Made available in DSpace on 2014-06-12T15:52:45Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5052_1.pdf: 2036213 bytes, checksum: 2c0f7ed2b7243e81e2ec1a3c2684f2df (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2003 / A produção e a purificação de DNA plasmidial com elevado grau de pureza tem tido um elevado interesse nos últimos anos, devido fundamentalmente aos desenvolvimentos de técnicas de medicina molecular, como a terapia gênica e a vacinação com DNA. O plasmídeo pD2 foi produzido em diferentes condições de cultivo, sendo analisado várias parâmetros durante o crescimento, tais como, influência da velocidade de agitação (120, 160 e 200 rpm), concentrações de canamicina (10, 20, 30, 40 e 50mg ml-1) e meio de cultura (Terrific Broth - TB ou Luria Bertani com glicose - LBG). Foram também investigados o efeito da partição de DNA plasmidial, RNA e proteínas totais nos sistemas de duas fases aquosas (SDFA) do tipo polietileno glicol (PEG)/sal de fosfato de sódio dibásico (K2HPO4) do plasmídeo (pD2) durante o processo de purificação. Analisou-se a influência da massa molar do PEG, massa que carrega o sistema da solução de lise (20, 40 ou 60% m/m) na partição do plasmídeo. A técnica de precipitação com sulfato de amônio (2,0, 2,5 e 3,0M), seguido da técnica cromatográfica de interação hidrofóbica (CIH) utilizando como matriz estacionária o suporte Phenyl Sepharose 6 Fast Flow foram utilizadas para purificar o plasmídeo pVax-LacZ. A velocidade de agitação que apresentou os melhores resultados para a produção de biomassa e DNA plasmidial foi a 200 rpm, enquanto as concentrações 30- 50mg mL-1 de canamicina apresentaram resultados semelhantes para todas as condições estudadas. O meio de cultura TB apresentou ser o melhor em termos de produção de DNA plasmidial e biomassa, neste meio de cultura o plasmídeo foi mais estável, apresentando 82% de células contendo o plasmídeo. O DNA plasmidial foi particionado entre a fase superior e inferior na dependência da massa molar do polímero constituinte do sistema, tendo uma grande quantidade de proteína do lisado celular acumulada na interfase dos sistemas. O melhor rendimento plasmidial (37%) foi obtido com sistema PEG 400/K2HPO4 (20/20% m/m) carregado com 60% (m/m) de lisado celular. O procedimento de precipitação com sulfato de amônio (2,5M) seguido da cromatografia de interação hidrofóbica foram capazes de separar proteínas e DNA genômico do plasmídeo, obtendo 51% de rendimento e um fator de purificação de 3,3

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:53:19Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5109_1.pdf: 4981987 bytes, checksum: 45983940c169b7f60379907b2e4ab868 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2004 / Os lentivírus de pequenos ruminantes (SRLV) causam doença progressiva multissistêmica crônica, com longo período de incubação, que acomete caprinos e ovinos de todas as raças e idades. Estes vírus podem se manifestar de forma artrítica, respiratória, mamária e nervosa ou mesmo atingir vários órgãos, causando perda de peso e debilidade até a morte do animal. A infecção é persistente apesar da maioria dos animais infectados não desenvolver sintomas clínicos, com risco de disseminar o vírus para outros animais. A principal forma de transmissão do vírus do vírus é através da ingestão de colostro e/ou leite proveniente de animais infectados. Pode ocorrer transmissão horizontal. Os SRLV infectam células do sistema fagocítico-mononuclear e células dendríticas in vivo e infectam e replicam em macrófagos e em células derivadas de vários tecidos in vitro. O cultivo primário de células de membrana sinovial (MS) é amplamente utilizado para isolamento e replicação de SRLV. A capacidade de divisão destas células é limitada até atingir seu estado de senescência celular. Objetivando a otimização da produção, foi celular feito o reaproveitamento de explantes das articulações metacarpianas de feto caprino soronegativos para SRLV. Os explantes foram reaproveitados por seis vezes. As células de MS obtidas mantiveram-se em níveis satisfatórios de produtividade e permissividade à replicação de amostras de SRLV. Estas células de MS foram utilizadas para estudo da replicação de amostras brasileiras de SRLV BrPe1-01 e BrMg2-03, de forma comparativa com as amostras padrão CAEV Cork e Maedi-visna K1514. Não se obtiveram títulos viral e antígênico significativos das amostras brasileiras nas várias tentativas de replicação das amostras BrPe1-01 e BrMg2-03. Visando um melhor entendimento da epidemiologia dos SRLV em caprinos do Estado de Pernambuco, foi feito um levantamento sorológico nos anos de 2002 e 2003. Foram testados, por técnica de imunodifusão em gel de agar (IDGA), todos os animais de 31 rebanhos do Estado de Pernambuco. Dos 2206 animais testados, 15,3% (n= 338) estavam infectados por SRLV. Os animais soropositivos estavam distribuídos em 74,2% dos rebanhos (n=23).A avaliação do perfil lipídico de animais infectados por SRLV sem sintomatologia clínica, quando comparados aos de animais controle, sob as mesmas condições de manejo e alimentação, apresentaram os seguintes resultados: a) Os níveis de colesterol total foram significativamente mais elevados (p<0.005); b) O colesterol das lipotroteínas de elevada densidade (HDL) estava levemente aumentado, não sendo significativo; c) O colesterol das lipoproteínas de muito baixa densidade (VLDL) estava levemente baixo; d) O nível de triglicerídeo foi similar nos dois grupos; e) O colesterol das lipoproteínas de baixa densidade (LDL) estava significativamente elevado (p<0.005)

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:53:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5155_1.pdf: 2342299 bytes, checksum: b730313f534dc9332a411c31eef42ab4 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2005 / Amostras de bactérias pertencentes à família Bacillaceae foram isoladas de solo do Porto do Recife, de uma área contaminada por petróleo; de efluente e lodo de indústria têxtil, identificadas 26 amostras como Bacillus licheniformis e 02 amsotras de Geobacillus stearothermophilus, apresentando similaridade quanto as características morfofisiológicas e bioquímicas tais como: crescimento em diferentes temperaturas e concentrações de cloreto de sódio; utilização do citrato; redução do nitrato a nitrito; produção de oxidase, catalase e amilase; fermentação de açúcares; posição dos endosporos; hemólise e susceptibilidade aos antibióticos. Das espécies estudadas, a nova amostra de G.stearothermophilus apresentou características consideradas biotecnologicamente interessantes de termofilia e halofilia, além de uma excelente capacidade de produção de biossurfactante, com estabilidade em condições adversas de pH, temperatura e salinidade, demonstrando grande reduçao da tensão superficial. O dibenzotiofeno (DBT), composto organosulfurado presente em combustíveis como óleo diesel e lubrificantes foi analisado seu processo de degradação por G. stearothermophilus. Observou-se que o microrganismo foi capaz de degradar 77% do dibenzotiofeno, clivando suas ligações carbono-carbono, retirando o átomo de enxofre, transformando-o em compostos alifáticos de fácil degradação ambiental. O novo isolado de G. stearothermophilus UCP 986 apresenta caracteristicas importantes em condições adversas (termofilia e halofilia), demonstrando ser um excelente candidato em tratamentos in situ nos processos de melhoramento da recuperação de óleo (MEOR) em refinarias

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:53:55Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5174_1.pdf: 2256316 bytes, checksum: 17f48cbb68279e09cc75129bfa86b4e4 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2005 / As Sigatokas negra e amarela, causadas pelos fungos Mycosphaerella fijiensis e M. musicola, respectivamente, provocam graves prejuízos à bananicultura em todo o Mundo. A Sigatoka negra encontra-se distribuída no Brasil, exceto na Região Nordeste, e nos Estados do Rio de Janeiro, Espírito Santo, Goiás e Tocantins, enquanto a Sigatoka amarela é encontrada em todo o território nacional. O conhecimento da diversidade genética destes fungos é fundamental para o delineamento de estratégias de controle e tem sido estudada nos níveis local, regional, continental e global pelo uso de marcadores moleculares. A detecção da diversidade patogênica dos isolados também contribui para a compreensão da dinâmica das populações dos fungos e suas estratégias de estabelecimento em novas regiões. No Brasil essas informações ainda são escassas. Neste estudo objetivamos avaliar as diversidade genética e patogênica de M. fijiensis na Região Norte e Mato Grosso e analisar a variabilidade genética de isolados de M. musicola em Pernambuco, segundo maior produtor de banana da Região Nordeste e onde o fungo está estabelecido há muitos anos. Para tanto, foi necessário estabelecer previamente um novo sistema de cultivo que promovesse condições favoráveis ao crescimento micelial de M. musicola in vitro, baseado na avaliação da influência de diferentes meios de cultura, combinações de fontes de carbono e nitrogênio, valores de pH e regimes luminosos. O meio de cultura BDA/IFB, com o valor final de pH ajustado para 5,7, em regime de escuro contínuo, foi estabelecido como o melhor para o crescimento do fungo. A diversidade genética de 28 isolados de M. musicola foi então avaliada mediante a análise por RAPD, tendo sido obtidas 78 bandas, das quais 24 polimórficas, detectando-se elevada variabilidade genética entre os isolados coletados em nove municípios do Estado de Pernambuco, sem correlação clara entre a diversidade flagrada e as origens geográficas dos isolados. Quando a diversidade genética de M. fijiensis foi avaliada pela mesma técnica, foram obtidas 184 bandas distintas, sendo 158 polimórficas. A análise de clusters sugere a existência de uma elevada variabilidade genética do fungo entre os grupos formados e baixa dentro dos grupos. Estas conclusões foram confirmadas pelo estudo dos haplótipos gerados por AFLP, após análise de 298 bandas, sendo 264 polimórficas, para 42 isolados. A diversidade genética de M. fijiensis também foi avaliada pela análise das seqüências de ITS do DNA ribossomal e confirmam, na maior parte, as conclusões obtidas com as demais técnicas, ainda que gerando menor polimorfismo (apenas 4 posições polimórficas nas duas seqüências ITS). Nenhuma das duas análises permitiu identificar uma correlação clara entre padrão genético e origem geográfica, mas os marcadores AFLP e, em menor escala, o RAPD, mostraram-se muito mais poderosos como ferramentas para o estudo da diversidade intra-específica de M. fijiensis do que a análise de ITS. A demonstração da existência de diversidade patogênica entre os isolados deste fungo foi obtida a partir da inoculação em genótipos usados como diferenciadores. As reações individuais dos isolados-genótipos hospedeiros observadas revelaram a existência de variabilidade patogênica entre as populações brasileiras de M. fijiensis. A rápida disseminação do M. fijiensis no país, aliada a sua grande capacidade de recombinação gênica, e o elevado nível de variabilidade genética detectado entre os isolados de M. musicola no Estado de Pernambuco, são fatores preocupantes para a bananicultura local por ser o cultivo realizado basicamente por pequenos agricultores que utilizam cultivares suscetíveis às duas Sigatokas

Orientador: Jose Luiz Pereira / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-21T18:51:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_MariaLucia_D.pdf: 9478581 bytes, checksum: c861238b4f3d07217ef9049ca9516ac8 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Linhagens de estafilococos coagulase negativos e pauciprodutores de enterotoxinas de A a E, com capacidade de síntese variando de 1,4 a 16,8ng/mL oriundas de sítios anatômicos de cabras sadias, procedentes da Espanha, foram estudadas com o intuito de se avaliar comparativamente desenvolvimento e quantidade de enterotoxina estafilocócica ("SE") produzida, em condições de cultivo laboratorial e em alimentos experimentalmente inoculados, Para tal, 14 linhagens teste - S.caprae, ref. 163 e 339; S.chromogenes, ref.l46;-S.cohnii, ref. 366; S.epidermidis, ref. 10; S.haemolyticus, ref, 107 e 214; S.hyicus, ref. 129; S.lentus, ref. 44, S.sciuri, ref. 308; S.xylosus, ref. 141 e 335 e S.warneri, ref, 14 e 224 - foram primeiramente reavaliadas quanto ao seu perfil morfo-tintorial e bioquímico, tentando-se, através dos caracteres fenéticos obtidos, a classificação adansoniana, para confirmação de espécies, A produção de "SE", utilizando-se cinco diferentes meios de cultivo laboratorial, foi conduzida com os métodos de "membrana sobre ágar" e "saco de diálise". Após incubação a 37ºC, durante 24horas, foi procedida a detecção e quantificação de enterotoxinas através do ensaio de "RPLA" ("Reversed passive latex agglutination test"). Já para a pesquisa em alimentos, adotaram-se leite integral tipo "longa vida" e presunto cozido inoculados com cerca de lO4UFC de estafilococos/g ou mL de substrato. Estes substratos, mantidos em estufa a 30ºC, durante 24 e 48h de incubação, foram, neste período, submetidos à contagem de células estafilocócicas em ágar "BP" e à avaliação de presença de "SE", através do ensaio de ¿ELISA, SET-EIA¿("Enzyrne linked immunosorbent assay") e "RPLA", Os resultados obtidos evidenciaram que os caracteres fenéficos apresentaram-se em número insuficiente para a montagem da matriz classificatório, permitindo, apenas, a confirmação de S.haemolyticus, ref.107. Por sua vez, os dados concernentes a produção de "SE", em condições de cultivo laboratorial, maior número de resultados positivos foram obtidos a partir do método "membrana sobre ágar", destacando-se os meios "Nz4"(Digestivo pancreático de caseína, "Nz amine A", "Nz", a 4% acrescido de extrato de levedura, "Yeast extract", "YE", a 1%; de L-arginine a 0,001% e de KH2PO4 a 0,1%), "BHI"-2x-0,5 (Infuso de cérebro e coração, "Brain hearth infusion broth", "BHI", concentração dupla; acrescido de "YE" a 0,5%)e ¿Nzó¿ (¿Nz¿ a 6% acrescido de "YE" a 1%), que sobressaíram por melhor desempenho individual. De uma maneira geral, a quantidade de "SE" produzida foi menor que a dos resultados originais fornecidos para as 14 linhagens teste ressaltando-se ainda a ausência de produção de enferotoxina B, "SEB", para S.wctmeri, S.haemolyticus, S.warneri e S.cohnii, ref. 14, 214, 224 e 366 e enterotoxina D, "SED", para S.caprae, ref, 163 e 339. Quanto ao desenvolvimento e produção de "SE", em substratos alimentícios pôde-se verificar que as linhagens teste, tanto em leite integral tipo "longa vida" como em presunto cozido, apresentaram desenvolvimento mínimo estipulado em 106 e máximo de 109UFC/g ou ml de alimento, decorridas 48h de incubação, não apresentando contudo, em nenhuma ocasião, produção de "SE" que pudesse ter sido detectada através do ensaio de "ELISA, SET-EIA" e também por "RPLA", nos dois períodos de incubação considerados. Havendo ocorrido um surto de intoxicação alimentar humana, em Beto Horizonte, MG, envolvendo sete pessoas de uma família, com sintomas de vômito, diarréia, prostração e dores abdominais, e período médio de incubação de 4h, que conduziam à hipótese do envolvimento de enferotoxina estafiliocócica, efetuou-se o estudo de tal episódio, A pesquisa do agente causai e de possível enterotoxina pré- elaborada no alimento envolvido, queijo tipo "Minas", semi-curado, permitiu evidenciar que a linhagem isolada, em população estimada de 2,9 x 108UFC de S.aureus sub-espécie aureus/g, no queijo suspeito, produzia baixas quantidades de enterotoxina, 180ng de enterotoxina H, "SEH"/mL de fluido sobrenadante de cultura / Abstract: The aim of this work was to establish the relationship of the amount of the enterotoxin produced in laboratory medium and the enterotoxin production in foods by fourteen coagulase-negative low-enterotoxin-producing strains, The strains with synthesis capacity ranging from 1,4 to 16.8ng of staphylococcal enterotoxin/mL were obtained from anatomic sites in healthy goats, in Spain. First of ail, S.caprae, n° 163 e 339; S.chromogenes, nº 146; S.cohnii, nº 366; S.epidermidis, nº 10; S.haemolyficus, nº 107 and 214; S.hyicus, nº 129; S.Ientus, nº44, S.sciuri, nº 308; S.xylosus, nº 141 and 335 and S.warneri, nº 14 and 224 were studied on its fenetic characters in order to confirm the species through the numerical taxonomy. The enterotoxin production was conducted using five different culture media on membrane over agar and sac culture. After 24h at 37ºC incubating period, the staphylococcal enterotoxin (SE) was detected and quantified by RPLA (Reversed passive latex agglutination assay). Samples of whole milk and cooked ham were inoculated with 104CFU Staphylococci/g or ml, These substrates were kept at 30ºC, during 24 and 48 hours and submitted to the count of staphylococcal cells on BP agar and the enterotoxin detection was made by ELISA, SET-EIA (Enzyme linked immunosorbent assay) and RPLA. The results revealed that the fenetic charactes were insufficient to be applied on matrix species, but confimed S.haemolyticus, nº 107. The enterotoxin production in culture media presented the great number of positive results by membrane over agar, and Nz4 mediun (Nz Amine A, Nz, at 4% plus yeast extract, YE, at 1%; L-arginine at 0.001% and KH2PO4 at 0,1%), BHI-2x-0.5 mediun (Brain hearth infusion broth double concentration plus YE at 0,5%) and Nz6 mediun (Nz at 6% plus YE at 1%) were classified for its best results, in general, the amount of enterotoxin produced were lower than the original results reported by its Spanish strains. S.wameri, S.haemolyticus, S.warneri and S.cohnii (nº 14, 214, 224 and 366) and S.caprae (163 and 339) did not produced SEB and SED, respectivelly. Concerning to staphylococcal behavior in whole milk and cooked ham, all strains showed minimun development of 106 and maximun of 109CFU/g or mL after 48 hours incubation period and no SE production was observed in these substrates that could be detected by ELISA, SET-EIA and RPLA. A study was conducted to verify the presence of staphylococcal enterotoxin in semi-cured "Minas" cheese produced in Belo Horizonte, Minas Gerais State, Brazil, after seven members of one family became ill with vomiting, diarrhea, prostration and abdominal pain. This research indicated that the isolated strain, Staphylococcus aureus sub-specie aureus with a population of 2,9 x 108CFU/g, produced a low level of enterotoxin H (SEH), 18D ng/L, in culture supernatant fluid / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / The mangroves are essistemas important and productive, found along the coastline of tropical and subtropical regions. Important processes such as nutrient cycling, are directly connected to the activity of soil microbial communities. Given its strategic position the mangroves are very impacted the world. In Brazil, important areas such as the Bay of All Saints (BA) are severely affected by the presence of oil. Understanding the adaptation of the microbiota and its local dynamics, before the environmental change is essential to be able to maintain or restore these ecosystems. This thesis investigated the structure and function of microbial communities in a mangrove area of the Bay of All Saints polluted by the oil industry. Two sites were sampled - one located in the refinement of the industry and another, distant location and used as the control. Besides the measured abiotic data, two independent methods of cultivation were used: T-RFLP and DNA microarranjos. The results of both sites in the experiments of T-RFLP showed that the two bacterial communities differ in their structure. For the site sampled in the refinery, a greater number of Otus suggests an environmental stimulus, the bacterial community, a fact associÃvel the high organic matter content of the site. For microarranjos DNA, similar categories of genes were detected in both places, but the specificity of their sequences were distinct. The genes that encode for the remediation organic, were more representative, more than 40% in total in the two sites. Even detecting similar categories, only 4% of the gene sequences were common to the sites. These data show that different bodies are responsible for similar functions at each point. The difference between the sites observed in the experiments can be related with the fact that Site 1 is located in a region heavily affected by oil. Using the ecological data rates of T-RFLP indicated the site 1 as the most diverse, while the results with the DNA microarranjos show the opposite. In conclusion, the structure and function of the local microbiota are affected by the presence of the oil industry. Additional studies may help understand the dynamics of microbial communities, facing the future exposure to the oil and / or derivatives. / Os manguezais sÃo essistemas importantes e produtivos, encontrados ao longo da linha da costa de regiÃes tropicias e subtropicais. Processos importantes como a ciclagem de nutrientes, estÃo diretamente conectados à atividade das comunidades microbianas desses solos. Dada sua posiÃÃo estratÃgica os manguezais sÃo bastante impactados no mundo todo. No Brasil, Ãreas importantes como a da BaÃa de todos os Santos (BA) sÃo severamente afetadas pela presenÃa do petrÃleo. Compreender as adaptaÃÃes da microbiota local e sua dinÃmica, frente Ãs alteraÃÃes ambientais, à essencial para que se consiga manter ou restaurar esses ecossistemas. A presente dissertaÃÃo investigou a estrutura e a funÃÃo de comunidades microbianas em uma Ãrea de manguezal da baÃa de Todos os Santos poluÃda pela indÃstria do petrÃleo. Dois locais foram amostrados - um, situado na Ãrea de refinamento dessa indÃstria e o outro, distante desse local e usado como controle. AlÃm dos dados abiÃticos medidos, dois mÃtodos independentes de cultivo foram utilizados: T-RFLP e microarranjos de DNA. Os resultados de ambos os sÃtios nos experimentos de T-RFLP mostraram que as duas comunidades bacterianas diferem quanto à sua estrutura. Para o sÃtio amostrado na refinaria, um nÃmero maior de OTUs sugere um estÃmulo ambiental, na comunidade bacteriana, fato associÃvel ao alto teor de matÃria orgÃnica desse local. Para os microarranjos de DNA, categorias similares de genes foram detectados, em ambos os locais, mas a especificidade de suas sequÃncias foi distinta. Os genes que codificam para a remediaÃÃo orgÃnica, foram os mais representativos, mais de 40% no total nos dois sÃtios. Mesmo detectando categorias semelhantes, apenas 4% das sequÃncias genÃticas foram comuns aos sÃtios. Estes dados mostram que organismos diferentes sÃo responsÃveis por funÃÃes similares em cada ponto. A diferenÃa entre os locais observadas nos experimentos pode ser relacionada, com o fato do sÃtio 1 situar-se numa regiÃo fortemente afetada por hidrocarbonetos. Utilizando-se Ãndices ecolÃgicos os dados de T-RFLP indicaram o sÃtio 1 como o mais diverso, enquantoo os resultados com os microarranjos de DNA mostram o oposto. Concluindo, a estrutura e funÃÃo da microbiota local sÃo afetadas pela presenÃa da indÃstria do petrÃleo. Estudos adicionais poderÃo ajudar a compreender a dinÃmica dessas comunidades microbianas, frente Ãs futuras exposiÃÃes ao Ãleo e/ou derivados.

Orientador: Fawzi Ahmed Moustafa Dawood / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T02:27:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moreira_SergioSelos_M.pdf: 3085039 bytes, checksum: 65bbcb341e666278f084c7a6b42f03c9 (MD5) Previous issue date: 1992 / Resumo: 1 ¿ As concentrações de interleucina i (IL ¿ 1) e interleucina 2 (IL ¿ 2), produzidas nos sobrenadantes do sangue periférico dos pacientes com câncer avançado, foram determinadas afim de identificar as causas de imunosupressão característica da doença oncótica. 2 ¿ As células mononucleares obtidas de 19 pacientes foram estimuladas em cultura para produzir IL-1 e IL-2 e comparadas com células de indivíduos normais. Uma queda acentuada na atividade de IL-1 e IL-2 foi observada nos pacientes com câncer. 3 ¿ Os números de células T auxiliadoras (Ts: OKT8+) foram determinados pelo uso de anticorpos monoclonais e o método de imunofluorescência indireta. Não houve correlação nenhuma entre o baixo número de células OKT4+ encontrado nos pacientes com câncer e os níveis de produção de IL-2 ... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Mestrado / Imunologia / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador : H. A. Rangel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T03:14:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Araujo_PauloMariaFerreirade_M.pdf: 4036500 bytes, checksum: 69d5dd1c881169a6facc3607bd72f755 (MD5) Previous issue date: 1975 / Resumo: A Sôro-Albumina Bovina (SAB) degradada pela catepsina D de coelho foi submetida a uma análise imunoquímica. Misturas de 2 gramas de SAB foram submetidas à proteólise com 500 U desta enzima, em condições variáveis de temperatura e tempo de digestão. O digesto foi estudado do ponto de vista imunoquímico com vistas ao isolamento de fragmentos que pudessem contribuir para elucidar a estrutura antigênica desta alumina. Do fracionamento prévio do digesto, obteve-se duas frações: fração F1 precipitada no pH 4.5, e fração F2 sobrenadante restante. Esta fração F2 concentrada por ultra-filtração, originou uma terceira fração -F3 presente no ultrafiltrado. - A fração F1 representando cerca de 25% do digesto, é constituído por moléculas de SAB pouco alteradas com a proteólise. A análise imunoeletroforética demonstrou existir pelo menos dois sistemas precipitantes nesta fração. - A fração F2 representando cerca de 65% do digesto, é bastante heterogênea, contendo vários sistemas precipitantes, podendo ser fracionada em condições adequadas para a obtenção de pequenos fragmentos imunológicamente ativos. A fração F3 obtida da concentração de F2 por ultrafragmentos com atividade imunológica de pesos moleculares / estimados entre 5000 e 11000. estes fragmentos são os mesmos contidos nas sub-frações oriundas das frações F2 ou F2-C obtidas diretamente por cromatografia... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador : Humberto de Araujo Rangel / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T03:14:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Araujo_PauloMariaFerreirade_D.pdf: 3185759 bytes, checksum: d2c366bb1140e84db853955da681480f (MD5) Previous issue date: 1979 / Resumo: A fração solúvel (FS) de lisados das formas epimastigotas de T. cruzi, contendo diferentes atividades proteolíticas em pH neutro, foi analisada por diferentes métodos, visando-se o isolamento e caracterização de uma proteinase. Empregando-se o método de Anson (1938), as condições de dosagem da atividade proteinásica da FS foram determinadas, usando-se a caseína como substrato, em tampão fosfato 0.05 M pH 7.0. A maior quantidade de produtos TCA-solúveis era obtida, quando a mistura enzima-substrato era incubada a temperaturas entre ¿37 GRAUS¿C e ¿45 GRAUS¿C, por 90 minutos; não se observando alterações apreciáveis na quantidade de produtos após esse período. Uma estimativa do Km foi feita nessas condições, encontrando-se um valor de 2.5 mg da caseína. Essa atividade proteinásica da FS, era maior em presença de EDTA e dos compostos sulfidricos ME e cisteina. Inibição total dessa atividade era obtida, em presença de concentrações 1 mM dos reagentes de grupamentos tiois ('HG POT. 2+¿, iodoacetamida, ácido iodoacético, N-EMI, p-AFMC), havendo reversibilidade desse efeito inibitório, com a adição de 15 mM de ME, exceção feita àquele, resultante do ácido iodoacético. Esses dados sugeriam que a proteinase era do tipo SH-dependente. A proteinase foi purificada 60 vezes, empregando-se a seguinte metodologia: 1) Precipitação a pH 4.5 com 80% de acetona a ¿¿20 GRAUS¿C... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Doutorado / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador : Oswaldo Augusto E.B. Sant'Anna / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T04:26:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_AntonioCarlosda_D.pdf: 3875730 bytes, checksum: da654d5187709271df128bdc46899302 (MD5) Previous issue date: 1992 / Resumo: Duas linhagens de camundongos estão em processo de seleção para susceptibilidade (linhagem ST) e resistência (linhagem RT) à tolerância oral. Os acasalamentos seletivos se iniciaram de uma população Fo, geneticamente heterogênea, originada do intercruzamento de oito linhagens isogênicas escolhidas por suas origens distintas: A, 'DBA IND.2¿, P, SWR, SJL, CBA, Balb/c e C57 ¿Bl IND. 6¿. Sete dias após administração intragástrica de 5 mg/0,2 ml de proteína solúvel, camundongos de 2 a 3 meses de idades foram imunizados intraperitonealmente (ip) com 100 'mu¿g /0,2 ml dos antígenos correspondentes. Os títulos individuais de anticorpo, expressos como 'log BASE 2¿ da mais alta diluição do soro dando uma reação positiva, foram medidos pelo teste de hemaglutinação passiva 14 e 28 dias após a imunização ... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Two lines of mice are in the process of selection for susceptibility (TS line) and resistence (TR line) to oral tolerance. The selective breeding was started from a highly genetically heteroenous Fo population consisting of the balanced intercrossing of eight inbred lines chosen for this distinct origin: A, 'DBA IND. 2¿, P, SWR, SJL, CBA, Balb/c e C57¿BL IND. 6¿. Seven days after intragastric administration of 5 mg/0,2 ml solute protein, 2-3 months old mice were imunized intraperitoneally (ip) with 100 'mu¿g/0,2 ml of the corresponding antigen ... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Doutor em Ciências Biológicas