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Aspectos epidemiológicos, clínicos, imunológicos e terapêuticos da leishmaniose disseminada produzida por Leishmania braziliensisRosa, Maria Elisa Alves 22 September 2013 (has links)
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Tese_Med_Maria Elisa Alves Rosa.pdf: 3316589 bytes, checksum: 97596f3066b2982c655ce211d84132f9 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico
(CNPq);Fundação de Amparo à Pesquisa (FAPESB);National Institutes of Health (NIH). / A Leishmaniose Disseminada (LD) é forma grave de Leishmaniose Tegumentar
Americana (LTA), caracterizada pelo aparecimento de múltiplas lesões
pleiomórficas, em mais de 2 segmentos corporais não contíguos. Ainda pouco
compreendida, importante pelo caráter emergente, gravidade das lesões e
dificuldade de tratamento. Objetivo: descrição dos aspectos clínicos,
epidemiológicos, imunológicos e terapêuticos da LD. Desenho do Estudo:
Série de casos, Corte Transversal e Coorte. Casuística, Material e Métodos:
acompanhamento clínico de 121 pacientes de LD. Sangue periférico e tecido de
64 pacientes de LD e de Leishmaniose Cutânea (LC) foram avaliados quanto à
produção in vitro e expressão tecidual de INFγ, TNFα, IL5, IL10, CCL2, CCL3,
CCL11, CXCL9 e CXCL10. Resultados: apresentam maior risco de
desenvolverem LD indivíduos adultos, do gênero masculino e lavradores.
Envolvimento mucoso foi observado em 50% dos casos, 64% apresentaram
entre 10 e 50 lesões, a reação de Montenegro foi positiva em 65% e Leishmania
braziliensis foi identificada em 97% dos pacientes. Cura clínica foi observada
em 36,8% dos pacientes com o uso de 1 a 4 séries de antimonial pentavalente
(SbV); anfotericina B foi utilizada como medicação de resgate em 29% dos
casos, com cura clínica em 100%. Pacientes adultos apresentaram um risco 9
vezes maior de falha terapêutica com o SbV que os menores de 18 anos. A
produção in vitro de IFNγ e de TNFα foi mais baixa em pacientes com LD. A
produção de CXCL9 foi mais elevado nos portadores de LD. A expressão
tecidual das citocinas e quimiocinas foi equivalente nas 2 formas. Conclusões:
adultos apresentam maior risco de falha terapêutica com o SbV. A avaliação
imunológica sugere que os pacientes de LD apresentam resposta Th1 deslocada
para os tecidos. / Salvador
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Imunopatogênese da leishmaniose cutânea humana: correlação entre extensão da inflamação, células e vasos em lesões fechadas causadas por leishmania Viannia braziliensis na forma disseminada (LD)Mendes, Dayana Santos January 2011 (has links)
Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2013-10-16T19:18:46Z
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Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / Leishmania (Viannia) braziliensis causa várias formas de doença clinica cutânea,
entre elas a forma cutânea disseminada (LD) com uma úlcera cutânea e lesões secundárias
disseminadas por mais de duas regiões do corpo. Esta forma além da úlcera inicial apresenta manifestação clínica de múltiplas pápulas e lesões não ulceradas. Neste estudo, descrevemos a histopatologia das lesões não ulceradas da LD, correlacionando-a com a extensão da área
inflamada com células CD4, CD20, CD68, CD31 e células de fator de von Willebrand (vW).
Metodologia: Dezoito biópsias de lesões de pacientes diagnosticados com LD por critérios
clínicos, teste cutâneo de Montenegro positivo e cultivo positivo para L. braziliensis dos
aspirados locais das lesões. A análise histopatológica foi feita a partir dos fragmentos de
tecidos corados com Hematoxilina e Eosina (HE). A quantificação da área inflamada e células
positivas para CD4, CD20, CD68, CD31 e vW foi avaliada com o auxílio do programa
Image-Pro Plus (Media Cibernetics).
Resultados: Infiltrado inflamatório linfoplasmocitário perivascular e formação de granulomas
são achados comuns nas lesões papulares causadas por L. braziliensis. A extensão da área de
inflamação variou de 3% a 73%. Houve uma correlação linear significativa entre a extensão
da inflamação e a presença de vasos vW+. As células mais frequentes no infiltrado
inflamatório foram os macrófagos CD68+, seguido por células B CD20+ e células T CD4+.
Houve uma correlação linear significante entre células CD4+ e CD20+ e a área inflamada.
Amastigotas foram detectadas por HE e imunohistoquímica em nove biópsias, todos os
dezoito aspirados foram positivos para L. (Viannia) braziliensis nos cultivos in vitro.
Conclusão: Pela análise histopatológica e imunohistoquímica em lesões fechadas causadas
por L. braziliensis, observamos a presença de inflamação crônica variável qualitativa e
quantitativamente. Com a expansão da área de inflamação, células CD4+ aumentam
proporcionalmente ao número de vasos encontrados e células CD20+. / Introduction: Skin infection by Leishmania (Viannia) braziliensis results in cutaneous and
mucosal leishmaniasis. In between this clinical spectrum, disseminated leishmaniasis (DL)
primary ulcer and/or ulcerated secondary lesions differs from other presentations by the
clinical manifestation of multiple papules and non-ulcerated lesions. In this study, we describe
the histopathology of DL non-ulcerated lesions correlating them with the amount of CD4,
CD20, CD68, CD31 cells, and von Willebrand factor (vW) and with the amount of inflamed
area which characterize immune inflammatory aspects.
Methods: Eighteen biopsies from patients diagnosed by clinical criteria, positive skin tests,
and fine needle aspirations in vitro cultivation were analyzed. Histopathological properties
were determined by analyzing hematoxylin and eosin (HE) stained slides. To quantify the
inflamed area and the number of cell positive for CD4, CD20, CD 68, CD31 and vW cell
markers, Image-Pro (Media Cybernetics) software was used.
Results: Diffuse lymphoplasmacytic perivascular infiltrates and granulomas were found in the
dermal skin layer. Inflammation extent varied from 3% to 73% indicating a significant linear
correlation with vW+ vessels and with graded patterns. The most frequent inflammatory cells
were macrophages CD68+, followed by B cells CD20+, and T cells CD4+. A significant
linear correlation between CD4+ and CD20+ cells with the total area of inflammation was
also found. Amastigotes were visualized in immunostained or HE stained slides. All 18
biopsies were positive for L. (Viannia) braziliensis.
Conclusion: Our findings suggest that chronic inflammation was present in all papules and
was predominantly formed by macrophages, plasmacytes, T cells and B cells. As the area of inflammation expands, the vascular framework increases proportionally as the presence of CD20+ and CD4+ cells
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Avaliação do papel de monócitos/macrófagos na patogênese da leishmaniose disseminada causada por L. braziliensisMacedo, Michael Nascimento January 2015 (has links)
Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2016-03-09T12:47:35Z
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Dissertação_Med_ Michael Nascimento Macedo.pdf: 3741822 bytes, checksum: 30ce35fc01a94f4442ef1a3849bf8e7d (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2016-04-19T15:37:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1
Dissertação_Med_ Michael Nascimento Macedo.pdf: 3741822 bytes, checksum: 30ce35fc01a94f4442ef1a3849bf8e7d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-19T15:37:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Dissertação_Med_ Michael Nascimento Macedo.pdf: 3741822 bytes, checksum: 30ce35fc01a94f4442ef1a3849bf8e7d (MD5) / National Institute of Health (NIH); Capes / Introdução: A leishmaniose disseminada (LD) é uma forma emergente da infecção causada por Leishmania braziliensis, caracterizada por multiplas lesões cutâneas em diferentes partes do corpo. Os mecanismos que permitem a disseminação do parasito na LD ainda não estão bem esclarecidos. Monócitos/macrófagos tem um papel importante na resposta imune inata e o controle inicial da infecção por Leishmaniatem sido relacionado com a ativação de macrófagos e a morte dos parasitos. Entretanto, alguns estudos têm demonstrado queos macrófagos também participam da patogênese da leishmaniose cutânea (LC). A hipótese deste estudo é de que monócitos/macrófagos de pacientes com LD são mais susceptíveis à infecção por L. braziliensiscontribuindo para a disseminação da doença e produzem mais moléculas inflamatórias do que monócitos/macrófagos de pacientes com LC. Oobjetivodeste estudo foi caracterizar o comportamento de monócitos/macrófagos de pacientes com LD após a infecção com L. braziliensis. Material e métodos e Resultados: Monócitos do sangue periférico e macrófagos derivados de monócitos de pacientes com LD e LC foram infectados com L. braziliensisna proporção de 5:1 em diferentes períodos. O número de monócitos infectados e a carga parasitária foram determinados por microscopia óptica. A viabilidade das promastigotas foi avaliada através da contabilização das promastigotas móveis após três dias em meio de cultura Schneider. A determinação do burst oxidativo foi realizada através da oxidação da Dihidrorodamina 123 e avaliado porcitometria de fluxo. A produção de citocinas/quimiocinas foi avaliada através de ensaio imunoenzimático (ELISA).Resultados: Monócitos de pacientes com LD apresentaram um menor percentual de infecção e de carga parasitária nos ultimos períodos de infecçãoquando comparados com os monócitos de pacientes com LC. Entretanto o número de parasitos viáveis nos sobrenadantes de culturas de monócitos após 72 horas foi maior nos pacientes com LD quando comparado com pacientes com LC. A produção do burst oxidativo após a infecção com L. braziliensisfoi menor em monócitos de pacientes com LD comparados com monócitos de pacientes com LC. Entretanto, a produção de TNF, CXCL9 e CXCL10 foi maior em culturas de macrófagos de pacientes com LD. Foi observada uma forte correlação entre a produção de TNF por macrófagos e o número de lesões nos pacientes com LD. Conclusão: A proliferaçãode L. braziliensisem pacientes com leishmaniose disseminada está provavelmente associada com a baixa produção do burst oxidativo e as elevadas concentrações de moléculas inflamatórias produzidas por macrófagos de pacientes com LD podem contribuir para a patogênese da doença.
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Efeito do fator de crescimento insulina-símile-I em promastigota e amastigota intracelular de Leishmania (Viannia) braziliensis de pacientes com diferentes formas clínicas de leishmaniose tegumentar americana / Effect of Insulin-like growth factor-I on promastigotes and intracellular amastigotes of Leishmania (Viannia) braziliensis from patients with different clinical forms of American tegumentary leishmaniasisSouza, Luana Dias de 03 October 2012 (has links)
Leishmanioses são doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania e se apresentam sob forma tegumentar ou visceral. No Brasil, a leishmaniose tegumentar americana (LTA) é causada, na sua maioria, por Leishmania (Viannia) braziliensis e conhecem-se principalmente as formas cutânea (LC), mucosa (LM) e disseminada (LD) da doença. Na LTA as formas clínicas tem sido atribuídas a diferenças na resposta imune do hospedeiro, mas recentemente vinculam-se também à variabilidade intraespecífica da L. (V.) braziliensis. Neste estudo avaliamos se haveria variabilidade biológica nos isolados de L. (V.) braziliensis, provenientes de pacientes com LC, LM e LD, principalmente em resposta a fator de crescimento insulina-símile-I (IGF-I). Os fatores de crescimento do hospedeiro tem sido alvo de estudos no desenvolvimento das leishmanioses, sendo IGF-I um deles. Havíamos demonstrado em estudos anteriores, utilizando Leishmania (Leishmania) amazonensis, que IGF-I induz proliferação, aumentando a atividade da arginase, com geração de poliaminas e diminuindo a síntese de óxido nítrico. No presente estudo analisamos o efeito de IGF-I em L.(V.) braziliensis, espécie prevalente no Brasil. Avaliamos inicialmente as características dos diferentes isolados enquanto promastigota e no prosseguimento enquanto amastigota em células de linhagem monocítica humana THP-1, com e sem estímulo de IGF-I. Nossos dados sugerem que há diferenças na atividade da arginase basal entre os isolados de L. (V.) braziliensis, sendo maior naqueles provenientes de pacientes com LM. IGF-I aumentou a atividade da arginase nos isolados de LC e LD, mas não de LM. Nos isolados em forma amastigota nas células de linhagem monocítica humana THP-1, o efeito de IGF-I foi de aumento do parasitismo nos isolados de LC e LM e de diminuição com os de LD. Nos isolados de LD a atividade da arginase basal foi menor que nos de LC. Por outro lado, a produção de óxido nítrico tendeu a ser maior em isolados de LD quando sob estímulo de IGF-I. Os dados sugerem que diferenças nas características biológicas dos parasitos podem contribuir na apresentação clínica dos casos da LTA. / Leishmaniasis are diseases caused by protozoa of the genus Leishmania that may manifest as cutaneous or visceral disease. In Brazil, American tegumentary leishmaniasis (ATL) is caused mostly by Leishmania (Viannia) braziliensis and cutaneous (CL), mucosal (ML) and disseminated (DL) forms of the disease are known.The diversity of clinical manifestations has been attributed to differences in the host immune response, but recently it has also been related to intraspecific variability of L. (V.) braziliensis. In the present study we evaluated whether there were biological variability in different isolates of L. (V.) braziliensis from patients with CL, ML, and DL, mainly in response to insulin-like growth factor-I (IGF-I). Growth factors of the host have been investigated in the development of leishmaniasis including IGF-I. In previous studies using Leishmania (Leishmania) amazonensis IGF-I was shown to induce proliferation, to increase the activity of arginase, generating polyamines and to decrease the synthesis of nitric oxide. In this study we analyzed the effect of IGF-I in L. (V.) braziliensis, a species prevalent in Brazil. Initially we evaluated the characteristics of individual isolates as promastigote and further as amastigote within human macrophage cell line THP-1 with and without IGF-I stimulation. Our data suggest that there are differences in the basal arginase activity amongst isolates of L. (V.) braziliensis, being higher in those from patients with ML. IGF-I increased the activity of arginase in the isolates of CL and DL, but not of ML. In isolates in the form of amastigotes within THP-1 cells, IGF-I induced the increase of parasitism of isolates from CL and ML, and decrease of those from DL. In isolates of DL the basal arginase activity was lower than in those of CL. Moreover, the production of nitric oxide tended to be higher with isolates of DL upon IGF-I stimulation. The data suggest that differences in the biological characteristics of parasites may contribute to the diversity of clinical presentation of ATL.
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Efeito do fator de crescimento insulina-símile-I em promastigota e amastigota intracelular de Leishmania (Viannia) braziliensis de pacientes com diferentes formas clínicas de leishmaniose tegumentar americana / Effect of Insulin-like growth factor-I on promastigotes and intracellular amastigotes of Leishmania (Viannia) braziliensis from patients with different clinical forms of American tegumentary leishmaniasisLuana Dias de Souza 03 October 2012 (has links)
Leishmanioses são doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania e se apresentam sob forma tegumentar ou visceral. No Brasil, a leishmaniose tegumentar americana (LTA) é causada, na sua maioria, por Leishmania (Viannia) braziliensis e conhecem-se principalmente as formas cutânea (LC), mucosa (LM) e disseminada (LD) da doença. Na LTA as formas clínicas tem sido atribuídas a diferenças na resposta imune do hospedeiro, mas recentemente vinculam-se também à variabilidade intraespecífica da L. (V.) braziliensis. Neste estudo avaliamos se haveria variabilidade biológica nos isolados de L. (V.) braziliensis, provenientes de pacientes com LC, LM e LD, principalmente em resposta a fator de crescimento insulina-símile-I (IGF-I). Os fatores de crescimento do hospedeiro tem sido alvo de estudos no desenvolvimento das leishmanioses, sendo IGF-I um deles. Havíamos demonstrado em estudos anteriores, utilizando Leishmania (Leishmania) amazonensis, que IGF-I induz proliferação, aumentando a atividade da arginase, com geração de poliaminas e diminuindo a síntese de óxido nítrico. No presente estudo analisamos o efeito de IGF-I em L.(V.) braziliensis, espécie prevalente no Brasil. Avaliamos inicialmente as características dos diferentes isolados enquanto promastigota e no prosseguimento enquanto amastigota em células de linhagem monocítica humana THP-1, com e sem estímulo de IGF-I. Nossos dados sugerem que há diferenças na atividade da arginase basal entre os isolados de L. (V.) braziliensis, sendo maior naqueles provenientes de pacientes com LM. IGF-I aumentou a atividade da arginase nos isolados de LC e LD, mas não de LM. Nos isolados em forma amastigota nas células de linhagem monocítica humana THP-1, o efeito de IGF-I foi de aumento do parasitismo nos isolados de LC e LM e de diminuição com os de LD. Nos isolados de LD a atividade da arginase basal foi menor que nos de LC. Por outro lado, a produção de óxido nítrico tendeu a ser maior em isolados de LD quando sob estímulo de IGF-I. Os dados sugerem que diferenças nas características biológicas dos parasitos podem contribuir na apresentação clínica dos casos da LTA. / Leishmaniasis are diseases caused by protozoa of the genus Leishmania that may manifest as cutaneous or visceral disease. In Brazil, American tegumentary leishmaniasis (ATL) is caused mostly by Leishmania (Viannia) braziliensis and cutaneous (CL), mucosal (ML) and disseminated (DL) forms of the disease are known.The diversity of clinical manifestations has been attributed to differences in the host immune response, but recently it has also been related to intraspecific variability of L. (V.) braziliensis. In the present study we evaluated whether there were biological variability in different isolates of L. (V.) braziliensis from patients with CL, ML, and DL, mainly in response to insulin-like growth factor-I (IGF-I). Growth factors of the host have been investigated in the development of leishmaniasis including IGF-I. In previous studies using Leishmania (Leishmania) amazonensis IGF-I was shown to induce proliferation, to increase the activity of arginase, generating polyamines and to decrease the synthesis of nitric oxide. In this study we analyzed the effect of IGF-I in L. (V.) braziliensis, a species prevalent in Brazil. Initially we evaluated the characteristics of individual isolates as promastigote and further as amastigote within human macrophage cell line THP-1 with and without IGF-I stimulation. Our data suggest that there are differences in the basal arginase activity amongst isolates of L. (V.) braziliensis, being higher in those from patients with ML. IGF-I increased the activity of arginase in the isolates of CL and DL, but not of ML. In isolates in the form of amastigotes within THP-1 cells, IGF-I induced the increase of parasitism of isolates from CL and ML, and decrease of those from DL. In isolates of DL the basal arginase activity was lower than in those of CL. Moreover, the production of nitric oxide tended to be higher with isolates of DL upon IGF-I stimulation. The data suggest that differences in the biological characteristics of parasites may contribute to the diversity of clinical presentation of ATL.
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