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Caracterização de genótipos de milho para produção de silagem

Vieira, Valmir da Cunha 14 February 2011 (has links)
O objetivo deste trabalho foi avaliar as características fitotécnicas e bromatológicas dos genótipos de milho para a produção de silagem, bem como, verificar se as diferentes bases genéticas (híbridos simples, triplo, duplo, intervarietal e variedades cultivadas) ou a textura dos grãos (duro, semiduro e dentado) alteram a indicação de genótipos para a produção silagem. O experimento foi realizado na área experimental da Universidade Tecnológica Federal do Paraná (UTFPR), Campus Dois Vizinhos no período de outubro de 2009 a março de 2010. Avaliaram-se os ensaios: centro superprecoce (32 genótipos), sul superprecoce (30 genótipos) e sul precoce normal (36 genótipos) da Rede Nacional de Genótipos de Milho, fornecidos pela Embrapa Milho e Sorgo (Sete Lagoas, MG). O experimento foi conduzido segundo o delineamento de blocos ao acaso com duas repetições e foram avaliados caracteres fitomorfológicos e bromatológicos da cultura do milho. Para cada ensaio os genótipos foram agrupados conforme as suas bases genéticas e posteriormente conforme a textura do grão, aplicando-se o teste de Scheffée, após realizou-se o teste de Scott-Knott. Como resultados, verificou-se que não existe influência da base genética nem da textura dos grãos na indicação de genótipos. Porém, existem genótipos que se destacam para a recomendação para a produção de silagem de milho. / The aim of this work was to evaluate the phytotechnical and bromatological characteristics of corn (maize) genotypes for silage production, and to verify whether the different genetic bases (single, three-way, double and inter-varietal hybrids and cultivated varieties) and grain texture (hard, semi-hard and dent) affect genotype suitability for silage production. The experiment was carried out in the experimental area of Paraná Federal Technology University (UTFPR) at the Dois Vizinhos Campus between October 2009 and March 2010. The trial cultivars evaluated were: “Centro superprecoce” [Central Super Early] (32 genotypes), “Sul superprecoce” [South Super Early] (30 genotypes) and “Sul precoce normal” [Central Normal Early] (36 genotypes) from the Rede Nacional de Genótipos de Milho [National Network of Corn Genotypes], provided by Embrapa Milho e Sorgo (Sete Lagoas, MG). The experimental arrangement was a randomized blocks design with two replications and the phytomorphological and bromatological characters of the corn crop were evaluated. In each trial, genotypes were grouped according to their genetic bases and then on the basis of grain texture, using the Scheffée method, and next, a Scott-Knott test was run. Results showed that neither the genetic base nor the grain texture affected genotype suitability. However, taken individually, some of the genotypes could be recommended for corn silage production.
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Caracterização de genótipos de milho para produção de silagem

Vieira, Valmir da Cunha 14 February 2011 (has links)
O objetivo deste trabalho foi avaliar as características fitotécnicas e bromatológicas dos genótipos de milho para a produção de silagem, bem como, verificar se as diferentes bases genéticas (híbridos simples, triplo, duplo, intervarietal e variedades cultivadas) ou a textura dos grãos (duro, semiduro e dentado) alteram a indicação de genótipos para a produção silagem. O experimento foi realizado na área experimental da Universidade Tecnológica Federal do Paraná (UTFPR), Campus Dois Vizinhos no período de outubro de 2009 a março de 2010. Avaliaram-se os ensaios: centro superprecoce (32 genótipos), sul superprecoce (30 genótipos) e sul precoce normal (36 genótipos) da Rede Nacional de Genótipos de Milho, fornecidos pela Embrapa Milho e Sorgo (Sete Lagoas, MG). O experimento foi conduzido segundo o delineamento de blocos ao acaso com duas repetições e foram avaliados caracteres fitomorfológicos e bromatológicos da cultura do milho. Para cada ensaio os genótipos foram agrupados conforme as suas bases genéticas e posteriormente conforme a textura do grão, aplicando-se o teste de Scheffée, após realizou-se o teste de Scott-Knott. Como resultados, verificou-se que não existe influência da base genética nem da textura dos grãos na indicação de genótipos. Porém, existem genótipos que se destacam para a recomendação para a produção de silagem de milho. / The aim of this work was to evaluate the phytotechnical and bromatological characteristics of corn (maize) genotypes for silage production, and to verify whether the different genetic bases (single, three-way, double and inter-varietal hybrids and cultivated varieties) and grain texture (hard, semi-hard and dent) affect genotype suitability for silage production. The experiment was carried out in the experimental area of Paraná Federal Technology University (UTFPR) at the Dois Vizinhos Campus between October 2009 and March 2010. The trial cultivars evaluated were: “Centro superprecoce” [Central Super Early] (32 genotypes), “Sul superprecoce” [South Super Early] (30 genotypes) and “Sul precoce normal” [Central Normal Early] (36 genotypes) from the Rede Nacional de Genótipos de Milho [National Network of Corn Genotypes], provided by Embrapa Milho e Sorgo (Sete Lagoas, MG). The experimental arrangement was a randomized blocks design with two replications and the phytomorphological and bromatological characters of the corn crop were evaluated. In each trial, genotypes were grouped according to their genetic bases and then on the basis of grain texture, using the Scheffée method, and next, a Scott-Knott test was run. Results showed that neither the genetic base nor the grain texture affected genotype suitability. However, taken individually, some of the genotypes could be recommended for corn silage production.
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Caracterização molecular de Zmal1 : um gene induzido por aluminio em plantas de milho

Maron, Lyza Gontow 26 July 2018 (has links)
Orientador: Marcelo Menossi Teixeira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-26T19:37:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maron_LyzaGontow_M.pdf: 2238825 bytes, checksum: 4a67ca7cb16ababccc6f8418622be2c0 (MD5) Previous issue date: 2000 / Mestrado
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Capacidade produtiva, adaptabilidade e estabilidade de híbridos de famílias endogâmicas de milho (Zea mays L.), obtidos pelo método dos híbridos crípticos / Productive capacity, adaptability and stability of hybrids from endogamic families of maize (Zea mays L.) obtained by the cryptic hybrid method

Lopes, Maria Teresa Gomes 01 February 1999 (has links)
Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-10-17T17:03:36Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 20283543 bytes, checksum: ce5ac777ef1d7956ab6f67822feb99ca (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-17T17:03:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 20283543 bytes, checksum: ce5ac777ef1d7956ab6f67822feb99ca (MD5) Previous issue date: 1999-02-01 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Neste trabalho, avaliou-se o comportamento de híbridos de famílias endogâmicas de milho obtidos pelo método dos híbridos crípticos, pelo programa de melhoramento de milho do Setor de Genética do Departamento de Biologia Geral da Universidade Federal de Viçosa (DBG-UFV). Estudou-se o potencial do referido método a partir da análise da capacidade produtiva dos híbridos, avaliada em 26 ensaios. Estes foram ainda caracterizados quanto a seus padrões de adaptabilidade e estabilidade. Nos ensaios conduzidos, nenhum dos cinco híbridos de famílias endogâmicas mais produtivos apresentou produção estatisticamente inferior à das testemunhas comerciais, o que revelou que o método dos híbridos crípticos e potencialmente capaz de permitir a obtenção de híbridos superiores. Depois de obtidos os pares de linhagens superiores, derivadas de famílias endogâmicas selecionadas uma ou mais vezes para capacidade específica de combinação, deve ser adequado afirmar que a continuidade do processo permitirá obter híbridos simples, duplos e triplos com elevada capacidade produtiva. Em relação aos números de híbridos S1 x S1, S2 x S2 e S3 x S3 avaliados, de modo geral, a proporção de híbridos S3 x S3 superiores foi maior que a de híbridos S2 x S2, que foi maior que a de híbridos S1 x S1. Portanto, apesar da redução do índice de prolificidade ao valor 1 impossibilitar a continuidade do processo, em trabalhos que utilizem esse método é aconselhável ao melhorista avaliar híbridos de famílias com grau mais elevado de endogamia. Na análise de adaptabilidade e estabilidade, considerando o método proposto por Eberhart e Russell, foram identificados 15 híbridos com produção acima da média geral, considerados os de maior interesse para dar continuidade ao programa de melhoramento. Entre eles, 53,3% apresentaram adaptabilidade geral e alta estabilidade (84-6, 86-1, 86-19, 86-11, 86-15, 86-21, 86-27 e 86-10). Vinte porcento deles apresentaram adaptação específica a ambientes favoráveis e alta estabilidade (86-22, 85-2 e 84-5). Os hibridos 85-1, 85-3 e 86-2, que apresentaram adaptabilidade geral associada à baixa estabilidade, correspondem também a 20% dos mais produtivos. O último (86-8), correspondendo a 6,7%, apresentou adaptação específica a ambientes favoráveis e baixa estabilidade. Com base na análise e considerando uma modificação do método proposto por Lin e Binns, foram identificados os híbridos 86-22, 86-8, 84-5, 85-2 e 86-19 como os mais adaptados a ambientes favoráveis e os híbridos 86-11, 85-3, 86-27 e 86-2, como os mais adaptados a ambientes desfavoráveis. As etapas seguintes deste programa de melhoramento são extrair linhagens dos pares de famílias selecionadas, obter e avaliar os híbridos. / This study was carried out in order to evaluate the behavior of hybrids from maize endogamic families which were obtained through the hybrid cryptic method by the maize breeding program undergoing at the Genetics Sector of the Biology Department in the Universidade Federal de Viçosa (DBG-UFV). This method potential was studied from analysis for hybrid productive capacity which was evaluated in twenty six assays. The hybrids were also characterized for their adaptability and stability patterns. Among the five more productive endogamic-family hybrids neither one showed a statistically inferior production in comparison with the commercial controls, which revealed the cryptic hybrid method to be potentially able to allow for the obtainment of superior hybrids. After obtaining the couples of the superior inbred lines derived from endogamic families selected once or more times for combination specific capacity, it would be appropriate to affirm that the continuity of the process will permit to obtain single cross, double cross and three-way cross hybrids provided with a high productive capacity. In relation to the number of the hybrids S1 x S1, S2 x S2 and S3 x S3 in general, the proportion of the superior hybrids S3 x S3 was higher than that of the S2 x S2 hybrids which was higher than that of the S1 x S1 hybrids. Thus, although the reduction of the prolificacy index to value 1 hampers the process continuity in works using this method, it is recommended that an evaluation be made for those hybrids from families with a higher endogamy level. Considering the method proposed by Eberhart and Russell for the adaptability and stability analysis an identification was performed for fifteen hybrids presenting a production above the general average, which were considered of greater interest for the continuity of the breeding program. Among these hybrids, 53.3% presented general adaptability and high stability (84-6, 86-1, 86-19, 86-11, 86-15, 86-21, 86-27 and 86-10); and 20% from that total (15 hybrids) showed specific adaptation to the favorable environments and high stability (86-22, 85-2 and 84-5). The hybrids 85-1, 85-3 and 86-2 presenting general adaptability associated with low stability also correspond to 20% of the most productive ones. The last one (86-8) corresponding to 6.7% showed a specific adaptation to the favorable environments and low stability. Based on the analysis considering the modification of the method proposed by Lin and Binns, the hybrids 86-22, 86-8, 84-, 85-2 and 86-19 were identified as the most adapted to the favorable environments, and the hybrids 86-11, 85-3, 86-27 and 86-2 as the most adapted to the unfavorable environments. In this breeding program the following phases will consist on the extraction of bred lines from couples of the selected families, as well as to obtain and evaluate the hybrids.
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Analise, classificação, anotação e perfil de expressão de fatores de transcrição no endosperma de milho (Zea mays L.) / Analysis, classification, annotation and expression pattern of transcription factors in maize (Zea mays L.) endosperm

Ferreira, Natalia Cristina Verza 05 December 2006 (has links)
Orientador: Paulo Arruda / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-06T21:19:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ferreira_NataliaCristinaVerza_D.pdf: 9495810 bytes, checksum: 18cf9ae055a2b9f39de109abc6de469c (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: O seqüenciamento de ESTs (etiquetas de seqüências expressas) e a sua organização em bancos de dados constituem poderosas ferramentas para identificar genes de interesse expressos em determinados tecidos e/ou tipos celulares. Neste trabalho criou-se um banco de seqüências expressas chamado MAIZESTdb, que contém ESTs de diversos tecidos de milho, porém enriquecido com seqüências provenientes do endosperma de milho em desenvolvimento. O MAIZESTdb contém 227.431 ESTs vindos de mais de 30 órgãos e tecidos de milho diferentes, 30.531 seqüenciados em nosso laboratório a partir de bibliotecas construídas com RNA mensageiro de endosperma. Estas seqüências representam uma grande contribuição na identificação de novos genes expressos no endosperma. A análise deste banco de ESTs possibilitou a identificação de 4.032 transcritos preferencialmente expressos no endosperma, e a sua anotação revelou uma ampla variedade de prováveis genes novos envolvidos no desenvolvimento e no metabolismo do endosperma. O banco MAIZESTdb foi utilizado neste trabalho para a identificação de fatores de transcrição (TFs) expressos no endosperma de milho, e, especialmente, na identificação de fatores preferencialmente expressos no endosperma, que podem desempenhar papéis regulatórios importantes durante a formação da semente. Foram identificados 1.233 TFs expressos em milho, 414 dos quais expressos no endosperma em desenvolvimento. Foram identificados ainda, através de análises in silico, 113 TFs preferencialmente expressos no endosperma, conjunto este que representa 9.2% dos TFs expressos identificados em milho, e que possivelmente contém reguladores importantes dos processos de especificação celular e desenvolvimento do endosperma de milho. Esta é a maior coleção de fatores de transcrição já descrita para este tecido, e representa uma fonte de dados importante para identificação de reguladores dos principais processos relacionados ao desenvolvimento do endosperma, como metabolismo de nitrogênio e carboidratos e controle da massa da semente. Uma das famílias mais representadas entre os TFs preferencialmente expressos no endosperma foi a família NAC de fatores de transcrição. Esta família apresentou 12 membros preferencialmente expressos no endosperma de milho. Um novo membro da família NAC, chamado de EPN-1 (Endosperm Specific NAM 1), teve seu perfil de expressão caracterizado. Sua expressão pode ser detectada desde os 5 DAPs, embora o pico de expressão ocorra entre 20 e 25 DAP, e ele apresenta expressão preferencial no endosperma. O promotor do gene EPN-1 foi clonado, seqüenciado e analisado quanto aos seus possíveis elementos CIS regulatórios; foram encontrados elementos conservados relacionados à endosperma-especificidade, elementos relacionados à regulação por ácido abscísico e giberelinas, e elementos conservados presentes nos promotores de a-amilases, indicando uma possível relação deste gene com o processo de transição entre a maturação e a germinação da semente. Ensaios de expressão transitória com o promotor do gene EPN-1 revelaram que sua expressão está dirigida à camada de aleurona do endosperma de milho, o que constitui mais uma evidência de sua possível função na regulação de genes relacionados aos processos de maturação e germinação da semente / Abstract: The sequencing of ESTs (expressed sequence tags) and its organization in databases constitute powerful tools to identify genes of interest in certain tissues and/or cell types. In this work we have created MAIZESTdb, a database of ESTs expressed in diverse maize tissues. The importance of this database, however, is that it is enriched with sequences from developing maize endosperm. The MAIZESTdb contains 227,431 ESTs coming from more than 30 different maize tissues and organs, 30,531 of which sequenced from endosperm cDNA libraries constructed in our laboratory. These sequences represent a great contribution for the identification of novel genes expressed in endosperm. The analysis of this ESTs database led to the identification of 4,032 transcripts preferentially expressed in the endosperm, and its annotation revealed a great variety of new genes involved in endosperm metabolism and development. The MAIZESTdb was then used to identify transcription factors (TFs) expressed in maize endosperm, and, mainly, in the identification of TFs preferentially expressed in the endosperm. We identified 1,233 TFs expressed in diverse maize tissues, 414 of which expressed in developing endosperm. We also identified, through in silico comparison of transcript abundance and library source, 113 TFs with preferential expression in endosperm, representing 9,2% of the TFs identified in this work. This dataset probably contains important regulators of cellular specification of the endosperm development. This is the biggest TFs collection reported for this tissue, and represents an important source of data for identification of regulators for main processes related to the endosperm development such as nitrogen and carbohydrate metabolism and control of seed mass. One of the most represented families among the TFs preferentially expressed in endosperm was the NAC family of transcription factors. This family presented 12 members with preferential expression in the endosperm. A new member of the NAC family, called EPN-1 (Endosperm Specific NAM 1), was characterized. Its expression / Doutorado / Genetica Vegetal e Melhoramento / Doutor em Genetica e Biologia Molecular
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Análise funcional e fisiológica de genes de milho induzidos pelo estresse por alumínio / Functional and physiological analysis of maize genes induced by aluminum stress

Feltrim, Daniela, 1983- 22 August 2018 (has links)
Orientadores: Marcelo Menossi Teixeira, Augustina Gentile / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-22T18:33:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Feltrim_Daniela_M.pdf: 2255232 bytes, checksum: c1f34d09fda3a2de4f7c62d0c7b9ec71 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: O presente trabalho possui como objetivo caracterizar fisiológica e funcionalmente um gene de milho que têm expressão relacionada com a tolerância ao cultivo em solo ácido contendo níveis tóxicos de alumínio (Al). Este gene, denominado Zmwrky69, foi identificado na linhagem de milho Cat100-6, tolerante ao Al (Mattiello et al., 2010). A análise da sequência da proteína ZmWRKY69 indica que ela pertence ao grupo III dessa família de fatores de transcrição, apresentando o motivo WRKYGKQ na região amino terminal e o motivo dedo de zinco Cx7Cx23HxC na região carboxi terminal. A proteína ZmWRKY69 está localizada no núcleo, conforme inferido por ensaio de localização subcelular em epitélio de cebola empregando uma fusão da proteína de milho com a proteína verde fluorescente (GFP). Ensaios de duplo híbrido em levedura indicam que a proteína ZmWRKY69 interage com um receptor de giberelina, uma proteína envolvida com a regulação por auxinas e uma proteína com função desconhecida. Plantas transgênicas de tabaco superexpressando Zmwrky69 apresentaram menor inibição do crescimento radicular na presença de Al, comparativamente às plantas selvagens. Esses resultados indicam que o gene Zmwrky69 codifica um fator de transcrição que apresenta um papel importante na tolerância ao Al em milho / Abstract: The objective of the present work is to characterize a gene differentially expressed in the maize inbred line Cat100-6 (aluminum tolerant) grown in acidic soil containing toxic levels of aluminum. This gene called Zmwrky69 was identified in the aluminum tolerant Cat100-6 inbred line (Mattiello et al., 2010). The sequence analysis of the ZmWRKY69 protein indicated that it belongs to the group III of this transcription factor family classification. The protein has the motif WRKYGKQ in the amino terminal region and a zinc finger motif Cx7Cx23HxC in the carboxi terminal region. This protein is localized in the nucleus as inferred by subcellular localization in onion epidermis using a maize protein fused to the Green Fluorescent Protein (GFP). Yeast two-hybrid essays indicate that the protein ZmWRKY69 interacts with a gibberellin receptor, a protein involved in auxin regulation and a protein with an unknown function. Transgenic tobacco plants overexpressing Zmwrky69 presented a lower degree of root growth inhibition in the presence of Al compared to wild type plants. These results indicate that Zmwrky69 gene encodes a transcription factor that presents an important role in Al tolerance in maize / Mestrado / Genetica Vegetal e Melhoramento / Mestra em Genética e Biologia Molecular
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Caracterização do gene que codifica a enzima sorbitol desidrogenase em milho / Characterization of maize sorbitol dehydrogenase

Sousa, Sylvia Morais de 06 August 2018 (has links)
Orientadores: Jose Andres Yunes, Paulo Arruda / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-06T03:29:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sousa_SylviaMoraisde_D.pdf: 2327103 bytes, checksum: 46b30ffc017a15b7cd82326bbf0adc53 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: A análise do banco de ESTs de endosperma de milho (MAIZEST) revelou que o gene da sorbitol desidrogenase (SDH) é o transcrito mais abundante no início do desenvolvimento da semente (aos 10 dias após a polinização - DAP). A SDH cataliza a redução NADH-dependente da frutose em sorbitol ou a oxidação do sorbitol em frutose. Em Rosaceae esta enzima tem um importante papel na translocação do sorbitol das folhas para os frutos e no armazenamento da frutose nos frutos. A semente de milho, todavia, não acumula frutose nem sorbitol, que portanto, deve ser um metabólito intermediário. A atividade bioquímica da SDH de milho já havia sido caracterizada, porém não havia informações sobre sua estrutura genômica. Visando estudar o gene da SDH, a seqüência genômica completa foi seqüenciada. A região codificante da SDH mostrou-se muito conservada, o que não ocorre com as regiões não codificantes. Inclusive, ocorrendo uma perda de introns entre as diferentes espécies de plantas. Análises de Southem blot e isoenzima indicaram que há apenas um loeus de SDH em milho. As análises de Northem blot e atividade enzimática confirmaram que a expressão está restrita ao endosperma, e que começa logo após a polinização, I atingindo o ápice aos 15 DAP e caindo a níveis baixos aos 25 DAP. A localização enzimática in situ mostrou que a atividade está restrita ao endosperma amiláceo, mais especificamente na região basal da semente, próxima ao embrião. Os mutantes sugary1 e shrunken2, que acumulam mais açúcares, têm uma maior atividade de SDH. A injeção de até 150 mM de sacarose na semente de milho causou um aumento de atividade de SDH, confirmando os resultados obtidos com os mutantes. Esse aumento parece ser ao nível transcricional e ser regulado pelo intron 1. O intron 1 parece controlar não apenas à reposta a sacarose, mas também a resposta à hipoxia. O papel do sorbitol e da SDH nas sementes de milho em desenvolvimento parece ser crucial, porém permanece indefinido. O sorbitol é encontrado nos embriões de milho, apesar de não ter sido encontrada atividade da SDH. Além disso, foi demonstrado que os embriões conseguem se desenvolver tendo como única fonte de carbono o sorbitol. Foram encontrados ESTs no MAIZEST de um transportador de sorbitol no endosperma e de aldose redutase (AR), capaz de converter sorbitol em glicose, no embrião. Foi mostrado também que o sorbitol pode ser transportado do endosperma para o embrião. Desta forma, podemos sugerir a partir dos resultados que o sorbitol pode ser translocado do endosperma para o embrião pelo transportador de sorbitol e ser convertido em glicose pela AR no interior do embrião. Nossos resultados indicam que o sorbitol pode atuar de três maneiras; primeiro como um açúcar que é transportado de modo não vascular do endosperma para o embrião; segundo, como um metabólito intermediário; e terceiro, servindo como um escape para o excesso de NAD(P)H formado no interior hipóxico da semente. Os resultados apresentados nesta tese mostram um mecanismo inédito de interação metabólica entre o embrião e o endosperma, mediado pelo sorbitol, cuja síntese na semente, até então, era tida como um caminho "sem saída" / Abstract: At 10 DAP (days after pollinization) sorbitol dehydrogenase (SDH) was found to be the most abundant transcript, as depicted by the number of reads in the MAIZEST database. SDH catalyzes the NADH-dependent reduction of fructose to sorbitol or the oxidation of sorbitol to fructose. In Rosaceae, this enzyme has an important role in the sorbitol translocation from leaves to fruits and fructose storage in fruits. Maize endosperm, however, does not store fructose or sorbitol. The biochemical activity of SDH was already characterized, but there is no information about SDH genomic structure. Trying to understand better this gene we sequenced a complete genomic SDH sequence. Amino acid sequence comparisons showed SDH to be highly eonserved, but the non-coding sequences were not, and an intron loss has occurred among plant species. Southern blot and isoenzyme analyses indicated that there is only one SDH loeus in maize. Northern blot and enzyme activity analyses confirmed that SDH expression is restricted to the endosperm, starting early after pollinization, reaehing a peak at 15 DAP and decreasing to low levels after 25 DAP. The in situ loealization of SDH activity revealed that the enzyme is expressed ali over the amilaceous endosperm, more especifically in the basal region. Sugary1 and Shrunken2 mutants, that store more sugar, had a higher SDH activity. Upon injection of up to 150 mM of sucrose in maize ear SDH activity incresead, confirming the mutant's results. Sueh increase seemed to be at the transcriptionallevel and regulated by the first intron. The first intron seems to control not only sucrose, but also hypoxia response. The role of sorbitol in developing maize kernels is potentially pivotal, but remains undefined. Suerose arriving at the kernel base is metabolized into fructose, which can be converted to sorbitol by SDH. This is a highly active enzyme in maize endosperm, but not in embryos. Still, there is considerable sorbitol in maize embryos. We verified that embryos eould grow having only sorbitol as a carbon source. We have found sorbitol transporter ESTs in endosperm and aldose-reductase, which can convert sorbitol into glueose, ESTs in embryo. We also demonstrated that sorbitol can be transported into the embryo. So, we hypothesize that sorbitol can be translocated into the embryo by sorbitol transporters, and inside the embryo, AR may convert sorbitol into glucose. In summary, SDH activity and sorbitol synthesis may contribute in three critica I ways during seed development; first as a non-vascular transport sugar moving from endosperm to embryo; second, as an intermediate metabolite largely isolated frem sugar-signaling paths; and third, as a much-needed shuttle for excess NAD(P)H forming in the hypoxic kernel interior. The presented results showed a new mechanism of embryo-endosperm interaction, mediated by sorbitol, which was considered a dead end, until now / Doutorado / Genetica Vegetal e Melhoramento / Doutor em Genetica e Biologia Molecular
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Estudo dos mecanismos de defesa de plantas de milho atraves das abordagens de analise proteomica e mapeamento de QTLs

Silva, Adriana Moreira da Silva e 15 March 2005 (has links)
Orientador: Sergio Marangoni / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T06:47:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_AdrianaMoreiradaSilvae_D.pdf: 6318592 bytes, checksum: 2d42ae741dfb799cf38492581dbb5324 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: As plantas são capazes de responder e resistir ao ataque de patógenos ativando uma diversidade de estratégias de defesa. A maioria delas exibe uma estratégia geral onde são ativadas respostas bioquímicas de maneira coordenada, incluindo a reprogramação do metabolismo celular, o reforço das barreiras celulares e produção de compostos antimicrobianos e proteínas que agem diretamente sobre o patógeno. Mas existem também respostas específicas das plantas a determinados patógenos, onde são ativadas vias de defesa específicas.Apesar da crescente quantidade de dados em literatura descrevendo genes envolvidos na patogênese vegetal, pouco se sabe sobre as modificações ao nível de proteoma associadas com estas interações. Neste trabalho é apresentado um estudo proteômico comparativo de plantas de milho, de dois genótipos contrastantes em relação à resistência ao fungo Puccinia polysora, em que foram caracterizadas as diferenças no perfil de expressão de proteínas em sementes dos dois genótipos. Através de uma ampla caracterização dos perfis de proteína por diferentes métodos eletroforéticos, foram reveladas 12 proteínas diferencialmente expressas no genótipo de maior resistência. Destas, 5 foram identificadas por espectrometria de massas por MALDI-TOF, sendo 3 delas identificadas como proteínas com atividade de defesa: uma lipoxigenase de 96 kDa, uma proteína Vicilin-like de 66 kDa e uma proteína Heat-Shockde 70 kDa. No segundo capítulo da tese, apresentamos um estudo complementar de mapeamento de QTLs em plantas de milho para a identificação dos genes reguladores da síntese de DIMBOA, um composto secundário que atua na defesa de plantas contra fungos e insetos. Neste estudo foi construído um mapa genético de ligação de uma população F2 resultante do cruzamento de uma linhagem com alta produção de DIMBOA e outra linhagem de baixa produção deste composto. O mapa, com um tamanho total de 1432,9 centimorgans, foi construído com 123 marcadores SSR. Com este mapa foi possível identificar quatro QTLs potencialmente relacionadas com a regulação da via de síntese de DIMBOA, sendo uma no cromossomo 1 (bin 1.08), duas no cromossomo 6 (bin 6.01 e bin 6.02) e uma no cromossomo 10 (bin 10.05) / Abstract: Plants have the ability to respond to invasion by pathogens through activation of a variety of defense strategies. Most plants exhibit a general defense strategy in which a wide range of biochemical responses are induced in a coordinated manner, including reprogramming of cellular metabolism, accumulation of barrier-forming substances and production of antimicrobial compounds and proteins that act directly to prevent pathogen invasion. Some plants show also specific pathogen responses, in a different strategy pathway. Although there is an increasing amount of literature dealing with genes involved in bacterial and fungal pathogenesis, very few reports have addressed proteome modifications associated with such interactions. In the present work we show a comparative proteomic analysis of maize plants, resistant and susceptible genotypes to Puccinia polysora fungi infection and the characterization of differences in protein expression profiles of seeds. Protein profiles of both genotypes were analyzed by a broad range of electrophoresis methods and we could identify 12 proteins differentially expressed in resistant genotype. Five of them were identified by MALDI-TOF mass spectrometry and 3 of them were identified as defense related proteins, a 96 kDa lipoxygenase, 66 kDa Vicilin-like protein and 70 kDa Heat-Shock protein. We also present a complementary study of QTL mapping for identification of regulatory genes controlling DIMBOA synthesis in maize. In this study is shown a linkage map of a F2 population resultant from crossing between two maize lines presenting high DIMBOA production and low DIMBOA production. This map presents 1432,9 centimorgans and was constructed using 123 SSR markers. Using this map we could identify four QTLs possibly related with DIMBOA production, one QTL on bin 1.08 of chromossome 1, two QTLs on bins 6.01 and 6.02 on chromossome 6, and one last QTL on bin 10.05 on chromossome 10 / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

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