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AplicaÃÃo de tÃcnicas espectromÃtricas e cromatogrÃficas na caracterizaÃÃo de seis tipos quÃmicos de Myracrodruon urundeuva (Aroeira-do-sertÃo).Nayara Coriolano de Aquino 14 March 2013 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Myracrodruon urundeuva Fr. Alem. (Anacardiaceae) is the scientific designation of âaroeira-do-sertÃoâ, a tree well dispersed at the northeasttern of Brazil characteristic âcaatingaâ, whose medicinal use is widespread throughout the rural population. The inner trunk bark decoction is ethnopharmacologically used to treat cutaneous affections, urinary and respiratory diseases, as an aseptic bath postpartum, and as a remedy to other gynecological problems. Recently, âaroeira-do-sertÃoâ has been included by ANVISA, in the official list of plants with reputed folk medicinal use having potential for phitoterapic exploration. On the hand, due to its predatory extractivism, it has also been included in the IBAMA list of native species under extinction threat. This work has as the main objective the phytochemical analysis of the leaves of âaroeira-do-sertÃoâ seeking for scientific details about the volatile chemical composition as well as the non-volatile constitution. Fresh leaves of 52 wild âaroeira-do-sertÃoâ specimens were submitted to hydrodistillation. Analyses by 1H NMR and GC-MS of all oil samples permited the characterization of six chemomarkers and, in consequence, the characterization of six âaroeira-do-sertÃoâ chemotypes: (E)-β-ocimene (Z)-β-ocimene, Δ3-carene, α-pinene, myrcene and limonene. The volatile composition of oil samples from leaves of 43 cultivated âaroeira-do-sertÃoâ revealed the same type of behavior for young plants. Both the aqueous (obtained by decoction) and the ethanol (by maceration) extracts from leaves of âaroeira-do-sertÃoâ were submitted to pharmacological assays showing no cytotoxic effect, but antiflammatory potential. The phytochemical analysis of both extracts, using spectroscopic and chromatographic techniques, lead to the isolation and characterization of gallic acid, methyl gallate, quinic acid and the unknown N-methyl-3R*, 5R*-dihydroxy-2-piperidinone / Myracrodruon urundeuva Fr. Allem (Anacardiaceae) à a designaÃÃo cientÃfica para a aroeira-do-sertÃo, uma das plantas cujo uso medicinal à dos mais difundidos na populaÃÃo rural no Nordeste do Brasil. O decocto da entrecasca apresenta uso etnofarmacolÃgico no tratamento de afecÃÃes cutÃneas, problemas relacionados com doenÃas respiratÃrias e urinÃrias, alÃm de excelente âbanho-de-assentoâ no pÃs-parto e outros problemas ginecolÃgicos. Recentemente a aroeira-do-sertÃo foi incluÃda na lista oficial de plantas ANVISA, preconizadas pelo uso popular, com potencial uso fitoterÃpico, mas o extrativismo predatÃrio a tem colocado na lista do IBAMA das espÃcies da caatinga nordestina em risco de extinÃÃo. Este trabalho tem como objetivo a anÃlise fitoquÃmica das folhas de Myracrodruon urundeuva, visando o detalhamento da composiÃÃo quÃmica volÃtil, e o isolamento dos constituintes nÃo volÃteis. As folhas frescas de 52 espÃcimes silvestres de aroeira-do-sertÃo foram submetidas à extraÃÃo por hidrodestilaÃÃo, para obtenÃÃo dos Ãleos essenciais. As anÃlises por RMN 1H e CG-MS das diversas amostras de Ãleos essenciais provenientes de folhas de aroeira-do-sertÃo silvestres permitiu a caracterizaÃÃo de seis marcadores quimiotaxonÃmicos e, em conseqÃÃncia de seis diferentes tipos quÃmicos ((E)-β-ocimeno, (Z)-β-ocimeno, Δ3-careno, α-pineno, mirceno e limoneno) revelando, portanto uma variaÃÃo quÃmica intra-especÃfica. TambÃm foram analisados os Ãleos essenciais das folhas de plantas cultivadas, caracterizando-se a constituiÃÃo quÃmica volÃtil semelhante as plantas silvestres. Os extratos aquoso (decocÃÃo) e etanÃlico (maceraÃÃo) da folhas de aroeira-do-sertÃo foram submetidos a testes farmacolÃgicos de citotoxicidade e anti-inflamatÃrio em neutrÃfilo humano, revelando que os extratos nÃo apresentaram citotoxicidade, mas tinham potencial anti-inflamatÃrio. O estudo fitoquÃmico dos extratos resultou no isolamento e caracterizaÃÃo de quatro compostos: Ãcido gÃlico, galato de metila, Ãcido quÃnico e N-metil-3R*,5R*-di-hidroxi-2-piperidinona, uma lactama inÃdita na literatura.
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Atividades enzimáticas presentes em intestino de Nasutitermes coniger: detecção, caracterização e modulação por lectinas termiticidasLima, Thâmarah de Albuquerque 16 April 2012 (has links)
Submitted by Daniella Sodre (daniella.sodre@ufpe.br) on 2015-03-26T13:50:28Z
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Previous issue date: 2012-04-16 / CNPq, FACEPE, CAPES e UFPE / Nasutitermes corniger é uma espécie de cupim-praga que causa danos em diversas
construções. Enzimas digestivas possuem várias aplicações biotecnológicas e podem
constituir alvos para o controle de insetos. O presente trabalho descreve a detecção das
atividades de celulases (endoglucanase, exoglucanase e β-glicosidase), hemicelulases (β-
xilosidase, α-L-arabinofuranosidase e β-xilanase), α-amilase, e proteases (tripsina-símile,
quimotripsina-símile, calicreína-símile e do tipo queratinase) em extratos de intestino de
operários e soldados de N. corniger. As atividades enzimáticas foram avaliadas após
incubação dos extratos de intestino em diferentes temperaturas e valores de pH e com lectinas
termiticidas de Myracrodruon urundeuva. A adaptabilidade desta espécie de cupins para
digerir materiais lignocelulósicos foi evidenciada pelos altos valores de atividade de
endoglucanase e β-xilanase. Zimografia para proteases do extrato de operários revelou que
polipeptídeos de 22, 30 e 43 kDa hidrolisaram caseína. Efeito de inibidores na atividade
enzimática mostrou que serino proteases foram as principais proteases presentes no intestino
de operários e soldados. As atividades tripsina-símile e calicreína-símile foram detectadas em
maiores níveis. Os resultados dos ensaios de estabilidade frente ao aquecimento e pH revelam
a presença de aparatos digestivos distintos entre operários e soldados. As lectinas de M.
urundeuva afetaram diferentemente as atividades enzimáticas e sua atividade termiticida pode
estar relacionada com a modulação de enzimas digestivas. O presente trabalho é uma etapa
inicial no estudo do aparato digestivo de N. corniger e estimula a purificação e avaliação do
potencial biotecnológico dessas enzimas.
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Lectina e metabólitos secundários do cerne de Myracrodruon urundeuva: atividades antioxidante, antifúngica sobre Fusarium e termicida sobre Nasutitermes cornigerHenrique Napoleão, Thiago 31 January 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Cerne de Myracrodruon urundeuva é resistente à biodeterioração por fungos e cupins que
promovem danos severos à madeira. Este trabalho descreve as atividades antioxidante,
antifúngica e repelente contra Nasutitermes corniger de metabólitos secundários de cerne
de M. urundeuva e atividade termiticida da lectina de cerne de M. urundeuva (MuHL).
Extrato salino (ES, preparação com atividade hemaglutinante) e extrato metanólico (EM,
sem atividade hemaglutinante) contêm compostos fenólicos, ácido gálico, flavonóides,
luteolina, derivados cinâmicos, proantocianidinas, taninos hidrolisáveis e
leucoantocianidinas. Ambos ES e EM mostraram atividade antioxidante e foram efetivos
na inibição do crescimento de Fusarium. ES foi eficiente contra F. decemcellulare, F.
moniliforme, F. oxysporum, e F. solani, mas ele teve pouco efeito contra F. lateritium. EM
praticamente não teve efeito sobre F. decemcellulare e foi mais ativo do que ES contra F.
lateritium. ES induziu mortalidade de N. corniger (CL50 de 1,81 mg/mL para soldados e
2,59 mg/mL para operários) e não teve atividade repelente. EM não teve atividade
termiticida, mas foi um bom repelente. A presença de MuHL foi detectada em ES. MuHL
foi isolada por cromatografia de afinidade (coluna de quitina) e o efeito da lectina sobre N.
corniger foi avaliado pelos ensaios termiticida e repelente. MuHL foi submetida a
tratamento com tripsina e analizada para a presença de contaminantes não protéicos. A
atividade da lectina foi inibida pelo monossacarídeo N-acetilglicosamina e adsorveu na
coluna de quitina. A preparação lectínica foi livre de metabólitos secundários que podem
promover a mortalidade de insetos. Contato com lectina em todas as concentrações induziu
mortalidade dos cupins. Os valores de CL50 foram 0,248 mg/mL para operários e 0,199
mg/mL para soldados, após 4 dias. Ensaio repelente indicou que a lectina não induziu um
efeito de rejeição. A lectina permaneceu ativa após incubação com tripsina bovina. Este é o
primeiro relato do efeito tóxico de lectinas sobre térmitas. As bioatividades detectadas
assinalam a possibilidade da participação de metabólitos secundários e MuHL na
resistência do cerne de M. urundeuva à biodeterioração. Adicionalmente, os resultados
indicam o uso de resíduos de madeira como fonte de agentes bioativos naturais
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Descrição das estratégias adaptativas à limitada disponibilidade hídrica em Myracrodruon urundeuva Allemão, espécie da caatinga ameaçada de extinçãoSOUZA, Lindomar Maria de 19 February 2018 (has links)
Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-06-04T12:53:07Z
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Previous issue date: 2018-02-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The Caatinga, a dry tropical rainforest, is proportionally less studied and protected and is undergoing an accelerated process of environmental change and deterioration caused by the inadequate use of its resources. The continuous and intensive predatory exploitation leads to the destruction and diminution of the habitat, constituting serious threats to the species, since some provide good quality wood, such as aroeira (Myracrodruon urundeuva Allemão). This species belongs to the family Anacardiaceae and presents great economic and social value due to its use by local communities in the semi-arid region in the construction of houses, preparation of tanneries and mainly in folk medicine. Plant species of the Caatinga are adapted to the climatic rigors of the region, characterized by high temperature and luminosity, besides a sparse and irregular rainfall. Knowing the morphophysiological responses of plants adapted to the semi-arid conditions will lead to an understanding of the strategies used in an environment with high evaporative demand, due to high temperature and low relative humidity, besides water irregularity and excess light energy. Young plants of Myracrodruon urundeuva were evaluated in order to identify and understand biochemical and physiological strategies of this species against water deficit. For this, two experiments were performed. In the first, three - month - old plants were cultivated in sand or soil in two water conditions, continuous irrigation (CR) or total irrigation (SR) suspension for 30 days. Subsequently, the plants submitted to water restriction were re-irrigated for 15 days. Reduction in water availability negatively affected plant stem growth and promoted increased activity of the enzymes superoxide dismutase (SOD) and ascorbate peroxidase (APX). Hydrogen peroxide (H2O2) and malondialdehyde (MDA) contents were also higher in plants subject to water restriction. The reestablishment of irrigation promoted the resumption of growth and the reduction of MDA levels in plants submitted to water deficit. In the second experiment, two-month-old plants were grown on sand washed in RC or SR conditions for 20 days. After the period of water restriction the plants were rehydrated for 20 days. Growth in height and dry biomass were negatively affected by water deficit. Cell metabolism was reduced during the period of water restriction, with a rapid return to phenological activities after water reestablishment. The reduction in the stomatal perimeter under conditions of water restriction contributes to the reduction of water loss through transpiration in Myracrodruon urundeuva. The strategies of Myracrodruon urundeuva against the water deficit are altered according to the phenological stage and the type of substrate. / A Caatinga, floresta tropical sazonal seca é, proporcionalmente, a menos estudada e protegida e está em acelerado processo de alteração e deterioração ambiental provocado pelo uso inadequado dos seus recursos. A contínua e intensiva exploração predatória acarreta na destruição e diminuição do habitat, constituindo sérias ameaças às espécies, pois algumas fornecem madeira de boa qualidade, tais como a aroeira (Myracrodruon urundeuva Allemão). Esta espécie pertence à família Anacardiaceae e apresenta grande valor econômico e social decorrente de seu uso pelas comunidades locais na região do Semiárido na construção de casas, preparo de curtumes e principalmente na medicina popular. Espécies vegetais da Caatinga estão adaptadas aos rigores climáticos da região, caracterizada por elevada temperatura e luminosidade, além de uma pluviosidade escassa e irregular. Conhecer as respostas morfofisiológicas de plantas adaptadas às condições do semiárido levará à compreensão das estratégias utilizadas em um ambiente com elevada demanda evaporativa, devido à alta temperatura e à baixa umidade relativa, além da irregularidade hídrica e do excesso de energia luminosa. Plantas jovens de Myracrodruon urundeuva foram avaliadas visando identificar e compreender estratégias bioquímicas e fisiológicas dessa espécie frente ao déficit hídrico. Para isso, dois experimentos foram realizados. No primeiro, plantas com três meses de idade foram cultivadas em areia ou solo em duas condições hídricas, a de rega contínua (RC) ou suspensão total da rega (SR) por 30 dias. Posteriormente, as plantas submetidas à restrição hídrica voltaram a ser irrigadas por 15 dias. A redução da disponibilidade hídrica afetou negativamente o crescimento do caule das plantas e promoveu o aumento na atividade das enzimas superóxido dismutase (SOD) e ascorbato peroxidase (APX). Os teores de peróxido de hidrogênio (H2O2) e malondialdeído (MDA) também foram maiores nas plantas submetidas à restrição hídrica. O restabelecimento da rega promoveu a retomada do crescimento e a redução nos teores de MDA nas plantas submetidas ao déficit hídrico. No segundo experimento foram utilizadas plantas com dois meses de idade, cultivadas em areia lavada em condições de RC ou SR por 20 dias. Após o período de restrição hídrica as plantas foram reidratadas por 20 dias. O crescimento em altura e a biomassa seca foram afetados negativamente pelo déficit hídrico. O metabolismo celular foi reduzido durante o período de restrição hídrica, com rápido retorno às atividades fenológicas após o restabelecimento hídrico. A redução no perímetro estomático em condições de restrição hídrica constribui para redução da perda de água por transpiração em Myracrodruon urundeuva. As estratégias de Myracrodruon urundeuva frente ao déficit hídrico são alteradas em função do estágio fenológico e do tipo de substrato.
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Caracterização do extrato de aroeira (Myracrodruon urundeuva) e seu efeito sobre a viabilidade de fibroblastos gengivais humanosMachado, Alessandra Cury 29 August 2013 (has links)
A aroeira (Myracrodruon urundeuva) é uma árvore cujas folhas vem sendo estudadas com fins terapêuticos na medicina e odontologia por apresentar potencial antiinflamatório e antimicrobiano, além de favorecer o processo de reparo e cicatrização. O objetivo do trabalho foi caracterizar quimicamente o extrato de aroeira e avaliar seu efeito sobre fibroblastos gengivais humanos. Foi realizado a caracterização química da aroeira por meio do processo de triagem cromatográfica que consistiu na coleta das folhas sadias, maceração em metanol (MeOH) 80%, partição entre os solventes hexano, acetato de etila (AcOEt) e n-butanol (n-(BuOH)) Em seguida, realizaram-se análises dos compostos químicos em cromatografia liquida de alta eficiência acoplado a detector de arranjo de fotodiodo HPLC-PAD, análises por espectrometria de massas MS e cromatografia liquida acoplada a espectrometria de massas (LC-MS). Posteriormente foi realizada a análise de citotoxicidade do extrato hidroalcoólico de aroeira em fibroblastos gengivais humanos (linhagem FGH). Para a realização dos experimentos foram plaqueadas 2x103 células/poço em placas de 96 poços. O meio de cultivo foi substituído por meio de cultura de Eagle modificado por Dullbecco complementado por 10% soro fetal bovino (SFB) em diferentes concentrações do extrato hidroalcoólico de aroeira (extrato bruto; 1:10; 1:100; 1:1000; 1:10000 e controle). As análises de viabilidade foram feitas nos tempos experimentais de 24, 48, 72 e 96 horas, por meio dos testes de redução do MTT (brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difeniltetrazólio), captação do vermelho neutro e coloração pelo cristal violeta. A estatística foi realizada em análise de variância de 2 critérios seguido de uma análise de teste Tukey (p<0,05). Os compostos encontrados no extrato foram os derivados de ácido gálico, galotaninos, além de flavonoides. Para a redução do MTT os resultados mostraram uma ligeira oscilação da absorbância em todos os grupos nos períodos experimentais. Destaque para as diluições de 1:100, 1:1000 e 1:10000 que apresentaram, em geral para todos os períodos, os maiores valores; enquanto os grupos de extrato bruto e diluição 1:10 apresentaram valores inferiores aos outros grupos (p<0,05). Na análise da captação do vermelho neutro também houve uma leve oscilação dos valores de absorbância, no entanto os valores obtidos para o grupo do extrato bruto foram os menores em todos os períodos estudados (p<0,05). Enquanto os grupos controle e de diluições de 1:100, 1:1000 e 1:10000 apresentaram valores semelhantes sem diferença significante (p>0,05). Para o teste do cristal violeta, os resultados encontrados seguiram o mesmo padrão do vermelho neutro: valores de absorbância menores nos grupos do extrato bruto e 1:10, ao contrário dos outros grupos que apresentaram valores maiores (p<0,05). Em vista dos resultados, podemos concluir que o extrato metanólico de aroeira apresenta em sua composição taninos, flavonóides e derivados de ácido gálico e de galotaninos. Além disso, o extrato de aroeira é capaz de modular a viabilidade de fibroblastos gengivais humanos de maneira dose-dependente. / Aroeira (M. urundeuva) is a tree whose leaves have been studied with therapeutic purpose in dentistry and medicine, due it antimicrobial and antinflamatory potencial protect, besides the repair and cicatrization processes. The aim of the study was characterize the aroeiras extract and evaluate effect over human gingival fibroblast. The aroeiras characterization was realized by means of chromatography screenuy, process that consists in healthy leaves maceration in 80% MeOH, partition in the BuOH, AcOEt and hexanes solvents. Next, the chemicals compounds were analysed in High Performance Liquide Chromatography-Photo Diode Array (HPLC-PAD), Liquide Chromatography Mass Spectrometry (LCMS) and Mass Spectrometry (MSs). Subsequently was realized the citotoxicitys analysis from the aroeira hidroalcooholic extract in human gingival fibroblast (FGH lineage). For the experiments realization was platted 2x103 cels/well in 96 wells plate. The cultives mean was substituted for Eagles means culture changed for complemented Dullbeco for 10% bovine fetal serum in aroeiras hidroalcooholic extracts concentrations different (brute extract, 1:10, 1:100, 1:1000, 1:10000). The viability analysis was carried out in experimental times 24, 48, 72 and 96 hours, by means of MTT reductions test (brometo3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difeniltetrazolio), neutral red captation and violet crystal). The statistics were performed for analysis of variance in 2 criteria continue with a Tukey test analysis (p<0.05). The founded compounds in the extract was the galic acid, gallotanine linked to glucose, besides flavonoids. For the MTTs reduction the results display an absorbance oscillation lightness in all the groups in experimental periods. Distinction for the control group and 1:100, 1:1000 and 1:10000 dilution, that present, by and large, for all the periods, the biggest valuable, while the brute extract group and 1:10 dilution present valuable lower to the others groups (p<0.05). In neutral red is caption analysis there was an absorbants values light oscillation too, despite this, the gotten values for the brute extracts group was smaller in all the studied periods (p<0.05). While the control group and the 1:100, 1:1000 and 1:10000 dilution presented similar values without significant difference (p>0.05). In view of the results, conclude the aroeiras methanolic extract present in your composition flavonoids and gallotanine, and galic acid derivates. Then, the aroeiras extracts is able to human gingival fibroblasts viable modulate dependent dose way.
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Monodominância de aroeira: fitossociologia, relações pedológicas e distribuição espacial em Tumiritinga-MG / Monodominance of aroeira: phytosociology, edaphic relations and spatial distribuition in Tumiritinga-MGOliveira, Felipe Pinho de 27 July 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-07-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The framework of advanced environmental degradation in the central region of the Rio Doce in the state of Minas Gerais by is attributed several authors to the practice of extensive cattle raising added to interactions with the soil, climate, geomorphology and also anthropic interactions. As an aggravating factor of the degradation in the region, some researchers begin to draw attention to the expansion of mono-dominated fragments by the aroeira forest species (Myracrodruon urundeuva Fr. All.). Parallel to this scenario, M. urundeuva appears in the official list of species of flora threatened with extinction in the category "Vulnerable" from 1992 until the present day. On the other hand the Regulatory Ordinance number 85 of September 26, 1991 of IBAMA allows the exploitation of the species in secondary forests through a forest management plan. It is felt that the lack of knowledge about the mono-dominated fragments by aroeira entails the insecurity of the law operators regarding the authorization for intervention in these environments; this is aimed at the recovery of degraded areas and the sustainable management of these fragments. In the search to clarify questions about the areas under mono-dominance of aroeira, this work aimed to characterize the major floristic composition, the horizontal structure and the parametric structure of forest stands under the mono-dominance of Myracrodruon urundeuva in Tumiritinga-MG; evaluate the existence of correlation between chemical and physical attributes of the soil and the expansion of settlements mono-dominated by the aroeira; evaluate the performance of the maximum likelihood classifier and the classifier of artificial neural networks to map the areas occupied by fragments of aroeira in mono-dominance in the city of Tumiritinga-MG; and evaluate the potential use of remote sensing data on board the Landsat TM-5 and RapidEye satellites for the mapping of the areas mono-dominated by aroeira. For this the city of Tumiritinga was widely covered by registering with a GPS navigation device and photo the forms of land use prevalent throughout the studied region. Sixteen inventory plots of forest were distributed throughout the city representing the diversity of environments where the Aroeirais manifest. In the plots inventory xi circles, the total height and botanical identification of all individuals with CAP> 15.7 cm were recorded. From the collected data it was made an analysis of horizontal structure, parametric structure and floristic of the fragments mono-dominated by aroeira in the city of Tumiritinga using the Mata Nativa 2.0 software. In eleven of the sixteen parts of inventory, three undisturbed samples composed of soil were collected and three simple disturbed samples of soil were collected randomly. For each plot it was selected an adjacent pasture from where three simple undisturbed soil samples were collected and three deformed soil samples composed of soil, totaling 33 samples of soil under "Aroeirais" and 33 samples of soil under pasture. The soil samples were submitted to the following chemical analysis: pH in H2O; levels of Ca2+, Mg2+, K+, Al3+, exchangeable Na+, available P, H + Al, SB, t, T, V, m; MOS and ISNa, and the following physical tests: texture, Dp, Ds, Pt, Pmic, Pmac, Ko and water retention at field capacity (-10 kPa) at the permanent wilting point (- 1500 kPa) and in tensions equivalent to -300 kPa and -500 kPa. In order to evaluate the hypothesis of equality between the averages of chemical and physical parameters obtained in mono-dominance of aroeira and grazing systems, it was applied the t test for independent samples, at 5% of significance. For classification of the RapidEye image two methods of supervised classification were evaluated: the classification by the maximum likelihood algorithm and the classification by Artificial Neural Networks. We tested 19 combinations involving bands, principal components and the normalized difference of vegetation index (NDVI). The network training was carried out by trial and error. For the classification of the Landsat image, the maximum likelihood algorithm was used and tests were made with 10 combinations involving bands, principal components and NDVI. The assessment of the thematic maps that were produced was performed using the Kappa and conditional Kappa coefficients for the class of aroeira soil use. The horizontal structure and the floristic analysis of forest fragments inventoried in the city of Tumiritinga-MG prove the monodominant occurrence of M. urundeuva in the study region. The monodominance of aroeira is characterized by low diversity of species and dominance reflected in 96% of individuals that were sampled, 96% of the baseline measure and 96% of the total amount of stored wood. The chemical parameters K+, Ca2+, Mg2+, SB, T and t differed significantly between the grazing systems and aroeira monodominance, the values of all parameters in the aroeira monodominance system were superior. The physical parameters Dp, Pmic, Pt and silt content differed significantly between the grazing systems and aroeira monodominance; the values of Dp, Pmic and Ptot higher in soils under aroeira monodominance and silt content were superior in the upper pasture. The best results were found for the classification of the RapidEye image was obtained by the maximum likelihood algorithm that showed a kappa coefficient equal to 80 and 90 for conditional Kappa. For the Landsat image the Kappa and conditional Kappa coefficients for the aroeira class were respectively 80 and 76. Through the thematic maps produced it was observed that 22% of the city of Tumiritinga, 10,758 ha, is under the occupation of the aroeira in monodominance. Given the size that the settlements monodominated by aroeira occupy in the landscape, the implications of the aroeira monodominance imposes on the biodiversity in soil conservation, and in the sustainability in the local agroecosystem, it is necessary to pursue further studies in order to clarify the edaphic and ecological mechanisms involved in the maintenance and expansion of areas monodominated by aroeira. The knowledge of the conditioning processes of this system may help the development of plans for sustainable forest management; in which the combination the timber and not timber production will be able to increase the productivity and the income of farmers. / O quadro de avançada degradação ambiental na região do médio rio Doce mineiro é atribuído por diversos autores à prática da pecuária extensiva somada às interações edáficas, climáticas, geomorfológicas e antrópicas. Como agravante da degradação na região, alguns pesquisadores começar a chamam a atenção para a expansão de fragmentos monodominados pela espécie florestal aroeira (Myracrodruon urundeuva Fr. All.). Paralelo ao quadro de expansão de áreas monodominadas pela aroeira no médio Rio Doce, a espécie aparece na lista oficial de espécies da flora brasileira ameaçada de extinção na categoria vulnerável desde 1992 até o presente. Em contrapartida a Portaria Normativa n° 83 de 26 de setembro de 1991 do IBAMA, permite a exploração da espécie em florestas secundárias, mediante plano de manejo florestal. Percebe-se que a falta de conhecimento sobre os fragmentos monodominados por aroeira acarreta na insegurança dos operadores do direito no que tange a autorização de intervenção nestes ambientes, seja esta visando a recuperação de áreas degradadas ou o manejo sustentável destes fragmentos. Na busca de elucidar algumas questões sobre as áreas sob monodominância de aroeira, este trabalho teve por objetivos principais caracterizar a composição florística, a estrutura horizontal e a estrutura paramétrica de povoamentos florestais sob monodominância de Myracrodruon urundeuva em Tumiritinga-MG; avaliar a existência de correlação entre atributos químicos e físicos do solo e a expansão de povoamentos monodominados pela aroeira; avaliar o desempenho do classificador da maximaverossimilhança e do classificador de redes neurais artificiais para mapear áreas ocupadas por fragmentos de aroeira em monodominância no município de Tumiritinga-MG; e avaliar o potencial de uso de dados de sensores remotos a bordo dos satélites Landsat TM-5 e Rapideye para o mapeamento de áreas monodominadas por aroeira. Para tanto o município de Tumiritinga foi amplamente percorrido, registrando com aparelho GPS de navegação e fotografias as formas de uso do solo predominantes no município, em especial os aroeirais . Dezesseis parcelas de inventário florestal foram distribuídas ao longo do município representando a diversidade de ambientes onde os aroeirais se manifestam. Nas parcelas de inventário foram registradas as circunferências, a altura total e a identificação botânica de todos os indivíduos com CAP > 15,7 cm. A partir dos dados foram feitas as análises de estrutura horizontal, estrutura paramétrica e florística dos fragmentos monodominados por aroeira no município de Tumiritinga utilizando o software Mata Nativa 2.0. Em onze das dezesseis parcelas de inventário, três amostras indeformadas compostas de solo foram coletadas e três amostras deformadas simples de solo foram coletadas de forma aleatória dentro das parcelas. Para cada fragmento foi selecionado uma pastagem adjacente de onde foram coletadas três amostras indeformadas simples de solo e três amostras deformadas compostas de solo, totalizando 33 amostras de solo sob aroeirais e 33 amostras de solo sob pastagens. A partir das amostras de solos foram realizadas as seguintes análises químicas: pH em H2O; teores de Ca2+, Mg2+, K+, Al3+, Na+ trocáveis; P disponível; H + Al; SB; t; T; V; m; MOS e ISNa; e as seguintes análises físicas: textura, Dp, Ds, Pt, Pmic, Pmac, Ko e retenção de água na capacidade de campo (-10 kPa) no ponto de murcha permanente (-1.500 kPa) e nas tensões equivalentes de -300 kPa e -500 kPa. Para avaliar a hipótese de igualdade entre as médias dos parâmetros químicos e físicos obtidos nos sistemas de monodominância de aroeira e de pastagem, foi aplicado o teste t para amostras independentes, a 5% de significância. Para a classificação da imagem Rapideye foram avaliados dois métodos de classificação supervisionada, a classificação pelo algoritmo da maximaverossimilhança e a classificação por Redes Neurais Artificiais. Foram testadas 19 combinações envolvendo bandas, componentes principais e o índice de vegetação da diferença normalizada (NDVI). O treinamento da rede foi realizado por tentativa e erro. Para a classificação da imagem Landsat foi utilizado o algoritmo da máximaverossimilhança e foram testadas 10 combinações envolvendo bandas, componentes principais e o NDVI. A avaliação dos mapas temáticos produzidos foi realizada através dos coeficientes Kappa e Kappa condicional para a classe de uso do solo aroeira . A estrutura horizontal e a análise florística de fragmentos florestais inventariados no município de Tumiritinga MG comprovam a ocorrência monodominante da espécie florestal aroeira (Myracrodruon urundeuva Fr. All) na região de estudo. A monodominância de aroeira é caracterizada por baixa diversidade de espécies e dominância refletida em 96% dos indivíduos amostrados, 96% da área basal medida e 96% do volume total de madeira estocado. Os parâmetros químicos K+, Ca2+, Mg2+, SB, T e t diferiram significativamente entre os sistemas pastagem e monodominância de aroeira, sendo os valores de todos os parâmetros superiores no sistema monodominância de aroeira. Os parâmetros físicos Dp, Pmic, Pt e teor de silte diferiram significativamente entre os sistemas pastagem e monodominância de aroeira, sendo os valores de Dp, Pmic e Ptot maiores em solos sob monodominância de aroeira e o teor de silte superior nas pastagens. O melhor resultado encontrado para a classificação da imagem Rapideye foi obtido pelo algoritmo da maximaverossimilhança que apresentou coeficiente Kappa igual a 80 e Kappa condicional 90. Para a imagem Landsat os coeficientes Kappa e Kappa condicional para a classe Aroeira foram respectivamente 80 e 76. Através dos mapas temáticos produzidos observou-se que 22% do município de Tumiritinga, 10.6758 ha, se encontra sob ocupação da aroeira em monodominância. Dado a dimensão que os povoamentos monodominados por aroeira ocupam na paisagem, as implicações que a monodominância da aroeira impõe sobre a biodiversidade, sob a conservação dos solos, e sob a sustentabilidade dos agroecossistemas locais, fazem-se necessários estudos complementares que busquem esclarecer os mecanismos edáficos e ecológicos envolvidos na manutenção e expansão das áreas monodominadas por aroeira. O conhecimento dos processos condicionantes deste sistema poderá subsidiar a elaboração de planos de manejo florestal sustentável que, conciliando a produção madeireira e não madeireira sejam capazes de aumentar a produtividade e a renda do produtor rural.
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Caracterização do extrato de aroeira (Myracrodruon urundeuva) e seu efeito sobre a viabilidade de fibroblastos gengivais humanosAlessandra Cury Machado 29 August 2013 (has links)
A aroeira (Myracrodruon urundeuva) é uma árvore cujas folhas vem sendo estudadas com fins terapêuticos na medicina e odontologia por apresentar potencial antiinflamatório e antimicrobiano, além de favorecer o processo de reparo e cicatrização. O objetivo do trabalho foi caracterizar quimicamente o extrato de aroeira e avaliar seu efeito sobre fibroblastos gengivais humanos. Foi realizado a caracterização química da aroeira por meio do processo de triagem cromatográfica que consistiu na coleta das folhas sadias, maceração em metanol (MeOH) 80%, partição entre os solventes hexano, acetato de etila (AcOEt) e n-butanol (n-(BuOH)) Em seguida, realizaram-se análises dos compostos químicos em cromatografia liquida de alta eficiência acoplado a detector de arranjo de fotodiodo HPLC-PAD, análises por espectrometria de massas MS e cromatografia liquida acoplada a espectrometria de massas (LC-MS). Posteriormente foi realizada a análise de citotoxicidade do extrato hidroalcoólico de aroeira em fibroblastos gengivais humanos (linhagem FGH). Para a realização dos experimentos foram plaqueadas 2x103 células/poço em placas de 96 poços. O meio de cultivo foi substituído por meio de cultura de Eagle modificado por Dullbecco complementado por 10% soro fetal bovino (SFB) em diferentes concentrações do extrato hidroalcoólico de aroeira (extrato bruto; 1:10; 1:100; 1:1000; 1:10000 e controle). As análises de viabilidade foram feitas nos tempos experimentais de 24, 48, 72 e 96 horas, por meio dos testes de redução do MTT (brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difeniltetrazólio), captação do vermelho neutro e coloração pelo cristal violeta. A estatística foi realizada em análise de variância de 2 critérios seguido de uma análise de teste Tukey (p<0,05). Os compostos encontrados no extrato foram os derivados de ácido gálico, galotaninos, além de flavonoides. Para a redução do MTT os resultados mostraram uma ligeira oscilação da absorbância em todos os grupos nos períodos experimentais. Destaque para as diluições de 1:100, 1:1000 e 1:10000 que apresentaram, em geral para todos os períodos, os maiores valores; enquanto os grupos de extrato bruto e diluição 1:10 apresentaram valores inferiores aos outros grupos (p<0,05). Na análise da captação do vermelho neutro também houve uma leve oscilação dos valores de absorbância, no entanto os valores obtidos para o grupo do extrato bruto foram os menores em todos os períodos estudados (p<0,05). Enquanto os grupos controle e de diluições de 1:100, 1:1000 e 1:10000 apresentaram valores semelhantes sem diferença significante (p>0,05). Para o teste do cristal violeta, os resultados encontrados seguiram o mesmo padrão do vermelho neutro: valores de absorbância menores nos grupos do extrato bruto e 1:10, ao contrário dos outros grupos que apresentaram valores maiores (p<0,05). Em vista dos resultados, podemos concluir que o extrato metanólico de aroeira apresenta em sua composição taninos, flavonóides e derivados de ácido gálico e de galotaninos. Além disso, o extrato de aroeira é capaz de modular a viabilidade de fibroblastos gengivais humanos de maneira dose-dependente. / Aroeira (M. urundeuva) is a tree whose leaves have been studied with therapeutic purpose in dentistry and medicine, due it antimicrobial and antinflamatory potencial protect, besides the repair and cicatrization processes. The aim of the study was characterize the aroeiras extract and evaluate effect over human gingival fibroblast. The aroeiras characterization was realized by means of chromatography screenuy, process that consists in healthy leaves maceration in 80% MeOH, partition in the BuOH, AcOEt and hexanes solvents. Next, the chemicals compounds were analysed in High Performance Liquide Chromatography-Photo Diode Array (HPLC-PAD), Liquide Chromatography Mass Spectrometry (LCMS) and Mass Spectrometry (MSs). Subsequently was realized the citotoxicitys analysis from the aroeira hidroalcooholic extract in human gingival fibroblast (FGH lineage). For the experiments realization was platted 2x103 cels/well in 96 wells plate. The cultives mean was substituted for Eagles means culture changed for complemented Dullbeco for 10% bovine fetal serum in aroeiras hidroalcooholic extracts concentrations different (brute extract, 1:10, 1:100, 1:1000, 1:10000). The viability analysis was carried out in experimental times 24, 48, 72 and 96 hours, by means of MTT reductions test (brometo3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difeniltetrazolio), neutral red captation and violet crystal). The statistics were performed for analysis of variance in 2 criteria continue with a Tukey test analysis (p<0.05). The founded compounds in the extract was the galic acid, gallotanine linked to glucose, besides flavonoids. For the MTTs reduction the results display an absorbance oscillation lightness in all the groups in experimental periods. Distinction for the control group and 1:100, 1:1000 and 1:10000 dilution, that present, by and large, for all the periods, the biggest valuable, while the brute extract group and 1:10 dilution present valuable lower to the others groups (p<0.05). In neutral red is caption analysis there was an absorbants values light oscillation too, despite this, the gotten values for the brute extracts group was smaller in all the studied periods (p<0.05). While the control group and the 1:100, 1:1000 and 1:10000 dilution presented similar values without significant difference (p>0.05). In view of the results, conclude the aroeiras methanolic extract present in your composition flavonoids and gallotanine, and galic acid derivates. Then, the aroeiras extracts is able to human gingival fibroblasts viable modulate dependent dose way.
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Efeito do extrato de aroeira no processo de proliferação e mineralização de osteoblastos in vitro / Effect of aroira extract in the process of proliferation and mineralization of osteoblasts in vitroMatos, Adriana Arruda 30 August 2013 (has links)
Em virtude do uso indiscriminado de antimicrobianos, a resistência de microrganismos patogênicos à diversas drogas tem aumentado nos últimos anos. Essa situação tem forçado pesquisadores a procurarem por novas drogas, tais como os medicamentos fitoterápicos que são preparações farmacêuticas (extratos, tinturas, pomadas e cápsulas) de ervas medicinais, utilizadas para o tratamento de inúmeras doenças. Uma das espécies brasileiras do cerrado que tem despertado o interesse de várias áreas é a aroeira (Myracrodruon urundeuva), por apresentar ação antiinflamatória, antiproliferativa, antioxidante e antimicrobiana. Dessa maneira o objetivo deste trabalho foi de avaliar o efeito do extrato hidroalcoólico de aroeira na viabilidade celular dos osteoblastos humanos e analisar a influência do extrato hidroalcoólico de aroeira na expressão de metaloproteinase de matriz 2 (MMP-2) e anquilose progressiva humana (ANKH). Nesse estudo foram utilizados osteoblastos humanos cultivados em Meio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) adicionado de 10% de soro fetal bovino (SFB). Após atingirem a subconfluência as células foram plaqueadas e tratadas com diferentes concentrações do extrato hidroalcoólico de aroeira (Extrato Bruto; 1:10; 1:100; 1:1.000; 1:10.000). Após 24, 48, 72, 96 horas foi realizada a análise da viabilidade celular por meio da redução do MTT (brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5- difeniltetrazólio), captação do vermelho neutro e cristal violeta. Também foi feita a redução do MTT após 7, 14, 21 e 28 dias de tratamento com o extrato, para verificar se as células permaneciam viáveis nesses períodos. A análise da expressão gênica de MMP-2 e ANKH foi realizada pelo RT-PCR em tempo real nos períodos de 24, 48, 72 horas, 7, 14, 21 e 28 dias. Os ensaio de viabilidade celular (redução do MTT, captação do vermelho e cristal violeta) mostraram que houve o aumento da viabilidade celular nos grupos tratados com o extrato a 1:10.000; e a diminuição da viabilidade dos osteoblastos humanos nos grupos com extrato bruto e com 1:10. Com relação à expressão de MMP-2 e ANKH, os resultados mostraram que o extrato promoveu uma modulação da expressão desses genes no decorrer dos períodos em comparação com o grupo controle. De um modo geral o extrato, em maiores concentrações (1:100), inibiu a expressão de MMP-2 e aumentou a expressão de ANKH. Tendo em vista os resultados obtidos concluímos que o extrato hidroalcoólico de aroeira em altas concentrações promove redução e/ou morte celular dos osteoblastos humanos e ainda modulam a expressão de MMP-2 e ANKH. / Due to the indiscriminate use of antimicrobial, the resistance of pathogenic microorganisms to various drugs has increased in recent years. This situation has forced researchers to search for new drugs, such as herbal medicines that are pharmaceutical preparations (extracts, tinctures, ointments and capsules) medicinal herb, used for the treatment of numerous diseases. One species of the Brazil that has aroused interest in many areas is the aroeira (Myracrodruon urundeuva) because of its anti-inflammatory, antiproliferative, antioxidant and antimicrobial. Thus the aim of this work was to evaluate the effect of hydroalcoholic extract of aroeira on cell viability of human osteoblasts and to analyze extract on the expression of matrix metalloproteinase 2 (MMP-2) and human progressive ankylosis (ANKH) . In this study, we used human osteoblasts cultured in Eagle\'s medium modified by Dulbecco (DMEM) supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS). After reaching subconfluence cells were plated and treated with different concentrations of the aroeira extract hydroalcoholic (brute extract , 1:10, 1:100, 1:1.000, 1:10:000). After 24, 48, 72 and 96 hours analysis was performed of cell viability by the reduction of MTT (3 - (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5 - diphenyltetrazolium bromide) uptake of neutral red and crystal violet. It was also made MTT reduction after 7, 14, 21 and 28 days of treatment with the extract, to check if the cells remained viable during these periods. The analysis of the gene expression of MMP-2 and ANKH was performed by Real Time RT-PCR in periods of 24, 48 hours, 72 hours, 7, 14, 21 and 28 days. The cell viability assay (MTT reduction, uptake of neutral red and crystal violet) showed that there was a tendency of increased cell viability in the groups treated with the extract 1:10.000, and decreased viability of human osteoblast cells in groups with brute extract and 1:10. With respect to expression of MMP-2 and ANKH, the results showed that the extract promoted a modulation of expression of these genes during the periods, compared to the control group. Generally extract at higher concentrations (1:100) both inhibited the expression of MMP-2 and increased rhe expression of ANKH. Given the results we conclude that the hydroalcoholic extract of aroeira in high concentrations causes a reduction and / or cell death of human osteoblasts and also modulate the expressio of MMP-2 and ANKH.
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Concentração inibitória mínima e concentração bactericida mínima de extratos hidroalcoólicos das folhas de Myracrodruon urundeuva All. e Qualea grandiflora Mart. sobre Streptococcus mutans e Lactobacillus casei / Minimum inhibitory concentration and minimum bactericidal concentration of hydroalcoholic extracts of Myracrodruon urundeuva All. and Qualea grandiflora Mart. leaves on Streptococcus mutans and Lactobacillus caseiFabris, Rita de Cassia 11 August 2017 (has links)
A cárie dentária é uma doença bucal de alta prevalência e impactante em países em desenvolvimento. É causada pela presença de biofilme dentário rico em bactérias acidogênicas e acidúricas, como Streptococcus mutans e Lactobacillus casei. Neste sentido, a fitoterapia tem sido aplicada na odontologia devido ao seu conhecido efeito antimicrobiano, tendo potencial para prevenir doenças como a cárie dentária. Portanto, o presente estudo tem como objetivo testar o potencial antimicrobiano de extratos bruto e etanólico das folhas de Myracrodruon urundeuva (M. urundeuva.) e Qualea grandiflora (Q. grandiflora) sobre S.mutans e L. casei. Para tal, determinaram-se a Concentração Inibitória Mínima (CIM) e a Concentração Bactericida Mínima (CBM). A CIM foi definida como a menor concentração do agente antimicrobiano capaz de inibir 100% o crescimento microbiano (absorbância) em relação aos controles negativos. Para a CBM, alíquotas foram removidas dos poços que não apresentaram nenhuma absorbância (viabilidade, concentrações CIM) e semeadas em placas de ágar BHI, incubadas por 24 h a 37°C em estufa de CO2 5%. A CBM foi determinada considerando a menor concentração dos extratos capaz de impedir o crescimento bacteriano visível. Cepas de S. mutans (ATCC 21175) e L. casei (ATTC 334) foram ativadas em BHI e caldo Rogosa, respectivamente. A CIM foi determinada pela técnica de diluição em microplacas de 96 poços (100 l de extrato + 80 l BHI/Rogosa + 20 l da bactéria diluída em BHI/Rogosa equivalente a 5x105 UFC/mL), as quais foram incubadas por 24 h (S. mutans) e 48 h (L. casei) a 37°C em estufa de CO2 5%. Os extratos de M. urundeuva e Q. grandiflora inicialmente foram diluídos em BHI/Rogosa variando as concentrações entre 2 mg/ml a 0,00012207 mg/ml e os mesmos extratos diluídos em álcool foram avaliados nas concentrações entre 20 mg/ml a 0,00244 mg/ml para S. mutans e L. casei. Não foi possível determinar a CIM e a CBM para os extratos diluídos no BHI/Rogosa. Foram utilizados como controle positivo a clorexidina e como controles negativos BHI/Rogosa com e sem álcool a 5%. As CIMs (CBMs) da M. urundeuva e Q. grandiflora, diluídas em álcool, e clorexidina contra S. mutans foram 2,5 mg/ml (2,5 mg/ml), 5,0 mg/ml (--) e 0,00468 mg/ml (0,00937 mg/ml), respectivamente. Em relação ao L. casei, as CIMs (CBMs) da M. urundeuva e Q. grandiflora, diluídas em álcool, e da clorexidina foram 0,156 mg/ml (0,312 mg/ml), 0,156 0,625 mg/ml (0,312 0,625mg/ml) e 0,00468 mg/ml (0,3 mg/ml), respectivamente. Como conclusão, nosso estudo mostrou que L. casei (ATTC 334) é mais susceptível aos extratos que S. mutans (ATCC 21175) e o extrato M. urundeuva apresenta melhor efeito antimicrobiano que a Q. grandiflora em S. mutans (ATCC 21175), porém os dois extratos apresentam efeito similar sobre L. casei (ATTC 334) e ambos foram inferiores à CHX. / Dental caries is an oral disease of high prevalence and impact in developing countries. It is caused by the presence of a dental biofilm rich in acidogenic and aciduric bacteria, such as Streptococcus mutans and Lactobacillus casei. Accordingly, phytotherapy has been applied in dentistry due to its known antimicrobial effect, having potential to prevent diseases such as dental caries. Therefore, the present study aims to test the antimicrobial potential of crude and ethanolic extracts of Myracrodruon urundeuva (M. urundeuva) and Qualea grandiflora (Q. grandiflora) leaves on S. mutans and L. casei. For this, the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (MBC) were determined. MIC was defined as the lowest concentration of the antimicrobial agent capable of inhibiting 100% the microbial growth in comparison to the negative controls. For MBC, aliquots were removed from the wells that did not show any absorbance (viability, concentrations than MIC) and seeded on BHI agar plates, incubated for 24 h at 37°C and 5% CO2. The MBC was determined considering the lowest concentration of extracts capable of preventing visible bacterial growth. Strains of S. mutans (ATCC 21175) and L. casei (ATTC 334) were activated in BHI and Rogosa broth. MIC was determined by the dilution technique in 96-wells microplates (100 l of extract + 80 l BHI/ Rogosa + 20 l of bacterium diluted in BHI/Rogosa equivalent to 5x105 CFU/ml), which were incubated for 24 h (S. mutans) and 48 h (L. casei) at 37°C and 5% CO2. The extracts were firstly diluted in BHI/Rogosa varying the concentrations between 2 mg/mL and 0.00012207 mg/ml; the same extracts were also diluted in alcohol at concentrations ranging from 20 mg/ml to 0.00244 mg/ml and both tested against S. mutans and L. casei. It was not possible to determine the MIC and MBC for the extracts diluted in BHI/Rogosa. Chlorhexidine was used as positive control, while BHI/Rogosa with or without 5% alcohol were used as negative controls. The MICs (MBCs) of M. urundeuva and Q. grandiflora diluted in alcohol, and clorexidine against S. mutans were 2.5 mg/ml (2.5 mg/ml), 5.0 mg/ml (--) and 0.00468 mg/ml (0.00937 mg/ml), respectively. In respect to L. casei, the MICs (MBCs) of M. urundeuva and Q. grandiflora, diluted in alcohol, and chlorhexidine were 0.156 mg/ml (0.312 mg/ml), 0.156 0.625 mg/ml (0.312 0.625 mg/ml) and 0.00468 mg/ml (0.3 mg/ml), respectively. In conclusion, our study showed that L. casei (ATTC 334) is more susceptible than S. mutans (ATCC 21175) to the extracts and the extract of M. urundeuva has a better antimicrobial effect than Q. grandiflora against S. mutans (ATCC 21175), but both extracts have similar effect on L. casei (ATTC 334) and they were inferior to CHX.
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Concentração inibitória mínima e concentração bactericida mínima de extratos hidroalcoólicos das folhas de Myracrodruon urundeuva All. e Qualea grandiflora Mart. sobre Streptococcus mutans e Lactobacillus casei / Minimum inhibitory concentration and minimum bactericidal concentration of hydroalcoholic extracts of Myracrodruon urundeuva All. and Qualea grandiflora Mart. leaves on Streptococcus mutans and Lactobacillus caseiRita de Cassia Fabris 11 August 2017 (has links)
A cárie dentária é uma doença bucal de alta prevalência e impactante em países em desenvolvimento. É causada pela presença de biofilme dentário rico em bactérias acidogênicas e acidúricas, como Streptococcus mutans e Lactobacillus casei. Neste sentido, a fitoterapia tem sido aplicada na odontologia devido ao seu conhecido efeito antimicrobiano, tendo potencial para prevenir doenças como a cárie dentária. Portanto, o presente estudo tem como objetivo testar o potencial antimicrobiano de extratos bruto e etanólico das folhas de Myracrodruon urundeuva (M. urundeuva.) e Qualea grandiflora (Q. grandiflora) sobre S.mutans e L. casei. Para tal, determinaram-se a Concentração Inibitória Mínima (CIM) e a Concentração Bactericida Mínima (CBM). A CIM foi definida como a menor concentração do agente antimicrobiano capaz de inibir 100% o crescimento microbiano (absorbância) em relação aos controles negativos. Para a CBM, alíquotas foram removidas dos poços que não apresentaram nenhuma absorbância (viabilidade, concentrações CIM) e semeadas em placas de ágar BHI, incubadas por 24 h a 37°C em estufa de CO2 5%. A CBM foi determinada considerando a menor concentração dos extratos capaz de impedir o crescimento bacteriano visível. Cepas de S. mutans (ATCC 21175) e L. casei (ATTC 334) foram ativadas em BHI e caldo Rogosa, respectivamente. A CIM foi determinada pela técnica de diluição em microplacas de 96 poços (100 l de extrato + 80 l BHI/Rogosa + 20 l da bactéria diluída em BHI/Rogosa equivalente a 5x105 UFC/mL), as quais foram incubadas por 24 h (S. mutans) e 48 h (L. casei) a 37°C em estufa de CO2 5%. Os extratos de M. urundeuva e Q. grandiflora inicialmente foram diluídos em BHI/Rogosa variando as concentrações entre 2 mg/ml a 0,00012207 mg/ml e os mesmos extratos diluídos em álcool foram avaliados nas concentrações entre 20 mg/ml a 0,00244 mg/ml para S. mutans e L. casei. Não foi possível determinar a CIM e a CBM para os extratos diluídos no BHI/Rogosa. Foram utilizados como controle positivo a clorexidina e como controles negativos BHI/Rogosa com e sem álcool a 5%. As CIMs (CBMs) da M. urundeuva e Q. grandiflora, diluídas em álcool, e clorexidina contra S. mutans foram 2,5 mg/ml (2,5 mg/ml), 5,0 mg/ml (--) e 0,00468 mg/ml (0,00937 mg/ml), respectivamente. Em relação ao L. casei, as CIMs (CBMs) da M. urundeuva e Q. grandiflora, diluídas em álcool, e da clorexidina foram 0,156 mg/ml (0,312 mg/ml), 0,156 0,625 mg/ml (0,312 0,625mg/ml) e 0,00468 mg/ml (0,3 mg/ml), respectivamente. Como conclusão, nosso estudo mostrou que L. casei (ATTC 334) é mais susceptível aos extratos que S. mutans (ATCC 21175) e o extrato M. urundeuva apresenta melhor efeito antimicrobiano que a Q. grandiflora em S. mutans (ATCC 21175), porém os dois extratos apresentam efeito similar sobre L. casei (ATTC 334) e ambos foram inferiores à CHX. / Dental caries is an oral disease of high prevalence and impact in developing countries. It is caused by the presence of a dental biofilm rich in acidogenic and aciduric bacteria, such as Streptococcus mutans and Lactobacillus casei. Accordingly, phytotherapy has been applied in dentistry due to its known antimicrobial effect, having potential to prevent diseases such as dental caries. Therefore, the present study aims to test the antimicrobial potential of crude and ethanolic extracts of Myracrodruon urundeuva (M. urundeuva) and Qualea grandiflora (Q. grandiflora) leaves on S. mutans and L. casei. For this, the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (MBC) were determined. MIC was defined as the lowest concentration of the antimicrobial agent capable of inhibiting 100% the microbial growth in comparison to the negative controls. For MBC, aliquots were removed from the wells that did not show any absorbance (viability, concentrations than MIC) and seeded on BHI agar plates, incubated for 24 h at 37°C and 5% CO2. The MBC was determined considering the lowest concentration of extracts capable of preventing visible bacterial growth. Strains of S. mutans (ATCC 21175) and L. casei (ATTC 334) were activated in BHI and Rogosa broth. MIC was determined by the dilution technique in 96-wells microplates (100 l of extract + 80 l BHI/ Rogosa + 20 l of bacterium diluted in BHI/Rogosa equivalent to 5x105 CFU/ml), which were incubated for 24 h (S. mutans) and 48 h (L. casei) at 37°C and 5% CO2. The extracts were firstly diluted in BHI/Rogosa varying the concentrations between 2 mg/mL and 0.00012207 mg/ml; the same extracts were also diluted in alcohol at concentrations ranging from 20 mg/ml to 0.00244 mg/ml and both tested against S. mutans and L. casei. It was not possible to determine the MIC and MBC for the extracts diluted in BHI/Rogosa. Chlorhexidine was used as positive control, while BHI/Rogosa with or without 5% alcohol were used as negative controls. The MICs (MBCs) of M. urundeuva and Q. grandiflora diluted in alcohol, and clorexidine against S. mutans were 2.5 mg/ml (2.5 mg/ml), 5.0 mg/ml (--) and 0.00468 mg/ml (0.00937 mg/ml), respectively. In respect to L. casei, the MICs (MBCs) of M. urundeuva and Q. grandiflora, diluted in alcohol, and chlorhexidine were 0.156 mg/ml (0.312 mg/ml), 0.156 0.625 mg/ml (0.312 0.625 mg/ml) and 0.00468 mg/ml (0.3 mg/ml), respectively. In conclusion, our study showed that L. casei (ATTC 334) is more susceptible than S. mutans (ATCC 21175) to the extracts and the extract of M. urundeuva has a better antimicrobial effect than Q. grandiflora against S. mutans (ATCC 21175), but both extracts have similar effect on L. casei (ATTC 334) and they were inferior to CHX.
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