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Levantamento da fauna flebotom?nica e ocorr?ncia de c?es sororreagentes para Leishmaniose Tegumentar Americana no Munic?pio de Serop?dica, Estado do Rio de Janeiro. / Investigation of phlebotominic fauna and occurrence serum-reactive dogs for American Cutaneous Leishmaniasis in Serop?dica Country, Rio de Janeiro State.Cardoso, Patr?cia Giupponi 16 October 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007-10-16 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The American Cutaneous Leishmaniasis (ACL) is a no contagious infectious illness caused by Leishmania protozoa genera affecting skin and mucous membranes basically being a zoonotic infection. The aim of this study was to cany out phlebotominic fauna survey in ACL human cases occurrence areas. For sandfly collection monthly systematic captures by Castro trap from 6 o clock p.m. to 10 o clock p.m. for 12 months were performed. The diptera were placed on 70% alcohol bottles and carried to Sergio Arouca Public Health National School Biological Sciences Department Vectors Laboratory, Oswaldo Cruz Foundation, Rio de Janeiro, where they have been clarified and identified, as well. For dogs serology, blood samples from invaded residences animals as well as from a neighbour one, by venous puncture were taken. After serum centrifugation and separation, samples were stored at 20?C till serological assays performance at FIOCRUZ Public Health Nation School Immunodiagnosis Laboratory. The following methods: Indirect Immunofluorescence Reaction (IFIR) and Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) were used. From October, 2004 to September, 2005, 2390 units from four species were captured. The predominant species was the Lutzomyia intermedia with 97.1% from total collected, followed by L. whitmani 1.6%, L.migonei 1.21% and L.oswaldoi 0.09 %. From 35 dogs serology: 60% (21) no reagent animals were reported, 22.9% just for ELISA, 2.9% for IFIR, and 14.2% (5) reagent animals for both techniques, definitely positive. No correlated evidences between serologies (IFIR+/ELISA+ and other results) in regard to animals residence (ill or neighbour) by Fisher statistical test were reported. It might be suggested that ACL transmission in Serop?dica County has basically been spread by Lutzomyia intermedia specie. The presence of reagent dogs unless suggestive injury may contribute for new ACL reports. / A Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) ? uma doen?a infecciosa n?o contagiosa causada por protozo?rios do g?nero Leishmania que acomete a pele e mucosa, sendo primariamente uma infec??o zoon?tica. O objetivo desta pesquisa foi realizar o levantamento da fauna flebotom?nica em ?reas com ocorr?ncia de casos humanos de LTA. Para coleta dos fleb?tomos foram realizadas capturas mensais sistem?ticas utilizando o capturador de Castro, no hor?rio das 18 ?s 22h, durante 12 meses. Os d?pteros foram colocados em frascos contendo ?lcool 70% e transportados para o laborat?rio de Vetores do Departamento de Ci?ncias Biol?gicas da Escola Nacional de Sa?de P?blica S?rgio Arouca, Funda??o Oswaldo Cruz, RJ, onde foram clarificados e identificados. Para sorologia dos c?es, amostras de sangue foram coletadas por venopun??o em animais residentes nos domic?lios acometidos e de c?es vizinhos. Ap?s centrifuga??o e separa??o do soro, as amostras foram conservadas a -20?C, at? o momento da realiza??o dos ensaios sorol?gicos no laborat?rio de Imudiagn?stico da ENSP, da FIOCRUZ. Empregaram-se os seguintes m?todos: Rea??o de Imunofluoresc?ncia Indireta (RIFI) e o enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Foram capturados 2390 exemplares de flebotom?neos entre os meses de outubro de 2004 a setembro de 2005, pertencentes a quatro esp?cies. A esp?cie predominante foi a Lutzomyia intermedia com 97,1% do total coletado, seguida pela L. whitmani 1,6% , L.migonei 1,21% e L.oswaldoi 0,09 %. Da sorologia de 35 c?es: 60% (21) animais foram considerados n?o reativos; 22,9% reativos somente para ELISA; 2,9% somente RIFI e 14,2% (5) dos c?es reativos para as duas t?cnicas, conclusivamente positivos. N?o houve evid?ncias de associa??o entre sorologia (RIFI+/ELISA+ e outros resultados) com a propriedade do animal (paciente ou vizinho), segundo o teste exato de Fisher. Aparentemente a transmiss?o da LTA no munic?pio de Serop?dica esteja sendo veiculada pela L. intermedia. A presen?a de c?es reativos sem a exist?ncia de les?o sugestiva pode contribir para novos focos da LTA, funcionando como um animal em potencial para manuten??o da protozoose.
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Apresentação clínica, etiologia e distribuição geográfica da Leishmaniose tegumentar no município de Santarém, estado do Pará, Brasil / Clinical presentation, etiology and geographic distribution of American tegumentary Leishmaniasis in the municipality of Santarém, Pará, BrazilMARTINS, Nádia Vicência do Nascimento 27 December 2012 (has links)
Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2015-06-22T18:50:58Z
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Previous issue date: 2012 / FIDESA - Fundação Instituto para o Desenvolvimento da Amazônia / A leishmaniose tegumentar americana (LTA) é uma doença infecciosa que atinge pele e mucosas e que vem apresentando um aumento significativo em sua incidência nas últimas décadas, tem uma prevalência global de aproximadamente 1,5 milhões de casos anuais em todo o mundo. O presente estudo tem uma abordagem analítica, descritiva, transversal, com objetivo de estabelecer perfil clínico epidemiológico e correlações etiológicas da leishmaniose tegumentar em uma série de casos na região oeste do Pará. Na pesquisa foram incluídos 102 indivíduos apresentando manifestações clínicas de LTA, selecionados no período de outubro de 2009 a novembro de 2011, atendidos no Centro de Controle de Zoonoses no município de Santarém, estado do Pará. As variáveis foram analisadas a partir da aplicação do teste qui-quadrado de aderência, e apresentadas através de figuras e tabelas. Os resultados demonstram que prevaleceram as infecções em indivíduos do sexo masculino 85,29%, na faixa etária de 30 a 40 anos 32,35%, trabalhadores e moradores da área rural que exercem ocupações na sua maioria de lavradores 21,57%, apresentaram lesões únicas 63,72%, do tipo ulceradas 77,45%, localizadas nos membros inferiores em 58,82% dos casos, com tempo de evolução da doença em média de 02 meses 74,50%. Conclusão: Seis espécies de Leishmania foram identificadas, sendo o subgênero Viannia mais prevalente e a espécie predominante a L (V). braziliensis. / American tegumentary leishmaniasis (ATL) is an infectious disease affecting skin and mucosa, which has shown a significant increase in incidence in recent decades, has an overall prevalence of approximately 1.5 million cases annually worldwide. The present study is an analytic approach, descriptive, cross-sectional profile with the objective of establishing clinical and epidemiological correlations etiologies of cutaneous leishmaniasis in a series of cases in western Pará In the survey included 102 individuals presenting clinical manifestations of ATL, selected in from October 2009 to November 2011, attended the Center for Zoonosis Control in the city of Santarém, state of Pará variables were analyzed from the application of the chi-square tack and presented through figures and tables. The results demonstrate that prevailed infections in males 85.29%, aged 30 to 40 years 32.35%, workers and residents of rural areas engaged in occupations mostly peasants 21.57%, showed single lesions 63.72%, 77.45% ulcerated type, located in the lower limbs in 58.82% of cases, with time to disease progression of 02 months on average 74.50%. Conclusion: Six Leishmania species were identified, and the subgenus Viannia more prevalent and predominant species E (V). braziliensis. / UEPA - Universidade do Estado do Pará
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Leishmaniose tegumentar americana e a relação doença-espaço geográfico: aportes para a gestão dos Parques Estaduais do Aguapeí e do Rio do Peixe-SP / American cutaneous leishmaniasis and the relationship between the disease and the geographic space: contributions for the management of Aguapeí and Rio do Peixe State Parks-SPHenriques, Natália Poiani [UNESP] 11 October 2017 (has links)
Submitted by NATÁLIA POIANI HENRIQUES null (natihenriques@yahoo.com.br) on 2018-03-02T02:05:43Z
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Previous issue date: 2017-10-11 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) é uma doença infecto-parasitária, não contagiosa, transmitida aos mamíferos através da picada de fêmeas de flebotomíneos, infectadas por protozoários do gênero Leishmania. Caracterizada por afecções dermatológicas, a doença apresenta atualmente três padrões epidemiológicos e ampla distribuição geográfica. A preocupação em se entender a doença e seus fatores determinantes não é recente, e dentre eles, é preciso considerar como se processa a produção do espaço e a relação da sociedade com a natureza, o que reforça a importância dos estudos geográficos. Os Parques Estaduais do Aguapeí (PEA) e do Rio do Peixe (PERP) e os municípios que os integram, compõem a área do presente estudo, cujo objetivo geral consistiu em analisar a relação entre o espaço geográfico e a LTA, de modo a contribuir com a gestão destes espaços especialmente protegidos. Para tanto, na revisão bibliográfica, retomamos os processos de ocupação da região e os estudos da doença no estado de São Paulo em diferentes contextos históricos. Consideramos as notificações dos casos humanos da doença de 1998 a 2016, a ocorrência de casos nas proximidades dos parques e as relações socioespaciais existentes no interior dos mesmos. Utilizamos armadilhas luminosas tipo CDC para a captura de espécies de flebotomíneos e analisamos os planos de manejo com vistas à identificação da abordagem epidemiológica. Assim, constatamos que a situação epidemiológica da doença na área de interesse caracteriza-se por casos esporádicos com evidências da ocorrência de um surto em alguns municípios do PEA no ano de 2015, quando observamos um incremento significativo na participação da área de estudo nos casos totais do Estado. Foram capturadas 12 espécies de flebotomíneos, das quais Bichromomyia flaviscutellata, Migonemyia migonei, Nyssomyia neivai, Nyssomyia whitmani e Pintomyia fischeri estão associadas à transmissão da LTA. Constatamos ainda que os planos de manejo atuais não contemplam o levantamento entomológico e não abordam aspectos epidemiológicos desta ou de outras doenças. Considerando os perfis epidemiológicos da LTA e as relações sociais que ocorrem no interior dos parques, ao trazermos para a reflexão a noção de risco e vulnerabilidade em saúde, propomos ações e destacamos medidas preventivas individuais e coletivas, contribuindo para a gestão destes espaços no tocante ao risco da transmissão desta doença. / American Cutaneous Leishmaniasis (ACL) is a non-contagious infectious-parasitic disease transmitted to mammals through the bite of female sandflies infected by protozoa of the genus Leishmania. Characterized by dermatological conditions, the disease currently presents three epidemiological patterns and a wide geographic distribution. The concern to understand the disease and its determinants is not recent, and among them, it is necessary to consider how the production of space and the relation of society to nature are processed, which reinforces the importance of geographic studies. Aguapeí and Rio do Peixe State Parks and the municipalities that comprise them integrate the area of the present study, whose general aim was to analyze the relationship between geographic space and the ACL, in order to contribute with the management of these specially protected spaces. Therefore, in the bibliographic review, we return to the processes of occupation of the region and the studies of the disease in the state of São Paulo in different historical contexts. We consider the reports of the human cases of the disease from 1998 to 2016, the occurrence of cases in the vicinity of the parks and the socio-spatial relationships existing within them. We used CDC type light traps to capture sandflies species and analyzed management plans to identify the epidemiological approach. Thus, we verified that the epidemiological situation of the disease in the area of interest is characterized by sporadic cases with evidence of the occurrence of an outbreak in some municipalities of the Aguapeí State Park in the year 2015, when we observed a significant increase in the participation of the study area in the total cases of state. Twelve species of sandflies were captured, of which Bichromomyia flaviscutellata, Migonemyia migonei, Nyssomyia neivai, Nyssomyia whitmani and Pintomyia fischeri are associated with the transmission of ACL. We also found that the current management plans do not contemplate the entomological survey and do not address the epidemiological aspects of this or other diseases. Considering the epidemiological profiles of the ACL and the social relations that occur within the parks, in bringing to the reflection the notion of risk and vulnerability in health, we propose actions and highlight individual and collective preventive measures, contributing to the management of these spaces in relation to the transmission of this disease. / FAPESP: 2012/23959-9
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Desenvolvimento de hidrog?is de poli (?lcool vin?lico) contendo anfotericina B para o tratamento de leishmaniose tegumentar americanaAlexandrino J?nior, Francisco 31 March 2015 (has links)
Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-02-20T23:04:19Z
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Previous issue date: 2015-03-31 / A leishmaniose ? uma infec??o parasit?ria, emergente e n?o controlada, que por usa elevada incidencia est? presente no programa de doen?as tropicais negligenciadas da Organiza??o Mundial da Sa?de (OMS). Adicionalmente, esta ? considerada, neste programa, a segunda maior causa de perda de anos de vida ?til devido a ?bito ou debilidade, chegando em 2004 a quase 2 bilh?es de anos de vida ?til perdidos em todo o mundo. Anualmente, registra-se 1,3 milh?o de casos, dos quais aproximadamente 1 milh?o corresponde a sua forma tegumentar (LTA). Apesar desta contundente realidade, atualmente n?o h? uma proposta de tratamento ou medicamento que adeque simultaneamente eficacia terap?utica, boa rela??o custo-benef?cio, f?cil produ??o e eventos adversos negligenciaveis. Com o int?ito de elaborar uma abordagem alternativa e inovadora para o tratamento da LTA, esse trabalho prop?s o desenvolvimento e a avalia??o de uma formula??o t?pica do tipo curativo polim?rico, baseado em um hidrog?l de ?lcool polivin?lico contendo anfotericina B (AmB). Ap?s a produ??o dos hidrog?is foi observado que a AmB incorporada pode estar entre as cadeias polim?ricas sob a forma de dispers?o molecular. Essa localiza??o alterou o mecanismo de intumescimento, de um transporte limitado pela difus?o (caso I) para an?malo, permitindo que o sistema intumes?a mais e mais r?pido, quando comparado com o mesmo sem o ativo. No entanto, n?o foi observada a libera??o imediata da AmB, sendo esta liberada de forma cont?nua e seguindo o modelo o cin?tico de Higuchi. O hidrog?l contendo AmBdemonstrou ter eficiente atividade leishmanicida nas primeiras 24 horas. Al?m disso, apresentou impermeabilidade a microrganismos, e permeabilidade ao vapor d??gua compat?vel com as necessidades da pele em seu estado lesionado, o que indica uma poss?vel habilidade de prevenir infec??es secund?rias e manter um ambiente favor?vel ao processo cicatricial. Estes resultados demonstram que os hidrog?is s?o sistemas promissores para a libera??o controlada de AmB e um potencial tratamento t?pico para a LTA.
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Estudo dos genes codificadores de citocinas implicadas na modulação da leishmaniose tegumentar americana e correlação com os achados clínico-laboratoriais da doença / Study of genes encoding cytokines involved in the modulation of American cutaneous leishmaniasis and correlation with the clinical-laboratory findings of the diseaseDaise Damaris Carnietto de Hippolito 31 August 2017 (has links)
A resposta imune desencadeada em pacientes com leishmaniose tegumentar Americana (LTA) é predominantemente celular. Assim, o estudo dos mecanismos imunológicos responsáveis pela formação, progressão e cura desta infecção é de grande importância, considerando a deformação que ela pode causar em indivíduos infectados. Este estudo investigou a expressão de mRNA de IFN-?, IL-10, IL-27, TNF-?, TGF-? e IL-6 em 40 biopsias de parafina (FFPE) fixadas em formalina de pacientes com diagnóstico clínico e laboratorial para LTA. Um grupo de 10 biópsias FFPE coletadas de pacientes com diagnóstico clínico de leishmaniose mucosa (LM) foi utilizado para o controle da evolução da infecção. Inicialmente, foi padronizado a extração de RNA, a síntese de cDNA e a escolha do gene endógeno em 9 biopsias frescas e 8 FFPE. Após essas padronizações, as moléculas de RNA de fragmentos de biopsias parafinadas, foram extraídas com kit específico, tratadas com DNase, quantificadas por fluorimetria e sintetizadas para cDNA. A expressão relativa de cada citocina foi determinada (em duplicata) por PCR em tempo real. As reações foram normalizadas frente ao padrão de expressão do gene endógeno GAPDH, que foi previamente padronizado. O padrão de expressão de cada gene alvo foram determinados segundo a fórmula do \"CT comparativo\" (2-??CT), na qual calcula-se quantas vezes mais ocorre a expressão do gene alvo em relação a indivíduos normais. Também incluído nesse estudo 5 amostras de biopsia de pele de indivíduos normais (grupo IV). Os resultados foram expressos em média de quantificação relativa, a análise estatística foi realizada utilizando foi determinada por Teste t não pareado e teste F para comparação de variâncias, onde três grupos de pacientes foram formados. Grupo I, 35 pacientes com LTA, cuja expressão relativa de IFN-? foi inferior a 100. Grupo II, 5 pacientes com LTA cuja expressão relativa de IFN-? foi superior a 100. Grupo III, 10 pacientes com leishmaniose mucosa. Os níveis de expressão para IFN-? foram 33,34; 214,1 e 129,6 vezes maiores para os Grupos I, II e III, respectivamente do que as amostras do controle normal. Para o TNF-? foram 11,22; 2,37 e 4,59 vezes superiores ao normal nos Grupos I, II e III, respectivamente. Para IL-10 foram 5,14; 11,54 e 2,51 vezes superiores aos valores normais nos Grupos I, II e III, respectivamente. Para IL-27 foram 15,81; 85,29 e 17,29 vezes superiores ao normal nos Grupos I, II e III, respectivamente. Para o TGF-? foram 5,38; 4,33 e 4,72 vezes superiores ao normal nos Grupos I, II e III, respectivamente. Para a IL-6 foram 5,92; 5,69 e 2,09 vezes superiores aos valores normais nos Grupos I, II e III, respectivamente. Estes resultados foram semelhantes a resultados de estudos que analisam a expressão de citocinas já sintetizadas. No geral, os resultados de expressão gênica das citocinas estudadas sugerem que a exacerbação da resposta imune do perfil Th1 (IFN-?) poderia levar ao surgimento de lesões mais graves nos pacientes dos Grupos II e III. Os níveis elevados de mRNA de IL-10, observado nos pacientes do Grupo II podem promover baixa ativação macrofágica, colaborando com a replicação do parasita e assim culminar com a progressão da doença. A expressão de mRNA de IL-27 não interferiu na expressão de mRNA de IFN-? nas células dos pacientes com leishmaiose tegumentar ou leishmaniose mucocutânea. Em conclusão, estes resultados podem sugerir que os pacientes do Grupo II podem desenvolver formas mais graves de LTA quando comparados aos do Grupo I. / The immune response triggered in patients with American cutaneous leishmaniasis (ACL) is predominantly cellular. Thus, the study of the immunological mechanisms responsible for the formation, progression and cure of this infection is of great importance, considering the deformation that it can cause in infected individuals. This study investigated the expression of IFN-?, IL-10, IL-27, TNF-?, TGF-? and IL-6 mRNA in 40 formalin-fixed paraffin-embedded paraffin biopsies (FFPE) from patients with clinical and laboratory diagnosis for LTA. A group of 10 FFPE biopsies collected from patients with clinical diagnosis of mucosal leishmaniasis (MCL) was used to control the evolution of the infection. Initially, RNA extraction, cDNA synthesis and the choice of the endogenous gene were standardized in 9 fresh biopsies and 8 FFPE. After these standardizations, the RNA molecules of fragments of paraffin-shaped biopsies were extracted with a specific kit, treated with DNase, quantified by fluorimetry and synthesized for cDNA. The relative expression of each cytokine was determined (in duplicate) by real-time PCR. Reactions were normalized against the expression pattern of the endogenous GAPDH gene, which was previously standardized. The expression pattern results for each target gene were determined by the \"comparative CT\" (2-??CT) formula, in which it is calculated how many times more the expression of the target gene occurs in relation to normal individuals. Also included in this study 5 skin biopsy samples from normal subjects (group IV). The results were expressed as mean relative quantification, statistical analysis was performed using was determined by unpaired t test and F test for comparison of variances, where three groups of patients were formed. Group I, 35 patients with ACL, whose relative expression of IFN-? was less than 100. Group II, 5 patients with ACL whose relative expression of IFN-? was greater than 100. Group III, 10 patients with mucosal leishmaniasis. The expression levels for IFN-? were 33,34; 214,1 and 129,6 times higher for Groups I, II and III, respectively than the samples from the normal control. For TNF-? were 11,22; 2,37 and 4,59 times higher than normal in Groups I, II and III, respectively. For IL-10 were 5,14; 11,54 and 2,51 times higher than the normal values in Groups I, II and III, respectively. For IL-27, 15,81; 85,29 and 17,29 times higher than normal in Groups I, II and III, respectively. For TGF-? were 5,38; 4,33 and 4,72 times higher than normal in Groups I, II and III, respectively. For IL-6 were 5,92; 5,69 and 2,09 times higher than the normal values in Groups I, II and III, respectively. These results were similar to the results of studies that analyze the expression of cytokines already synthesized. In general, the gene expression results of the cytokines studied suggest that the exacerbation of the Th1 profile (IFN-?) immune response could lead to more serious lesions in patients in Groups II and III. Elevated levels of IL-10 mRNA observed in Group II patients may promote low macrophage activation, assisting in the replication of the parasite and thus culminating in the progression of the disease. Expression of IL-27 mRNA did not interfere in the expression of IFN-? mRNA in the cells of patients with tegumentary leishmaiosis or mucocutaneous leishmaniasis. In conclusion, these results may suggest that patients in Group II may develop more severe forms of ACL when compared to those in Group I.
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Aplicação da Citometria de Fluxo no Diagnótico e Critério de Cura da Leishmaniose Tegumentar AmericanaOliveira-mendes, Andresa Pereira de 05 March 2015 (has links)
Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-04-29T14:12:28Z
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Previous issue date: 2015-03-05 / FACEPE / A leishmaniose tegumentar americana (LTA) é um problema de saúde pública, que afeta a
produtividade e a vitalidade das pessoas. Embora estudos avaliem a resposta humoral na LTA,
ainda não está completamente esclarecido o papel de anticorpos específicos na imunidade
contra Leishmania. Além dos desafios sócio-econômicos que agravam ainda mais o problema
da LTA, o diagnóstico da doença demonstra dificuldades, sendo freqüentemente necessário à
correlação de vários elementos para se chegar ao diagnóstico definitivo. Dessa maneira, o
objetivo desse estudo, foi avaliar o uso da citometria de fluxo, como uma metodologia
alternativa na avaliação diagnóstica em indivíduos com LTA ativa (AT), como critério de
cura pós-terapêutica em indivíduos após o tratamento (PT), naqueles com cura clínica
espontânea (CE) e em indivíduos com outras doenças (doença de Chagas – DC, leishmaniose
visceral–LV, hanseníase e esporotricose). A reatividade relatada pela citometria de fluxo,
utilizando promastigotas vivas e fixadas de Leishmania (Viannia) braziliensis foi
respectivamente, 86% e 90% de porcentagem de parasitas fluorescentes positivos (PPFP). Por
análise comparativa, entre citometria de fluxo e imunofluorescência indireta, utilizando os
pacientes AT, 1, 2 e 5 anos PT, verificou-se que a citometria de fluxo mostrou sensibilidade
de 86% e especificidade de 77%, enquanto a IFI teve uma sensibilidade de 78% e
especificidade de 85%. Contudo esta técnica teve confirmada a sua aplicabilidade no critério
de cura da LTA. Analisando os resultados apresentados pelos pacientes CE, obtivemos um
desempenho com 100% de especificidade. O diagnóstico diferencial da LTA que utiliza soros
de pacientes DC e LV demonstrou reação cruzada, revelando resultados falso-positivos. No
entanto, a utilização de soros de pacientes com esporotricose, tuberculose e hanseníase,
demonstrou potencial para o uso da citometria de fluxo no diagnóstico diferencial. O estudo
mostrou que os ensaios realizados utilizando anticorpos IgG, detectados por Leishmania (V.)
braziliensis na citometria de fluxo, representam uma ferramenta alternativa para o diagnóstico
da LTA e também abrem perspectivas para a utilização no monitoramento e critério de cura
da LTA. / American tegumentar leishmaniasis (ATL) is a public health problem, affecting the
productivity and vitality. Although there are studies to assess the humoral response in the
ATL, is not yet fully understood the role of specific antibodies in immunity against
Leishmania. In addition to the socioeconomic challenges that further aggravate the problem of
ATL, the diagnosis shows difficulties and is often necessary to the correlation of various
elements to reach a definitive diagnosis. Thus, the aim of this study was to evaluate the use of
flow cytometry as an alternative methodology in the diagnostic evaluation in patients with
active ATL before treatment (BT), as post-therapy cure criteria in individuals after treatment
(AT), those with spontaneous clinical cure (EC) and in individuals with other diseases
(Chagas disease - CD, visceral leishmaniasis-LV, leprosy and sporotrichosis). The reactivity
reported by flow cytometry, using live and fixed promastigotes of Leishmania (V.)
braziliensis were respectively 86% and 90% percentage of positive fluorescent parasites
(PPFP). A comparative analysis of flow cytometry and indirect immunofluorescence using
patient AT, 1, PT 2 and 5 years, it has been found that the flow cytometry showed a
sensitivity of 86% and specificity of 77% and had a sensitivity IIF of 78% and specificity of
85%. Though this technique has confirmed its applicability in the healing criterion of ATL,
analyzing the results presented by the EC patients achieved a performance with 100%
specificity. The differential diagnosis of ATL using sera from patients of CD and LV
demonstrated cross-reactivity, revealing false-positive results. Moreover, the use of sera from
patients with sporotrichosis, tuberculosis and leprosy showed potential for the use of flow
cytometry in the differential diagnosis. The study showed that testing performed using IgG
antibodies, detected by Leishmania (V.) braziliensis in flow cytometry, are an alternative tool
for the diagnosis of ATL and also open up prospects for use in monitoring and in its cure
criterion.
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AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE LEISHMANICIDA DE ESPÉCIES VEGETAIS / EVALUATION OF ACTIVITY LEISHMANIA OF VEGETAL SPECIESBezerra, Jeamile Lima 17 March 2006 (has links)
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Previous issue date: 2006-03-17 / The Leishmaniose, infectum-parasitic illness caused by protozoans of the Leishmania sort, is still one of the biggest problems of public health affecting about 12 millions of people in 88 countries, with the 1-2 register million new cases annually. Of all the cases of LT, 90% occur in Brazil, Peru, Afghanistan, Algeria, Saudi Arabia, Syria e Anger. In Brazil, leishmaniose is one antropozoonose emergent had mainly to occured changes in the chain epidemiologist, including alterations in the reservoirs, vectors and hosts, in result of the social, economic and cultural conditions of the population. The Leishmaniose American Tegumentar (LTA) has been pointed in practically all the Brazilian states with gradual increase of cases, registering in recent years in the regions North, Northeast, Center-West and South.Isolated natural composites of plants had had and continue having a great one impact in supervened and the treatment of some diseases human beings. Moreover, the plants they are important substance sources, many of which if they constitute in raw materials or archetypes for synthesis of new remedies. / A Leishmaniose Tegumentar (LT), doença infecto-parasitária causada por protozoários do gênero Leishmania, é ainda um dos maiores problemas de saúde pública afetando cerca de 12
milhões de pessoas em 88 países, com o registro de 1-2 milhões de novos casos anualmente. De
todos os casos de LT, 90% ocorrem no Brasil, Peru, Afeganistão, Algéria, Arábia Saudita, Síria e
Irã. No Brasil, a leishmaniose é uma antropozoonose emergente devido principalmente às
mudanças ocorridas na cadeia epidemiológica, incluindo alterações nos reservatórios, vetores e
hospedeiros, em decorrência das condições sociais, econômicas e culturais da população. A Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) tem sido apontada em praticamente todos os estados brasileiros com aumento progressivo de casos nos últimos anos, registrando-se surtos nas regiões Norte, Nordeste, Centro-Oeste, Sudeste e Sul.Inúmeros compostos naturais isolados de plantas tiveram e continuam tendo um grande
impacto na sobrevida e no tratamento de várias enfermidades humanas. Além disso, as plantas
são importantes fontes de substâncias, muitas das quais se constituem em matérias-primas ou
protótipos para síntese de novos fármacos.
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ATP difosfohidrolase em formas promastigotas de Leishmania (Viannia) braziliensis: caracterização e análise de domínios compartilhados com a apirase de Solanum tuberosumSoares, Fabrícia Aparecida Rezende 11 December 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007-12-11 / Uma ATP difosfohidrolase foi identificada em promastigotas de Leishmania braziliensis, e resultado similar foi encontrado em outra cepa de Leishmania, pertencente ao Complexo Leishmania braziliensis. Hidrólise de nucleosídeos di- e trifosfatados sob estímulo de íons bivalentes, associada à inibição por azida sódica, sugeriram que atividade ATP difosfohidrolásica está presente em promastigotas. Western blots desenvolvidos com anticorpos anti-apirase de batata produzidos em coelho revelaram bandas de 48 e 43 kDa, possivelmente sub-unidades da mesma proteína. Estes anticorpos imobilizados em Proteína A-Sepharose depletaram aproximadamente 85% da atividade ATPásica ou ADPásica da ATP difosfohidrolase solubilizada em C12E9. O complexo imunoprecipitado (resina-anticorpo-antígeno) foi separado por SDS-PAGE. Através de western blots desenvolvidos com anticorpos anti-apirase de batata produzidos em camundongos, a mesma banda de 48 kDa foi identificada nas duas cepas, confirmando que as proteínas do parasito e da batata compartilham epítopos. Além disso, o peso molecular coincidente sugeriu que esta ATP difosfohidrolase corresponde a um nucleosídeo difosfatase identificada no genoma de L. braziliensis como pertencente à família das NTPDases. Estreita relação estrutural e evolucionária foram então demonstradas entre a apirase de batata e a NDPase de L. braziliensis por cladograma, alinhamento de seqüências de aminoácidos, predição de epítopos e modelagem molecular. Domínios específicos parecem estar potencialmente envolvidos na resposta imune do hospedeiro, conservados entre estes diferentes organismos. Devido a esta imunoreatividade cruzada observada entre a apirase de batata e a ATP difosfohidrolase de L. braziliensis, também sugerido por análises in silico, western blots foram desenvolvidos com soros de pacientes com LTA, e os resultados sugeriram que estes epítopos compartilhados são antigênicos para o humano. Os níveis de anticorpos contra a proteína vegetal ou contra o homogeneizado de L. braziliensis foram então analisados em 21 amostras de soros de pacientes com LTA. Aproximadamente 84% deles têm soropositividade de IgG para Lb ou apirase de batata. Correlação positiva foi observada entre os níveis de IgG e os níveis elevados dos subtipos IgG1 e IgG3 contra Lb, ambos com 76% de soropositividade em pacientes com LTA. Interessantemente, aumentos significativos dos níveis de IgG1 (71% de soropositividade) e IgG3 (43% soropositividade) contra a apirase de batata foram também observados. Elevada soropositividade de IgG4 para Lb (62%) e apirase de batata (48%), mas não de IgG2 (<24%), evidenciaram que a ATP difosfohidrolase do parasito é também capaz de estimular este subtipo de IgG. Soropositividade de IgA para Lb ou apirase de batata foi de 62% e 14%, respectivamente, enquanto para IgM ou IgE foi baixa em ambas preparações (<14%). Estes resultados sugerem que os domínios compartilhados entre a apirase de batata e a ATP difosfohidrolase de L. braziliensis contribuem com a elevação de IgG contra antígenos de promastigota, associada a maior produção de IgG1, IgG3 e IgG4. Esta é a primeira demonstração de uma ATP difosfohidrolase ativa em promastigotas de L. braziliensis, de sua imunoreatividade cruzada com anticorpos anti-apirase de batata, e de propriedades antigênicas dos domínios conservados entre elas em pacientes com LTA. Estudos destes domínios compartilhados poderão levar ao desenvolvimento de novas drogas, marcadores moleculares ou vacinas. / ATP diphosphohydrolase was identified in Leishmania braziliensis promastigote, and similar result was found in other Leishmania strain, typified as belonging to the Leishmania braziliensis Complex. The significant hydrolysis of di- or triphosphate nucleosides upon bivalent metal ion stimulus, associated to the inhibition promoted by sodium azide, suggested strongly that ATP diphosphohydrolase activity is present in promastigote preparations. Western blots developed with rabbit polyclonal anti-potato apyrase revealed bands of 48 and 43 kDa, possibly subunits of the same protein. These antibodies immobilized on Protein A-Sepharose depleted about 85% of the ATPase or ADPase activity from C12E9-solubilized ATP diphosphohydrolase. The immunoprecipitated resin-rabbit antibody-antigen complex was separated by SDS-PAGE, and Western blots developed with mouse polyclonal anti-potato apyrase antibodies identify the same 48 kDa band in the two promastigote strains, confirming that parasite and vegetable proteins share epitopes. Furthermore, the coincident molecular weigh suggested that this active ATP diphosphohydrolase corresponds to the putative nucleoside diphosphatase identified in L. braziliensis genome as belonging to NTPDase family, whose amino acid sequence was recently deposited in GeneBank database from NCBI. Evolutionary and closer structural relationships were then demonstrated between potato apyrase and Leishmania braziliensis NDPase by phylogenetic analysis, alignment of amino acid sequences, peptides prediction and molecular modeling. Specific protein domains are suggested to be potentially involved in the immune response. They also seem to be conserved during host and parasites co-evolution. Due to this cross-immunoreactivity between potato apyrase and ATP diphosphohydrolase from Leishmania (V.) braziliensis promastigotes, also suggested by in silico analyses, Western blots were developed with antibody present in sera from patients with American cutaneous leishmaniasis (ACL), and the results suggested that these shared epitopes are antigenic for host human. The antibody levels against the vegetable protein or against Leishmania braziliensis promastigote antigens preparation were then analyzed in 21 serum samples from patients with ACL. About 84% of them have IgG seropositivity for L. braziliensis promastigote antigens (Lb) or potato apyrase. Positive correlation was observed between IgG and the elevated IgG1 or IgG3 subtypes levels against Lb, both subtypes com 76% seropositivity in ACL patients. Interestingly, significant elevations of the IgG1 (71% seropositivity) and IgG3 (43% seropositivity) levels against potato apyrase were also observed. High IgG4 seropositivity for both Lb (62%) and potato apyrase (48%), but not of IgG2 (<24%), evidenced that parasite ATP diphosphohydrolase is also capable to stimulate this IgG subtype. IgA seropositivity for Lb or potato apyrase was 62% and 14%, respectively, while IgM or IgE antibody seropositivity was low for both preparations (<14%). These results suggest that the domains shared between potato apyrase and Leishmania braziliensis ATP diphosphohydrolase contribute with IgG antibody level elevation against promastigote antigens, associated to higher IgG1, IgG3 and IgG4 subtype production. It is the first demonstration of an active ATP diphosphohydrolase in Leishmania braziliensis promastigote form, of its cross-immunoreactivity with anti-potato apyrase antibody, and antigenic properties of conserved domains in ACL patients. Further studies of these shared domains could lead to the development of new drugs targets, molecular markers or implementation of vaccines.
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Fatores relacionados à ocorrência de Leishmaniose Tegumentar Americana no Vale do Ribeira / Factors related to the occurrence American cutaneous leishmaniasis in the Ribeira ValleySilva, Alessandra Ferreira da 18 December 2008 (has links)
Este trabalho é um estudo ecológico descritivo sobre a leishmaniose tegumentar americana (LTA) na região do Vale do Ribeira paulista (composto por 23 municípios), que teve como objetivo correlacionar a incidência da doença com fatores determinantes ambientais e sociais. O trabalho se refere ao período de 1998 a 2006 o qual foi divido em três triênios, o primeiro de 1998 a 2000, o segundo de 2001 a 2003 e o terceiro de 2004 a 2006. Os coeficientes de incidência da LTA foram calculados para estes períodos (Coefmtr1, Coefmtr2 e Coefmtr3) segundo Szklo. Essa divisão de triênios se deu de acordo com as características gráficas dos coeficientes de incidência da LTA no período, que demonstraram haver num primeiro período uma fase endêmica da doença, no segundo período (2001 a 2003) a análise mostra picos de incidência que caracteriza um período epidêmico acentuado. No terceiro período alguns municípios mostram picos de incidência de proporções menores que os observados no período anterior, contudo ainda característicos de fase epidêmica. Os coeficientes de incidência são as variáveis dependentes dos três modelos de regressão realizados. As variáveis independentes foram obtidas de fontes de dados secundários e são de natureza sócio-demográfica, relacionadas as condições climáticas, de natureza político-geográficas e físico-biológicas. Essas variáveis foram separadas em qualitativas e quantitativas e analisadas respectivamente por testes não paramétricos de Mann Whitney e Spearman e selecionou-se para o processo de modelagem múltipla, as variáveis com p<0,20. Houve a necessidade de três modelos diferentes para verificar se os fatores determinantes que levaram as séries a se comportar de maneira diferenciada, seriam os mesmos ou não. O que se percebe é que há uma mudança no padrão do primeiro para os dois outros períodos. O trabalho aponta para fatores sócio-demográficos como determinantes na incidência de LTA, bem como a presença do vetor / This work is an ecological descriptive study on the American cutaneous leishmaniasis (ACL) in the Ribeira Valley region of Sao Paulo (composed of 23 municipalities), which aimed to correlate the incidence of the disease with environmental and social factors. The paper refers to the period 1998 to 2006 which was divided into three years, the first from 1998 to 2000, the second from 2001 to 2003 and the third from 2004 to 2006. The rates of incidence of ACL were calculated for these periods (Coefmtr1, Coefmtr2 and Coefmtr3) Szklo seconds. This division was made in accordance with the graphics characteristics of the coefficients of incidence of ACL in the period, which has shown a period in a first stage of the disease endemic in the second period (2001 to 2003) the peak incidence analysis shows that characterizes a epidemic period strong. In the second period some municipalities show peaks of incidence of proportions lower than those observed in the previous period, yet still features the epidemic stage. The rates of incidence are dependent variables of the three regression models performed. The independent variables were obtained from sources in secondary databases, and are: in nature and socio-demographic, related climatic conditions, a political-geographical and physical and biological. These variables were separated in quality and quantity respectively and analyzed by non-parametric tests for Spearman and Mann Whitney and selected for the process of regress multiple model, the variables with p <0.20. There was a need for three different models to see if the determining factors that led to the series to behave in a different way, would be the same or not. What we understand is that there is a change in the pattern of the first to the other two periods. The study points to socio-demographic factors as determinants in the incidence of ACL and the presence of vector
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Leishmaniose tegumentar americana (LTA) no município de Bandeirantes - Paraná, entre 2000 e 2009 / American Cutaneous Leishmaniasis (ACL) in the city of Bandeirantes - Paraná, between 2000 and 2009.Cruz, Carolina Fordellone Rosa 24 September 2010 (has links)
No estado do Paraná a leishmaniose tegumentar americana (LTA) é endêmica, ocorrendo em 276 dos seus 399 municípios. Dos 12.304 casos da doença registrados no Sul do Brasil de 1980 a 2003, 12.220 (99,3 por cento) ocorreram no Estado do Paraná, sendo notificados 123 casos autóctones no município de Bandeirantes de 2000 a 2009. Objetivos. 1) Descreve a ocorrência da LTA no município de Bandeirantes entre 2000 e 2009, segundo a distribuição espacial, temporal e atributos pessoais; 2) relatar aspectos das formas clínicas e terapêuticos da LTA; identificar: 3) as espécies de Leishmania circulante na população humana e 4) as espécies de flebotomíneos capturadas em ambiente de transmissão da doença no município, de modo a 5) apontar para as espécies vetoras. Métodos. Desenvolveu-se estudo epidemiológico retrospectivo e descritivo de base de dados secundária da LTA e ecológico do grupo dos insetos vetores de Leishmania. Foram utilizados dados das fichas de investigação epidemiológica de LTA notificados à Secretaria Municipal de Saúde de Bandeirantes. Para a identificação da Leishmania sp, foram utilizadas amostras de tecidos das feridas de pacientes com suspeita de LTA e submetidas à reação em cadeia da polimerase (PCR). Para a análise entomológica foram realizadas capturas com armadilhas automáticas luminosas tipo CDC, durante um ano, com periodicidade quinzenal em 11 pontos peridomiciliares da zona urbana, e mensal, em 12 pontos da zona rural, a maioria deles selecionados tendo como referência a presença de casos de LTA. Além destes, foram feitas coletas com armadilha Shannon modificada nas cores branca e preta em um ponto da zona rural, nas três estações do ano (primavera, verão e outono). Resultados. No período de estudo a evolução da doença evidenciou um momento epidêmico em 2007, quando o coeficiente de incidência representou 1,038 casos/1.000 habitantes/ano. A distribuição dos casos no espaço ocorreu de forma heterogênea, com maior concentração na zona urbana. Das 123 notificações de LTA, 76 (61,79 por cento) foram do sexo feminino e 47 (38,21 por cento) do masculino. A faixa etária predominante foi a de 60 anos, em ambos os sexos. Houve predomínio da atividade doméstica (40,65 por cento), da forma clínica cutânea (95,94 por cento) e o Antimonial Pentavalente foi a droga mais utilizada a (98,37 por cento). Leishmania (Viannia) braziliensis foi identificada por meio da PCR em três pacientes de LTA. Na pesquisa do grupo de vetores, nos 24 pontos amostrados com as armadilhas CDC e Shannon, capturou-se um total de 5.652 flebotomíneos (51,66 por cento machos e 48,33 por cento fêmeas) pertencentes a 17 espécies. Nyssomyia neivai predominou (47,36 por cento), seguida de Nyssomyia whitmani (35,77 por cento), Pintomyia pessoai (6,51 por cento), Brumptomyia brumpti (5,54 por cento) e Expapillata firmatoi (2,30 por cento). Na zona urbana foram capturados apenas 22 flebotomíneos pertencentes a seis espécies: Br. brumpti, Evandromyia cortelezzii, Ny. neivai, Ny. whitmani, Pi. pessoai e Sciopemyia sordellii. Na zona rural capturou-se com as CDC, 3.843 flebotomíneos pertencentes a 15 espécies: Ny. neivai, Ny. whitmani, Pi. pessoai, Pi. fischeri, Br. brumpti, Br. cunhai, Br. nitzulescui, Br. sp., Ev. correalimai, Ev. cortelezzii, Ex. firmatoi, Mg. migonei, Mi. ferreirana, Mi. longipennis e Sc. sordellii. A espécie mais abundante foi Ny. neivai, cujo valor do índice de abundância padronizado foi de 0,89, seguida por Ny. whitmani (0,85) e Pi. pessoai (0,69). Os maiores índices de diversidade (H) ocorreram em uma margem de mata (1,45) e chiqueiro (1,42) de um bairro rural, e num outro, a maior equitabilidade entre o número de exemplares coletados em domicílio (0,96) e galinheiro (0,92). No total de espécimes capturados, as médias mensais mais elevadas ocorreram nos meses de março (6,92) e dezembro (6,45), Ny. neivai apresentou a maior média nos meses de dezembro (4,28 insetos/ armadilha) e Ny. whitmani em março (4,34). Na armadilha Shannon modificada foram capturados 1.787 espécimes, destacando-se Ny. neivai (56,86 por cento) e Ny. whitmani (32,79 por cento). A média horária mais elevada para Ny. neivai ocorreu das 23:0024:00 horas e Ny. whitmani entre 20:00 e 21:00 horas. Conclusão. Os dados sócio-econômicos apresentados mostram a LTA afetando predominantemente mulheres, porém crianças também foram atingidas, sugerindo que a transmissão da Leishmania pelos principais prováveis vetores, Ny. neivai e Ny. whitmani, esteja ocorrendo em área domiciliar e peridomiciliar. Áreas estas, cuja atração aos flebotomíneos pode aumentar o risco de aquisição da doença pelos moradores / In the state of Paraná, American cutaneous leishmaniasis (ACL) is endemic, occurring in 276 of its 399 municipalities. Of the 12,304 cases of ACL registered in the Southern Region of Brazil between 1980 and 2003, 12,220 (99.3 per cent) of them occurred in the State of Paraná. In this state, 123 autochthonous cases were registered in the Bandeirantes municipality between 2000 and 2009. Objectives. To describe: 1) the occurrence of ACL in the municipality of Bandeirantes between 2000 and 2009, in terms of its spatial and temporal distribution and the personal characteristics of the population affected and 2) the clinical and therapeutic aspects of ACL; to identify: 3) the Leishmania species infecting the human population and 4) the phlebotomine species captured in the environments where the disease may be transmitted, so as 5) to indicate the possible vectors. Methods. A retrospective and descriptive epidemiological study was undertaken based on a secondary database together with an identification of the Leishmania sp. and ecological study of the vectors. The secondary data used were derived from the ACL epidemiological investigation cards of the Municipal Health Service of Bandeirantes. For the identification of the Leishmania spp., samples of tissue taken from the wounds of suspected ACL patients were submitted to the polymerase chain reaction (PCR). For the entomological analysis, captures with automatic light traps (CDC type) were carried out during one year: fortnightly at 11 urban peridomiciliary sites and monthly at three sites, including domestic animal shelters, peridomiciles and forest edge, in each of four rural localities. Cases of ACL had occurred at the majority of the urban sites and rural localities. Captures were also undertaken (one in each season, spring, summer and fall) with modified black and white Shannon traps at one of the rural sites. Results. The progression of the disease reached an epidemic peak in 2007, when the incidence coefficient attained 1.038 cases/1,000 inhabitants per year. The spatial distribution of the cases presented its highest concentration in the urban zone. Of the 123 notifications of ACL, 76 (61.79 per cent) occurred in females and 47 (38.21 per cent) in males. The age group 60 years predominated in both sexes as also did domestic activity (40.65 per cent). The cutaneous form accounted for 95.94 per cent of the cases, the drug most utilized being Antimony Pentavalent (98.37 per cent). Leishmania (Viannia) braziliensis was identified by PCR in three patients. At the 24 sites sampled with CDC and Shannon traps, 5,652 sand flies (51.66 per cent males and 48.33 per cent females) belonging to 17 species were captured, with the predominance of Nyssomyia neivai (47.36 per cent), Nyssomyia whitmani (35.77 per cent), Pintomyia pessoai (6.51 per cent), Brumptomyia brumpti (5.54 per cent) and Expapillata firmatoi (2.30 per cent). Only 22 specimens belonging to 6 species (Br. brumpti, Ev. cortelezzii, Ny. neivai, Ny. whitmani, Pi. pessoai, Sciopemyia sordellii) were captured in the urban zone. In the rural zone 3,843 sand flies belonging to 15 species (Ny. neivai, Ny. whitmani, Pi. pessoai, Pi. fischeri, Br. brumpti, Br. cunhai, Br. nitzulescui, Br, sp., Ev. correalimai, Ev. cortelezzii, Ex. firmatoi, Migonemyia migonei, Micropygomyia ferreirana, Mi. longipennis and Sc. sordellii) were captured, with CDC. Ny. neivai presented the highest standardized abundance index (0.89), followed by Ny. whitmani (0.85) and Pi. pessoai (0.69). The highest diversity indices (H) observed were on the forest edge (1.45), and in a pigsty (1.42). As regards evenness, there was a greater balance between the number collected in a house (0.96) and poultry coop (0.92). Considering all the specimens captured, the highest monthly average occurred in March (6.92) and December (6.45), Ny. neivai showed the highest average in December (4.28 specimens/trap) and Ny. whitmani in March (4.34). With the modified Shannon traps, 1,787 specimens were captured, Ny. neivai (56.86 per cent) and Ny. whitmani (32.79 per cent) predominating. The highest hourly average of Ny. neivai occurred between 23.00 and 24.00 hours and that of Ny. whitmani between 20.00 and 21.00 hours. Conclusions. The socio-economic data presented show that ACL affects women predominantly; however, infants were also affected, suggesting that the transmission of Leishmania by the principal probable vectors (Ny. neivai and Ny. whitmani) is occurring in domiciliary and peridomiciliary environments, whose attractiveness to sand flies may increase the risk of the transmission of the disease to the residents
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