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Estudo das proteínas dissulfeto isomerase na maturação epididimária em um modelo suíno de hipogonadismo

Lenz, Ângela Maria Schorr 12 1900 (has links)
Submitted by FERNANDA DA SILVA VON PORSTER (fdsvporster@univates.br) on 2015-06-22T19:09:13Z No. of bitstreams: 3 license_text: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) 2014AngelaMariaSchorrLenz.pdf: 1126263 bytes, checksum: e890e5b36bb305f0c49adb4a4b264c77 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Lisboa Monteiro (monteiro@univates.br) on 2015-06-25T20:16:34Z (GMT) No. of bitstreams: 3 license_text: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) 2014AngelaMariaSchorrLenz.pdf: 1126263 bytes, checksum: e890e5b36bb305f0c49adb4a4b264c77 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-06-25T20:16:34Z (GMT). No. of bitstreams: 3 license_text: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) 2014AngelaMariaSchorrLenz.pdf: 1126263 bytes, checksum: e890e5b36bb305f0c49adb4a4b264c77 (MD5) / Os processos fisiológicos, inclusive a maturação epididimária, são regidos por testosterona e estradiol e as proteínas secretadas pelas células epiteliais do túbulo do epidídimo são apontadas como efetoras desse processo. O hipogonadismo, condição resultante da disfunção testicular apresenta efeitos deletérios sobre os processos de espermatogênese e secreção hormonal. A correlação das funções das proteínas com atividade de chaperona da família das Proteínas Dissulfeto Isomerase (PDI) com alterações hormonais pode revelar relação de ação destas com a infertilidade em machos de diferentes espécies. O presente trabalho foi conduzido com o objetivo de descrever a presença das chaperonas PDIA1, PDILT e PDIA3 no epidídimo de suínos com hipogonadismo ocasionado pela imunocastração. Foram utilizados testículos de dezesseis animais, nove castrados cirurgicamente em rotinas zootécnicas (grupo controle) e sete machos imunocastrados com vacina Vivax (Pfizer). Espermatozoides e fluido epididimário das regiões de cabeça, corpo e cauda foram coletados, processados e o imunoconteúdo das PDI quantificado por Western Blotting. Os resultados demonstraram que, no grupo controle, o imunoconteúdo da PDIA1, PDIA3 e PDILT nos espermatozoides apresenta maior expressão nas regiões de cabeça e corpo (P<0,05). Em relação ao fluido, observou-se o mesmo padrão de distribuição, com exceção da PDILT, que não apresentou diferença entre as regiões epididimárias. Porém, no grupo de imunocastrados, a quantificação dessas chaperonas demonstrou a presença das mesmas nas três regiões do epidídimo. Desta forma, a imunocastração influencia no imunoconteúdo de chaperonas da família PDI demonstrando uma possível associação destas a processos iniciais de maturação espermática. / The physiological processes including epididymal maturation, are governed by testosterone and estradiol and secreted proteins by epithelial cells of tubule of the epididymis are identified as effectors of this process. Hypogonadism resulting condition of testicular dysfunction has detrimental effects on spermatogenesis processes and hormone secretion. The correlation functions of proteins with chaperone activity of Protein Disulfide Isomerase (PDI) family with hormonal changes can reveal action their relation to infertility in males of different species. This study was conducted with the objective of describing the presence of chaperones PDIA1, PDILT and PDIA3 in the epididymis of pigs with hypogonadism caused by immunocastration. This study was performed with tests in sixteen animals, nine castrated surgically in husbandry routines (control group) and seven males immunocastrated with Vivax vaccine (Pfizer). Epididymal sperm and fluid regions of the head, body and tail were collected, processed and immunocontent of PDIs quantified by Western blotting. The results showed that in the control group, the immunocontent of PDIA1, PDIA3 and PDILT in sperm has a higher expression in the head and body regions (P <0.05). Regarding the fluid, we observed the same pattern of distribution, except PDILT, which showed not difference between the epididymal regions. However, in the immunocastrated group, the quantification of these chaperones demonstrated the presence of the same in the three regions of the epididymis. Therefore, the immunocastration influences the immunocontent of PDI family of chaperones showing a possible association of the initial processes of sperm maturation.
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Atividades proteolíticas e microrganismos envolvidos na maturação do queijo serrano

Dalla Rosa, Tiziano January 2005 (has links)
A proposição do presente trabalho foi avaliar o potencial das enzimas das NSLAB do queijo Serrano quanto às atividades aminopeptidásicas. Seis bateladas de queijo Serrano foram elaboradas (3 no verão e 3 no inverno) por três diferentes produtores (A, B e C) de Caxias do Sul (RS), utilizando leite cru, sem adição de culturas iniciadoras. A atividade das aminopeptidases foi avaliada nas FPS dos queijos e nos extratos aquosos dos microrganismos através da hidrólise dos substratos sintéticos Gly- NA, Arg- NA, Tyr- NA, Leu- NA e Asp- NA, Glu- NA, Lys- NA, e Pro- NA. Nos queijos do produtor A, que apresentaram as maiores atividades (19 a 74 U/g de queijo), foram analisados os amino ácidos livres (AAL) e os resultados revelaram que eles aumentam continuamente, estão presentes em quantidades elevadas (4051 mg/100g de ES do queijo aos 60 d), e os AAL com maiores concentrações nos queijos foram Glu, Arg, Lys, Pro e Leu (juntos representam 58% a 61% do total de AAL). Extratos aquosos das NSLAB dos queijos de verão foram parcialmente purificados por cromatografia de troca iônica de fluxo rápido, utilizando Q-sepharose e incubados com os substratos Glu- NA, Arg- NA, Lys- NA, Leu- NA e Pro- NA, indicando atividade para todos os substratos e que a atividade nas frações mudam nas NSLAB para queijos com diferentes tempos de maturação. Uma comparação das atividades aminopeptidases recuperadas após o zimograma do gel de eletroforese-PAGE das FPS dos queijos e dos microrganismos, sugerem que as PepN, PepC e PepL ativas nas FPS têm suas origens na lise das NSLAB presentes nos mesmos.
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Atividades proteolíticas e microrganismos envolvidos na maturação do queijo serrano

Dalla Rosa, Tiziano January 2005 (has links)
A proposição do presente trabalho foi avaliar o potencial das enzimas das NSLAB do queijo Serrano quanto às atividades aminopeptidásicas. Seis bateladas de queijo Serrano foram elaboradas (3 no verão e 3 no inverno) por três diferentes produtores (A, B e C) de Caxias do Sul (RS), utilizando leite cru, sem adição de culturas iniciadoras. A atividade das aminopeptidases foi avaliada nas FPS dos queijos e nos extratos aquosos dos microrganismos através da hidrólise dos substratos sintéticos Gly- NA, Arg- NA, Tyr- NA, Leu- NA e Asp- NA, Glu- NA, Lys- NA, e Pro- NA. Nos queijos do produtor A, que apresentaram as maiores atividades (19 a 74 U/g de queijo), foram analisados os amino ácidos livres (AAL) e os resultados revelaram que eles aumentam continuamente, estão presentes em quantidades elevadas (4051 mg/100g de ES do queijo aos 60 d), e os AAL com maiores concentrações nos queijos foram Glu, Arg, Lys, Pro e Leu (juntos representam 58% a 61% do total de AAL). Extratos aquosos das NSLAB dos queijos de verão foram parcialmente purificados por cromatografia de troca iônica de fluxo rápido, utilizando Q-sepharose e incubados com os substratos Glu- NA, Arg- NA, Lys- NA, Leu- NA e Pro- NA, indicando atividade para todos os substratos e que a atividade nas frações mudam nas NSLAB para queijos com diferentes tempos de maturação. Uma comparação das atividades aminopeptidases recuperadas após o zimograma do gel de eletroforese-PAGE das FPS dos queijos e dos microrganismos, sugerem que as PepN, PepC e PepL ativas nas FPS têm suas origens na lise das NSLAB presentes nos mesmos.
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Atividades proteolíticas e microrganismos envolvidos na maturação do queijo serrano

Dalla Rosa, Tiziano January 2005 (has links)
A proposição do presente trabalho foi avaliar o potencial das enzimas das NSLAB do queijo Serrano quanto às atividades aminopeptidásicas. Seis bateladas de queijo Serrano foram elaboradas (3 no verão e 3 no inverno) por três diferentes produtores (A, B e C) de Caxias do Sul (RS), utilizando leite cru, sem adição de culturas iniciadoras. A atividade das aminopeptidases foi avaliada nas FPS dos queijos e nos extratos aquosos dos microrganismos através da hidrólise dos substratos sintéticos Gly- NA, Arg- NA, Tyr- NA, Leu- NA e Asp- NA, Glu- NA, Lys- NA, e Pro- NA. Nos queijos do produtor A, que apresentaram as maiores atividades (19 a 74 U/g de queijo), foram analisados os amino ácidos livres (AAL) e os resultados revelaram que eles aumentam continuamente, estão presentes em quantidades elevadas (4051 mg/100g de ES do queijo aos 60 d), e os AAL com maiores concentrações nos queijos foram Glu, Arg, Lys, Pro e Leu (juntos representam 58% a 61% do total de AAL). Extratos aquosos das NSLAB dos queijos de verão foram parcialmente purificados por cromatografia de troca iônica de fluxo rápido, utilizando Q-sepharose e incubados com os substratos Glu- NA, Arg- NA, Lys- NA, Leu- NA e Pro- NA, indicando atividade para todos os substratos e que a atividade nas frações mudam nas NSLAB para queijos com diferentes tempos de maturação. Uma comparação das atividades aminopeptidases recuperadas após o zimograma do gel de eletroforese-PAGE das FPS dos queijos e dos microrganismos, sugerem que as PepN, PepC e PepL ativas nas FPS têm suas origens na lise das NSLAB presentes nos mesmos.
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Determinação das curvas de maturação das variedades citricas (Citrus sinensis L. Osbeck) Pera-rio, Natal, Valencia e Hamlin

Benassi Junior, Mario 27 July 2018 (has links)
Orientador: Roberto Herminio Moretti / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-27T08:07:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 BenassiJunior_Mario_M.pdf: 27050249 bytes, checksum: e9a8aa9e44116e92e66b5b7ebfa53df7 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Foram determinadas as curvas de maturação das quatro principais variedades de Laranja no Estado de São Paulo; Pêra, Natal, Valência, e Hamlin, na safra de 1999, entre março e dezembro, com coletas a cada 14 dias na Hamlin e 28 dias nas demais. Foram estudadas 15 variáveis durante o período de maturação, para as 4 variedades. As seguintes variáveis apresentaram declínio de valores do início para o final da safra; Acidez total titulável variando de 2,16 a 0,76 %, Teor de ácido ascórbico de 65 a 40 mg/100 ml. Apresentaram incremento de valores do início para o final da safra; °Brixde 7 a 13, "Ratio" de 5 a 15, Cor de 35 e 38 (à exceção da Hamlin com 35), Peso do fruto de 0,05 a 0,15 kglfruto, pH de 3 a 3,6, pH com acidez a 0,1 % de 3,2 a 3,8, Teor de polpa no suco de 15 a 25 %, Teor de Prolina de 100 a 1700 mgllitro, Tamanho do fruto de 636 a 310 Frutos/caixa (40,8 kg), Teor de cinzas de 0,3 a 0,6 %, Teor de sólidos solúveis/caixa de 40,8 kg de 1,6 a 3,5 kg e Atividade de Pectinesterase de 20 a 60 PEU x 104.As variáveis Rendimento de suco (50 a 62 %) e Teor de óleo recuperável (0,05 a 0,14 %) não apresentaram tendências específicas ao longo do período de maturação. E entre essas variáveis; Acidez, "Ratio", Prolina, pH e Cinzas responderam a um modelo linear de regressão. °Brix,Teor de sólidos/caixa de 40,8 kg e Ácido ascórbico responderam a um modelo de regressão quadrático. A Hamlin é uma variedade precoce com menores valores; Cor,°Brix, Rendimento,Teorde óleo recuperável,Teor de Prolina, Cinzas, Teor de sólidos/caixa de 40,8 Kg, Atividade de pectinesterase e maior Teor de ácido ascórbico. A Pêra-rio é de meia-estação e tem teores intermediários, tendo maiores valores; pH, Teor de polpa e Teor de Prolina. A Natal é tardia com o maior Peso de fruto e menor Teor de polpa. A Valência é tardia tendo o menor Peso de fruto, e os maiores valores; °Brix, Rendimento de suco, Teor de óleo, Cinzas, Teor de sólidos/caixa e Atividade de pectinesterase. As variáveis de maturação "Ratio" e Acidez foram as mais importantes variáveis para identificar o comportamento de maturação correlacionando-se com 6 (seis) outras variáveis. Em seguida apresentaram alta correlação as variáveis Prolina e Cor com 5 (cinco) variáveis cada uma. As variáveis pH e °Brix apresentaram correlação com outras quatro variáveis. O suco de Laranja tem um alto poder tamponante o que impede que altas variações de pH possam ocorrer, apesar das grandes variações de acidez ocorridas. O suco foi diluído a 0,1 % de acidez e medido o pH, houve um aumento de apenas 0,2 pontos, confirmando seu poder tamponante. / Abstract: The maturation curves of the 4 main Brasilian citrus varieties Pêra-rio, Natal, Valência and Hamlin, growing in the State of São Paulo, were determined. The experiment was realized in the 1999 crop, between march and december. The juice was extracted and 15 parameters were determined for the 4 varieties. The following parameters showed decline of values from the beginning to the end of the season: Total acidity from 2,76 to 0,76%, Ascorbic acid from 65 to 40 mg/100 ml. The others parameters showed an increase of values form the beginning to the end of the season: °Brix from 7 to 13, TSS/Acidity from 5 to 15, Color from 35 to 3S (except Hamlin, with 35), Fruit wheight from 0,05 to 0,15 kg, pH from 3 to 3,6, pH with 0,1 % of acidity trom 3,2 to 3,S, Pulp trom 15 to 25 %, Proline content from 100 to 1700 mglliter, Fruit size from 636 to 310 Fruits/box (40,S kg), Ash content from 0,3 to 0,6 %, TSS lbox(40,S kg) from 1,6 to 3,5, PEU from 20 to 40 PEU x104. Juice perfruit (50 to 62 %) and Recoverable oil (0,05 to 0,14 %) had no especific trends during the season. The parameters Total acidity, TSS/Acidity, Proline, pH and Ash frtted in a linear regression model. °Brix,TSS/box and Ascorbic acid fitted in a quadratic regression model. Hamlin an early variety, showed the lowest Color, °Brix, Juice per box, Recoverable oil, Proline, Ash, TSS/box and PEU and the highest Ascorbic acid content. Pêra-rio a midseason variety, showed a medium content comparing with the other varieties, but had the higest pH, Pulp and Proline. Natal a Iate variety, showed the highest fruit weight and the lowest pulp content with a similar behaviour as Valencia. Valencia a Iate variety, showed the lowest Weight of fruit the highest content of °Brix, Juice per fruit, Recoverable oil, Ash, TSS/box and PEU. TSS/Acidity and Total acidity were the most important parameters to identify maturation behaviour because they presented correlation with 6 other parameters, followed by Proline content, Color, pH and °Brix with lower levels of correlation in number of paramaters. The orange juice of this 4 varieties showed a high buffer level, because the juice was diluted to 0,1 % of total acidity and the pH determination only increased 0,2 points, confirming the buffer property of the juice. / Mestrado / Mestre em Tecnologia de Alimentos
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Danos mecanicos em sementes de amendoim (Arachis hypogaea L.) colhidas em diferentes estagios de maturação

Ticelli, Marcelo 27 July 2018 (has links)
Orientador : Luiz Fernandes Razera / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Agricola / Made available in DSpace on 2018-07-27T23:40:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ticelli_Marcelo_M.pdf: 424261 bytes, checksum: 617246353394c59b237e6363969b1816 (MD5) Previous issue date: 2001 / Mestrado
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Identificação e caracterização de cDNAs expressos diferencialmente durante a maturação dos frutos de Coffea arabica L.

Ribeiro, Fernanda Lattario 03 August 2018 (has links)
Orientadores: Laura Maria Mariscal Ottoboni, Mirian Perez Maluf / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T19:42:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ribeiro_FernandaLattario_M.pdf: 1008298 bytes, checksum: f4425561e8e16a8ff6da119e1c8145c1 (MD5) Previous issue date: 2004 / Mestrado
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Maturação do queijo tipo prato : influencia da adição de enzimas proteoliticas no processo

Silva, Adriana Torres 07 August 1998 (has links)
Orientador: Ariene G. F. Van Dender / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-24T02:07:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_AdrianaTorres_M.pdf: 8802763 bytes, checksum: 4ea01aaac5ae90f433d9b7a9bc51e201 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: A maturação do queijo é um processo complexo envolvendo a formação de variedades de componentes de aroma e sabor por diferentes vias, bem como uma mudança nas propriedades físicas e estruturais da matriz protéica. No queijo Prato este processo corresponde a um período de aproximadamente 40 dias. Este produto tipicamente brasileiro vem sofrendo uma descaracterização progressiva devido principalmente a alterações no processo de cura, visando diminuir os custos. Diante de tal problema a alternativa mais viável consiste na aceleração da maturação, e dentre os métodos empregados, a adição de enzimas proteolíticas é o de mais fácil aplicação prática. Neste trabalho, foram avaliados os parâmetros tecnológicos de fabricação e as variáveis envolvidas na cura do queijo tipo Prato obtido pela adição de enzimas proteolíticas. Foram estudados paralelamente queijos fabricados pelo método tradicional e obtidos com três concentrações de enzima (25, 15 e 10 mg/kg leite) adicionadas à massa antes da pré prensagem. A avaliação da proteólise foi efetuada pelos teores de Nitrogênio (N) solúvel a pH 4,6 e em ácido tricloroacético (TCA) 12%, pela determinação da concentração de tiro sina e triptofano, por reação colorimétrica com ácido trinitrobenzeno sulfônico (TNBS) e ninidrina-cádmio e por eletroforese nos queijos com 1, 7, 14,21,28 e 40 dias de maturação. Os atributos de textura e sensoriais também foram avaliados. O uso da enzima Neutrase® acelerou a proteólise do queijo Prato. Os queijos fabricados pelo método modificado apresentaram já no primeiro dia de maturação e durante todo período da mesma, um índice de extensão (% NS-pH 4,6/NT) e de profundidade (% NS TCA 12%/NT) significativamente maiores do que aqueles fabricados pelo método tradicional, nos processos com adição de 25, 15 e 10 mg enzima/kg leite. Os queijos modificados do processo A (25mg enzima/kg leite) apresentaram um índice de extensão aos 7 dias (17,32%) mais elevado do que o correspondente com 30 dias conforme descrito na literatura (14,0 - 14,5%), ao passo que no processo B (15mg enzima/kg leite) o valor obtido para os queijos com um dia (16,02%) já foi maior. No processo C (10mg enzima/kg leite) um valor próximo (15,61%) àquele correspondente a 30 dias na literatura foi alcançado com 14 dias de maturação. A adição de enzima Neutrase® à massa dos queijos modificados não acarretou perdas no rendimento. Nos processos A e B houve um decréscimo do índice de firmeza até o 210 dia de maturação, correspondendo à primeira fase da maturação onde a quebra da ?S1-caseína promoveu um amolecimento da massa. A região analisada (periferia e centro) influenciou a textura dos queijos. O índice de firmeza nas fatias retiradas da região mediana foi menor do que aquele obtido nas fatias da ponta do queijo. O perfil eletroforético dos queijos mostrou que a adição de enzimas levou a diferenças quantitativas nas frações protéicas dos queijos modificados quando comparados aos tradicionais. Houve uma maior degradação das frações ?S1 e ?-caseínas, com acúmulo maior de alguns produtos de degradação destas duas frações nos queijos modificados. A degradação da fração ?-caseína nos queijos modificados foi maior do que a da ?S1-caseina / Abstract: The ripening process of cheese is a very complex process that involves the development in many different ways of a great variety of flavor compounds that affect the aroma and taste of the finished product. Throughout the ripening process, the protein content undergoes a considerable number of changes that influence its physical and structural properties. The ripening of Prato cheese is completed after about 40 days. In recent times, however, this typically Brazilian product has gradually lost some of its main characteristics due to changes introduced in the ageing procedure by many cheese plants to reduce production costs. In view of the need to incorporate the economic aspects of cheesemaking, the most viable alterative consists in accelerating the ripening process. From a technological standpoint, the addition of proteolytic enzymes is the technique that offers the greatest facility to be implemented in practice. The present research project aimed at evaluating the technological manufacturing parameters and the variables involved in the ageing of Prato cheese obtained with the incorporation of a proteolytic enzyme (Neutrase®). Parallel experiments were conducted to study cheese made without enzyme (traditional method) and cheeses made with the incorporation of three different enzyme concentrations (25, 15 and 10 mg enzyme/kg milk) in the raw curd prior to the pre-pressing stage (modified method). Proteolysis after 1, 7, 14, 21, 28 and 40 days ripening was evaluated by determining: 1) the content of soluble Nitrogen (N) at pH 4,6; 2) the content of soluble nitrogen in a 12% trichloroacetic acid solution; 3) the concentration of tyrosin and tryptophane. Additional methods to determine proteolysis included colorimetric reactions with trinitrobenzene sulphonic acid (TNBS) and ninidrin-cadmium, respectively. Finally, proteolysis was also determined by electrophoresis. The texture and sensorial attributes were also evaluated. The use of Neutrase® accelerated proteolysis in Prato cheese. As for the modified experiments (25, 15 and 10 mg enzyme/kg milk), the cheeses showed, from the very first day of the ripening process on and throughout the rest of the ripening period, extension (% NS-pH 4,6/NT) and depth (% NS TCA 12%/NT) indexes significantly higher in comparison to the values produced by the traditional cheeses manufactured without the addition of enzyme. The modified cheeses of process A (25 mg enzyme/kg milk) presented after 7 days ripening an extension index (17,32%) which was higher than the corresponding index figure obtained for cheese after 30 days ripening described in literature (14,0 - 14,5%). On the other band, the cheeses of process B (15 mg enzyme/kg milk) exceeded (16,02%) the figure referred to in literature (14,0 - 14,5 % after 30 days) already after only 1 day ripening. As for Process C (10 mg enzyme/kg milk), a value quite close (15,61%) to the one referred to in literature for 30 days (14,0 - 14,5%) was reached after 14 days. The incorporation of the enzyme Neutrase® in the curd of modified cheeses did not bring about any losses in terms of cheese yield. Processes A and B showed a decrease ofthe firmness index up to the 21st day ofthe ripening process. This time span of 21 days corresponds to the first stage ofthe breakdown process of ?S1-casein which causes softening of the curd. The texture of the cheeses varied according to the areas submitted to analysis (peripheral and core). The firmness values produced by slices taken from the central part of the cheeses were smaller than those produced by slices taken from the edges. The electrophoretic profile of the cheeses clearly showed that the incorporation of enzymes brought about quantitative differences relative to the protein fractions of the modified cheeses in comparison to the values obtained for the traditional product. A more intense breakdown of the ?S1 and ?-casein fractions is observed, evidenced by higher concentrations of some degradation products of these two fractions found in modified cheeses. The degradation of the ?-casein fraction in the modified cheeses was more intense than the breakdown of ?S1-casein. / Mestrado / Mestre em Tecnologia de Alimentos
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Perfil enológico de uvas viníferas cultivadas no vale do submédio São Francisco

LIMA, Márcia Valéria Dantas de Oliveira 31 January 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T23:02:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8482_1.pdf: 900167 bytes, checksum: 9d03e475d000e7fb4c24be7b02e8627b (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O acompanhamento da maturação de uvas destinadas à vinificação é fundamental para determinar o seu perfil enológico. Considerando que a inexistência de inverno na região do Vale do Submédio São Francisco possibilita a produção de uvas em diferentes períodos do ano, foi realizada esta pesquisa, com vistas a caracterizar as curvas de maturação das Vitis vinifera L. tintas Cabernet Sauvignon, Tempranillo, Syrah e Grenache, em duas safras consecutivas em 2008 e 2009. A área experimental foi instalada numa propriedade comercial situada em Casa Nova-BA, com videiras cultivadas em espaldeira enxertada sobre o portaenxerto IAC 766 e irrigadas por gotejamento. Nas amostras de uvas coletadas semanalmente, do pintor à colheita para vinificação, em plantas representativas de cada cultivar, foram determinadas: massa das bagas, cascas e sementes; volume do mosto; pH; sólidos solúveis totais; acidez total titulável; açúcares redutores; ácidos orgânicos; polifenóis totais; intensidade e tonalidade de cor. Os resultados evidenciaram diferenças entre as safras no que diz respeito ao tempo transcorrido entre o pintor e a colheita, reduzido na segunda safra e evolução dos constituintes físico-químicos, independentemente da variedade. A análise multivariada dos dados ao diferenciar satisfatoriamente as variedades, revelando semelhanças entre Syrah e Tempranillo e variabilidade da Cabernet Sauvignon e Grenache, quanto à concentração desses compostos, demonstra que as uvas das cultivares avaliadas, apresentam distinto potencial enológico, o que requer a adequação dos protocolos de vinificação específicos para a obtenção de vinhos tropicais de qualidade na região
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Inibição e reversão da maturação nuclear, avaliação da maturação citoplasmática e produção de esteróides em complexos cumulus oophorus bovinos co-cultivados com hemi-secções foliculares em meio de cultura definido

Silva, Ingrid de Oliveira e 02 1900 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2008. / Submitted by Jaqueline Oliveira (jaqueoliveiram@gmail.com) on 2008-12-03T17:25:03Z No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO_2008_IngridOliveiraSilva.pdf: 1065354 bytes, checksum: 5c704b05ad9fbdc93257f3bf700ca39a (MD5) / Approved for entry into archive by Georgia Fernandes(georgia@bce.unb.br) on 2009-01-22T13:45:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO_2008_IngridOliveiraSilva.pdf: 1065354 bytes, checksum: 5c704b05ad9fbdc93257f3bf700ca39a (MD5) / Made available in DSpace on 2009-01-22T13:45:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO_2008_IngridOliveiraSilva.pdf: 1065354 bytes, checksum: 5c704b05ad9fbdc93257f3bf700ca39a (MD5) / O presente trabalho teve o objetivo de padronizar um protocolo de pré-maturação, onde complexos cumulus oophorus (COCs- do inglês cumulus oocyte complex) bovinos imaturos são co-cultivados com hemi-secções foliculares (HS) em meio definido (α-MEM+PVA). No experimento 1 foi avaliado, o efeito deste co-cultivo pelo período de 24 horas na manutenção do estágio imaturo dos COCs. Os grupos experimentais avaliados foram: G1=TCM- 199+SFB+COCs; G2=TCM-199+SFB+HS+COCs; G3=α-MEM+PVA+COCs; G4=α- MEM+PVA+HS+COCs. No experimento 2, foi feita a avaliação do potencial de reversibilidade do processo inibitório após a pré-maturação, cultivando os COCs previamente pré-maturados em meio de maturação padrão (TCM-199+SFB). Os meios de cultivo destes experimentos foram armazenados a –20° C para posterior dosagem dos hormônios estradiol (E2) e progesterona (P4) com a utilização de kits de radioimunoensaio. Em média 4 COCs de cada tratamento dos experimentos 1 e 2 foram processados para análise da maturação citoplasmática ao microscópio eletrônico de transmissão. Os resultados do experimento 1 mostram que, os tratamentos G2, G3 e G4 foram efetivos na inibição da progressão da meiose, com respectivamente 81,2; 74,0 e 96,3% dos COCs imaturos. O tratamento G1 (controle) apresentou ao final do tempo de cultivo 83,1% de COCs maduros; P<0,05. No experimento 2, somente os grupos G1 e G3 apresentaram mais de 80% de oócitos maduros ao final das 24 horas de cultura em meio padrão. Os grupos G2 e G4 apresentaram apenas 29,1 e 16,3% respectivamente dos COCs maduros ao final do cultivo; P<0,05. A dosagem dos hormônios esteróides mostrou no experimento 1, que o grupo G3 apresentou a maior produção de E2 (2444,24 pg/mL) e menor produção de P4 (3,47 ng/mL); P<0,0001. A produção de P4 foi máxima no grupo G2 (77,87 ng/mL). A presença das HS promoveu o aumento da produção deste hormônio nos grupos G2 e G4. No experimento 2, a concentração de E2 foi maior no grupo pré-maturado em meio definido, assim como a concentração de P4, que foi significativamente maior neste tratamento (G3), 42,82 ng/mL; P< 0,0032. A análise ultraestrutural dos COCs mostrou que a presença das HS (grupos G2 e G4) provoca a morte destes ainda no período de pré-maturação. No grupo G3, foi observado que o meio de cultivo α-MEM+PVA promoveu o início da maturação citoplasmática durante a pré-maturação. No experimento 2, este processo foi completado após o cultivo em meio de maturação padrão. Conclui-se portanto que o meio de cultura α-MEM+PVA fornece um ambiente adequado para que os COCs sofram a pré-maturação, já que a relação E2:P4 neste sistema é condizente com a fase em que os COCs se encontram, além de que este meio propicia uma alta taxa de inibição da maturação nuclear seguida de uma grande porcentagem de reversão desta inibição. Outro fato importante foi que a maturação citoplasmática foi iniciada ainda no período de prématuração, e chegou a termo durante a maturação in vitro. O co-cultivo com HS, no entanto, não gerou resultados promissores. ___________________________________________________________________________________ ABSTRACT / This study aimed to standardize a physiological protocol of pre- maturation, where immature bovine cumulus oocyte complex (COCs) are co-cultured with follicular hemissections (HS) in defined medium (α-MEM + PVA). In the first experiment it was evaluated, the effect of this co-culture for the period of 24 hours in the maintenance of COCs’ immature stage. The following experimental groups evaluated were: G1=TCM-199 +FCS+COCs; G2=TCM- 199+FCS+HS+COCs; G3=α-MEM+PVA+COCs; G4=α-MEM+PVA+HS+COCs. The experiment 2 was performed to assess the reversibility potential of the inhibitory process after the pre-maturation. COCs previously pre-matured were cultured in standard medium of maturation (TCM-199 + SFB). The culture medium of these experiments were stored at -20° C for later dosage of hormones estradiol (E2) and progesterone (P4) with radioimmunoassay kits. On average 4 COCs of each treatment of experiments 1 and 2 were processed for cytoplasmic maturation analysis at the transmission electron microscope. The results of the experiment 1 show that the treatments G2, G3 and G4 were effective in maintain meiotic arrest, with 81.2, 74.0 and 96.3% respectively of immature COCs. Treatment G1 (control) showed at the end of culture 83.1% of mature COCs, P <0.05. In experiment 2, only the groups G1 and G3 showed more than 80% of mature oocytes at the end of 24 hours of culture in the medium standard. The groups G2 and G4 had only 29.1 and 16.3% respectively of the mature COCs at the end of the culture, P<0.05. The dosage of steroid hormones in Experiment 1 showed that the G3 had the highest production of E2 (2444.24 pg / mL) and lower production of P4 (3.47 ng / mL), P <0.0001. The production of P4 was the highest in group G2 (77.87 ng / mL). Due the presence of HS there was an increasing production of this hormone in groups G2 and G4. In experiment 2, the concentration of E2 was higher in group pre-matured in defined medium, as well as the concentration of P4, which was significantly higher in this treatment, 42.82 ng / mL, P<0.0032.The ultrastructural analysis of the COCs showed that the presence of HS (groups G2 and G4) causes the cellular death still in the prematuration culture. In group G3, it was observed that the medium α-MEM + PVA promoted the beginning of the cytoplasmic maturation during the pre-maturation. In experiment 2, this process has been completed after culture in standard maturation medium. It comes to the conclusion that the culture α-MEM + PVA provides a suitable environment for the COCs suffer a pre-maturation, as the relationship E2: P4 in this system is consistent with the stage in which the COCs are. In addition, this system provides a high rate of inhibition of nuclear maturation followed by a large percentage of reversal of this inhibition. Another important fact is that the cytoplasmic maturation began still in the prematuration period, and finished during in vitro maturation. The co-culture with HS, didn’t generate promising results.

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