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Ensayos para la determinación de Haptoglobina y Proteína C reactiva en muestras de saliva y jugo cárnico y estudios proteómicos preliminares en saliva porcina

Gutiérrez Montes, Ana María 24 October 2008 (has links)
Se realizaron cuatro experiencias con el fin desarrollar métodos simples y sensibles para la determinación de las proteínas de fase aguda en muestras de saliva y jugo cárnico de cerdo, y contribuir a un mayor conocimiento sus posibles usos y aplicaciones. En la primera experiencia se desarrolló y optimizó un inmunoensayo para la determinación de la haptoglobina porcina en muestras de saliva y jugo cárnico basado en la fluorometría a tiempo resuelto. En la segunda experiencia se adaptó un inmunoensayo, previamente desarrollado para la determinación de la proteína C reactiva en muestras de sangre entera porcina, para la cuantificación de los niveles de dicha proteína en muestras de saliva y jugo cárnico. La tercera experiencia se centró en estudiar la utilidad práctica de los fluoroinmunoensayos desarrollados para evaluar la respuesta de fase aguda en enfermedades producidas en condiciones de campo. Además se valoró si la saliva y el jugo cárnico podrían utilizarse como muestras alternativas al suero sanguíneo para la determinación de Hp y CRP porcina. Finalmente, la cuarta experiencia consistió en un estudio proteómico en muestras de saliva porcina. Se utilizaron técnicas electroforéticas de alta resolución para realizar la separación de las proteínas salivares en una y dos dimensiones y permitir la identificación de dichas proteínas mediante inmunoblot y espectrofotometría de masas. / The objectives of the present study were:1. To develop and validate a time resolved immunofluorometric assay (TR-IFMA) for Hp quantification in saliva and meat juice of pigs, including the study of the stability of Hp in those body fluids. A monoclonal antibody against porcine Hp was produced for this purpose allowing the development of a fast one-step assay that give results of a 95 wells plate in only 20 minutes.2. To develop and validate a TR-IFMA for CRP quantification in saliva and meat juice of pigs, including the study of the stability of CRP in those body fluids.3. To perform a clinical evaluation of the two TR-IFMAs developed in field conditions. For this purpose Hp and CRP were quantified in serum, saliva and meat juice of animals with PRRS at different ages and the results were compared in order to assess the usefulness of APP determinations in saliva and meat juice as an alternative to serum.4. To perform a preliminary evaluation of whole saliva by proteomics for possible identifications of new biomarkers of disease in pigs.
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Estudio histoquímico e inmunohistoquímico de los músculos de la lengua, paladar y faringe en el perro (Canis familiaris L.)

Sánchez Collado, Cayetano 23 April 2009 (has links)
Un análisis de los tipos de fibras y de su distribución fue realizado en muestras de músculos de la lengua (mm. geniogloso, estilogloso, hiogloso y lingual propio), del paladar y fauces (mm. palatofaríngeo, palatino, elevador y tensor del velo palatino) y de la faringe (mm. terigofaríngeo, estilofaríngeo caudal, hiofaríngeo, tirofaríngeo y cricofaríngeo) en la especie canina. Asimismo, se procesaron muestras del músculo semitendinoso, que fue utilizado como músculo control. La tipificación fibrilar se basó en técnicas histoquímicas (mATPasa y NADH-TR) e inmunohistoquímicas (aplicación de anticuerpos monoclonales específicos frente a las cadenas pesadas de miosina tipos I, IIa y IIx). En todos los músculos estudiados se evidenciaron fibras puras (tipos I, IIA y IIX) e híbridas (tipos IIAX, IIXA y IIC). Por otra parte, en el músculo tensor del velo palatino también fueron identificadas fibras tipo IIM. / An analysis of fiber types and its distribution in canine muscles of the tongue (genioglossus, hyoglossus, styloglossus and lingualis propius muscles), soft palate (palatinus, levator veli palatini, tensor veli palatini and palatopharyngeus muscles), and pharynx (pterygopharyngeus, stylopharyngeus caudalis, hyopharyngeus, thyropharyngeus and cricopharyngeus muscles) was carried out. Additional samples were obtained from the semitendinosus muscle to be used as a control. Muscle fiber types were defined by histochemical (mATPase and NADH-TR), and immunohistochemical (monoclonal antibodies against myosin heavy chain isoforms I, IIa and IIx) techniques. In all analyzed muscles pure I, IIA and IIX fibers and hybrid IIAX, IIXA and IIC fibers were observed. Furthermore, type IIM fibers were identified in tensor veli palatini muscle
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Estudio de la romifidina en sedación y anestesia disociativa felina

Belda Mellado, Eliseo 20 May 2005 (has links)
En la primera parte se evalúan los efectos sedantes, adversos y sobre el sistema cardiorrespiratorio de la romifidina en la especie felina. Se utilizaron cinco y se realizaron 4 grupos experimentales: romifidina 200, 400 y 600 μg/Kg IM y medetomidina 80 μg/Kg IM. En la segunda parte se evalúa la combinación romifidina/ketamina en la especie felina. Se utilizaron siete gatos. Se realizaron 5 grupos experimentales: Romifidina 100 y 200 μg/Kg con ketamina 7,5 y 10 mg/Kg y romifidina 200 μg/Kg con ketamina 5 mg/Kg. Se monitorizó el grado de relajación muscular, la respuesta al clampado y el sistema cardiorrespiratorio durante 60 minutos. Los resultados obtenidos sugieren que el efecto sedante de la romifidina puede ser útil en premedicación anestésica y en intervenciones no dolorosas. La romifidina potencia la actividad de la ketamina, y su combinación compensa parcialmente los efectos adversos de la misma. / Firstly, the sedative, cardio respiratory and adverse effects produced for the administration of romifidine were evaluated in five cats. Four experimental groups were established: romifidine 200, 400 and 600 μg/Kg in comparison to medetomidine 80 μg/Kg. Secondly, the anaesthetic quality, cardiorespiratory and adverse effects produced by the mixture of romifidine and ketamine were studied in seven cats. Five experimental groups were established: Romifidine 100 μg/Kg and ketamine 7.5 mg/Kg and 10 mg/Kg, romifidine 200 μg/Kg and ketamine 5 mg/Kg, 7.5 mg/Kg, and 10 mg/Kg. The drugs were administred intramuscularly. The results of this experience suggest that romifidine could be a good alternative as a sedative for the development of non-painful procedures, as well as anaesthetic pre-medication. Romifidine enhances the anaesthetic effects of ketamine and the disadvantages of each compound are well remedied in the combination. This mixture in combination wit h opioids could be a chance to perform minor surgery procedures.

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