Orientador: Yong Kun Park / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos e Agricola / Made available in DSpace on 2018-07-14T16:32:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Morga_Alexandre_D.pdf: 2918667 bytes, checksum: 3d11269ea5faac4f3e63bc350c30d472 (MD5) Previous issue date: 1979 / Resumo: No presente trabalho desenvolvemos um estudo referente a duas cepas de bactérias produtoras de ?-amilase, representantes de um total de 851 microrganismos (fungos e bactérias), isolados de diferentes fontes (solo, água, vegetais), usando os meios de cultura agar batata e agar nutriente com amido a 1%. Identificamos estas cepas como Bacillus megaterium e Bacillus polymyxa. Estudamos a produção de ? -amilase por estas bactérias em diferentes temperaturas, para verificarmos a faixa ótima de temperatura de fermentação. Esta faixa foi, para Bacillus megaterium, de 26° a 29°C e, para Bacillus polymyxa, de 34° a 36°C. Estudamos também a influência de diferentes fontes de carboidrato e nitrogênio e suas concentrações. O melhor meio de cultura para a produção de ?-amilase do Bacillus megaterium foi amido 0,5%, farinha de soja 1%, extrato de levedura 1%, e, para a ? -amilase do Bacillus polymyxa, amido 2%, caseína 1% e extrato de levedura 1%. O método usado para verificar a produção dessas 8-amilases em relação ao pH e à massa celular foi o de agitação rotatória e mini-fermentação, nas temperaturas de 28°C para Bacillus megaterium e 35°C para Bacillus polymyxa durante 60 horas. Depois da centrifugação usamos o sobrenadante da cultura como fonte da enzima, a qual foi purificada pela precipitação com (NH4)2S04 a 80% e o precipitado foi dialisado e fracionado em colunas de DEAE-celulose e CM-celulose. A caracterização comparativa da atividade dessas ? -amilases mostrou os seguintes resultados: para o Bacillus megaterium as condições ótimas foram pH 6,5 a temperatura 40°-45°C, sendo a enzima estável na faixa de pH5,0-7,5 e inativada a temperatura acima de 55°C; o Km foi de 0,52mg/ml e a Vmax 1,02 ?mol/min/mg; a percentagem de hidrólise do amido foi 6l,3%. Para o Bacillus polymyxa o pH e a temperatura ótima foram 7,0 e 45°C, respectivamente, sendo a enzima estável na faixa de pH 4,0 a 9,0 e inativada acima de 60°C; o Km foi 1,92mg/ml e Vmax 1,04 ?mol/min/mgi a percentagem de hidrólise do amido foi 68,8% / Abstract: Of 851 micro-organisms (fungi and bacteria) obtained from various sources (soil, water, vegetables) two strains of ?-amylase producing bacteria were isolated, employing potato agar and nutrient agar as culture media. These strains were identified as Bacillus megaterium and Bacillus polymyxa. The ? -amylase.production of these bacteria was studied at different temperatures to determine the best temperature range of fermentation. The range for Bacillus megaterium was between 26°-29°C and for Bacillus polymyxa between 34°-36°C. The effect of various carbohydrate and nitrogen sources and their concentrations was also studied. The best culture medium for the ? -amylase production by Bacillus megaterium was: 0,5% starch, 1% soybean flour, 1% of yeast extract and in the case of Bacillus polymyxa: 2% starch, 1% casein, 1% of yeast extract. The method used for assessing the production of ? -amylase in relation to pH and cellular mass, was rotatory shake and mini-fermentation at the temperature of 28°C for Bacillus megaterium and 35°C for Bacillus polymyxa, during 60 hours. After centrifugation the supernatant of the culture was used as the S-amylase source and purified as follows: precipitation was effected with 80% solution of (NH4)2S04; the precipitate was dialised and fractioned using DEAE-cellulose and CM-cellulose columns. A comparative characterization of the activity of the ? -amylases obtained, showed following resu1ts: best conditions for Bacillus megaterium were pH 6.5 and a temperature of 40°-45°, the enzyme being stab1e in the range of pH 5.0-7.5 and inactivated above 55°C. The km was 0.52mg/ml, Vmax 1.02~mol/min/mg, and the percentage of starch hydro1ysis was 61.3. For Bacillus polymyxa the optimum pH and temperature were 7.0 and 450C, respectively, the enzyme being stab1e in the range between pH 4.0 and 9.0, and inactivated above 60°C. The km was 1.92mg/ml, Vmax 1.04?mo1/min/mg and the degree of starch hydrolysis was 68.8% / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

LIMA, Juliana Paiva Marques. Estudo in situ do efeito antimicrobiano da terapia fotodinâmica em lesões de cárie dentinária. 2009. 53 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-12-14T12:44:29Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_jpmlima.pdf: 1340530 bytes, checksum: 957c40717dd836daf842ab8dee02ea30 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-01T12:57:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_jpmlima.pdf: 1340530 bytes, checksum: 957c40717dd836daf842ab8dee02ea30 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-01T12:57:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_jpmlima.pdf: 1340530 bytes, checksum: 957c40717dd836daf842ab8dee02ea30 (MD5) Previous issue date: 2009 / Photodynamic therapy is a concept of treatment, suggested by the literature as a potential therapy capable of inactivating microbial. Thus, this study assessed the efficacy of photodynamic therapy on injuries of dentine caries by a in situ design of single phase. During 14 days, 20 volunteers wore intra-oral palatal devices containing six human dental dentine slabs. The volunteers wore asked to drop a 40% sucrose solution onto the slabs ten times per day, in order to simulate a cariogenic challenge and to use fluoride dentifrice three times per day. At the end of the experimental period the slabs were randomly allocated into one of the following groups: without sensitizer and light (S-L-); with sensitizer and without light (S+L-); without sensitizer and irradiated with 47J/cm2 energy density (S-L+47); without sensitizer and irradiated with 94J/cm2 energy density (S-L+94); with sensitizer and irradiated with 47J/cm2 energy density (S+L+47); and with sensitizer and irradiated with 94J/cm2 energy density (S+L+94). The sensitizer of choice was the toluidine blue O at 100 g/mL concentration and radiation originated from a light-emitting diode (LED) with a 638,8 nm predominant wavelength. Before and after the treatments, dentine samples were collected and analyzed to figure out the total microorganisms, total streptococci, mutans streptococci and lactobacilli. The data of the counts were transformed into log10.The values of log reduction was achieved and the statistical differences identified by ANOVA One way and Tukey Kramer tests (p<0,05). In both analyses statistically significant difference between the microbial counts before and after treatment in groups (S-L+47), (S+L+94), (S+L+94) for all microorganisms tested are founded. It was concluded that PACT in the tested parameters was effective in promoting microbial death and that the exposure time of dentine to 10 minutes of light was also effective in microbial inactivation. / Terapia fotodinâmica é um conceito de tratamento, sugerido pela literatura como uma potencial terapia capaz de proporcionar inativação microbiana. Desta forma, este estudo avaliou a ação da terapia fotodinâmica sobre lesões de cárie dentinária, mediante um delineamento in situ de única fase. Durante 14 dias, 20 voluntários utilizaram dispositivos intra-orais palatinos, contendo, cada um, seis blocos de dentina humana. Todos os voluntários foram instruídos a gotejar sobre os blocos uma solução de sacarose a 40% dez vezes ao dia, simulando um desafio cariogênico e a utilizar dentifrício fluoretado três vezes ao dia. No final deste período clínico, os blocos foram randomicamente alocados em um dos seguintes grupos: sem fotossensibilizador e luz (F-L-); com fotossensibilizador e sem luz (F+L-); sem fotossensibilizador e com luz com densidade de energia de 47J/cm2(F-L+47); sem fotossensibilizador e com luz com densidade de energia de 94J/cm2 (F-L+94); com fotossensibilizador e irradiados com densidade de energia de 47J/cm2(F+L+47); com fotossensibilizador e irradiados com densidade de energia de 94J/cm2(F+L+94). O fotossensibilizador de escolha foi azul de orto-toluidina na concentração de 100 g/mL e a irradiação originada de um diodo emissor de luz (LED) com comprimento de onda predominante em 638,8nm. Amostras de dentina cariada de cada bloco foram coletadas antes e após os tratamentos e analisadas para contagem de microorganismos totais, estreptococos totais, estreptococos grupo mutans e lactobacilos. Os dados das contagens foram transformados em log10, os valores de log redução foram obtidos e as diferenças estatísticas identificadas através dos testes ANOVA One way e Tukey Kramer (p<0,05). Em ambas as análises, foram observadas diferenças estatisticamente significativas entre as contagens microbiológicas antes e depois dos tratamentos nos grupos (F-L+94), (F+L+47), (F+L+94) para todos os microrganismos testados. Concluiu-se que a terapia fotodinâmica foi efetiva na morte microbiana nos parâmetros testados e que o tempo de exposição da dentina à luz de 10 minutos, também, promoveu inativação microbiana.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2017. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2017-06-22T14:53:35Z No. of bitstreams: 1 2017_NaraRúbiaSouza.pdf: 1094041 bytes, checksum: 5b066bd9df59cb7e71acf5c98349863b (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-08-09T16:44:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_NaraRúbiaSouza.pdf: 1094041 bytes, checksum: 5b066bd9df59cb7e71acf5c98349863b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-09T16:44:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_NaraRúbiaSouza.pdf: 1094041 bytes, checksum: 5b066bd9df59cb7e71acf5c98349863b (MD5) Previous issue date: 2017-08-09 / Os objetivos deste trabalho foram pesquisar Salmonella spp., promover a caracterização microbiológica em amostras de ovos inspecionados comercializados na região do Distrito Federal, realizar antibiograma e detectar genes de resistência antimicrobiana nos isolados.Nas 140 amostras de ovos analisadas,não foi encontrada presença do microrganismo Salmonella spp.. Na caracterização microbiológica das 140 amostras de ovos foram isolados 42 microrganismos em 38 ovos, sendo 24/140 (17,1%) de Staphylococcus coagulase negativa, 4/140 (2,8%) de Enterobacter spp., 4/140 (2,8%) de Escherichia coli, 3/14 (2,14%) de Hafnia alvei, 2/140 (1,42%) de Pseudomonas spp., 1/140 (0,71%) de Corynebacterium spp., 1/140 (0,71%) de Proteus mirabilis, 1/140 (0,71%) de Providencia spp., 1/140 (0,71%) de Yersinia spp., 1/140 (0,71%) de Acinetobacter spp. O perfil de susceptibilidade antimicrobiana demonstrou que os 42 microrganismos apresentaram resistência a pelo menos um antimicrobiano sendo o maior índice de resistência, 14/42 (58,3%), dos microrganismos isolados foram para Tetraciclina e Vancomicina. Não foram detectados os genes de resistência antimicrobiana para Sulfonamidas, Beta-lactâmicos, Clorafenicol, Aminoglicosídeos e Tetraciclina nos isolados. Foi detectado o gene da integrase Intl1 em 3/42 microrganismos. Não foi detectada a presença de Salmonella spp. nas amostras analisadas e vários diferentes microrganismos foram isolados na caracterização microbiológica. Foram detectados ainda a presença fenotípica de resistência antimicrobiana e o gene da integrase 1. No entanto maiores estudos devem ser realizados para pesquisa de Salmonella spp em ovos e a verificação da origem da resistência antimicrobiana nos microrganismos isolados de ovos inspecionados comercializados na região do Distrito Federal. / The objectives of this work were to investigate Salmonella spp., to promote the microbiological characterization in samples of inspected eggs commercialized in the Federal District, to perform antibiogram and to detect antimicrobial resistance genes in the isolates. In the 140 samples of eggs analyzed, no microorganism was found Salmonella spp. In the microbiological characterization of the 140 egg samples, 42 microorganisms were isolated in 38 eggs, 24/140 (17.1%) of coagulase negative Staphylococcus, 4/140 (2.8%) Enterobacter spp., 4 / 140 (2.8%) of Escherichia coli, 3/14 (2.14%) of Hafnia alvei, 2/140 (1.42%) of Pseudomonas spp., 1/140 (0.71%) of Corynebacterium spp., 1/140 (0,71%) Protein mirabilis, 1/140 (0.71%) Providencia spp., 1/140 (0.71%) Yersinia spp., 1/140 (0, 71%) of Acinetobacter spp. The antimicrobial susceptibility profile showed that the 42 microorganisms showed resistance to at least one antimicrobial being the highest resistance index, 14/42 (58.3%), of the isolated microorganisms were for Tetracycline and Vancomycin. No antimicrobial resistance genes were detected for Sulfonamides, Beta-lactams, Chlorphenicol, Aminoglycosides and Tetracycline in the isolates. Intl1 integrase gene was detected in 3/42 microorganisms. No evidence of Salmonella spp. In the analyzed samples and several different microorganisms were isolated in the microbiological characterization. The phenotypic presence of antimicrobial resistance and the integrase 1 gene were also detected. However, further studies should be carried out to investigate Salmonella spp in eggs and verify the origin of antimicrobial resistance in isolated microorganisms from inspected eggs marketed in the Federal District .

Este estudo teve como finalidade, testar uma barreira contra a contaminação microbiológica em placas de contato, utilizadas em monitoramento de salas limpas para fabricação de produtos farmacêuticos estéreis. Durante o ano de 2007, foram realizados testes de contato com a utilização da mencionada barreira, e os resultados foram comparados com dados dos anos de, 2004, 2005 e 2006, quando a barreira não foi utilizada. Os ambientes utilizados para os testes foram duas salas limpas de uma planta farmacêutica localizada no Rio de Janeiro. Nos mencionados ambientes é necessário o uso de uma vestimenta especial, de forma a evitar que partículas do corpo dos operadores, bactérias e fungos, migrem para a superfície externa do uniforme e coloquem em risco a esterilidade dos produtos. Sendo assim, foi proposta a colocação de uma camiseta diretamente sobre a pele do operador durante todo o ano de 2007 de forma a evitar ou reduzir a possibilidade de migração dessas partículas; e os resultados foram comparados com os anos de 2004, 2005 e 2006, quando a camiseta não foi usada. Os testes demonstraram que houve uma redução de cerca de 50% na ocorrência de placas contaminadas. Com relação ao número total de colônias formadas, a redução foi de 75% na comparação com os anos de 2004 e 2005 e de 50% com relação ao ano de 2006 / This study had as objective to test a barrier against microbiological contamination in contact plates that are used in sterile pharmaceutical products clean rooms monitoring. During 2007 the tests were performed and compared with data from, 2004, 2005 and 2006, when the mentioned barrier was not used. The test environments were two clean rooms from a pharmaceutical plant located at Rio de Janeiro. In the mentioned environments the use of special garments is necessary for avoiding that particles from operators bodies, bacteria and most remain in contact with the room environment, adding risk to the sterilized products. So, it was proposed the use of undershirt between the garment and the operator skin for reducing the contact plates contamination during the regular rooms monitoring. This undershirt was used during 2007 and the results were compared with the samples of 2004, 2005 and 2006 when the undershirt was not used. The results demonstrated that it was obtained a reduction of about 50% in relation to contaminated plates. In relation to the total number of colonies the reduction was 75% in comparison with 2004 and 2005, and 50% in comparison with 2006

Made available in DSpace on 2014-05-29T12:18:46Z (GMT). No. of bitstreams: 4 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 69441.pdf: 2989051 bytes, checksum: 8e1f78fb34fb10ed6a62ddab3e860e85 (MD5) 69441.pdf.txt: 252167 bytes, checksum: fa3f048c557c5ecc17e4f0b7176dacb5 (MD5) 69441.pdf.jpg: 1240 bytes, checksum: f1b121f954ab809e4e361e03e07c42ac (MD5) Previous issue date: 2014-05-07 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, Brasil / O gênero Mycobacterium possui mais de 160 espécies, dentre elas importantes patógenos como M. leprae, M. tuberculosis e M. bovis. Embora muito se conheça sobre estes patógenos, poucos estudos se concentraram na caracterização detalhada de micobactérias não-tuberculosas (MNT), que apresentam distribuição ambiental variada e são oligotróficas. Embora muitas sejam consideradas saprófitas, acredita-se que a infecção sub-clínica de animais e humanos esteja subestimada. A infecção por MNT ambientais é considerada como um dos fatores que modulam a resposta protetora conferida pela vacina BCG. Neste contexto, o presente estudo tem como foco a caracterização das MNT de crescimento rápido provenientes da Coleção de Bactérias da Mata Atlântica (CBMA) do IOC/FIOCRUZ, com dois objetivos principais: (1) caracterizar espécies que possam ser utilizadas no desenvolvimento de um novo sistema de expressão de proteínas heterólogas e (2) identificar antígenos e vias metabólicas compartilhadas entre espécies patogênicas e saprófitas. Os isolados obtidos da CBMA/IOC foram cultivados em meios LB contendo Tween 80, sob agitação a 25 °C. Foram geradas curvas de crescimento a partir da leitura da DO a 600 nm de triplicatas biológicas, e determinadas características morfológicas. Diversos testes bioquímicos foram realizados para uma melhor caracterização desses isolados O perfil de secreção de proteínas ao longo do crescimento foi verificado por SDS-PAGE, a presença de proteases secretadas avaliada por zimografia e a presença e atividade de celulases foi verificada através de western blot, zimografia e ensaio enzimático. A capacidade de transformação por DNA plasmidial foi avaliada por eletroporação. Também foram propostos agrupamentos filogenéticos com base na análise de sequências de regiões dos genes 16S rRNA (rrs) e hsp65. Em paralelo, foi verificada por western blot a presença de antígenos micobacterianos comuns, já descritos como tendo papel importante na geração de resposta imune (Mpt64, Mpt70, Mpt83 e antígenos do complexo 85) ou no metabolismo e sobrevivência do M. tuberculosis (GlnA1 e HspX). O perfil de crescimento e as características morfológicas e bioquímicas dos isolados parecem confirmar o agrupamento filogenético proposto. Atividade celulásica foi observada em apenas dois isolados, apesar de todos expressarem esta proteína, e não foi encontrada atividade proteásica no filtrado de cultura nas condições testadas Todos os isolados são transformáveis, mas apresentam diferenças quanto à eficiência e integridade do vetor. As análises por western blot revelaram a presença de proteínas do complexo 85, Mpt70 e GlnA1 e ausência de reatividade para os antígenos Mpt64, Mpt83 e HspX. Desse modo, três isolados foram selecionados para prosseguir com o desenvolvimento do novo sistema de expressão de proteínas heterólogas secretadas. A presença de alguns antígenos compartilhados fornecem novos subsídios para elucidar a relação entre MNT e vacina BCG / The genus Mycobacterium has more than 160 species, among them important pathogens such as M. leprae, M. tuberculosis and M. bovis. Although much is known about these pathogens, few studies have focused on the detailed characterization of non-tuberculous mycobacteria (NTM), which present wide environmental distribution and are oligotrophic. While many are considered saprophytes, it is believed that the subclinical infection of humans and animals is underestimated. The environmental NTM infection is considered as one of the factors that modulate the protective response provided by BCG vaccine. In this context, the present study focuses on the characterization of rapidly growing MNT from the Atlantic Forest Bacterial Collection (CBMA - Coleção de Bactérias da Mata Atlântica, IOC / FIOCRUZ), with two main objectives: (1) characterize species which may be used to develop a new system for heterologous protein expression and (2) to identify antigens and metabolic pathways shared between pathogenic species and saprophytes. The isolates obtained from CBMA/IOC were grown in LB media containing Tween 80, under agitation, at 25 °C. Growth curves were generated from the reading of the OD at 600 nm of biological triplicates, and certain morphological characteristics were determined. Several biochemical tests were performed to better characterize these isolates. The profile of secreted proteins was verified by SDS-PAGE along the growth curves, the presence of secreted proteases evaluated by zymography and the presence and activity of cellulases was verified by western blot, enzymatic assay and zymography. The transformation capacity of the individual isolates was evaluated by electroporation of plasmid DNA. Phylogenetic groupings were also proposed based on sequencing of regions from the 16S rRNA (rrs) and hsp65 genes. In parallel, the presence of shared mycobacterial antigens described as playing important roles in generating immune responses (Mpt64, Mpt70, Mpt83 and antigen 85 complex) or in metabolism and survival of M. tuberculosis, was verified by western blot. The growth profile and the morphological and biochemical characteristics of the isolates appear to confirm the phylogenetic grouping proposed. Cellulase activity was observed in only two strains, although all express this protein; protease activity was not found in the culture filtrate under the conditions tested. All isolates are transformable, but differ as to the efficiency and integrity of the vector. Western blot analysis revealed the presence of Ag85 complex, Mpt70 and GlnA1 and absence of reactivity for the Mpt64 and Mpt83 antigens as well as HspX. Thus, three isolates were selected to proceed with the development of a new heterologous protein expression system. The presence of some shared antigens provide new information to elucidate the relationship between NTM and BCG vaccine.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-13T14:05:28Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 401937 bytes, checksum: 8d28b0501a79861fa928c8e53ef135a5 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-13T14:05:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 401937 bytes, checksum: 8d28b0501a79861fa928c8e53ef135a5 (MD5) Previous issue date: 2003-08-15 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O acúmulo de resíduos agroindustriais constitui-se em problema ambiental devido à dificuldade de reciclagem. No Brasil são gerados vários tipos de resíduos, cujo volume demanda a sua liberação no ambiente. A casca de semente de algodão é problema para a indústria algodoeira e existe o interesse pelo desenvolvimento de tecnologias para o aproveitamento deste resíduo.Neste trabalho, avaliou-se o potencial do hidrolisado da casca de semente microbiológica de de algodão (HCA) xilitol. Foram como substrato utilizadas cinco para a produção leveduras (1.55, Debaryomyces hansenii UFV-170, 1.71, 2.64, 2.80) isoladas por SAMPAI O (2001) e caracterizadas como boas produtoras de xilitol em meio sintético. As leveduras foram cultivadas em hidrolisado hemicelulósico obtido de casca de semente de algodão antes e após moagem, acrescido de meio mineral e extrato de levedura, com agitação de 200 rpm, a 30 oC. A produção de xilitol foi cerca de 4 a 34% maior no hidrolisado de casca de semente de algodão moída (HCAM) do que no hidrolisado de casca de semente de algodão sem moer (HCASM). Das cinco leveduras testadas, apenas a levedura 2.80 não apresentou valores significativos de produção de xilitol nas condições utilizadas neste trabalho. As demais leveduras produziram xilitol no HCA e a produtividade volumétrica (Q p ), produtividade específica (q p ) e rendimento (Y p/s ) de xilitol entre os isolados foram semelhantes. A levedura Debaryomyces hansenii UFV-170 cresceu no HCA concentrado cinco vezes, mas não produziu xilitol. No HCA não concentrado, os melhores resultados de produção de xilitol foram obtidos após 24 h de cultivo. Os maiores valores de produtividade volumétrica (0,38 g L -1 h -1 ) e rendimento (0,56 g g -1 ) foram obtidos com o hidrolisado concentrado três vezes, na agitação de 100 rpm e após 72 h de cultivo. Os resultados indicam que o hidrolisado de casca de semente de algodão pode ser utilizado para a produção microbiológica de xilitol. Entretanto, a influência de outros fatores no processo de bioconversão precis / Previous studies indicated that five yeasts isolated from dairy environments could produce high levels of xylitol in synthetic media. When these isolates were cultivated in cotton husk hydrolysate added with yeast extract and mineral media, xylitol production was detected in the cell-free supernatants of only four isolates. Three isolates did not show significant differences in xylitol production, and the average volumetric productivity was a function of D-xylose concentration. I f the isolate that presented the highest xylitol production in synthetic media (yeast Debaryomyces hansenii UFV-170) was incubated in media containing cotton husk hydrolysate, maximal xylitol production occurred after 24 h under agitation of 100 rpm. When the hydrolysate was concentrated 3-fold, xylitol production increased, but only if the fermentation period was approximately 72 h. Xylitol production did not occur if the hydrolysate was concentrated 5-fold. Because substrate concentration alone could not explain the effect on xylitol production, it appears that toxic substances in the hydrolysate caused the inhibitory effect.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Departamento de Biologia Celular, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2018. / Submitted by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-08-15T19:46:55Z No. of bitstreams: 1 2018_LauraFernandesGonçalves.pdf: 1541641 bytes, checksum: 343bb09af189640ebaaa4ef409e26ac4 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-08-27T18:10:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2018_LauraFernandesGonçalves.pdf: 1541641 bytes, checksum: 343bb09af189640ebaaa4ef409e26ac4 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-27T18:10:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2018_LauraFernandesGonçalves.pdf: 1541641 bytes, checksum: 343bb09af189640ebaaa4ef409e26ac4 (MD5) Previous issue date: 2018-08-15 / Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal (FAP-DF); Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) e Fundação de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Hospital da Universidade de Brasília (FAHUB). / Klebsiella pneumoniae é considerada um dos patógenos mais importantes causadores de infecções entre indivíduos imunocomprometidos. Os problemas clínicos causados pelo bacilo podem levar a graves complicações, incluindo infecções do trato urinário, septicemia, pneumonia e morte. Apesar de estarem primariamente associadas às infecções oportunistas, existem linhagens de K. pneumoniae hipervirulentas (hvKp) que possuem uma grande quantidade de fatores de virulência que atuam estrategicamente as capacitando de se multiplicar, proteger do sistema imune do hospedeiro e causar patogenias em hospedeiros sem imunocomprometimento. Os fatores de transcrição denominados receptores ativados por proliferadores de peroxissoma γ (PPAR-γ) tem sido amplamente estudados por seu papel na imunoregulação e estabelecimento de infecções bacterianas já que esses receptores são expressos por uma grande quantidade de células do sistema imune e apresentam um papel duplo promovendo a inibição de moléculas pró-inflamatórias e auxiliando no clearence bacteriano, mas também desencadeando apoptose em diversas células do sistema imune, diminuindo a migração e adesão de neutrófilos. Portanto, nesse trabalho, tivemos por objetivo avaliar o papel do PPAR-γ na capacidade de colonização de células epiteliais da linhagem HEp-2 por três isolados hipervirulentos de K. pneumoniae (HvKp) obtidos de um paciente com bacteremia no Hospital Universitário de Brasília. Caracterizamos os três isolados como geneticamente idênticos, multirresistentes, KPC e pertencentes ao clone ST11. Os isolados também apresentaram produção forte de biofilme em superfícies abióticas bem como a capacidade de sobreviver em sangue e em soro por 30 minutos. As células infectadas com os isolados hipermucoides apresentaram expressão de PPAR-γ 24 e 48 horas após a infecção. Os isolados mostraram-se capazes de sobreviver no interior de células Hep-2 3,6 e 24 horas após a infecção. Também apresentaram maior capacidade de sobrevivência nas células quando PPAR-γ estava presente do que quando este foi inibido por GW9662. Foi observado também que os isolados são citotóxicos para as células diminuindo a viabilidade celular nos tempos de 3 e 6 horas após a infecção e recuperação da viabilidade 24 horas após a infecção. Também, observou-se a produção de óxido nítrico após a infecção e constatou-se que esta ocorre mais acentuadamente 24 e 48 horas pós-infecção e que ocorre um aumento na produção de NO quando PPAR-γ encontra-se inibido. Dessa forma, os isolados mostraram-se resistentes aos efeitos microbicidas da célula. / Klebsiella pneumoniae is considered one of the most important pathogens causing infections among immunocompromised individuals. Clinical problems caused by this bacillus can lead to severe complications, including urinary tract infections, septicemia, pneumonia, and death. Although they are primarily associated with opportunistic infections, there are hypervirulent K. pneumoniae (hvKp) strains that have a large number of virulence factors that act strategically to enable them to multiply, protect from the host's immune system and cause pathogenies in hosts without immunocompromising. Transcription factors called peroxisome proliferator-activated receptors (PPAR-γ) have been extensively studied for their role in immunoregulation and establishment of bacterial infections since these receptors are expressed by a large number of immune system cells and have a double role promoting the inhibition of proinflammatory molecules and assisting in bacterial clearence, but also triggering apoptosis in several cells of the immune system, decreasing neutrophil migration and adhesion. Therefore, the objective of this study was to evaluate the role of PPAR-γ in the ability to colonize epithelial cells of the Hep-2 lineage by three hypermucoid isolates of K. pneumoniae (HvKp) obtained from a patient with bacteremia at the Hospital Universitário de Brasília. In this work, we characterize the three isolates as genetically identical, multiresistant, KPC and belonging to clone ST11. The isolates also showed strong biofilm production on abiotic surfaces as well as the ability to survive in blood and serum for 30 minutes. Cells infected with the hypermucoid isolates showed PPAR-γ expression 24 and 48 hours post-infection. Isolates were able to survive within HEp-2 cells 3,6 and 24 hours post-infection. They also showed greater survival ability in the cells when PPAR-γ was present than when it was inhibited by GW9662. It was also observed that the isolates are cytotoxic to the cells reducing cell viability 3 and 6 hours post infection and viability recovery 24 hours post infection. The production of nitric oxide after infection has also been verified and it has been observed that this occurs more markedly 24 and 48 hours post infection and that an increase in NO production occurs when PPAR-γ is inhibited. Thus, the isolates were resistant to the microbicidal effects of the cell.

Este estudo teve como finalidade, testar uma barreira contra a contaminação microbiológica em placas de contato, utilizadas em monitoramento de salas limpas para fabricação de produtos farmacêuticos estéreis. Durante o ano de 2007, foram realizados testes de contato com a utilização da mencionada barreira, e os resultados foram comparados com dados dos anos de, 2004, 2005 e 2006, quando a barreira não foi utilizada. Os ambientes utilizados para os testes foram duas salas limpas de uma planta farmacêutica localizada no Rio de Janeiro. Nos mencionados ambientes é necessário o uso de uma vestimenta especial, de forma a evitar que partículas do corpo dos operadores, bactérias e fungos, migrem para a superfície externa do uniforme e coloquem em risco a esterilidade dos produtos. Sendo assim, foi proposta a colocação de uma camiseta diretamente sobre a pele do operador durante todo o ano de 2007 de forma a evitar ou reduzir a possibilidade de migração dessas partículas; e os resultados foram comparados com os anos de 2004, 2005 e 2006, quando a camiseta não foi usada. Os testes demonstraram que houve uma redução de cerca de 50% na ocorrência de placas contaminadas. Com relação ao número total de colônias formadas, a redução foi de 75% na comparação com os anos de 2004 e 2005 e de 50% com relação ao ano de 2006 / This study had as objective to test a barrier against microbiological contamination in contact plates that are used in sterile pharmaceutical products clean rooms monitoring. During 2007 the tests were performed and compared with data from, 2004, 2005 and 2006, when the mentioned barrier was not used. The test environments were two clean rooms from a pharmaceutical plant located at Rio de Janeiro. In the mentioned environments the use of special garments is necessary for avoiding that particles from operators bodies, bacteria and most remain in contact with the room environment, adding risk to the sterilized products. So, it was proposed the use of undershirt between the garment and the operator skin for reducing the contact plates contamination during the regular rooms monitoring. This undershirt was used during 2007 and the results were compared with the samples of 2004, 2005 and 2006 when the undershirt was not used. The results demonstrated that it was obtained a reduction of about 50% in relation to contaminated plates. In relation to the total number of colonies the reduction was 75% in comparison with 2004 and 2005, and 50% in comparison with 2006

Orientador: Simone Baldini Lucheis / Resumo: O leite e seus derivados são bons meios para o desenvolvimento de microorganismos patogênicos e deteriorantes, exigindo cuidados rigorosos com a ordenha, processamento e armazenamento. Entre os vários grupos de bactérias que podem ser desenvolvidas em leite refrigerado cru, Yersinia enterocolitica, um enteropatógeno invasivo para humanos, é uma delas. Esta bactéria pode causar a uma série de sintomas clínicos intestinais e extraintestinais, variando de gastroenterite leve a linfadenite mesentérica, semelhante a apendicite. Para avaliar a prevalência de Yersinia enterocolitica patogênica no leite cru de tanques de expansão localizados no estado de São Paulo, foram avaliadas 102 amostras de leite bovino, pelas análises microbiológicas, seguido de provas bioquímicas; a Reação em Cadeia de Polimerase (PCR) e sequenciamento genético. Não houve o isolamento de Yersinia enterocolitica pelas provas microbiológicas. A análise de PCR revelou seis (6) amostras positivas para Yersinia enterocolitica (5,9%), confirmadas por sequenciamento genético. Somente o gene inv, foi detectado, presente em cepas virulentas e avirulentas. Portanto, ainda que o patógeno estudado não represente um risco potencial nas amostras de leite analisadas neste estudo, foram observados diversos fatores de risco nas fazendas visitadas e uma grande contaminação da microbiota presente no leite, podendo-se afirmar que a qualidade do leite cru em tanques de expansão das fazendas avaliadas é de risco para a saúde públi... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-13T12:06:59Z No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 21960 bytes, checksum: 8d947eda58a337bd02a73a5a5e9c5f58 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-13T12:06:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 21960 bytes, checksum: 8d947eda58a337bd02a73a5a5e9c5f58 (MD5) Previous issue date: 2002-12-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Avaliou-se, durante 25 dias de estocagem a 5oC , as alterações na microbiota contaminante, na cor e no pH de carne suína acondicionada sob atmosferas modificadas com: vácuo, 100% de CO 2 , 99% de CO 2 + 1% de CO, 100% de O 2 e 100% de CO, por uma hora de contato, seguido de embalagem sob vácuo. A aceitação do produto pelos consumidores foi avaliada após 24 horas e 20 dias de estocagem. A análise microbiológica da matéria-prima indicou ausência de Salmonella nas porções de 25 g analisadas e o número de Staphylococcus aureus coagulase positivo foi inferior a 10 UFC g -1 . Verificou-se que os coliformes, determinados a 45oC, não se constituíram em agentes importantes de deterioração da carne suína, uma vez que o NMP g -1 foi inferior ou igual a 93 na matéria-prima e em todo período de estocagem em todos os tratamentos. Exceto nos lombos estocados em 100% de O 2 , a microbiota psicrotrófica aeróbia e anaeróbia predominou, alcançando 10 8 UFC g -1 após 25 dias de estocagem. Nesse tempo, bactérias do gênero Pseudomonas alcançaram 10 9 UFC g -1 nas amostras estocadas em 100% de O 2 , o que equivaleu a um aumento de 5,2 ciclos logarítmicos. Nos demais tratamentos, a população máxima de Pseudomonas foi de 10 6 UFC g -1 . As bactérias lácticas apresentaram um aumento em torno de 3,5 ciclos logarítmicos nas amostras de lombo mantidas em embalagens livres de O 2 . Entretanto, nas embalagens com concentração elevada de O 2 , foi o grupo avaliado que apresentou o menor crescimento. Nos demais tratamentos, a população dessa microbiota atingiu a valores próximos a 10 5 a 10 6 UFC g -1 . Leveduras apresentaram crescimento limitado na carne submetida a todos os tratamentos avaliados, exceto na atmosfera contendo 100% de O 2 , onde foram registrados valores próximos a 10 7 UFC g -1 . Ao longo dos 25 dias de estocagem, constatou-se que, dentre os tratamentos realizados, a atmosfera contendo 1% de CO + 99% de CO 2 foi a que conferiu melhor resultado para preservação da cor desejável do produto, mantendo os valores de L*, a* e b* mais próximos aos do lombo in natura. O pH não apresentou variação significativa e manteve-se na faixa de 5,4 a 5,7 durante os 25 dias de estocagem. Verificou-se, por meio da Análise de Componentes Principais, que houve diferença na aceitação visual das amostras submetidas a diferentes atmosferas pelos consumidores. A análise da dispersão das cargas indicou que lombo suíno conservado sob atmosfera de 99% de CO 2 + 1% de CO foi preferido por um maior número de consumidores, após estocagem por 24 horas. Após 20 dias, as amostras que apresentaram maior aceitabilidade foram aquelas estocadas nessa atmosfera e aquelas que receberam tratamento prévio com CO. / Changes in the contaminating microbiota, CIELAB color, and pH of pork loin were evaluated during 25 days of storage at 5°C under modified atmospheres containing 100% CO 2 , 99% CO 2 + 1% CO, 100% O 2 and then sealed, as well as 100% CO for one hour of exposure, followed by vacuum application before sealing. Consumer acceptance of stored meat was evaluated either after 24 hours or 20 days of storage. In accordance to the Brazilian legal standards for pork meat quality, the presence of Salmonella was not detected in 25 g meat samples. The numbers of coagulase-positive Staphylococcus aureus were lower than 10 CFU g -1 , and the most probable number of thermo tolerant coliforms, grown at 45°C, was less than or equal to 93 in samples from two replicates. Since the most probable number for thermo tolerant coliforms was always lower than 93 during all the storage time and under all treatments, this group was not considered to be significant deterioration in pork meat. Except for the loins packaged in 100% O 2 , aerobic and anaerobic psychrotrophic microbiota predominated, reaching 10 8 UFC g -1 after 25 days of storage. At this time, Pseudomonas predominated in samples packaged in 100% O 2 , reaching 10 9 UFC g -1 corresponding to an increase of 5,2 log cycles. In the other treatments the maximum Pseudomonas count was 10 6 UFC g -1 . The numbers of lactic xiibacteria increased 3.5 log cycles in loin samples stored in O 2 -free packages. However, samples packaged under elevated O 2 concentrations, showed the lowest growth rates recorded in the experiments. Yeast populations had a limited growth in pork loin in all treatments tested, but under 100% O 2 . In the latter, yeast counts reached approximately 10 7 CFU g -1 . The atmosphere of 99% CO 2 + 1% CO provided the least amount of change to meat color during the 25-day storage, with L*, a*, and b* values close to those of fresh loin. Irrespective of treatment applied, loin pH did not show any significant variation during storage, maintaining values between 5.4 and 5.7. Visual main component analyses evidenced differences in the acceptance of the pork loin by consumers. Loading dispersion analyses showed that pork loin stored for 24 hours under 99% CO 2 + 1% CO were preferred by consumers. After 20 days of storage, meat samples with best acceptability were those stored under 99% CO 2 + 1% CO and those that received a previous treatment with CO.