Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1655871 bytes, checksum: 7d0213ba4f9cfcbc052053c9cd7fbc98 (MD5) Previous issue date: 2012-05-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The present study aimed to determine the rate of surgical site infection (SSI) in small animals surgery department at the Veterinary Hospital of the Federal University of Viçosa (UFV-VH) and associate this incidence to the following risk factors: surgery wound classification according to their potential contamination, antimicrobial prophylaxis, antimicrobial therapy and number of people present in the operating room during the procedure. For this, the residents were previously trained to standardize the diagnosis of SSI, as well as obtaining the data mentioned above. Animals from the surgical routine of the UFV-VH were included in the study, without changing it, from August 2, 2010 to July 01, 2011. During this period 401 animals were included, with 21 of them presenting ISC, determining an infection rate of 5.24%. After statistical analysis, an association was found between the incidence of SSI and a group of surgeries characterized by presenting contamination risk higher than 5%, which were the potentially contaminated, contaminated and infected surgeries, combined into a single group. Other risk factors evaluated showed no association with SSI, however, on the amount of people present in the surgery room, in absolute values, an SSI rate of 2.84 times higher was detected for surgeries in which the operating room had more than four people. Additionally, we aimed at using the same sample in the same period, to identify bacteria on the surgical wounds diagnosed with SSI in the UFV-VH, and trace its antimicrobial resistance profile. Thus, samples were collected from the 21 patients diagnosed with ISC, which were initially processed to obtain pure cultures. These 21 samples resulted in 61 isolates, which underwent biochemical tests for phenotypic characterization and subsequently by conventional PCR for their genotypic characterization. It was also determined the minimum inhibitory concentration for the most frequently antimicrobials used in the UFV-VH used as follows: amoxicillin/clavulanic acid, cephalothin, tetracycline, ampicillin and oxacillin for Gram-positive and amoxicillin/clavulanic acid, tetracycline, ampicillin and enrofloxacin for Gram negative. It was verified the occurrence of 12 genera of bacteria on the surgical wounds diagnosed with SSI in the UFV-VH, and 63,93% were characterized as Gram-negative and that among these, the genus Escherichia presented with greater frequency. Among the Gram-positive bacteria (36,07%) the genera Staphylococcus has been found in larger quantities. In this genus, resistance to oxacilin was determined in 76,47% of the samples and positive results for the coagulase test were verified. Finally, among all identified genera, greater resistance to ampicillin was detected, followed by tetracycline, cephalothin, enrofloxacin and amoxicillin/clavulanic acid. / O presente estudo teve como objetivo determinar a taxa de infecção do sítio cirúrgico (ISC) na Clínica Cirúrgica de Pequenos Animais do Hospital Veterinário da Universidade Federal de Viçosa (HVT-UFV) e associar essa incidência com os seguintes fatores de risco: classificação da ferida cirúrgica de acordo com seu potencial de contaminação, realização de profilaxia antimicrobiana, prescrição de terapia antimicrobiana e quantidade de pessoas presentes na sala de cirurgia no momento do procedimento. Para isso os médicos veterinários residentes passaram por treinamento prévio para padronizar o diagnóstico de ISC, assim como a obtenção dos dados acima citados. Foram utilizados os animais atendidos na rotina cirúrgica do HVT-UFV sem alterá-la, no período de 02 de agosto de 2010 a 01 julho de 2011. Neste período foram incluídos no estudo 401 animais, entre cães e gatos, dos quais 21 apresentaram ISC, determinando uma taxa de infecção de 5,24%. Após análise estatística dos dados, foi verificada associação entre incidência de ISC e cirurgias com risco de contaminação maior que 5%, sendo estas denominadas cirurgias potencialmente contaminadas, contaminadas e infectadas, reunidas em um único grupo. Os demais fatores de risco avaliados não apresentaram associação com a ocorrência de ISC, porém, em relação à quantidade de pessoas presentes na sala de cirurgia detectou-se, em valores absolutos, uma taxa de ISC 2,84 vezes maior na sala em que estavam presentes mais de quatro pessoas. Objetivou-se ainda com a utilização da mesma amostra e no mesmo período, identificar as bactérias presentes nas feridas cirúrgicas com diagnóstico de ISC no HVT-UFV, assim como traçar seu perfil de resistência aos antimicrobianos. Diante disso, foram coletadas amostras dos 21 pacientes com diagnóstico positivo de ISC, as quais foram processadas para obtenção de culturas puras. A partir dessas 21 amostras foram obtidos 61 isolados, os quais passaram por testes bioquímicos para sua caracterização fenotípica e posteriormente por sequenciamento genético para sua caracterização genotípica. Foi também determinado o perfil de resistência aos antimicrobianos utilizados na Clínica Cirúrgica de Pequenos Animais do HVT-UFV, os quais foram analisados da seguinte forma: amoxicilina/ácido clavulânico, cefalotina, tetraciclina, oxacilina e ampicilina para as bactérias Gram positivas e amoxicilina/ácido clavulânico, tetraciclina, ampicilina e enrofloxacino paras as Gram negativas. Após análise dos dados obtidos pode-se verificar a ocorrência de 12 gêneros de bactérias presentes nas feridas cirúrgicas diagnosticadas com ISC no HVT-UFV. Caracterizaram-se como Gram negativas 63,93% das bactérias identificadas, e dentre estas, o gênero Escherichia foi observado em maior número. Entre as bactérias caracterizadas como Gram positivas (36,07%), o gênero Staphylococcus foi verificado em maior quantidade. Neste gênero foi detectada resistência à oxacilina em 76,47% dos isolados e resultados positivos para o teste da coagulase. Por fim, dentre todos os antimicrobianos testados, a ampicilina foi o antimicrobiano que apresentou maior número de isolados resistentes, seguida pela tetraciclina, cefalotina, enrofloxacino e amoxicilina/ácido clavulânico.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 926741 bytes, checksum: 18d302c22a4907755b01b95cb9c1ea36 (MD5) Previous issue date: 2013-06-04 / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / The diseases associated with PCV2 (PCVAD) require various factors to occur, however, the virus infection is critical to the development of any one of the syndromes. The present study aimed to determine differences in serologic and viremic profiles for PCV2 in the swine breed Piau and a commercial line (Landrace x Large White x Pietrain) at a subclinically infected farm by the virus studied. The experiment was conducted at the Genetic Improvement Pig Farm (GMS), Federal University of Viçosa (UFV), in which it isn´t carried out vaccination against PCV2. This study conducted a cross-sectional sample of sows (> 2 parity), pigs for 1-3 weeks, 3-8 weeks and 8-22 weeks of age. The serum samples were used to measure the level of total antibodies by ELISA and quantitation of viremia by real time PCR. The results showed that, at the age of 3-8 weeks, the Piau breed piglets seroconverted earlier than the commercial line piglets and the Piau breed sows showed lower levels of total antibodies in relation to the commercial line. There were no differences in viremia between the different stages of production within each genetic group or between groups. This work provides evidence that the breed Piau has a different humoral immune response than the commercial line studied when facing a natural PCV2 subclinical infection. The results of this study reinforce the importance of the conservation of native breeds that have not been used for development of high productivity commercial lines. / As doenças associadas ao PCV2 (PCVAD) necessitam de vários fatores para ocorrer, no entanto, a infecção pelo vírus é fundamental para o desenvolvimento de qualquer uma das síndromes. O presente estudo teve como objetivo verificar diferenças nos perfis sorológicos e virêmicos para o PCV2 entre suínos da raça Piau e de uma linhagem comercial (Landrace x Large White x Pietrain) em uma granja subclinicamente infectada pelo vírus estudado. O experimento foi realizado na Granja de Melhoramento Genético (GMS) da Universidade Federal de Viçosa (UFV), na qual não é realizada a vacinação contra o PCV2. O presente estudo realizou uma amostragem transversal em porcas (>2º parto), suínos de 1-3 semanas, 3-8 semanas e 8-22 semanas de idade. As amostras de soro obtidas foram utilizadas para mensuração dos níveis de anticorpos totais por ELISA indireto e quantificação da viremia por PCR em tempo real. Os resultados demonstraram que, na idade de 3-8 semanas, os leitões da raça Piau soroconverteram mais precocemente em relação aos leitões da linhagem comercial e as porcas da raça Piau apresentaram menores níveis de anticorpos totais em relação às da linhagem comercial. Não houve diferença na viremia entre as diferentes fases de produção dentro de cada grupo genético ou entre os grupos. Este trabalho fornece indícios de que a raça Piau apresenta uma resposta imune humoral diferente da desenvolvida pela linhagem comercial estudada diante de uma infecção subclínica natural pelo PCV2. Os resultados obtidos neste estudo reforçam a importância da conservação das raças nativas que não foram utilizadas para formação de linhagens de alta produtividade.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 761454 bytes, checksum: 12b991fd727e757f5f80c026d87d867c (MD5) Previous issue date: 2013-12-19 / The objective of this work is to characterize the microbiological quality of bottled natural mineral water sold in Viçosa - MG and understand users' perceptions related to this source of water supply for human consumption. To diagnose the quality of bottled water samples were collected from four brands of natural mineral water bottled in gallon 20 liters for microbiological evaluation. The quality of these waters was verified by bacteriological tests for Escherichia coli, total coliforms, Enterococci, Pseudomonas aeruginosa and values of color and turbidity. The profile of consumers of bottled water, the perception of water quality and factors that motivate the choice of this type of water were studied by means of interviews with application of qualitative method employing the strategy of content analysis. For the presence of total coliforms only brand D showed this bacterium, equivalent to a contamination of 25 % of the samples from this brand. There was no presence of E.coli in any brand analyzed. For enterococci, all the brands had at least once this bacteria, and the brand B showed contamination of 37.5 % of the studied samples. Presence of P.aeruginosa was observed in two marks (A and C) contaminated with 25% of the investigated samples for each brand. Regarding the qualitative study on consumer perception of bottled natural mineral water was observed that the question of why choice for consumption of bottled water is less related to the sense of health protection and more to the spread of a social practice, consolidated and legitimated in everyday life. / O objetivo deste trabalho foi caracterizar a qualidade microbiológica de águas minerais naturais envasadas comercializadas no município de Viçosa-MG e compreender as percepções dos usuários relacionadas a essa fonte de abastecimento de água para consumo humano. Para o diagnóstico da qualidade da água envasada foram coletadas amostras de quatro marcas de água mineral natural envasada em galão de 20 litros para avaliação microbiológica. A qualidade dessas águas foi verificada por meio de análises bacteriológicas para Escherichia coli, coliformes totais, Enterococos, Pseudomonas aeruginosa e valores de cor e turbidez. O perfil dos consumidores de água envasada, a percepção sobre qualidade da água e fatores que motivam a escolha desse tipo de água foram pesquisados por meio da realização de entrevistas, com aplicação do método qualitativo empregando a estratégia da análise de conteúdo. A presença de coliformes totais foi identificada somente na marca D, sendo que 25% das amostras tiveram resultado positivo. Não houve detecção de E. coli em qualquer das marcas analisadas. Para Enterococos, todas as marcas apresentaram pelo menos uma amostra positiva, sendo que a marca B apresentou contaminação em 37,5% das amostras pesquisadas. A presença de P. aeruginosa foi observada em duas marcas (A e C) com contaminação de 25% das amostras pesquisadas referente a cada marca. Em relação ao estudo qualitativo sobre a percepção dos consumidores de água mineral natural envasada foi possível perceber que a questão do motivo de escolha para o consumo da água envasada está relacionada menos ao sentido de proteção da saúde e mais à disseminação de uma prática social, consolidada e legitimada no cotidiano.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1111599 bytes, checksum: 1d237896c865356f1238a4fc70aec751 (MD5) Previous issue date: 2014-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The taeniasis-cysticercosis complex is a disease of great importance to public and animal health, and human beings play an important role as the only definitive hosts that develop taeniasis. Cysticercosis can affect pigs, which are infected by the larva of Taenia solium, cattle, which are infected by the larva of Taenia saginata and, accidentally, humans, who can act as an intermediate hosts (T. solium), developing cysticercosis in their tissues, with neurocysticercosis being the most severe form of the disease. Despite the importance of taeniasis and cysticercosis to public health, animal health and economy in Brazil, the epidemiological reality of the occurrence of zoonoses is poorly understood. In the state of Minas Gerais, most of the data is obtained from official sanitary inspection agencies in slaughterhouses, and little information is based on field data from live animals. In order to assess the epidemiological situation of the taeniasis-cysticercosis complex in small and medium-sized farms in the municipalities of Iraí de Minas, Romaria, Grupiara and Douradoquara, located in the microregion of Patrocínio, in the Triangulo Mineiro region, this study addressed the occurrence of human taeniasis, bovine and porcine cysticercosis, and the main risk factors associated with transmission of parasitic forms of T. saginata and T. solium in the sampled farms. Thus, a cross-sectional epidemiological study was conducted with 68 farms located in rural areas of the four aforementioned municipalities, and these properties were georeferenced. Data collected consisted of 1002 bovine blood samples, 22 porcine blood samples, and stool samples from 119 members of the households and applied an epidemiological questionnaire. The serological diagnosis of animal cysticercosis was performed by screening using the indirect ELISA test, and the suspected cases underwent Immunoblot testing for confirmation purposes. Stool examination was performed by the simple sedimentation method (HPJ). This study found a prevalence of 4.5% of porcine cysticercosis and 4.69% of bovine cysticercosis in the farms of the rural area of the sampled municipalities between July and August 2013. No case of human taeniasis was disagnosed; however, other enteroparasitoses were diagnosed. This study evaluated the association between some risk factors and the prevalence of cases of bovine cysticercosis, in which the variables that were statistically significant were the profession of the person in charge of such farms, income and the water treatment in the farms. From the georeferencing of farms, which generated maps of the collected points and the points diagnosed with bovine cysticercosis. There was the possibility that the transmission of this parasite may occur from the rivers and tributaries that flow along the sampled municipalities from the hydrography of the region. This study identified the prevalence of taeniasis-cysticercosis complex in the sampled municipalities and the results will aid in the prevention and control of this zoonosis in the areas of occurrence. / O complexo teníase-cisticercose é uma doença de grande importância para a saúde pública e animal, no qual o ser humano desempenha importante papel como o único hospedeiro definitivo, desenvolvendo a teníase. A cisticercose pode acometer o suíno, que desenvolve a larva da Taenia solium, o bovino, que desenvolve a larva da Taenia saginata e, acidentalmente, o homem pode atuar como hospedeiro intermediário (T. solium), desenvolvendo a cisticercose em seus tecidos, sendo a neurocisticercose a forma mais grave. Apesar da importância da teníase e da cisticercose para a saúde pública, para a saúde animal e para economia, a realidade epidemiológica da ocorrência dessas zoonoses no Brasil é pouco conhecida. No estado de Minas Gerais a maioria dos dados é obtida dos serviços oficiais de Inspeção Sanitária nos matadouros- frigoríficos, sendo poucas as informações baseadas em dados de campo oriundos de animais vivos. Com o objetivo de avaliar a situação epidemiológica do complexo teníase-cisticercose em pequenas e médias propriedades rurais dos municípios de Iraí de Minas, Romaria, Grupiara e Douradoquara, situados na microrregião de Patrocínio, região do Triângulo Mineiro, se pesquisou a ocorrência da teníase humana, da cisticercose bovina e suína e os principais fatores de risco associados à transmissão das formas parasitárias T. saginata e T. solium nas propriedades amostradas. Dessa forma, foi realizado um estudo epidemiológico de corte transversal envolvendo as 68 propriedades localizadas nas zonas rurais dos quatro municípios, sendo essas propriedades georreferenciadas. Foram coletadas 1002 amostras de sangue bovino e 22 amostras de sangue suíno, 119 amostras de fezes dos integrantes das famílias residentes nas propriedades e aplicado um questionário epidemiológico. O diagnóstico sorológico da cisticercose animal foi realizado por triagem pelo teste ELISA indireto e os casos suspeitos foram submetidos ao Immunoblot para confirmação. O exame de fezes foi realizado pelo método de sedimentação simples. Este estudo revelou prevalência de 4,5% de cisticercose suína e de 4,69% de cisticercose bovina nas propriedades da zona rural dos municípios amostrados, no período de julho a agosto de 2013. Não foi diagnosticado nenhum caso de teníase humana, no entanto, outras enteroparasitoses foram diagnosticadas. Avaliou-se a associação entre alguns fatores de risco e a prevalência dos casos de cisticercose bovina, no qual as variáveis que se mostraram estatisticamente significantes foram profissão do responsável pela propriedade, renda familiar e tratamento da água da propriedade. A partir do georreferenciamento das propriedades, foram produzidos os mapas dos pontos coletados e dos pontos diagnosticados com cisticercose bovina. Observou-se a possibilidade da transmissão dessa parasitose ocorrer a partir dos rios e seus afluentes nos municípios amostrados a partir da hidrografia da região. O estudo permitiu a identificação da prevalência do complexo teníase-cisticercose nos municípios amostrados e os resultados permitirão auxiliar a prevenção e o controle dessa zoonose nas áreas de ocorrência.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1156387 bytes, checksum: 78ed9fe351974511a2d1393bbd68273a (MD5) Previous issue date: 2003-02-28 / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / The immune response against the pathogen Anaplasma marginale was evaluated after the inoculation, in calves, with the strain AUFV1 2nd passage. For this, routine coloration techniques and immunohistochemistry techniques were performed in slides of superficial limph nodes. In the first week post inoculation, a proliferative response was observed in the paracortical areas and, in the third week, a great number of germinal centers. With the TUNEL technique, many cells in apoptosis were observed, in a number statistically significant six and 13 days post inoculation. Antigens of A. marginale presented by dendritic cells were detected with the Indirect Immunoperoxidase technique six days post inoculation, and these were not observed in the limph node of the negative control animal. The same technique was also performed with the purpose of identifying the surface antigens CD4, CD8 and WC1, and a little augment was observed only on the population of lymphocytes CD4+. Another experiment evolved the isolation of peripheral blood mononuclear cells (PBMCs), wich were isolated in the same days the limph nodes were coleted, for studies of proliferation and production of cytokines after reestimulation ex vivo. The mitogen Con A and initial bodies of A. marginale were utilized as positive controls. The PBMCs were estimulated wiht two synthetic peptides based on the structure of the surface protein of A. marginale MSP-2, named 13590 and 13591. A negative control was also utilized, were was added incomplete medium only. On the proliferative tests, only six days post inoculation the peptides were better than the negative control, with numbers statistically significants (p<0,05). On this way, we could conclude that the inoculated animals developed an adaptative immune response against A. marginale, probably evolving T helper cells. In relation to the synthetic peptides tested, we can only afirm that they are good candidates for the development of a vaccine against bovine anaplasmosis, but more studies have to be performed in this area. / Foi avaliada a resposta imune contra o patógeno Anaplasma marginale através da inoculação, em bezerros, da amostra AUFV1 2a passagem. Para tanto, foram realizadas técnicas de coloração de rotina e técnicas imunohistoquímicas em cortes de linfonodos superficiais. Inicialmente, foi observada uma resposta proliferativa na área paracortical e, a partir da terceira semana pós-inoculação, grande reatividade de centros germinais. Através da técnica de TUNEL, foram observadas inúmeras células em apoptose, em número estatisticamente significativo aos seis e 13 dias pós-inoculação. Antígenos de A. marginale apresentados por células dendríticas foram detectados pela técnica da Imunoperoxidase Indireta já aos seis dias pós-inoculação, não sendo observados no linfonodo do animal controle negativo. A técnica da Imunoperoxidase Indireta também foi utilizada para a detecção de antígenos CD4, CD8 e WC1, sendo observado um pequeno aumento apenas de linfócitos CD4+. Paralelamente a estes estudos, foram isoladas células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), nos mesmos dias em que eram feitas as coletas de linfonodos, para estudos de proliferação e de produção de citocinas após reestimulação ex vivo. Como controle positivo, foi utilizado o mitógeno celular Concanavalina A, além de corpúsculos iniciais de A. marginale. As PBMCs foram estimuladas com dois peptídeos sintéticos baseados na estrutura da proteína de superfície de A. marginale MSP-2, os peptídeos 13590 e 13591. Também foi feito um controle negativo, onde era adicionado apenas meio de cultivo incompleto. Nos testes proliferativos, apenas aos seis dias pós-inoculação os peptídeos tiveram desempenho melhor, estatisticamente significativo (p<0,05), com relação ao controle negativo. Dessa forma, pode-se concluir que os animais inoculados desenvolveram uma resposta imune adaptativa contra o A. marginale, provavelmente envolvendo células T auxiliares. Quanto aos peptídeos sintéticos testados, serão necessários mais estudos, podendo-se afirmar apenas que eles são candidatos ao desenvolvimento de uma vacina eficaz contra o A. marginale.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 923002 bytes, checksum: d038ed7630080e45d27557c298896b35 (MD5) Previous issue date: 2006-12-15 / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Sixteen bovines belonged to Bos taurus taurus species, serumly and parasitically negatives to hemoparasites, were divided in four groups of inoculation: Control groups, Saponine group, Treatment group I and Treatment group II. The following study had the objective to evaluate and measure the cellular immune response and the protection given to bovines, through simultaneous vaccination of synthetics immunogenics SBbo 23290 in opposite sides (Treatment I) and through vaccination of the same immunogenics SBm 7462 + SB 23290 in the same dose (Treatment II). All animals were inoculated three times, through subcutaneous, with intermissions of thirty days. The challenges were done thirty and thirty-four days after third inoculation, placing 2000 grubs of Ripicephalus Boophilus miroplus, out of hemoparasites, and lately inoculating the strain of Babesia bovis UFV1 ninth passing, in the concentration of 1 x 106 Babesias/ml, respectively. The results show that, along the study, animals vaccinated in two forms related obtained an alteration of the sub population of lymphocytes present in the peripheral blood. Among the population of lymphocytes studied, a bigger increase for the sub population of cells B CD21+ was seen. Through the study of kinetic production of interleukin 4, was valued the activation of blood peripheral mononuclear cells (PBMC) cultivated after vaccination of animals and beforehand stimulated together with synthetic peptides SBbo 23290 e SBm 7462. The quantification of IL-4 production showed low levels for Treatment group I, Treatment group II and Saponine group. / Dezesseis bovinos pertencentes a espécie Bos taurus taurus, negativos sorologicamente e parasitologicamente à hemoparasitas foram divididos em quatro grupos de inoculação: grupo Controle, grupo adjuvante Saponina, grupo Tratamento I e grupo com Tratamento II. O presente estudo teve como objetivo avaliar a resposta imune celular e a proteção conferida aos bovinos, pela vacinação simultânea com os imunógenos sintéticos SBm 7462 e SBbo 23290 em lados opostos (Tratamento I) e pela vacinação dos mesmos imunógenos SBm 7462 + SBbo 23290 na mesma dose (Tratamento II). Todos os animais foram inoculados três vezes, via subcutânea, com intervalos de trinta dias. O desafio foi feito 30 e 34 dias após a terceira inoculação, colocando-se 2000 larvas de Ripicephalus Boophilus microplus, livres de hemoparasitas, e posteriormente inoculando a cepa de Babesia bovis UFV1 - 9ª passagem, na concentração de 1x 106 Babesias/mL, respectivamente. Os resultados demonstraram que, ao longo do estudo, os animais vacinados das duas formas desenvolveram uma modificação das sub-populações de linfócitos presentes no sangue periférico. Dentre as populações de linfócitos estudadas houve um maior aumento para as sub-populações de células B CD21+. Por meio de um estudo da cinética de produção de Interleucina-4 avaliou-se a ativação de células sanguíneas mononucleares periféricas (PBMC) cultivadas após a vacinação dos animais e previamente estimuladas juntamente com os peptídeos sintéticos SBbo 23290 e SBm 7462 .Os resultados da produção de IL-4 apresentaram baixos níveis para os grupos Tratamento I, Tramento II e Saponina.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 584551 bytes, checksum: e1d595c9a9fc8674d1102eca696ef69b (MD5) Previous issue date: 2007-07-31 / In Brazil, the American Cutaneous Leishmaniasis (ACL) is highly endemic, and has been a serious public health problem. The country currently confronts the spreading and urbanization, in big and middle-sized cities, of the ACL, which is primally zoonotic and related to forest environments. The present work valued the epidemiologic aspects of ACL in Ilhéus, and the possible risk factors associated to its appearance in the urban area of this city, with previous case reports notified as autochthones of this area. A revision of all investigation cards of ACL cases in Ilhéus, registered by the SVE/SMS/Ilhéus from January 2000 to December 2006 was performed, analyzing the follows information about the referred cases: age, sex, clinical forms, diagnostic date and illness evolution. A study on phlebotomine sand fly occurrence in the urban area of Ilhéus was carried out from March to August 2006, using CDC light traps. The canine infection was investigated through indirect fluorescent antibody test (IFAT) and BIOGENE enzyme- linked immunosorbent antibody test (ELISA) for calazar canine. Additionally, with the purpose of identifying risk factors for cutaneous leishmaniasis transmission in the urban area of Ilhéus, a matched case-control study was carried out involving the human population. The information about the human cases, sand fly fauna and dogs was analyzed with frequency tables. The human cases were also analyzed, with correlation studies between the probable infection date and climate data. The possible risk factors were determinated with X² MacNemar calculation, Odds Ration (OR) and 95% Confidence Intervals (CI). Analysis of investigation records showed that ACL affects mainly adult subjects, with cutaneous lesions as the principal clinical form. The seasonality analysis showed the probable infection period to be quarter September-November (Spring). No statistically significant correlation was observed (p< 0.05) between case number and climate data (rain fall, humidity and temperature). On the other hands, periods with high rainfall and humidity showed a smaller number of cases. Lu. Cortelezzii was the one species collected in urban area. Three seropositive dogs were identified by the immunofluorescence assay. The case-control study showed that the age group 13 to 44 years (p= 0.0061; OR=0.13; 95% CI= 0.076-0.22), living close to woodlands, was associated with decreased risk; the habit of going to the rural area of Ilhéus showed to be a risk factor to ACL (p= 0.003; OR= 5.5; 95%; CI= 1.75- 17.29). With these results, we can conclude that ACL in Ilhéus is not urban, since no typical vector species were found, and the human cases were associated to the habit of going to the rural area. Additionally, the case profiles, adult males, showed that the subjects exposed demonstrate non- compatible characteristics with a wider-ranging exposure, as should be expected to happen if the illness transmission cycle took place in Ilhéus urban area. We also note the importance of maintaining a strict registry of human cases, with maximum rigidity, to guarantee specific diagnostic for ACL, making possible epidemiological analysis more rustworthy. / No Brasil, a Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) é altamente endêmica e constitui sério problema de saúde pública. Primariamente zoonótica, relacionada a ambientes silvestres, atualmente o país enfrenta a expansão e urbanização da LTA em cidades de médio e grande porte. O presente trabalho avaliou os aspectos epidemiológicos da LTA no município de Ilhéus-BA e os possíveis fatores de risco associados ao seu aparecimento na área urbana da cidade, com registros recentes de casos notificados como autóctones dessa área. Foi realizada revisão de todas as fichas de investigação dos casos de LTA procedentes do município de Ilhéus, notificados pelo SVE/SMS/Ilhéus durante o período de janeiro de 2000 a dezembro de 2006, obtendo-se as seguintes informações referentes aos casos: idade, sexo, forma clínica, data de diagnóstico e evolução da doença. Também foi realizado estudo sobre a fauna flebotomínea na área urbana, durante os meses de março a agosto de 2006, utilizando armadilhas luminosas tipo CDC (Center of Disease Control), além da coleta transversal de amostras de soro sangüíneo, para pesquisa de anticorpos (RIFI e ELISA) e dados referentes a cães domiciliados na área urbana e rural. Adicionalmente, foi realizado estudo caso-controle pareado envolvendo a população humana residente na área urbana para identificação de fatores de risco associados. Os dados relativos aos casos humanos, fauna flebotomínea e os cães foram analisados a partir da construção de tabelas de freqüência; os casos huamnos também foram analisados a partir de estudos de correlação entre a provável data de infecção e dados climatológicos (pluviosidade, umidade e temperatura). Os possíveis fatores de risco foram determinados a partir do cálculo do &#967;2 de MacNemar, da razão de chances e respectivo intervalo com 95% de confiança. De acordo com a análise das fichas de investigação, a LTA acomete, principalmente, indivíduos adultos, em idade economicamente ativa, com a forma clínica cutânea como predominante. A análise da sazonalidade demonstrou ser o trimestre setembro-novembro (primavera) o provável período de infecção. Não foram identificadas correlações significativas (p < 0,05) entre o número de casos e dados climatológicos, entretanto, os períodos de pluviosidade e umidade relativa altas, concentraram o menor número de casos. As coletas entomológicas indicam ser a espécie Lu. cortelezzii o único componente da fauna flebotomínea na área urbana. Dos 381 cães pesquisados, apresentaram títulos positivos para Leishmania spp., através da RIFI, apenas três animais. O estudo caso-controle revelou que a faixa etária 13 a 44 anos (p = 0,0061; RC = 0,13; IC 95% = 0,076- 0,22) e morar próximo à mata (p = 0,005; RC = 0,09; IC 95% = 0,05- 0,16) constituíram fatores de proteção para a doença e o hábito de freqüentar a área rural do município, fator de risco para LTA (p = 0,003; RC = 5,5; IC 95% = 1,75- 17,29). A partir dos resultados encontrados podemos concluir que, aparentemente, a LTA no município de Ilhéus, não tenha passado por processo de urbanização, uma vez que não foram identificados vetores típicos do agente e os casos humanos terem estado associados ao fato do paciente freqüentar a área rural. Adicionalmente, o perfil dos casos, homens em idade economicamente ativa, revela que os indivíduos expostos apresentam características não compatíveis com uma exposição mais abrangente, como se esperaria acontecer se a doença tivesse seu ciclo de transmissão instalado na área urbana. Assinalamos também a importância de que a notificação dos casos humanos seja realizada com o máximo rigor, de forma a garantir o diagnóstico específico para a LTA, possibilitando análises epidemiológicas mais fidedignas.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 427044 bytes, checksum: 5c1651c701a5ae2b53e04e42782f989e (MD5) Previous issue date: 2007-09-24 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Infectious bursal disease (IBD) has been the major preoccupation for the poultry industry, especially in the past decade with the emergency of high virulent strains. Mutations in the gene that code the VP2 viral protein of pathogenic strains and the amiss use of attenuate vaccines by few passages have been responsible for the springing of new outbreaks. The purpose of this work was to analyze phylogenetically two different isolates of IBDV in Minas Gerais State by the comparison of the nucleotide sequence of the gene that code VP2 viral capside protein. In order to study the pathogen-host interaction, a subtractive library was constructed from VERO cells infected by IBDV (8 hours post-infection) aiming the identification of differential gene expression during this interaction. For the phylogenic analysis of the isolates, fragments of 251 bp amplified by RT-PCR were cloned and sequenced. The comparison of the sequences revealed that these isolates have 98-100% identity with classical vaccinal IBDV strains indicating that these outbreaks might have been caused by the vaccinal virus. To construct the subtractive library, two cDNA populations were hibridizated: one derived by IBDV infected VERO cells and other by non infected VERO cells. The hibridizated products were amplified for the posterior cloning and evaluation of the differential express products. Understanding of the replication characteristics of the IBDV associated to the study of the virus infection effects in the gene expression of the host cell, shown in this work, will allow the elucidation of the mechanisms involved in the pathogen-host interaction contributing, therefore, for the development of methods more effectives in the control and prevention of the IBDV. / A doença infecciosa bursal (IBD) tem sido, há muitos anos, uma grande preocupação para a indústria avícola, especialmente na década passada devido a emergência de cepas virais hipervirulentas. Mutações no gene responsável pela codificação da proteína viral VP2 de linhagens patogênicas e a má utilização de vacinas atenuadas por poucas passagens têm sido responsáveis pelo aparecimento de novos surtos. A proposta deste trabalho foi analisar filogeneticamente dois diferentes isolados de IBDV de Minas Gerais por meio da comparação da seqüência nucleotídica do gene que codifica a proteína do capsídeo viral VP2. Em razão da necessidade de se estudar melhor a interação patógeno-hospedeiro, objetivou-se ainda a construção de uma biblioteca subtrativa a partir de células VERO infectadas pelo IBDV, 8 horas após a infecção, com a finalidade de identificar genes diferencialmente expressos durante essa interação vírus-célula hospedeira. Para a análise filogenética dos isolados, fragmentos de 251 pb amplificados por RT-PCR foram clonados e seqüenciados. A comparação das seqüências revelou que os isolados possuem identidade de 98-100% com linhagens clássicas vacinais de IBDV, indicando que os surtos analisados podem ter sido causados pelo vírus vacinal. Para a construção da biblioteca subtrativa, duas populações de cDNA foram hibridizadas: uma derivada de células VERO infectadas por IBDV e a outra de células VERO não infectadas. Os produtos hibridizados foram amplificados para posterior clonagem e avaliação dos produtos diferencialmente expressos. O conhecimento das características replicativas do IBDV associado ao estudo das conseqüências da infecção pelo vírus na expressão gênica da célula hospedeira, iniciado neste trabalho, permitirá a elucidação dos mecanismos envolvidos na interação patógeno-hospedeiro, contribuindo assim para o desenvolvimento de métodos mais eficazes no controle e prevenção da IBD.

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCV06MA014.pdf: 2536288 bytes, checksum: 2ced4e5eb18884533f8a66a86da4f665 (MD5) Previous issue date: 2006-07-04 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Aujeszky s disease (AD) is an infect-contagious illness that causes serious economical damages to the producer and the swine industry. Aiming to develop mechanisms and to improve technologies that are faster, more sensitive and more specific for diagnosis and for use in free areas or in AD s eradication programs, the sequence codifier of the glycoprotein E (gE) of Aujeszky s disease virus (ADV) was amplified, cloned and expressed. Through genetic engineering the sequence of the gE gene was propagated in an host organism. The gE was amplified by the technique of polimerase chain reaction (PCR), cloned in the vector pGem®-T Easy and transformed in competent cells of Escherichia coli, DH-5a . The clone obtained was sub-cloned in the expression plasmid pFastBac 1, which contains the promoter gene of the polyhedrin. The obtained subclone was analyzed inside for certification of its correct plasmid orientation with the restriction endonucleases BamH I and EcoR I. The sub-clone with the correct orientation had its DNA extracted and used for transposition inside the bacmid (recombinant baculovirus and helper plasmid with competent DH10Bac cell). Colonies with inserted gE were selected by the phenotype of the colony, which expresses white color when cloned. White recombinant colonies had their DNA extracted and used for cotransfection in insect cells Trichoplusia ni (BTI-Tn5B1-4). The recombinant-gE baculovirus was inoculated in cultured cells and expressed the recombinant gE by PCR and Western blotting . The recombinant-gE baculovirus containing only the gE gene of the VDA will be used for antigen and monoclonal antibodies production, which will aid in the development of a more sensitive, specific and safer for the use in VDA free regions / A doença de Aujeszky (DA) é uma enfermidade infecto-contagiosa que causa graves prejuízos econômicos ao produtor e à agroindústria suinícola. Com o objetivo de desenvolver insumos e aprimorar tecnologias que sejam mais rápidas, sensíveis e específicas de diagnóstico para uso em regiões livres ou em erradicação da DA, a seqüência codificadora da glicoproteína E (gE) do vírus da doença de Aujeszky (VDA) foi amplificada, clonada e expressada. Através da engenharia genética a seqüência do gene da gE foi propagada em um organismo hospedeiro. A gE foi amplificada pela técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) , clonada no vetor pGem®-T Easy e transformada em células competentes de Escherichia coli, DH-5a . O clone obtido foi subclonado no plasmídeo de expressão pFastBac 1, o qual possui o sítio promotor do gene da poliedrina. O subclone obtido foi analisado para certificação de sua orientação correta dentro do plasmídeo com as endonucleases de restrição BamH I e EcoR I. O subclone com a orientação correta teve seu DNA extraído e usado para a transposição dentro do bacmid (baculovírus recombinante e plasmídeo helper em célula competente DH10Bac ). As colônias com inserto gE foram selecionadas pelo fenótipo da colônia, a qual expressa cor branca quando clonada. As colônias brancas recombinantes tiveram seu DNA extraído e usado para a co-transfecção em células do inseto Trichoplusia ni (BTITn5B1- 4). O baculovírus gE-recombinante ao ser inoculado em cultivo celular, expressou a gE recombinante, comprovada pela técnica de PCR e Western blotting . O baculovírus gE-recombinante contendo apenas o gene da gE do VDA será utilizado para produção de antígeno e de anticorpos monoclonais, o que auxiliará no desenvolvimento de um teste de diagnóstico mais sensível, específico e mais seguro para uso em áreas livres do VDA

FAPESP - Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de São Paulo / Os macrófagos desempenham papéis importantes na mediação de respostas imunes inatas induzidas pelo Vírus da Bronquite Infecciosa (IBV) e são protagonistas da conexão entre estas respostas com a imunidade adaptativa. O IBV se replica nas células epiteliais e em macrófagos residentes nos órgãos respiratórios do Gallus gallus domesticus, no entanto, os mecanismos de geração da resposta imune inata contra a infecção viral nesses tecidos, bem como, as alterações morfológicas dos macrófagos aviários, não estão caracterizados totalmente. Este estudo possuiu como objetivo analisar as respostas imunes inata e adaptativa humoral ao IBV por meio da detecção da disfunção mitocondrial de macrófagos aviários da linhagem HD11 infectados pela estirpe viral Mass-41 e da investigação da soroprevalência do IBV em planteis de hospedeiros não vacinados. As investigações foram realizadas com o uso das técnicas de Citometria de Fluxo e ELISA, de acordo com as instruções técnicas dos fabricantes. A expressão mais pronunciada de alterações nas células do sistema fagocítico mononuclear foi a de um número elevado de células apoptóticas precoces em todos os períodos pós-infecção. A infecção viral foi associada à despolarização da membrana mitocondrial e à produção de espécies reativas de oxigênio. No teste sorológico, foi observada uma positividade para anticorpos Anti-IBV de 34% no total dos planteis estudados. Este estudo demonstrou que a replicação viral leva à disfunção mitocondrial de macrófagos e, consequentemente, à imunossupressão dos hospedeiros. Além disso, evidenciou a importância da vacinação, visto que o IBV afeta diretamente a produção e viabilidade das aves, podendo levar à morbidade e mortalidade graves no rebanho. / The macrophages play an important role in mediating innate immune responses induced by the Infectious Bronchitis Virus (IBV) and are protagonists in the connection between these responses and adaptive immunity. The IBV replicates in epithelial cells and macrophages resident in the respiratory organs of Gallus gallus domesticus; however, the mechanisms of generation of innate immune response against viral infection in these tissues, as well as, the morphological alterations of the avian macrophages, have not been fully characterized. Therefore, this study aimed to analyze the innate immune and humoral adaptive responses to IBV through the detection of mitochondrial dysfunction of HD11 avian macrophages infected by the Mass-41 viral strain and the investigation of IBV seroprevalence in flocks of non-vaccinated hosts. The investigations were performed with the use of Flow Cytometry and ELISA techniques, according to the technical instructions of the manufacturer. The most pronounced expression of changes in mononuclear phagocytic system cells was that of a high number of early apoptotic cells, in all postinfection periods. Viral infection was associated with mitochondrial membrane depolarization and the production of reactive oxygen species. In the serological test, a positivity was observed for Anti-IBV antibodies of 34% in the total of the studied subjects. This study demonstrated that viral replication leads to mitochondrial dysfunction of macrophages and, consequently, host immunosuppression. In addition, it showed the importance of vaccination, since the IBV directly affects the production and viability of the birds, which can lead to serious morbidity and mortality in the flock. / Tese (Doutorado)