A fenilcetonúria (PKU) é um dos erros inatos do metabolismo mais frequentes. Ela é causada pela deficiência na atividade da fenilalanina hidroxilase, levando à acumulação de fenilalanina e dos seus metabolitos no sangue e tecidos. A PKU ou hiperfenilalaninemia materna não tratada pode resultar em prole não fenilcetonúrica com baixo peso ao nascer e sequelas neonatais, especialmente microcefalia e deficiência intelectual. Os mecanismos subjacentes à neuropatologia da lesão cerebral na síndrome da fenilcetonúria materna são pouco compreendidos. No presente estudo, avaliou-se o possível efeito preventivo da coadministração de creatina e piruvato sobre os efeitos desencadeados pela administração de fenilalanina a ratas Wistar durante a gestação e lactação em algumas enzimas envolvidas na rede de fosforil transferência no córtex cerebral e no hipocampo da prole aos 21 dias de idade. A administração de fenilalanina provocou diminuição do peso corporal, do córtex cerebral e hipocampo e diminuição da atividade da adenilato-cinase e creatina-cinase citosólica e mitocondria. A coadministração de creatina e piruvato foi eficaz na prevenção destas alterações provocadas por fenilalanina, sugerindo que modificações no metabolismo energético podem ser importantes na fisiopatologia da PKU materna. Se estas alterações também ocorrem na PKU materno, é possível que a suplementação com creatina e piruvato à dieta restrita em fenilalanina possa ser benéfica para os filhos de mães fenilcetonúricas. / Phenylketonuria (PKU) is the most frequent inborn error of metabolism. It is caused by deficiency in the activity of phenylalanine hydroxylase, leading to accumulation of phenylalanine and its metabolites. Untreated maternal PKU or hyperphenylalaninemia may result in nonphenylketonuric offspring with low birth weight and neonatal sequelae, especially microcephaly and intellectual disability. The mechanisms underlying the neuropathology of brain injury in maternal PKU syndrome are poorly understood. In the present study, we evaluated the possible preventive effect of the co-administration of creatine plus pyruvate on the effects elicited by phenylalanine administration to female Wistar rats during pregnancy and lactation on some enzymes involved in the phosphoryltransfer network in the brain cortex and hippocampus of the offspring at 21 days of age. Phenylalanine administration provoked diminution of body, brain cortex an hippocampus weight and decrease of adenylate kinase, mitochondrial and cytosolic creatine kinase activities. Coadministration of creatine plus pyruvate was effective in the prevention of those alterations provoked by phenylalanine, suggesting that altered energy metabolism may be important in the pathophysiology of maternal PKU. If these alterations also occur in maternal PKU, it is possible that pyruvate and creatine supplementation to the phenylalanine-restricted diet might be beneficial to the children born from phenylketonuric mothers.

Orientador: Paula Schmidt Azevedo Gaiolla / Resumo: Introdução: A exposição à fumaça de cigarros (EFC) não só aumenta o risco para doenças cardiovasculares como, também, lesa diretamente o miocárdio. Estudos experimentais e clínicos mostram que EFC está associada com hipertrofia e disfunção miocárdica, independentemente de fatores vasculares. Pouco se sabe sobre os mecanismos envolvidos com a lesão miocárdica induzida pela EFC. Dentre estes mecanismos estão as alterações no metabolismo energético. Em um coração normal, 60 a 90% do adenosina trifosfato (ATP) são provenientes da oxidação de ácidos graxos (AG). Em condições patológicas, existem alterações na utilização dos substratos, na biogênese mitocondrial e por fim na produção de ATP, que podem comprometer a morfologia e função cardíaca. Estudos mostram que o tabagismo pode levar a resistência insulínica, que por sua vez pode comprometer a bioenergética cardíaca. Entretanto, não é sabido se há comprometimento do metabolismo energético cardíaco associado à resistência insulínica induzida pela EFC. Adicionalmente, em estudos experimentais, a metformina tem se mostrado eficiente em atenuar a remodelação cardíaca, principalmente atuando sobre o metabolismo energético. Objetivos: Os objetivos do trabalho foi avaliar o papel da metformina na remodelação cardíaca induzida pela fumaça de cigarro, por meio da avaliação morfofuncional cardíaca, do estresse oxidativo, do metabolismo energético, e expressão de proteínas que participam do metabolismo da glicose. Material e Métodos: Foram... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Introduction: Exposure to cigarette smoke (ECS) not only increases the risk for cardiovascular disease but also directly damages the myocardium. Experimental and clinical studies show that ECS is associated with hypertrophy and myocardial dysfunction, regardless of vascular factors. Little is known about the mechanisms involved with myocardial injury induced by ECS. Among these mechanisms are the changes in energy metabolism. In a normal heart, 60 to 90% of the adenosine triphosphate (ATP) comes from the fatty acid oxidation (FA). In pathological conditions, there are alterations in the use of substrates, in mitochondrial biogenesis and finally in the production of ATP, which may compromise morphology and cardiac function. Studies show that smoking can lead to insulin resistance, which in turn can compromise cardiac bioenergetics. However, it is not known whether there is impairment of the cardiac energy metabolism associated with the insulin resistance induced by the ECS. Additionally, in experimental studies, metformin has been shown to be effective in attenuating cardiac remodeling, mainly by acting on energy metabolism. Objectives: The objective of this study was to evaluate the role of metformin in cardiac remodeling induced by cigarette smoke through cardiac morphofunctional evaluation, oxidative stress, energy metabolism, and expression of proteins that participate in glucose metabolism. Material and Methods: Sixty animals were allocated to four groups of 15 animals ea... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Nutrição Humana, 2015. / Submitted by Patrícia Nunes da Silva (patricia@bce.unb.br) on 2015-12-18T13:44:32Z No. of bitstreams: 1 2015_MarianedeAlmeidaCardeal_Parcial.pdf: 250553 bytes, checksum: eb4e7a1f02c158837b19de866bafbce5 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2016-01-05T13:45:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_MarianedeAlmeidaCardeal_Parcial.pdf: 250553 bytes, checksum: eb4e7a1f02c158837b19de866bafbce5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-05T13:45:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_MarianedeAlmeidaCardeal_Parcial.pdf: 250553 bytes, checksum: eb4e7a1f02c158837b19de866bafbce5 (MD5) / Introdução: A cirurgia bariátrica tem se mostrado como um tratamento efetivo para a obesidade clinicamente grave. A melhora no metabolismo energético, como na termogênese induzida pela dieta (TID), tem sido apontada como um dos mecanismos para explicar seu sucesso. Apesar disso, nem todos os pacientes conseguem manter um peso adequado após o procedimento. Assim, questiona-se se após o reganho de peso póscirurgia bariátrica, tais alterações no metabolismo energético continuam atuantes. Objetivos: Investigar se há diferença na TID entre pacientes no pós-operatório tardio do Bypass Gástrico em Y-de-Roux que mantiveram o peso perdido, aqueles que tiveram reganho de peso e aqueles ainda com obesidade clinicamente grave no pré-operatório. Métodos: Trata-se de um estudo transversal onde avaliou-se 3 grupos de pacientes, todas do sexo feminino: 1) 20 com tempo de pós-operatório do BPGYR de pelo menos 2 anos com peso saudável (perda de pelo menos 50% do excesso de peso) (grupo Saudável); 2) 19 com obesidade clinicamente grave (IMC maior que 40 kg/m2 sem comorbidades e maior que 35 kg/m2 com comorbidades) (grupo Pré); 3) 18 que sofreram reganho de peso pós BPGYR (grupo Reganho). Os três grupos foram submetidos a um exame de calorimetria indireta para a medição da taxa metabólica de repouso (TMR), quociente respiratório e TID. Imediatamente após a aferição da TMR, foi ofertado uma refeição mista de consistência normal. Dez minutos após, foram iniciadas as medições de gasto energético, sendo quatro medições com 30 minutos durante as três horas pós-prandiais seguintes. A composição corporal foi avaliada através de bioimpedância elétrica multi-freqüêncial. Em um subgrupo da população foram aferidos os níveis de glicose e insulina basais e pós-prandiais aos 30, 60, 90, 120 e 180 minutos após a alimentação. As médias das áreas sob a curva (AUC) entre os três grupos e medidas no tempo basal foram comparadas usando-se o teste de análise de variância (ANOVA). Considerou-se significativo valor de p < 0.05. Resultados: O grupo Saudável apresentou o maior valor de TMR/kg de peso quando comparado tanto com o grupo Pré quanto com o grupo Reganho (23,03±3,02 kcal/kg; 16,18±2,94 kcal/kg; 17,11±3,28 kcal/kg, respectivamente) (p<0,0001). O grupo Reganho e Pré não apresentaram diferença para esta variável. A TID/kg de peso (AUC0-180 minutos) foi cerca de 42 e 34% maior no grupo saudável em relação ao grupo Pré e Reganho, respectivamente (p<0,0001). A massa magra (kg) apresentou correlação positiva e significativa com a AUC da TID/kg de peso nos três grupos. Encontrou-se também uma correlação positiva entre a AUC da TID/kg de peso e AUC da insulinemia. Conclusão: observou-se uma menor TID/kg de peso no grupo com reganho de peso em comparação ao grupo de peso saudável, sem diferenças com o grupo de paciente obesos. A massa magra e a secreção de insulina parecem ter associação positiva com a termogênese induzida pela dieta. / Introduction: Bariatric surgery has been shown to be an effective treatment for clinically severe obesity. Changes in energy expenditure, especially in dietinduced thermogenesis (DIT), has been identified as an importante mechanism to explain its success. However, not all patients are able to maintain a good weight loss after the procedure. In this way, the question is if in the weight regain after bariatric surgery, these changes in energy metabolism are still active. Objective: To investigate if the weight regain after the Roux en Y Gastric Bypass (RYGB) surgery is associated with a lower diet-induced thermogenesis in the late postoperative period. Methods: This is a crosssectional study where three groups of female patients were evaluated: 1) 20 with RYGB postoperative time at least two years, who have kept a healthy weigh after surgery (loss of at least 50% of excess weight loss) (Healthy group); 2) 19 with clinically severe obesity in the preoperative period (BMI greater than 40 kg/m2 without comorbidities and greater than 35 kg/m2 with comorbidities) (Pre group); 3) 18 who showed weight regain after RYGB (Regain group). The three groups were submited to indirect calorimetry for measure the resting metabolic rate (RMR), respiratory quotient and DIT. Immediately after the RMR measurement, was offered a mixed meal with normal consistency. Ten minutes after the food intake initiation, energy expenditure measurements were initiated. Four 30 minutes measurements were made during the three next posprandial hours. Body composition was assessed by multi-frequencial bioelectrical impedance. In a subpopulation group, glucose and insulin levels were measured at basal and 30, 60, 90, 120 and 180 minutes after feeding. The mean area under the curve (AUC) between the three groups and measurements at baseline were compared using the analysis of variance (ANOVA). Results: The Healthy group had the highest body weight adjusted RMR value when compared with both the Pre and Regain group (23.03 ± 3.02 kcal / kg; 16.18 ± 2.94 kcal / kg; 17.11 ± 3.28 kcal / kg, respectively) (p <0.0001). The Regain and Pre group showed no difference for this variable. The body weight adjusted DIT (AUC0-180 minutes) was about 42 and 34% higher in Healthy group when compared to Pre and Regain group, respectively (p <0.0001). Lean body mass (kg) showed a positive correlation with the AUC of body weight adjusted DIT in the three groups. It was also found a positive correlation between the AUC of body weight adjusted DIT and AUC of plasma insulin. Conclusion: There was a smaller body weight adjusted DIT in the group with weight regain compared to the healthy group, with no difference compared to the obese patient group. The lean mass and insulin secretion seem to have a positive association with diet-induced thermogenesis.

Orientador: Bertha Furlan Polegato / Resumo: Introdução: a doxorubicina é um quimioterápico amplamente utilizado, mas apresenta a cardiotoxicidade como mais grave efeito colateral. A lesão miocárdica se inicia imediatamente após a infusão da droga e é mediada por lesão oxidativa, aumento de apoptose e ativação de metaloproteinases. O açaí é um fruto rico em antocianinas, que apresenta elevado efeito antioxidativo e anti-inflamatório. O objetivo do estudo foi avaliar o efeito do açaí na prevenção da disfunção ventricular e a influência no estresse oxidativo, na apoptose e na atividade das metaloproteinases de matriz no modelo experimental de cardiotoxicidade aguda induzida pela doxorrubicina em ratos. Material e métodos: Foram utilizados 64 ratos Wistar machos, alocados em 4 grupos: controle (C), açaí (A), doxorrubicina (D) e açaí-doxorrubicina (DA). Os ratos receberam dieta padrão (grupos C e D) ou dieta padrão suplementada com açaí a 5% (grupos A e DA) por 4 semanas. Após esse período receberam injeção de doxorrubicina 20mg/kg (grupos D e DA) ou salina (grupos C e A). Quarenta e oito horas após a injeção, foi realizado ecocardiograma e estudo do coração isolado e em seguida foi realizada eutanásia. Foi coletado tecido cardíaco para realização de zimografia, Western blot, avaliação do estresse oxidativo e metabolismo energético, além da dosagem da concentração dos metabólitos de oxido nítrico (NO) no soro. Os resultados foram analisados por ANOVA de duas vias e foi considerada significância estatística de 5%. Result... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-08-12T11:09:39Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1176305 bytes, checksum: 5d862cfc0902b9fccc9819d9959d50fb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-12T11:09:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1176305 bytes, checksum: 5d862cfc0902b9fccc9819d9959d50fb (MD5) Previous issue date: 2014-02-14 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Objetivo: Comparar o efeito da ingestão aguda de amendoim rico em ácido oleico sobre o apetite metabolismo energético entre homens eutróficos e com excesso de peso. Métodos: Quarenta e oito homens (27,2±7,6 anos) foram alocados nos grupos E (eutróficos, n=22) ou EP (excesso de peso, n=26) de acordo com o índice de massa corporal (IMC), entre 18,5 -24,9 kg/m2 e entre 27 -34,9 kg/m2, respectivamente. Após um jejum noturno (12 horas), o gasto energético de repouso (GER) foi avaliado por calorimetria indireta (Deltatrac II). Os indivíduos ingeriram junto ao desjejum 56 g de amendoim rico em ácido graxo oleico. Após intervalo de 30 minutos, a termogênese induzida pela dieta (TID) e oxidação de substratos energéticos foram avaliados nos 200 minutos seguintes. Neste período pós-prandial, foram ainda coletados dados para análise do apetite As variáveis: peso, IMC, composição corporal, perímetro da cintura e GE foram comparadas por meio do teste T ou Mann-Whitney, escolhidos de acordo com os testes de normalidade de Shapiro-Wilk e de igualdade de variâncias de Levene.Além disso, GE, quociente respiratório, oxidação de macronutrientes, TID e apetite foram avaliados por meio do cálculo da área incremental sob a curva (piAUC) pelo método trapezoidal. O nível de significância foi fixado em 5%. Resultados: O grupo EP apresentou maiores valores de GER e gasto energético pós-prandial (p< 0,001), bem como em suas área incremental abaixo da curva (piAUC) (p=0,016), em relação ao grupo E. O amendoim rico em ácido graxo oleico promoveu maior elevação da TID no grupo EP, porém, não foi significante em relação ao E. A oxidação de lipídios foi significativamente superior em todo período pós-prandial no grupo EP (p< 0,05). Em relação ao apetite, piAUC da sensação subjetiva do desejo prospectivo de se alimentar e da fome foi significativamente maior no E (p <0,001). Não houve diferença de saciedade e na compensação calórica entre E e EP (p>0,05), sendo que, ambos apresentaram compensação calórica incompleta (< que 100 pontos). Conclusão: O grupo EP apresentou maior gasto energético de repouso e oxidação de lipídios no período pós-prandial e menor sensação de fome e desejo de se alimentar. Desta maneira, sugere-se que o amendoim rico em ácido graxo oleico pode ser um coadjuvante no controle de peso corporal. Entretanto, como se trata de um estudo agudo, faz-se necessário avaliar os efeitos da inserção deste alimento na alimentação diária para avaliar seus efeitos no controle da obesidade. / Objective: To compare the effect of acute ingestion of peanuts rich in oleic acid on appetite, energy metabolism between normal weight and overweight men. Methods: Forty -eight men (27.2 ± 7.6 years) were divided in groups E (eutrophic, n = 22) or EP (overweight, n = 26) according to body mass index (BMI) between 18.5 -24.9 kg / m2 and between 27 -34.9 kg/m2, respectively. After an overnight fast (12 hours), the resting energy expenditure (REE) was assessed by indirect calorimetry (Deltatrac II). Subjects ingested 56 g of high-oleic fatty acid peanut in the breakfast. After a 30 minute interval, diet-induced thermogenesis (DIT) and energetic substrate oxidation were evaluated in the following 200 minutes. In the postprandial period, data for analysis of appetite were also collected. Variables: weight, BMI, body composition, waist circumference and GE were compared using the t test or Mann-Whitney, chosen according to the tests of the Shapiro-Wilk normality and equal variances Levene. In addition, GE, respiratory quotient, macronutrient oxidation, DIT and appetite were assessed by calculating the incremental area under the curve (piAUC) by the trapezoidal method. The significance level was set at 5 % .Results: The EP group showed higher values of GER and postprandial energy expenditure (p < 0.001), as well as their incremental area under the curve (piAUC) (p = 0.016) compared to group E. The peanuts rich in oleic fatty acid promoted greater elevation of DIT in EP group, however, was not significant in relation to E. The lipid oxidation was significantly higher throughout the postprandial period in PE (p < 0.05). In relation to appetite, piAUC of the subjective feeling of prospective desire to eat and the hungerwere significantly higher in E (p < 0.001). There was no difference in satiety and caloric compensation between E and EP (p > 0.05), and both showed incomplete caloric compensation (<than 100 points). Conclusion: The EP group showed increased resting energy expenditure and lipid oxidation during the postprandial period and lower feelings of hunger and desire to eat. Thus, it is suggested that the peanut rich in oleic fatty acid may be useful in controlling body weight. However, as this is an acute study, it is necessary to evaluate the effects of insertion of food in the daily diet to evaluate its effects in controlling obesity.

Orientador: Ariovaldo Pereira da Cruz Neto / Banca: Fernando Ribeiro Gomes / Banca: Guilherme Gomes / Resumo: Um dos componentes da resposta imune inata é a resposta de fase aguda (RFA), a qual tem como objetivo restabelecer a homeostase e promover a cura de um organismo através de uma serie de alterações fisiológicas que podem acarretar num alto gasto energético. Algumas das alterações são aumento da taxa metabólica, temperatura corpórea (febre) e granulócitos no sangue (eosinófilos, basófilos e neutrófilos). Os animais podem também apresentar anorexia, diminuição da atividade e perda de massa corpórea, minimizando o gasto de energia durante a ativação da RFA. Em situações de aumento da demanda de energia e diminuição da ingestão calórica, os organismos estão sujeitos a uma deficiência nas reservas energéticas, a qual poderia dificultar o combate efetivo contra patógenos. Nos induzimos a ativação da RFA em morcegos frugívoros da espécie Carollia perspicillata por meio de injeção de lipopolissacarídeo (LPS). Quantificamos o custo energético da RFA e como o mesmo é afetado pela sazonalidade (inverno e verão) e disponibilidade de alimento (restrição alimentar e alimentados ad libitum). A perda de massa corpórea durante a RFA foi significativa em ambas as estações, porém apenas em morcegos em restrição alimentar, provavelmente devido a que nos morcegos em restrição alimentar foi necessária a mobilização de reservas energéticas, enquanto que morcegos alimentados ad libitum cobriram parte do custo da RFA através da mobilização de carboidratos ingeridos horas antes do experimento. Não obse... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: One of the innate immune response components is the APR, which can be activated by trauma, infection, stress and inflammation. The APR activation aims to restore homeostasis and health of an organism exposed to the before mentioned events, through several physiological modifications that may result in high energetic cost. Some modifications are increase in metabolic rate, fever and granulocytes in the blood (eosinophils, basophils and neutrophils). Animals may also show anorexia and body mass loss, reducing the energy expenditure during the APR activation. In situations where animals are exposed to increase energy demand and decrease caloric intake, they could experience a deficiency in energy reserves, which may hamper the effectiveness of an immune response. We induced the APR activation in the Short-tailed fruit bats (Carollia perspicillata) by LPS injection. We quantified the energetic cost of the APR and how it is affected by seasonality (winter and summer) and food availability (food restriction and fed ad libitum). Body mass loss during the APR activation was observed in both seasons, but only in bats in food restriction, probably due to the mobilization of energy reserves, while bats fed ad libitum covered part of the APR cost by the mobilization of carbohydrates from the recent ingested food. Bats did not show fever or leukocytosis, nevertheless, we found increase in N/L ratio when bats were in food restriction and during winter. This parameter is also a stress indicator, so probably the combination of limited food availability and increase in the energy demand for thermoregulation during winter, may be a stressful situation for this bat. It seems that bats from this group were able to activate the APR, nevertheless we could not measure if the effectiveness of the response was jeopardized... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Dissertação apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Educação da Universidade do Extremo Sul Catarinense - UNESC, como requisito parcial para a obtenção do título de Mestre em Ciências da Saúde. / Lamotrigine has an antiglutamatergic action, which may contribute to its antidepressant effects, since glutamate has been associated with depression. This study aimed to evaluate the neurochemical and behavioral effects of lamotrigine as an antidepressant in Wistar rats. For this, the study was divided into three steps. The first was to evaluate the effects of the acute and chronic administration of lamotrigine at doses of 10 mg/kg and 20 mg/kg and imipramine (positive control) at a dose of 30 mg / kg in the forced swimming test, levels of BDNF, NGF Bcl-2, AKT and GSK-3 and activity of enzymes creatine kinase, citrate synthase and enzymatic complexes I, II, III, III, IV in the hippocampus, prefrontal cortex and amygdala. The results showed that both treatments reduced the immobility time. BDNF levels were increased in the prefrontal cortex after acute treatment (20 mg/kg) and chronic (10 and 20 mg/kg) with lamotrigine, the level of NGF was also increased in the prefrontal cortex after chronic treatment (10 and 20 mg/kg) with lamotrigine. The increased levels of AKT and Bcl- 2 and GSK-3 decreased after both treatments in all areas of the brain. The activity of citrate synthase and creatine kinase were increased in the amygdala after acute treatment with imipramine and chronic treatment with imipramine and lamotrigine (10 mg/kg) in the hippocampus. The activity of complex I was decreased and the complex II, II-III and IV was increased, but related to the type of treatment and brain area. In a second step, the animals were submitted to the animal model of maternal deprivation in adulthood and treated with lamotrigine at a dose of 20 mg/kg for 14 days. After undergoing the forced swimming test, an evaluation of the levels of BDNF and NGF in the hippocampus, prefrontal cortex and amygdala was performed. The results showed that treatment with lamotrigine reversed the increased immobility time of deprived rats. BDNF levels were decreased in the amygdala of deprived rats treated with saline and lamotrigine treatment reversed this effect. NGF levels were reduced in the hippocampus of deprived rats treated with saline. In the third stage the animals were subjected to a stress protocol for 40 days and then treated with lamotrigine at a dose of 20 mg/kg. The following were evaluated: anhedonia, weight of the adrenal gland, the levels of BDNF, NGF and parameters of oxidative stress in the hippocampus, prefrontal cortex and amygdala. The results showed that stressed rats treated with saline and control rats treated with lamotrigine had an anhedonia behavior and the lamotrigine reversed this effect in stressed rats. The chronic stress procedure induced a moderate decrease of the adrenal gland in stressed rats treated with lamotrigine; stressed rats treated with saline had an increase inBDNF levels in the hippocampus. Lamotrigine control animals induced an increase in lipid peroxidation in the prefrontal and amygdala and in stressed animals in the pre-frontal. The protocol of stress induced an increase in protein carbonylation in the prefrontal and amygdala, lamotrigine reversed this effect in the prefrontal. The activity of the antioxidant enzymes SOD and CAT was decreased in the prefrontal and hippocampus of stressed rats and lamotrigine did not reverse this effect, since lamotrigine in the amygdala increased the activity of SOD and CAT in stressed rats. In conclusion, lamotrigine exerted antidepressant effects in animal models and altered several molecular pathways involved in the pathophysiology and treatment of depression, suggesting that lamotrigine may be a new tool for the pharmacological treatment of mood disorders. / Lamotrigina possui uma ação antiglutamatérgica, o que pode contribuir para seus efeitos antidepressivos, uma vez que o glutamato tem sido associado à depressão. O presente estudo teve como objetivo avaliar os efeitos neuroquímicos e comportamentais da lamotrigina como antidepressivo em ratos Wistar. Para isso, o estudo foi divido em três etapas. A primeira teve como objetivo avaliar os efeitos da administração aguda e crônica da lamotrigina nas doses 10 mg/kg e 20 mg/kg e imipramina (controle positivo) na dose de 30 mg/kg no teste do nado forçado, nos níveis de BDNF, NGF, Bcl-2, AKT e GSK-3 e na atividade das enzimas creatina quinase, citrato sintase e dos complexos enzimáticos I, II-III, III, IV no hipocampo, córtex pré-frontal e amígdala. Os resultados mostraram que ambos os tratamentos reduziram o tempo de imobilidade. Os níveis de BDNF foram aumentados no córtex pré-frontal após tratamento agudo (20 mg/kg) e crônico (10 e 20 mg/kg) com lamotrigina, os níveis de NGF também foi aumentado no córtex pré-frontal após tratamento crônico (10 e 20 mg/kg) com lamotrigina. Os níveis de AKT aumentaram e de Bcl-2 e GSK-3 diminuíram após ambos os tratamentos em todas as áreas do cérebro. A atividade da citrato sintase e creatina quinase foram aumentadas na amígdala após tratamento agudo com imipramina e no tratamento crônico com imipramina e lamotrigina (10 mg/kg) no hipocampo. A atividade do complexo I foi diminuída e no complexo II, II-III e IV foi aumentada, mas relacionados com o tipo de tratamento e área cerebral. Em uma segunda etapa, os animais foram submetidos ao modelo animal de privação materna e na vida adulta tratados com lamotrigina na dose de 20 mg/kg por 14 dias. Após foram submetidos ao teste do nado forçado e avaliado os níveis de BDNF e NGF no hipocampo, córtex pré-frontal e amígdala. Os resultados mostraram que o tratamento com lamotrigina reverteu o aumento do tempo de imobilidade dos ratos privados. Os níveis de BDNF foram diminuidos na amígdala em ratos privados tratados com salina e o tratamento com lamotrigina reverteu este efeito. Os níveis de NGF foram reduzidos no hipocampo em ratos privados tratados com salina. Na terceira etapa os animais foram submetidos a um protocolo de estresse por 40 dias e a seguir tratados com lamotrigina na dose de 20 mg/kg. Após foram avaliados: anedonia, peso da glandula adrenal, os niveis de BDNF, NGF e paramêtros de estresse oxidativo no hipocampo, córtex pré-frontal e amígdala. Os resultados demostraram que ratos estressados tratados com salina e ratos controle tratados com lamotrigina tiveram comportamento anedônico e a lamotrigina reverteu tal efeito em ratos estressados, o procedimento de estresse crônico moderado induziu uma diminuição do peso da glândula adrenal em ratos estressados tratados com lamotrigina; ratos estressados tratados com salina tiveram um aumento nos níveis BDNF no hipocampo. Lamotrigina em animais controle induziu aumento na peroxidação lipídica no pré-frontal e amígdala e em animais estressados no pré-frontal. O protocolo de estresse induziu aumento na carbonilação de proteína em pré-frontal e amígdala, lamotrigina reverteu este efeito no pré-frontal. A atividade das enzimas antioxidantes SOD e CAT foi diminuída no pré-frontal e hipocampo em ratos estressados e a lamotrigina não reverteu este efeito, já na amígdala lamotrigina aumentou a atividade da SOD e CAT em ratos estressados. Concluindo, a lamotrigina exerceu efeitos antidepressivos em diferentes modelos animais e alterou diversas vias moleculares envolvidas com a fisiopatologia e tratamento da depressão, sugerindo-se que a lamotrigina pode ser uma nova ferramenta farmacológica para o tratamento de transtornos do humor.

Submitted by LIVIA MARIA BERALDO SIMÕES MATHIAS null (livia_beraldo@hotmail.com) on 2017-04-14T15:34:07Z No. of bitstreams: 1 MESTRADO Versao Final 13 abril 2017 pdf.pdf: 1211026 bytes, checksum: 6061dee1717bd06a4a45e7d018267638 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-04-17T12:54:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 mathias_lmbs_me_bot.pdf: 1211026 bytes, checksum: 6061dee1717bd06a4a45e7d018267638 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-17T12:54:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 mathias_lmbs_me_bot.pdf: 1211026 bytes, checksum: 6061dee1717bd06a4a45e7d018267638 (MD5) Previous issue date: 2017-02-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Introdução: a doxorubicina é um quimioterápico amplamente utilizado, mas apresenta a cardiotoxicidade como mais grave efeito colateral. A lesão miocárdica se inicia imediatamente após a infusão da droga e é mediada por lesão oxidativa, aumento de apoptose e ativação de metaloproteinases. O açaí é um fruto rico em antocianinas, que apresenta elevado efeito antioxidativo e anti-inflamatório. O objetivo do estudo foi avaliar o efeito do açaí na prevenção da disfunção ventricular e a influência no estresse oxidativo, na apoptose e na atividade das metaloproteinases de matriz no modelo experimental de cardiotoxicidade aguda induzida pela doxorrubicina em ratos. Material e métodos: Foram utilizados 64 ratos Wistar machos, alocados em 4 grupos: controle (C), açaí (A), doxorrubicina (D) e açaí-doxorrubicina (DA). Os ratos receberam dieta padrão (grupos C e D) ou dieta padrão suplementada com açaí a 5% (grupos A e DA) por 4 semanas. Após esse período receberam injeção de doxorrubicina 20mg/kg (grupos D e DA) ou salina (grupos C e A). Quarenta e oito horas após a injeção, foi realizado ecocardiograma e estudo do coração isolado e em seguida foi realizada eutanásia. Foi coletado tecido cardíaco para realização de zimografia, Western blot, avaliação do estresse oxidativo e metabolismo energético, além da dosagem da concentração dos metabólitos de oxido nítrico (NO) no soro. Os resultados foram analisados por ANOVA de duas vias e foi considerada significância estatística de 5%. Resultados: Os animais que receberam doxorrubicina apresentaram diminuição do peso corporal e diminuição da ingestão de água e ração após a injeção da droga e o açaí não interferiu nesses resultados. Quarenta e oito horas após a injeção da doxorrubicina, os animais que receberam apresentaram aumento do átrio esquerdo, aumento do diâmetro sistólico do ventrículo esquerdo, diminuição da fração de encurtamento do ventrículo esquerdo e diminuição da onda E’ septal ao doppler tissular. Quando os ratos receberam doxorrubicina e foram suplementados com açaí, houve melhora da fração de encurtamento e do E’ septal. A doxorrubicina reduziu a +dP/dt, a –dP/dt e a pressão sistólica máxima, sugerindo piora tanto na função sistólica, quanto diastólica, no entanto o açaí não foi capaz de prevenir a disfunção ventricular no estudo do coração isolado. A doxorrubicina também ativou MMP-2, aumentou o estresse oxidativo, provocou alterações no metabolismo energético, com predomínio do metabolismo glicídico e causou aumento na apoptose, evidenciado por aumento na expressão proteica da caspase-3 ativa. Quando o açaí foi administrado conjuntamente, observamos melhora do metabolismo energético cardíaco, porém sem efeito na atividade de metaloproteinases de matriz, no estresse oxidativo ou na apoptose. Não observamos diferenças nas dosagens séricas dos metabólitos do NO entre os grupos. Conclusão: A doxorrubicina induziu alterações na estrutura e função cardíaca, além de aumento do estresse oxidativo, mudanças no metabolismo energético, ativação de MMP-2 e aumento da apoptose. O açaí preveniu o aparecimento de disfunção cardíaca e atenuou as mudanças no metabolismo energético. / Introduction: the doxorubicin is a widely used chemotherapeutic, but it presents cardiotoxicity as a most severe side effect. The myocardial injury immediately begins after the infusion of the drug and is mediated by oxidative injury, increased apoptosis and Metalloproteinases activation. The açaí berry is a fruit rich in anthocyanins, which provides high antirust and antiinflammatory effect. The goal of this study is to evaluate the effect of the açaí berry in the prevention of ventricular dysfunction and the influence on oxidative stress, in the apoptosis and in the of matrix Metalloproteinases activity in the experimental model of acute cardiotoxicity induced by doxorubicin in rats. Material and methods: 64 male Wistar rats were used, allocated in four (4) groups: control (C), açaí (A), doxorubicin (D) and açaí-doxorubicin (AD). The rats received standard diet (groups C and D) or standard diet supplemented with açaí berry to 5% (groups A and AD) for 4 weeks. After this period the rats received doxorubicin injection 20 mg/kg (groups D and AD) or saline (groups C and A). Forty-eight hours after the injection, an Echocardiogram was performed and a study of the isolated heart, and the following procedure was the euthanasia performance. The cardiac tissue of the rats were collected for zymography, Western blot, oxidative stress and energy metabolism evaluation, as well as the metabolic concentration dosage determination of nitric oxide (NO) in the blood serum. The results were analyzed by a two-way ANOVA and there was a statistical significance of 5%. Results: the rats who received doxorubicin showed decreased body weight and decreased water intake and feed after the drug injection and also the açaí berry did not interfere in the results. Forty-eight hours after the doxorubicin injection, the animals which were injected presented an increased left atrium, increased left ventricle systolic diameter, left ventricle systolic diameter decrease, left ventricle shortening and E’ wave to doppler tissular decrease. When the rats received doxorubicin and were supplemented with açaí berry, there was an improvement of the shortening fraction an the E’. The doxorubicin reduced the + dP/dt,-dP/dt and the maximum systolic pressure, suggesting a worsening in both systolic and diastolic function, however the açaí berry was not capable of preventing de ventricular 10 dysfunction on the study of the isolated heart. We did not observe any differences in the NO metabolites dosage between the groups. The doxorubicin also activated MMP-2, increased oxidative stress, caused changes in energetic metabolism, with predominance of the glycidic metabolism and caused an increase in the apoptosis, evidenced by the increase in the active caspase 3 expression. When the açai berry was administered jointly, we observed an improvement of the cardiac energetic metabolism, with no effect in the metalloproteinases of matrix or in the apoptosis. Conclusion: The doxorubicin induced alterations in the structure and cardiac functions, besides the increase of the oxidative stress, energetic metabolism changes, MMP-2 activation and increase in apoptosis. The açaí berry prevented cardiac dysfunction and attenuated the energetic metabolism changes.

Made available in DSpace on 2015-07-08T03:25:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000471669-Texto+Completo-0.pdf: 569 bytes, checksum: 6a1c936d05685eff8820f7ae0824dac4 (MD5) Previous issue date: 2015 / Currently, the execution of biological research that is able to classify and characterize the biodiversity and its ecological relations has been increasingly important and necessary in order to achieve environmental conservation. Conservation physiology is concerned about studying and qualifying many variables related to an organism, so that is possible to increase the knowledge about the functioning of a given species and to detail main environmental requirements or to establish periods of natural vulnerability. The genus Hyalella presents an American distribution and has a great importance on the food chain where it occurs, and becoming a fundamental link in processes of energy transference. The amphipod Hyalella kaingang, a very recent described species and so far not very studied, was used on this study of seasonal variation, and the objective of the present work was to analyze the metabolic behavior, the metabolic allocation, the levels of lipid peroxidation and the activity of antioxidant enzymes of the species. Thirty animals from each sex were used each season of the year, which were collected at Centro de Pesquisa e Conservação da Natureza (CPCN) Pró-Mata, located at São Francisco de Paula, Rio Grande do Sul. In the field, animals were euthanized by cryoanesthesia and in the laboratory they were homogenized in order to quantify levels of total proteins, glycogen, lipids, triglycerides, glycerol lipid peroxidation and the activity of the antioxidant enzymes superoxide dismutase, catalase and glutathione S- transferase. There was significative difference in the levels of glycogen, lipids, triglycerides, lipoperoxidation and in the activity of the enzymes superoxide dismutase and glutathione S-transferase over a full seasonal cycle in both males and females. The results of biomarkers from energetic metabolism and from oxidative stress indicate a feeding trend directed to the ingestion of proteins, and it is also suggested that the reproductive period of the species may be long-lasting, with this hypothesis being based also on the observation of pregnant females in many of the analyzed seasons. It is also suggested that there may be a reproductive peak during autumn. However, more studies must be done with this species so that the knowledge about its reproductive biology, general ecology and physiology can be increased. The present work also reinforces the idea that must be a greater interaction between different scientific fields so that a more precise profile of any given organism can be stated. / Atualmente, a realização de levantamentos biológicos que sejam capazes de classificar e caracterizar a biodiversidade e suas relações ecológicas tem sido cada vez mais importante e necessária na busca da conservação ambiental. A fisiologia da conservação preocupa-se em estudar e qualificar diversas variáveis relacionadas a um organismo, para que assim seja possível ampliar os conhecimentos acerca do funcionamento de determinada espécie e detalhar necessidades básicas ambientais ou estabelecer períodos de vulnerabilidade natural. O gênero Hyalella, de distribuição americana, tem uma grande importância nas cadeias tróficas onde ocorrem, tornando-se uma ligação fundamental em processos de transferência energética. O anfípodo Hyalella kaingang, uma espécie recentemente descrita e pouco estudada, foi utilizada nas pesquisas referentes às análises sazonais, e o objetivo do presente trabalho foi analisar o funcionamento metabólico, a alocação energética, os níveis de lipoperoxidação e atividades de enzimas antioxidantes da espécie. Foram utilizados 30 animais de cada sexo em cada estação do ano, os quais foram coletados dentro do Centro de Pesquisa e Conservação da Natureza (CPCN) Pró-Mata, no município de São Francisco de Paula, Rio Grande do Sul. Em campo, os animais foram eutanaziados por crioanestesia e no laboratório, homogeneizados para a quantificação dos níveis de proteínas, glicogênio, lipídios, triglicerídeos, glicerol, lipoperoxidação e a atividade das enzimas superóxido dismutase, catalase e glutationa S-transferase. Houve diferença significativa nos níveis de glicogênio, lipídios, triglicerídeos, lipoperoxidação e na atividade das enzimas superóxido dismutase e glutationa S-transferase ao longo de um ciclo sazonal, tanto em machos como em fêmeas. Os resultados encontrados a partir dos biomarcadores de metabolismo energético e do estresse oxidativo indicam tendências alimentares direcionadas ao consumo predominantemente de proteínas, e também que o período reprodutivo da espécie seja longo, hipótese baseada também na observação de fêmeas ovígeras em muitas estações. Sugere-se também, que exista um pico de atividade reprodutiva no outono. Contudo, mais estudos devem ser realizados com a espécie para que possam ser aprofundados os conhecimentos acerca da biologia reprodutiva, ecologia geral e fisiologia desta espécie. O presente trabalho reforça a ideia de que deve haver uma maior integração entre diferentes campos científicos para que se possa obter um perfil mais preciso de um determinado organismo.

Submitted by VANESSA DE CÁSSIA MARTINS PIRES FERREIRA (vanessapires.lds@gmail.com) on 2018-04-25T16:27:59Z No. of bitstreams: 2 Dissertação de mestrado projeto metformina.pdf: 1241718 bytes, checksum: 57f3c86c906bfcdd00e17fd79b26db9a (MD5) Dissertação de mestrado projeto metformina (1).pdf: 1241718 bytes, checksum: 57f3c86c906bfcdd00e17fd79b26db9a (MD5) / Rejected by ROSANGELA APARECIDA LOBO null (rosangelalobo@btu.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo as orientações abaixo: problema 1: no arquivo submetido não consta abstract (resumo em inglês), item obrigatório de acordo com as normas do seu programa de pós. Assim que tiver efetuado essa correção submeta o arquivo, em PDF, novamente. Agradecemos a compreensão. on 2018-04-26T18:01:54Z (GMT) / Submitted by VANESSA DE CÁSSIA MARTINS PIRES FERREIRA (vanessapires.lds@gmail.com) on 2018-05-07T13:07:58Z No. of bitstreams: 1 Dissertação de mestrado projeto metformina REPOSITÓRIO.pdf: 1252280 bytes, checksum: 4ad269b53a70756d64e305bf791b0405 (MD5) / Approved for entry into archive by Sulamita Selma C Colnago null (sulamita@btu.unesp.br) on 2018-05-07T18:47:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 pires_vcm_me_bot_int.pdf: 1252280 bytes, checksum: 4ad269b53a70756d64e305bf791b0405 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-07T18:47:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 pires_vcm_me_bot_int.pdf: 1252280 bytes, checksum: 4ad269b53a70756d64e305bf791b0405 (MD5) Previous issue date: 2018-02-28 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Introdução: A exposição à fumaça de cigarros (EFC) não só aumenta o risco para doenças cardiovasculares como, também, lesa diretamente o miocárdio. Estudos experimentais e clínicos mostram que EFC está associada com hipertrofia e disfunção miocárdica, independentemente de fatores vasculares. Pouco se sabe sobre os mecanismos envolvidos com a lesão miocárdica induzida pela EFC. Dentre estes mecanismos estão as alterações no metabolismo energético. Em um coração normal, 60 a 90% do adenosina trifosfato (ATP) são provenientes da oxidação de ácidos graxos (AG). Em condições patológicas, existem alterações na utilização dos substratos, na biogênese mitocondrial e por fim na produção de ATP, que podem comprometer a morfologia e função cardíaca. Estudos mostram que o tabagismo pode levar a resistência insulínica, que por sua vez pode comprometer a bioenergética cardíaca. Entretanto, não é sabido se há comprometimento do metabolismo energético cardíaco associado à resistência insulínica induzida pela EFC. Adicionalmente, em estudos experimentais, a metformina tem se mostrado eficiente em atenuar a remodelação cardíaca, principalmente atuando sobre o metabolismo energético. Objetivos: Os objetivos do trabalho foi avaliar o papel da metformina na remodelação cardíaca induzida pela fumaça de cigarro, por meio da avaliação morfofuncional cardíaca, do estresse oxidativo, do metabolismo energético, e expressão de proteínas que participam do metabolismo da glicose. Material e Métodos: Foram utilizados 60 animais alocados em 4 grupos de 15 animais cada: grupo EFC (n=15), formado por animais expostos à fumaça do cigarro; EFC-MET (n=15) formado por animais expostos à fumaça do cigarro e com ingestão de metformina diluida na água; grupo controle C (n=15) e grupo MET (n=15) que recebeu metformina diluida em água. Após 2 meses os animais foram submetidos a: a) estudo bioquímico para avaliação da exposição ao cigarro, b) estudo ecocardiográfico para avaliação morfofuncional; c) aferição da pressão arterial caudal; d) estudo histológico utilizando imunofluorescência para avaliação de hipertrofia, angiogenese e translocação de GLUt-4; e) Western Blot para avaliação da expressão de proteínas envolvidas com resistência insulínica e metabolismo da glicose; f) avaliação espectrofotométrica para avaliação da atividade de enzimas do metabolismo energético e da quantidade de glicogênio cardíaco. Resultados: Os animais EFC tiveram aumento do átrio esquerdo (AE), do diâmetro do ventrículo esquerdo (DDVE), da massa do ventrículo esquerdo (IMVE), da espessura relativa da parede posterior (ERP) seguido de disfunção diastólica. A metformina atenuou o tamanho do AE, a ERP, a disfunção diastólica em animais EFC. Em relação aos mecanismos potencialmente envolvidos, observou-se que a EFC aumentou a formação de hidroperóxido de lipídeos, mas a associação com metformina e fumo aumentou ainda mais. Porém a metformina, independentemente da EFC aumentou a atividade das enzimas antioxidantes catalase e superóxido dismutase. Em relação ao metabolismo energético, observou-se que o fumo independentemente da metformina reduziu a atividade do complexo I e ATP sintase. Já a metformina aumentou a atividade do complexo I, II e ATP sintase, independentemente da EFC. Não houve interação entre fumo e metformina para o metabolismo energético. Em relação a expressão de proteínas do metabolismo da glicose observou-se que AKT fosforilado/AKT total e GLUT-4 da membrana diminuíram com o fumo e foram atenuados pela metformina. Conclusão: A metformina atenua os danos gerados pela EFC, provavelmente este fato não ocorre por redução do estresse oxidativo. Existe a possibilidade da EFC induzir alteração do metabolismo da glicose, que no tecido cardíaco fora atenuada pela metformina, talvez por aumentar a fosforilação da AKT e aumento do GLUT-4 na membrana. / Introduction: Exposure to cigarette smoke (ECS) not only increases the risk for cardiovascular disease but also directly damages the myocardium. Experimental and clinical studies show that ECS is associated with hypertrophy and myocardial dysfunction, regardless of vascular factors. Little is known about the mechanisms involved with myocardial injury induced by ECS. Among these mechanisms are the changes in energy metabolism. In a normal heart, 60 to 90% of the adenosine triphosphate (ATP) comes from the fatty acid oxidation (FA). In pathological conditions, there are alterations in the use of substrates, in mitochondrial biogenesis and finally in the production of ATP, which may compromise morphology and cardiac function. Studies show that smoking can lead to insulin resistance, which in turn can compromise cardiac bioenergetics. However, it is not known whether there is impairment of the cardiac energy metabolism associated with the insulin resistance induced by the ECS. Additionally, in experimental studies, metformin has been shown to be effective in attenuating cardiac remodeling, mainly by acting on energy metabolism. Objectives: The objective of this study was to evaluate the role of metformin in cardiac remodeling induced by cigarette smoke through cardiac morphofunctional evaluation, oxidative stress, energy metabolism, and expression of proteins that participate in glucose metabolism. Material and Methods: Sixty animals were allocated to four groups of 15 animals each: ECS group (n = 15), composed of animals exposed to cigarette smoke; ECS-MET (n = 15) consisting of animals exposed to cigarette smoke and with ingestion of metformin diluted in water; group C (n = 15) and MET group (n = 15) who received metformin diluted in water. After 2 months the animals were submitted to: a) biochemical study to evaluate the exposure to cigarette; b) echocardiographic study for morphofunctional evaluation; c) measurement of caudal blood pressure; d) histological study using immunofluorescence to evaluate hypertrophy, angiogenesis and GLUt-4 translocation; e) Western Blot for evaluation of the expression of proteins involved with insulin resistance and glucose metabolism; f) spectrophotometric evaluation to evaluate the activity of energy metabolism enzymes and the amount of cardiac glycogen. RESULTS: ECS animals had left atrial enlargement (AE), left ventricular diameter (LVDD), left ventricular mass (LVMI), relative posterior wall thickness (ERP) followed by diastolic dysfunction. Metformin attenuated the size of AE, ERP, diastolic dysfunction in ECS animals. Regarding the potentially involved mechanisms, it was observed that the ECS increased the formation of lipid hydroperoxide, but the association with metformin and smoke increased even more. However, metformin, independently of the ECS increased the activity of the antioxidant enzymes catalase and superoxide dismutase. Regarding energetic metabolism, it was observed that smoking independently of metformin reduced the activity of complex I and ATP synthase. On the other hand, metformin increased the activity of complex I, II and ATP synthase, independently of the ECS. There was no interaction between smoking and metformin for energy metabolism. Regarding the expression of glucose metabolism proteins, it was observed that phosphorylated AKT / total AKT and membrane GLUT-4 decreased with smoke and were attenuated by metformin. Conclusion: Metformin attenuates the damage generated by the ECS, probably not by reducing oxidative stress. There is a possibility that ECS may induce altered glucose metabolism, which in cardiac tissue has been attenuated by metformin, perhaps by increasing the phosphorylation of AKT and increasing GLUT-4 in the membrane. / 2016/14547-0