Submitted by MARIA EDUARDA CHIARADIA FURQUIM null (mecfurquim@yahoo.com.br) on 2016-12-12T22:31:12Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Maria Eduarda Chiaradia Furquim 2016.pdf: 2147185 bytes, checksum: 9cbd94cd959a4435ddb99f33983dbb76 (MD5) / Approved for entry into archive by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br) on 2016-12-15T15:41:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 furquim_mec_me_jabo.pdf: 2147185 bytes, checksum: 9cbd94cd959a4435ddb99f33983dbb76 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-15T15:41:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 furquim_mec_me_jabo.pdf: 2147185 bytes, checksum: 9cbd94cd959a4435ddb99f33983dbb76 (MD5) Previous issue date: 2016-11-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Com o intuito avaliar a frequência de aglutinas anti-Leptospira dentre as amostras analisadas no Laboratório de Brucelose e Leptospirose da Unesp, Câmpus Jaboticabal, realizou- se uma investigação retrospectiva dos resultados de exames sorológicos para diagnóstico de leptospirose entre os anos de 2007 e 2015. Neste período foram recebidas 24.483 amostras bovinas, 1.855 amostras equinas, 819 amostras caninas, 532 amostras ovinas, 230 amostras caprinas e 123 amostras suínas. As amostras bovinas provinham de 21 estados brasileiros e a frequência de reagentes foi de 35,30% (IC 95%: 34,70% - 35,90%), sendo o sorogrupo Sejroe o mais relevante. Das amostras caninas, a maioria foi originaria do Estado de São Paulo e a frequência de amostras reagentes foi de 23,93% (IC 95%: 21,01% - 26,85%), sendo o sorogrupo Canicola o mais relevante. Nos equinos, a frequência de amostras reagentes encontrada foi de 46,95% (IC 95%: 44,68% - 49,23%), sendo o sorogrupo Icterohaemorrhagiae o mais importante nesta espécie. A frequência de reagentes encontrada nas amostras das espécies ovina, caprina e suína foi 7,32% (IC 95%: 5,12% - 9,55%), 1,30% (IC 95%: 0,0044% - 3,764%) e 6,03% (IC 95%: 1,70% - 10,37%), respectivamente, e o sorogrupo de maior ocorrência nesses animais foi Icterohaemorrhagiae. Tais resultados permitem confirmar o caráter endêmico da leptospirose em território brasileiro, bem como evidenciar a importância dos hospedeiros de manutenção do agente na disseminação da doença. / In order to evaluate the frequency of anti-Leptospira agglutinins among the samples analyzed in the Leptospirosis and Brucellosis Laboratory, Unesp, Jaboticabal Campus, a retrospective investigation of the results of serological tests for leptospirosis between the years 2007 and 2015 was performed. During this period, 24,483 bovine samples, 1,855 equine samples, 819 canine samples, 532 sheep samples, 230 goats samples and 123 swine samples were received. Bovine samples came from 21 Brazilian states and the frequency of reactors was 35.30% (95% CI: 34.70% - 35.90%) and serogroup Sejroe was the most relevant. Of canine samples, most were originally from the state of São Paulo and the frequency of reacting samples was 23.93% (95% CI: 21.01% - 26.85%), the serogroup Canicola was the most relevant. In horses, the frequency of reagent samples was found to be 46.95% (95% CI: 44.68% - 49.23%), the serogroup Icterohaemorrhagiae was the most important in this species. The frequency of reactors among of sheep, goats and swine samples was 7.32% (95% CI: 5.12% - 9.55%), 1.30% (95% CI: 0.0044% - 3.764%) and 6.03% (95% CI: 1.70% - 10.37%), respectively, and the serogroup most frequent in these animals was Icterohaemorrhagiae. These results confirm the endemicity of leptospirosis in Brazil, as well as highlight the importance of the agent maintenance hosts in the dissemination of the disease.

Submitted by RAFAEL MASSA null (rmassavet@yahoo.com.br) on 2017-01-25T17:36:12Z No. of bitstreams: 1 TESE versão final.pdf: 300203 bytes, checksum: 56039d51bf4b813ec825d1d9f0da7f3e (MD5) / Rejected by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo a orientação abaixo: O arquivo submetido não contém o certificado de aprovação. Corrija esta informação e realize uma nova submissão com o arquivo correto. Agradecemos a compreensão. on 2017-01-27T13:23:12Z (GMT) / Submitted by RAFAEL MASSA null (rmassavet@yahoo.com.br) on 2017-01-27T16:30:18Z No. of bitstreams: 1 Tese_Rafael_Massa.pdf: 774602 bytes, checksum: 777b45d4c1d3d2fb5b52fd11f14af8ad (MD5) / Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-01-30T16:06:29Z (GMT) No. of bitstreams: 1 massa_r_dr_jabo.pdf: 774602 bytes, checksum: 777b45d4c1d3d2fb5b52fd11f14af8ad (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-30T16:06:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 massa_r_dr_jabo.pdf: 774602 bytes, checksum: 777b45d4c1d3d2fb5b52fd11f14af8ad (MD5) Previous issue date: 2017-01-17 / Com o objetivo de analisar as diferentes formas de interpretação dos resultados em pesquisas epidemiológicas com Leptospira spp., em quatro espécies de hospedeiros, as concordâncias entre os resultados da soroaglutinação microscópica (SAM) contra 24 sorovariedades foram testadas por meio do coeficiente Kappa. Os resultados obtidos com o cálculo clássico da soroprevalência, o método da sorovariedade mais provável (SMP) com 24 e oito antígenos e três variações do SMP foram comparados por meio da intersecção entre os intervalos de confiança de 95%. As concordâncias entre sorovariedades nos resultados da SAM indicam que a maioria das coaglutinações ocorre dentro do esperado pelo acaso e que não é possível atribuí-las apenas a reações cruzadas. O SMP resultou em soroprevalências menores que as obtidas pelo método clássico. Quanto mais antígenos são utilizados na SAM, menores serão a soroprevalências para cada sorovariedade, demonstrando que a bateria de antígenos interfere nos resultados. As diferentes formas de calcular o resultado do SMP mostraram ser coeficientes diferentes, que podem confundir os leitores, caso não sejam bem definidos nos trabalhos. Conclui-se que o método clássico de cálculo da soroprevalência seria o mais indicado, respeitando-se as limitações da SAM na conclusão das pesquisas. / Aiming to analyze the different ways of interpreting the results of epidemiological research with Leptospira spp. in four host species, the agreement between the results in the microscopic agglutination test (MAT) against 24 serovars was tested by the Kappa coefficient. The results with the classic seroprevalence method, the most likely serovar method (SMP) with 24 and eight antigens and three variations of the SMP were compared by the intersection of the 95% confidence intervals. Agreements between serovars in the results of MAT indicate that most co-agglutinations occur randonly, and cross-reactions can not assign as the only cause of them. The SMP resulted in lower seroprevalences than those obtained by the classical method. The more antigens are used in MAT, lower the seroprevalences for each serovar, demonstrating that the antigen battery interferes with the results. The different ways of calculating the result of the SMP proved to be different coefficients, which may confuse readers, if they are not well defined in the research. It was concluded that the classic seroprevalence would be the most appropriate method of calculation, respecting the limitations of the MAT in the research's conclusions.

Orientador: Luis Antonio Mathias / Banca: Luiz Augusto do Amaral / Banca: Maria da Gloria Buzinaro / Banca: Fernanda Senter Magajervski / Banca: Raphaella Barbosa Meirelles Bartoli / Resumo: O estudo foi desenvolvido em uma fazenda localizada em área de mata Atlântica e de floresta artificial, no Município de Telêmaco Borba, Estado do Paraná. Teve por objetivo verificar, por meio de armadilhas fotográficas, quais espécies de carnívoros selvagens ocorrem na região, caracterizar espacialmente a área de vida das espécies-alvo, verificar a inter-relação entre os carnívoros selvagens e os domésticos na área de estudo, investigar a ocorrência de anticorpos contra Brucella, Leishmania, Leptospira, Neospora e Toxoplasma em carnívoros selvagens e domésticos na área de estudo, verificar o conhecimento dos moradores locais a respeito das infecções estudadas e avaliar o efeito de campanha educativa sobre esse conhecimento. Foram examinados 18 cães de funcionários da fazenda e foram capturados três exemplares de lobo-guará (Chrysocyon brachyurus) e quatro exemplares de jaguatirica (Leopardus pardalis), dos quais foi colhido soro sanguíneo, e nos animais selvagens foi colocado rádio-colar com GPS. Foram realizados testes sorológicos para pesquisa de anticorpos contra Brucella abortus, B. canis, Leishmania chagasi, Leptospira spp., Neospora caninum e Toxoplasma gondii. Foram identificadas na área 14 espécies de carnívoros selvagens, pertencentes a 12 gêneros e quatro famílias. Foi possível recuperar o colar de apenas um dos animais (jaguatirica), cuja área de vida teve um Mínimo Polígono Convexo (MPC) de 25 mil hectares (Ha), aproximadamente. Os testes sorológicos mostraram que foram observados anticorpos contra: B. abortus, em apenas um dos lobos-guarás; Leptospira, em um dos cães, um dos lobos-guarás e três das jaguatiricas; Neospora, em dois dos cães, dois dos lobos-guarás e duas das jaguatiricas; Toxoplasma, em oito dos cães, todos os três lobos-guarás e todas as quatro jaguatiricas. Nenhum dos animais apresentou anticorpos contra B. canis nem contra Leishmania. As avaliações realizadas... / Abstract: The investigation was carried out in farm located in an area of Atlantic and artificial forest in the municipality of Telêmaco Borba, State of Paraná, Brazil. The aims of the study were: to verify, through photografical traps, the species of wild carnivores in the region; to characterize spatially the area of life of the target species; to verify the relationships between wild and domestic carnivora in the study area; to investigate the occurrence of antibodies against Brucella, Leishmania, Leptospira, Neospora and Toxoplasma in domestic dogs and wild carnivores; to verify the knowledege of people living in the farm about the infections studied and to verify the effect of educational instruction on the knowledge of these people. Blood samples were obtained from 18 domestic dogs belonging to the farm workers, from three freeranging maned wolves (Chrysocyon brachyurus) and four free-ranging ocelots (Leopardus pardalis) captured in the area. A GPS radio transmitter housed in a collar was attached to each of the wild animals. Serological tests to Brucella abortus, B. canis, Leishmania chagasi, Leptospira spp., Neospora caninum, and Toxoplasma gondii antigens were performed. Fourteen wild carnivore species classified in twelve genera and in four families were found in the area. Only one GPS transmitter, attached to one ocelot, was found, and revealed that this animal had an area of life measuring about 25 thousand hectares. Serological tests showed antibody against B. abortus only in one maned wolf, against Leptospira in one dog, one maned wolf and three ocelots, against Neospora in two dogs, two maned wolves and two ocelots, against Toxoplasma in eigth dogs, all the three maned wolves and all the four ocelots. None of the animals had antibody titres to B. canis nor to Leishmania. The workers had initially low knowledge about the diseases, but their knowledge significantly improved after the instructions. Results of the study led to ... / Doutor

Orientador: Antonio Carlos Paes / Banca: Helio Langoni / Banca: Rogério Giuffrida / Resumo: A toxoplasmose e a leptospirose são doenças zoonóticas que acometem animais domésticos e selvagens. Inquéritos soroepidemiológicos em quatis (Nasua nasua) são importantes para conhecimento, vigilância e controle de doenças. O objetivo deste trabalho foi verificar a soroprevalência de anticorpos anti- Leptospira spp. e anti Toxoplasma gondii, em 108 amostras de soro de quatis mantidos em vida livre, provenientes do Parque Ecológico do Tietê, São Paulo, Brasil. Para a pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii foi utilizado o teste de aglutinação modificada (MAT) verificando soroprevalência de 18 animais (16,67%) positivos e 90 animais (83,33%) negativos (IC 95%= 0,09- 0,23). Dos 18 animais positivos a frequência dos títulos apresentados foram: 25 (n=8; 44,44%), 50 (n=3; 16,67%), 100 (n=3; 16,67%), 200 (n=1; 5,56%) e 400 (n=3; 16,67%). Para pesquisa de anticorpos anti- Leptospira spp. foi utilizado o teste de Soroaglutinação Microscópica (SAM), sendo 96 animais negativos (88,89%) e 12 animais positivos, correspondente a soroprevalência de 11,11% (IC 95%= 6,0- 19), e os sorovares reagentes encontrados foram Butembo (n=2; 16,67%); Whitcombi (n=1; 8,33%); Sentot (n=1; 8,33%); Gryppotyphosa (n=1; 8,33%); Panama (n=1; 8,33%); Hardjo bovis (n=1; 8,33%); Hardjo ctg (n=1; 8,33%); Hardjo prajitno (n=4; 33,33%) e a frequência dos títulos apresentados foi: 100 (n=5; 41,67%); 200 (n=5; 41,67%); 400 (n=2; 16,67%). Portanto o presente estudo demonstra a importância da avaliação sorológica anti- Toxoplasma gondii e anti- Leptospira spp. em quatis de vida livre, o que avalia os aspectos epidemiológicos relacionados a estas zoonoses e riscos para a saúde pública, pois mantém contato com humanos / Abstract: The toxoplasmosis and leptospirosis are zoonotic diseases that affect domestic and wild animals. Seroepidemiological surveys in coatis (Nasua nasua) is important for information, surveillance and disease control. The objective of this study was to determine the seroprevalence of antibody against Leptospira spp. and Toxoplasma gondii in 108 samples of coatis serum maintained in the wild, from the Ecological Park of Tietê, São Paulo, Brazil. For research of anti-Toxoplasma gondii antibodies we used the modified agglutination test (MAT) and 18 animals (16.67%) were soropositive and 90 animals (83.33%) negative (95% CI = 0,09- 0.23). Of the 18 positive animals positive the frequency of the antibodies were: 25 (n = 8; 44.44%), 50 (n = 3; 16.67%), 100 (n = 3; 16.67%), 200 (n = 1; 5.56%) and 400 (n = 3; 16.67%). To search the anti-Leptospira spp antibodies. It was used the Microscopic Agglutination Test test (MAT), and 96 were negative 88.89%) and 12 positive (11,11%) (95% CI = 6,0- 19). The serovars reagents Butembo (n = 2; 16.67%); Whitcombi (n = 1; 8.33%); Sentot (n = 1; 8.33%); Gryppotyphosa (n = 1; 8.33%); Panama (n = 1; 8.33%); Hardjo bovis (n = 1; 8.33%); Hardjo ctg (n = 1; 8.33%); Hardjo prajitno (n = 4; 33.33%). The frequency of the presented titles were 100 (n = 5; 41.67%); 200 (n = 5; 41.67%); 400 (n = 2; 16.67%). Therefore, this study demonstrates the importance of evaluating the serological response to anti- Toxoplasma gondii and for anti-Leptospira spp. of captive animals to assess epidemiological aspects related to these zoonoses and risks to public health because it maintains contact with humans / Mestre

Orientador: Luís Antonio Mathias / Resumo: Com o intuito avaliar a frequência de aglutinas anti-Leptospira dentre as amostras analisadas no Laboratório de Brucelose e Leptospirose da Unesp, Câmpus Jaboticabal, realizou- se uma investigação retrospectiva dos resultados de exames sorológicos para diagnóstico de leptospirose entre os anos de 2007 e 2015. Neste período foram recebidas 24.483 amostras bovinas, 1.855 amostras equinas, 819 amostras caninas, 532 amostras ovinas, 230 amostras caprinas e 123 amostras suínas. As amostras bovinas provinham de 21 estados brasileiros e a frequência de reagentes foi de 35,30% (IC 95%: 34,70% - 35,90%), sendo o sorogrupo Sejroe o mais relevante. Das amostras caninas, a maioria foi originaria do Estado de São Paulo e a frequência de amostras reagentes foi de 23,93% (IC 95%: 21,01% - 26,85%), sendo o sorogrupo Canicola o mais relevante. Nos equinos, a frequência de amostras reagentes encontrada foi de 46,95% (IC 95%: 44,68% - 49,23%), sendo o sorogrupo Icterohaemorrhagiae o mais importante nesta espécie. A frequência de reagentes encontrada nas amostras das espécies ovina, caprina e suína foi 7,32% (IC 95%: 5,12% - 9,55%), 1,30% (IC 95%: 0,0044% - 3,764%) e 6,03% (IC 95%: 1,70% - 10,37%), respectivamente, e o sorogrupo de maior ocorrência nesses animais foi Icterohaemorrhagiae. Tais resultados permitem confirmar o caráter endêmico da leptospirose em território brasileiro, bem como evidenciar a importância dos hospedeiros de manutenção do agente na disseminação da doença. / Mestre

Orientador: Raul José da Silva Girio / Banca: Maria da Glória Buzzinaro / Banca: Luiz Francisco Zafalon / Banca: Samir Issa Samara / Banca: João Barbudo Filho / Resumo: A leptospirose é uma zoonose de distribuição mundial, assumindo um forte significado social, econômico e cultural. A enfermidade acomete, praticamente, todos os animais domésticos, selvagens e o ser humano, bem como a maioria das espécies silvestres, entre os quais destacam-se os carnívoros, roedores, primatas e marsupiais, que podem tornar-se portadores e contribuírem para a disseminação do microrganismo na natureza. O presente estudo foi realizado na Mata de Santa Teresa, Ribeirão Preto, SP, onde foi realizada a captura de Cebus apella nigritus de vida livre. Foram colhidos amostras de sangue para a realização da soroaglutinação microscópica (SAM), estudo da bioquímica sérica e teste da reação em cadeia da polimerase na urina dos animais. Foram capturados 55 animais e foi observado a soro-reação em 33 animais (60%). Os sorovares encontrados foram Shermani (11/55, 33,33%), Andamana (8/33. 24,24%), Pyrogenes (4/33, 12,12%), Grippotyphosa (2/33; 6,06%), Australis, Canicola, Castelonis, Copenhageni, Hardjo, Hebdomadis, Pomona e Wolffi (1/33, 3,03%), respectivamente. Foi colhido oito amostras de urina dos animais (14,54%) e a análise das amostras de urina pela PCR foi negativa, não demonstrando excreção renal da Leptospira spp. A análise do soro nas provas de bioquímica sérica não foi elucidativa, pois alguns animais apresentaram alto título de anticorpos e níveis normais da bioquímica sérica. / Abstract: Leptospirosis is a worldwide zoonosis, being social, economic and culture significance. The disease occurs in all domestic animals, wild animals and man, as well as, in majority wildlife species, mainly carnivores, rodents, not human primates and marsupials and they are able to become reservoirs, disseminating the bacteria in the nature. This study were in Mata de Santa Teresa, Ribeirão Preto, SP, where were collected serum of wildlife Cebus paella nigritus and processed by Microscopic Agglutination test (MAT), analysis of serum biochemistry and polymerase chain reaction (PCR) in urine of these animals. Were captured 55 primates (C. apella) and the results showed 33 animals (60%) reactive serum. The serovars: Shermani (11/55, 33,33%), Andamana (8/33. 24,24%), Pyrogenes (4/33, 12,12%), Grippotyphosa (2/33; 6,06%), Australis, Canicola, Castelonis, Copenhageni, Hardjo, Hebdomadis, Pomona and Wolffi (1/33, 3,03%) respectively. Were collected 8 urine samples from primates (14,54%) and analysis from PCR were negative, not showed kidney excretion of Leptospira spp. The serum analyses were not elucidative, because some animals showed high titres antibody levels and normal levels of serum biochemistry. / Doutor

Orientador: Raul José Silva Girio / Banca: Luís Antonio Mathias / Banca: José Rafael Modolo / Resumo: Conhecendo-se a predileção das leptospiras pelo aparelho urogenital, e a crescente utilização de técnicas de reprodução assistida na espécie canina, o presente trabalho objetivou pesquisar a presença e a ação da Leptospira no sêmen e testículo de cães. Foram utilizados 32 animais, dos quais 20 foram inoculados com uma cepa patogênica de Leptospira interrogans sorovar Canicola e 12 não receberam inóculo algum, sendo considerados animais-controle. Assim, os 32 animais experimentais foram reunidos em quatro grupos de estudo encerrando cinco cães inoculados e três cães-controle por grupo. Os animais do grupo um foram sacrificados após sete dias da inoculação, os animais do grupo dois sacrificados 15 dias após a inoculação, os animais do grupo três sacrificados após 30 dias de incubação e os animais do grupo quatro foram sacrificados após 45 dias da inoculação da cepa patogênica. Após o sacrifício, colheram-se fragmentos de testículo para pesquisa de Leptospira no parênquima testicular pela técnica de coloração de Levaditi. Nos dias zero (dia da inoculação), três, cinco, sete, dez, e a partir daí de cinco em cinco dias após a inoculação da cepa patogênica de Leptospira, foram colhidas amostras de sangue e sêmen. No sêmen, foram realizados exames andrológicos e PCR, no sangue, além da pesquisa de anticorpos pela técnica de soroaglutinação microscópica (SAM), foram verificados os níveis hormonais de testosterona. Dos 20 cães infectados, apenas um não apresentou título detectável na prova de SAM no período analisado. No grupo dois, foi verificada uma queda significativa nos valores do vigor e da concentração espermática, nos cães infectados, durante grande parte do período de estudo...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Considering the Leptospira predilection for the urogenital system and the increasing of utilization of assisted reproduction in dogs, this work aimed to search the presence and the role of Leptospira in semen and testicles from dogs. From 32 animals, 20 were inoculated with a pathogenic Leptospira interrogans serovar Canicola strain and 12 received no inoculum, acting as control animals. The 32 experimental animals were distributed in four groups with five inoculated and three control dogs per group. Animals from group one were sacrificed seven days after inoculation, animals from group two were sacrificed 15 days after inoculation, animals from group three were sacrificed 30 days after inoculation, and animals from group four were sacrificed 45 days after inoculation. Testicle fragments were collected after dog sacrifices for searching Leptospira in testicle parenchyma using Levaditi stain technique. Blood and semen samples were collected at day zero (inoculation day), three, five, seven, ten and then by each five days after pathogenic Leptospira strain inoculation. Andrologic exams and PCR were performed with semen. Blood samples were used to detect antibodies using microscopic agglutination test (MAT) and verify testosterone levels. Only one of the 20 infected dogs had no detectable titre using MAT. Spermatic vigor and spermatic concentration had a significant decrease in group two during most part of the study. In three of nine days of semen collection, only spermatic concentrations were significantly lower in infected animals from group three. In this study it was possible to detect Leptospira DNA in semen samples from 16 of the 20 dogs inoculated with L. interrogans serovar Canicola strain. Thereby it was not possible to correlate the decrease of testosterone serum levels in infected animals with those detected in control animals...(Complete abstract, click electronic access below) / Mestre

Orientador: Hélio Langoni / Banca: Virgínia Bodelão Richini-Pereira / Banca: Carlos Roberto Teixeira / Banca: José Carlos de Figueiredo Pantoja / Banca: Jean Carlos Ramos da Silva / Resumo: A leptospirose é uma zoonose de grande importância em animais e humanos. Devido à falta de estudos em animais silvestres, o presente estudo teve como objetivo investigar a epidemiologia da leptospirose em mamíferos silvestres de vida livre da região de Botucatu, SP. Foram colhidas amostras de sangue e urina de 309 animais, distribuídos em 16 espécies. O diagnóstico de leptospirose foi realizado pelas técnicas de Soroaglutinação Microscópica e PCR em tempo real (qPCR). Foram analisadas possíveis associações entre a positividade no diagnóstico, alterações clínicas e local de origem dos animais. Foram positivos 64 animais (20,7%), com maiores prevalências nas seguintes espécies: furão (83,3%), cachorro do mato (75%), lobo guará (66,6%) e quati (30,3%). O sorogrupo Semaranga foi o mais frequente, principalmente entre os gambás. Não foi observada uma associação positiva entre o diagnóstico de leptospirose e alterações clínicas. Gambás provenientes da mata apresentaram maiores chances de infecção em relação aos localizados na área urbana (Odds Ratio = 3,87). Os resultados permitiram concluir que uma grande diversidade de mamíferos silvestres apresentou infecção por Leptospira spp. na região de Botucatu; existem diferenças significativas na prevalência de infecção entre espécies, com maior positividade em indivíduos das famílias Canidae e Mustelidae; a leptospirose apresentou baixa morbidade nos animais estudados; os gambás apresentaram uma alta prevalência de infecção por leptospiras saprófitas; e fatores ambientais estão envolvidos na maior prevalência de infecção em gambás provenientes da mata em relação aos gambás localizados na área urbana / Abstract: Leptospirosis is considered a zoonoses of great importance in animals and humans. Due to the lack of studies in wild animals, the present study aimed to investigate the epidemiology of leptospirosis in free-ranging wild mammals from Botucatu, SP. Blood and urine samples were collected from 309 animals, distributes in 16 species. Leptospirosis diagnosis was performed by Microscopic Agglutination Test (MAT) and Real Time PCR (qPCR). Correlations between positivity, clinical disorders and origin of animals were assessed. Sixty-four (20.7%) animals were positive, with higher prevalence among the following species: lesser grisson (83.3%), crab-eating fox (75%), maned wolf (66.6%) and coatis (30.3%). Semaranga serogroup was the most prevalent, especially in opossums. No positive association was observed between diagnosis and clinical disorders. Opossums from forests presented higher chances of infection than those from urban areas (Odds Ratio = 3.87). The results demonstrated the high diversity of wild mammals infected by Leptospira spp. in Botucatu; there are significant differences in the prevalence of infection between species, with higher positivity in Canidae and Mustelidae families; leptospirosis presented low morbidity in the studied animals; opossums presented high prevalence of infection by saprophyte leptospires; and environmental features are involved in the higher prevalence of infection in opossums from the forest than those from urban areas / Doutor

Foi investigada a existência de proteção cruzada entre bacterinas bivalentes formuladas com um de três representantes do Sorogrupo Sejroe: hardjo (bacterina A), wolffi (bacterina B) e guaricura (bacterina C), e uma estirpe do sorovar pomona, empregada por ser patogênica para hamsters (Mesocricetus auratus) e possibilitar a realização do teste de potência com desafio. Os ensaios foram efetuados em hamsters machos, comparando-se os níveis de anticorpos aglutinantes e neutralizantes, respectivamente obtidos nos testes de soroaglutinação microscópica (SAM) e inibição de leptospiras in vitro (ICL). Os animais receberam duas doses de vacinas via subcutânea; aos dez dias da segunda dose, foram inoculados com culturas não inativadas dos respectivos sorovares do Sorogrupo Sejroe. Aos 21 dias pós-infecção (d.p.i.), os animais foram sangrados, os soros (n=8) foram agrupados em pools e submetidos aos testes de SAM e ICL. O teste de potência com desafio para o sorovar pomona foi adaptado do protocolo preconizado pelo United States Department of Agriculture, mas as vacinas não foram diluídas e o esquema de imunização empregou duas aplicações de 1,0mL pela via subcutânea em intervalo de dez dias; o desafio foi efetuado aos dez dias da segunda aplicação; os óbitos por leptospirose foram registrados e, aos 21 d.p.i., os sobreviventes foram sacrificados e a condição de portadores renais foi investigada através de cultivos de tecido renal para isolamento de leptospiras. No teste de potência com o sorovar pomona, o número de doses infectantes empregado para desafio (100) situou-se dentro da faixa preconizada (10 a 100); respectivamente para as bacterinas A, B e C, as proporções de mortes por leptospirose entre os animais vacinados foram de 1/10, 0/10 e 3/10, e as de portadores renais de leptospiras entre os sobreviventes foram 2/9, 1/10 e 2/7. Os resultados do teste SAM revelaram que a bacterina A induziu reações para os sorovares hardjo e wolffi; a bacterina B, para hardjo, wolffi e guaricura, e a bacterina C, apenas para a guaricura, e do teste de ICL, que animais vacinados com as bacterinas B ou C apresentaram proteção para hardjo, wolffi e guaricura; entretanto, a bacterina A conferiu proteção apenas para wolffi. Apesar das variações no poder imunogênico segundo a estirpe de leptospira empregada para a produção das bacterinas, houve proteção cruzada entre os sorovares hardjo, wolffi e guaricura. / The existence of cross-protection among bivalent bacterins, produced with one of three leptospires belonging to Serogroup Sejroe: hardjo (bacterin A), wolffi (bacterin B) and guaricura (bacterin C), and a strain of serovar pomona (included because of its pathogenicity to hamsters and the possibility of performing potency assay with challenge), was investigated in male hamsters (Mesocricetus auratus) by comparison of agglutinating and neutralizing antibodies titers, respectively measured by microscopic agglutination (MAT) and in vitro growth inhibition (GIT) tests. All animals received two doses of bacterins by subcutaneous route; after ten days from the second dose, they were inoculated with non-inactivated cultures of respective serovars of Serogroup Sejroe. At 21 post-challenge day (p.c.d.), all animals were bled and their sera (n=8) were joined in pools and tested by MAT and GIT. The potency assay with challenge performed only with serovar pomona was modified from protocol of USDA, but vaccines were not diluted and the immunization schedule employed two 1.0 mL vaccine doses by subcutaneous route with 10?day interval; the challenge was performed after ten days from the second dose; the number of deaths due to leptospirosis was registered; at 21 p.c.d., the survivors were sacrificed and their renal carrier state was investigated by culture of renal tissue for leptospires isolation. In the potency assay with serovar pomona, the number of infectious doses employed for challenge (100 infective units) was in accordance with the recommended range (10-1,000 infective units); respectively to bacterins A, B and C, proportions of deaths due to leptospirosis among vaccinated animals were 1/10, 0/10 and 3/10, and proportions of leptospires renal carrier among survivors were 2/9, 1/10 and 2/7. Results of MAT showed that bacterin A induced reactions against serovars hardjo and wolffi; bacterin B, against hardjo, wolffi and guaricura, and bacterin C, against guaricura; results of GIT revealed that vaccinated animals with bacterins B or C presented protection against serovar hardjo, wolffi and guaricura; however, bacterin A induced protection only against wolffi. A cross?protection was observed among serovars hardjo, wolffi and guaricura, although variations exist in the immunogenic capacity according to the strain of leptospires used for the bacterins production.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-06T13:45:04Z No. of bitstreams: 1 Erika Fernanda Torres Samico Fernandes Cavalcanti.pdf: 636532 bytes, checksum: 2f815e6a83dda45939bd553b7269f4f7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-06T13:45:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Erika Fernanda Torres Samico Fernandes Cavalcanti.pdf: 636532 bytes, checksum: 2f815e6a83dda45939bd553b7269f4f7 (MD5) Previous issue date: 2011-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The objective of this work to study the occurrence of anti-Toxoplasma gondii (T. gondii) and Leptospira spp. in pig killed in the Micro Valley Ipojuca Wasteland of Pernambuco We collected blood samples from 305 animals from 11 municipalities. Sera were submitted to the Immunofluorescence Assay (IFA) for detection of anti-T. gondii, by adopting a cutoff of 1:64. In animals positive for IFA was used the PCR technique to detect the DNA of T. gondii in fragments of heart. To search for anti Leptospira spp. used the microscopic agglutination test (MAT). Among all samples, we observed that thirty-eight 38/305 (12.46%) were positive for anti-T. gondii and 267/305 (87.54%) were negative, distributed in 11 cities. Of the animals positive serology, 21/38 (55.26%) were also positive in PCR. Results related to Leptospira spp. showed that 78/305 (25.57%) positive samples and 227/305 (74.42%) negative, distributed in 11 municipalities. The most frequent serovars were Icterohaemorrhagiae, Copenhageni, Djasiman and with frequencies of 55.12%, 17.94% and 6.41% respectively. It was concluded that pigs were beaten in the region exposed to infection by these agents and raises a discussion about the health risks of food handlers and consumers of carcasses and the need to minimize them through the implementation of surveillance programs and corrective actions in region studied. / Objetivou-se com este trabalho estudar a ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii (T. gondii) e Leptospira spp. em suínos abatidos na Microrregião do Vale do Ipojuca, Agreste do Estado de Pernambuco. Foram coletadas 305 amostras de sangue de animais provenientes de 11 municípios. Os soros foram submetidos à Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para pesquisa de anticorpos anti-T. gondii, adotando-se ponto de corte de 1:64. Nos animais positivos para RIFI foi utilizada a técnica da PCR para detectar o DNA do T. gondii em fragmentos de coração. Para pesquisa de anticorpos anti-Leptospira spp. utilizou-se a técnica de Soroaglutinação Microscópica (SAM). Das amostras analisadas, observou-se que 38/305 (12,46%) foram positivas para anticorpos anti-T. gondii e 267/305 (87,54%) foram negativas, distribuídas em 11 cidades. Dos animais positivos na sorologia, 21/38 (55,26%) também foram positivos na PCR. Os resultados referentes à infecção por Leptospira spp. demonstraram que 78/305 (25,57%) amostras foram positivas e 227/305 (74,42%) negativas, distribuídas nos 11 municípios estudados. Os sorovares mais frequentes foram Icterohaemorrhagiae, Copenhageni e Djasiman com frequências de 55,12%, 17,94% e 6,41%, respectivamente. Conclui-se que os suínos abatidos nessa região foram expostos à infecção por esses agentes e levanta uma discussão sobre os riscos à saúde dos manipuladores das carcaças e dos consumidores e a necessidade de minimizá-los por meio da implantação de programas de vigilância e ações corretivas na região estudada.