Made available in DSpace on 2014-07-29T15:07:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao2008_Eliete_Souza.pdf: 988968 bytes, checksum: 83e526f4061a2613940db4e37b3c6955 (MD5) Previous issue date: 2009-07-25 / This study was conducted at the Experimental Center of Poultry Diseases and Laboratory of Bacteriology Department of Veterinary Medicine Veterinary School, Federal University of Goias to evaluate the effects of lactulose in Salmonella typhimurium in broilers. The experimental design was completely randomized, evaluating substance applied (lactulose) and bacterial challenge. We used 630 chicks of commercial strain, which were distributed in six treatments with seven replicates and 15 birds per experimental unit. The microbial challenge was provided to birds in the first days of life containing 5.0 X 102 CFU / 0.5 mL of Salmonella typhimurium. And lactulose at a dose of 0.023 mL / g of body weight up to 14 days of age. The weights of the birds and feed intake were seen weekly for performance measurement. On days seven, 14, 21 and 28, one bird per treatment was necropsied, and liver collected for biometric analysis and histopathological. The contents of ingluvie and caeca were submitted to enumeration of Salmonella and Escherichia coli and bacterial analysis, as well as the spleen, liver and heart were examined bacteriologically. Was also measured the pH of ingluvie, small intestine and cecum and blood collected for evaluation of liver enzymes. The quantitative performance data, biometrics liver, pH, bacterial count and liver enzymes were analyzed by applying ANOVA and Tukey (5%), and data resulting from analysis of fecal excretion of Salmonella were analyzed using the nonparametric chi-square . There was greater weight gain and lower feed conversion (P <0.05) in groups receiving lactulose with or without S. Typhimurium to 21 days of life and decreased fecal excretion of S. Typhimurium at 10 days of age for birds fed lactulose (P <0.05) from the first days of life. It was also found that the lactulose caused decrease in values (P <0.05) pH in the organs of the digestive system for seven days of life and that lactulose decreased (P <0.05) the CFU of E. coli in ingluvie at 21 and 28 days and S. Typhimurium in the treatments administered lactulose before the pathogen and ages. Lactulose prevented infection in the early period of life for birds, showing a better effect when administered 48 hours before inoculation. It was also that there was an increase in relative liver weight by S. Typhimurium in all ages studied and that the lactulose caused mild liver abnormalities, and it was also found that the S. Typhimurium did not cause severe clinical signs or mortality and that its recovery rate decreased with age. It can be concluded that lactulose causes greater weight gain in birds until one week after delivery, as well, was able to decrease the fecal excretion of S. Typhimurium. It also appears that the lactulose changed the pH values, except pH and reduced cecal colonization of S. Typhimurium in the cecum and the number of CFU of E. coli in ingluvie. It is also concluded that lactulose was able to prevent systemic infection while being provided, showing better preventive effect, and also ordered discrete liver, a process similar to congestive / O presente trabalho foi conduzido no Núcleo Experimental de Doenças de Aves e Laboratório de Bacteriologia do Departamento de Medicina Veterinária da Escola de Veterinária da Universidade Federal de Goiás para avaliar os efeitos da lactulose na Salmonella Typhimurium em frangos de corte. O delineamento utilizado foi inteiramente casualizado, avaliando substância aplicada (lactulose) e desafio bacteriano. Foram utilizados 630 pintos de linhagem comercial, os quais foram distribuídos em seis tratamentos, com sete repetições e 15 aves por unidade experimental. O desafio microbiano foi fornecido às aves no primeiro dia de vida contendo 5,0 X 102 UFC /0,5mL de Salmonella Typhimurium. E lactulose na dose de 0,023 mL/g de peso vivo até 14 dias de idade. Os pesos das aves e ração consumida foram considerados semanalmente para cálculo do desempenho. Nos dias sete, 14, 21 e 28, uma ave por parcela foi necropsiada, sendo coletado o fígado para análises biométricas e histopatológicas. Os conteúdos dos inglúvios e dos cecos foram submetidos à enumeração de Salmonella e Escherichia coli e às análises bacterianas, assim como o baço, o fígado e o coração foram examinados bacteriologicamente. Também foi aferido o pH do inglúvio, intestino delgado e ceco e coletado sangue para avaliação das enzimas hepáticas. Os dados quantitativos de desempenho, biometria do fígado, pH, contagem de bactérias e enzimas hepáticas foram analisados aplicando ANOVA e Tukey (5%), e os dados resultantes das análises de excreção fecal da Salmonella foram analisados utilizando o teste não paramétrico qui-quadrado. Observou-se maior ganho de peso e menor conversão alimentar (P<0,05) nos grupos que receberam a lactulose com ou sem S. Typhimurium até 21 dias de vida e que houve redução da excreção fecal de S. Typhimurium aos 10 dias de idade, para as aves que receberam a lactulose (P<0,05) desde o primeiro dia de vida. Constatou-se também, que a lactulose determinou redução nos valores (P<0,05) de pH nos órgãos do sistema digestivo aos sete dias de vida e que a lactulose reduziu (P<0,05) as UFC de E. coli no inglúvio aos 21 e 28 dias de vida e de S. Typhimurium nos tratamentos em que se administrou a lactulose antes do patógeno e nas idades avaliadas. A lactulose impediu infecção no período inicial de vida das aves, mostrando melhor efeito, quando administrada 48 horas antes da inoculação do patógeno. Constatou-se, ainda, que houve aumento do peso relativo do fígado pela S. Typhimurium em todas as idades estudadas e que a lactulose causou discretas alterações hepáticas; e constatou-se também, que a S. Typhimurium não determinou sinais clínicos severos, nem mortalidade e que seu índice de recuperação diminuiu com a idade. Pode-se concluir que a lactulose propiciou maior ganho de peso nas aves até uma semana após seu fornecimento; assim como, foi hábil em diminuir a excreção fecal de S. Typhimurium. Conclui-se também, que a lactulose alterou os valores de pH, com exceção do pH cecal e reduziu a colonização de S. Typhimurium no ceco e o número das UFCs de E. coli no inglúvio. Conclui-se ainda, que a lactulose foi capaz de impedir a infecção sistêmica enquanto estava sendo fornecida, tendo mostrado melhor efeito preventivo; e ainda, determinou alterações hepáticas discretas, semelhantes a um processo congestivo

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:07:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Debora Vieira Lopes.pdf: 3694828 bytes, checksum: 3e94381bb182e551bbc0c29ed0f62ba5 (MD5) Previous issue date: 2009-08-14 / The urinary acidifiers as ammonium chloride and citric acid have been used in the treatment of urinary tract diseases. These illnesses lead to important losses to the brazilian and worldwide swine production. In the present work the hematological and biochemical parameters of sows getting citric acid and ammonium chloride in the food were evaluated. In the present study 48 animals were distributed into 6 groups: group sc-positive control, group nc-negative control, group sac-sows with urinary infection getting citric acid in the food, group sca-sows with urinary infection getting ammonium chloride in the food, nac-sows without urinary infection getting citric acid in the food and group ncasows without urinary infection getting chloride ammonium in the food. Significant differences were observed between the group of animals with urinary infection and the group of animals without urinary infection regarding the medium values of serum creatinine, hemoglobin, hematocrit and MCHC. The medium values of creatinine, hemoglobin and hematrocit were higher in the group of animals with urinary infection. The value of MCHC was higher in the group of animals without urinary infection. Regarding the different treatments, it was observed that the citric acid was able to increase the values of serum albumin in animals without urinary infection, to reduce the value of MCV and the white blood cells counting as well as it increased the value of MCHC in the group of animals with urinary infection and only the value of MCHC in this group was not according to the reference values. The ammonium chloride reduced significantly the values of hemoglobin and hematocrit in animals with and without urinary infection, as well as it reduced the MCV of animals with urinary infection, where the values were according to the reference values. The conclusion is that the presence of urinary infection changed the values of serum creatinine and that the use of citric acid and ammonium chloride didn t change significantly the hematological and biochemical parameters of sows with and without urinary infection. / Os acidificantes urinários tais como o cloreto de amônio e ácido cítrico vêm sendo largamente utilizados no controle de doenças do trato urinário. Estas enfermidades levam a prejuízos relevantes para a suinocultura brasileira e mundial. No presente trabalho foram estudados os parâmetros hematológicos e bioquímicos de matrizes suínas sem infecção urinária e com infecção urinária recebendo ácido cítrico ou cloreto de amônio. Foram utilizados 48 animais distribuídos em seis grupos: grupo sc-controle positivo, grupo nc-controle negativo grupo sac-matrizes com infecção urinária recebendo ácido cítrico, grupo scamatrizes com infecção urinária recebendo cloreto de amônio, grupo nac-matrizes sem infecção urinária recebendo ácido cítrico e grupo nca-matrizes sem infecção urinária recebendo cloreto de amônio. Comparando-se os grupos de animais com infecção e sem infecção urinária, foram observadas diferenças estatísticas significativas quanto aos valores médios de creatinina sérica, hemoglobina, hematócrito e concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM). Os valores médios de creatinina, hemoglobina, hematócrito e CHCM foram superiores no grupo de animais com infecção urinária. Com relação aos ratamentos, verificou-se que o ácido cítrico fornecido na ração aumentou significativamente o valor da albumina sérica, reduziu significativamente o valor do volume corpuscular médio (VCM) e a contagem de leucócitos totais no grupo de animais sem infecção urinária, bem como aumentou significativamente o valor do CHCM no grupo de animais com infecção urinária, sendo que apenas o último estava fora dos valores de referência. O cloreto de amônio reduziu significativamente os valores de hemoglobina e hematócrito em animais com e sem infecção urinária, bem como reduziu o VCM de animais com infecção urinária, sendo que todos os valores permaneceram dentro dos valores de referência. Conclui-se que a presença de infecção urinária elevou os valores de creatinina sérica e que a utilização de ácido cítrico e cloreto de amônio não alterou significativamente os valores bioquímicos e hematológicos de matrizes suínas em produção com e sem infecção urinária.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:07:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Hilari _Pdf.pdf: 539492 bytes, checksum: e0488461a67ab589969fbb878d006e8c (MD5) Previous issue date: 2010-02-26 / The wild animal trafficking is the third largest illegal activity in the world, ranking only behind the trafficking of weapons and drugs. The birds are the animals most affected by the illegal trade. Besides damaging to biodiversity, trafficking can also pose risks to human health. A number of diseases can be transmitted and acquired by the birds, the most commonly detected in the bacterial etiology. Improper management, especially related to transportation and overcrowding, promotes increased susceptibility to infections of birds or even the activation of latent infection with subsequent spread of pathogens. For these reasons this study aimed to conduct research and determine the Enterobacteriaceae resistance of strains of Escherichia coli, as well as raising the frequency of Chlamydophila spp. of parrots seized in actions to combat trafficking of wild animals in Goiás, with proper authorization from the Brazilian Institute of Environment and Renewable Natural Resources (IBAMA / GO). For this, 300 parrots in a period of one year were enrolled in the Screening Center of Wild Animals (CETAS), in Goiânia, Goiás, and underwent clinical and laboratory examinations. For Research Enterobacteriaceae were collected excreta from the bottom of cages, lined with aluminum foil and packed in ice for transport to the laboratory where they were examined by conventional bacteriological method. For the presence of Chlamydophila psittaci 300 cloacal swabs and 300 tracheids were collected and analyzed by polymerase chain reaction (PCR). We have identified the following excreta bacteria of the Enterobacteriaceae: Escherichia coli, 172/300 (33.87%), Enterobacter spp. 153/300 (30.12%), Klebsiella spp. 89/300 (17, 73%), Citrobacter spp. 9 / 300 (11.71%), Proteus vulgaris 21/300 (4.23%), Providencia alcalifaciens 5 / 300 (0.98%), Serratia sp.5/300 (0.98%), Hafnia aivei 3 / 300 ( 0.59%) and Salmonella sp. 1 / 300 (0.19%). Escherichia coli isolates were tested using the sensitivity to antibiotics, which revealed: amoxicillin (10mg) (70.93%), ampicillin (10mg) (75.58%), ciprofloxacin (5&#956;g) (69.76%), chloramphenicol (30&#956;g) (33.14% ), doxycycline (30&#956;g) (64.53%), enrofloxacin (5&#956;g) (41.28%), tetracycline (30&#956;g) (69.19%), sulfonamide (300&#956;g) (71.51%) of antimicrobial resistance. Of samples, 11/300 (3.66%) were positive in PCR analysis for Chlamydophilla spp. The results suggest that parrots from illegal trade are potential backers of zoonotic agents, and also point to the possibility that wild birds would constitute support for transfer of resistant phenotypes of E. coli to the human microbiota and other animals / O tráfico de animais silvestres é a terceira maior atividade ilegal do mundo, estando apenas atrás do tráfico de armas e de drogas. As aves são os animais mais atingidos pelo comércio ilegal. Além de prejudicial à biodiversidade, o tráfico também pode implicar riscos à saúde humana. Uma série de doenças podem ser transmitidas e adquiridas pelas aves, sendo as mais comumente detectadas as de etiologia bacteriana. O manejo inadequado, principalmente relacionado ao transporte e superpopulação, favorece o aumento da susceptibilidade das aves às infecções ou mesmo a ativação de infecções latentes com conseqüente disseminação de patógenos. Pelo exposto objetivouse realizar a pesquisa de Enterobacteriaceae e determinar o perfil de resistência das cepas isoladas de Escherichia coli, assim como, levantamento da freqüência de Chlamydophila spp. de psitacídeos apreendidos nas ações de combate ao tráfico de animais selvagens em Goiás, com devida autorização do Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis (IBAMA/GO). Para tanto, 300 psitacídeos, num período de um ano, foram cadastrados no Centro de Triagem de Animais Silvestres (CETAS), na cidade de Goiânia-Goiás, e submetidos a exames clínicos e laboratoriais. Para a pesquisa de Enterobacteriaceae foram colhidos excretas do fundo de gaiolas, forradas com papel alumínio e acondicionados em gelo para transporte ao laboratório, onde foram analisadas pelo método bacteriológico convencional. Para a pesquisa da Chlamydophila psittaci 300 suabes cloacais e 300 traqueais foram coletados e analisados pela reação em cadeia da polimerase (PCR). Identificaram-se nas excretas as seguintes bactérias da família Enterobacteriaceae: Escherichia coli, 172/300 (33,87%), Enterobacter spp. 153/300 (30,12%), Klebsiella spp. 89/300 (17, 73%), Citrobacter spp. 9/300 (11,71%), Proteus vulgaris 21/300 (4,23%), Providencia alcalifaciens 5/300 (0,98%), Serratia sp.5/300 (0,98%), Hafnia aivei 3/300 (0,59%) e Salmonella sp. 1/300 (0,19%). Isolados de Escherichia coli foram submetidos ao teste de sensibilidade à antimicrobianos, onde se obteve: amoxicilina (10&#956;g) (70,93%), ampicilina (10&#956;g) (75,58%), ciprofloxacina (5&#956;g) (69,76%), cloranfenicol (30&#956;g) (33,14%), doxiciclina (30&#956;g) (64,53%), enrofloxacina(5&#956;g) (41,28%), tetraciclina (30&#956;g) (69,19%), sulfonamida (300&#956;g) (71,51%) de resistência aos antimicrobianos testados. Das amostras colhidas, 11/300 (3,66%) foram positivas na análise pela PCR para Chlamydophilla spp. Os resultados sugerem que psitacídeos provenientes do comercio ilegal são potenciais veiculadores de agentes zoonóticos, e apontam ainda a possibilidade de aves selvagens se constituírem em suporte de transferência de fenótipos de E.coli resistentes para a microbiota humana e de outros animais

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:07:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao fabio henrique de oliveira.pdf: 372660 bytes, checksum: bdd44406d1a8d9f6f7d507fe16807adb (MD5) Previous issue date: 2010-02-19 / Urinary infection is a multifactorial disease, very common in swine herds worldwide, is considered a major cause of reproductive failure that adversely affect the productivity levels of swine. In control of this infection has been frequently used acidifiers the urine. The present study was to evaluate the action of two acidifying, citric acid and ammonium chloride, used to control urinary tract infection, on the physico-chemical and microbiological tests of urine, pH, color and consistency of the feces of swine females in production. We used 48 pregnant females divided into six groups: control (-): females without urinary infection; control (+): females with infection, acid (-): females without infection receiving citric acid, acid (+): infected females receiving citric acid, chloride (-): females without infection receiving ammonium chloride, chloride (+): females with infection receiving ammonium chloride. Were collected samples of urine and feces on days zero, seven and 15 of treatment to perform on the physical-chemical and microbiological analysis. The urinary variables studied were: color, odor, pH, density, protein, sediment and bacterial count. The feces samples were evaluated for pH, color and consistency. The results showed that ammonium chloride was able to reduce the urinary pH, but did not affect the other urinary parameters. Since citric acid showed effect on the color of the urine with a tendency to yellow. The citric acid reduced the bacteriology count. The two acidifiers didn t can reduce the bacterial count, demonstrating that they did not have a bactericidal or bacteriostatic action. The pH of feces increased after supplementation with citric acid and ammonium chloride / A infecção urinária é uma doença multifatorial, muito freqüente nos rebanhos suínos no mundo todo, sendo considerada uma das principais causas de falhas reprodutivas que influenciam negativamente os índices de produtividade da suinocultura. No controle desta infecção tem sido freqüentemente utilizado os acidificantes urinários. O presente trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar a ação de dois acidificantes, ácido cítrico e cloreto de amônio, usados para controlar a infecção urinária, sobre os parâmetros físico-químicos e microbiológicos da urina, pH, coloração e consistência das fezes de matrizes suínas em produção. Foram utilizadas 48 fêmeas em gestação distribuídas em seis grupos: controle (-): fêmeas sem infecção urinária; controle (+): fêmeas com infecção; ácido (-): fêmeas sem infecção recebendo ácido cítrico; ácido (+): fêmeas com infecção recebendo ácido cítrico; cloreto (-): fêmeas sem infecção recebendo cloreto de amônio; cloreto (+): fêmeas com infecção recebendo cloreto de amônio. Foram coletadas amostras de urina e fezes nos dias zero, sete e 15 do tratamento para realização das análises físico-químicas e microbiológicas. Aos 21 dias foram coletadas amostras de urina para verificar se permanecia o efeito dos acidificantes. As variáveis urinárias estudadas foram: cor, odor, aspecto, pH, densidade, proteína, sedimento e contagem bacteriana. Nas amostras de fezes foram avaliados o pH, a coloração e a consistência. Os resultados demonstraram que o cloreto de amônio foi capaz de reduzir o pH, porém não alterou os demais parâmetros urinários. Já o ácido cítrico mostrou efeito sobre a coloração da urina com tendência para o amarelo claro. O ácido cítrico foi o único acidificante capaz de reduzir a contagem bacteriana. O pH das fezes aumentou após a suplementação com ácido cítrico e cloreto de amônio

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:13:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_Kennedy_2010.pdf: 1273886 bytes, checksum: d53179ca59a4af096e34e7c640527b2d (MD5) Previous issue date: 2010-08-13 / Amblyomma cajennense, commonly known as Cayenne tick, is a three-host tick widely distributed in Brazil and in the rest of Latin American countries. Owing to its low host specificity, it plays an important role in the transmission of pathogens in animals and man. Chemical communication is a vital component in tick biology whereby pheromones are largely responsible in the regulation of mating, recognition of sexual partner and copulation. By understanding the behaviour of A. cajennense and the pheromones involved, there exists practical possibility for the use of these substances as an additional method of control thereby reducing the use of acaricides. Based on this, the aims of this work were to quantify and elucidate behaviours induced by pheromones emitted by females A. cajennense as well as identify and characterize qualitatively and biologically the pheromone produced by males. Engorged females were collected from naturally-infested horses for the establishment of laboratory colonies for use in this study. The pheromones were obtained by extraction in hexane and sonication by ultra-sound of fed males and females. The female sex pheromone, 2,6-dichlorophenol (2,6-DCP), was quantified by GC/MS using internal standard and standard addition methods through construction of calibration curves using 5-bromine-4-hydroxy-3-methoxybenzaldehyde and 2,6-DCP, respectively. The male extract was analysed chemically by GC/MS in comparison with standards. As concerns biological tests, glass beads were treated with two femaleequivalents of the female pheromone and 2,6-DCP in an equivalent concentration and exposed to males to observe the induced behaviour(s). Attraction to the male pheromone was evaluated by release of individual unfed, virgin females to three concentrations (1, 5 and 10 male-equivalents) of the extract in olfactometer bioassays. Orientations towards the odour source were analysed by Kruskal-Wallis and displacement angles by Circular Statistics. Aggregation was evaluated by releasing the tick stages in Petri dish bioassays shortly followed by introduction of filter paper strips impregnated with 10 male-equivalents of the extract and recording tick responses on camera. Data analysis was by Chi-square test. Tests for attachment were carried out in vivo in rabbits, Oryctolagus cuniculus, and the released ticks observed in determined intervals between 20min and 24hrs. The data was analysed by Wilcoxon signed-ranked test and Friedman s repeated measures ANOVA. The results indicated that each female emits 2.15 ng ml-1 of pheromone on average. The male extract was positive for benzoic acid, nonanoic acid, salicylic acid, benzaldehyde, 2,6-DCP, limonene and methyl salicylate. The female extract and 2,6- DCP stimulated mounting in up to 80% and 73% of all cases, respectively, confirming that 2,6-DCP alone mediates mounting behaviour in A. cajennense. There was no statistically significant attraction or aggregation in males or females induced by the male pheromone. However, significantly faster and greater attachment was recorded in both. The behavioural responses corresponded with the pheromone s composition. It was concluded that the male pheromone promotes neither attraction nor aggregation but is responsible for faster fixation of A. cajennense adults. The pheromone also contains different proportions and differs from other Amblyomma species as far as the presence or absence of certain components is concerned. The results serve as a first step in advanced studies aimed at development of novel strategies for the management of this species using these pheromones. / Amblyomma cajennense, vulgarmente conhecido como carrapato-estrela, é um carrapato trioxeno que está amplamente difundido no território brasileiro e nos demais países da América Latina. Dada a sua baixa especificidade, assume um importante papel na transmissão de patógenos entre os animais e o homem. A comunicação química é um componente vital na biologia dos carrapatos, onde feromônios são majoritariamente responsáveis na regulação da busca pelo parceiro e a cópula. Compreendendo o comportamento de A. cajennense e os feromônios envolvidos, existem possibilidades práticas do uso destas substâncias como uma forma alternativa e satisfatória de controlálos minimizando o uso de acaricidas. Diante disso, procurou-se neste trabalho, quantificar e elucidar comportamentos instigados por feromônio produzido por fêmeas bem como identificar e caracterizar qualitativa e biologicamente feromônio de machos. Fêmeas ingurgitadas de A. cajennense foram colhidas de eqüinos naturalmente infestados para estabelecimento de colônias no laboratório. Os feromônios foram obtidos por extração e sonicação em hexano de machos ou fêmeas de carrapatos alimentados. Quantificou-se o feromônio sexual, o 2,6-diclorofenol (2,6-DCF), em fêmeas pelas técnicas de padrão interno, com 5-bromo-4-hidróxi-3-metóxi-benzaldeido como referência interna, e adição padrão por meio de cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG/EM) através de construção de curvas de calibração. O extrato dos machos foi analisado quimicamente por CG/EM diante de padrões sintéticos. No que concerne aos testes biológicos, pérolas de vidro foram tratadas com dois equivalentes-fêmea de amostra de feromônio extraído de fêmeas e com 2,6-DCF em uma dose equivalente e expostas aos machos para observar comportamento(s) provocado(s). A atração diante do feromônio de machos foi avaliada pela liberação individual de fêmeas, machos e ninfas virgens, não alimentadas, frente a três concentrações (1, 5 e 10 equivalentes-macho) do extrato de machos, em um olfatômetro. As orientações à fonte de odor foram analisadas por teste de Kruskal-Wallis e os ângulos por Estatística Circular. A agregação foi avaliada pela aplicação de 10 equivalentes-macho do extrato em arenas de placas de Petri e os dados analisados por Chi-quadrado. Testes de fixação foram feitos in vivo em coelhos, Oryctolagus cuniculus, onde os carrapatos foram liberados e observados em intervalos determinados entre 20min e 24hs e suas respostas analisadas por testes de Wilcoxon e ANOVA Friedman. Os resultados mostraram que uma fêmea libera em média 2,15 ng mL-1 de feromônio. O extrato de machos apresentou ácido benzóico, ácido nonanóico, ácido salicílico, benzaldeido, 2,6-DCF, limoneno e salicilato de metila. O extrato de fêmeas e o 2,6-DCF sintético estimularam a monta em até 73% de casos, respectivamente, confirmando que o composto é responsável por mediar à monta em A. cajennense. Não houve atração nem agregação estatisticamente maior dos machos e fêmeas diante do feromônio procedente de machos. Entretanto, uma fixação significativamente maior e mais rápida foi registrada dentro de 24 h em ambos os sexos. Os achados de respostas biológicas corresponderam com a composição química de feromônio de machos. Concluiu-se que o feromônio de machos não promove atração nem agregação, mas é responsável pela fixação de adultos de A. cajennense. O feromônio também possui diferenças na proporção e na presença de determinados compostos descritos em outras espécies do gênero Amblyomma. Os resultados estão discutidos como um ponto de partida para estudos avançados visando o desenvolvimento de novas estratégias de controle e de manejo desta espécie utilizando esses feromônios.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:13:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacaoCarlaLouly.pdf: 1077366 bytes, checksum: b65a73f51a856c3912b92c4b294caf0e (MD5) Previous issue date: 2008-08-15 / This study aimed to identify 2,6-dichlorophenol (2,6-DCP) in Amblyomma cajennense and to evaluate its role in A. cajennense and Rhipicephalus sanguineus courtship. Hexanic extract from attractive females was purified by solid phase extraction and the phenol was identified by the single ion monitoring method using GC/MS. In an olfactometer, the responses of A. cajennense and R. sanguineus males to females, control rubber septa or rubber septa impregnated with 2,6-DCP at 50, 500, and 5000 ng, respectively, were studied. 2,6-DCP was identified in A. cajennense extract and the males oriented themselves toward the concentration of 500 ng. These septa and the females were recognized as copula partners. The septa treated with 2,6-DCP did not attract and were not even recognized by the R. sanguineus males, whereas the females were recognized. Due to the presence of 2,6-DCP in A. cajennense and the results of biological bioassays, it was concluded that this compound acts as an attractant and mounting sex pheromone in this tick, but it does not play any role in R. sanguineus courtship. / Este estudo teve por objetivo identificar o 2.6-dichlorophenol (2,6-DCP)em Amblyomma cajennense de e avaliar seu papel na cópula de A. cajennense e de Rhipicephalus sanguineus. O extrato hexânico de fêmeas atrativas purificado pela extração da fase contínua e o fenol foi identificado pelo método da monitoração do íon usando o GC/MS. Em um olfatômetro, foram estudadas as respostas de machos de A. cajennense e de R. sanguineus às fêmeas, a septos de borracha ou a septos de borracha impregnados com o 2,6-DCP a 50ng, 500ng, e 5000ng. No extrato de fêmeas de A. cajennense 2,6-DCP foi identificado, os machos orientaram-se para a concentração de 500ng, e estes septos e as fêmeas foram reconhecidos como parceiros para a cópula. Os septos tratados com o 2,6-DCP não atraíram e nem foram reconhecidos pelos machos de R. sanguineus. Devido à presença de 2,6- DCP na espécie A. cajennense e aos resultados dos ensaios biológicos, concluiu-se que este composto atua como um feromônio sexual de atração e de monta nesta espécie, mas não desempenha nenhum papel na cópula do R. sanguineus .

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:13:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Vanessa Silvestre Ferreira de Oliveira.pdf: 1341350 bytes, checksum: 9ce3345b7f150b232b983b427448e976 (MD5) Previous issue date: 2011-03-16 / Este trabalho teve como objetivos identificar os protozoários encontrados em fezes de cães, observar a ocorrência da infecção por Neospora caninum e Toxoplasma gondii em cães pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI), desenvolver e validar técnicas de ELISA para o diagnóstico sorológico de N. caninum em cães, determinar a utilidade do Western Blot para esse diagnóstico e observar a ocorrência de DNA de N. caninum, T. gondii e Hammondia heydorni em tecido cerebral de cães. Para isso, foram colhidas amostras de cérebro e sangue de 251 cães, e fezes de 106 cães, provenientes do Centro de Zoonoses de Goiânia, Goiás. Foram utilizados oito soros de infecção experimental por N. caninum e quatro por T. gondii para comprovação dos resultados sorológicos. As amostras de fezes foram concentradas pelo método de Teleman seguido da flutuação com solução de Sheather, para visualização dos oocistos. Foi realizada a extração de DNA de todas as amostras, posteriormente analisadas por nested-PCR específicas para detecção de DNA de N. caninum, H. heydorni, T. gondii, Cryptosporidium spp. e Giardia spp. Uma nested-PCR foi ainda realizada nas amostras em que foram visualizados oocistos menores de 20 µm, para a detecção de DNA de coccídios e posterior seqüenciamento, para correta identificação dos mesmos. A técnica de RIFI foi realizada em todas as amostras de sangue, e técnicas de ELISA foram padronizadas, utilizando-se extrato solúvel de taquizoítos e as proteínas recombinantes rNcGRA7, rNcSAG4, rNcBSR4 e rNcSRS9 de N. caninum. Para a detecção de DNA dos parasitos nos cérebros, estes foram divididos em três partes, e de cada parte foi realizada a extração de DNA. Após a extração, foram realizadas nested-PCR específicas para cada parasito. Nas fezes dos cães, foram encontradas doze amostras contendo oocistos. Em seis, os oocistos eram maiores que 20 µm, e foram identificados como de Cystoisospora canis, e nas outras seis, oocistos menores que 20 µm foram visualizados e identificados como sendo quatro de H. heydorni, um de Cystoisospora spp. e uma amostra apresentava DNA tanto de H. heydorni quanto de Cystoisospora spp. DNA de C. canis foi identificado em quatro amostras, uma amostra foi identificada como G. duodenalis genótipo C e quatro como G. duodenalis genótipo D. Nenhuma amostra de fezes foi positiva para N. caninum e T. gondii, e quatro foram positivas para H. heydorni na PCR específica para este parasito. Nos cérebros analisados, foram encontradas seis amostras (2,4%) positivas a N. caninum e 23 amostras (9,1%) foram positivas a T. gondii. Nenhuma amostra foi positiva a H. heydorni. Anticorpos anti-N. caninum foram encontrados em 18,32% dos cães analisados, e 56,57% dos cães apresentaram sorologia positiva a T. gondii pela técnica de RIFI. Técnicas de ELISA foram padronizadas, utilizando-se extrato solúvel de taquizoítos e as proteínas recombinantes rNcGRA7, rNcSAG4, rNcBSR4 e rNcSRS9 de N. caninum. Foram encontrados valores de sensibilidade e especificidade menores que 84%, além do reconhecimento das proteínas recombinantes pelos dois parasitos, nos soros de infecções naturais e experimentais. Uma baixa concordância entre as técnicas foi observada, com valores de Kappa inferiores a 0,4. Os resultados encontrados indicam que N. caninum está menos presente em fezes de cães, enquanto H. heydorni é mais facilmente encontrada. As amostras que continham Cryptosporidium e Giardia foram identificadas como espécies-específicas. A pesquisa de DNA de parasitos em órgãos de cães pode ser utilizada como uma ferramenta para o diagnóstico post-mortem de infecções por protozoários, porém as técnicas de PCR podem apresentar baixa sensibilidade devido à pequena quantidade de tecido utilizado. Os resultados encontrados no WB indicam não haver um padrão de reconhecimento das proteínas imunodominantes, e que as técnicas sorológicas na neosporose canina têm limitações, devido aos baixos títulos encontrados e à reação cruzada com T. gondii, além da alta prevalência da infecção por T. gondii em cães, e presença de infecções mistas.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:13:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE DE DOUTORADO FRANCISCO ANILTON.pdf: 1620939 bytes, checksum: 474cd6952a1d81661658894052ffbcee (MD5) Previous issue date: 2011-12-06 / This study determined the prevalence of hemagglutination-inhibition antibodies against alphaviruses in horses during an epizootic event by Eastern Equine Encephalitis virus in the state of Paraiba, Brazil, in 2009 and compared the results between the techniques of hemagglutination inhibition and serum neutralization test in microplates. The results of15 arboviruses obtained from serological surveys on horses in Brazil from 2007 to , as well as the results for the arboviruses found in two serological surveys on wild birds in the state of Para, between 2007 and 2008 2009 were analyzed,. In Paraiba, blood was collected from 188 horses during other surveys of 4.402 animals and 544 wild birds. The material was tested by the hemagglutination inhibition technique, neutralization was performed in microplates aiming at virus isolation. In Paraíba, we obtained a true prevalence of 62.2% for Eastern Equine Encephalitis and hemagglutination inhibition test had 79.5% sensitivity and 87.3% specificity . In Brazil, the prevalence rate was 33.3% for arboviruses, 20.6% for flaviviruses, 14.1% for alphavirus and 10.1% for bunyavirus. In birds, the positivity was 28.4%, being 14.7% for alphaviruses, 9.5% for flaviviruses and 7.4% for bunyavirus. There was a high circulation of antibodies against Eastern Equine Encephalitis in inapparent-host animals and the hemagglutination inhibition test can be recommended as screening method. The other arboviruses surveyed were found in animals of the nine states with a significant difference in the prevalence from the motivation of the survey. Migratory birds have proved to be important amplifiers of these agents . / Este estudo determinou a prevalência de anticorpos inibidores de hemaglutinação para alfavírus em equídeos durante uma epizootia pelo vírus da Encefalite Equina do Leste na Paraíba, em 2009 e comparou os resultados obtidos entre as técnicas de inibição de hemaglutinação e teste de soroneutralização em microplacas. Analisou os resultados obtidos para arbovírus em 15 inquéritos sorológicos realizados em equídeos no Brasil, entre 2007 a 2009 e analisou os resultados para os arbovírus encontrados em dois inquéritos sorológicos realizados em aves silvestres no Pará, entre 2007 a 2008. Na Paraíba, foi realizada coleta de sangue de 188 equideos, nos outros inquéritos de 4.402 animais e de 544 aves silvestres. O material foi testado pela técnica de inibição de hemaglutinação, soroneutralização em microplacas e foi feito tentativa de isolamento viral. Na Paraíba, obteve-se uma prevalência real de 62,2% para Encefalite Equina do Leste e o teste de inibição por hemaglutinação apresentou uma sensibilidade de 79,5% e especificidade de 87,3%. No Brasil, a prevalência observada foi de 33,3% para os arbovírus, sendo 20,6% para os flavivírus, 14,1% para os alfavírus e 10,1% para bunyavírus. Nas aves, a positividade foi de 28,4%, sendo 14,7% para os alfavírus, 9,5% para os flavivírus e 7,4% para os bunyavírus. Observou-se uma elevada circulação de anticorpos do vírus da Encefalite Equina do Leste em animais portadores inaparentes e que o teste de inibição por hemaglutinação pode ser recomendado como de triagem. Os outros arbovírus pesquisados foram encontrados em animais dos nove estados, havendo diferença na prevalência a partir da motivação do inquérito. As aves migratórias demonstraram ser importantes amplificadores desses agentes.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:13:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Debora_G_Melo.pdf: 804977 bytes, checksum: 2854d8486722eba4b2703a8a3bd9eab0 (MD5) Previous issue date: 2008-08-14 / The objective of this work was to obtain new isolates of N. caninum and characterize the same pathogenically. In Nerópolis (Goiás, Brazil), two Holstein-Friesian male calves, aged four months, positive for indirect immunoflourescence for Neospora with a titre of 1:400 and 1:800 were utilized for the isolation. Two new isolates, NC- Goiás 1 and NC-Goiás 2, were obtained. NC-Goiás 2 was discarded, however, due to fungal contamination. In addition to characterization of isolate NC-Goiás 1, pathogenic characterizations were done for six Spanish isolates in female mice of the lineage Balb/c. Symptomatology and mortality caused by the isolates, parasitaemia, detection of parasite DNA in the brain and lungs were verified, as well as parasite load in the brain throughout the experiment. Further, the development of humoral immune response of the animals was verified. Statistical analysis was carried analysing the effect of isolate and the infection phase. Differences between percentages encountered through nested-PCR were analysed using the Chi-square test. When significant differences were observed (P<0,05), the groups were compared two by two. The difference between parasite loads, optical density values for IgG1, IgG2a and the relation IgG1/IgG2a between the isolates were analysed by the Kruskal-Wallis test. When statistically significant differences were observed (P<0,05), the groups were compared two by two using the Mann-Whitney U test. In blood and lungs, the parasite was detected mainly in the acute phase (P<0,05). The DNA of N. caninum was also detected in the brain mainly in the chronic phase (P<0,05). On comparing parasite loads between isolates, statistically significant differences were observed between them in the chronic phase (P< 0,05). Antibodies of class IgG1 and IgG2a were detected starting from day 16 P.I. and 4 P.I. respectively, increasing gradually and remaining high until day 64 P.I. An analysis of the relation IgG1/IgG2a demonstrated predominance of IgG2a on day 8 e 16 P.I. and highest levels of IgG1 were detected on day 32 and 64 P.I. The isolate NC-Goiás 1 is the first isolate obtained in Goiás and the first obtained from an infected calf, though clinically healthy, reported from South América. These results are the first of a study of the diversity of the protozoon, N. caninum, and indicate that these isolates are of low pathogenicity in mice as compared with other known isolates / A neosporose bovina foi reconhecida inicialmente em 1989 e a partir de seu reconhecimento e descrição da nova espécie Neospora caninum, a neosporose emergiu como uma séria enfermidade de bovinos e cães. Este trabalho teve como objetivo obter novos isolados de N. caninum e realizar a caracterização patogênica dos mesmos. Em Nerópolis (Goiás, Brasil) dois bezerros machos de quatro meses de idade, da raça Holandês, positivos por Imunofluorescência indireta para Neospora com título de 1:400 e 1:800, foram utilizados para isolamento. Dois novos isolados denominados NC-Goiás 1 e NC-Goiás 2 foram obtidos porém, o isolado NC-Goiás 2 foi perdido devido a contaminação por fungos. Além da caracterização do isolado NC-Goiás 1 foram feitas caracterizações biológicas de seis isolados espanhóis em camundongos fêmeas, da linhagem BALB/c. Foi verificada a sintomatologia e mortalidade provocada pelos isolados, a parasitemia, detecção de DNA do parasito no cérebro e pulmão e determinada a carga parasitária no cérebro ao longo do experimento. Além disso, também se verificou o desenvolvimento da resposta imune humoral dos animais. A análise estatística foi realizada para verificar a influência do isolado e a fase da infecção. As diferenças entre as porcentagens encontradas pela nested-PCR foram analisadas aplicando o teste de Qui-quadrado. Quando observadas diferenças estatisticamente significativas (P<0,05), os grupos foram comparados dois a dois. A diferença entre as cargas parasitárias, valores de densidade óptica para IgG1, IgG2a e a razão IgG1/IgG2a entre os isolados foram analisadas pela prova de Kruskal-Wallis. Quando observadas diferenças estatisticamente significativas (P<0,05), os grupos foram comparados dois a dois pelo teste de U de Mann-Whitney. No sangue e pulmão o parasito foi detectado principalmente na fase aguda (P<0,05). Quanto ao cérebro, foi detectado DNA de N. caninum principalmente na fase crônica (P<0,05). Ao comparar as cargas parasitárias entre os isolados, foram observadas diferenças estatisticamente significativas na fase crônica (P< 0,005). Anticorpos da classe IgG1 e IgG2a foram detectados a partir do dia 16 P.I. e 4 P.I. respectivamente, aumentando gradualmente e se mantendo elevados até o dia 64 P.I. A análise da relação de IgG1/IgG2a mostrou predominância de IgG2a nos dias 8 e 16 P.I. e os níveis de IgG1 mais elevados foram detectados nos dias 32 e 64 P.I. O isolado NC-Goiás 1 é o primeiro isolado de N. caninum obtido em Goiás e o primeiro isolado obtido de um bezerro infectado porém clinicamente saudável relatado na América do Sul. Esses resultados são o início do estudo da diversidade do protozoário N. caninum e indicam que esses isolados são de baixa patogenicidade em camundongos quando comparados com outros isolados conhecidos

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:13:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE ALANA ROMANI.pdf: 1045802 bytes, checksum: f2ca493c65e73360592831be5ef56fb6 (MD5) Previous issue date: 2012-09-21 / The locally adapted breeds to different Brazilian ecosystems characterized as an alternative to food production, for presenting, among other characteristics, greater resistance to diseases.The main objective of this study was to evaluate the epidemiological situation of brucellosis and leptospirosis in nucleus of in situ conservation of Curraleiro and Pantaneiro bovine breeds in Cerrado and Pantanal biomes by serological and molecular diagnosis of these diseases in the livestock. We analyzed serum of 1,280 Curraleiro and 248 Pantaneiro animals on convenience sampling. We employed microscopic agglutination test, for the diagnosis of leptospirosis and the buffered acidified antigen test (Rose Bengal plate test) for brucellosis and 2-mercaptoethanol test for confirmation. The frequency of brucellosis in Curraleiro was 0.7% for animals and 25% for herds. In Pantaneiros, all animals tested were negative for Brucella abortus. The frequency of anti- Leptospira antibodies was 44.8% in Curraleiro and 51.2% in Pantaneiros, and 100% of the herds of both breeds showed positive animals. The factors associated with leptospirosis were access to wetland, abortions, vaccination against leptospirosis and practice of slaughtering in the propertyfor Curraleiro breed; and sex and age, with the highest risk for females aged between 12 and 24 months for Pantaneiro breed. Serological methods were employed above and polymerase chain reaction (PCR) for detecting infection by Brucella spp. and Leptospira spp. in cattle, to evaluate the concordance of the results of such tests. Brucellosis shows low frequency in Curraleiro cattle and is controlled in Pantaneiro. Leptospirosis was widely disseminated in nucleus of in situ conservation. In both breeds the serovars Hardjo and Wolffi were the most prevalent, which reinforce the function of bovine as a source of infection in the herd. However, the presence of reactions to serovars characteristic of wild animals suggests the involvement of local wildlife in the epidemiology of bovine leptospirosis in these nuclei of in situ conservation. The correlation of results obtained by serology and PCR to identify infection by Brucella spp. and Leptospira spp. was weak, which reinforces the idea that the diagnosis is more reliable when more than one method is employed. / As raças bovinas localmente adaptadas aos diferentes ecossistemas brasileiros caracterizam-se como uma alternativa para produção de alimentos, por apresentarem entre outras características, maior resistência a enfermidades. O objetivo geral foi avaliar a situação epidemiológica da brucelose e da leptospirose em núcleos de conservação de bovinos Curraleiros Pé Duro e Pantaneiros no Cerrado e Pantanal, utilizando métodos sorológicos e moleculares no diagnóstico de rebanho destas enfermidades. Foram testados soros de 1.280 bovinos Curraleiros e 248 bovinos Pantaneiros em amostragem de conveniência. Para diagnóstico de leptospirose empregou-se a soroaglutinação microscópica (SAM) e para brucelose adotou-se o teste de antígeno acidificado tamponado (AAT) e confirmação pelo teste de soroaglutinação lenta e 2 mercaptoetanol (2 - ME). Além dos métodos sorológicos descritos, foi empregada a reação em cadeia da polimerase (PCR) para detecção de infecção por Brucella spp. e Leptospira spp. em bovinos Curraleiros Pé Duro, para avaliar a concordância dos resultados de tais testes. A frequência de brucelose em bovinos Curraleiros foi de 0,7% para animais e 25% para rebanhos, enquanto os Pantaneiros foram soronegativos para Brucella abortus. A frequência anticorpos anti-Leptospira em bovinos Curraleiros foi de 44,8% e em Pantaneiros 51,2%. 100% dos rebanhos apresentaram animais soropositivos. Os fatores associados à leptospirose em bovinos Curraleiros foram acesso à área alagadiça, ocorrência de abortos, vacinação contra leptospirose e prática de abate na propriedade. Para bovinos Pantaneiros os fatores associados foram sexo e idade, com maior risco para fêmeas na faixa etária entre 12 e 24 meses. Conclui-se que a brucelose apresenta baixa frequência em bovinos Curraleiros Pé Duro e está controlada em Pantaneiros. A leptospirose revelou-se amplamente disseminada nos núcleos de criação de bovinos de raças localmente adaptadas. Nas duas raças os sorovares mais prevalentes foram Hardjo e Wolffi reforçando o papel dos bovinos como fonte de infecção no rebanho. A ocorrência de positividade para sorovares adaptados à fauna silvestre local sugere a participação da mesma na epidemiologia da leptospirose bovina nos núcleos de conservação das raças. A concordância dos resultados obtidos pela PCR em amostras sanguíneas e pela sorologia para identificação da infecção por Brucella spp. e Leptospira spp. foi fraca, o que reforça da necessidade de validação da PCR tendo em vista que o diagnóstico é mais confiável quando obtido por meio de vários métodos.