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Distribuição dos receptores de acetilcolina e eliminação sinaptica durante o desenvolvimento da junção neuromuscular do camundongo MDXMinatel, Elaine, 1976- 05 September 2002 (has links)
Orientador: Maria Julia Marques / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-01T11:47:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2002 / Resumo: As junções neuromusculares (JNM) dos vertebrados, inicialmente polinervadas, tomam-se monoinervadas em um processo denominado eliminação sináptica. Os mecanismos envolvidos neste processo ainda são pouco conhecidos, sendo uma das possibilidades a de que mudanças no nível das moléculas da membrana pós-sináptica poderiam levar a remoção dos terminais nervosos em excesso. Neste sentido, a JNM distrófica se toma um modelo interessante para o estudo dos mecanismos envolvidos na eliminação sináptica, uma vez que as fibras distróficas não expressam distrofina e apresentam redução de moléculas do complexo distrofina-glicoproteina, complexo este que faz parte do citoesqueleto pós-sináptico e que possivelmente está envolvido na estabilização dos receptores de acetilcolina (AChRs). Desta forma, no presente trabalho verificamos se a eliminação sináptica e a distribuição dos receptores de acetilcolina, observados durante o desenvolvimento pós-natal, estão alterados na fibra deficiente de distrofina. Os AChRs e os terminais nervosos do músculo estemomastóide de camundongos mdx e controle (C57BL/1O) foram marcados, respectivamente, com rodamina-a.-bungarotoxina e anticorpo anti-neurofilamento. Através da microscopia confocal, observamos que 7 dias após o nascimento a maioria das JNMs do camundongo mdx se encontravam monoinervadas (86,7% - n=200), enquanto a mesma observação foi feita em 41,4% no controle (n=200). Consistente com este fato, no mesmo período, a presença de placas perfuradas é mais fTequente no mdx (18,6%) do que no controle (7,3%). No final da segunda semana pósnatal, todas as JNMs se encontravam monoinervadas (100% mdx e 94,7% controle, n=200 para cada grupo) e os AChRs apresentavam o padrão de distribuição adulto. No camundongo mdx, a presença de AChRs distribuídos em pequenas ilhas foi observada no período de 21 dias pós-natal em 13,3% das JNM, indicando a presença de fibras musculares regeneradas. Nossos resultados demonstram que a eliminação sináptica ocorre mais cedo nas fibras musculares distróficas quando comparada ao de um animal controle, sugerindo assim que a estabilização da fibra muscular pela distrofina ou pelo complexo distrofinaglicoproteínas normal é necessário para o curso da eliminação sináptica em tempo normal / Abstract: The vertebrate neuromuscular junction goes trom multiple to monoinervated during early postnatal life in a process calIed synapse elimination. The mechanisms underlying this process are unknown but one possibility would be that changes at in the molecular level in the postsynaptic cell lead to the removal of the overlying nerve terminal. The mdx mice show a deficiency of dystrophin and associated proteins, which are part of the postsynaptic cytoskeleton and possibly involved in acetylcholine receptors (AChRs) stabilization. In the study, we used rhodamine-a-bungarotoxin and anti-neurofilament-IgG-FITC to stain AChRs and nerve terminals of the sternomastoid muscle, during early postnatal development of mdx and control C57BL/lO mice. Using fluorescence confocal microscopy, we observed that 7 days after birth, 86,7% of the mdx endplates were monoinervated (n=200) while the same observation was made in 41,4% of the controls (n=200). Consistent with this is the fact that, at this time, perforated plaques were seen more trequent1y in mdx (18,6%) than controls (7,3%). By the end of the second postnatal week, all the endplates were monoinervated (100% mdx and 94,7% controls, n=200 for each group) and AchRs had attained the branched-pattern distribution of adults. In mdx mice, breaking down of receptors into islands, as observed in adult mdx, were seen 21 days after birth in 13,3% of the junctions, indicating the presence of regenerated muscle fibers. These results show that synapse elimination takes place earlier in dystrophin-deficient muscle fibers of the mdx mice, suggesting that stabilization of muscle fiber by dystrophin or a nonnal cytoskeleton complex is required for the nonnal time course of synapse elimination / Doutorado / Anatomia / Doutor em Biologia Celular e Estrutural
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Distribuição do CGRP na junção neuromuscular de camundongos distroficos da linhagem MDXGuimarães, Alessandra Oliveira 14 August 2002 (has links)
Orientador: Maria Julia Marques / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T04:25:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2002 / Resumo: Os camundongos distróficos da linhagem mdx apresentam ausência de distrofina e ciclos de degeneração-regeneração muscular, sendo o modelo experimental usado para estudar a distrofia muscular. As principais alterações na fibra muscular destes animais são observadas na junção neuromuscular (JNM), em que as dobras juncionais são escassas e pouco desenvolvidas e os receptores de acetilcolina (AChRs) se apresentam em pequenos aglomerados que contrastam com a distribuição em braços contínuos típicos de animais normais. O terminal nervoso contém, dentre outras moléculas, o peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP), que auxilia na manutenção da alta densidade dos AChRs no topo das dobras juncionais. Uma vez que a falta da distrofina parece não ser o único fator responsável pelas alterações causadas nos AChRs, o objetivo do presente trabalho foi investigar a distribuição do CGRP nas JNM distróficas de camundongos da linhagem mdx. Foram utilizados animais distróficos mdx e animais normais C57B1/1O como controle. Os animais utilizados eram de ambos os sexos, com 3 a 4 meses de idade. Os músculos esternomastóideos (STNs) foram marcados com rodamina-alfa-bungarotoxina para observação dos AChRs e o CGRP foi marcado com os anti-corpos anti-CGRP-IgG-FITC (Sigma). Através da microscopia confocal de fluorescência observamos que 81% das junções controle estavam positivas à marcação do CGRP, enquanto que nos animais mdx, 34% das junções apresentavam marcação do CGRP. Sugerimos que o CGRP, nos mdx, não se acoplaria corretamente ao complexo de glicoproteínas, por este estar alterado devido à ausência da distrofina e que sua quantidade reduzida deve ser resultado de alteração na produção, transporte e/ou ligação deste peptídeo no complexo de glicoproteínas, o que poderia contribuir, pelo menos em parte, para as alterações de distribuição dos receptores de acetilcolina tipicamente observadas nos animais mdx / Abstract: The aim of the present investigation was to study the distribution of the calcitonin gene related peptide (CGRP) at the neuromuscular junction (nmj) of mdx mice. Mutant mdx mice carry a point mutation on the X-chromosome and have a profound deficiency of dystrophin, for this they are the experimental model to study muscular dystrophy. We used the sternomastoid muscle (STN) of adult (3-4 months) mdx mice and control C57Bl/1O mice. The muscles were removed, labelled with rhodamin-abungarotoxin for acetylcholine receptors (AChRs) observation and anti-CGRP-IgG-FITC to label CGRP. A BioRad laser fluorescence confocal system (MRC 1024 UV) mounted on an Axiovertt 100 Zeiss inverted microscope equipped with an Ar-Kr and UV lasers was used. We found that fewer dystrophic nmjs showed CGRP labeling, when compared to controls. In controls, the label was seen in intramuscular nerve branches and in nerve terminals covering the AChRs branches. In mdx mice, intramuscular nerve branches were rarely seen and CGRP staining colocalized with AChRs in a more diffuse pattern. AChRs distribution in mdx mice was disrupted, as typically seen in dystrophin-deficient fibers. Receptors seemed to be usually brighter than controls, suggesting an increase in AChRs density. These results suggest that CGRP production and or release are under different control in dystrophic and normal muscles and this may lead to changes in AChRs turnover or distribution seen in mdx mice / Mestrado / Anatomia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural
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Contribuição ao estudo da guanidina na junção neuromuscularCarvalho, Ilma da Silva 13 July 2018 (has links)
Orientador: Lea Rodrigues Simioni / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-13T23:57:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1991 / Resumo: Com o objetivo de esclarecer o mecanismo pelo qual a gua¬nidina interfere com a transmissão neuromuscular estudaram-se os seguintes aspectos do fenômeno: ação pré-juncional - sugerida pela facilitação inicial que também está presente na ação da 4-aminopiridina, indicando fortemente um mesmo mecanismo de ação para ambas, ou seja, bloqueio de canal de K dependente de voltagem; tal sugestão. é apoiada pelo retardo da fase de relaxamento determinada pela guanidina; pelo aumento na freqüência dos potenciais de placa terminal em miniatura (pptm) reforçando a hipótese de uma ação a nivel de terminal nervoso. Além disso, a guanidina aumenta a freqüência dos pptm mesmo em preparações previamente incubada com TTX (0,5g/ml) . No entanto, a usual descarga do pptm ap6s lavagem, consequente a retirada da guanidina está ausenta na vigência de TTX.Ação pós-juncional: os estudos em músculo curarizado e cronicamente desnervado em presença de guanidina 10mM induziu aumento na amplitude de resposta a estimulo direto e ausência de facilitação pós-lavagem. Além disso a curva dose-efeito da acetilcolina exibiu um bloqueio não competitivo em presença de guanidina (10 - 20 mM). O efeito despolarizante do carbacol sobre a membrana pré sináptica não foi afetado pela guanidina / Abstract: Not informed. / Doutorado / Farmacologia / Doutor em Ciências
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Uma nova proposta para confecção da extensão da terminação da junção (JTE) em dispositivos planares de alta tensãoMouallem, Janete 09 August 1991 (has links)
Orientador: Jose Antonio Siqueira Dias / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Eletrica / Made available in DSpace on 2018-07-14T00:23:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1991 / Resumo: Sabe-se que a curvatura da junção reduz a tensão de ruptura de junções p-n. Neste trabalho, desenvolveu-se uma técnica simples que usa pré-deposição convencional de boro com fontes dopantes sólidas, para fazer uma Extensão da Terminação da Junção (Junction Termination Extension - JTE) em substituição aos processos de implantação de íon de alto custo. Para a obtenção de níveis de dopagem extremamente baixos para a fabricação do JTE, uma camada de óxido bem fina é previamente crescida sobre o "wafer", por uma oxidação à baixa temperatura, atuando como uma barreira para a carga de boro, controlando a carga liquida que alcança a superfície do silício / Abstract: Junction curvature has been known to reduce the breakdown voltage of p-n junctions. A simple technique that uses conventional boron pre-deposition with solid sources dopants was developed in this work to make Junction Termination Extension (JTE) in substitution for the high cost ion-implanted processes. To obtain the extremely low doping levels for the fabrication of the JTE, a very thin oxide layer previously grown on the wafer by a LTO acts as a barrier to the boron charge, controlling the net charge that reaches the silicon surface / Mestrado / Mestre em Engenharia Elétrica
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Desenvolvimento de um instrumento baseado em um microcomputador para estudar a ação de drogas e toxinas na junção neuromuscularAmaral, Darcio de Almeida 12 August 1985 (has links)
Orientador: Maria Adelia Collier Farias / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Campinas / Made available in DSpace on 2018-07-14T02:51:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1985 / Resumo: Este trabalho descreve um instrumento capaz de calcular o conteúdo quanta 1 médio (o número médio de quanta de acetilcolina liberados por um potencial de ação), a partir de seqüências de potenciais de placa terminal e potenciais de placa terminal em miniatura; e assim, caracterizar de maneira quantitativa a ação. De drogas e toxinas na junção neuromuscular. O instrumento, baseado em um microcomputador, é versatil e de custo relativamente baixo. Seu software pode ser fácil mente expandido pela adição de novos programas que possibilitem uma análise mais sofisticada do problema. / Abstract: A microcomputer-based instrument, to study the effects of drugs and toxins in the transmission of impulses from nerve to muscle, is described. The instrument computes the mean number of packets of acetylcholine liberated by an impulse, from trains of end-plate potentials and miniature end-plate potentials. Being microcomputer-based, it is versatile and relatively inexpensive, and its software can be easily expanded to include other routines which would be necessary for a more sophisticated analysis. / Mestrado / Mestre em Engenharia Elétrica
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Distribuição das celulas de Schwann na junção neuromuscular de camundongos distroficos da linhagem mdxCarvalho, Candida Luiza Tonizza de 16 April 2003 (has links)
Orientador: Maria Julia Marques / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T15:01:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2003 / Resumo: O objetivo do presente trabalho foi verificar possíveis alterações no padrão de distribuição das células de Schwann nas junções neuromusculares de camundongos distróficos comparando-se com a distribuição observada em animais normais controle, desnervados ou não. Sabe-se que as células de Schwann induzem e guiam os brotamentos do terminal nervoso. Nos animais distróficos, os quais apresentam ausência de distrofina, bem como ciclos de degeneração-regeneração da fibra muscular, há aumento dos brotamentos intraterminais, sem lesão nervosa. Foram utilizados 10 animais distróficos mdx e 10 normais da linhagem controle C57BL/I0, com 14 (P14) e 60 (P60) dias, dos quais 5 foram desnervados. As células de Schwann e os receptores de acetilcolina (AChRs) foram marcados com anti-S 100-IgG-anti-rabbit-FITC erodaminaungarmona, respectivamente. Através da microscopia de fluorescência confocal observamos nos animais controles desnervados P60 (n = 100 junções) maior complexidade na distribuição dos prolongamentos das células de Schwann, conforme esperado. Em animais controle P14 (n = 536) o padrão de distribuição das células de Schwann e sua relação com os AchRs foram semelhantes aos animais distróficos P14 (n = 47), apresentando prolongamentos citoplasmáticos co-localizados, simples e contínuos ao longo dos braços dos AChRs. Em controle P60 (n = 237) os prolongamentos apresentam-se simples e contínuos ao longo dos braços dos AChRs, diferentemente no mdx P60 (n = 192), os prolongamentos encontram-se condensados e na porção distal fragmentados, no centro das ilhas de receptores. Estes resultados sugerem que as células de Schwann sofrem alterações que acompanham as do terminal nervoso, mesmo em ausência de lesão axonal, na fibra muscular distrófica / Abstract: The pattem of Schwann distribution was studied at the neuromuscular junction of the mdx mice. These mice show deficiency of dystrophin, a sarcolemmal protein that forms a complex with other cytoskeletal components of the muscle fiber membrane. In these fibers there is an increase in the amount of intracellular calcium leading to myonecrosis, which in the mdx is followed by cycles of muscle regeneration-degeneration. The major changes at the dystrophic neuromuscular junction are seen at the postsynaptic site. However, an increase in the complexity of the nerve terminal architecture was reported in this animal, possibly related to the changes in the postsynaptic membrane, with no alterations in the nerve terminal functional properties. By using fluorescence confocal microscopy, we observed that at most ofthe adult (2 month-old) mdx junctions (n = 192) viewed, terminal Schwann cells labeled with anti-S-100 presented prolongations of the cytoplasm co-localized with acetylcholine receptors, in a more compIex pattem of distribution as seen in controIs (n = 237 junctions). When viewed before the cycles of degeneration-regeneration had began (14 days after birth; n = 47 mdx endpIates), there were no qualitative differences in the pattem of Schwann cell distribution, when compared to controIs at the same age (n =536 neuromuscuIar junctions). This suggests that changes at the postsynaptic membrane may Iead to changes in Schwann cell pattem of distribution, which paralIel the alterations in nerve terminal architecture reported for the mdx mice, only after the degenerative- regenerative cycles of the muscle fiber had been established. / Mestrado / Anatomia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural
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Modelamento de transistores bipolares de heterojunçãoMartins, Everson 29 June 1995 (has links)
Orientador: Jacobus W. Awart / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Fisica Gleb Wataghin / Made available in DSpace on 2018-07-20T13:31:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1994 / Resumo: Neste trabalho apresentamos um estudo inicial sobre os mecanismos de transporte de corrente envolvidos em uma heterojunção. Vemos que os mecanismos de deriva e difusão não são suficientes para descrever seu comportamento elétrico ( devido a um spike na banda de condução, no caso de transistor Npn), sendo introduzido o mecanismo de Emissão-Termiônica. Considerando este novo mecanismo modelos EBERS-MOLL e GUMMEL-POON são obtidos para descrever este transistor. Destes modelos, considerando um transistor de uma única heterojunção abrupta na junção de base-emissor, obtemos as equações das correntes de base e de coletor na região onde os efeitos de resistências parasitárias e térmicos são desprezados. Nestas condições mostramos a equivalência entre os dois modelos e consideramos somente o modelo EBERS-MOLL. Comparando os resultados práticos com os teóricos, vemos correntes de coletor calculadas muito menores que os valores medidos. Isto se deve ao fato de não levarmos em conta o tunelamento de cargas através do spike. O efeito do tunelamento é aumentar o valor da corrente e saturação (IS) e o fator de idealidade (nF). Assim conseguimos uma boa concordância entre o modelo teórico e as curvas experimentais. Para altos valores de tensão entre base-emissor, o tunelamento desvia o modelo das curvas experimentais.
Tendo o modelo, partimos para a obtenção dos parâmetros necessários a sua descrição Avaliamos e implementamos um conjunto de técnicas de medidas e extração de parâmetros ( rE, rC , IS, nF, ISE, nE, ISC, nC, bF e bR). Derivamos também o modelo de pequenos sinais a partir do modelo DC e estudamos uma metodologia de extração deste modelo a partir de medidas de parâmetros S do dispositivo. A extração não foi possível devido aos altos efeitos parasitários decorrente das estruturas de testes de microondas. Nos apresentamos soluções para reduzir estes efeitos.
Realizamos medidas e comparamos três tipos diferentes de dispositivos: transistores bipolares de homojunção , transistores bipolares de heterojunção de AlGaAs/GaAs e transistores bipolares de heterojunção de InP /InGaAs. Nos transistores de AlGaAs/GaAs que medimos vemos uma ausência da região onde a relação entre a corrente de coletor e de base é constante, devido a alta taxa de recombinação lateral. Já nos transistores de InP /InGaAs que medimos esta região existe, mas é devido a alta taxa de recombinação na região neutra de base / Abstract: A study about current transport mechanism through a heterojunction is presented. Drift and diffusion mechanism are not enough to describe the electrical current (due to a spike in the conduction band of the Npn transistor). This has led to the introduction of the Thermionic-Emission mechanism. The Ebers-Moll and Gummel-Poon models are also compatible with this last mechanism. The equations of the base and collector currents for a transistor with a single heterojunction are developed, considering that parasitic resistances and thermal effects are negligible. It is shown that both models, Ebers-Moll and Gummel-Poon, are equivalent. Based on this, the Ebers-Moll model was selected. By comparing the calculated currents with the experimental ones, it is I shown that the calculated ones are much smaller. This is proposed to be I attributed to the tunneling through the spike. The effect of tunneling is to increase the parameters of saturation current (IS) and ideality factor (nF). A good , fit between experiment and model is obtained by this way. For high base-emitter bias values, however, the model deviates from the experimental curve.
A set of DC measurement techniques was implemented and parameter extraction procedures were implemented and analyzed. A small signal model was derived from the DC model and a methodology for extracting the parameters of the model from the S parameters of the devices is presented. The actual extraction of the AC parameters of the devices was not possible due to high parasitic effects associated to the layout of the pads. Corrections for the problem are presented. '
Three different types of devices were measured and compared: homojunction bipolar transistors, HBTs of AIGaAs/GaAs and HBTs of InP/lnGaAs. For the AIGaAs/GaAs devices, no bias range with constant relation between base and collector currents was obtained, due to a high lateral recombination current. On the other hand, for the InP/lnGaAs devices, a constant relation between base and collector current was obtained, in this case attributed to a high recombination current in the neutral base region / Mestrado / Física / Mestre em Física
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Contribuição ao estudo das ações do McN-A-343 na função neuro-muscularSimioni, Lea Rodrigues, 1942- 18 July 2018 (has links)
Orientador : Oswaldo Vital Brazil / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-18T02:24:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1976 / Resumo: As ações do McN-A-343 (McN) - potente estimulante ganglionar não-nicotínico - na junção neuromuscular foram estudadas em preparações inervadas e desnervadas dos músculos tibial anterior de gato "in situ" e diafragma isolado de rato, empregando-se técnicas mio gráficas e eletrofisiológicas. Com base nos nossos resultados e nas considerações tecidas a respeito, podemos concluir que: 1º) o McN apresenta dois tipos de efeitos na junção neuromuscular, dissociáveis pelo emprego de diferentes níveis de concentração do composto, isto é, um efeito estimulante quando aplicado em pequenas doses e um efeito bloqueador que se instala ap6s a aplicação de altas doses; 2º) o efeito estimulante, traduzido por um discreto porém prolongado aumento da amplitude da contração das referidas preparações, decorre fundamentalmente da despolarização dos terminais nervosos motores, evidenciada através do aumento da freqüência da descarga dos potenciais de placa terminal em miniatura (mepp) e, em menor grau, da discreta atividade anticolinesterásica do composto observada "in vivo" e comprovada "in vitro" na vigência da aplicação de pequenas doses de McN / Abstract: Not informed / Doutorado / Doutor em Ciências Médicas
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ASBJOIN: uma estratégia adaptativa para consultas envolvendo operadores de junção em Linked data / ASBJOIN: an adaptive strategy for queries involving join operators on Linked dateMaia, Macedo Sousa January 2013 (has links)
MAIA, M. S. ASBJOIN: uma estratégia adaptativa para consultas envolvendo operadores de junção em Linked data. 2013. 97 f. Dissertação (Mestrado em Ciência da Computação) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013. / Submitted by Daniel Eduardo Alencar da Silva (dealencar.silva@gmail.com) on 2015-01-23T20:44:30Z
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Previous issue date: 2013 / Motivated by the success of Linked Data and driven by the growing number of data sources into RDF files available on the web, new challenges for query processing are emerging, especially in distributed settings. These environments allow distributed execution of federated queries, which involve joining data provided by multiple sources, which are often unstable. In this sense, the design of new algorithms and adaptive strategies for efficiently implementing joins is a major challenge. In this paper, we present a solution to the adaptive joins execution in federated queries. The adaptative context of distributed data sources is based on statistics that are collected at runtime. For this, we use a module that updates the information in the catalog as the query is executed. The module works in parallel with the query processor. / Motivado pelo sucesso de Linked Data e impulsionado pelo crescimento do número de fontes de dados em formato RDF disponíveis na Web, novos desafios para processamento de consultas estão emergindo, especialmente em configurações distribuídas. No ambiente de Linked Data, é possível executar consultas federadas, as quais envolvem junções de dados fornecidos por múltiplas fontes. O termo consulta federada é usado quando queremos prover soluções baseadas em informações obtidas de diferentes fontes. Nesse sentido, a concepção de novos algoritmos e estratégias adaptativas para a execução de junções de forma eficiente constitui um desafio importante. Nesse trabalho, apresentamos uma solução para a execução adaptativa de operações de junções de dados em consultas federadas. A execução da operação de junção adaptativa entre informações contidas em fontes de dados distribuídas baseia-se em estatísticas, que são coletadas em tempo de execução. Uma informação estatística sobre uma determinada fontes seria, por exemplo, o tempo decorrido (Elapsed Time) para obter algum resultado. Para obter as informações estatísticas atualizadas, usamos uma estratégia que coleta essas informações durante a execução da consulta e,logo após, são armazenadas em uma base de dados local, na qual denominamos como catálogo de informações estatísticas.
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Efeitos do veneno de Micrurus dumerilii carinicauda na junção neuromuscukar e bo musculo esqueletico de ratoSerafim, Francine Gonzaga 25 August 2000 (has links)
Orientadores: Marcos Dias Fontana, Maria Alice da Cruz-Hofling / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-26T15:39:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2000 / Resumo: A serpente Micrurus dumerilii carinicauda (Md.carinicauda) é uma espécie de coral, encontrada do Norte de Santander, região nordeste da Colômbia, atravessa a Bacia do Maracaibo e estende-se até Caracas no Estado de Miranda, na Venezuela. Pouco se conhece sobre o modo de ação do veneno desta espécie de Micrurus, que contém uma variedade de neurotoxinas e miotoxinas. Neste trabalho, o veneno de M d. carinicauda induziu bloqueio neuromuscular nas preparações nervo frênico-diafragma de rato e biventer cervicis de pintainho. Em ambas as preparações, o veneno (5 ~g!ml) não deprimiu a resposta contrátil evocada pela estimulação elétrica direta. A Neo (5,8 ~) e a 3,4-DAP (230~) antagonizaram, parcialmente, efeito bloqueador neuro~uscular produzido pelo veneno (5, 10 e 20 ~gIml) nas preparações nervo frênico-diafragma de rato, enquanto a~ sucessivas lavagens da preparação com Tyrode foram ineficazes na tentativa de reverter o bloqueio neurotnuscular induzido pelo veneno. Tais resultados sugerem uma ação do veneno nos receptores colinérgicos nicotínicos pós-sinápticos. As contraturas induzidas pela adição de acetilcolina (ACh; 15 J..IM) tanto no diafragma desnervado como no biventer cervicis de pintainho (ACh; 37 tJM) foram inibidas pela ação do veneno (5 J..1g1ml), mas a contratura evocada pela adição do KCI (134 tJM) não foi deprimida. Sugerindo mais uma vez, que a ação do veneno ocorre nos receptores colinérgicos nicotínicos e que não possui ação sobre a fibra muscular, nesta dose estudada. Esta hipótese foi confirmada com o estudo dos potenciais bioelétricos. O veneno, na dose de 5 /-lg/ml, produziu um progressivo decréscimo na amplitude e freqüência dos potenciais de placa terminal em miniatura (pptm) até seu bloqueio completo. A Neo e a 3,4-DAP foram capazes de reverter totalmente o bloqueio dos pptm, sugerindo assim que a ação do veneno (5 /-lg/ml) ocorra pós sinapticamente. O estudo do potencial de membrana mostrou que o veneno (5 /-lg/ml) não possui ação despolarizante sobre a fibra muscular do diafragma de rato, embora os estudos morfológicos tenham demonstrado que este possui ação miotóxica já com esta dose. A dissociação dos efeitos miotóxicos dos efeitos farmacológicos está relacionado com o número de fibras musculares que permaneceram íntegras. O efeito miotóxico do veneno, na preparação nervo frênico-diafragma de rato, mostrou ser dose-dependente. Estudos histológicos e ultra-estruturais mostraram que nas doses de 5 e 10 /-lg/ml o veneno induziu miotoxicidade e, esta foi mais evidente com a dose de 10 /-lg/ml, afetando a integridade do sarcolema de numerosas fibras musculares e produziu desorganização dos sarcômeros e ainda condensação dos miofilamentos. Nestas mesmas doses, o veneno também causou alterações ultra-estruturais sobre a junção neuromuscular, dentre as quais a bipartição do terminal nervoso e invaginação dos processos da célula de Schwann, alterações topológicas na distribuição das vesículas sinápticas, bem como a presença de mitocôndrias degeneradas e indentações ômega, formando pequenas invaginações no axolema. Em conclusão, os resultados sugerem que o veneno induz miotoxicidade nas preparações estudadas, mas o efeito predominante do ocorre nos receptores colinérgicos nicotínicos pós-sinápticos / Abstract: The effects of the venom of Micrurus dumerilii carinicauda (M d. carinicauda), a coral snake restricted to north of South America (Venezuela and Colombia), was studied in mammal (rat hemidiaphragm) and avian (chick biventer cervicis) muscle preparations by pharmacological and morphological approaches. The venom induced neuromuscular blockade in the rat phrenic nerve-diaphragm preparation and on the chick biventer cervicis nerve-muscle preparation. Neostigmine (Neo) and 3,4-Diaminopyridine (3,4-DAP), antagonize partially the effect of the venom on the neuromuscular transmission in the rat nerve-diaphragm. Either in rat phrenic nerve~diaphragm preparation as well as on the chick biventer cervicis nerve-muscle preparation, the venom does not depress the twitch response elicited by direct muscle stimulation. The contractures induced by acetylcholine (ACh) .in the denervated rat hemidiaphragm and in the chick biventer cervicis are inhibited by the venom. This fmdings - suggests that the main cause of the neuromuscular blockade is due to a post synaptic action on the nicotinic receptors. It is corroborated by our findings on the bioelectrical potentials where Ju. d. carinicauda venom (5 ~g/m1) produced a progressive decrease in the amplitude of the miniature end-plate potentials until these were abolished. Neo (5.8 ~M) and 3,4-DAP (230 ~M) antagonized this blocked effect on neuromuscular transmission and fully prevented the venom-induced blockade of m.e.p.p.s These results indicates that M d. carinicauda venom produces neuromuscular blockade mainly by apost synaptic action. M d. carinicauda venom (5 ~g/ml) had no effect on the resting membrane potential and had no effects on the muscle contractile response under direct stímulation. Our fmdings also shown that this venom (5 or 10 Jlg/ml) induces pronounced myotoxicity (1 °Jlg/ml), affecting in a number of fibers the sarcolemma integrity and producing sarcomere disorganization and clumping of myofllaments. This effect though seems to have little influence on the neuromuscular-inducing effect, since even with 20 Jlg/ml of the venom there is no change in the muscle contractile response under direct stimulation. In parallel, Md.carinicauda venom produced adose-dependent morphological change on the mammal preparation. In addition the higher the dose the more frequent the presence of multiple zones of closely-massed myofibrils in diaphragm preparation. In biventer cervicis, changes have a slow onset and were greatly characterized by undulation of fibers and rarely by collapsing zones of myofibrils by the end of the incubation period. In this work, also was observed, that the most markedy morphological changes related was related to bipartition of the presynaptic elements with invagination of the Schwann cell processes. Furthermore, was observed topological ) / Mestrado / Mestre em Farmacologia
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