas vantagens citadas, pode ter desvantagens, principalmente quando utilizado de maneira inadequada, com potencial de causar diversos problemas no agroecossistema, além de desequilíbrios ambientais. Devido a importância da cultura da soja e do milho para o Brasil e para o mundo, como base da alimentação animal e humana, reconhecendo o grande uso e papel dos inseticidas como uma das principais táticas usadas para o controle de insetos-praga destas culturas, se faz necessário estudos que tratem da melhor forma de uso dos inseticidas e estudos que avaliem possíveis efeitos adversos destas moléculas em insetos benéficos, para que estejam de acordo com as premissas do MIP. Para viabilizar esta importante tática de controle, realizou-se estudos com os seguintes objetivos: 1) Estudar a toxicidade residual dos inseticidas indoxacarb (Avatar&reg;), chlorantraniliprole (Premio&reg;), spinosad (Tracer&reg;) e teflubenzuron (Nomolt 150&reg;) para C. includens em soja, em ensaio com e sem simulação de chuva; 2) Estudar a toxicidade residual dos inseticidas indoxacarb (Avatar&reg;), chlorantraniliprole (Premio&reg;), spinosad (Tracer&reg;) e teflubenzuron (Nomolt 150&reg;) para S. frugiperda em milho, em ensaio com e sem simulação de chuva; 3) Avaliar efeito letal e subletal de inseticidas recomendados para soja e milho sobre o predador Doru luteipes. Para o primeiro objetivo, teflubenzuron (15 g i. a. ha-1); spinosad (36 g i. a. ha-1); chlorantraniliprole (5, 10 e 20 g i. a. ha-1); indoxacarb (30, 60 e 90 g i. a. ha-1) não tiveram a eficácia afetada quando submetidos à simulação de chuva em todos os tempos avaliados. Quanto a toxicidade residual ao longo do tempo, teflubenzuron, chlorantraniliprole e indoxacarb, nas duas condições, com e sem simulação de chuva, tiveram redução da eficácia após o 5° dia. Diferentemente, os inseticidas spinosad (36 g i. a. ha-1) e indoxacarb (90 g i. a. ha-1), nas duas condições, não tiveram redução da eficácia até 15 dias após aplicação, e em todos os tempos avaliados foram mais eficazes do que os demais inseticidas. Para o segundo objetivo, spinosad (36 g i. a. ha-1) e chlorantraniliprole (10, 20 e 30 g i. a. ha-1) mantiveram a eficácia até o 15º dia após pulverização. Quanto aos efeito da simulação da chuva, spinosad (36 g i. a. ha-1), chlorantraniliprole (10, 20 e 30 g i. a. ha-1) e indoxacarb (90 g i. a. ha-1) mantiveram a eficácia. O inseticida chlorantraniliprole na maior dose utilizada e recomenda para o controle da praga na cultura foi o mais efetivo dentre todos, quanto a toxicidade residual e sob ação da simulação de chuva. Quanto ao terceiro objetivo, ensaio de efeito letal, Tracer, Premio e Avatar foram classificados como nocivos (classe 4), e somente Nomolt foi inócuo (classe 1). No ensaio de efeito subletal apenas o inseticida Nomolt teve parâmetros avaliados. Apesar disso, causou efeitos adversos ao predador, como: aumento do período de pré-oviposição; aumento do período embrionário e diminuição da fecundidade; não sendo, portanto, recomendado para utilização em programas de MIP, pois, altera a capacidade de desenvolvimento e reprodutiva da tesourinha predadora. Os resultados obtidos nesses estudos proveram importantes informações para o refinamento do uso de moléculas inseticidas e classificação desses quanto a seletividade ao predador generalista D. luteipes, agregando informações práticas para o manejo de pragas na cultura da soja e milho. / Chemical pest control for many agricultural crops is one of the main tactics in integrated pest management (IPM) programs, bringing real benefits and decreasing losses by pest insects, as well as increased food and fiber production, protection of stored products and protection of pests and diseases of humans. Pest control in soybean and corn has been mostly carried out using Bt plants and chemical products, for the latter, in addition to the several advantages cited, may have some disadvantages, especially when used improperly, with the potential to cause several problems in the agroecosystem, as well as environmental impacts. Owing to the importance of soybean and corn cultivation to Brazil and to the world, as a basis of animal and human feeding, recognizing the great use and role of insecticides as one of the main tactics used to control insect pests of these crops, it is necessary to study the best use of insecticides and studies that evaluate the possible adverse effects of these chemical molecules on beneficial insects, so that they are in accordance with the IPM premises. To enable this important control tactic, studies were carried out with the following objectives: 1) To study the residual toxicity of insecticides indoxacarb (Avatar&reg;), chlorantraniliprole (Premio&reg;), spinosad (Tracer&reg;) and teflubenzuron (Nomolt 150&reg;) for C. includens in soybeans, with and without rainfastness; 2) To study the residual toxicity of insecticides indoxacarb (Avatar&reg;), chlorantraniliprole (Premio&reg;), spinosad (Tracer&reg;) and teflubenzuron (Nomolt 150&reg;) for S. frugiperda in maize, with and without rainfastness; 3) To evaluate the lethal and sublethal effect of insecticides recommended for soybean and corn on the earwing predator Doru luteipes. For the first objective, teflubenzuron (15 g a. i. ha-1); spinosad (36 g a. i. ha-1); chlorantraniliprole (5, 10 and 20 g a. i. ha-1); indoxacarb (30, 60 and 90 g a. i. ha-1) were not affected when submitted to rainfastness at all evaluated times. Concerning for residual toxicity over time, teflubenzuron, chlorantraniliprole e indoxacarb, under both conditions, with and without rainfastness, had a reduction in efficacy after 5 day. In contrast, the insecticides spinosad (36 g a. i. ha-1) and indoxacarb (90 g a. i. ha-1), in both conditions had no efficacy reduction until 15 days after application and at all times evaluated were more effective than the other insecticides. For the second objective, spinosad (36 g a. i. ha-1) e chlorantraniliprole (10, 20 and 30 g a. i. ha-1) maintained efficacy until the 15th day after spraying. As for the effects of rainfastness, spinosad (36 g a. i. ha-1), chlorantraniliprole (10, 20 and 30 g a. i. ha-1) and indoxacarb (90 g a. i. ha-1) remained effective. The insecticide chlorantraniliprole at the highest dose used and recommended for the control of the pest in the crop was the most effective of all, regarding residual toxicity and under the action of the rainfastness. About the third objective, lethal effect bioassay, Tracer, Premio e Avatar were classified as harmful (class 4), and only Nomolt was innocuous (class 1). In the test of sublethal effect, just the insecticide Nomolt had parameters evaluated. Nevertheless, it caused adverse effects to the predator, such as: increased pre-oviposition period; increase in the embryonic period and decrease in fecundity; therefore, it is not recommended for use in IPM programs, because it modify the developmental and reproductive capacity of predatory earwings. The results obtained in these studies provided important information for the refinement of the use of insecticidal molecules and the classification of these as the selectivity to the generalist predator D. luteipes, adding practical information for pest management in soybean and corn crops.