Made available in DSpace on 2013-08-07T19:06:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000413832-Texto+Completo-0.pdf: 10977222 bytes, checksum: 57ede65b6619980480494bbe479e7a6a (MD5) Previous issue date: 2009 / Introduction: although it is becoming less frequent, meconium aspiration syndrome is still a common cause of severe respiratory distress in term neonates. Meconium has an inhibitory effect over the surfactant system and the bronchoalveolar lavage and surfactant replacement have been studied in recent years. Objective: to evaluate the effect of bronchoalveolar lavage with diluted surfactant followed by a supplementary dose of surfactant in a piglet model of meconium aspiration syndrome. Methods: 25 newborn piglets were used in the study. The animals were artificially ventilated with fixed settings throughout the study. After istillation of 5ml/kg of meconium diluted to 20% in isotonic saline, the piglets were randomized in the following groups: group I (n=9) - control; group II (n=6) - bronchoalveolar lavage with diluted surfactant (15ml/kg); group III (n=5) - bronchoalveolar lavage with diluted surfactant (15ml/kg) followed by a supplementary dose of surfactant (Curosurf® 100mg/kg); and group IV (n=5) – dose of surfactant without bronchoalveolar lavage. Arterial blood gases sample were obtained 30 minutes and 3 hours after the inhalation of meconium. Results: values for PaO2 were significantly higher at 30 min after meconium aspiration in the animals from group III compared to group I [ PaO2 44+27 and 10+11 respectively (p=0,005)]. Three hours after the intervention, the oxygenation in group III was also better then in the control group [ PaO2 69+65 e 12+21, respectively (p=0,03)]. Conclusion: bronchoalveolar lavage with diluted surfactant followed by a supplementary dose of surfactant improves oxygenation in experimental piglet model of meconium aspiration syndrome. / Introdução: apesar de estar ocorrendo com menos freqüência, a síndrome de aspiração de mecônio ainda é uma causa comum de insuficiência respiratória em recémnascidos a termo. Devido à inativação do surfactante pelo mecônio, o lavado broncoalveolar e a reposição de surfactante vêm sendo estudados nos últimos anos. Objetivo: avaliar o efeito do lavado broncoalveolar com surfactante diluído e dose complementar de surfactante em modelo animal de síndrome de aspiração de mecônio. Métodos: foram utilizados 25 porcos a termo recém-nascidos, sendo ventilados com parâmetros fixos durante todo o estudo. Após a indução da aspiração de mecônio com 5ml/kg de mecônio a 20%, os animais foram randomizados em 4 grupos: grupo I (n=9) - controle; grupo II (n=6) - lavado broncoalveolar com surfactante diluído (15ml/kg); grupo III (n=5) - lavado broncoalveolar com surfactante diluído (15ml/kg) seguido de dose complementar de surfactante (Curosurf® 100mg/kg); e grupo IV (n=5) - dose de surfactante (Curosurf® 100mg/kg) sem lavado broncoalveolar. As gasometrias arteriais foram coletadas 30 minutos e 3 horas após a administração do mecônio. Resultados: houve melhora significativa da PaO2 na gasometria coletada 30 minutos após a indução da síndrome de aspiração de mecônio apenas no grupo III comparativamente ao grupo I [ PaO2 44+27 e 10+11, respectivamente (p=0,005)]. Após 3 horas da intervenção, manteve-se uma melhora na oxigenação apenas do grupo III comparativamente ao grupo controle [ PaO2 69+65 e 12+21, respectivamente (p=0,03)]. Conclusão: a realização de lavado broncoalveolar com surfactante diluído seguida de dose complementar de surfactante melhora a oxigenação em curto prazo em modelo experimental de síndrome de aspiração de mecônio.

O mecônio é uma matéria fecal que começa a acumular no intestino do feto por volta do terceiro mês de gestação e normalmente é eliminado nos primeiros dias de vida do recém nascido. No mecônio ocorre o acúmulo de substâncias com as quais a mãe entrou em contato durante o período de gestação e, portanto, sendo possível avaliar a exposição fetal. Nos casos de mães fumantes, compostos presentes no tabaco tais como nicotina e substâncias que são formadas após a metabolização da nicotina como por exemplo a cotinina, podem ser também detectadas nas amostras de mecônio, já que ocorre o acúmulo de nicotina e seus metabólitos no mesmo. O uso do cigarro durante o período gestacional acarreta em uma série de problemas ao feto como baixo peso ao nascer, parto pré-maturo, doenças no trato respiratório, dentre outros. Nos dias atuais é possível fazer a pesquisa de drogas lícitas e ilícitas em várias amostras biológicas tais como, sangue, urina, cabelo, fluido oral, mecônio, entre outras. O mecônio é uma boa opção, por vários motivos: amostragem fácil e não invasiva (a coleta pode ser feita na fralda), indica o histórico do uso de substâncias pela mãe durante a gestação por ser cumulativo, etc. O objetivo foi desenvolver e validar um método analítico empregando cromatografia em fase gasosa acoplada a espectrometria de massas para a determinação de nicotina e, seu metabólito, cotinina em amostras de mecônio coletadas de recém nascidos. Para o desenvolvimento do método foi utilizado 0,5g de mecônio e os analitos foram extraídos com metanol e em seguida a amostra foi submetida a purificação através da extração em fase sólida utilizando cartuchos Bond Elut Certify I. O método foi validado de acordo com os parâmetros estabelecidos pela ANVISA e demonstrou linearidade de 160 1600 ng/g para nicotina e de 160 1000 ng/g para cotinina. Os limites de detecção estabelecidos foram de 10 ng/g para nicotina e 60 ng/g para cotinina, enquanto os limites de quantificação foram de 60 ng/g para nicotina e 100 ng/g para cotinina. A exatidão apresentou valores de 91,73% a 103,73%, a precisão intra-ensaio variou entre 3,21% a 10,86%, e a precisão inter-ensaio obteve valores entre 4,91% a 9,88%. O método validado foi aplicado em amostras de mecônio coletadas no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (HCFMRP-USP). / Meconium is a fecal matter passed by the newborn after birth. It begins to form around the 3th month of gestation and accumulates in the fetus until birth. Substances which the mothers had contact during the gestation period may accumulate in meconium and, therefore, its possible to assess fetal exposure. Substances from the tobacco smoke, like nicotine and its metabolite cotinine, also accumulates in the meconium and can be detected .Maternal smoking during pregnancy is hazardous to the fetus and it is associated with low birth weight, prematurity, respiratory tract infections and others. Nowadays it is possible to assess licit and illicit drugs in several biological samples like blood, urine, hair, oral fluid, meconium and others. Meconium is the best choice because its easy to collect and its noninvasive, indicates a history of substances use by the mother in the latter half of pregnancy, etc. The purpose of this study was to develop and validate a methodology using gas chromatography-mass spectrometry to assess nicotine and cotinine in meconium samples collected from newborns. To the development of the methodology 0,5g of meconium was used per assay and the analytes were extracted from the matrix using methanol. Then, a solid phase extraction was applied using Bond Elut Certify I cartridges. The methodology was validated in the range of 160 1600 ng/g for nicotine and 160 - 1000 ng/g for cotinine. The limit of detection established was 10 ng/g for nicotine and 60 ng/g for cotinine, while the limit of quantification was 60 ng/g for nicotine and 100 ng/g for cotinine. The accuracy showed values between 91,73% and 103,73%, the intra-assay precision between 3,21% and 10,86% and the inter-assay precision between 4,91% and 9,88%. The validated methodology was applied to analysis of meconium samples collected from newborns in the Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (HCFMRP-USP).

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:06:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000422804-Texto+Completo-0.pdf: 1388068 bytes, checksum: 46ed542c6211d43c59728550953b54e0 (MD5) Previous issue date: 2010 / Introduction: meconium aspiration syndrome (MAS) is one of the most significant respiratory diseases in the neonatal period. Surfactant therapy has only modest impact on MAS outcome. Meconium is a potent surfactant inhibitor. Non-ionic polymers reverse surfactant inhibition caused by meconium in vitro. Surfactant treatment in animal models do not show consistent results. Objective: to evaluate the effect of non-ionic polymers on surfactant activity in vitro and added to in animal model of meconium aspiration syndrome. Methods: measurements of adsorption and minimal surface tension of surfactant solutions with added dextran or polyethylene glycol (PEG) attained by captive bubble surfactometer. Animal experiment consisted of 16 newborn piglets submitted to MAS by instillation of 5 ml/kg of 20% meconium. There were divided in three groups: l. controls (n=5): ll. surfactant 100 mg/kg (n=5); lll. surfactant -PEG 7,5% (n=6). The experiments lasted for 6 hours. The responses to different treatments were evaluated by serial arterial blood gases. Results: adding dextran and PEG improved surfactant function. PaO2 values (mean ± SEM) at 30 minutes after treatment of MAS were: Group l= 66. 80 ± 21. 12 mmHg; Group ll= 68. 12 ± 19. 41 mmHg; and Group lll= 61. 33 ± 16. 18 mmHg (P=0. 817 ). At 3 hours after treatment values were: Group l= 90. 60 ± 68. 12 mmHg; Group ll= 72. 18 ± 34. 83 mmHg; Group lll= 69. 00 ± 24. 46 (P= 0. 711 ). At 6 hours after treatment values were: Group l= 76. 60 ± 48. 04 mmHg; Group ll= 99. 00 ± 94,17 mmHg; Group lll= 60. 83 ± 19. 18 mmHg (P=0586). Multivariate ANOVA modified for repeated measures was not significant among the three groups (P= 0. 560). Conclusions: adding PEG to surfactant has no effect in the hypoxemic respiratory failure due to MAS, despite the improvement of surfactant properties in vitro. / Introdução: a síndrome da aspiração de mecônio (SAM) é uma das doenças respiratórias mais importantes no período neonatal. O tratamento com surfactante exógeno apresenta uma resposta muito modesta. O mecônio é um potente inibidor da função surfactante. Polímeros não iônicos adicionados ao surfactante neutralizam a inibição causada pelo mecônio in vitro. Os resultados do uso de surfactante em modelos experimentais não apresentam respostas consistentes. Objetivo: avaliar o efeito de polímeros não iônicos na função surfactante in vitro e em modelo experimental de síndrome de aspiração de mecônio. Método: a medidas da adsorção e da tensão superficial mínima de soluções de surfactante contendo dextran e polietilenoglicol (PEG) foram avaliados pelo surfactômetro da bolha cativa. O experimento in vivo, foi realizado com 16 porcos recém-nascidos nos quais a aspiração de mecônio foi provocada pela instilação de 5 ml/kg de mecônio a 20%. Os animais foram divididos em três grupos: l. controle (n=5); ll. surfactante 100mg/kg (n=5); lll. surfactante-polietilenoglicol 7,5% (n=6). O período de observação foi de 6 horas. A resposta aos diversos tratamentos foi avaliada por gasometrias arteriais seriadas. Resultados: a adição de dextran e PEG melhorou o desempenho do surfactante avaliado pelo surfactômetro da bolha cativa. Os valores da PaO2 (média ± desvio padrão) aos 30 minutos após o tratamento da SAM foram: Grupo l= 66,8 ± 21,12 mmHg; Grupo ll= 68,12 ± 19,41 mmHg; e no Grupo lll= 61,33 ± 16,18 mmHg (P= 0,817 ). Com 3 horas após tratamento os valores foram: Grupo l= 90,60 ± 68,12 mmHg; Grupo ll= 72,18 ± 34,83 mmHg; Grupo lll= 69,00 ± 24,46 (P= 0,711 ). Com 6 horas após tratamento, os valores foram: Grupo l= 76,60 ± 48,04 mmHg; Grupo ll= 99,00 ± 94,17 mmHg; Grupo lll= 60,83 ± 19,18 mmHg (P= 0,586). ANOVA multivariada xvi modificada para medidas repetidas não demonstrou diferença significativa entre os três grupos (P= 0,560). Conclusão: adição de PEG ao surfactante não modificou o quadro de insuficiência respiratória hipoxêmica grave causada pela SAM, apesar de melhorar o desempenho do surfactante in vitro.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:06:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000422046-Texto+Completo-0.pdf: 3689751 bytes, checksum: 00b671824e3b0da2d618137848e9734c (MD5) Previous issue date: 2009 / Introduction: meconium aspiration syndrome is a cause of severe respiratory distress and mortality in term neonates. Due to meconium´s obstructive effect on the airways and its inhibitory action over the surfactant system, treatment with bronchoalveolar lavage and surfactant replacement have been evaluated in recent years. The best timing for the procedure is yet to be determined. Objective: to compare the effect of early and late administration of bronchoalveolar lavage with diluted surfactant followed by a supplementary dose of surfactant carried out in a piglet model of meconium aspiration syndrome. Methods: 15 newborn piglets were studied. The animals were mechanically ventilated with fixed settings throughout the study. Meconium aspiration syndrome was induced by instillation of 5 ml/kg of meconium diluted to 20% in isotonic saline, and afterwards the piglets were randomly allocated to one of the following groups: group I (n=5) - control; group II (n=5) - bronchoalveolar lavage with diluted surfactant (15 ml/kg) followed by a supplementary dose of alpha poractant surfactant (Curosurf®) 100 mg/kg – early administration; group III (n=5) - bronchoalveolar lavage with diluted surfactant (15 ml/kg) followed by a supplementary dose of alpha poractant surfactant 100 mg/kg – late administration. Arterial blood gases were measured six times at specific intervals during the six hours of the study. Results: mean PaO2 before immediate and late interventions were 52. 60±13. 33 and 66±32. 27 mmHg (p=0. 658); 30 minutes after each of the therapeutic procedures 96. 80±33. 07 and 101. 40±86. 74 mmHg (p=0. 894); and three hours following each intervention 122. 80±76. 79 and 142. 20±113. 71 mmHg (p=0. 672), respectively. The improvement in oxygenation observed three hours after the procedure was statistically significant both in the early [DPaO2=70. 20±23. 67 (p=0. 013)] and in the late [DPaO2=92. 48±35. 16 (p=0. 022)] intervention groups, and this was not observed in the control group. Conclusion: Bronchoalveolar lavage with diluted surfactant followed by a supplementary dose of surfactant administered three hours after the induction of disease improved oxygenation in a similar way as did the immediate administration of the same treatment in an experimental model of meconium aspiration syndrome. Both immediate and late interventions improved oxygenation when compared to a control group. / Introdução: a síndrome de aspiração de mecônio é causa de insuficiência respiratória grave e de mortalidade significativa em neonatos a termo. Devido à obstrução das vias aéreas e à inativação do surfactante causados pelo mecônio, o lavado broncoalveolar e a reposição de surfactante vêm sendo estudados nos últimos anos. O momento ótimo para a intervenção terapêutica ainda não está determinado. Objetivo: comparar o efeito do uso precoce com o efeito do uso tardio da intervenção com lavado broncoalveolar com surfactante diluído, seguido de uma dose complementar de surfactante, em um modelo animal de síndrome de aspiração de mecônio. Métodos: utilizaram-se 15 porcos recém-nascidos, ventilados com parâmetros fixos durante todo o experimento. Após a indução da aspiração de mecônio com 5 ml/kg de mecônio a 20%, os animais foram randomizados em 3 grupos: grupo I (n=5) - controle; grupo II (n=5) - lavado broncoalveolar com surfactante diluído (15 ml/kg) seguido de dose complementar de surfactante alfa poractante (Curosurf®) 100 mg/kg - intervenção precoce; grupo III (n=5) - lavado broncoalveolar com surfactante diluído (15 ml/kg) seguido de dose complementar de surfactante alfa poractante 100 mg/kg - intervenção tardia. Seis gasometrias arteriais foram coletadas em intervalos específicos ao longo das seis horas do experimento. Resultados: os valores médios de PaO2 antes das intervenções precoce e tardia foram 52,60±13,33 e 66±32,27 mmHg (p=0,658); 30 minutos após cada procedimento terapêutico 96,80±33,07 e 101,40±86,74 mmHg (p=0,894); e três horas após cada um dos tratamentos 122,80±76,79 e 142,20±113,71 mmHg (p= 0,672), respectivamente. A melhora na oxigenação três horas após a intervenção foi significativa tanto no grupo da intervenção precoce [(ΔDPaO2 = 70,20±23,67 (p=0,013)] quanto no da intervenção tardia [(ΔPaO2 = 92,48±35,16 (p=0,022)], o que não foi observado no grupo controle. Conclusão: o lavado broncoalveolar com surfactante diluído, seguido de dose complementar de surfactante, aplicado três horas após a indução da doença, produziu uma melhora na oxigenação em curto prazo semelhante aquela obtida com sua aplicação imediata, em modelo experimental de síndrome de aspiração de mecônio. Ambas as intervenções produziram uma melhora na oxigenação em curto prazo, quando comparadas a um grupo controle.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:06:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000442214-Texto+Completo-0.pdf: 490211 bytes, checksum: 0261605ef315e91b9f475f503e9a7066 (MD5) Previous issue date: 2012 / Introduction: Meconium Aspiration Syndrome (MAS) is a complex disease that can cause varying degrees of respiratory failure in newborns. The use of broncho alveolar lavage (BAL) and surfactant therapy has been tested in humans and in animal models getting promising results as well as Bag-squezing maneuver has shown good results in adults Aims: To evaluate the effects of the combination of Bag Squeezing maneuver with broncho-alveolar surfactant in an experimental model of Meconium Aspiration Syndrome in newborn pigs. Methodology: were used in the study newborn pigs (n = 15), ventilated with fixed parameters. After instillation of human meconium 4ml/Kg diluted to 20%, the pigs were randomized into three groups: CONTROL-SAM model subjected only aspiration (n = 5), Grupo BAL-SAM model treated only with surfactant BAL (n = 5), and Grupo BAL + BAG-SAM model treated with BAL with surfactant associated with Bag Squeezing maneuver (n = 5). For the LBA was used 15ml/kg of Curosurf ™ diluted in NaCl (5mg/ml). Blood gases, vital signs and behavior of mechanical ventilation were analyzed throughout the study. Results: The that group received a BAL + BAG improved blood gas, reducted of airway resistance (p = 0, 004) and compliance lung (p = 0. 003) better than the other groups with a significant increase in the amount of meconium removed (p = 0. 046) with the bag-squeezing maneuver. Conclusion: The association of Bag-squeezing maneuver can bring benefits to gasometric parameters mechanical ventilation and increase the removal of meconium. / Introdução: A Síndrome de Aspiração de Mecônio (SAM) é uma doença complexa que pode gerar vários graus de insuficiência respiratória em recém-nascidos. A utilização do lavado bronco alveolar (LBA) com surfactante como terapia vem sendo testada em humanos e em modelos animais obtendo resultados promissores assim como a manobra de Bag-squezing tem demonstrado bons resultados em adultos Objetivo: Avaliar os efeitos da associação da manobra de Bag-Squeezing com Lavado bronco alveolar com surfactante em modelo experimental de Síndrome de Aspiração de Mecônio em suínos recém-nascidos. Metodologia: Foram utilizados no estudo suínos recém-nascidos (n=15), ventilados com parâmetros fixos. Após a instilação de 4ml/Kg de mecônio humano diluído a 20%, os suínos foram randomizados em três grupos: Grupo CONTROLEmodelo de SAM submetido somente aspiração (n=5), Grupo LBA-modelo de SAM tratado somente com LBA surfactante(n=5), e o Grupo LBA+BAG-modelo de SAM tratado com LBA com surfactante associado à manobra de Bag-Squeezing (n=5). Para o LBA, foi utilizado 15ml/kg de Curosurf® diluído em NaCl (5mg/ml). Gases arteriais, sinais vitais e comportamento da mecânica ventilatória foram analisados ao longo do estudo. Resultados: O grupo LBA+BAG obteve uma melhora gasométrica e redução da resistência nas vias aéreas (p=0, 004) e complacência pulmonar (p=0,003) melhores em relação aos demais grupos, com significativo aumento na quantidade de mecônio removido (p= 0,046) com a manobra de Bag-squeezing. Conclusão: a associação da manobra de Bag-squeezing pode trazer benefícios aos parâmetros gasométricos, de mecânica ventilatoria e incrementar a remoção.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:07:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000438704-Texto+Completo-0.pdf: 1089872 bytes, checksum: 26e9b82adb7d51a185543e38c2cdc8d2 (MD5) Previous issue date: 2011 / BACKGROUND: Due to meconium's obstructive effect on the airways and its inhibitory action over the surfactant system, treatment with bronchoalveolar lavage and surfactant replacement are currently under evaluation. OBJECTIVE: To evaluate, in an experimental model, the effect on the arterial blood gases and pulmonary mechanics of the treatment of meconium aspiration syndrome with exogenous surfactant, preceded or not of bronchoalveolar lavage with diluted surfactant in low volumes. DESIGN/METHODS: 21 newborn piglets were mechanically ventilated with predetermined settings. Meconium aspiration syndrome was induced by instillation of 5 ml/kg of meconium 20% diluted in isotonic saline, and afterwards the piglets were randomly allocated to: group I (n=7) - control; group II (n=7) - surfactant (Curosurf®) 200mg/kg; group III (n=7) - bronchoalveolar lavage with diluted surfactant 5mg/ml (15 ml/kg in 2ml aliquots), followed by a supplementary dose of surfactant 125mg/kg. Arterial blood gases, compliance, resistance, and tidal volume were measured five times at specific intervals during the six hours of the study. RESULTS: After instillation of meconium, before treatment, the PaO2 fell to a mean of 50mmHg and the PaCO2 increased to 76mmHg (no statistically difference among groups). Mean PaO2 (mmHg) in groups I, II and III were 72, 106 and 172 (p=0,01); 70, 95 and 198 (p<0. 01); 79, 110 and 217 (p=0. 01) at 30 minutes, 3 and 6 hours after treatment, respectively. Mean PaCO2 (mmHg) in Groups I, II and III were 81, 65 and 35 (p=0. 01); 82, 59 and 37 (p=0. 01); 82, 75 and 32 (p<0. 01) at 30', 3 and 6 hours after treatment, respectively. Mean Compliance (ml/cmH2O) in Groups I, II, III were 0. 76, 1. 01 and 1. 57 (p<0. 05); 1. 02, 0. 69, e 1. 79(p<0. 05) at 30 minutes and 6 hours after treatment, respectively. Mean resistance (cmH2O/L/S) in Groups I, II, III were 422. 57, 385. 29 and 268. 86 (p<0. 05); 408. 83, 564. 86 e 248. 43(p<0. 05) at 30 minutes and 6 hours after treatment, respectively. CONCLUSIONS: Bronchoalveolar lavage with diluted surfactant, with low volumes and small aliquots, followed by a supplementary dose of surfactant, significantly improved arterial blood gases and pulmonary function measurements when compared to the administration of a single dose of surfactant in an experimental model of meconium aspiration syndrome. / INTRODUÇÃO: devido ao efeito obstrutivo do mecônio nas vias aéreas e a ação inibitória sobre o sistema surfactante, o lavado broncoalveolar e a reposição de surfactante estão sendo avaliados nos últimos tempos para o tratamento da síndrome da aspiração de mecônio. OBJETIVO: Avaliar, em modelo experimental, o efeito sobre os gases sanguíneos arteriais e a mecânica pulmonar do tratamento da síndrome de aspiração de mecônio grave com surfactante exógeno, precedido ou não de lavado broncoalveolar com surfactante diluído em pequenos volumes.MÉTODOS: 21 porcos recém-nascidos eram ventilados mecanicamente com parâmetros respiratórios predeterminados. Para induzir a síndrome de aspiração de mecônio foi instilado 5ml/kg de mecônio diluído a 20% em solução salina isotônica. Após, os porcos foram randomizados em 3 grupos: grupo I (n=7) - controle; grupo II (n=7) - surfactante (Curosurf®) 200mg/kg; grupo III (n=7) - lavado broncoalveolar com surfactante diluído – 5mg/ml (15ml/kg em alíquotas de 2ml) seguido de uma dose suplementar de surfactante 125mg/kg. Gases arteriais sanguíneos, complacência, resistência e volume corrente foram avaliados durante as 6 horas do estudo em 5 momentos específicos. RESULTADOS: após a instilação de mecônio, antes do tratamento, a PaO2 caiu para uma média em torno de 50mmHg e a PaCO2 aumentou para uma média em torno de 76mmHg, não havendo diferença significativa entre os grupos. Após o tratamento a média da PaO2(mmHg) nos grupos I, II e III aos 30 minutos, 3 e 6 horas foi de 72, 106 e 172 (p=0,01) - 70, 95 e 198 (p<0,01) e 79, 110 e 217 (p=0,01), respectivamente. A média da PaCO2 (mmHg) nos grupos I, II e III foi 81, 65 e 35 (p=0,01) - 82, 59 e 37 (p=0,01) e 83, 75 e 33 (p<0,01), respectivamente. Após o tratamento a média da complacência (ml/cmH2O) aos 30 minutos e 6 horas nos grupos I, II, III foi de 0,76, 1,01 e 1,57(p<0,05) e de 1,02, 0,69 e 1,79 (p<0,05), respectivamente. A média da resistência (cmH2O/L/S) nos grupos I, II e III foi de 422,57, 385,29 e 268,86(p<0,05) e de 408,83, 564,86 e 248,43 (p<0,05) aos 30 minutos e 6 horas, respectivamente. CONCLUSÃO: o lavado broncoalveolar com surfactante diluído, com baixos volumes e pequenas alíquotas, seguido por uma dose suplementar de surfactante, melhorou significativamente os gases sanguíneos arteriais e a mecânica pulmonar quando comparado com uma dose de surfactante sem lavado broncoalveolar e com um grupo controle, em um modelo experimental de síndrome de aspiração de mecônio.

O mecônio é uma matéria fecal que começa a acumular no intestino do feto por volta do terceiro mês de gestação e normalmente é eliminado nos primeiros dias de vida do recém nascido. No mecônio ocorre o acúmulo de substâncias com as quais a mãe entrou em contato durante o período de gestação e, portanto, sendo possível avaliar a exposição fetal. Nos casos de mães fumantes, compostos presentes no tabaco tais como nicotina e substâncias que são formadas após a metabolização da nicotina como por exemplo a cotinina, podem ser também detectadas nas amostras de mecônio, já que ocorre o acúmulo de nicotina e seus metabólitos no mesmo. O uso do cigarro durante o período gestacional acarreta em uma série de problemas ao feto como baixo peso ao nascer, parto pré-maturo, doenças no trato respiratório, dentre outros. Nos dias atuais é possível fazer a pesquisa de drogas lícitas e ilícitas em várias amostras biológicas tais como, sangue, urina, cabelo, fluido oral, mecônio, entre outras. O mecônio é uma boa opção, por vários motivos: amostragem fácil e não invasiva (a coleta pode ser feita na fralda), indica o histórico do uso de substâncias pela mãe durante a gestação por ser cumulativo, etc. O objetivo foi desenvolver e validar um método analítico empregando cromatografia em fase gasosa acoplada a espectrometria de massas para a determinação de nicotina e, seu metabólito, cotinina em amostras de mecônio coletadas de recém nascidos. Para o desenvolvimento do método foi utilizado 0,5g de mecônio e os analitos foram extraídos com metanol e em seguida a amostra foi submetida a purificação através da extração em fase sólida utilizando cartuchos Bond Elut Certify I. O método foi validado de acordo com os parâmetros estabelecidos pela ANVISA e demonstrou linearidade de 160 1600 ng/g para nicotina e de 160 1000 ng/g para cotinina. Os limites de detecção estabelecidos foram de 10 ng/g para nicotina e 60 ng/g para cotinina, enquanto os limites de quantificação foram de 60 ng/g para nicotina e 100 ng/g para cotinina. A exatidão apresentou valores de 91,73% a 103,73%, a precisão intra-ensaio variou entre 3,21% a 10,86%, e a precisão inter-ensaio obteve valores entre 4,91% a 9,88%. O método validado foi aplicado em amostras de mecônio coletadas no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (HCFMRP-USP). / Meconium is a fecal matter passed by the newborn after birth. It begins to form around the 3th month of gestation and accumulates in the fetus until birth. Substances which the mothers had contact during the gestation period may accumulate in meconium and, therefore, its possible to assess fetal exposure. Substances from the tobacco smoke, like nicotine and its metabolite cotinine, also accumulates in the meconium and can be detected .Maternal smoking during pregnancy is hazardous to the fetus and it is associated with low birth weight, prematurity, respiratory tract infections and others. Nowadays it is possible to assess licit and illicit drugs in several biological samples like blood, urine, hair, oral fluid, meconium and others. Meconium is the best choice because its easy to collect and its noninvasive, indicates a history of substances use by the mother in the latter half of pregnancy, etc. The purpose of this study was to develop and validate a methodology using gas chromatography-mass spectrometry to assess nicotine and cotinine in meconium samples collected from newborns. To the development of the methodology 0,5g of meconium was used per assay and the analytes were extracted from the matrix using methanol. Then, a solid phase extraction was applied using Bond Elut Certify I cartridges. The methodology was validated in the range of 160 1600 ng/g for nicotine and 160 - 1000 ng/g for cotinine. The limit of detection established was 10 ng/g for nicotine and 60 ng/g for cotinine, while the limit of quantification was 60 ng/g for nicotine and 100 ng/g for cotinine. The accuracy showed values between 91,73% and 103,73%, the intra-assay precision between 3,21% and 10,86% and the inter-assay precision between 4,91% and 9,88%. The validated methodology was applied to analysis of meconium samples collected from newborns in the Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (HCFMRP-USP).

O uso de drogas por mulheres em idade reprodutiva é considerado um grave problema de saúde pública mundial. O mecônio é a primeira excreção do recém-nascido e tem sido utilizado como uma matriz alternativa em análises toxicológicas. A extração em fase sólida (SPE) é um método amplamente utilizado para a purificação e concentração dos analitos em amostras biológicas no campo da análise forense. A maioria dos produtos de SPE convencionais requerem volumes relativamente grandes de solventes levando a um custo acrescido por amostra e um aumento no tempo de processamento da amostra. As ponteiras de extração com fase sólida modificada (DPX) foram utilizadas como uma alternativa aos cartuchos SPE tradicionais. A técnica combina eficiência e rapidez no procedimento de extração, com redução significativa no consumo de solvente e na quantidade de amostra. O objetivo desse estudo foi desenvolver e validar um método para a determinação de nicotina, cotinina, cocaína, benzoilecgonina, cocaetileno e éster metil anidroecgonina em amostras de mecônio usando DPX e cromatografia em fase gasosa acoplada à espectrometria de massa (GC/MS). Os resultados da validação indicaram uma extração eficiente, exata e precisa, com recuperação entre 50-98%, exatidão entre 92-106%, precisão intra-ensaio 4-12% e precisão inter-ensaio 6 a 12%. As curvas de calibração foram lineares com valores de R2 superiores a 0,99; os limites de detecção (LOD) variaram entre 2,5-15 ng/g e os limites de quantificação (LOQ) entre 10-20 ng/g. O método DPX-GC/MS mostrou ser eficaz para análise traços de drogas presentes em amostras de mecônio. Após desenvolvimento e validação, o método foi aplicado em 50 amostras de mecônio coletadas no berçário da Maternidade do Complexo Aeroporto (MATER) na cidade de Ribeirão Preto - São Paulo, Brasil. / Drug abuse by pregnant women is considered a serious public health problem worldwide. Meconium is the first excretion in newborns and has been used as an alternative matrix to evaluate in utero drug exposure. Solid phase extraction (SPE) is widely employed to prepare and cleanup samples in the field of forensic analysis. Most SPE products require large volumes of solvent, which culminates in longer sample processing times; increased cost per sample and higher limits of detection. Disposable Pipette Extraction tips (DPX) have been used as an alternative to traditional SPE cartridges. They combine efficient and rapid extraction with reduced solvent consumption. The purpose of this study was to develop and validate a method to determine nicotine, cotinine, cocaine, benzoylecgonine, cocaethylene and methyl ester anhydroecgonine in meconium using DPX and GC/MS. Validation results indicated extraction efficiency, ranged between 50-98%, accuracy 92-106%, intra-assay precision 4-12% and inter-assay precision 6 to 12%. Linear calibration curves resulted in R2 values greater than 0.99; limits of detection ranged from 2.5 - 15 ng/g and the limit of quantitation from 10 - 20 ng/g. The DPX-GC/MS method provided to selectively analyze trace concentrations of drugs in meconium samples. Finally, the developed and validated method was applied to 50 meconium samples collected at the nursery of Maternidade do Complexo Aeroporto (MATER) in the city of Ribeirão Preto - São Paulo, Brazil.

O uso de drogas por mulheres em idade reprodutiva é considerado um grave problema de saúde pública mundial. O mecônio é a primeira excreção do recém-nascido e tem sido utilizado como uma matriz alternativa em análises toxicológicas. A extração em fase sólida (SPE) é um método amplamente utilizado para a purificação e concentração dos analitos em amostras biológicas no campo da análise forense. A maioria dos produtos de SPE convencionais requerem volumes relativamente grandes de solventes levando a um custo acrescido por amostra e um aumento no tempo de processamento da amostra. As ponteiras de extração com fase sólida modificada (DPX) foram utilizadas como uma alternativa aos cartuchos SPE tradicionais. A técnica combina eficiência e rapidez no procedimento de extração, com redução significativa no consumo de solvente e na quantidade de amostra. O objetivo desse estudo foi desenvolver e validar um método para a determinação de nicotina, cotinina, cocaína, benzoilecgonina, cocaetileno e éster metil anidroecgonina em amostras de mecônio usando DPX e cromatografia em fase gasosa acoplada à espectrometria de massa (GC/MS). Os resultados da validação indicaram uma extração eficiente, exata e precisa, com recuperação entre 50-98%, exatidão entre 92-106%, precisão intra-ensaio 4-12% e precisão inter-ensaio 6 a 12%. As curvas de calibração foram lineares com valores de R2 superiores a 0,99; os limites de detecção (LOD) variaram entre 2,5-15 ng/g e os limites de quantificação (LOQ) entre 10-20 ng/g. O método DPX-GC/MS mostrou ser eficaz para análise traços de drogas presentes em amostras de mecônio. Após desenvolvimento e validação, o método foi aplicado em 50 amostras de mecônio coletadas no berçário da Maternidade do Complexo Aeroporto (MATER) na cidade de Ribeirão Preto - São Paulo, Brasil. / Drug abuse by pregnant women is considered a serious public health problem worldwide. Meconium is the first excretion in newborns and has been used as an alternative matrix to evaluate in utero drug exposure. Solid phase extraction (SPE) is widely employed to prepare and cleanup samples in the field of forensic analysis. Most SPE products require large volumes of solvent, which culminates in longer sample processing times; increased cost per sample and higher limits of detection. Disposable Pipette Extraction tips (DPX) have been used as an alternative to traditional SPE cartridges. They combine efficient and rapid extraction with reduced solvent consumption. The purpose of this study was to develop and validate a method to determine nicotine, cotinine, cocaine, benzoylecgonine, cocaethylene and methyl ester anhydroecgonine in meconium using DPX and GC/MS. Validation results indicated extraction efficiency, ranged between 50-98%, accuracy 92-106%, intra-assay precision 4-12% and inter-assay precision 6 to 12%. Linear calibration curves resulted in R2 values greater than 0.99; limits of detection ranged from 2.5 - 15 ng/g and the limit of quantitation from 10 - 20 ng/g. The DPX-GC/MS method provided to selectively analyze trace concentrations of drugs in meconium samples. Finally, the developed and validated method was applied to 50 meconium samples collected at the nursery of Maternidade do Complexo Aeroporto (MATER) in the city of Ribeirão Preto - São Paulo, Brazil.

O tabaco é uma das principais drogas consumidas mundialmente e seu uso por mulheres em idade reprodutiva, em particular, têm representado uma grande preocupação por parte de especialistas e da sociedade em geral. Apesar dos efeitos adversos associados ao ato de fumar durante a gestação serem bastante documentados e conhecidos, sabe-se que uma parcela de mulheres grávidas tem dificuldades em abandonar o hábito. A exposição fetal aos constituintes do tabaco tem sido associada com aumento do risco de aborto espontâneo e nascimentos prematuros, incidência de recém-nascidos com baixo peso, síndrome de morte súbita infantil e desordens cognitivas e neurocomportamentais. Entretanto, devido ao sentimento de culpa e medo de ações punitivas, mulheres raramente admitem terem utilizado tabaco durante a gestação. Como resultado, uma série de marcadores biológicos tem sido estudada para se diagnosticar a exposição fetal aos constituintes do tabaco. Dentre os marcadores utilizados estão a nicotina e o seu principal produto de biotransformação, a cotinina, que podem ser detectados em amostras de mecônio de recém-nascidos. No presente estudo, um método analítico foi desenvolvido visando à detecção desses marcadores em amostras de mecônio. Foi considerada neste projeto a técnica de extração acelerada por solvente (ASE) por ser uma técnica promissora para o preparo de amostras sólidas e/ou semi-sólidas. Os analitos foram identificados por cromatografia em fase-gasosa com detector de nitrogênio e fósforo (GC/NPD). Os limites de detecção foram de 3 ng/g e 30 ng/g e os de quantificação foram de 5 ng/g e 40 ng/g, para cotinina e nicotina respectivamente, e apresentaram boa linearidade na faixa de concentração estudada (5-500 ng/g), com coeficiente de correlação (r2) maior que 0,98. A precisão intra-ensaio, determinada pelo coeficiente de variação do método (CV%) foi menor que 15% e a precisão interensaio foram menor ou igual a 20% para nicotina e cotinina. A recuperação média foi de 77%. O método desenvolvido demonstrou ser rápido, preciso, prático e sensível e com uso de menores volumes de solventes orgânicos do que outros métodos descritos na literatura. O método desenvolvido e validado foi aplicado em amostras de mecônio de neonatos com suspeita ou não de exposição fetal aos constituintes do tabaco. / Tobacco is one of the main drugs consumed worldwide and its use by women of reproductive age in particular has played a major concern among experts and society in general. Despite the adverse effects associated with smoking during pregnancy are well documented, it is known that a significant proportion of pregnant women have difficulties to quit the habit. Fetal exposure to tobacco constituents has been associated with increased risk of spontaneous abortion (miscarriage) and premature births, incidence of newborns with low birth weight, sudden infant death syndrome and neurobehavioral and cognitive disorders. However, due to guilt and fear of punitive actions, women rarely admit to have used tobacco during pregnancy. As a result, a series of biological markers have been studied to diagnose fetal exposure to tobacco constituents. Nicotine and cotinine are some of these biomarkers which can be detected in meconium samples from newborns. In this study, an analytical method was developed to detect these biomarkers in meconium samples. Accelerated solvent extraction (ASE), a promising technique for solid or semi-solid sample preparation, was considered in this work the that is considered a. The analytes were identified by gas-chromatography with nitrogen phosphorus detector (GC / NPD). The limits of detection (LOD) were 3 ng/g and 30 ng/g and the limits of quantification (LOQ) were 5 ng/g and 40 ng/g for cotinine and nicotine, respectively. The method showed good linearity in the concentration range studied (5-500 ng/g), with a coefficient of correlation (r2) greater than 0.98. The intraday precision, determined by the coefficient of variation (CV %) was less than 15% and the interday precision was less or equal than 20% for nicotine and cotinine. The average recovery was 77%. The method proved to be fast, accurate, practical and sensitive and smaller volumes of organic solvents are necessary, compared to other methods published in the scientific literature. The developed and validated method was applied to meconium samples of suspected and nonsuspected neonates of having been exposed to tobacco constituents during gestation.