D'un grup de pacients que presentin la mateixa malaltia, fins i tot en cas que en tots ells es pogués comprovar que la intensiat del procés és la mateixa, no tots responen amb igual intensitat a un fàrmac administrat a la mateixa dosi, per la mateixa via i amb el mateix interval d'administració. Tenir en compte la variabilitat de resposta quan s'admimstra un fàrmac és un del prerequisits de l'ús racional de medicaments. Amb l'augment del nombre de fàrmacs emprats en terapèutica s'ha enregistrat un increment en la incidència de reaccions adverses. Per tal de disnnnuir-les al mínim i aconseguir una resposta terapèutica òptima cal conèixer quins són els factors que influeixen en la relació dosi/resposta i individualitzar la dosi quan això sigui possible. L'important desenvolupament de les tècnlques de determinació dels nivells plasmàtics de fàrmacs ha permès saber que els processos farmacocinètics constitueixen la principal font de variabilitat intenndividual en la resposta als medicaments, i entre aquests el més important des d'un punt de vista quantitatiu és el metabolisme. Les causes més importants de variabilitat en la capacitat de metabolisme dels xenobiòtics són els factors ambientals i els genètics. Fa uns 30 anys que es coneix que la capacitat d'acetilació està sotmesa a polimorfisme genètic, més recentment s'han descrit polimorfismes de metabolisme d'altres vies, generalment hidroxilatives. En aquest sentit el present treball es composa de tres apartats:1) Determinació de la capaciat de metabolisme de la Isoniazida (fenotip acetilador) en una mostra de 126 individus sans. La distribució de freqüències de la relació entre el fàrmac i el seu principal metabòlit en orina, es comporta de forma bimodal, diferenciant-se una subpoblació d'individus amb una baixa formació de metabòlit (acetiladors lents) que representa un 65,1 de la mostra estudiada. El 34,9 restant està format per individus amb una major capacitat de metabolisme (acetiladors ràpids). No sembla existir cap influència de factors com Tedat, sexe, consum de tabac, cafè i alcohol en e1 fenotip acetilador.2) Determinació de la capacitat de metabolisme de la debrlsoquina (fenotip hidroxilador) en una mostra de 156 voluntaris sans. La distribució de freqüències de la relació entre aquest fàrmac i el seu principal metabòlit és de tipus bimodal. Un 4,5 del individus estudiats metabolitzen de forma defectuosa la debrisoquina (hidroxiladors pobres) i un 95,5 ho fan de forma normal (hidroxiladors extensos). Tampoc existeix cap influència de l'edat, sexe, i hàbits tòxics en la manifestació d'aquest fenotip.3) L'acció neurotòxica d'alguns xenobiòtic sembla ser un dels factors etiopatogènics de la malaltia de Parkinson. Els individus amb una baixa capacitat metabòlica (detoxificant) podrien tenir un major risc de patir parklnsonisme o malaltia de Parkinson . Alguns fàrmacs (neurolèptics) i substàncies ambientals (MPTP) que poden produir parkinsonisme es metabolitzen per via hidroxilativa. En base a aquesta hipòtesi es va determinar el fenotip hidroxilador de la debrisoquina en una mostra de 54 pacients diagnosticats de Parkinson, amb la finalitat d'estudiar si en aquest tipus de pacients hi ha una major incidència de metabolitzadors pobres. No s'han detectat diferèncles entre els percentatges d'hidroxiladors pobres de les dues mostres analitzades (individus sans 4,5, parkinsomans 3,7), el que demostra que no sembla existir relació entre la capacitat de metabolitzar la debrisoquina i la malaltia de Parkinson. / Not all patients in a group suffering from the same illness respond in the same degree to a drug administered in the same dose, by the same route and the same interval even when the intensity of the process were proven to be the same. Taking into account the variability of response when administering a drug is one of the prerequisites for a rational use of drugs. With the increase in the number of drugs prescribed in therapeutics, an increase in the incidence of adverse drug reactions has been recorded. In order to reduce such reactions and achieve an optimal therapeutic response , the factors that influence the dose/response ratio have to be known and the dose has to be individualized whenever possible. The dramatic development of techniques for the determination of plasmatic levels of drugs has revealed that pharmacokinetic processes are the main cause of interindividual variability in response to drugs and that metabolism is quantitatively the most important of these processes. The main cause of variability in the capacity to metabolize xenobiotics are the environmental and the genetic factors. The capacity to acetytate has been known to be subject to genetic polymorphism for about 30 years. More recently, metabolic polymorphisms of other pathways, usually hydroxylative, have been described. This research deals with acetylator and hydroxylator phenotypes. It is composed of tree parts:
1) Determination of the rate of metabolism of isoniazid (acetilator phenotype) in a sample of 126 healthy individuals. The frequency distribution of the urinary drug/metabolite ratio reveals a bimodal pattern: 65.1 of the sample population shown a low formation of the metabolite (slow acetilators), while the remaining 34.9 have a higher capacity to metabolize (fast acetilators). Factors such as age, sex and tobacco, cofee or alcohol intake do not seem to influence this phenotype.2) Determination of the rate of metabolism of debrisoquine (hydroxylator phenotype) in a sample of 156 healthy volunteers. The frequency distribution of the urinary drug/metabolite ratio again showns a bimodal pattern: 4.5 of the sample population are defective metabolizers of debrisoquine (poor hydroxylators), while 95.5 are normal metabolizers (extensive hydroxylators). Age ,sex and toxic habits do not seem to influence the manifestation of this phenotype, either.3) The neurotoxic action of some xenobiotics appears to be one of the aetiopathogenic factors causing the appearance of Parkinson's disease. Individuals with a low metabolic rate migth be more exposed to developing Parkinsonism or Parkinson's disease. Some neuroleptic drugs and some environmental substances (MPTP) which may produce Parkinsonism are metabolized by hydroxylation. According to this hypothesis, the hydroxylator phenotype of debrisoquine was determined in a sample of 54 patients with diagnosed Parkinson's disease in order to ascertain if a higher incidence of poor metabolizers is found among this kind of patients. No significant difference in the percentage of poor hydroxylators has been recorded between the two analyzed sample populations (4.5 in healthy individuals, 3.7 in Parkinson patients), which proves that no relationship seems to exist between the capacity to metabolize debrisoquine and Parkinson's disease.

En el presente trabajo de investigación se determina por primera vez la composición flavónica de "Thymus willkomii", "T. aestivus" y "T. glandulosus", y se efectúan nuevas aportaciones sobre los polifenoles de "T. membranaceus", "T. longiflorus", "T. moroderi", "T. funkii", "T. capitellatus", "T. camphoratus", "T. vulgaris", "T. baeticus" y "T. orospedanus".Se aislan 27 flavonoides de las hojas de "T. moroderi". Veintiuno son aglicones que se distribuyen en catorce flavones: 5-desmetilnobiletina 8-ome-cirsilineol cirsilineol xantomicrol pilloina 5 4'-(OH)2-7 8-(OME)2-flavona genkwanina sideritoflavona apigenina timusina sorbifolina 7-0-ME-luteolina luteolina y 6-OH-luteolina; un flavonol: kempferol; cuatro flavanonas; cinco 4'-(OH)2-6, siete 8-(OME)3-flavanona, sakuranetina, naringenina y eriodictiol; y dos dihidroflavonoles: taxifolina y dihidrokempferol. Seis son heterosidos: cinco o-heterosidos: 7-0-glucuronil-luteolina 7-0-xilosil-luteolina 7-0-glucosil-luteolina 3'-0-allosil-luteolina (nuevo producto natural) y un diglicosido acetilado de luteolina; y un c-heterosido: vicenina-2. Además, dos de ellos se encuentran por segunda vez en la naturaleza, uno es nuevo para la familia Labiadas y seis son nuevos para el género "Thymus" L.El estudio de los aceites esenciales permite identificar más del 90% de las esencias de "T. moroderi", "T. membranaceus", "T. moroderi", "T. glandulosus" y "T. willkomii" que no habían sido investigadas. Se aportan nuevos datos sobre la composición de las de "T. membranaceus", "T. funkii", "T. aestivus", "T. baeticus" Y "T. camphoratus". Por lo menos veinte de los componentes identificados son nuevos para el género "Thymus". Se estudian también los aceites esenciales de individuos de "T. moroderi", "T. membranaceus" y su hibrido, observándose una mayor variabilidad en los componentes sesquiterpénicos que en los monoterpénicos.

It is well established that bacteria cause pulpal and periradicular disease (Kakehashi et al. 1965). Of the bacteria recovered from failing root canals, Enterococcus faecalis is one of the most prevalent species (Molander et al. 1998; Sundqvist et al. 1998). Many laboratory studies have investigated the effectiveness of root canal irrigants and medicaments against E. faecalis. Most used planktonic cultures, which are not representative of the in vivo growth conditions of an infected root canal system, where bacteria grow as a biofilm adhering to the dentinal wall (Nair 1987). Organisation of bacteria within biofilms confers a range of phenotypic properties that are not evident in their planktonic counterparts, including a markedly reduced susceptibility to antimicrobial killing (Wilson 1996). Objectives: The aims of this study were: 1) To compare the efficacy of commonly used endodontic medicaments against E. faecalis cultured as a biofilm. The medicaments tested were Ledermix paste, calcium hydroxide, Odontopaste, 0.2% chlorhexidine gel and 50:50 combinations of Ledermix/calcium hydroxide and Odontopaste/calcium hydroxide. 2) To compare the antimicrobial effect achieved through exposure to endodontic medicaments with that achieved by exposure to a constant concentration of sodium hypochlorite for varying times. Methods: A biofilm was established using a continuous flow cell. E. faecalis inoculum was introduced into the flow cell and allowed to establish on human dentine slices over 4 weeks. Each test medicament was introduced into the flow cell for a period of 24 or 48 hours, while sodium hypochlorite was evaluated after 1, 10, 30 and 60 minutes. Biofilms were harvested by sonication in sterile PBS. Cellular protein levels were measured to quantitate the amount of biofilm harvested. Cellular viability was determined using serial plating. The number of colony forming units was then adjusted for cellular protein levels to allow treatment protocols to be compared. Qualitative SEM analyses of the biofilm was performed following exposure to each test agent. Results: Sodium hypochlorite was the only agent that achieved total bacterial elimination. Ledermix and Odontopaste had no significant effect on the E. faecalis biofilm, while calcium hydroxide and 50:50 combinations of calcium hydroxide with either Ledermix or Odontopaste were able to reduce viability by > 99%. Conclusion: When used in isolation, antibiotic containing medicaments had no appreciable effect on the viability of Enterococcus faecalis. Sodium hypochlorite remains the gold standard for bacterial elimination in root canal therapy. / Thesis (D.Clin.Dent.) -- University of Adelaide, School of Dentistry, 2009

It is well established that bacteria cause pulpal and periradicular disease (Kakehashi et al. 1965). Of the bacteria recovered from failing root canals, Enterococcus faecalis is one of the most prevalent species (Molander et al. 1998; Sundqvist et al. 1998). Many laboratory studies have investigated the effectiveness of root canal irrigants and medicaments against E. faecalis. Most used planktonic cultures, which are not representative of the in vivo growth conditions of an infected root canal system, where bacteria grow as a biofilm adhering to the dentinal wall (Nair 1987). Organisation of bacteria within biofilms confers a range of phenotypic properties that are not evident in their planktonic counterparts, including a markedly reduced susceptibility to antimicrobial killing (Wilson 1996). Objectives: The aims of this study were: 1) To compare the efficacy of commonly used endodontic medicaments against E. faecalis cultured as a biofilm. The medicaments tested were Ledermix paste, calcium hydroxide, Odontopaste, 0.2% chlorhexidine gel and 50:50 combinations of Ledermix/calcium hydroxide and Odontopaste/calcium hydroxide. 2) To compare the antimicrobial effect achieved through exposure to endodontic medicaments with that achieved by exposure to a constant concentration of sodium hypochlorite for varying times. Methods: A biofilm was established using a continuous flow cell. E. faecalis inoculum was introduced into the flow cell and allowed to establish on human dentine slices over 4 weeks. Each test medicament was introduced into the flow cell for a period of 24 or 48 hours, while sodium hypochlorite was evaluated after 1, 10, 30 and 60 minutes. Biofilms were harvested by sonication in sterile PBS. Cellular protein levels were measured to quantitate the amount of biofilm harvested. Cellular viability was determined using serial plating. The number of colony forming units was then adjusted for cellular protein levels to allow treatment protocols to be compared. Qualitative SEM analyses of the biofilm was performed following exposure to each test agent. Results: Sodium hypochlorite was the only agent that achieved total bacterial elimination. Ledermix and Odontopaste had no significant effect on the E. faecalis biofilm, while calcium hydroxide and 50:50 combinations of calcium hydroxide with either Ledermix or Odontopaste were able to reduce viability by > 99%. Conclusion: When used in isolation, antibiotic containing medicaments had no appreciable effect on the viability of Enterococcus faecalis. Sodium hypochlorite remains the gold standard for bacterial elimination in root canal therapy. / Thesis (D.Clin.Dent.) -- University of Adelaide, School of Dentistry, 2009

La normativa defineix els serveis de farmàcia com a unes estructures de suport per a l'ús racional dels medicaments en els hospitals, els quals exerceixen unes funcions recollides en la normativa legal. Entre aquestes funcions es troben la selecció i l'adquisició de medicaments.En el treball s'han analitzat els processos que intervenen en la selecció i en l'adquisició de medicaments, amb una anàlisi comparativa de la normativa de la Unió Europea, d'Espanya (estatal i autonòmica) i de França (estatal), amb la finalitat d'estudiar les situacions conflictives produïdes després de l'aplicació de la normativa que regula el medicament, i la problemàtica generada per l'aplicació de normatives de caràcter general (normativa de contractació pública) al cas dels medicaments, els quals tenen una regulació específica.L'objectiu final del treball és analitzar la normativa legal que regula la selecció i l'adquisició de medicaments per part dels serveis de farmàcia a Espanya, destacant els problemes que es generen en la pràctica diària, i establir un estudi comparatiu amb la situació a França. / "Comparative juridical study of the selection and acquisition of medicines by hospital pharmacy services of Spain and France"The law describes hospital pharmacy services as structures of support for the rational use of the medicines in the hospitals, which exercise some functions according to the legal regulations. Among these functions the selection and the acquisition of medicines are found.The study analyzes all the processes that intervene in the selection and the acquisition of medicines, with a comparative analysis of the regulations of the European Union, Spain (national and autonomic) and France (national), in order to study the problems produced after the application of the regulations that regulate the medicines.The final objective of the study is to analyze the legal regulations that regulate the selection and the acquisition of medicines by hospital pharmacy services in Spain, highlighting the problems that are generated in the daily practice, and to establish a comparative study with the situation in France.

En la presente Memoria se ha efectuado un estudio de las gráficas conductimétricas que se producen en continuo durante el proceso de elaboración de emulsiones de tipo O/A de parafina líquida en agua de baja conductividad, elaboradas por inversión de fase en caliente. Para ello se han diferenciado las dos etapas características de esta elaboración:- Adición de la fase acuosa al concentrado emulsionable constituido por la mezcla emulgente + aceite, a una temperatura elevada, previamente elegida por el operador (en la Memoria: etapa de vertido o de dilución del concentrado emulsionable, en caliente)- Enfriamiento del producto obtenido en la etapa anterior (etapa de enfriamiento)En el primer caso se obtienen las gráficas de conductancia/dilución del concentrado emulsionable, a temperatura constante, y en el segundo, las gráficas de conductancia/temperatura decreciente, del producto obtenido en la etapa anterior (para estos fines se ha utilizado un utillaje y estandarizado una metódica, que se describen detalladamente).En ambos casos se ha razonado la correlación entre los perfiles de las gráficas y las variaciones de estructura del producto estudiado, así como las características de las emulsiones O/A. obtenidas en las condiciones de la experiencia.a) Etapa de dilución del concentrado emulsionableEn esta etapa se pueden obtener emulsiones fluidas finamente divididas y de estabilidad aceptable. Estas dos características están íntimamente correlacionadas con la aptitud del emulgente para formar, a una temperatura previamente establecida, mesofases laminares agua/emulgente (E/A) equilibrados con la película monomolecular del emulgente adsorbida en la interfase agua/aceite (A/O). Los parámetros conductimétrícos t(i) y t(M) permiten establecer, en el diagrama ternario agua (A), aceite (O), emulgente (E) la región de emulsiones en la zona de equilibrio de estos sistemas, y su relación con la estabilidad del producto, de acuerdo con la estructura de la mesofase laminar de la mesofase condensada, en que se produce la inversión de fases, que da lugar a la emulsión naciente, hasta mesofase expandida, en la que se constituye la emulsión primaria de máxima estabilidad.En esta etapa, las emulsiones elaboradas en el IILB requerido para el emulgente en el sistema se caracterizan por los parámetros conductimétricos t(i) y t(M) mínimos a la temperatura de la experiencia y son las más estables frente a la coalescencia para el emulgente utilizado, en función de su concentración en la mesofase laminar que constituye la fase continua acuosa (E/A) en equilibrio con la fase oleosa (E/O) de la emulsión primaria.Esta emulsión, estabilizada frente a la coalescencia, puede diluirse con el resto del agua de la formulación, que da lugar a un isótropo acuoso que puede considerarse como "agua libre" de la fase continua acuosa en la emulsión fluida diluida.En este sistema se mantienen prácticamente las características de resistencia a la coalescencia debida a la acción protectora de la mesofase laminar expandida, altamente viscoelástica, pero el fenómeno de cremado (separación densitaria de la emulsión primaria del "agua libre") se produce con cierta rapidez.b) Etapa de enfriamientoLa gráfica conductancia/temperatura decreciente que se obtiene durante esta etapa de enfriamiento del producto obtenido en la etapa anterior, es útil cuando interesa averiguar la temperatura a que se produce la inversión de fases en emulsiones que no se forman en la etapa de dilución en caliente. En este caso, la gráfica conductancia/temperatura decreciente se caracteriza por los parámetros t(i) que corresponden al inicio de la transición lenta A/O -> O/A, y t(M), temperatura en que culmina dicha transición, dando lugar a un sistema emulsionado más o menos estable.Siguiendo en el supuesto anterior (emulsiones que no se forman durante la etapa de vertido en caliente) el estudio de las gráficas conductimétricas de enfriamiento tiene especial interés en emulsiones espesadas mediante la asociación de exceso de un anfifilo lipófilo no iónico (en nuestra Memoria, alcohol cetoestearílico, (ACE)) con el emulgente básico (formador) de la emulsión. La gráfica conductimétrica se caracteriza por los parámetros t(i) y t(M) que corresponden a una transición lenta A/O -> O/A. El valor t(M) suele coincidir con el inicio de la gelificación de la fase continua acuosa ("agua libre") que se produce en esta etapa de enfriamiento. La estabilización de la emulsión se debe al espesamiento del isótropo acuoso, que se opone al cremado de la emulsión diluida. De esta manera se introduce en la formulación un factor importante de estabilidad pero que sólo actúa dentro de 1ímites de temperatura que conviene conocer.En emulsiones espesadas con ACE, que se forman durante el proceso de dilución del concentrado emulsionable, en caliente, el parámetro t(e) indica la temperatura de estructuración de la fase acuosa, caracterizada por un incremento acusado de la viscosidad del producto.El valor práctico de estos parámetros se ha comprobado en emulsiones de parafina líquidas elaboradas con emulgentes no iónicos (mezcla de anfifilos de este tipo) solos o asociados con tensiactivos iónicos, (laurilsulfato sódico) y adicionados de cantidades crecientes de alcohol ceto-esteárico. / In this work, the continuous conductimetric records produced during the elaboration of o/w 1iquid paraffin emulsions in low conductivity water, prepared by the phase inversion method, has been studied.The different emulsions has been formulated with non ionic surfactant mixtures, alone or jointly with ionics ones (sodium 1auryl sulphate), and with increasing proportions of cetostearyl alcohol.During the elaboration of emulsions by the phase inversion method, the two characteristic steps of this process has been differenciated:- Addition of heated water over the emulsiflable concentrated (oil and surfactant mixture) at the same temperature, previously chosen by the operator. In the Work this phase has been said "water addition phase" or "dilution of the emulsifiable concentrated phase".- Cooling of the product obtained in the previous phase ("cooling phase").In the first phase, the graphics of conductance vs. time of dilution of the emulsifiable concentrated (at constant temperature) are obtained. In the second phase, the graphics of conductance vs. decreasing temperature of the product are obtained. The standarized procedure and the equipment used is fully commented in the memory.The experimental results allowed us to get the objectives of the work: A correlation between the conductimetric graphics and structural variations of the emulsions fluid emulsions and creams) has been established.The usefulness of these graphics as a monitorizing method during the elaboration process has been demonstrated.These graphics allow us to establish the significance of some variables to know the process of elaboration and to predict the probable stability of the emulsions.

This diploma thesis deals with legislative regulations in providing welfare (well-being) and health of animals. The impuls for this diploma are the cattle breeders facing to increasing requierements targeting the provision of welfare of livestock. These requirements are leading to changes especially in the field of the production technology in case of both newly installed and exististing breeding technology. The changes mentioned above result from directives adopted in the European Union and are implemented to the Czech legislation. The main attention is concentrated on the issue of welfare and health of animals in the stock of layers and beef-cattles or more precisely in the stock of dairy cattles. The essence of the diploma thesis consists in the analysis of economic consequences of implemented regulations for breeders of mentioned animal husbandry in the Czech Republic. Economic analysis considers costs and economic effectiveness of new technology and the distrbution shed use for farms.

1) Hipótesis Evidenciar que estudiando la evolución de las exigencias de calidad requeridas para la solicitud de autorización de un medicamento, según la documentación oficial publicada y diversas publicaciones o documentos coetáneos, se puede describir cómo ha evolucionado la calidad de los medicamentos. 2) Objetivos Como objetivo principal estudiar la evolución a lo largo del tiempo de los requerimientos de calidad para los expedientes de solicitud de autorización de los medicamentos y su relación con la calidad de los mismos. Como objetivo secundario evidenciar la influencia de circunstancias excepcionales de la propia sociedad, o comportamientos inesperados de algún medicamento. 3) Metodología Análisis de la legislación publicada en España referente al Registro Farmacéutico desde 1850, comparando las referencias a la calidad de cada documento con las de la legislación inmediatamente anterior destacando lo que representa un avance. Consulta de revistas y documentos no publicados. Discusión de la evolución de la calidad relacionándola con el contexto político-social del país. El trabajo se ha estructurado en cuatro partes marcadas por hechos que han comportado cambios en los procedimientos de registro. Como final se aporta una aproximación al futuro inmediato. 4) Resultados y conclusiones Primera parte: Hasta 1855 no se podía hablar de medicamentos sino de remedios secretos. La Ley de 28 de Noviembre de 1855 estableció la obligación de declarar los remedios a la Autoridad Sanitaria. El Real Decreto de 1919 estableció el Registro Farmacéutico y la asignación del número de registro. El Real Decreto de 1924 lo actualizó sin avanzar en la calidad. Entre 1924 y 1944 de produjo un estancamiento tanto en normativa como en calidad, debido a la guerra civil y al bloqueo internacional. La Ley de Bases de 1944 anunciaba una reforma que aún tardó en producirse. Segunda parte: El Decreto 2464/1963, representó un gran avance en las exigencias de calidad para el registro introduciendo cambios tanto en la forma como en el fondo. Entre este Decreto y la Orden 12 de agosto se concretaron muchas exigencias de calidad. Diez años después el Decreto 1416/1973 introdujo de nuevo grandes cambios. Al final del periodo, la Ley 25/90 del medicamento introdujo nuevos conceptos como Garantía y los avales de un experto. Tercera parte: En un período de 4 o 5 años, se sucedieron grandes avances. Se produjo la integración en la Comunidad Europea, lo que implicó muchos cambios regulatorios y de procedimiento difíciles de asumir. La adaptación a la legislación comunitaria se produjo a través del Real Decreto 1564/1992 y, especialmente, el Real Decreto 767/1993. Cuarta parte: No es un período de cambios bruscos sino que los cambios son los que se van produciendo en toda la Comunidad Europea entre ellos la creación de la Agencia Europea para la Evaluación de Medicamentos. En cuanto al procedimiento se produce la aparición en el año 2000, de la directriz ICH M4, Documento Técnico Común (CTD) que cambia la organización del expediente. Como epílogo se intenta describir hacia adonde pueden dirigirse los cambios en un futuro próximo. 5) Conclusiones El estudio de la legislación relativa al registro de medicamentos desde el punto de vista de los requerimientos de calidad, permite evidenciar la evolución de la propia calidad del medicamento. La legislación y paralelamente la calidad del medicamento han evolucionado en España con una alternancia de períodos muy fructíferos con otros de total inactividad. Algunos hechos fortuitos y totalmente inesperados han tenido una influencia considerable tanto positiva como negativa en la evolución de la calidad. Los expedientes de registro son un elemento de referencia fundamental para conocer la calidad de un medicamento en un momento determinado. / “Evolution of the quality of medicinal products industrially manufactured in Spain based on regulatory requirements for pharmaceutical registration. Since 1850 to the current situation”. 1) Hypothesis To demonstrate that by studying the evolution of quality requirements for the application for authorization of a medicinal product, according to the official documents and several contemporary publications or documents it is possible to describe the evolution of medicines quality. 2) Objectives The main objective is to study the evolution of quality requirements in the application files for authorization of medicinal products as well as the relationship with their quality. A secondary objective is to highlight the influence of exceptional circumstances due to socio-political context or unexpected behaviour of a medicinal product on the quality. 3) Methodology Analysis of the legislation published in Spain concerning the Pharmaceutical Registration since 1850, comparing the references to the quality in each document with those in the immediately previous legislation and highlighting all aspects that represent progress. Search in journals and unpublished documents. Discuss about the evolution of the medicinal products quality taking into account the socio-political context of the country. This memory is structured in four parts marked by events that involved changes in registration procedures. As a final approach, some considerations about the near future are provided. 4) Results and Discussion Part One: Until 1855 there were no medicines only secret remedies. The Law of November 28, 1855 set the obligation to declare all remedies to the Health Authority. The Royal Decree of 1919 created the Pharmaceutical Registration and assigned a registration number to each product. The Royal Decree of 1924 updated it without any progress in quality. Between 1924 and 1944 due to Civil War and the international blockade there was a stagnation period in regulations as well as in quality. The Law of 1944 announced a reform but still took a while in coming. Part Two: The Decree 2464/1963 represented a breakthrough in the quality requirements for registration through changes in form and substance. Between this Decree and the Order of August 12 many quality requirements were implemented. Ten years later the Decree 1416/1973 introduced major changes again. At the end of the period, the Medicines Law 25/90 introduced new concepts as quality assurance and expert reports. Part Three: In a four- or five-year period, significant advances occurred. The integration into the European Community took place and that involved many regulatory and procedural changes difficult to assume. The adaptation to EU legislation came through the Royal Decree 1564/1992 and, especially, Royal Decree 767/1993. Part Four: There are no sudden changes in this period but changes that occur throughout the European Community including the creation of the European Agency for the Evaluation of Medicinal Products. As for the procedure, in 2000 the ICH M4 Guideline, Common Technical Document (CTD) occurred, changing the organization of the file. As an epilogue, an attempt is made to describe the direction that changes can take in the near future. 5) Conclusions The study of the legislation on the registration of medicinal products from the perspective of quality requirements makes evident the evolution of the quality of the product itself. Legislation and medicinal products quality in parallel, evolved in Spain alternating very fruitful periods with others of total inactivity. Some totally unexpected and unforeseen events had a considerable influence both positive and negative on quality evolution. Registration files are an essential reference to determine the quality of a medicinal product at a given time.

There are several reasons to celebrate the latest advances in the treatment of the infection with HIV. According to the Joint United Nations Programme on HIV/AIDS, the number of new infections dropped by 15%; there is also a decrease by 22% in the number of deaths related to HIV/AIDS. Nevertheless, there are new emerging challenges, i.e. the transmission of drug-resistant HIV-1 strains. Therefore, there is a demand for the continued research for new and more potent antiretroviral agents. The entry of HIV into the cell implies a complex and well-orchestrated series of steps in which both viral and cellular molecules are implied, ending with the production of new viral particles. The HIV gp120 glycoprotein binds to the cellular CD4 receptor and to a chemokine receptor, inducing structural rearrangements that continue with the cellular and viral membrane fusion mediated by the HIV glycoprotein gp41. Hence, the entry of HIV is an essential step of the viral replication that offers an open path for the design of new antiviral compounds that could be added to the repertory of drugs used in the treatment of HIV infection. In coincidence with the recent and highly relevant information of the fusion mechanism occurring during the viral entry, the design of new fusion inhibitors has become one of the most promising and debated areas in the study of entry inhibitors. ADS-J1 was originally selected to bind to gp41 and to inhibit the fusion of membranes. In several assays, including the generation of HIV strains resistant to ADS-J1, our laboratory has proved that ADS-J1 interact with gp120 instead of gp41. A more recent publication suggested that ADS-J1 binds to the pocket region of gp41 preventing the infection by the virus. Here, we confirmed that ADS-J1 interacts with gp120 instead of gp41. Recombination of gp120 into a wild type HIV-1 backbone restored the resistant phenotype. Moreover, time of addition assays clearly demonstrated that ADS-J1 does not interact with gp41. VIRIP was identified as a natural peptide present in human hemofiltrate that inhibits the HIV gp41-mediated membrane fusion. It was suggested that VIRIP interact with the fusion peptide in gp41, therefore blocking the fusion of membranes. With the objective to determine the precise mode of action of VIRIP, we generated a HIV-1 virus resistant to VIR-353, an analogue of VIRIP. Additionally, we determined the most relevant combination of mutations for the resistant phenotype. Recent studies have shown the effectivity of VIR-576, a peptide closely related to VIRIP and VIR-353 in a clinical trial phase I/II. The resistance to VIRIP/VIR-353 took a long time to emerge, suggesting a high genetic barrier to resistance. The mutations responsible for the resistant phenotype affected in large scale the replicative capacity of the virus, nevertheless, several compensatory mutations restored the viral fitness, while the resistance to VIR-353 was unaltered. The antiviral combination of VIR-353 and T20 showed an additive effect in inhibiting viral replication, indicating that VIR-353 appeared no to affect the binding of T20 to gp41 in its antiviral activity, the combination of the two fusion inhibitors showed an additive effect in inhibiting viral replication. In general, our results evidence the plasticity of the HIV envelope glycoproteins. This plasticity is highly remarked when the virus replicates under drug selective pressure, which imposes an additional genetic barrier for the virus to overcome. / ADS‐J1 ha estat seleccionat per unir‐se a gp41 i inhibir la fusió de les membranes. A través de diversos assajos, incloent la generació de soques resistents a ADS‐J1, el nostre laboratori va demostrar que ADS‐J1 interactua amb gp120 i no amb gp41. Una publicació posterior va suggerir que ADS‐J1 s’uneix a la ‘pocket‐region’ de gp41, prevenint l’infecció pel virus. En el present treball, nosaltres confirmem que ADSJ1 interactua amb gp120 i no amb gp41 i que la recombinació de gp120 en un VIH silvestre restitueix el fenotip resistent. Assajos de temps de addició van demostrar clarament que ADS‐J1 no interactua amb gp41. VIRIP va ser identificat com un pèptid natural present en el hemofiltrat humà capaç d’inhibir la fusió de membranes operada per gp41 del VIH. Es va suggerir que VIRIP interactua amb el pèptid de fusió de gp41, bloquejant la fusió de les membranes. Nosaltres hem generat un virus resistent a VIR‐353, un anàleg de VIRIP. Addicionalment, hem determinat la combinació de mutacions que generen el fenotip resistent. Estudis recents van mostrar l'efectivitat de VIR‐576, un pèptid amb alta similitud a VIRIP i VIR‐353 en un assaig clínic fase I/II. La resistència a VIRIP/VIR‐353 va requerir un període de temps llarg per emergir, la qual cosa suggereix una elevada barrera genètica a la resistència. Les mutacions responsables del fenotip resistent van afectar en greument la capacitat replicativa del virus, no obstant això, diverses mutacions compensatòries van restaurar‐ne la capacitat replicativa, mantenint intacta la resistència a VIR‐353. L’activitat antiviral de T20 no sembla afectada per VIR‐353, la combinació dels dos inhibidors de fusió van mostrar un efecte additiu en la inhibició de la replicació. En general, els nostres resultats evidencien la plasticitat de les glicoproteïnes de l'embolcall del VIH. Aquesta plasticitat es realça quan el virus replica sota la pressió selectiva imposada per fàrmacs que inhibeixen la replicació viral, la qual cosa afegeix una barrera genètica addicional a ser superada pel virus.

DE LA TESIS:Desde la aparición de las quinolonas, las resistencias bacterianas a las mismas han evolucionado de forma paralela. Conforme han ido apareciendo nuevas moléculas con mayor capacidad bactericida y mejores parámetros farmacodinámicos y farmacocinéticos, también se han ido identificando nuevos y más sofisticados mecanismos de resistencia, que se han ido adaptando a las necesidades de cada momento. Es por ello que se hace necesaria una nueva metodología para el diseño y la síntesis de nuevos agentes antibacterianos con el objetivo de aumentar su potencia antibacteriana y, al mismo tiempo, disminuir la probabilidad de generar a corto plazo nuevos mecanismos de resistencia. Con este fin, es fundamental conocer todos los mecanismos de resistencia y cuál es, en detalle, su mecanismo de acción, para poder diseñar nuevas moléculas capaces de, manteniendo su capacidad bactericida, eludir dichos mecanismos.En esta tesis nos propusimos como objetivos fundamentales, en primer lugar, investigar las bases moleculares de los mecanismos de resistencia a quinolonas en bacterias Gram-negativas. En concreto, en Escherichia coli, Yersinia enterocolitica y Citrobacter freundii. Por otro lado, se llevaron a cabo cálculos de acoplamiento o "docking" mediante la utilización de programas informáticos con el fin de incrementar nuestros conocimientos respecto al modelo de interacción entra ADN-ADN girasa-quinolona, para de esta manera mejorar nuestra comprensión de los mecanismos de resistencia a fluoroquinolonas asociados a las mutaciones más comúnmente encontradas en el gen gyrA. Finalmente, el último de los objetivos que nos propusimos fue el de diseñar, sintetizar y evaluar diferentes derivados de ciprofloxacino y norfloxacino con el fin de encontrar entre ellos alguno que tuviera la capacidad de interaccionar con la enzima ADN girasa, poseyendo ésta uno o dos cambios aminoacídicos en su subunidad A.