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Estudo citogenetico de duas especies de dipteros de interesse medico-veterinario : Haematobia irritans e Muscina stabulans (Diptera, Muscidae)

Parise, Patricia Pasquali 12 December 1994 (has links)
Orientador: Rita Maria Pereira Avancini / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-19T20:54:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Parise_PatriciaPasquali_M.pdf: 6704686 bytes, checksum: 66cbd34e948223b61a8869a96579c600 (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: Muscina stabulans e Haematobia irritans são dípteros considerados exceções dentro da família Muscidae por apresentar um conjunto haplóide com cinco pares de cromossomos, enquanto a regra nesta família é 2n= 12, sendo um par sexual. Em nosso estudo tivemos como objetivos a descrição do cariótipo de M. stabulans e o reestudo do cariótipo de H. irritans, a localização física de NORs e de regiões de heterocromatina constitutiva em cromossomos mitóticos e meióticos nas duas espécies. Foi também estudado o comportamento do nucléolo em núcleos interfásicos de diferentes tecidos. O cariótipo de M. stabulans foi caracterizado a partir do resultado de medidas feitas em cromossomos de gânglio cerebral de larvas em estágio L3. Os pares I, lI, III e V são metacêntricos e o par IV, submetacêntrico. Foram observadas duas constrições secundárias no braço longo do cromossomo I e uma no braço curto do cromossomo lI. As características cariotípicas de H. irritans foram obtidas de metáfases provenientes de células de gânglio cerebral de larvas L3. Os pares I, II e V são metacêntricos e os demais, submetacêntricos. Para o estudo das regiões organizadoras nucleolares foi utilizada a técnica de impregnação pelo íon prata para marcação de NORs. Obteve-se como resultado, quase sempre, uma grande inespecificidade do método para cromossomos mitóticos de ambas as espécies, pois foram observadas marcações centroméricas, teloméricas e algumas vezes, intercalares. Já para cromossomos meióticos, o método mostrou-se mais específico sendo possível a detecção de uma nítida marcação intercalar no cromossomo III de H. irritans. Através do método de bandamento C foi possível localizar as regiões de heterocromatina constitutiva. Nos preparados de gânglio cerebral de M. stabulans foram observadas marcações centroméricas em todos os cromossomos e uma forte marcação no braço curto do cromossomo 11, que parece estar relacionada com a região de constrição secundária. Nos cromossomos de H. irritans não foi possível observar marcações centroméricas; apenas foi detectada uma marcação intercalar no par 11. Foram observados núcleos interfásicos com um ou dois nucléolos em células de gânglio cerebral, testículo e de tecido embrionário. Os nucléolos de núcleos interfásicos de testículos de M. stabulans são múltiplos ou únicos, podendo ser resultado de fragmentação ou associação ao longo do desenvolvimento celular. Todos os resultados foram discutidos com os existentes na literatura para dípteros e outros insetos. A análise do padrão de banda C e de NORs nos cromossomos mitóticos e meióticos das duas espécies estudadas, ao lado do número e morfologia cromossômicos contribuem com dados para os estudos citotaxonômicos do grupo e para o entendimento da diminuição do número de cromossomos de 12 para 10 em certas espécies / Abstract: The flies Muscina stabulans and Haematobia irritans are exceptions among Muscidae since both present one less pair of chromosomes and thus do not follow the mIe 2n=12. The objectives of this study were:describing the karyotype of M. stabulans, re-analyzing the karyotype of H. irritans and locating NORs and constitutive heterochromatic regions in mitotic and meiotic chromosomes of both species. The nucleolus was also examined by comparing its number and morphQlogy in different tissues. To characterize the M. stabulans karyotype, chromosomes from L3 larval brain preparations were measured. Pairs I, 11, 111 e V are metacentric and pair IV is submetacentric. The long arm of chromosome I presents two secundary constrictions and the short arm of chromosome n presents one constriction. The description of the karyotype of H. irritans was performed using the same methods. Chromosomes I, 11 and Vare metacentric and the other two are submetacentric. The nucleolar organizer regions were studied through silve r staining. As a result, the method has very often shown to be unspecific for mitotic chromosomes in both species, since detection of centromeric, telomeric and sometimes intersticial was possible. As for meiotic chromosomes, the method was more specific, allowing clear detection of one dense black dot in chromosome 111 of H. irritans. C-banding allowed the identification of constitutive heterochromatin regions. In M. stabulans brain preparations the centromeric regions of all chromosomes and one region of the short arm of the chromosome 11, which seems to be related to the secundary constriction, were all C-band positive. In H. irritans chromosomes, however, centromeric regions could not be distinguished as C-band positive. Only one intercalary band was seen in pair 11. Cells possessing one or two nucleoli were observed in testes, brain and embryonic tissues. Nucleoli in testes of M. stabulans are seen either as multiple or single units, which could be the results of either fission or aggregation throughout the development of these cells. The results obtained were compared to those available for Diptera and other insects. The C-band and NO R patterns obtained for both mitotic and meiotic chromosomes of the two flies as well as the number and morphology of their chromosomes contribute to the cytotaxonomic studies of Muscidae and add up to data that can help to understand the reduction of chromosomes from 12 to 10 in certain species / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Ciências Biológicas
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Artropodofauna associada a fezes bovinas em pastagens e alguns aspectos da biologia dos estagios imaturos da Haematobia irritans (Linnaeus, 1758) (Diptera: Muscidae) na Região de São Carlos, SP

Mendes, Julio 09 February 1996 (has links)
Orientador: Aricio Xavier Linhares / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-21T01:33:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mendes_Julio_D.pdf: 5622162 bytes, checksum: 57fed8b68059bb4a1e80996671c49137 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Foram amostradas fezes bovinas naturalmente depositadas em pastagens da Fazenda Canchim - EMBRAP A, São Carlos e em pastagens de Ribeirão Bonito e distrito de Santa Eudóxia (São Carlos) - SP, no período de abril de 1992 a julho de 1994. As amostras tiveram como objetivo verificar a freqüência relativa e sazonalidade da artropodofauna associada às fezes e estudar o parasitoidismo, ocorrência de diapausa, sítio de empupação e taxa de emergência de H. irritans. Os resultados obtidos permitiram obter algumas informações sobre os mais abundantes oleópteros, dípteros e ácaros macroquelídeos presentes em fezes bovinas com aproximadamente 24 horas de idade. As variações meteorológicas mostraram-se o principal fator limitante da artropodofauna. De maneira geral toda artropodofauna apresentou seus picos populacionais nos meses quentes e úmidos do ano. Nenhuma espécie foi predominantemente do período seco e frio, embora algumas poucas tenham apresentado picos consideráveis nesse período. Verificou-se ocorrência de Diapausa em 12% das pupas de H. irritam; coletadas em pastagens nos meses de junho e julho mas apenas 4,5% mostraram-se viáveis. Observou-se parasitismo bem suscedido em 7% das pupas de H. irritans encontradas em pastagens. S. nigroaenea e S. cameroni foram os mais abundantes parasitóides pupais de H. irritam;. As L3 de H. irritans empuparam quase que exclusivamente dentro e abaixo das fezes e não demonstraram preferência por nenhum desses dois locais independentemente do tipo de solo ou das variações meteorológicas. Não se observou variação significativa na mortalidade de pupas coletadas em pastagens, entre os meses mais frios e quentes do ano / Abstract: ovine faeces naturally dropped were sampled at EMBRAP A livestock pastures in São Carlos, and in Ribeirão Bonito in São Paulo State, trom April of 1992 to April 1994. The samples were taken to obtain the reI ative trequency and sazonallity of Coleoptera, Diptera, Macrochelidae (Acari) and Microhimenoptera considered important for the degradation process of bovine feaces in pastures and/or in the control of coprofilous Diptera, including H. irritans. The meteorological variations seemed to be the main limitant factor for the arthropodofauna. In general, the community showed a peak during the warm and humid months. No species was predominant in the dry and cold period. Nevertheless some were abundant in that period. Diapause occurrence was verified in H. irritans pupae sampled at Ribeirão Bonito pastures in June and July. The percentage of occurrence was 12%, but only 4,5% was viable. It was verified 7% of parasitoidism in H. irritans pupae . S. nigroaenea and S. cameroni were the most abundant parasitoids of H. irritam'. The tly did not show preference for pupation site, inside or below the faeces, independently of soil type or the annual temperature changes. The pupal mortality did not change significantly during the year / Doutorado / Parasitologia / Doutor em Ciências Biológicas
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Analise de restrição de rDNA de tres especies de dipteros muscoideos de importancia medico-veterinaria

Horle, Lucianne Vieira Vargas 08 February 1996 (has links)
Orientador: Shirlei Maria Recco-Pimentel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-21T01:15:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Horle_LucianneVieiraVargas_M.pdf: 2359968 bytes, checksum: ff83d55a46d6db19a16ab4879c27d297 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: o DNA ribossomal de três dípteros de importância médico-veterinária (Haematobia irritans, Muscina stabulans e Chrysomya putoria) foi analisado através do estudo dos sítios de restrição para as enzimas Eco RI, Bam HI, Hind 111, Pst I, Sal I, BgI 11 e Sma I em digestões simples e duplas. Os plasmídios recombinantes pDm 238, HM 456, HM123 e pc Hi 18 foram marcados pelo método de "random priming" e detectados por quimioluminescência. Os tamanhos estimados das unidades de repetição dos rDNAs de H irritans, M. stabulans e C. putoria são, respectivamente, 9,8; 9,0 e 11,0 kb. Comparando-se os mapas de restrição das três espécies entre si e com o de Drosophila melanogaster e de Calliphora erytrocephala verificou-se que os sítios para as enzimas Eco RI, Hind 111, BgI 11 e Sma I, da região codificadora 18S, e Pst I, na região transcrita interna (ITS), são altamente conservados. Na região do 28S em M stabulans e C. putoria está presente o mesmo número de sítios Hind 111, BgI 11, e Sma I, porém localizamse em pontos diferentes. No rDNA das três espécies estudadas não foi identificado sítio para Bam HI e em C. putoria foi encontrado um segundo sítio Eco RI, localizado na região IGS. Apenas na espécie H irritans foi possível localizar um sítio BgI 11 na região IGS. Os mapas de restrição de C. putoria e C. erytrocephala, que pertencem à família Calliphoridae, são mais semelhantes entre si do que H irritans e M. stabulans, da família Muscidae. A presença de inserções no gene 28S, bem como de variação intraespecífica no tamanho de IGS, a exemplo do que é descrito para outros dípteros, seriam explicações para a presença de fragmentos adicionais, de bandas difusas e de fragmentos com tamanhos maiores ou menores do que os possíveis no mapa de restrição das três espécies. As enzimas Eco RI, BgI 11 e Hind 111 produzem um padrão de bandas, com a utilização da sonda pDm 238, que permite fazer a distinção do rDNA das três espécies entre si. A localização dos sítios de restrição do rDNA destas espécies poderá servir de base para estudos futuros de clonagem e sequenciamento, bem como estudos filogenéticos / Abstract: Three species of flies (Haematabia irritans, Muscina stabulans, and Chrysamya putaria) which present economic and sanitary importance had their rDNA studied and compared. Genomic DNA obtained by phenol/chloroform extraction of proteins and ethanol precipitation of the DNA was digested with the restriction enzymes: Eco RI, Bam HI, Hind lU, Pst I, Sal I, BgI U and Sma I either in simple or double digestions. Probing DNA from each species with the recombinants plasmids pDm 238, HM 123, HM 456 and pcHi 18, identified some conserved sites and a few unique ones on each rDNA. The conserved sites among the three studied species plus two species available from literature, Drasaphila melanagaster and Callyphara erytracephala were: Eco RI, Hind lU, BgI U and Sma I located in the coding region 18S and Pst I Ín the internal transcribed egion (ITS). No Bam HI site was identified in any of the three flies. M stabulans and C. putaria presented the same number of sites Hind lU, BgI U and Sma I in the coding region 28S but they mapped in different regions. Furthermore, C. putaria was the only fly presenting a second Eco RI site located in the intergenic region (IGS). C. putaria had the longest rDNA cistron which was estimated to be 11 Kb, when compared to H irritans (9.8Kb) and to M stabulans (9.0Kb). Restriction maps of the rDNA cistron in C. putaria and the other calliphorid, Calliphara erytracephala, are more similar than maps of the two muscid, H irritans and M stabulans. A number of variant bands detected in some digestions may be explained by the presence of insertions in the 28S region as well as intraspecific variation in the IGS length as described in other Diptera. Species-specific patterns were identified for the three flies when the DNA was igested with each of the following restriction enzymes Eco RI, BgI U and Hind lU (probed with pDm 238) / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Ciências Biológicas
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Influencia do tratamento endectocida (ivermectina) e da ação biologica coprofila no desenvolvimento da mosca-dos-chifres (Haematobia irritans) (L.) (Diptera: Muscidae) e na entomofauna no municipio de Araçatuba, São Paulo, Brasil / The influence of treatment with a anti-helmintic drug (ivermectin) and coprophagic insects on the development of horn fly (Haematobia irritans) (L.) (Diptera: Muscidae) and insect fauna in Araçatuba countryside, São Paulo, Brazil

Lima, Luiz Gustavo Ferraz 31 August 2005 (has links)
Orientador: Angelo Pires do Prado / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-05T02:17:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lima_LuizGustavoFerraz_D.pdf: 1683443 bytes, checksum: f27b22a1767db423773354723196c9c2 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Foram avaliadas entre 2002 e 2004, as influências da ação de insetos coprofágicos de dois tratamentos com endectocida (ivermectina), no desenvolvimento da ¿mosca-dos-chifres¿ (Haematobia irritans) (L.1758), em fezes bovinas, no município de Araçatuba, SP, Brasil, bem como da ação coprofágica. No campo, foram capturadas ¿mosca-dos-chifres¿ e coletadas as fezes de bovinos tratados (ivermectina) e não tratados (controle). Para avaliar o desenvolvimento da mosca nos grupos, em condição de temperatura laboratorial e ambiental, os ovos das moscas foram obtidos em laboratório e contadas as larvas inoculadas em fezes bovinas. Considerou-se como resultado dos testes, o número de ¿moscas-dos-chifres¿ emergidas, do número de larvas inicialmente inoculadas. O grupo não tratado obteve maior número de moscas, comparativamente ao grupo tratado, tanto em condição de temperatura laboratorial, como em condição ambiental. O tratamento mensal dos bovinos impediu o desenvolvimento da ¿mosca-dos-chifres¿ por até 30 dias em todos os testes, e no tratamento com única dose, as moscas emergiram a partir do 28º dia após sua aplicação. Para avaliação da ação dos artrópodes predadores, competidores e parasitos da ¿mosca-dos-chifres¿ em fezes bovinas, os ovos das moscas foram inoculados apenas em fezes do grupo não tratado. O número de moscas emergidas das fezes expostas no campo, sob a ação dos insetos da coprofauna bovina, foi significativamente menor (p<0,0021), comparativamente às moscas emergidas das fezes protegidas. Os Dípteros simbovinos no município de Araçatuba, SP, foram similares para os períodos, e entre o grupo tratado e não tratado: Cecidomyidae, Chloropidae, Muscidae, Psychodidae, Sepsidae, Sarcophagidae, Sphaeroceridae e Syrphidae, porém o número, a freqüência, a dominância, a diversidade e a similaridade das famílias, foram influenciadas pelo tratamento / Abstract: The influence of coprophagic insects and the treatment with a anti-helmintic drug (ivermectin) on the development of horn fly (Haematobia irritans) (L.1758), inside bovine feces were evaluated, in Araçatuba county (São Paulo State, Brazil), as well as the influence of these factors on the coprophilic entomofauna. Horn flies and feces were collected in the field from the bovines treated with ivermectin and from untreated bovines (control group). To evaluate the development of these flies in the two groups in conditions of controlled and environmental temperatures the fly eggs were collected, counted and inoculated into bovine feces. The numbers of horn fly that emerged from the feces and the number of larvae primarily inoculated were compared. The untreated group showed a higher number of fly counts, when compared to the treated group (were not observation fly), both in controlled temperature, as well in environmental conditions. The treatment at bovines with ivermectin, performed monthly, prevented the development of horn fly for up to 30 days in all the experiments and, after one treatment with the drug, the flies emerged only on the 28th day. To evaluate the effects of the arthropod predators, competitors and parasites of the horn fly in the bovine feces, flies eggs were inoculated into the feces from the untreated group. The number of flies that emerged from the feces exposed to the field, under the action of coprophilic entomofauna, was significantly smaller (p<0,0001), comparatively to those that emerged from the protected feces. The Diptera associated with bovine dung in Araçatuba municipality, were similar in the treated and untreated groups for studied period: Cecidomyidae, Chloropidae, Muscidae, Psychodidae, Sepsidae, Sarcophagidae, Sphaeroceridae e Syrphidae. However, the total number, frequency, dominance, diversity and the similarities between the families were influenced by the treatment / Doutorado / Doutor em Parasitologia
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Isolamento e caracterização de marcadores microssatelites para a mosca-dos-chifres, Haematobia irritans (Linnaeus, 1758) / Isolation and characterization of polymorphic microsatelite loci for the horn fly, Haematobia irritans (Linnaeus, 1758)

Rosa, Aline Coelho da 31 August 2007 (has links)
Orientador: Ana Maria Lima de Azeredo-Espin / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-09T08:21:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rosa_AlineCoelhoda_M.pdf: 1020874 bytes, checksum: 5958193e586711ee1cf0c5fe30134718 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Este trabalho consiste na construção de uma biblioteca genômica enriquecida em microssatélites e na caracterização de dez locos polimórficos para a espécie Haematobia irritans irritans (Diptera: Muscidae), popularmente conhecida como mosca-dos-chifres, um ectoparasita de grande importância econômica para a pecuária de diversos países, principalmente no Brasil. A biblioteca genômica enriquecida em microssatélites teve um rendimento de 67% considerando-se o número de microsatélites (contendo mais de 7 repetições em série) caracterizados em um total de 109 sequências analisadas. Um rendimento de 22% foi encontrado referente à obtenção de 16 locos potencialmente informativos. Dos microssatélites identificados nesta análise, 85% possuíam motivos (CA)n e apenas 12% apresentaram motivos (GA)n, apesar da biblioteca ter sido enriquecida para ambos os motivos. Neste projeto, dez locos polimórficos de microssatélites foram descritos para a espécie H. irritans. Destes, oito locos apresentaram motivos dinucleotídeos, sendo cinco motivos (CA)n e três motivos (GA)n, além da identificação de um loco com motivo trinucleotídeo (CAA)7 e um tetranucleotídeo (CCGT)6. Entre os dez locos polimórficos, o número de alelos por loco variou entre dois e oito, tendo uma média de quatro alelos por loco, considerados um número baixo quando comparado com outras espécies de dípteros. As heterozigosidades esperada e observada apresentaram um intervalo de 0,1421-0,7702 e 0,1500-0,6750, respectivamente. Os valores de heterozigosidade também foram considerados baixos, sendo inferiores a 0,5 em pelo menos três locos. Após correção seqüencial de Bonferroni, oito locos não apresentaram desvios significativos pelo esperado por Hardy-Weinberg, bem como não foi verificado desequilíbrio de ligação entre os pares de locos. A caracterização destes marcadores microssatélites polimórficos, é potencialmente informativa para elucidar questões evolutivas envolvendo H. irritans como a compreensão da dinâmica populacional e estrutura genética desta espécie. A análise deste marcador molecular poderá orientar projetos de manejo e controle da mosca-dos-chifres / Abstract: The aim of this work was the construction of a genomic microsatelliteenriched library for the species Haematobia irritans irritans (Diptera: Muscidae), commonly known as ¿horn fly¿, an ectoparasite of great economic importance world-wide, and particularly in Brazil. Here we describe ten polymorphic microsatellite loci isolated from this species. From a complete set of 109 sequences analised, 67% contained microsatellites regions (considering sequences with more than 7 repeats). The analysis of these sequences resulted in the identification of 16 potentially informative microsatellites loci (an efficience of 22%). Regarding the composition of the microsatellites sequenced retrived in this process, 85% have (CA)n motifs and only 12% have (GA)n motifs, despite enrichment on both. From the ten polymorphic microsatellite loci isolated from H. irritans, 8 have dinucleotide motifs (5 (CA)n and 3 (GA)n), one was a trinucleotide motif (CAA)7 and one was a tetranucleotide motif (CCGT)6. The number of alleles per locus ranged from two to eight, with an average of four alleles per locus. This number of alleles was considered low if compared with other dipterans studies. The expected and observed heterozigosities ranged from 0,1421 to 0,7702 and 0,1500 to 0,6750, respectively. Heterozigosity values were considered low. In this analysis, at least three loci presented heterozigosity values under 0,5. After sequential Bonferroni correction, significant deviation from Hardy-Weinberg equilibrium was found for 2 loci. No linkage disequilibrium was observed between pairs of loci after correction for multiple tests. The characterization of these polymorphic microsatellites markers is potentially informative to investigate evolutionary questions regarding H. irritans populations by providing fundamental insights into population dynamics and genetic structure. Further projects on horn flies control and management could also benefit from this molecular marker analysis / Mestrado / Genetica Animal e Evolução / Mestre em Genética e Biologia Molecular

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