Orientador: Luiz Edivaldo Pezzato / Coorientador: Luiz Roberto Furlan / Banca: Elisabeth Criscuolo Urbinati / Banca: Jesus Aparecido Ferro / Banca: Maria Célia Portella / Banca: Eduardo Gianini Abimorad / Resumo: A aquicultura brasileira apresenta-se como atividade comercial em franca ascensão e, dentre as espécies nativas, o pacu, Piaractus mesopotamicus, destaca-se como uma das mais cultivadas nas regiões Sul, Sudeste e Centro Oeste do Brasil. Contudo, à semelhança do que ocorre com as demais espécies de interesse comercial, a produção do pacu enfrenta problemas ao longo do processo produtivo, tais como a alta densidade populacional utilizada, fornecimento incorreto de rações e estresse, que resultam em redução da produtividade e aumento na taxa de mortalidade. Uma das estratégias estudadas para melhorar o manejo alimentar em peixes consiste na utilização da privação alimentar por tempo determinado com a finalidade de promover compensação do crescimento, durante o período de realimentação. Entretanto, informações relacionadas às respostas fisiológicas, de modulação celular e de possíveis alterações na microbiota intestinal provocada por este tipo de manejo ainda são discordantes. A compreensão destas informações é necessária para o desenvolvimento de estratégias que minimizem o estresse ocasionado pela privação alimentar. Diante do exposto, a proposta deste trabalho foi avaliar o impacto do jejum prolongado, seguido de curto período de realimentação, sobre os parâmetros fisiológicos, expressão de genes relacionados ao processo de crescimento e estresse, prevalência de determinados grupos bacterianos na mucosa e conteúdo intestinal, além da clonagem, identificação e validação de genes de referência para normalização de dados de expressão gênica em estudos com pacus. Os resultados obtidos demonstraram que o pacu apresenta grande capacidade de mobilização das reservas endógenas, porém a recuperação das mesmas é mais rápida em peixes de menor tamanho. O presente estudo apresenta as primeiras comparações experimentais para validação de genes de referência para o pacu. Os genes clonados... / Abstract: The Brazilian aquaculture is as a commercial activity on the rise. Among the native species, pacu, Piaractus mesopotamicus, stands out as one of the most reared in the southern, central and northeastern Brazil. However, similar to what occurs with other commercial species, the production of pacu experience problems during the production process, such as high population density used, incorrect food supply and stress, resulting in reduced productivity and increased mortality. One of the strategies investigated to improve the management of fish feeding is the use of dietary restrictions for a certain time to promote growth compensation during the refeeding period. However, information related to physiological responses and cell modulations caused by this type of management are still unknown. Understanding this information is necessary for the development of strategies to minimize the stress caused by food restriction. The purpose of this study was to evaluate the impact of prolonged fasting, followed by short refeeding on the physiological parameters, gene expression related to growth and stress, the prevalence of certain bacterial groups in the mucosa and intestinal content and cloning, identification and validation of reference genes for normalization of gene expression data in studies with pacu. The results showed that the pacu has great capacity for mobilization of endogenous reserves, but their recovery is faster in smaller fish. This study presents the first experimental comparisons for validation of reference genes for pacu. Cloned, sequenced and validated genes will be used in future studies of gene expression with this species. In addition, this study provides the first information about the changes in intestinal microbiota in pacu. The use of qPCR for the detection and quantification of specific bacterial groups proved to be an important tool for assessing changes in bacterial communities in the mucosa and intestinal contents of fish / Doutor

Orientador: Maria Célia Portella / Coorientador: Maeli Dal Pai / Banca: Natália de Jesus Leitão / Banca: Rosângela Kiyoko Jomori Bonichelli / Banca: Luiz Roberto Furlan / Banca: Laura Satiko Okada Nakaghi / Resumo: O pacu, Piaractus mesopotamicus, é uma espécie de grande importância econômica no Brasil e muitos estudos sobre sua fase inicial já foram conduzidos visando viabilizar o cultivo intensivo dessa espécie. Peixes passam por períodos em jejum, tanto em condições naturais quanto nas de cultivo, ocorrendo a ativação de sistemas proteolíticos ocasionando a degradação do tecido muscular, o que implica na redução da musculatura estriada esquelética, parte mais importante do animal em termos produtivos. Assim, fazem-se necessárias pesquisas visando compreender a formação e degradação do tecido muscular, uma vez que essa é a principal parte comercializada. Nesse estudo, juvenis de pacu com 20,4 ± 0,7 mm de comprimento total e 90,3 ± 4,1 mg de peso médio foram estocados em 20 tanques de 50 L a uma densidade de 10 peixes/L. Três períodos de jejum foram avaliados: J4, J8 e J11, correspondentes a 4, 8 e 11 dias de jejum. Após este período, os peixes foram realimentados por 20 dias com náuplios de artêmia. O controle positivo (ART) foram peixes alimentados com náuplios de artêmia durante todo o período experimental. Amostras para análises biométricas, histológica do fígado e musculo esquelético e de expressão de genes que controlam o crescimento e atrofia muscular foram coletadas no final de cada período de jejum e ao final do experimento. As fibras musculares foram distribuídas nas seguintes classes de diâmetro (d = μm): Classe 10 = d ≤ 10, Classe 20 = 10 <d ≤ 20, Classe 30 = 20 <d ≤ 30, Classe 40 = 30 <d ≤ 40, e classe 50 = d> 40. No final do período de jejum observou-se que o crescimento dos juvenis celularidade das fibras musculares foram afetados pelo jejum. Os animais do tratamento J11 apresentaram alta incidência de atrofia das fibras musculares, como revelado pelo aumento das frequências das fibras nas classes de fibras 10 e 20. Comportamento semelhante foi observado nos animais mantidos 8 dias... / Abstract: The pacu, Piaractus mesopotamicus, is a species with great economic importance in Brazil and many studies on its initial phase have been conducted to enable the intensive culture of this species. Fish undergo fasting periods, both in natural conditions as in the intensive rearing, causing activation of proteolytic systems due to the breakdown of muscle tissue, which implies the reduction of the skeletal striated muscles of the animal, the edible part of fish. In this way, more research is necessary to understand the formation and breakdown of muscle tissue. In this study, juvenile pacu with 20.4 ± 0.7 mm in total length and 90.3 ± 4.1mg of average weight were stocked in 20 tanks of 50 L at a density of 10 fish/L. The fasting periods evaluated were: J4; J8 and J11, corresponding to 4, 8 and 11 days of fasting. After this period, the fish were refed for 20 days with artemia nauplii. The positive control (ART) was fish fed newly hatched artemia nauplii throughout the experimental period. Samples for growth, histological analysis of liver and muscle fibers and gene expression were collected at the end of each period of fasting and at the end of the experiment. Muscle fibers were distributed into the following diameter classes (d = μm): Class 10 = d ≤ 10, Class 20 = 10 <d ≤ 20, Class 30 = 20 <d ≤ 30, Class 40 = 30 <d ≤ 40, and class d 50 => 40. At the end of the fasting period, growth, survival and the frequency of muscle fibers were affected by fasting. The fish in the treatment J11 showed high incidence of muscle fiber atrophy, as revealed by increased frequencies in classes 10 and 20 fibers. Similar pattern was observed in animals kept eight days fasting (J8). The fish of the treatment J4 showed a lower incidence of muscle fiber atrophy and the frequency of fiber classes 10, 20, 30 and 50 was similar to the positive control. The glycogen storage in the liver of fasted animals was decreased as higher was the fasting ... / Doutor

Orientador: Maria Célia Portella / Coorientador: Maeli Dal Pai / Banca: Luiz Roberto Furlan / Banca: Rodrigo Takata / Banca: Jaqueline Dalbello Biller Takahashi / Banca: Fernanda Losi Alves de Almeida / Resumo: O objetivo do trabalho foi investigar as características morfológicas e fisiológicas, e a expressão de genes envolvidos na atrofia muscular (MuRF-1 77 e atrogina-1) e genes que controlam o crescimento muscular (MyoD, Miogenina, IGF-1 e receptor de IGF-1) e a Miostatina, em juvenis de tilápia-do-nilo (Oreochromis niloticus), submetidos ao jejum, seguidos de realimentação. Foram utilizados juvenis de tilápia-do-nilo, com peso médio de 30.2 ± 0.9 g, e o experimento foi realizado em delineamento inteiramente casualizado (DIC), com quatro tratamentos e oito repetições: (AL) controle alimentado, alimentado até a saciedade aparente durante o período experimental; (J1) uma semana de jejum e 10 semanas de realimentação; (J2) duas semanas de jejum e 10 semanas de realimentação; (J3) três semanas de jejum e 10 semanas de realimentação. As biometrias foram realizadas após uma, duas e três semanas de jejum e após uma, duas, seis e semanas de realimentação para cada tratamento. As coletas de amostras (n = 16/tratamento) foram realizadas nos finais dos períodos de jejum e após semanas de realimentação. Foram observadas significativas reduções nos índices de desempenho nos peixes durante o jejum. Entretanto, após dez semanas de realimentação, os peixes que passaram por jejum apresentaram apenas crescimento compensatório parcial. O consumo alimentar e a taxa de crescimento específico aumentaram durante a realimentação, igualando-se ao consumo alimentar do tratamento AL, porém não foram suficientes para induzir o crescimento compensatório total. A taxa de sobrevivência não diferiu entre os tratamentos. Os níveis de triglicérides e o cortisol nos peixes do tratmento J1 foram significativamente menores em relação ao AL. Os índice hepatosomático (IHS), índices de gordura visceral (IGV), lipídio na carcaça e os níveis de glicogênio ... / Abstract: The aim of this study was to investigate the morphological and physiological characteristics and the gene expression involved in muscle atrophy (MuRF-1 and atrogin-1) and genes that control muscle growth (MyoD, Myogenin, IGF-1 and IGF-1 receptor) and the Myostatin, in Nile tilapia (Oreochomis niloticus) juveniles submitted to fasting, followed by refeeding. It was used Nile tilapia juveniles with average body mass 30.2 ± 0.9 g and the experiment was completely randomized with four treatments and eight repetitions: (FC) fed control, fish were fed continuously during the 13 weeks; (F1) one week of fasting and 10 weeks of refeeding; (F2) two weeks of fasting and 10 weeks of refeeding; (F3) three weeks of fasting and 10 weeks of refeeding. Biometric performance was made after one, two and three weeks of fasting and after one, two, six and 10 weeks of refeeding. Samples were collected (n = 16 fish/treatment) after the end of each period of fasting and after 10 weeks of refeeding. It was observed significant decrease of performance index of fish during fasting. However, after 10 weeks of refeeding, fish that were fasted showed only partial compensatory growth. The feed intake and specific growth rate increased during refeeding, equaling to the FC, but it was not enough to induce total growth compensation. The survival rate did not differ among all treatments. The triglycerides and cortisol levels in fish from F1 were significantly lower than FC. The hepatosomatic index (HSI), visceral fat index (VFI), carcass lipid and liver glycogen levels decreased in fish that was fasting. However, after 10 weeks of refeeding, the lipids amount on VFI, on body composition and liver glycogen in fish from F1, F2 and F3 treatments were similar to FC. At the first week of the experiment, in the F1 and FC treatments, the morphological muscle fibers analyses showed a high quantity of small muscle fibers with central nucleus, showing the mosaic hyperplasia ... / Doutor

Orientador: Lúcia Regina Ribeiro / Coorientador: Mário Sérgio Mantovani / Banca: Maria Inês de Moura Campos Pardini / Banca: Raquel Alves dos Santos / Resumo: Em diversas partes do mundo, a prevalência da obesidade tem aumentado rapidamente. A Organização Mundial da Saúde estima que, em 2015, haverá 700 milhões de pessoas obesas (índice de massa corporal ≥30kg/m2) em todo o mundo. No Brasil, aproximadamente, 50% da população acima dos 20 anos apresentam sobrepeso (índice de massa corporal ≥25kg/m2) e 16% já demonstram quadro de obesidade. A obesidade é um dos fatores desencadeadores de diversas doenças crônicas, assim, é importante identificar características que predispõem indivíduos à obesidade, ou condições negativas que ocorrem durante o desenvolvimento da obesidade, as quais alteram o metabolismo e o estado de saúde de maneira negativa. O objetivo do presente estudo foi avaliar diferenças na expressão de genes-alvo do PPARα em células mononucleares periféricas do sangue (PBMCs) e na concentração plasmática de ácidos graxos livres no sangue, entre indivíduos obesos e não-obesos, após 24 horas de jejum. Este estudo foi o primeiro realizado na população brasileira. Em ambos os grupos (obeso e não-obeso), a concentração plasmática de ácidos graxos livres (AGL) elevou-se de forma significante após as 24horas de jejum, em especial, no grupo não-obeso, onde a média da concentração elevou-se 3 vezes se comparada com a média da concentração no tempo 0h. A média da concentração plasmática basal (0h) de AGL revelou-se 2 vezes maior no grupo obeso quando comparada com a média do grupo não-obeso. No entanto essa diferença não foi observada após as 24h de jejum. Os genes estudados participam diretamente na β-oxidação mitocondrial hepática e musculoesquelética e são ativados por PPARα. Após o jejum, todos os genes estudados evidenciaram um incremento na expressão (fold change) quando comparados com o... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The prevalence of obesity has increased rapidly in many parts of the world. The World Health Organization estimates that in 2015, there should be 700 million obese people (body mass index ≥ 30kg / m²) around the world. In Brazil, approximately 50% of the population aged 20 years and older are overweight (body mass index ≥ 25kg / m²) and 16% already meet the criterion for obesity. Obesity is considered a trigger factor for several chronic diseases, so it is important to identify traits that predispose individuals to obesity or negative conditions that occur during the development of obesity, affecting metabolism and health negatively. The aim of this study was to evaluate differences in the expression of PPAR-alpha target genes in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and in plasma free fatty acid concentration in the blood of obese and non-obese subjects, after 24 hours of fasting. This was the first study conducted in the Brazilian population. In both groups (obese and non-obese), plasma free fatty acid (FFA) concentration increased significantly after 24 hours of fasting, especially in the non-obese group, in which the mean concentration rose 3 times compared with the mean concentration at time 0h. The baseline (0h) mean of plasma FFA concentration was 2 times higher in the obese group compared with the mean from the non-obese group. This difference, however, was not observed after 24h of fasting. The studied genes participate directly in hepatic and musculoskeletal mitochondrial beta-oxidation and are activated by PPAR-alpha. After fasting, all the studied genes had an increase in fold change compared with time 0h, in both groups. By identifying the preferential beta-oxidation during fasting, the CPT1A gene presented an increase in fold change compared with the CPT1B gene, indicating thus that beta-oxidation... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Sob o efeito do jejum os animais podem se comportar de várias maneiras e mudar a estratégia de forrageio, se arriscar mais ao se alimentar e responder mais rapidamente à presença da presa. Animais ectotérmicos e de metabolismo baixo são bastante afetados pelo jejum, construindo menos abrigos, se alimentando mais e se tornando mais ativos. Escorpiões são predadores predominantemente senta-e-espera mas que podem também deslocar-se em busca de suas presas, especialmente artrópodes. No forrageio, eles dependem de vibrações do substrato e de correntes de ar para localizar e capturar a presa. Esses estímulos são detectados por estruturas como os órgãos em fenda (fina região da cutícula onde ocorrem fendas que detectam vibrações do substrato) e os tricobótrios, que são longas cerdas sensíveis ao deslocamento de ar. Escorpiões são equipados com tricobótrios, mas a função comportamental destas cerdas nesse táxon nunca foi testada experimentalmente. No primeiro capítulo, testamos as hipóteses de que escorpiões em jejum se locomoveriam mais, detectariam mais rapidamente a presa e que a taxa de captura seria maior. Para medir a locomoção, nós dividimos a arena em quadrantes de 11 x 11cm e quantificamos o número de quadrantes utilizados, o número de mudanças de quadrantes e se o animal estava andando ou parado em cada observação. Para quantificar mudanças no limiar de detecção, nós medimos a distância em centímetros e a latência em segundos para detectar a presa. Para medir se houve diferenças na taxa de captura, nós contamos em ambos os grupos o número total de sujeitos experimentais que capturaram o grilo. Nós não encontramos diferenças entre os tratamentos em nenhuma das variáveis medidas. No segundo capítulo, testamos a hipótese de que os tricobótrios são importantes para captura de presas para escorpiões. Previmos que os sujeitos experimentais sem tricobótrios experimentalmente removidos teriam menor sucesso de captura do que os grupos controles (cerda controle removida/controle do procedimento experimental/controle sem manuseio). Previmos ainda que escorpiões sem tricobótrios teriam um maior número de tentativas de captura, que a latência para detecção e para a primeira tentativa de captura seriam maiores e que se orientariam menos vezes para a presa do que animais controle. Colocamos um sujeito experimental e um grilo sem o par de pernas III em uma arena circular com papel sulfite como substrato e filmamos os sujeitos experimentais. Nós não encontramos diferenças nas variáveis medidas entre os grupos comparados. Concluindo, os resultados do primeiro capítulo indicam que talvez o tempo de jejum não tenha sido longo o suficiente para influenciar mudanças no comportamento de forrageio e/ou as diferenças podem aparecer em outros comportamentos não medidos, como o tempo de ingestão. No segundo capítulo, os resultados indicam que os tricobótrios não são essenciais para captura de presas. Dessa forma, outras presas e substratos que atenuam vibrações do substrato devem ser considerados em estudos futuros / Under starvation, animals might behave in different ways and change their foraging strategy, become risk-prone while feeding and respond more quickly to the presence of prey. Ectothermic and with low metabolism animals are greatly affected by starvation, building less burrows, feeding more and becoming more active. Scorpions are predominantly sit-and-wait predators but they may also move in search for prey, especially arthropods. While foraging, they rely on substrate borne vibrations and air displacement to detect and capture prey. These stimuli are detect by sensory structures such as slit sense organs, (a thin region on the cuticle that bears slit that detect substrate borne vibration) and trichobothria, which are long setae sensitive to air displacement. Scorpions are equipped with trichobothria, however, the specific behavioral function of these sensilla on this taxa has never been experimentally tested. In the first chapter, we hypothesized that starved scorpions would become more roving, that the threshold to detection would decrease and that the capture rate would increase. To measure locomotion, we divided the arena into squares of 11 x 11 cm and quantified the number of squares used, the number of square changes and if the animal was walking or staying still in each observation. To quantify changes in the detection threshold, we measured the distance in centimeters and latency in seconds to detect the crickets. To measure if there was a difference in capture rate, we counted in both groups the total number of experimental subjects that captured the cricket. We found no differences between treatments in any of the measured variables. In the second chapter, we tested the hypothesis that trichobothria on pedipalps are important for scorpions to capture prey. We predicted that experimental subjects without trichobothria experimentally removed would be less successful in capturing prey than the control groups (control seta removed/control of experimental procedure/no handling control). We also predicted that scorpions without trichobothria would have a higher number of capture attempts, that the latency to detect prey and to the first capture attempt would be higher and the number of times that each scorpion oriented its body towards the prey would be lower. We used an experimental subject and a cricket without the pair of legs III in a circular arena with a printer paper as substrate and then record the experimental subjects. We did not find differences in the measured variables between the two groups. In conclusion, the results of the first chapter indicate that perhaps the starvation period has not been long enough to influence changes on foraging behavior and/or the differences may appear in other behaviors, such as ingestion time. In the second chapter, the results indicate that trichobothria are not essential for capture prey. Thus, other prey and substrates that attenuate substrate borne vibrations should be considered in future studies

A homeostase hidro-eletrolítica é controlada por informações sobre volume e a concentração dos íons dos líquidos corporais. Alterações da osmolalidade são detectadas por receptores presentes em diversas regiões do SNC, entre as quais os órgãos circunventriculares. Alterações conformacionais nestas células ativam neurônios localizados nos núcleos paraventricular (PVN) e supra-óptico (SON) do hipotálamo, que secretam ocitocina (OT) e vasopressina (AVP). A osmolalidade plasmática aumenta em conseqüência da alimentação, o que induz a secreção de OT e AVP. Os esteróides ovarianos podem influenciar o balanço de líquidos, modulando sistemas hormonais que regulam tanto o consumo quanto a excreção de água, ou agindo diretamente em neurônios ocitocinérgicos e vasopressinérgicos do hipotálamo. No entanto, esta ação não é ainda entendida. É possível que esses sistemas respondam de forma diferente às variações de estrógeno, talvez por ação direta através de receptores de estrógeno tipo em neurônios OT e AVP do PVN e SON, e por ação indireta através de receptores de estrógeno tipo em órgãos circunventriculares. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a participação do estradiol na modulação da secreção de AVP em resposta ao estímulo osmótico induzido pela realimentação após jejum. Para tanto, foi realizada a determinação da concentração plasmática de AVP, a análise da ativação de neurônios AVP, o conteúdo protéico de ER no PVN e no SON bem como a ativação neuronal pela expressão de FOS e a expressão de ER nos órgãos circunventriculares de animais ovariectomizados tratados com estradiol ou veículo. Os resultados mostram que a realimentação após jejum de 48 horas aumenta a expressão de FOS e a expressão da proteína de ER no PVN e SON, a expressão de FOS nos órgãos circunventriculares estudados e a concentração plasmática de AVP. No entanto, não foi observada diferença significativa entre os tratamentos. Houve uma inibição da expressão de ER nos órgãos circunventriculares estudados. Aparentemente, o estradiol não participa da elaboração de uma resposta frente ao estímulo osmótico induzido pela realimentação e não interfe na ativação de neurônios AVP e na secreção desse hormônio para circulação sanguínea. / The hydroelectrolyte homeostasis is controlled by information on volume and concentration of ions in the body fluids. Osmolality changes are detected by receptors in various regions of the CNS, including the circumventricular organs. Conformational changes of these cells activate neurons located in the paraventricular (PVN) and supraoptic (SON) nucleus of the hypothalamus, which secrete oxytocin (OT) and vasopressin (AVP). Feeding increases the plasma osmolality which induces the secretion of AVP and OT. Ovarian steroids may influence the balance of fluids modulating hormonal systems that regulate both consumption and excretion of water or acting directly on oxytocinergic and vasopressinergic neurons of the hypothalamus. However, this action is not clearly understood. It is possible that these systems respond differently to the estrogen changes perhaps by direct action through estrogen receptor type in AVP and OT neurons of the PVN and SON, and by indirect action through estrogen receptor type in circumventricular organs. The objective of this study was to evaluate the participation of estrogen in the modulation of AVP secretion in response to osmotic stimulus induced by refeeding after fasting. For this purpose, we performed the determination of plasma AVP, the analysis of the activation of AVP neurons, the protein content of ER in the PVN and SON as well as activation by neuronal expression of FOS and the expression of ER in the circumventricular organs in estrogen-primed and -unprimed ovariectomized animals. The results show that refeeding after fasting for 48 hours increases the expression of FOS and ER protein in the PVN and SON, the expression of FOS in the circumventricular organs studied and plasma AVP. However, there was no significant difference between treatments with estrogen or vehicle. There was an inhibition of ER expression in the circumventricular organs studied. Apparently, estrogen does not participate in the preparation of a response to the osmotic stimulus induced by refeeding and it does not interfere in the activation of AVP neurons or the secretion of this hormone to the bloodstream.

Orientador : Antonio Herbert Lancha Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T23:25:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Francischi_RachelPamfilioPradode_M.pdf: 10363324 bytes, checksum: bf68d1468b48d6b02221c295845846bf (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Dietas hiperlipídicas (HL) são fatores de risco para doenças metabólicas. A alimentação fracionada (padrão nibbling) parece prevenir tais desordens, e dietas com poucas e volumosas refeições (padrão gorging) podem causar obesidade e picos na insulinemia. O objetivo deste estudo foi avaliar o desenvolvimento de obesidade, de intolerância à glicose e de dislipidemia em ratas submetidas a diferentes freqüências de ingestão alimentar em dietas controle (11% de lipídeos) ou HL (39% de lipídeos). Ratas Wistar foram acompanhadas por 8 semanas, tendo sido divididas em 4 grupos: CG (controle gorging, com ingestão de ração comercial lx/dia durante 2h/dia); HLG (HL gorging, com consumo de HL lx/dia por 2h/dia); CN (controle nibbling, com acesso 24h/d à ração comercial) e HLN (HL nibbling, com acesso 24h/d à ração HL). O consumo alimentar foi limitado para igualar a ingestão energética entre os 4 grupos. Foram realizados OGTTs (testes orais de tolerância à glicose), dissecações e pesagens dos tecidos adiposos, extrações de gorduras dos tecidos, análises séricas e de glicogênio. Animais em HL apresentaram maior peso e maiores depósitos de tecido adiposo. A incorporação de gorduras na carcaça foi maior em CG (88,1 i: 21,0 mglg) que CN (55,7 i: 11,2 mglg), porém semelhante entre HLG (101,9 i: 19,2 mglg) e HLN (101,3 i: 14,3 mglg). CG e CN apresentaram maior conteúdo de glicogênio muscular que HLG e HLN. Grupos gorging apresentam maior teor de glicogênio hepático. Não foram detectadas diferenças na insulinemia, colesterolemia, trigliceridemia, albuminemia e nas concentrações de HDLcolesterol sérico, porém HLG apresentou a maior glicemia basal. A curva glicêmica de animais em HL apresentou glicemias mais elevadas que os controles. Houve prejuízo na tolerância à glicose também em resposta ao padrão gorging. O padrão gorging causou maior acúmulo de gorduras nos animais em dieta com restrição de gorduras, mas não aumentou o já eficiente acúmulo de tecido adiposo da alta ingestão de lipídeos. A associação da HL ao padrão gorging induziu prejuízos na tolerância à glicose. Estudos futuros serão importantes para melhor caracterizar a evolução da síndrome metabólica em resposta a estes comportamentos alimentares / Abstract: Fat diets (HL) are risk factor for metabolic diseases. Frequent feeding (nibbling pattern) may prevent these disorders, and meal feeding (gorging) may cause obesity and insulinemia peaks. The aim of this study was to evaluate obesity and glucose intolerance development, and serum lipids in rats submitted to different feeding frequencies associated to HL (39% fat) and control diet (11%). Female Wistar rats were accompanied during 8 weeks divided into: CG (gorging control, one meal a day with stock diet for 2h1day); BLG (gorging fat, one meal a day with fat rich diet for 2h1day); CN (nibbling control, 24h1d access to stock diet); BLN (nibbling fat, 24h1d access to fat rich diet). Food intake was limited in order to match the energy intake among all groups. OGTT (Oral glucose tolerance test), adipose tissue dissection, lipid extraction, plasma and glycogen analyses were performed. HL animals were heavier and fatter than controls. Lipid incorporation into carcass fat were greater in CG (88,1 i: 21,0 mg/g) than CN (55,7 i: 11,2 mg/g), however BLG (101,9 i: 19,2 mg/g) and BLN (101,3:t 14,3 mg/g) had the same fat amount in body carcass. CG and CN had more musc1e glycogen content than BLG and BLN. Gorging groups showed heavier liver glycogen deposit. There were no differences in insulinemia, cholesterolemia, serum albumin and serum HDL-cholesterol, but BLG had the greatest basal serum glucose. OGTT showed greater glucose concentrations in HL animals than in controls. There was glucose tolerance impairment in gorging rats. Meal feeding increased the rate of fat deposition when the low-fat diet is given, but did not improve the already efficient utilization of the high-fat diet. The association between HL and gorging induced glucose tolerance impairment. Future studies are important to better understand the metabolic syndrome evolution consequent to these feeding behaviors / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Made available in DSpace on 2016-12-23T13:56:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bermudes.pdf: 1280638 bytes, checksum: cf675a18fbda30bc9b61e74a1921a53e (MD5) Previous issue date: 2007-07-06 / Intermittent fasting is frequent in medical practice and this condition has been studied as a therapeutic intervention for some diseases. Increased life span and resistance to stress is observed in rodents submitted to intermittent fasting. However there is not much information on the evolution of infections in animals submitted to these diet manipulations. To study the evolution of fecal peritonitis in mice after 72 h fasting or after different time of intermittent fasting. After 72 h of fasting mice were submitted to cecal ligature and puncture or to an intraperitoneal injection of feces (1:6 or 1:9, weight/volume dilutions). Mice submitted to intermittent fasting, three days for two weeks or the day after the other day, during four months, received intraperitoneal injection of feces with the same dilutions. Mortality was evaluated up to 14 days, when the animals were killed to quantify the intraperitonel abscesses. The abscesses were classified with the values one, two or three according they were respectively up two, between two and five or higher than five millimeters in diameter. For each animal a score was obtained by the sum of values originated from the product of the number attributed to the abscesses versus the number of each abscess type. Control mice, paired by gender and age, were submitted to the same procedures. In mice submitted to 72 h fasting or intermittent fasting the signs of septic shock appeared earlier and were more severe, with higher mortality up to 24 h, although the global mortality evaluated by Kaplan-Meyer method was not significant after two weeks. Among the survivors the score of abscesses were significantly lower in mice submitted to fasting, mainly in groups treated with feces 1:9 dilution, in which occurred less mortality. Results demonstrate that acute or intermittent fasting increases the susceptibility to endotoxic shock and induces increased resistance to bacteria, demonstrated by reduction in number and volume of abscesses. / Jejum prolongado não é infrequente na prática médica e períodos intermitentes de jejum vêm sendo estudados como intervenção terapêutica para algumas doenças. Períodos intermitentes de jejum induzem aumento da longevidade e da resistência ao estresse em roedores. No entanto, pouco se conhece sobre o efeito dessas manipulações de dieta na evolução de infecções. Estudar a evolução de peritonite fecal em camundongos após jejum de 72 horas ou após períodos de jejuns intermitentes. Camundongos foram submetidos a jejum de 72 h e em seguida à ligadura e punção do ceco ou à injeção intra-peritoneal de fezes (diluídas a 1:6 ou a 1:9). Camundongos submetidos a jejum intermitente de três dias a cada duas semanas ou em dias alternados, durante quatro meses, foram submetidos a peritonite por injeção intra-peritoneal de fezes com as mesmas diluições. Foi avaliada a mortalidade até duas semanas, quando os animais foram sacrificados para contagem e mensuração dos abscessos intraperitoneais. Os abscessos recebiam os valores 1, 2 ou 3 conforme tivessem até 2, de 2 a 5 ou acima de 5 mm de diâmetro, respectivamente. Um escore para cada animal foi calculado pela soma dos valores obtidos da multiplicação do número de abscessos pelo valor atribuído ao seu tamanho. Animais controle, mantidos em dieta ad libitum , pareados por idade e sexo, foram submetidos aos mesmos procedimentos. Nos animais submetidos ao jejum agudo ou intermitente, as manifestações do choque séptico foram sempre mais precoces e mais graves, com maior mortalidade nas primeiras 48 h, embora nem sempre a diferença na sobrevivência (Kaplan-Meyer) tenha sido significativa. Nos sobreviventes, o escore dos abscessos era significativamente menor nos grupos submetidos a jejum, especialmente quando a peritonite fecal era induzida por injeção mais diluída de fezes (1:9), com menor mortalidade. Os resultados mostram que o jejum agudo ou o jejum intermitente aumentam a susceptibilidade ao choque endotóxico, mas aumenta resistência às bactérias, demonstrada pela menor extensão dos abscessos peritoneais formados.

Estudou-se o efeito da alimentação, do jejum e da realimentação sobre o perfil metabólico e ruminal de bovinos em crescimento. Para tal, empregaram-se 12 garrotes mestiços, com cerca de 300 kg, obtendo-se amostras de sangue e fluido ruminal no decorrer dos seguintes períodos: 11 horas de alimentação normal (período pós-prandial), 48 horas consecutivas de jejum alimentar, seguida de 48 horas de realimentação. Comparado com o período pós-prandial, o jejum provocou as seguintes modificações: moderada hipoglicemia; acompanhada por marcante lipólise, detectada pelo aumento nos teores plasmáticos de ácidos graxos livres; ausência de lipidose hepática, visto que não ocorreram alterações na atividade da aspartato aminotransferase e nos teores de colesterol sérico; discreta cetogênese, confirmada pela pequena elevação de &beta;-hidroxibutirato; e certo grau de proteólise, verificado pelo aumento dos teores de uréia sérica e da excreção urinária de uréia. Nesse mesmo período ocorreu uma ligeira hipovolemia, caracterizada pelo aumento no déficit de volume intravascular. Este quadro metabólico verificado durante o jejum foi completamente revertido durante a realimentação, com exceção da proteólise que foi temporariamente maior. O jejum provocou notável modificação no perfil ruminal: intensa elevação no pH do fluido; diminuição marcante na flora e fauna que foi detectada, respectivamente, pela menor quantidade de matéria seca bacteriana e expressiva redução no número de protozoários; notória elevação no tempo de redução do azul de metileno; queda no índice de excreção urinária de alantoína, contudo sem alteração no índice de excreção urinária de ácido úrico. A realimentação promoveu completa e rápida recuperação das variáveis do perfil ruminal, com exceção do número de protozoários, que embora tenha se elevado, não atingiu os valores basais. A prova de redução de azul de metileno apresentou alta correlação positiva (r = 0,89) com a quantidade de matéria seca bacteriana. Devido à facilidade, rapidez e praticidade de ser conduzida e a alta sensibilidade indica-se a prova de redução do azul de metileno como teste de eleição na análise do perfil ruminal. / The effect of feeding, fasting and refeeding on metabolic and ruminal profile of steers was studied. Thus, blood and ruminal samples were drawn of twelve 300 kg crossbred steers throughout three different periods: 11 hour during normal feeding, 48 hour of fasting followed by the same time of refeeding. The fasting caused a moderate hypoglycemia, followed by marked lipolysis, detected by the high plasma free fatty acid concentration, but there was no evidence of hepatic lipidosis, since there were no changes in the activity of aspartate aminotransferase and serum cholesterol levels; a discrete ketogenesis occurred as there was a slight increase in the &beta;-hidroxibutirate concentration; proteolysis were detected by the increase of serum and urinary excretion of urea. During the fasting the animals developed a slight hypovolemia detected by the increase of the plasma volume deficit. These metabolic changes were completely reversed during the refeeding, but the proteolysis had a temporary increase. The fasting gave rise to deeply changes in the ruminal profile, such as: increase in the rumen pH, reduction the number of rumen protozoa and bacteria, as seen by the low bacteria dry matter; increase in the methylene blue reduction time and lowering of the urinary excretion of allantoin, but no changes were seen in the uric acid urinary level. The refeeding made the rumen status return to normal, but the protozoa number that despite a slight increase was very far away from the basal standard. There was a high (r = 0.89) positive correlation between the methylene blue reduction time and the rumen bacteria dry matter. Due to the easiness, promptness, feasibility, and its high sensibility the methylene blue reduction method should be used to check the ruminal profile.

Orientador: Dionei Ramos / Resumo: Introdução: O tabagismo, bem como a abstinência deste, traz uma série de mudanças físicas e psicológicas. Na literatura a escala The Mood And Physical Symptoms Scale (MPSS) e a Wisconsin Smoking Withdrawal Scale (WSWS) são semelhantes e avaliam sintomas da abstinência do tabagismo, porém somente a WSWS é validada para o Brasil, sendo necessária a validação transcultural da MPSS. Além disso, é necessário verificar em momentos diferentes da abstinência, a responsividade das duas escalas a fim de quantificar corretamente os sintomas relacionados à Síndrome de Abstinência Tabagística (SAT). Objetivos: Verificar se MPSS é um instrumento válido e reprodutível para avaliar a presença de sintomas da SAT em tabagistas brasileiros e, determinar a diferença mínima clinicamente importante (DMI) da MPSS e WSWS após cessação. Métodos: Para a validação, 112 tabagistas responderam a escala MPSS e (WSWS) da seguinte forma: basal (avaliador 1 – MPSS e WSWS), após 30 minutos (avaliador 2 - MPSS) e após 15 dias (avaliador 1 - MPSS). Para a DMI foram avaliados 33 tabagistas após 24 horas e terceira semana após a cessação do tabagismo. Para reprodutibilidade na aplicação, e reaplicação da MPSS, o coeficiente de correlação intraclasse (CCI) foi utilizado, assim como o teste de Wilcoxon, para verificar se houve diferença entre as aplicações. A consistência interna da escala foi avaliada por meio do coeficiente alfa de Cronbach. A validade de constructo da MPSS em relação a WSWS foi avaliada por meio... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Introduction: Smoking, as well as this abstinence, brings a series of physical and psychological changes. In the literature, The Mood and Physical Symptoms Scale (MPSS) and The Wisconsin Smoking Withdrawal Scale (WSWS) are similar and evaluate smoking cessation symptoms, but only the WSWS is validated for Brazil, requiring cross-cultural validation of the MPSS. In addition, it is necessary to verify at different times of abstinence the responsiveness of the two scales in order to correctly quantify the symptoms related to the Smoking Abstinence Syndrome (SAS). Aim: Verify if MPSS scale is a valid and reproducible instrument to evaluate the presence of SAT symptoms in Brazilian smokers and to determine the Minimal Detectable Change (MDC) of MPSS and WSWS after cessation of smoking. Methods: For validation, 112 smokers answered to the MPSS and WSWS as follows: baseline (appraiser 1 - MPSS and WSWS), after 30 minutes (appraiser 2 - MPSS) and after 15 days evaluator 1 - MPSS). For MDC, 33 smokers were assessed after 24 hours and third week after cessation of smoking. For reproducibility in the application and reapplication of the MPSS, the intraclass correlation coefficient (ICC) was used and the Wilcoxon test, to verify if there was a difference between the applications. The internal consistency of the scale was evaluated using the Cronbach alpha coefficient. The construct validity of the MPSS in relation to the WSWS was evaluated by means of the Spearman correlation coefficient... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre