OBJECTIVE: Low level light therapy (LLLT) is being widely used in wound healing and pain relief, and its use is expected to be expanded rapidly to treatment of other disorders as well in a foreseeable future. However, before its expansion, the fear that LLLT could initiate or promote metastasis must be addressed thoroughly. As an initial effort towards this end, the current study evaluates the safety of LLLT in vitro using two different human cancer cell lines (Michigan Cancer Foundation-7 (MCF-7) and Jurkat E6-1) by determining the viability of cells after low level light (LLL) application while treatment under anti-cancer chemotherapeutic drugs (5-fluorouracil (5-FU) and cisplatin) separately on each cell line. METHODS: Two human cancer cell lines (MCF-7 and Jurkat E6-1) were cultured throughout the experiments. Two different anti-cancer chemotherapeutic drugs (5-FU and cisplatin) were used to treat both cell lines. The half maximal inhibitory concentration (IC50) of each drug on each cell line was determined by treating each cell line with varying concentrations of each drug. A total of 3 or 4 trials were done for each cell line with each drug, and the range of concentration was narrowed closer to the IC50 value at each successive trial. Once the IC50 concentrations were determined, each cell line was treated with 808 nm LLL at varying energy densities in a single dose using a light emitting diode (LED) source both in the absence and the presence of each drug at one IC50. A total of 3 or 5 trials were done for each cell line with each drug, and for each trial, six different energy densities ranging from 0 J/cm2 (control) to 10 J/cm2 were applied. The energy densities were varied for each trial with control always being used. After application of LLL, the viability of cells was determined, and three different 1-way ANOVA (Analysis of Variance) analyses were done to compare the viability of cells at each energy density to that of control. RESULTS: The IC50 of 5-FU in MCF-7 and Jurkat E6-1 cells was determined as 70 µM and 20 µM respectively. The IC50 of cisplatin in MCF-7 and Jurkat E6-1 cells was determined as 17 µM and 7 µM respectively. No significant difference (P > 0.05) in the viability of MCF-7 cells was observed between each group treated with different energy density of LLL and control group (0 J/cm2) both in the absence and the presence of 5-FU at IC50 (70 µM). No significant difference (P > 0.05) in the viability of MCF-7 cells was observed between each group treated with different energy density of LLL and control group (0 J/cm2) both in the absence and the presence of cisplatin at IC50 (17 µM). No significant difference (P > 0.05) in the viability of Jurkat E6-1 cells was observed between each group treated with different energy density of LLL and control group (0 J/cm2) both in the absence and the presence of 5-FU at IC50 (20 µM). However, a significant increase (0.01 < P < 0.05) in the viability of cells was observed when treating Jurkat E6-1 cells with 10 J/cm2 of LLL in the presence of cisplatin at IC50 (7 µM) compared to control group (0 J/cm2). Except for the comparison mentioned previously, no significant difference in the viability of Jurkat E6-1 cells was observed between each group treated with different energy density of LLL and control group (0 J/cm2) both in the absence and the presence of cisplatin at IC50 (7 µM). No definite trend in the viability of cells was observed with increasing energy density of LLL for each cell line either in the absence of the presence of each drug at IC50. CONCLUSIONS: The application of LLL at 808 nm with energy densities ranging from 0.1 J/cm2 to 10 J/cm2 under an LED source did not induce cell proliferation or death compared to control (0 J/cm2) for each cell line in the absence or the presence of each drug, and no definite trend was observed with increasing energy density. The study suggests that LLLT at these parameters may be safe to use on cancer patients, but further studies on different cancer cell lines and animal models with different parameters (wavelength, energy density, dosage) of LLL are warranted.

Orientador: Carlos Alberto de Souza Costa / Resumo: A fixação do tecido conjuntivo à superfície dos abutments de implantes dentários impede a migração apical do epitélio juncional e previne a reabsorção da crista óssea normalmente ocasionada pela inflamação peri-implantar, o qual promove comprometimento estético e o sucesso do procedimento reabilitador. O uso de terapias para favorecer a adesão celular, a fim de induzir um selamento biológico efetivo, pode melhorar as condições estéticas e funcionais nas reabilitações protéticas. O objetivo desta pesquisa foi avaliar o efeito da laserterapia de baixa potência (LBP) e do recobrimento de superfícies de titânio (Ti) e zircônia (ZrO2) com fator de crescimento epidérmico (EGF), sobre a adesão e metabolismo de células da mucosa oral humana expostas ao estímulo inflamatório com o fator de necrose tumoral α (TNF-α). Fibroblastos de gengiva e células epiteliais foram isolados e cultivados sobre discos de Ti e ZrO2, simulando o selamento biológico in vitro. Nos grupos com EGF, este fator de crescimento foi aplicado sobre as superfícies de Ti e ZrO2 previamente ao cultivo celular. Após a semeadura das células, estas foram irradiadas 3 vezes com LBP (LaserTABLE, InGaAsP, 780±3nm), em intervalos de 24 h, nas doses de 0,5 J/cm2; 1,5 J/cm2 e 3,0 J/cm2, de acordo os grupos estabelecidos e então, o TNF-α foi aplicado sobre as mesmas por 24 h. Foram realizadas as análises de rugosidade da superfície dos discos por Microscopia Confocal (n=8) e de liberação do EGF dos substratos recobertos, além ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The attachment of the connective tissue to abutment surface of dental implants prevents the apical migration of the junctional epithelium and the bone crest reabsorption, normally caused by the peri-implant inflammation, which compromises the aesthetics and the success of the rehabilitation procedure. The use of therapies to promote cell adhesion in order to induce effective biological sealing can improve aesthetic and functional conditions in prosthetic rehabilitation. The aim of this study was to evaluate the effects of low-level laser therapy (LLLT) and surfaces coating of titanium (Ti) and zirconia (ZrO2) with epidermal growth factor (EGF) on adhesion and metabolism of oral mucosa cells exposed or not to tumor necrosis alpha (TNF-α) inflammatory stimuli. Gingival fibroblasts and epithelial cells were isolated and seeded on surface Ti or ZrO2 surfaces, simulating the in vitro biological sealing. In EGF-coated groups, this growth factor was applied to Ti and ZrO2 surfaces prior to cell culture. After seeding cells, they were irradiated 3 times with LLLT (LaserTABLE, InGaAsP, 780 ± 3 nm) at 24 h intervals at doses of 0.5 J/cm2, 1.5 J/cm2 and 3.0 J/cm2, according to the established groups and then, TNF-α was applied to them for 24 h. Discs surface roughness analyzes were performed by confocal microscopy (n=8), EGF release of the coated substrates and cell adhesion by direct fluorescence. Cell viability (AlamarBlue, n=8), IL-6, IL-8 and VEGF (qPCR, n=5) gene expression, IL-6, ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

O presente estudo teve o objetivo de avaliar o efeito da Terapia Laser de Baixa Potência (TLBP) na estabilidade e no deslocamento de mini-implantes (MIs) submetidos a carga. A hipótese nula testada foi que a irradiação laser e o tipo de carga aplicada (imediata ou mediata) não influenciam na estabilidade e no deslocamento de MIs. Foram avaliados 48 dispositivos para a estabilidade e 35 para o deslocamento, os quais foram implantados em pacientes da clínica de pós graduação em Ortodontia da Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo. Os MIs foram divididos em 4 grupos segundo a intervenção recebida: 1- TLBP + CI (carga imediata), 2- TLBP + CM (carga mediata / após 4 semanas da implantação), 3- CI (sem TLBP) e 4- CM (após 4 semanas da implantação / sem TLBP). Carga de 150 gF foi aplicada por período de 3 meses para todos os dispositivos. A TLBP foi aplicada usando emissão laser vermelha com comprimento de onda de 660 nm e potência de 100 mW, imediatamente após implantação (densidade de energia: 4 J/cm&sup2; ). Nos dias posteriores foram aplicadas emissões laser infravermelhas com comprimento de onda de 808 nm a cada 48 horas durante duas semanas após colocação dos dispositivos (densidade de energia: 8 J/cm&sup2; para cada aplicação). A estabilidade dos dispositivos foi avaliada pela Análise de Freqüência de Ressonância (AFR) em três momentos: T0 no dia da implantação; T1 antes da aplicação da carga, somente nos grupos 2 e 4; e T2 após três meses de aplicação de carga. Para a avaliação do deslocamento dos dispositivos foram utilizadas imagens de Tomografias Computadorizadas de Feixe Cônico (TCFC). Planos tridimensionais foram criados a partir de pontos de referência identificados na maxila e mandibula para medir e comparar as diferenças entre as distâncias inicial (TC0) e final (TC1) da cabeça do MI ao plano tridimensional. Os resultados demonstraram que o grupo 2 apresentou a menor perda de estabilidade de todos os grupos (p= 0.0161). Os dispositivos que receberam TLBP (Grupos 1 e 2) apresentaram menor perda de estabilidade quando comparados aos grupos que não receberam irradiação laser (p= 0.0372). Os MIs que receberam CI (Grupos 1 e 3) apresentaram maior perda de estabilidade quando foi avaliado o tempo efetivo de aplicação da carga (p< 0.0001). Todos os dispositivos apresentaram deslocamento sem diferenças estatisticamente significantes entre os grupos. A hipótese nula foi parcialmente rejeitada. Os MIs que receberam TLBP e CM tiveram menor perda de estabilidade. O deslocamento não foi influenciado pela irradiação laser e pelo protocolo de aplicação da carga / The present study aimed to evaluate the effect of Low-level Laser Therapy (LLLT) on stability and displacement of mini-implants (MIs) submitted to loading. The null hypothesis tested was that laser irradiation and the applied loading protocol (immediate or mediate) do not influence the stability and displacement of MIs. Forty-eight devices were assessed for stability and 35 for displacement. They were implanted in patients from the graduate clinic of Orthodontics of the School of Dentistry of Ribeirão Preto, University of São Paulo. MIs were divided in four groups according to received intervention: 1- LLLT + IL (immediate loading), 2- LLLT + ML (mediate loading / 4 weeks after implantation), 3- IL (without LLLT) and 4- ML (4 weeks after implantation / without LLLT). Loading of 150 gF was applied during 3 months for all devices. LLLT was implemented using red laser emission with wavelength of 660 nm and potency of 100 mW, immediately after implantation (energy density: 4 J/cm2). In the later days they were applied infrared laser emissions with wavelength of 808 nm every 48 hours during two weeks after placement of devices (energy density: 8 J/cm2 for each application). MIs stability assessment was performed by Resonance Frequency Analysis (RFA) at three moments: T0 on the day of implantation; T1 before loading, for groups 2 and 4; and, T2 after three months of loading application. For displacement analysis, images from Cone-beam Computed Tomography (CBCT) scans were used. Threedimensional planes were created based on landmarks identified on maxilla and mandible to measure and compare differences of initial (TC0) and final (TC1) distances from the MIs head to the plane. Results demonstrated that group 2 presented the lowest loss of stability of all groups (p= 0.0161). Devices that received LLLT (Groups 1 and 2) showed lower loss of stability when they were compared with the groups that did not receive LLLT (p= 0.0372). MIs that received IL (Groups 1 and 3) presented greater loss of stability when the effective time of loading application was assessed (p< 0.0001). All groups showed displacement of the devices without significant differences between them. The null hypothesis was partially rejected. MIs that received LLLT and ML had lower loss of stability. Displacement was not influenced by laser irradiation or loading protocol

O objetivo deste trabalho foi comparar os efeitos de diferentes densidades de energia e irradiâncias do Laser de Baixa Intensidade (LBI), variando em função do tempo de irradiação e potência, na viabilidade e proliferação de fibroblastos derivados da polpa de dentes decíduos humanos (HPF). HPF foram cultivados em DMEM e usados entre a 4ª e 8ª passagem. Os grupos foram divididos de acordo com diferentes densidades de energia, variando: Tempo de irradiação - Grupo I Ia (1,2 J/cm2 - 5 mW - 10 s), Ib (2,5 J/cm2 - 5 mW - 20 s), Ic (3,7 J/cm2 - 5 mW - 30 s), Id (5,0 J/cm2 - 5 mW - 40 s), e Ie (6,2 J/cm2 - 5 mW - 50 s); ou potência - Grupo II IIa (1,2 J/cm2 - 5 mW - 10 s), IIb (2,5 J/cm2 - 10 mW - 10 s), IIc (3,7 J/cm2 - 15 mW - 10 s), IId (5,0 J/cm2 - 20 mW - 10 s), e IIe (6,2 J/cm2 - 25 mW - 10 s). Células não irradiadas - cultivadas em condições nutricionais regulares - 10% Soro Fetal Bovino (SFB) (If e IIf) e células não irradiadas - cultivadas em déficit nutricional - 1% SFB (Ig e IIg), foram consideradas controles positivos e negativos, respectivamente. A viabilidade e proliferação celular foram avaliadas, repesctivamente, pelas técnicas MTT e Cristal violeta (CV), nos períodos de 24, 48 e 72 horas após a irradiação. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística por ANOVA 2 critérios, seguido pelo teste de Tukey (P<0,05). No ensaio MTT, os controles negativos, Ig e IIg, apresentaram significativamente menor viabilidade em relação aos correspondentes grupos experimentais: IIa e IIb, 24 horas após a irradiação; Ia, Ib, Ie, If e IIf no período de 48 horas; e Ib-If, assim como, IIa-IIf após 72 horas. Nos diferentes períodos de avaliação do ensaio CV, todos os grupos, exceto Ie, IIe e If, exibiram significativamente maior proliferação em comparação aos respectivos controles negativos. Dentro de um mesmo grupo nos diferentes períodos, os grupos If e IIe apresentaram menor viabilidade durante o período de 24 horas em comparação ao período de 72 horas pelo ensaio MTT. Na avaliação intragrupos, o ensaio CV revelou menor proliferação no período de 24 horas em comparação aos períodos de 48 e 72 horas, independente do grupo avaliado. Os diferentes protocolos de irradiação, grupos I e II, não apresentaram diferença estatisticamente significativa na viabilidade e proliferação celular entre densidades de energia iguais com irradiâncias diferentes durante os períodos avaliados. De acordo com os resultados obtidos, as diferentes densidades de energia e irradiâncias propostas não prejudicaram a viabilidade e proliferação de fibroblastos pulpares de dentes decíduos humanos. A variação do protocolo de irradiação LBI, em função do tempo ou da potência, não interferiram nas respostas celulares após a aplicação da mesma densidade de energia com irradiâncias diferentes. / The aim of this study was to compare the effects of Low-level laser (LLL) with different energy densities and irradiances, varying according to the irradiation time and power, on cell viability and proliferation of pulp fibloblasts from human primary teeth (HPF). HPF were culture in DMEM and used between 4th and 8th passages. Groups were divided according to different energy densities, varying: Time of irradiation Ia (1.2 J/cm2 - 5 mW - 10 s), Ib (2.5 J/cm2 - 5 mW - 20 s), Ic (3.7 J/cm2 - 5 mW - 30 s), Id (5.0 J/cm2 - 5 mW - 40 s), and Ie (6.2 J/cm2 - 5 mW - 50 s); or output power - Grupo II IIa (1.2 J/cm2 - 5 mW - 10 s), IIb (2.5 J/cm2 - 10 mW - 10 s), IIc (3.7 J/cm2 - 15 mW - 10 s), IId (5.0 J/cm2 - 20 mW - 10 s), e IIe (6.2 J/cm2 - 25 mW - 10 s). Non-irradiated cells - grown in regular nutritional conditions - 10% Fetal Bovine Serum (FSB) (If and IIf) and non-irradiated cells - grown in nutritional deficit - 1% FBS (Ig and IIg) were considered positive and negative controls, respectively. Cell viability and proliferation were respectively assessed through MTT and Crystal violet (CV) assays at 24, 48 and 72h after irradiation. Data were submitted to statistical analysis by ANOVA 2 criteria, followed by Tukey test (P<0.05). In the MTT assay, the negative controls, Ig and IIg, showed significantly lower viability in relation to the corresponding groups: IIa and IIb 24 hours after irradiation; Ia, Ib, Ie, If and IIf at 48 hours period; and Ib-If, as IIa-IIf, after 72 hours. At different periods of evaluation of CV assay, all groups, except Ie, IIe and If, exhibited significantly higher proliferation compared to the respective negative controls. Within the same group at different periods, groups If and IIe showed lower viability during 24 hours compared to 72 hours period by MTT assay. In the intragroup evaluation, CV assay revealed lower proliferation at 24 hours compared to 48 and 72 hours periods, regardless of the evaluated group. Different irradiation protocols, groups I and II, showed no statistically significant differences on cell viability and proliferation among equals energy densities with different irradiances at the evaluated periods. According to these findings, different LLL energy densities and irradiances proposed did not impair viability and proliferation of pulp fibloblasts from human primary teeth. The variation of the LLL irradiation protocol, by the time or power, did not interfere in cellular responses after the application of the same energy density with different irradiances.

Orientador: Andrea Carvalho De Marco / Coorientador: Dimas Renó de Lima / Banca: Symone Cristina Teixeira / Banca: Cibelle Barbosa Lopes / Resumo: A hipersensibilidade dentinária é uma das complicações mais comuns entre os pacientes após o tratamento periodontal. Recentemente a terapia com o uso de laser de baixa intensidade foi introduzida como uma nova modalidade de tratamento e tem proporcionado resultados benéficos. Foi realizado um estudo clínico controlado, randômico, duplo-cego, de boca dividida com o objetivo de comparar a efetividade do uso do verniz tópico Fluoreto de sódio 5%, do Laser GaAlAs 780 nm e da combinação do Fluoreto de sódio 5% e o Laser GaAlAs 780 nm para o tratamento de hipersensibilidade dentinária. Os Grupos foram divididos em Grupo Controle (C), Grupo Fluoreto de sódio 5% (F), Grupo Laser GaAlAs 780 nm (LLLT), e o Grupo Fluoreto de sódio 5% + Laser GaAlAs 780 nm (F+LLLT). A aplicação do verniz foi realizada com pinceis do tipo "microbrush", e para cada elemento dental cinco pontos receberam a LLLT, com dose de 52,5 J/cm2 (70mW e 30 segundos) ou 2,1 J por ponto; 6 segundos por ponto. A hipersensibilidade primária foi registrada pela escala analógica visual (VAS: 0-10) para quantificar a dor subjetiva após estímulo com "spray de gelo" no baseline, e após o tratamento nos intervalos de 24 horas e 30 dias. Todos os dados foram analisados estatisticamente pela análise de variância ANOVA. Para cada um dos três tempos de avaliação foi efetuada uma comparação entre os 4 grupos (por meio da ANOVA oneway) com complementação pelos testes de Tukey e Bartlett a fim de verificar as diferenças estatísticas e... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Dentin hypersensitivity is one of the most common complications among patients after periodontal treatment. Recently the low level laser therapy has been introduced as a new treatment modality and has provided beneficial results. A split-mout, double-blind, randomized, controlled clinical trial was conducted with the aim of compare the effectiveness of the topical varnish 5% Sodium Fluoride, Laser GaAlAs 780 nm and the combination of 5% Sodium Fluoride and the Laser GaAlAs 780 nm for the treatment of dentin hipersensitivity. The groups were divided in Control Group (C), Sodium Fluoride at 5% Group (F), Laser Group GaAlAs 780 nm (LLLT), and Sodium Fluoride at 5% Group + GaAlAs Laser 780 nm (F + LLLT). The application of the varnish was realized with "microbrush", and for each dental element, five points was received LLLT. The dose was 52.5 J / cm2 (70mW and 30 seconds) or 2.1 J per point, 6 seconds per point. Primary hypersensitivity was be recorded by visual analogue scale (VAS: 0-10) to quantify subjective pain after the stimulus with "ice spray" at baseline, and after treatment at 24-hour and 30-day intervals. All data was analyzed statistically by analysis of variance ANOVA. For each of the three evaluation times a comparison was made between the 4 groups (through the oneway ANOVA) with complementation by the Tukey's and Bartlett's tests in order to verify the statistical differences between groups. The level of significance will be 5%. After statistical analysis the resul... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

O objetivo deste trabalho foi comparar os efeitos de diferentes densidades de energia e irradiâncias do Laser de Baixa Intensidade (LBI), variando em função do tempo de irradiação e potência, na viabilidade e proliferação de fibroblastos derivados da polpa de dentes decíduos humanos (HPF). HPF foram cultivados em DMEM e usados entre a 4ª e 8ª passagem. Os grupos foram divididos de acordo com diferentes densidades de energia, variando: Tempo de irradiação - Grupo I Ia (1,2 J/cm2 - 5 mW - 10 s), Ib (2,5 J/cm2 - 5 mW - 20 s), Ic (3,7 J/cm2 - 5 mW - 30 s), Id (5,0 J/cm2 - 5 mW - 40 s), e Ie (6,2 J/cm2 - 5 mW - 50 s); ou potência - Grupo II IIa (1,2 J/cm2 - 5 mW - 10 s), IIb (2,5 J/cm2 - 10 mW - 10 s), IIc (3,7 J/cm2 - 15 mW - 10 s), IId (5,0 J/cm2 - 20 mW - 10 s), e IIe (6,2 J/cm2 - 25 mW - 10 s). Células não irradiadas - cultivadas em condições nutricionais regulares - 10% Soro Fetal Bovino (SFB) (If e IIf) e células não irradiadas - cultivadas em déficit nutricional - 1% SFB (Ig e IIg), foram consideradas controles positivos e negativos, respectivamente. A viabilidade e proliferação celular foram avaliadas, repesctivamente, pelas técnicas MTT e Cristal violeta (CV), nos períodos de 24, 48 e 72 horas após a irradiação. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística por ANOVA 2 critérios, seguido pelo teste de Tukey (P<0,05). No ensaio MTT, os controles negativos, Ig e IIg, apresentaram significativamente menor viabilidade em relação aos correspondentes grupos experimentais: IIa e IIb, 24 horas após a irradiação; Ia, Ib, Ie, If e IIf no período de 48 horas; e Ib-If, assim como, IIa-IIf após 72 horas. Nos diferentes períodos de avaliação do ensaio CV, todos os grupos, exceto Ie, IIe e If, exibiram significativamente maior proliferação em comparação aos respectivos controles negativos. Dentro de um mesmo grupo nos diferentes períodos, os grupos If e IIe apresentaram menor viabilidade durante o período de 24 horas em comparação ao período de 72 horas pelo ensaio MTT. Na avaliação intragrupos, o ensaio CV revelou menor proliferação no período de 24 horas em comparação aos períodos de 48 e 72 horas, independente do grupo avaliado. Os diferentes protocolos de irradiação, grupos I e II, não apresentaram diferença estatisticamente significativa na viabilidade e proliferação celular entre densidades de energia iguais com irradiâncias diferentes durante os períodos avaliados. De acordo com os resultados obtidos, as diferentes densidades de energia e irradiâncias propostas não prejudicaram a viabilidade e proliferação de fibroblastos pulpares de dentes decíduos humanos. A variação do protocolo de irradiação LBI, em função do tempo ou da potência, não interferiram nas respostas celulares após a aplicação da mesma densidade de energia com irradiâncias diferentes. / The aim of this study was to compare the effects of Low-level laser (LLL) with different energy densities and irradiances, varying according to the irradiation time and power, on cell viability and proliferation of pulp fibloblasts from human primary teeth (HPF). HPF were culture in DMEM and used between 4th and 8th passages. Groups were divided according to different energy densities, varying: Time of irradiation Ia (1.2 J/cm2 - 5 mW - 10 s), Ib (2.5 J/cm2 - 5 mW - 20 s), Ic (3.7 J/cm2 - 5 mW - 30 s), Id (5.0 J/cm2 - 5 mW - 40 s), and Ie (6.2 J/cm2 - 5 mW - 50 s); or output power - Grupo II IIa (1.2 J/cm2 - 5 mW - 10 s), IIb (2.5 J/cm2 - 10 mW - 10 s), IIc (3.7 J/cm2 - 15 mW - 10 s), IId (5.0 J/cm2 - 20 mW - 10 s), e IIe (6.2 J/cm2 - 25 mW - 10 s). Non-irradiated cells - grown in regular nutritional conditions - 10% Fetal Bovine Serum (FSB) (If and IIf) and non-irradiated cells - grown in nutritional deficit - 1% FBS (Ig and IIg) were considered positive and negative controls, respectively. Cell viability and proliferation were respectively assessed through MTT and Crystal violet (CV) assays at 24, 48 and 72h after irradiation. Data were submitted to statistical analysis by ANOVA 2 criteria, followed by Tukey test (P<0.05). In the MTT assay, the negative controls, Ig and IIg, showed significantly lower viability in relation to the corresponding groups: IIa and IIb 24 hours after irradiation; Ia, Ib, Ie, If and IIf at 48 hours period; and Ib-If, as IIa-IIf, after 72 hours. At different periods of evaluation of CV assay, all groups, except Ie, IIe and If, exhibited significantly higher proliferation compared to the respective negative controls. Within the same group at different periods, groups If and IIe showed lower viability during 24 hours compared to 72 hours period by MTT assay. In the intragroup evaluation, CV assay revealed lower proliferation at 24 hours compared to 48 and 72 hours periods, regardless of the evaluated group. Different irradiation protocols, groups I and II, showed no statistically significant differences on cell viability and proliferation among equals energy densities with different irradiances at the evaluated periods. According to these findings, different LLL energy densities and irradiances proposed did not impair viability and proliferation of pulp fibloblasts from human primary teeth. The variation of the LLL irradiation protocol, by the time or power, did not interfere in cellular responses after the application of the same energy density with different irradiances.

Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2018-07-16T20:01:20Z No. of bitstreams: 1 Beatriz Guimarães Ribeiro.pdf: 1467862 bytes, checksum: d166e20babcfe778cdc4c7cf5708fc53 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-16T20:01:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Beatriz Guimarães Ribeiro.pdf: 1467862 bytes, checksum: d166e20babcfe778cdc4c7cf5708fc53 (MD5) Previous issue date: 2017-02-23 / The low level laser therapy (LLLT) is a resource capable of modulating in a positive way the different stages of the muscle repair process. However, little has been described about its effects when applied prior to injury, associated or not with post-injury treatment. The general objective of the present study was to evaluate the effect of LLLT applied prior to the muscle injury associated or not to the post-injury application on the rat skeletal muscle repair process. The aim of article 1 was to evaluate the effect of infrared LLLT applied prior to cryoinjury on the expression of IL-6, MyoD and myogenin. The aim of article 2 was to evaluate the effect of red and infrared LLLT prior to cryoinjury associated or not with post-injury application on oxidative stress. The aim of article 3 was to evaluate the effect of infrared LLLT applied prior to injury with or without post-injury application on the gene expression and protein synthesis of inflammatory cytokines TNF-α and IL-6, and muscle morphology. For the three studies, 205 Wistar rats were divided into the following experimental groups: Control; Injury; LLLT 660 nm prior to injury; LLLT 780 nm prior to injury; LLLT 660 nm pre- and post-injury; and LLLT 780 nm pre- and post-injury. The cryoinjury consisted of two applications of cane cooled in liquid nitrogen in the anterior tibial muscle (TA). The injured groups were evaluated at 1, 3, 7 and 14 days after injury (only for oxidative stress analysis, evaluation occurred at 1, 3, and 7 days). LLLT irradiation was performed with the AsGaAl laser (780 nm) at the parameters of 10 J/cm²; 40 mW; 10 seconds per point; 8 points; 3.2 J. At the end of the protocol, TA muscles were carefully removed for analysis of oxidative stress by lipid peroxidation (LPO) by chemiluminescence initiated by t-BOOH, protein oxidation through the carbonyl damage assay, and analysis of antioxidant enzymes: catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GPx). TNF-α and IL-6 cytokines were analyzed by quantitative real-time PCR for the detection of gene expression. In addition, a morphological analysis was performed by staining with hematoxylin and eosin. TNF-α and IL-6 cytokines were analyzed by ELISA for protein expression. Data were expressed as mean and standard error of the mean because they were parametric and the comparison between the groups was performed by ANOVA/Tukey (p<0.05). The results of article 1 demonstrate a reduction in the levels of IL-6 mRNA in the group irradiated prior to the injury, concluding that the LBP applied prior to injury was able to modulate positively this inflammatory cytokine, but had no effect on the myogenic regulatory factors MyoD and myogenin in the evaluated parameters. The results of article 2 containing the oxidative stress analysis showed that the irradiated groups presented reduction of the lipoperoxidation and positive modulation of the antioxidant enzymes during the muscle repair process, concluding the red and infrared laser were able to modulate positively the oxidative stress, being the most effective infrared laser in the modulation of antioxidant enzymes. The results of article 3 demonstrated a reduction in the gene expression of TNF-α in the group irradiated prior to injury. In the pre-and post-injury irradiated group, IL-6 and TNF-α mRNA levels increased during the skeletal muscle repair process, concluding that the infrared laser was able to positive modulation these inflammatory cytokines in the two forms of application. Therefore, it is concluded that the LLLT irradiated prior to injury associated or not with the post-injury application has a beneficial effect on inflammatory cytokines and oxidative stress during the repair of the skeletal muscle of rats. / O laser de baixa potência (LBP) é um recurso capaz de modular de forma positiva as diferentes etapas do processo de reparo muscular. Contudo, pouco há descrito sobre seus efeitos quando aplicado previamente a uma lesão, associado ou não a um tratamento pós-lesão. O objetivo geral do presente estudo foi avaliar o efeito do LBP aplicado previamente à lesão muscular associado ou não a aplicação pós-lesão sobre o processo de reparo musculo esquelético de rato. O objetivo do artigo 1 foi avaliar o efeito do LBP infravermelho aplicado previamente à criolesão sobre a expressão de IL-6, MyoD e miogenina. O objetivo do artigo 2 foi avaliar o efeito do LBP vermelho e infravermelho previamente a criolesão associado ou não a aplicação pós-lesão sobre o estresse oxidativo. O objetivo do artigo 3 foi avaliar o efeito do LBP infravermelho aplicado previamente à criolesão associado ou não a aplicação pós-lesão sobre a expressão gênica e síntese proteica das citocinas inflamatórias TNF-α e IL-6, e morfologia muscular. Para a realização dos três estudos, foram utilizados 205 ratos Wistar, divididos nos seguintes grupos experimentais: Controle; Somente lesão; LBP 660 nm previamente à lesão; LBP 780 nm previamente à lesão; LBP 660 nm pré e pós-lesão; e LBP 780 nm pré e pós-lesão. A criolesão consistiu de duas aplicações de bastão resfriado em nitrogênio líquido no músculo tibial anterior (TA). Os grupos lesionados foram avaliados em 1, 3, 7 e 14 dias após a lesão (somente para análise de estresse oxidativo, a avaliação ocorreu em 1, 3, e 7 dias). A irradiação com LBP foi realizada com o laser AsGaAl (780 nm) nos parâmetros de 10 J/cm²; 40 mW; 10 segundos por ponto; 8 pontos; 3.2 J. Ao término do protocolo, os músculos TA foram retirados cuidadosamente para análise de estresse oxidativo pela lipoperoxidação (LPO) por quimiluminescência iniciada por t-BOOH, pela oxidação proteica através do ensaio de dano as carbonilas, e pela análise das enzimas antioxidantes: catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD) e glutationa peroxidase (GPx). Também foram analisadas as citocinas TNF-α e IL-6 por PCR em tempo real quantitativo para detecção da expressão gênica. Além disso, foi realizada análise morfológica por coloração com hematoxilina e eosina. As citocinas TNF-α e IL-6 também foram analisadas por ELISA para detecção da expressão proteica. Os dados foram expressos em média e erro-padrão da média por se apresentarem paramétricos e a comparação entre os grupos foi realizada pelo ANOVA/ Tukey (p<0,05). Os resultados do artigo 1 demonstram redução nos níveis de mRNA IL-6 no grupo irradiado previamente à lesão, concluindo que o LBP aplicado previamente à lesão foi capaz de modular positivamente essa citocina inflamatória, mas não teve efeito sobre os fatores regulatórios miogênicos MyoD e miogenina nos parâmetros avaliados. Os resultados do artigo 2 contendo a análise de estresse oxidativo demonstram que os grupos irradiados apresentaram redução da lipoperoxidação e modulação positiva das enzimas antioxidantes durante o processo de reparo muscular, concluindo que tanto o laser vermelho como infravermelho foram capazes de modular positivamente o estresse oxidativo sendo o laser infravermelho mais eficaz na modulação de enzimas antioxidantes. Os resultados do artigo 3 demonstram uma redução na expressão gênica de TNF-α no grupo irradiado previamente a lesão. Já no grupo irradiado pré e pós-lesão, houve aumento dos níveis de mRNA IL-6 e TNF-α durante o processo de reparo musculo esquelético, concluindo que o laser infravermelho foi capaz de modular de forma positiva essas citocinas inflamatórias nas duas formas de aplicação. Portanto, conclui-se de forma geral que o LBP utilizado previamente à lesão associado ou não a aplicação pós-lesão tem efeito benéfico sobre a modulação de citocinas inflamatórias e do estresse oxidativo durante o reparo do músculo esquelético de ratos.

<p>Uvod: Lumbalni bolni sindrom (LBS) podrazumeva tegobe u vidu bolova, u lumbalnom ili lumbosakralnom segmentu kičmenog stuba, sa ili bez iradijacije u donje ekstremitete, uz poremećaj funkcije umbosakralnog dela kičmenog stuba, za&scaron;titnu mi&scaron;ićnu reakciju na bol (spazam) uz moguće znake senzitivnog poremećaja. Laser male snage (LMS) ima &scaron;iroku primenu u fizikalnoj medicini i rehabilitaciji zbog analgetskog, antiinflamatornog, antiedematoznog i biostimulativnog dejstva. Cilj rada: Glavni ciljevi su bili da se utvrdi da li fizikalna terapija primenom LMS utiče na smanjenje bola, povećanje pokretljivost lumbalne kičme, smanjenje spazma pravertebralne muskulature, kao i na smanjenje funkcionalne osnesposobljenosti u subakutnom LBS. Materijal i metode: Sprovedena je prospektivna studija na 123 pacijenata (50 mu&scaron;karaca i 73 žene), različitih profesija, izabranih metodom slučajnog izbora, prosečne životne dobi 32.59&plusmn;5.67 godina (ispitivana grupa 31.87&plusmn;5.84, kontrolna grupa 33.31&plusmn;5.45, raspon od 19-45). U studiju su uključeni ispitanici koji su prvi put doživeli lumbalni bolni sindrom koji su pregledani u Odeljenju za fizikalnu medicinu i rehabilitaciju Doma zdravlja Novi Sad. Ispitivanu grupu je činio 61 ispitanik koji su uključeni u fizikalni tretman, primenom laseroterapije i kineziterapije uz medikamentoznu terapiju. Kontrolnu grupu je činilo 62 ispitanika koji koji su uključeni u fizikalni tretman primenom kineziterapije uz medikamentoznu terapiju. Svim ispitanicima je uzeta anamneza, obavljen klinički pregled, izvr&scaron;ena samoprocena bola i popunjavali su upitnike. Navedeno ispitivanje je sprovedeno na početku tretmana, nakon 6 nedelje i nakon sprovedenog tretmana. Kori&scaron;ćeni su sledeći upitnici: vizuelna analogna skala (VAS), standardizovani upitnici za merenje funkcionalnog ishoda - The Oswestry Disability Index (ODI), The Rolland&amp;Morris Disability Questionnaire (RMDQ) i SF-36 upitnik. Rezultati: Rezultati ukazuju da se intenzitet bola meren VAS skalom u obe ispitivane grupe značajno smanjivao tokom svih posmatranih perioda ispitivanja, pri čemu dobijena razlika između dve grupe nije statistički značajna (p=0.904). Pokretljivost lumbalne kičme u obe ispitivane grupe tokom posmatranog perioda se značajno povećala tokom svih posmatranih perioda ispitivanja, pri čemu dobijena razlika između dve grupe nije statistički značajna (p=0.798). U obe ispitivane grupe spazam paravertebralne muskulature se značajno smanjivao tokom svih posmatranih perioda ispitivanja, dok dobijena razlika između grupa nije statistički značajna (p=0.453). Funkcionalna onesposobljenost pacijenata (procenjivana smanjenjem funkcionalne onesposobljenosti ODI i RMDQ) se značajno smanjivala u obe ispitivane grupe pacijenata tokom svih posmatranih perioda ispitivanja. Dobijena razlika u skorovima procenjivana RMDQ između ispitivanih grupa pacijenata nije statistički značajna (p=0.648), kao i putem ODI skora između ispitivanih grupa (p=0.311). Procena funkcionalne onesposobljenosti putem procene kvaliteta života (SF-36), ukazuje da se kvalitet života značajno povećavao u svim ispitivanim skorovima u obe ispitivane grupe tokom svih posmatranih perioda ispitivanja. Nema razlika u funkcionalnoj onesposobljenost (SF-36), odnosno nema razlike u kvalitetu života u skorovima fizičko funkcionisanje, ograničenje zbog emocionalnih problema, socijalno funkcionisanje, mentalno zdravlje, telesni bol, energija i vitalnost, sumarni skor fizičkog i sumarni skor mentalnog zdravlja između ispitivanih grupa. Dimenzije kvaliteta života u skorovima ograničenje zbog fizičkog zdravlja je značajno bolje u kontrolnoj grupi ispitanika (p=0.028). Dimenzija kvaliteta života u skoru op&scaron;te zdravlje je značajno bolje u ispitivanoj grupi pacijenata (p=0.041). Zaključci. Primenom LMS u subakutnom LBS do&scaron;lo je statistički značajnog smanjenja intenziteta bola, povećanja pokretljivosti lumbalne kičme, smanjenja spazma paravertebralne muskulature, kao i smanjenja funkcionalne onesposobljenosti. S obzirom da ne postoji koncenzus oko primene LMS, kao ni drugih metoda fizikalne terapije u subakutnom stadijumu LBS, navedeni rezultati bi mogli doprineti usvajanju kliničkih smernica, odnosno dijagnostičkih i terapijskih protokola za subakutni LBS.</p> / <p>Introduction: Low back pain syndrome (LBP) implies pain in the lumbar or lumbosacral segment of the spine, with or without irradiation into the lower extremities, with a disorder to the function of the lumbosacral part of the spine, a protective muscular reaction to pain (spasm) and possible signs of a sensory processing disorder. Low-Level Laser Therapy (LLLT) has broad application in physical medicine and rehabilitation due to analgesic, antiinflammatory, anti-edematous and biostimulative effects. Objective: The main objective of this study was to determine whether physical therapy with a LLLT has an effect on reducing pain, increasing mobility in the lumbar spine, reducing spasms of the paravertebral muscle, as well as in reducing functional incapacity in subacute LBP. Material and methods: A prospective study was conducted on 123 patients (50 men and 73 women), of different professions, chosen through random selection, with a mean age of 32.59 &plusmn; 5.67 years (examined group 31.87 &plusmn; 5.84, control group 33.31 &plusmn; 5.45, range 19-45). The study included respondents who had experienced lumbar pain syndrome for the first time and who had been examined in the Department of Physical Medicine and Rehabilitation of the Novi Sad Health Center. The examined group consisted of 61 respondents undergoing physical treatment with the application of LLLT and kinesiotherapy with medication therapy. The control group consisted of 62 respondents undergoing physical treatment with the application of kinesiotherapy with medication therapy. All patients were subject to an anamnesis, a clinical examination, a selfassessment of pain and were required to complete questionnaires. The above study was carried out at the beginning of treatment, after 6 weeks, and after treatment was completed. The following questionnaires were used: Visual Analogue Scale (VAS), standardized questionnaires for assessing functional outcomes &ndash; The Oswestry Disability Index (ODI), The Rolland &amp; Morris Disability Questionnaire (RMDQ) and the SF-36 questionnaire. Results: Results indicate that pain intensity assessed using the VAS scale was significantly decreased, in both examined groups, during all observed study periods, where the difference between the two groups was not statistically significant (p = 0.904). Mobility of the lumbar spine was significantly increased, in both examined groups, during all observed study periods, where the obtained difference between the two groups was not statistically significant (p = 0.798). In both examined groups, spasm of the paravertebral musculature significantly decreased during all observed study periods, while the difference between the groups was not statistically significant (p = 0.453). Functional disability of patients (assessed by a reduction of functional disabilities of ODI and RMDQ) significantly decreased in both examined groups of patients during all observed examination periods. The obtained difference in scores assessed via the RMDQ, between the studied patient groups, was not statistically significant (p = 0.648), as well as via the ODI score between the researched groups (p = 0.311). Assessment of functional disability through the assessment of quality of life (SF-36) indicates that the quality of life increased significantly, for all examined scores in both examined groups, during all observed testing periods. There is no difference in functional disability (SF-36), that is, there is no difference in quality of life in score physical functioning, restrictions due to emotional problems, social functioning, emotional wellbeing, bodily pain, energy/vitality, physical and mental health, between the examined groups. The dimensions of quality of life in score role limitations due to physical health problems are significantly better in the control group (p = 0.028). The quality of life dimension in the general health perceptions is significantly better in the examination group (p = 0.041). Conclusions: The application of LLLT in subacute LBP resulted in a statistically significant reduction in pain intensity, increased lumbar spine mobility, decreased spasms of paravertebral musculature, and decreased functional disability. Given that there is no consensus on the use of LLLT, nor any other methods of physical therapy, during the subacute LBP, these results could contribute to the adoption of clinical guidelines, that is, diagnostic and therapeutic protocols for subacute LBP.</p>

Após um trauma cirúrgico o paciente apresenta uma resposta inflamatória que acarreta em dor, edema, calor, rubor e perda de função. Tais sintomas podem tornar o pós-operatório desagradável e diminuir a qualidade de vida. Diversos estudos utilizando terapia de fotobiomodulação com variados protocolos têm mostrado resultados favoráveis no controle do edema, limitação de abertura de boca e dor no período pós-operatório. O uso do gelo no período pós-operatório tem sido orientação e recomendação de rotina para os pacientes, porém estudos clínicos controlados mostram resultados controversos em relação aos seus reais efeitos. Neste contexto, foi realizado um ensaio clínico randomizado cruzado triplo-cego para avaliar a limitação de abertura bucal, os níveis de edema e dor no período pós-operatório da exodontia de terceiros molares inferiores após a aplicação de bolsas de gelo (controlada, assistida e padronizada) associada (LG) ou não (LPG) a sessão única de fotobiomodulação (FBM). A irradiação foi aplicada por Diodo de Arseneto de Gálio e Alumínio (AsGaAl) seguindo os parâmetros: comprimento de onda de 808 nm (infravermelho) potência de 100 mW, densidade de potência de 3.57 W. cm², área do ponto de aplicação de 0.028 cm2, densidade de energia de 107 J/cm2, energia de 3 J, duração de 30 segundos em cada ponto de aplicação, em 4 pontos equidistantes sobre a pele entre a inserção e a origem do músculo masseter no lado onde o dente foi extraído totalizando 12 J. No grupo LPG a intervenção da FBM foi placebo realizada com o equipamento desativado. A amostra final foi composta por 21 pacientes, os resultados mostraram redução significativa para o grupo LG do edema no período entre 0-24 horas para a medida Ag-Cl (p= 0.009), entre 0-7 dias para a medida Tr-Cl (p= 0.002) e redução significativa da dor no período de 48 horas (p=0.03). Não houve diferença estatisticamente significativa entre os grupos LG e LPG para a limitação de abertura bucal. Concluímos que a fotobiomodulação extraoral pelo laser de baixa potência infravermelho de Diodo de Arseneto de Gálio e Alumínio (AsGaAl), aplicada em sessão única imediatamente após exodontia de terceiros molares inferiores foi capaz de melhorar os efeitos terapêuticos da aplicação local de bolsas de gelo em alguns parâmetros de edema e de dor mas não influenciou na limitação de abertura bucal. / After surgical trauma patients present inflammatory response that leads to pain, edema, heat, redness and loss of function. Such symptoms can make the postoperative unpleasant and quality of life decrease. Several studies using low power photobiomodulation therapy, with several protocols, have been performed with favorable results in the control of edema, limitation of mouth opening and pain in the postoperative period. The use of ice packs in the postoperative period has been a routine guidance and recommendation for patients, but controlled clinical trials show controversial results related to their actual effects. In this context, we conducted a randomized crossover clinical trial triple-blind to evaluate limitation of mouth opening, levels of swelling and pain in the postoperative period of third molar extraction after applying cold packs (controlled, assisted and standardized) associated with (LI) or not (LPI) to a single session of photobiomodulation therapy (PBMT). The irradiation was applied with a diode aluminum gallium arsenide laser (AlGaAs) following the parameters: wavelength of 808 nm (infrared), power of 100 mW, power density of 3.57 W. cm², application point area of 0.028 cm2, energy density of 107 J / cm2, energy of 3 J, duration of 30 seconds each application point, at 4 equidistant points on the skin between the insertion and origin of the masseter muscle on the side where the tooth was extracted, totaling 12 J. In the group LPI the PBMT intervention was placebo performed with the equipment turned off. The final sample consisted of 21 patients, the results showed a significant reduction for the LI group of edema in the period between 0-24 hours for the Ag-Cl measure (p = 0.009), between 0-7 days for the Tr-Cl measurement (p = 0.002) and significant pain reduction in the 48-hour period (p = 0.03). There was no statistically significant difference between LG and LPG groups for mouth opening limitation. We concluded that a single session of extraoral PBMT with infrared AlGaAs, applied immediately after inferior third molar extraction was able to improve effects of local application of ice packs on postoperative outcomes of edema and pain but not on mouth opening.