Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-09-30 / Introdução: O tendão calcâneo é um dos tendões mais lesados e a sua cicatrização total pode levar semanas, ou até meses. Na busca de acelerar o reparo tendíneo, a terapia a laser de baixa intensidade (TLBI), vem demonstrando efeitos satisfatórios. Objetivo: Avaliar a ação das diferentes potências da terapia a laser de baixa intensidade no reparo tendíneo, em ratos. Métodos: O laser utilizado foi (AsGaAl) 830nm, densidade de energia 30J/cm2 e potências de 40mW, 60mW, 80mW e 100mW, por um período de 5 dias consecutivos para todos os grupos. Todos os animais foram submetidos à lesão parcial do tendão calcâneo. No 6º dia após lesão, os tendões foram retirados e analisados por microscópio de polarização. Foi mensurada a organização das fibras de colágeno por meio da análise de birrefringência e verificada a predominância do tipo de colágeno no tendão calcâneo através da análise de picrosirius. Resultados: Os grupos tratados com TLBI mostraram uma melhora significante no realinhamento das fibras de colágeno, mas não apresentaram diferença significante entre si (p=0,139). Quanto à avaliação da quantidade de colágeno tipo III, foi observado que houve um aumento do percentual de colágeno, conforme o aumento da potência do laser (60 a 100mW) (p<0,01). Em relação ao colágeno tipo I, o grupo 80mW apresentou maior quantidade do que o grupo sham (p=0,05). Conclusão: A terapia a laser de baixa intensidade não apresentou diferença no realinhamento das fibras de colágenos entre diferentes potências. Potências a partir de 60mW aumentaram a quantidade de colágeno tipo III. Potência de 80mW aumentou a quantidade de colágeno tipo I e III. / Introduction: Calcaneous tendon is one of the most damaged tendons, and its healing may last from weeks to months to be completed. In the search after speeding tendon repair, low intensity laser therapy has shown favorable effect. Objective: To assess the effect of 40, 60, 80 and 100mW powers of low level laser on the process of tissue repair in partial lesion calcaneous tendon in rats. Methods: The was used 830-nm GaAlAs diode laser operating at output powers of 40, 60, 80 and 100 mW and energy density of 30 J/cm2 on the repair of partial calcaneal tendon ruptures in rats. A partial tendon rupture was induced in all animals, which were treated with laser irradiation for 5 consecutive days. Six days after injury, the injured tendons were removed and examined by polarized light microscopy. Results: Collagen fiber organization was evaluated by birefringence measurements, and collagen content was determined by picrosirius red staining. It was observed that the higher the output power (60-100 mW) the greater was the amount of type III collagen (P < 0.01). The amount of type I collagen was significantly greater (P = 0.05) in the 80-mW group than in the control group (sham stimulation). A non-statistically significant improvement in the realignment of collagen fibers was observed in the irradiated groups. Conclusion: Low-level laser therapy resulted in significantly greater amounts of type III collagen (output powers of 60 mW or more) and type I collagen (output power of 80 mW), however, no significant differences between groups were found in the realignment of collagen fibers. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

O sucesso do tratamento endodôntico depende da cuidadosa realização de todas as suas fases, terminando com uma obturação tridimensional que alcance todo o sistema de canais radiculares. Desta forma, os materiais obturadores, ou as substâncias liberadas, entrarão em contato com os tecidos perirradiculares, o que poderá influenciar a resposta inflamatória e o processo de reparo. A terapia laser de baixa potência (TLBP) tem sido estudada quanto à sua ação anti-inflamatória, favorecendo o reparo. O objetivo deste estudo foi investigar a produção das citocinas IL-1&#946;, IL-6 e IL-8 por fibroblastos de gengiva humana (linhagem FMM1) como resposta à presença dos extratos dos cimentos endodônticos AH Plus, MTA Fillapex e EndoSequence BC Sealer, bem como a eficácia da TLBP, neste modelo. Para isto, extratos destes cimentos, recém-manipulados e após 24 h do endurecimento, foram preparados em meio de cultura DMEM fresco, conforme as normas ISO 10993-12. Inicialmente, a citotoxicidade dos cimentos foi avaliada, após a interação das células com a diluição seriada destes extratos (1:1 a 1:16), por meio do ensaio MTT. Para a análise da produção de citocinas, 106 células por poço foram cultivadas em placas de cultura de 24 poços, para a interação com os extratos dos cimentos, na diluição 1:4. Estabeleceram-se os grupos não irradiado e irradiado. No grupo irradiado, as culturas celulares receberam duas irradiações do laser InGaAlP (660 nm, 30 mW, 5 J/cm2 e área do feixe de 0,028 cm2), com intervalo de 12 h. O grupo não irradiado foi submetido às mesmas condições ambientais que o irradiado. Os sobrenadantes das culturas foram coletados, centrifugados, aliquotados e armazenados congelados, para a posterior análise pelo ensaio de ELISA. Todos os dados obtidos (médias erro padrão) foram tratados estatisticamente por ANOVA one-way, complementado pelo teste de Tuckey e ANOVA two-way, com correção de Bonferroni (p< 0,05). A citotoxicidade dos cimentos AH Plus e EndoSequence BC Sealer revelou-se tempo/concentração-dependente, enquanto a do MTA Fillapex mostrou-se concentração-dependente. Os cimentos endodônticos induziram a produção das citocinas IL-1&#946;, IL-6 e IL-8 pelos fibroblastos, sem diferença significativa com os controles (p> 0,05). Somente o LPS de E. coli induziu a secreção de IL-8, com diferença estatística (p< 0,05). A TLBP não foi capaz de modular a produção das citocinas em questão, significativamente. / Endodontic treatment success depends on careful accomplishment of all steps, finishing with a three-dimensional obturation that reachs the entire root canal system. Thus, the obturation materials or the substances that are released will be in contact with perirradicular tissues, which may influence the inflammatory response and the repair process. Low-level laser therapy (LLLT) has been studied about its anti-inflammatory action, improving the repair. The aim of this study was to investigate the production of IL-1&#946;, IL-6 and IL-8 cytokines by human gingival fibroblasts (FMM1 lineage) as a response to the extracts of the endodontic cements AH Plus, MTA Fillapex and EndoSequence BC Sealer, besides the effectiveness of LLLT in this model. For that, freshly mixed and 24 h-set elutes of these sealers were prepared, in fresh DMEM, in accordance with ISO 10993-12. Firstly, cytotoxicity was assessed after cells were treated with cements extracts serial dilution (1:1 to 1:16), by MTT assay. To evaluate the cytokines production, 106 cells per well were cultured at 24-well-plates to interact with the 1:4 dilution of sealers extracts. Non-irradiated and irradiated groups were established. On the irradiated group, the cell culture received two InGaAlP laser irradiation (660 nm, 30 mW, 5 J/cm2, 0.028 cm2 spot size) at 12h-interval. The non-irradiated group was submitted to the same environment conditions of the irradiated group. The culture supernatants were collected, centrifuged, aliquoted and stored frozen to further analyse by ELISA assay. Data obtained (media standard error) were treated by ANOVA one-way, complemented by Tuckeys test and ANOVA two-way, with Bonferroni correction (p< 0.05). The cytotoxicity of AH Plus and EndoSequence BC Sealer was related to time/dose-dependent manner, whilst MTA Fillapex cytotoxicity was showed as dose-dependent manner. The endodontic sealers inducted the production of IL-1&#946;, IL-6 and IL-8 cytokines by fibroblasts similar to control (p> 0.05). Only E. coli LPS was capable to stimulate IL-8 secretion with statistic difference (p< 0.05). TLBP was not able to modulate the secretion of these cytokines, significantly.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:19:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissPMC.pdf: 6652992 bytes, checksum: ded1eb1eecf60367b1a7f8223eddbe63 (MD5) Previous issue date: 2004-02-18 / A lot of therapeutic techniques are used to accelerate and/or stimulate the tendineous repair process, among this techniques we have the low level laser therapy (LLLT). Therefore, this study had the aim of evaluating the effects of LLLT, in different wavelengths and different densities energy, on the tendineous repair process of calcaneal tendon of mice. In this study was used 48 male mice. 40 animals were submitted to the unilateral total tenotomy induced in the middle portion of the right calcaneal tendon. The tendons weren&#8217;t sutured after the surgery, just the skin around the surgery. The animals were randomized divided in 3 experimental groups (1, 2 and 3) and each group were divided in two subgroups. The subgroup A was treated with laser of 685 nm, 3 J/cm2, the subgroup B was treated with laser 685 nm, 10 J/cm2, the subgroup C was treated with 830 nm, 3 J/cm2 and the subgroup D with laser 830 nm, 10J/cm2; the subgroups E and F were classifieds as injured control/placebo treatment and non-injured control. It was used the lasers 685 nm and diode GaAlAs (830 nm), the parameters used in both lasers were 15 mW, continuos, power density of 5,4 W/cm2 and doses of 3 J/cm2 and 10 J/cm2. The applications were made punctually in each 24 hours, during 12 consecutive days, in just one point on the injured lesion. All animals were killed on the 13º day after the surgery and the tendons were extracted cirurgically and prepared for qualitative and quantitative analysis carry out through of polarization microscopy for obtain data of state of concentration, aggregation, orientation and deposition of collagen fibers in the site of tenotomy, was used measures of total birefringence take in polarization microscopy. After, it was obtained a picture of each tendon in the polarization microscopy for the qualitative histologic analysis of the tissue. The data analysis were made using the non-parametric test of multiple comparations in order to compare the data of all subgroups. It was found through of difference of OR (nm) values corresponding for the total birefringence that the molecules of collagen of tendons in process of tissue repair answered to the LLLT during the period of data collection, probabily through the increase in the fibroblastic proliferation and collagen synthesis. The tendinous repair of the subgroup A (685 nm, 3 J/cm2) showed the best result, considering the level of tissue organization, orientation, state of macromolecular aggregation and collagen deposition in the site of lesion. This subgroup was statistically different from the other subgroup, because it showed a higher OR value than the other subgroups treated with laser and the subgroup injured control/placebo treatment. We can conclude that, in the conditions our work was developed, there are different organizational answers in the injuried tendineous tissue and treated with LLLT. Therefore, there is a relationship between the improvement in the tendineous repair and the laser parameters used. In this case there were an acceleration of the tendineous repair when used the laser 685 nm and the dose of 3 J/cm2. / Várias técnicas terapêuticas são utilizadas para acelerar e/ou estimular o processo de reparo tendíneo, dentre elas a terapia laser de baixa potência (LLLT). Assim, este estudo teve por objetivo avaliar os efeitos do laser de baixa potência, aplicado a diferentes comprimentos de onda e diferentes densidades de energia sobre o processo de reparação tendínea no tendão calcanear de rato. Foram utilizados 48 ratos machos, onde 40 animais foram lesados por uma tenotomia total unilateral feita por cisalhamento induzida na porção média do tendão calcanear direito, os tendões não foram suturados após a incisão cirúrgica, somente a pele ao redor da incisão sofreu sutura. Os animais foram divididos aleatoriamente em 3 grupos experimentais homogêneos (1, 2 e 3), sendo que cada grupo foi subdividido em 2 subgrupos; o grupo 1 foi dividido em subgrupo A que recebeu tratamento com laser de 685 nm, 3 J/cm2 e subgrupo B que recebeu tratamento laser 685 nm, 10 J/cm2; o grupo 2 foi dividido em subgrupo C que recebeu tratamento com laser de 830 nm, 3 J/cm2 e subgrupo D cujo tratamento foi com laser de 830 nm, 10J/cm2 e o grupo 3 que também foi dividido em subgrupo E (CL/PL) e F (CP) que foram classificados como controle lesado/tratamento placebo e controle padrão respectivamente. Foram utilizados os lasers de 685 nm e o diodo Ga-Al-As (830 nm), os parâmetros dosimétricos utilizados para ambos os lasers foram (15 mW, contínuo, densidade de potência de 5,4 W/cm2 e doses de 3 J/cm2 e 10 J/cm2), as aplicações foram feitas pontualmente a cada 24 horas, durante 12 dias consecutivos, irradiando-se transcutaneamente um único ponto sobre a região da lesão. Todos os animais foram sacrificados no 13º de P.O. e seus tendões foram retirados cirurgicamente e processados para a análise qualitativa e quantitativa realizadas por meio da microscopia de luz polarizada para se obter dados sobre o estado de concentração, agregação, orientação e deposição das fibras colágenas no local da tenotomia, foi utilizado medidas de birrefringência total tomadas no microscópio de luz polarizada. Posteriormente os tendões foram fotografados no microscópio de polarização para a análise histológica qualitativa do tecido. A análise estatística utilizada foi o teste não-paramétrico de comparações múltiplas para a comparação de todos os subgrupos dois a dois afim de detectar possíveis diferenças estatísticas. Os achados demonstraram por meio de diferenças de valores de OR (nm), correspondentes à birrefringência total, que as moléculas de colágeno presentes nos tendões em processo de reparação tecidual responderam a LLLT durante o período da coleta do material, provavelmente através do aumento da proliferação fibroblástica e síntese de colágeno. A reparação tendínea do subgrupo A tratado com laser de 685 nm e 3 J/cm2 apresentou melhores resultados considerando o nível de organização, orientação, estado de agregação macromolecular e deposição das fibras colágenas no local da lesão, diferindo-se estatisticamente dos demais subgrupos, uma vez que este subgrupo apresentou valor de OR considerado estatisticamente maior que o OR dos demais subgrupos tratados com laser e o subgrupo controle lesado/tratamento placebo. Com base nos nossos resultados podemos concluir, nas condições que o nosso trabalho foi desenvolvido, que há diferenças na resposta organizacional do tecido tendíneo lesado e estimulado pela LLLT, há portanto uma relação de melhora do reparo tendíneo com a combinação dos parâmetros laser utilizados; neste caso houve aceleração do processo de reparação tendínea quando utilizou-se o laser de 685 nm e 3 J/cm2.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseACA.pdf: 1948849 bytes, checksum: 00677b36766e019e8a7e13bd7b288172 (MD5) Previous issue date: 2004-03-11 / The Low Intensity Laser Therapy (LILT) constitutes one of the resources most used by physical therapists, with the goal of stimulating the process of repairing the skeleton muscle tissue. On the other hand, the intense utilization, its respective action mechanisms and therapeutic effectiveness are not scientifically proved. Based on this, we elaborated the present study aiming to investigate the influence of the LILT, at wavelengths (&#955;) usually used at clinical practices (670, 685 and 830 nm), on the function of the Myogenic Precursor Cells (MPCs), directly responsible for the tissue regeneration process. The beginning phase was carried out throughout in vitro experiments, determining the alterations started by radiations over the proliferation ability and the cellular differentiation. The MPCs used were in the second passage, after had been extracted from four days old Wistar rats. To analyze the proliferation, it was elaborated, for each &#955;, a dose-response data curve including the control group constituted of non-radiated cells, and the irradiated groups with doses of 0.3; 0.6; 0.9; 1.2; and 1.5 J/cm2. This procedure was carried out with the cells under the influence of 5 or 10% of fetal bovine serum (FBS). The dose demonstrating the highest effectiveness on the cellular proliferation in each radiation, was used to establish the influence on the process of cellular differentiation, and investigated throughout the analysis of the expression of the genes related to the isoforms IIa and IIx of the myosin heavy chain (MHC). The final phase of the study was pointed towards the radiation action evaluation, at the same dose parameters used before, on the muscle regeneration process in vivo, after induced cryoscopy lesion at the Tibialis anterior muscles of adults Wistar rats. There were evaluations of the histological, histochemical aspects for the Succinic Dehydrogenase enzyme (SDH) and the activity of the Lactate Dehydrogenase enzymes (LDH) and Citrate Sintase (CS). The outcomes demonstrated that the radiation at &#955; of 670, 685 and 830 nm promoted an increase of 56.8, 70.6 and 84.8 % on the proliferate ability of the PMCs. These values were achieved with the 1.2, 0.6 and 0.3 J/cm2 doses respectively, and with the cells under the influence of 5% of FBS. The highest concentration of serum (10% of FBS) determined a less pronounced bio-stimulating effect, rising only 13.6, 17.5 and 10.9 %, respectively. In relation to the MHC isoforms expression rate, it showed that there was a significant fall of the IIa isoform, due to the action of the 685 nm, and an increase of the IIx isoform, due to the action of the 685 and 830 nm radiations, in relation to the non-radiated cells rate. By means of in vivo analysis, it was possible to demonstrate the ability of radiation at &#955; of 685 and 830 nm on increasing DHL enzymes and CS during the muscle regeneration process. Therefore, according to the outcomes it is allowed to attribute to the LILT an ability &#955; and dose-dependent of influencing the proliferation function and the metabolism of the MPCs. It was not possible to infer its effect on the cellular differentiation process, because of the inverted effect on the MHC isoforms expression, though. / A terapia LASER de baixa intensidade (TLBI) constitui um dos recursos mais utilizados pelos fisioterapeutas com o intuito de estimular o processo de reparo do tecido muscular esquelético. Em contrapartida à intensa utilização, seus respectivos mecanismos de ação e sua efetividade terapêutica não se encontram cientificamente comprovados. Com base nesse contexto, elaboramos a presente pesquisa com o objetivo de investigar a influência exercida pela TLBI, nos comprimentos de onda (&#955;) freqüentemente utilizados na prática clínica (670, 685 e 830 nm), sob a função das células precursoras miogênicas (CPMs), responsáveis diretas pelo processo de regeneração tecidual. A fase inicial foi realizada por meio de experimentos in vitro, determinando as alterações desencadeadas pelas radiações sobre a capacidade de proliferação e diferenciação celular. As CPMs utilizadas encontravam-se na 2a passagem, após terem sido extraídas dos músculos de ratos Wistar com 4 dias após o nascimento. Para analisar a proliferação foi elaborada, para cada &#955;, uma curva doseresposta compreendendo o grupo controle, constituído por células não irradiadas, e os grupos irradiados com as doses de 0.3, 0.6, 0.9, 1.2 e 1.5 J/cm2. Esse procedimento foi realizado com as células sob influência de 5 ou 10 % de soro fetal bovino (SFB). A dose demonstrando a maior efetividade sobre a proliferação celular em cada radiação foi utilizada para estabelecer a influência sobre o processo de diferenciação celular, investigada por meio da análise da expressão dos genes relacionados as isoformas IIa e IIx da cadeia pesada de miosina (MHC). A fase final da pesquisa foi direcionada a avaliar a ação das radiações, nos mesmos parâmetros dosimétricos previamente utilizados, sobre o processo de regeneração muscular in vivo após criolesão induzida no músculo tibial anterior de ratos Wistar adultos. Foram avaliados os aspectos histológicos, histoquímicos para a enzima Succinato Desidrogenase (SDH) e a atividade das enzimas Lactato Desidrogenase (LDH) e Citrato Sintase (CS). Os resultados demonstraram que as radiações nos &#955; de 670, 685 e 830 nm proporcionaram um aumento de 56.8, 70.6 e 84.8 % na taxa de proliferação das CPMs. Esses valores foram alcançados com as respectivas doses 1.2, 0,6 e 0,3 J/cm2 e com as células sobre a influência de 5% de SFB. A maior concentração de soro determinou um efeito bioestimulante menos pronunciado, com elevação de 13.6, 17.5 e 10.9 % respectivamente. Em relação à taxa de expressão das isoformas de MHC foi demonstrado que houve uma significativa diminuição da isoforma IIa, pela ação da radiação de 685 nm, e uma elevação da isoforma IIx, pela ação das radiações de 685 e 830 nm, em relação às células não irradiadas. A análise in vivo demonstrou a capacidade das radiações nos &#955; de 685 e 830 nm em elevar a atividade das enzimas LDH e CS durante o processo de regeneração muscular. Conjuntamente os resultados permitem atribuir à TLBI uma capacidade &#955; e dose-dependente de influenciar a função proliferativa e o metabolismo das CPMs. Porém, não foi possível inferir seu efeito sobre o processo de diferenciação celular em virtude do efeito inverso sobre a expressão das isoformas de MHC.

O sucesso do tratamento endodôntico depende da cuidadosa realização de todas as suas fases, terminando com uma obturação tridimensional que alcance todo o sistema de canais radiculares. Desta forma, os materiais obturadores, ou as substâncias liberadas, entrarão em contato com os tecidos perirradiculares, o que poderá influenciar a resposta inflamatória e o processo de reparo. A terapia laser de baixa potência (TLBP) tem sido estudada quanto à sua ação anti-inflamatória, favorecendo o reparo. O objetivo deste estudo foi investigar a produção das citocinas IL-1&#946;, IL-6 e IL-8 por fibroblastos de gengiva humana (linhagem FMM1) como resposta à presença dos extratos dos cimentos endodônticos AH Plus, MTA Fillapex e EndoSequence BC Sealer, bem como a eficácia da TLBP, neste modelo. Para isto, extratos destes cimentos, recém-manipulados e após 24 h do endurecimento, foram preparados em meio de cultura DMEM fresco, conforme as normas ISO 10993-12. Inicialmente, a citotoxicidade dos cimentos foi avaliada, após a interação das células com a diluição seriada destes extratos (1:1 a 1:16), por meio do ensaio MTT. Para a análise da produção de citocinas, 106 células por poço foram cultivadas em placas de cultura de 24 poços, para a interação com os extratos dos cimentos, na diluição 1:4. Estabeleceram-se os grupos não irradiado e irradiado. No grupo irradiado, as culturas celulares receberam duas irradiações do laser InGaAlP (660 nm, 30 mW, 5 J/cm2 e área do feixe de 0,028 cm2), com intervalo de 12 h. O grupo não irradiado foi submetido às mesmas condições ambientais que o irradiado. Os sobrenadantes das culturas foram coletados, centrifugados, aliquotados e armazenados congelados, para a posterior análise pelo ensaio de ELISA. Todos os dados obtidos (médias erro padrão) foram tratados estatisticamente por ANOVA one-way, complementado pelo teste de Tuckey e ANOVA two-way, com correção de Bonferroni (p< 0,05). A citotoxicidade dos cimentos AH Plus e EndoSequence BC Sealer revelou-se tempo/concentração-dependente, enquanto a do MTA Fillapex mostrou-se concentração-dependente. Os cimentos endodônticos induziram a produção das citocinas IL-1&#946;, IL-6 e IL-8 pelos fibroblastos, sem diferença significativa com os controles (p> 0,05). Somente o LPS de E. coli induziu a secreção de IL-8, com diferença estatística (p< 0,05). A TLBP não foi capaz de modular a produção das citocinas em questão, significativamente. / Endodontic treatment success depends on careful accomplishment of all steps, finishing with a three-dimensional obturation that reachs the entire root canal system. Thus, the obturation materials or the substances that are released will be in contact with perirradicular tissues, which may influence the inflammatory response and the repair process. Low-level laser therapy (LLLT) has been studied about its anti-inflammatory action, improving the repair. The aim of this study was to investigate the production of IL-1&#946;, IL-6 and IL-8 cytokines by human gingival fibroblasts (FMM1 lineage) as a response to the extracts of the endodontic cements AH Plus, MTA Fillapex and EndoSequence BC Sealer, besides the effectiveness of LLLT in this model. For that, freshly mixed and 24 h-set elutes of these sealers were prepared, in fresh DMEM, in accordance with ISO 10993-12. Firstly, cytotoxicity was assessed after cells were treated with cements extracts serial dilution (1:1 to 1:16), by MTT assay. To evaluate the cytokines production, 106 cells per well were cultured at 24-well-plates to interact with the 1:4 dilution of sealers extracts. Non-irradiated and irradiated groups were established. On the irradiated group, the cell culture received two InGaAlP laser irradiation (660 nm, 30 mW, 5 J/cm2, 0.028 cm2 spot size) at 12h-interval. The non-irradiated group was submitted to the same environment conditions of the irradiated group. The culture supernatants were collected, centrifuged, aliquoted and stored frozen to further analyse by ELISA assay. Data obtained (media standard error) were treated by ANOVA one-way, complemented by Tuckeys test and ANOVA two-way, with Bonferroni correction (p< 0.05). The cytotoxicity of AH Plus and EndoSequence BC Sealer was related to time/dose-dependent manner, whilst MTA Fillapex cytotoxicity was showed as dose-dependent manner. The endodontic sealers inducted the production of IL-1&#946;, IL-6 and IL-8 cytokines by fibroblasts similar to control (p> 0.05). Only E. coli LPS was capable to stimulate IL-8 secretion with statistic difference (p< 0.05). TLBP was not able to modulate the secretion of these cytokines, significantly.

INTRODUÇÃO: A Artrite aguda do joelho é o tipo mais comum de artrite, e sua prevalência aumenta em paralelo com o aumento da idade da população. Há muitas evidências de benefícios clínicos do laser para o tratamento da osteoartrite. No entanto, existem poucos estudos abordando os efeitos de 810 nm laser. Aqui nós iremos investigar os efeitos de Laser de Baixa Potencia (infra-vermelho, 810 nm). MATERIAL E MÉTODOS: Ratos Wistar machos (230 - 250g) foram anestesiados com halotano antes da injeção de pró-inflamatórios compostos. Carragenina e Kaolin, ambos a 3%, em solução diluída em soro Fisiológico, administrado intra-articular. Os grupos tratados receberam irradiação laser no local. Após 6 horas todos os animais foram anestesiados e mortos por deslocamento cervical para coleta de cavidade articular e lavado para celulares e análise bioquímica. O tecido articular foi analisado por PCR em tempo real análise, a fim de avaliar a expressão de COX-1 e COX-2. IL-1, TNF-alfa e IL-6 e a mieloperoxidase (MPO) também foi realizada. RESULTADOS E DISCUSSÃO: A terapia com laser de baixa potência foi capaz de inibir o número total de leucócitos, atividade de mieloperoxidase, o extravasamento vascular, IL-1b, TNF-a, IL-6 e Prostaglandina E2. / Introduction. Arthritis of the knee (AK) is the most common type of osteoarthritis, and its prevalence is rising in parallel with the increasing age of the population.. Here we investigate the effects of Low Level Laser Therapy (infra-red, 810 nm) in experimentally induced rat knee osteoarthritis. Methods. Male wistar rats (150 200g) were anaesthetized with halothane 1% prior the injection of pro-inflammatory compounds. Carrageenan and Kaolin (both 3%) administered intra-articular. After 6 hours all animals were killed by decaptation and articular cavity was washed and collected. Articular Tissue was carefully removed for edema and Real-time PCR analysis in order to evaluate COX-1 and COX-2 expression. Total and differential cell account, mieloperoxidase activity, IL-b, TNF-a, IL-6 was also analysed. Results. Low Level laser therapy was able to significantly inhibit the total number of leukocytes as well as the mieloperoxidase activity, polymorphonuclear cells at the inflammatory site, vascular extravasation, IL-1, TNF-alpha, IL-6 and prostaglandin E2. Conclusions. Low Level Laser Therapy operating in 810 nm markedly reduced inflammation in carrageenan, kaolin-induced knee osteoarthritis.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-10-20T16:39:49Z No. of bitstreams: 1 brunosallessottomaior.pdf: 12704173 bytes, checksum: c4e7331f49ab0ac31f7db172d785f1d4 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-10-25T12:28:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 brunosallessottomaior.pdf: 12704173 bytes, checksum: c4e7331f49ab0ac31f7db172d785f1d4 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-25T12:28:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 brunosallessottomaior.pdf: 12704173 bytes, checksum: c4e7331f49ab0ac31f7db172d785f1d4 (MD5) Previous issue date: 2008-12-17 / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / O objetivo deste estudo foi realizar uma avaliação histológica e histomorfométrica do efeito da associação da terapia laser de baixa intensidade e o enxerto ósseo bovino orgânico Gen-ox® no reparo de defeitos ósseos de fêmures de ratos Wistar albinus nas fases iniciais do processo de reparo. Cinquenta ratos foram divididos em três grupos de 25 fêmures cada, da seguinte forma: grupo I (controle), grupo II (Gen-ox®) e grupo III (LLLT e Gen-ox®). Os animais do grupo III foram irradiados, transcutaneamente, em quatro pontos ao redor do defeito a cada 48 horas. A primeira irradiação foi imediatamente após o procedimento. Em cada ponto, foi aplicada uma dose de 5 J/cm2 (Ø~0,4; 70 mW) e a dose total por sessão foi de 20 J/cm2. Os animais foram sacrificados com overdose de anestésico geral 1, 3, 5, 7 e 15 dias após a cirurgia. Para análise histológica dos dias 1, 3 e 5, os espécimes foram incluídos em parafina, feitos cortes seriados corados pela HE e analisados em microscopia de luz. Para a análise histomorfométrica, a média do volume de osso neoformado foi estimada pela captura digital (Axiovision®) de três áreas em cada espécime nos dias 5, 7 e 15. Os valores histométricos foram analisados estatisticamente pela análise de variância (ANOVA), com p ≤ 0,05 e pelo teste post hoc LSD. Os resultados mostraram que os espécimes do grupo III apresentaram maior concentração de fibras colágenas, intensa reação no periósteo celular oposto ao defeito nos dias 3 e 5 quando comparados com os grupos I e II. Foi observada maior formação óssea no grupo III em todos os períodos experimentais, com diferença estatisticamente significativa nos dias 5 e 15 quando comparado com os grupos I e II. Dentro dos parâmetros deste estudo, foi concluído que a LLLT associada ao enxerto ósseo bovino orgânico teve um efeito positivo no reparo de defeitos ósseos de ratos. / The aim of this study was to assess histologically and histometrically the effect of the association of low level laser therapy and organic bovine bone graft Gen-ox® on the repair of bone defects on the femur of Wistar albinus rats during the early stages of bone repair. Fifty rats were divided in three groups of 25 femurs each, as follow: group I (control), group II (Gen-ox®) and group III (Gen-ox® and LLLT). The animals on group III were irradiated transcutaneously at four points around the defect every 48 h. The first irradiation was immediately after the procedure. At each point a dose of 5 J/cm2 was given (Ø~0.4, 70 mW) and the total dose per session was 20 J/cm2. The animals were killed by an overdose of general anesthetic 1, 3, 5, 7 e 15 days after surgery. For histological assessment at days 1, 3 and 5, the specimens were routinely processed by embedding in paraffin, serially cut and stained with H&E and analyzed under light microscopy. For histomorphometric assessment, the mean volume of the newly formed bone was estimated by digital capture (Axiovision®) of three areas in each specimen at days 5, 7 and 15. Statistical analyses of the mean values were performed using analysis of variance (ANOVA), with p ≤ 0,05 and post hoc LSD test. The results showed that the specimens of group III presented a higher concentration of collagen fibers, intense reaction in the periosteum cell opposite to the defect at days 3 and 5 as compared to groups I and II. It was observed an increased bone formation in group III in all experimental periods of time. These results showed statistical significance at days 5 and 15 as compared to groups I and II. Within the parameters of this study, it was concluded that LLLT associated to organic bovine bone graft had a positive effect on the repair of bone defects of rats.

Made available in DSpace on 2015-09-25T12:18:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 THIAGO MACIEL CAVALCANTI.pdf: 1062270 bytes, checksum: 27c54a41e663f3e10d627bb93d161d7f (MD5) Previous issue date: 2011-07-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The increased resistance of bacteria to antibiotic drugs creats the need to develop new bacteriostatics ways and bactericidals to cooperate with the treatment of infected individuals. Among those tools are the complementary and alternative therapies involving laser therapy and photodynamic therapy. Lasers are being used isolated or associated with photosensitizing substances to work as helpers in the inactivation of bacterias, fungis and viruses. Photodynamic therapy (PDT) based on the activation of photosensitizers for visible light in low doses, with appropriate wavelength, has become an alternative to conventional treatments in the fight against oral micro-organisms, leading to death the organism by disorders in cell wall and DNA. IN VITRO study two therapies were used, Photodynamic therapy (PDT) and Low-Level Laser (LBP). For PDT we used the dye (methylene blue) to the bacteria in various concentrations, using the disk diffusion technique stimulated by laser light, wavelength 660nm, red light, InGaAlP active medium (Aluminum Indium Gallium Phosphorus). For use in the LBP isolated in micro-organisms several dosages were used with two parameters: medium active InGaAlP (Aluminum Indium Gallium Phosphorus), wavelength 660 nm, red laser and continuous emission and the active medium AsGaAl (Gallium Arsenide and Aluminum), 808 nm infrared laser and continuous emission. The bacteria used in this experiment were the standard strains American Type Culture Coletion - ATCC: Staphylococcus aureus ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 25923 and Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 covering the spectrum Gram-negative bacteria, Gram-positive, aerobic and facultative anaerobic. The antibacterial effect IN VITRO of PDT in different bacteria was quantified in millimeters by observing the diameter of inhibition halos measured with the aid of a halometer. Were considered present antibacterial activities of therapy with diameter of inhibition halos greater than or equal to 8mm. Observed antibacterial effects of PDT for Staphylococcus aureus and Escherichia coli with the presence of inhibition halos with an average of 12mm, as well as for the individual use of methylene blue dye. For Pseudomonas aeruginosa was not observed anyantibacterial effect as well as for the individual use of low power laser. / O aumento da resistência das bactérias às drogas antibióticas gera a necessidade de desenvolver novos meios bacteriostáticos e bactericidas que colaborem com a terapêutica de indivíduos infectados. Dentre esses meios estão as terapias complementares, envolvendo a laserterapia e a terapia fotodinâmica. Os laseres estão sendo utilizados isolados ou associados a substâncias fotossensibilizadoras para serem auxiliares na inativação de bactérias, fungos e vírus. A terapia fotodinâmica (TFD) baseada na ativação de fotossensibilizadores por luz visível em baixas doses, com comprimento de onda apropriado, tem se tornado uma alternativa aos tratamentos convencionais no combate aos micro-organimos bucais, levando à morte do micro-organismo através de desordens na sua parede celular e no seu DNA. Nesse estudo, IN VITRO, duas terapias foram empregadas, a terapia fotodinâmica (TFD) e o Laser de Baixa Potência (LBP). Para TFD empregou-se o corante azul de metileno frente às bactérias em várias concentrações, utilizando-se da técnica disco-difusão estimulado através da luz Laser, comprimento de onda 660nm, luz vermelha, 320J/cm 2 , meio ativo InGaAlP (Índio Gálio Alumínio Fósforo). Para o uso do LBP,isoladamente, sobre o crescimento bacteriano utilizou-se várias dosimetrias com dois parâmetros: meio ativo InGaAlP (Índio Gálio Alumínio Fósforo), comprimento de onda 660 nm, laser vermelho e emissão contínua e o meio ativo AsGaAl (Arseneto de Gálio e Alúminio) 808 nm, laser infravermelho e emissão contínua. As bactérias utilizadas nesse experimento foram as cepas padrão American Type Culture Coletion ATCC: Staphylococcus aureus ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 25923 e Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 abrangendo o espectro bacteriano Gram-negativo, Gram-positivo, aeróbias e anaeróbias facultativas. O efeito antibacteriano, IN VITRO, da TFD em diferentes bactérias foi quantificado em milímetros através da observação do diâmetro dos halos de inibição de crescimento medidos com o auxílio de um halômetro. Foram consideradas como presentes as atividades antibacterianas das terapias com resultados de diâmetro de halos de inibição de crescimento maiores ou iguais a 8mm. Observou-se efeitos antibacterianos da TFD para Staphylococcus aureus e Escherichia coli com a presença de halos de inibição com média de 12mm, assim como para o uso isolado do corante azul de metileno. Para Pseudomonas aeruginosa não foi observado qualquer efeito antibacteriano assim como para o uso isolado do laser de baixa potência.

O câncer é um problema de saúde pública mundial. O Instituto Nacional do Câncer (INCA) estimou que no Brasil, no ano de 2015, 576 mil novos casos surgiram, representando a segunda maior causa de mortes por esta doença. Entre os tratamentos oferecidos para o câncer, podemos destacar a radioterapia, que utiliza fontes ionizantes para erradicar ou impedir a proliferação das células tumorais. Entretanto, o uso da radiação ionizante (R.I), pode acarretar danos às células não tumorais circunvizinhas ao tumor. Assim, tratamentos coadjuvantes que possam diminuir os efeitos deletérios da radiação são extremamente importantes. Neste contexto, o laser de baixa potência (LBP) surge como alternativa para modular a resposta das células frente à radiação ionizante. Sendo esse nosso objetivo, células de fibroblastos de gengiva humana (FMM1) e câncer de mama (MDA-MB-231) foram expostas as doses de 2,5 e 10 Gy e após 24 h receberam LBP (&lambda;= 660 nm, 40 mW e 0,04 cm²) com as densidades de energia de 30, 60, 90, 120 e 150 J/cm². A viabilidade celular foi quantificada através do teste de exclusão com azul de tripan durante quatro dias. A influência do LBP nas fases do ciclo celular e a expressão do Antígeno Nuclear de Proliferação celular (PCNA) foram realizadas por citometria de fluxo. A expressão de &beta;-Galactosidase foi considerada para quantificar a senescência celular. Considerando os parâmetros utilizados, observou-se aumento na viabilidade celular, da expressão de PCNA, maior população nas fases S e G2/m do ciclo celular, e a diminuição de células senescentes para as células não tumorais, enquanto que para as tumorais, nenhuma resposta foi observada na viabilidade celular, maior população nas fases S e G2/m do ciclo celular e na quantidade de células senescentes enquanto que a expressão de PCNA diminuiu. Diante disso, concluímos que o LBP exerceu efeitos em ambas as linhagens celulares. / Cancer is considered a public health problem worldwide. According to the Brazils National Cancer Institute (INCA), 576,000 new cases of cancer were estimated for 2015 in Brazil, representing the second leading cause of death. Radiotherapy may be a treatment to several of types of cancer, frequently using ionizing radiation to eradicate or prevent the proliferation of tumor cells. This treatment, however, can lead to death of non-tumor cells around in irradiated tissue. Given this, adjuvant therapies that can minimize the side effects of ionizing radiation are of extremely importance. In this context, low power laser (LPL) may be an alternative to modulate the response of healthy cells to ionizing radiation. In this study, cells of human gingival fibroblasts (FMM1) and breast cancer (MDAMB- 231) were exposed to gamma radiation at doses of 2.5 and 10 Gy. After twenty-four hours, cell were irradiated with LPL (&lambda;= 660 nm, 40 mW and total area of 0.04 cm²) with energy densities of 30, 60, 90, 120 and 150 J/cm². The cell viability was measured during four days, using the trypan blue technique. The influence of LPL on the cell cycle and on expression of the nuclear antigen of cellular proliferation (PCNA) was evaluated by flow cytometry. The expression of &beta;-Galactosidase was the chosen method to assess cell senescence. Considering our adopted parameters, and focusing on the non-tumor cells, we have observed an increase in: 1) cell viability; 2) cell population in phases S and G2/M cell cycle; 3) PCNA expression with decrease in senescence. No alterations were observed in the cell viability, with greater population in phases S and G2/M cell cycle, while the number of senescent cells and the expression of PCNA were decreased. Therefore, we have concluded that the LPL promoted effects on both cell lineages, with increased cell viability on FMM1 cells, whether cancer cells maintained a decreased proliferation.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-08-21T18:31:15Z No. of bitstreams: 1 patriciayannedeoliveira.pdf: 1047015 bytes, checksum: 1a92b1ec7fc7cdc1e6d9f8551e6c4790 (MD5) / Rejected by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br), reason: Favor verificar metadata.dc.contributor.advisor2: Resende on 2017-08-24T12:05:18Z (GMT) / Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-08-24T12:09:35Z No. of bitstreams: 1 patriciayannedeoliveira.pdf: 1047015 bytes, checksum: 1a92b1ec7fc7cdc1e6d9f8551e6c4790 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-08-25T12:00:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 patriciayannedeoliveira.pdf: 1047015 bytes, checksum: 1a92b1ec7fc7cdc1e6d9f8551e6c4790 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-25T12:00:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 patriciayannedeoliveira.pdf: 1047015 bytes, checksum: 1a92b1ec7fc7cdc1e6d9f8551e6c4790 (MD5) Previous issue date: 2017-07-27 / Objetivo: Neste estudo in vitro, avaliou-se a proliferação de células-tronco de polpa dentária (DPSCs) após a aplicação de laser de baixa intensidade. Métodos: A análise da proliferação de DPSCs cultivadas com DMEM e SFB a 10% foi realizada pelo ensaio de redução de MTT. Estas células foram irradiadas a cada 12 horas durante 72 horas ou de 24 em 24 horas durante 72 horas, com um laser Vermelho-InGaAlP (660nm, 30mW e 0,5 ou 1J/cm2) durante 16 ou 33 segundos. O melhor parâmetro dado pelo ensaio do MTT foi utilizado para analisar a diferenciação osteogênica e a viabilidade celular através do teste Trypan Blue. Para a análise estatística foi utilizado o teste ANOVA com nível de significância de 5% (p <0,05). Resultados: Através do MTT, foi possível observar que a menor dose de laser (0,5J /cm2) em aplicações as 0 e 48 horas obteve as melhores taxas de proliferação comparada a todos os outros grupos. Além disso, o laser de baixa intensidade não influenciou estatísticamente na diferenciação osteogênica e na viabilidade celular após a coloração com o vermelho de alizarina e o teste Trypan Blue no melhor parâmetro encontrato pelo MTT (0,5J/cm2). Conclusões: Ao analisar os resultados e considerando os parâmetros utilizados, podemos observar que o laser de baixa intensidade é uma ferramenta que favorece a proliferação de DPSCs. Finalmente, outros estudos devem ser realizados a fim de melhor definir os parâmetros para as aplicações de células-tronco. / Purpose: In this in vitro study, the proliferation of dental pulp stem cells (DPSCs) was evaluated after the application of low intensity laser. Methods: Analysis of the proliferation of DPSCs cultured with DMEM and 10% FBS was performed by the MTT reduction assay. These cells were irradiated every 12 hours for 72 hours or every 24 hours for 72 hours, with a RedInGaAlP laser (660nm, 30mW and 0.5 or 1J/cm2) for 16 or 33 seconds. The best parameter recorded by MTT was used to analyze the osteogenic differentiation and viability using the Trypan Blue test. For the statistical analysis the ANOVA test was used with significance level of 5% (p <0.05). Results: Through the MTT, it was possible to observe that the lowest dose of the laser (0.5J/cm2) in applications at 0 and 48 hours obtained the best proliferation rates then all the other groups. In addition, the low level laser did not appear to influence on the osteogenic differentiation nor the viability of the cells by the Trypan Blue test in the best parameter found by MTT (0.5J /cm2). Conclusions: When analyzing the results and considering the parameters used, we can observe that the low intensity laser is a tool that favors the proliferation of dental pulp stem cells. Finally, further studies should be carried out in order to better define parameters for stem cell applications.