Orientador: Norma Sueli Pinheiro Módolo / Resumo: A nefropatia diabética é fator de risco para aumento da morbimortalidade em pessoas submetidas à cirurgia. A investigação por tratamentos capazes de exercer proteção renal durante procedimentos anestésico- cirúrgicos tornam-se relevantes. Este estudo avaliou a glicemia, a variação ponderal, a concentração sanguínea de ureia e creatinina, a proteinúria, a microscopia eletrônica dos rins com e sem isquemia e reperfusão, e a proteção renal de ratos Wistar com nefropatia diabética experimental, tratados previamente com a infusão dos frutos da Momordica charantia L.. Utilizamos 26 ratos Wistar, divididos em: Grupo Controle (n=10); Grupo Diabético sem tratamento (n=8) e Grupo Diabético tratados com Momordica charanthia L. (n=8). A determinação da glicemia de ambos os grupos foi feita com glicosimetro e o peso foi mensurado em balança digital no 1º, 15º e 30º dia do experimento. A dosagem da proteinúria foi feita em urina de 24 horas. Previamente a eutanásia, foi realizada a manobra da isquemia por 30 minutos, seguida da reperfusão por 15 minutos, no rim esquerdo, simulando a lesão renal ocorrida em cirurgias. Os rins isquêmicos e não isquêmicos foram encaminhados para microscopia eletrônica. A obtenção do sangue para dosagem de ureia e creatinina foi feita por punção cardíaca. Os resultados obtidos evidenciaram redução significativa da glicemia (p<0,001- Teste Friedman p<0,05) no 15ª dia, nos animais diabéticos tratados com a planta, Não foi evidenciada alterações significativas no... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Diabetic nephropathy is a risk factor for increased morbidity and mortality in people undergoing surgery. The investigation of treatments capable of exerting renal protection during anesthetic-surgical procedures becomes relevant. Diabetic nephropathy is a risk factor for increased morbidity and mortality in people undergoing surgery. The investigation of treatments capable of exerting renal protection during anesthetic-surgical procedures becomes relevant. This study evaluated glycemia, weight variation, blood urea and creatinine concentration, proteinuria, electron microscopy of the kidneys with and without ischemia and reperfusion, and renal protection of Wistar rats with experimental diabetic nephropathy, previously treated with the infusion of the fruits of Momordica charantia L. We used 26 Wistar rats, divided into: Control Group (n = 10); Untreated Diabetic Group (n = 8) and Diabetic Group treated with Momordica charanthia L. (n = 8). The determination of glycemia was done with glycosimetre and the weight was measured in digital scale on the 1st, 15th and 30th day of experimentation. The proteinuria was measured in 24-hour urine. Before euthanasia, the maneuver of the ischemia was performed for 30 minutes, followed by reperfusion for 15 minutes in the left kidney, simulating the renal injury that occurred in surgeries. The ischemic and non-ischemic kidneys were referred for electron microscopy. The blood obtained for urea and creatinine dosing was done by cardiac punct... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Submitted by Marcia Clelia Leite Marcellino (marcia.clelia@terra.com.br) on 2018-06-11T02:33:02Z No. of bitstreams: 1 TESE IMPRESSÃO.pdf: 1297621 bytes, checksum: 72d61d4f45d3f68457e648dba38bd91f (MD5) / Approved for entry into archive by ROSANGELA APARECIDA LOBO null (rosangelalobo@btu.unesp.br) on 2018-06-13T16:42:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 marcellino_mcl_dr_bot.pdf: 1297621 bytes, checksum: 72d61d4f45d3f68457e648dba38bd91f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-13T16:42:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 marcellino_mcl_dr_bot.pdf: 1297621 bytes, checksum: 72d61d4f45d3f68457e648dba38bd91f (MD5) Previous issue date: 2018-03-29 / A nefropatia diabética é fator de risco para aumento da morbimortalidade em pessoas submetidas à cirurgia. A investigação por tratamentos capazes de exercer proteção renal durante procedimentos anestésico- cirúrgicos tornam-se relevantes. Este estudo avaliou a glicemia, a variação ponderal, a concentração sanguínea de ureia e creatinina, a proteinúria, a microscopia eletrônica dos rins com e sem isquemia e reperfusão, e a proteção renal de ratos Wistar com nefropatia diabética experimental, tratados previamente com a infusão dos frutos da Momordica charantia L.. Utilizamos 26 ratos Wistar, divididos em: Grupo Controle (n=10); Grupo Diabético sem tratamento (n=8) e Grupo Diabético tratados com Momordica charanthia L. (n=8). A determinação da glicemia de ambos os grupos foi feita com glicosimetro e o peso foi mensurado em balança digital no 1º, 15º e 30º dia do experimento. A dosagem da proteinúria foi feita em urina de 24 horas. Previamente a eutanásia, foi realizada a manobra da isquemia por 30 minutos, seguida da reperfusão por 15 minutos, no rim esquerdo, simulando a lesão renal ocorrida em cirurgias. Os rins isquêmicos e não isquêmicos foram encaminhados para microscopia eletrônica. A obtenção do sangue para dosagem de ureia e creatinina foi feita por punção cardíaca. Os resultados obtidos evidenciaram redução significativa da glicemia (p<0,001- Teste Friedman p<0,05) no 15ª dia, nos animais diabéticos tratados com a planta, Não foi evidenciada alterações significativas no peso dos animais. A Momordica charantia L. reduziu significativamente a concentração de creatinina (p=0,022 – Teste T-Student p<0,05) e a proteinúria (p<0,001 – Teste T-Student p<0,05), mas não interferiu na uremia dos animais diabéticos. Na microscopia eletrônica evidenciou-se nos rins isquêmicos e não isquêmicos do grupo diabético tratado, a preservação da membrana basal, podócitos e pedicelos. Estas estruturas foram lesionadas no grupo diabético sem tratamento. Conclui-se que a Momordica charantia L. mostrou-se eficaz na redução da glicemia, no 15º dia de experimentação; reduziu a creatinina e a proteinúria em relação ao grupo diabético sem tratamento e preservou a integridade de estruturas glomerulares, sugerindo renoproteção frente à hiperglicemia persistente e a manobra de isquemia e reperfusão renal. / Diabetic nephropathy is a risk factor for increased morbidity and mortality in people undergoing surgery. The investigation of treatments capable of exerting renal protection during anesthetic-surgical procedures becomes relevant. Diabetic nephropathy is a risk factor for increased morbidity and mortality in people undergoing surgery. The investigation of treatments capable of exerting renal protection during anesthetic-surgical procedures becomes relevant. This study evaluated glycemia, weight variation, blood urea and creatinine concentration, proteinuria, electron microscopy of the kidneys with and without ischemia and reperfusion, and renal protection of Wistar rats with experimental diabetic nephropathy, previously treated with the infusion of the fruits of Momordica charantia L. We used 26 Wistar rats, divided into: Control Group (n = 10); Untreated Diabetic Group (n = 8) and Diabetic Group treated with Momordica charanthia L. (n = 8). The determination of glycemia was done with glycosimetre and the weight was measured in digital scale on the 1st, 15th and 30th day of experimentation. The proteinuria was measured in 24-hour urine. Before euthanasia, the maneuver of the ischemia was performed for 30 minutes, followed by reperfusion for 15 minutes in the left kidney, simulating the renal injury that occurred in surgeries. The ischemic and non-ischemic kidneys were referred for electron microscopy. The blood obtained for urea and creatinine dosing was done by cardiac puncture. The results obtained evidenced a significant reduction of glycemia (p <0.001 Friedman test p <0.05) on the 15th day, in the diabetic animals treated with the plant. No significant changes were observed in the weight of the animals. Momordica charantia L. significantly reduced creatinine concentration (p = 0.022 - Student's T-test p <0.05) and proteinuria (p <0.001 - Student's T-test p <0.05) but did not interfere with uremia of diabetic animals. Electron microscopy revealed preservation of the basement membrane, podocytes and pedicels in the ischemic and non-ischemic kidneys of the treated diabetic group. These structures were injured in the diabetic group without treatment. It was concluded that Momordica charantia L. was effective in the reduction of glycemia, on the 15th day of experimentation; reduced creatinine and proteinuria in relation to the untreated diabetic group and preserved the integrity of glomerular structures, suggesting renoprotection against persistent hyperglycemia and renal ischemia and reperfusion maneuver.

A hiperglicemia é um fator de risco na progressão da ND, que associada à atividade do SRA sistêmico e/ou intrarrenal e à síntese de ET1, resulta em perda da função renal. Objetivo: Investigar o papel da hiperglicemia e a relação com a síntese de Ang II e ET-1 no tecido renal no início da ND. Métodos: Ratos Wistar foram organizados em controle; diabéticos via STZ; tratados com losartan e outros com BQ123. Foram avaliados os parâmetros metabólicos e de função renal. Resultados: O losartan preveniu o efeito da STZ na expressão de renina medular, injúria tubular, expressão de desmina e de RNAm para TNF&#945; e Nox4. O BQ123 não alterou o efeito da STZ em nenhum dos parâmetros estudados. Conclusão: A hiperglicemia tem predominância na injúria renal nos primeiros estágios da ND. Nessa condição, a Ang II sistêmica e/ou intrarrenal via receptor AT1 amplia os efeitos da hiperglicemia nos eventos iniciais da ND. / Hyperglycemia and a risk factor in the progression of ND, which associated with the RAS activity of systemic and/or intrarrenal and the synthesis of ET-1, results in loss of renal function. Aim: To investigate the role of hyperglycemia and a relationship with a synthesis of Ang II and ET-1 in the renal tissue at the beginning of DN. Methods: Wistar rats were organized in control; Diabetics via STZ; Treated with losartan and others with BQ123. Metabolic and renal function parameters were evaluated. Results: Losartan prevented the effect of STZ on the expression of medullary renin, tubular injury, desmin and mRNA expression for TNF&#945; and Nox4. BQ123 did not alter the STZ effect in any of the parameters studied. Conclusion: Hyperglycemia has a predominance of renal injury in the early stages of ND. In this condition, Ang II systemic and/or intrarenal via the AT1 receptor amplifies the effects of hyperglycemia in the initial events of ND.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-01-05T13:05:00Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_VitaminadNefropatiaPacientes.pdf: 1064672 bytes, checksum: 41137c7bf50ba5aeff31fdf009874a1d (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-01-10T11:53:22Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_VitaminadNefropatiaPacientes.pdf: 1064672 bytes, checksum: 41137c7bf50ba5aeff31fdf009874a1d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-10T11:53:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_VitaminadNefropatiaPacientes.pdf: 1064672 bytes, checksum: 41137c7bf50ba5aeff31fdf009874a1d (MD5) Previous issue date: 2015-10-06 / O Diabetes Mellitus tipo 1 (DM1) resulta da destruição das células beta pancreáticas por um processo imunológico, podendo evoluir com complicações renais. Tanto fatores genéticos como ambientais estão envolvidos na patogenia do DM1, e a deficiência de vitamina D surge como uma candidata dentre os fatores de risco para desenvolvimento tanto do diabetes, quanto da nefropatia diabética. O objetivo deste estudo foi avaliar a existência de uma associação entre níveis reduzidos de vitamina D, com a presença e o grau de nefropatia diabética em pacientes com DM1. Adicionalmente, nosso estudo visou estabelecer a prevalência de hipovitaminose D em controles da nossa região, e determinar se esta difere dos pacientes com DM1. Realizou-se um estudo transversal, entre novembro de 2013 e dezembro de 2014, no qual foram analisados os níveis de 25-hidroxivitama D ou calcidiol [25(OH)D] e albuminúria em 37 pacientes com DM1 e níveis de creatinina normais, e em 36 indivíduos controles. Os pacientes com DM1 e hipovitaminose D apresentaram níveis de albuminúria mais elevados quando comparados com aqueles com níveis normais de vitamina D (log10 albuminúria = 1,92 versus 1,44; p < 0,05). Quando separamos o grupo com DM1 de acordo com o estágio da nefropatia diabética em pacientes com normoalbuminúria, microalbuminúria e macroalbuminúria, encontramos níveis menores de 25(OH)D nos últimos, quando comparados aos dois primeiros (26,7 ± 6,2; 24,8 ± 7 e 15,9 ± 7,6 ng/mL; p < 0,05, respectivamente). Ainda no grupo com DM1, encontramos correlações entre os níveis de vitamina D com os níveis de albuminúria e com os estágios de nefropatia diabética (r = -0,5; p < 0,01 e r = -0,4; p < 0,05, respectivamente). Adicionalmente, a prevalência de hipovitaminose D entre os indivíduos controles foi bastante elevada (78%), e não houve diferença em relação aos pacientes com DM1, cuja prevalência foi de 73%. Os pacientes com DM1, quando comparados ao grupo controle, também não apresentaram diferença entre os níveis médios de 25(OH)D (24,2 ± 7,4 versus 25,8 ± 11,2 ng/mL, NS). Nossos dados sugerem uma associação entre níveis reduzidos de vitamina D e a presença e gravidade da nefropatia diabética. Adicionalmente, os pacientes com diabetes mellitus tipo 1, quando comparados aos indivíduos controles normais em nossa região, não diferiram nos níveis médios e no status dos níveis de 25(OH)D. / Diabetes Mellitus type 1 (DM1) results from destruction of the pancreatic beta cells by an immunological process, which may progress to kidney complications. Both genetic and environmental factors are involved in the pathogenesis of type 1 diabetes, and vitamin D deficiency appears as a candidate among the risk factors for developing both diabetes and diabetic nephropathy. The objective of this study was to evaluate the existence of an association between low levels of vitamin D with the presence and degree of diabetic nephropathy in patients with type 1 diabetes. Additionally, our study aimed to establish the prevalence of vitamin D deficiency in normal individuals of our region and determine if it differs from DM1 patients. A cross-sectional study, between November 2013 and December 2014, in which levels of 25 (OH) D and albuminuria were analyzed in 37 patients with DM1, normal creatinine levels and 36 control subjects. The patients with DM1 and hypovitaminosis D had higher levels of albuminuria compared with those with normal vitamin D levels (albuminuria = log10 1.92 vs. 1.44; p <0.05). When the group of patients was separeted according to the stage of diabetic nephropathy in those with normoalbuminuria, microalbuminuria, and macroalbuminuria, we found lower levels of 25(OH)D in the latter when compared to the first two groups (26.7 ± 6.2, 24.8 and 15.9 ± 7 ± 7.6 ng / mL; p <0.05, respectively). In DM1 group, we found correlations between vitamin D levels with the levels of albuminuria and diabetic nephropathy stages (r= -0.5, p<0.01 r= -0.4; p <0.05, respectively). Additionally, the prevalence of vitamin D deficiency among control subjects was quite high (78%), and there was no difference compared to patients with DM1, whose prevalence was 73%. Patients with type 1 diabetes when compared to control group also showed no difference regarding the average levels of 25(OH)D (24.2 ± 7.4 versus 25.8 ± 11.2 ng / mL, NS). Our data suggest an association between reduced levels of vitamin D and the presence and severity of diabetic nephropathy. In addition, patients with type 1 diabetes mellitus, when compared to normal control subjects in our region did not differ in average and status of 25(OH)D levels.

The Diabetes Mellitus (DM) is a group of metabolic diseases, with hiperglycemia resulting from defects in insulin secretion (type 1 DM) and / or action (type 2 DM), promoting the elevation of blood glucose levels, which can damage target organs (eyes, kidneys, nerves, heart). In the kidney presents as diabetic nephropathy (DN), characterized by increased levels of urinary albumin excretion (UAE), which could progress to end stage kidney disease. The renin-angiotensin-aldosterone system (RAAS) is an important mediator of the pathophysiological changes of DN. The pharmacological blockade of this system has been shown as a combined treatment of DN, decreasing urinary albumin excretion. The aim of this study was to evaluate the effects of triple RAAS blockade on kidney structure and function, as well as albuminuria in diabetic Wistar rats with DN in development. Induction of diabetes in rats was performed with intravenous administration of alloxan (50mg/kg) diluted in 0.9% saline and glycemia observed 24h after the induction of diabetes; animals with blood glucose greater than 200 mg/dL were considered diabetic and were divide into 5 groups: I) control group - no treatment (CG); II) experimental group 1 - treated with enalapril (EN) (angiotensin converting enzyme inhibitor - ACEI), III) experimental group 2 - treated with losartan (LO) (angiotensin receptor blocker - ARB), IV) experimental group 3 - treated with aliskiren (AL) (direct renin inhibitor - DRI); V) experimental group 4 - treated with triple blockade ACEIARB- DRI (EN+LO+AL). After 90 days of treatment, animals were placed in metabolic cages to collect 24-hour urine and thereafter for determination of blood, proteinuria, and glomerular filtration rate by creatinine clearance. Then, the animals were anesthetized and had their kidneys removed for histological and immunohistochemical studies (&#945;-SMA and PCNA). After induction, all animals that became diabetic, remained with high glycemic levels throughout the treatment period. Histology showed on CG glomerular collagen deposition and tubulointerstitial, tubular dilation, space capsule expansion and inflammatory infiltration; those changes were attenuated by treatments with EN, LO, AL and EN+LO+AL. The treatments reduced the expression of &#945;-SMA glomerular (EN p<0.01; LO p<0.01; AL p<0.05, EN+LO+AL p<0.01) and tubulointerstitial (EN p<0.05, AL p<0.01, EN+LO+AL p<0.05) compared to CG. There were no significant differences in the number of PCNA glomeruli positive cells and in the analysis of plasma concentrations of sodium, potassium and urea between groups. However, EN and LO preserved a largest number of proliferating tubulointerstitial cells. Rats treated with AL (p<0.05) and EN+LO+AL (p<0.05) had a higher glomerular filtration rate (GFR) when compared to CG, EN and LO. AL and EN+LO+AL significantly reduced proteinuria in these animals when compared to CG (p<0.01). The treatment with EN+LO+AL reduced the expression of &#945;-SMA glomerular and tubulointerstitial, preserved a greater number glomeruli, GRF and UAE. However, administration of AL resulted in similar data. / O Diabete Melito (DM) corresponde a um grupo de doenças metabólicas, com hiperglicemia resultante de defeitos na secreção (DM1) e/ou ação (DM2) da insulina, promovendo a elevação das taxas glicêmicas, que pode lesionar órgãos-alvo (olhos, rins, nervos ou coração). Nos rins manifesta-se como a nefropatia diabética (ND), caracterizada pelos níveis aumentados de excreção urinária de albumina (EUA), que poderá evoluir até a insuficiência renal crônica terminal, dialítica. O sistema Renina-Angiotensina-Aldosterona (SRAA) é um importante mediador das alterações fisiopatológicas da ND. O bloqueio farmacológico deste sistema tem-se mostrado como um aliado ao tratamento da ND, diminuindo a EUA. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos do bloqueio triplo do SRAA na estrutura e função renais, bem como na proteinúria, de ratos Wistar diabéticos com ND em desenvolvimento. A indução do diabetes nos ratos foi feita com a administração intravenosa de aloxano (50mg/Kg) diluída em solução salina 0,9% e a glicemia verificada 12h, 24h e 48h após a indução do diabetes, animais com glicemia acima de 200mg/dL foram considerados diabéticos e divididos em 5 grupos: I) grupo controle sem qualquer tratamento (CO); II) grupo experimental 1 tratados com enalapril (EN) (iECA); III) grupo experimental 2 tratados com losartan (LO) (BRA); IV) grupo experimental 3 tratados com alisquireno (AL) (IR); V) grupo experimental 4 tratados com iECA-BRA-IR (EN+LO+AL). Após 90 dias de tratamento, os animais foram colocados em gaiolas metabólicas para coleta de urina 24 horas e, posteriormente, de sangue para determinação da proteinúria e taxa de filtração glomerular, através do clearance de creatinina. Em seguida, os animais foram anestesiados e tiveram seus rins retirados para estudos histológicos e imunohistoquímicos. Os animais de todos os grupos se apresentaram hiperglicêmicos após a indução e as glicemias se mantiveram elevadas durante todo o tempo de tratamento. A histologia mostrou no CO a deposição de colágeno glomerular e tubulointersticial, dilatação tubular, expansão do espaço capsular e presença de infiltrado inflamatório, alterações que foram atenuadas pelos tratamentos com EN, LO, AL e EN+LO+AL. Os tratamentos reduziram a expressão de &#945;-SMA glomerular (EN p<0,01; LO p<0,01; AL p<0,05; EN+LO+AL p<0,01) e tubulointersticial (EN p<0,05; AL p<0,01; EN+LO+AL p<0,05) quando comparados ao CO. Não houve diferenças significativas no número de células PCNA glomerulares positivas e nas análises das concentrações plasmáticas de sódio, potássio e uréia entre os grupos; entretanto, EN e LO preservaram o maior número de células em proliferação tubulointersticial. Os ratos tratados com AL (p<0,05) e EN+LO+AL (p<0,05) tiveram uma maior taxa de filtração glomerular, quando comparados ao CO, EN e LO. AL e EN+LO+AL reduziram significativamente a proteinúria desses animais, quando comparados ao CO (p<0,01). O tratamento com EN+LO+AL reduziu a expressão de &#945;-SMA glomerular e tubulointersticial, além de preservar um maior número de glomérulos, função renal e EUA, comuns nos quadros de ND. No entanto, a administração de AL resultou em dados semelhantes. / Mestre em Biologia Celular e Estrutural Aplicadas

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-07-09T11:01:01Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Luciana Carvalho Silveira - 2018.pdf: 1951667 bytes, checksum: 0801db794146b2cd2c97a78cf769e5a6 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-07-09T11:23:38Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Luciana Carvalho Silveira - 2018.pdf: 1951667 bytes, checksum: 0801db794146b2cd2c97a78cf769e5a6 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-09T11:23:38Z (GMT). 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Many studies about this subject are discordant, a fact that increases the need for joint analysis so that safe conclusions can be generated. The aim of this study was to investigate the association between ACE gene I/D polymorphism and the development of DN in patients with T2DM. Through a standardized research protocol, the bibliographic search was performed in the PubMed and Cochrane Library electronic databases of 1995-2017, selecting case-control observational studies using the terms "polymorphism" AND " ACE gene" AND “diabetic nephropathy ". We included 33 studies in qualitative synthesis and 30 studies for meta- analysis, with 9.077 participants with T2DM genotyped, 4.774 (52, 6%) individuals with DN and 4.303 (47. 4%) individuals without DN. Evaluated separately, the genotypes for the case group, we have I/I (23, 5%), I/D (46, 4%) and D/D (30, 6%). The genotypes for the control group, I/I (28, 6%), I/D (46.19%) and D/D (25%). The highest prevalence observed was of the I/D genotype in both groups. In the allele frequencies calculated by the Hardy-Weinberg Test, the mutant D allele presents with 54% in the case group and 48% in the control group. The wild-type I allele was present in 46% in the case group and 52% in the control group. The present meta-analysis concludes the I/D polymorphism of the ACE gene studied through the I/D and D/D genotypes is not associated with the risk of developing DN in individuals with T2DM, but the presence of the D allele has significant significance in the risk of developing the disease, as well as the protective role of the I allele. / A Nefropatia Diabética (ND) é uma complicação microvascular renal do Diabetes Mellitus (DM), caracterizada pelo aumento da albuminúria e perda progressiva da função renal. Nos últimos 10 anos, observa-se uma incidência cumulativa de 40%, principalmente em pacientes com diabetes mellitus tipo 2 (DM2) sendo uma causa importante de morbimortalidade. O polimorfismo Inserção / Deleção (I/D) no gene ECA poderia influenciar a predisposição para ND por modulação vascular no rim, através de um efeito direto sobre a hipertrofia celular, influenciando a proliferação e a ruptura da matriz extracelular. Estudos mostram discordância, fato que aumenta a necessidade de análises conjuntas para que se possam gerar conclusões seguras. O objetivo do estudo foi investigar a associação entre o polimorfismo I/D do gene ECA e o desenvolvimento de ND em pacientes com DM2. Através de um protocolo de pesquisa padronizado, realizou-se a busca bibliográfica nos bancos de dados eletrônicos PubMed e Cochrane Library de 1995-2017, selecionando estudos observacionais do tipo caso-controle, usando os termos "polymorphism" AND "ACE gene" AND "diabetic nephropathy". Incluiu-se 33 estudos na síntese qualitativa e 30 estudos na meta-análise, sendo 9.077 participantes com DM2 genotipados, 4.774 (52, 6%) indivíduos com ND e 4.303 (47,4%) indivíduos sem ND.Avaliados separadamente, os genótipos para o grupo caso, temos I/I (23, 5%), I/D (45, 8%) e D/D (30, 6%). Os genótipos para o grupo controle, I/I (28, 6%), I/D (46,4%) e D/D (25%). A maior prevalência observada é do genótipo I/D em ambos os grupos. Nas frequências alélicas calculadas através do Teste de Hardy-Weinberg, o alelo D mutante apresenta-se com 53% no grupo caso e 48% no grupo controle. O alelo I selvagem presente em 47% no grupo caso e 52% no grupo controle. A presente meta-análise conclui que o polimorfismo I/D do gene ECA estudado através dos genótipos I/D e D/D não estão associados ao risco de desenvolvimento da ND em indivíduos com DM2, porém, a presença do alelo D tem importante significância no risco de desenvolvimento da doença, assim como o papel protetivo do alelo I.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-04-24T13:01:47Z No. of bitstreams: 1 Simone Regina Barros de Macedo.pdf: 2148036 bytes, checksum: 7dba0ce8bcf8bf3c969d6a3aa4cdfd24 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-24T13:01:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Simone Regina Barros de Macedo.pdf: 2148036 bytes, checksum: 7dba0ce8bcf8bf3c969d6a3aa4cdfd24 (MD5) Previous issue date: 2017-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The objective of this study was to evaluate the histopathological and morphometric changes in renal and hepatic patients in diabetic Wistar rats submitted to the hyperlipidic diet and treated with metformin, pentoxifylline and melatonin. For the experiments were performed 25 male Wistar rats, 30 days old, kept under animal conditions in the Department of Morphology and Physiology of the Federal Rural University of Pernambuco. These animals were randomly distributed in five groups of animals and fed a hyperlipid diet and experimentally induced to diabetes: (GD) diabetic control group (GMP) treated with metformin (500 mg/kg) and melatonin (5 mg/kg), treated with metformin (GMP) treated with metformin and metformin (100 mg/kg) Pentoxifylline and melatonin. At the end of the experimental period, the animals were anesthetized and perfused, and the kidneys and liver were collected for qualitative and quantitative analysis of the lesions and blood serum for the determination of urea, creatinine, ALT, AST, ALP and GGT. With respect to histopathological lesions, the most frequent in the kidneys were membranous glomerulonephritis, proliferative glomerulonephritis, membranoproliferative glomerulonephritis, glomerular atrophy, contorted tube hydropsy, tube deformed with cellular debris, necrosis and congestion. The most frequent histopathological lesions in the liver were microsesteatosis, macroesteatosis, hepatocyte hypertrophy, narrowing of sinusoidal capillaries, coagulation necrosis, central lobular vein congestion, hepatic parenchyma congestion, hepatocyte cord atrophy, and dilatation of Sinusoidal capillaries. As for histomorphometry there was no difference in the percentage of necrotic hepatocytes, mononuclear hepatocytes, binucleated hepatocytes, blood vessels and bile ducts, Kupffer cells. Regarding the percentage of sinusoidal capillaries, the group treated with metformin associated with melatonin presented statistically higher value than the other groups. Serum urea concentrations were not statistically different between the treated groups and the control group. However, the mean values of the treated animals remained above normal for species. Diabetic animals submitted and treated with metformin + pentoxifylline and the association of these with melatonin provided a tendency to reduce serum urea levels in relation to untreated diabetic animals. No statistical difference was found between groups either. The creatinine values in the groups treated with metformin + melatonin and the association between metformin + pentoxifylline + melanin had a statistically significant reduction of 62% and 67%, respectively, in relation to the untreated diabetic group. It is concluded that pentoxifylline potentiates the reduction of the glycemic levels resulting from the administration of metformin. However, it is not able to reduce the glomerular and hepatic lesions due to diabetes and the administration of a hyperlipidic diet. Metformin associated with melatonin or in combination with pentoxifylline and melatonin protects the renal parenchyma from histopathological lesions and reduces serum creatinine levels, in addition to influencing the reduction of serum ALT levels and damage compatible with non-alcoholic fatty liver disease in Diabetic animals submitted to the hyperlipidic diet. / Objetivou-se com este trabalho avaliar as alterações histopatológicas e morfométricas renais e hepáticas em ratos Wistar diabéticos submetidos à dieta hiperlipídica e tratados com metformina, pentoxifilina e melatonina. Para a realização dos experimentos foram utilizados 25 ratos machos, da linhagem Wistar, com 30 dias de idade mantidos em condições de biotério no Departamento de Morfologia e Fisiologia da Universidade Federal Rural de Pernambuco. Esses animais foram distribuídos em aleatoriamente em cinco grupos de animais e, alimentados com dieta hiperlipídica e induzidos experimentalmente ao diabetes: (GD) grupo controle diabético; (GM) grupo tratado com metformina, (GMP) tratado com metformina e pentoxifilina (100 mg/kg), (GMM) tratados com metformina (500 mg/kg) e melatonina (5 mg/kg), (GMMP) tratados com metformina, pentoxifilina e melatonina. Ao final do período experimental, os animais foram anestesiados e perfundidos, sendo coletados rins e fígado para análise qualitativa e quantitativa das lesões e soro sanguíneo para dosagem de ureia, creatinina, ALT, AST, ALP e GGT. Com relação às lesões histopatológicas, as mais frequentes nos rins foram glomerulonefrite membranosa, glomerulonefrite proliferativa, glomerulonefrite membranoproliferativa, atrofia glomerular, hidropsia de tubo contorcido, tubo contorcido com debris celulares, necrose e congestão. Com relação às lesões histopatológicas encontradas no fígado, as mais frequentes foram microesteatose, macroesteatose, hipertrofia de hepatócitos, estreitamento de capilares sinusoides, necrose de coagulação, congestão de veia centro-lobular, congestão do parênquima hepático, atrofia de cordões de hepatócitos e dilatação de capilares sinusoides. Quanto à histomorfometria não houve diferença no percentual de hepatócitos necróticos, hepatócitos mononucleares, hepatócitos binucleado, vasos sanguíneos e ductos biliares, células de Kupffer. Com relação ao percentual de capilares sinusoides, o grupo tratado com metformina associada à melatonina apresentou valor maior estatisticamente que os demais grupos. As concentrações séricas de ureia não apresentaram diferença estatística entre os grupos tratados e o grupo controle. Porém, os valores médios dos animais tratados permaneceram acima dos padrões da normalidade para espécie. Os animais diabéticos submetidos e tratados com metformina + pentoxifilina e a associação destas com a melatonina proporcionaram uma tendência de redução dos valores dos níveis séricos de ureia em relação aos animais diabéticos sem tratamento. Em relação à albumina também não foi possível constatar diferença estatística entre os grupos. Os valores de creatinina nos grupos tratados com metformina+melatonina e a associação entre metformina+pentoxifilina+melanina tiveram redução estatisticamente significativa de 62% e 67%, respectivamente, em relação ao grupo diabético sem tratamento. Conclui-se que a pentoxifilina potencializa a redução dos níveis glicêmicos decorrentes da administração de metformina. No entanto, não é capaz de reduzir as lesões glomerulares e hepáticas decorrentes do diabetes e a administração de dieta hiperlipídica. A metformina associada a melatonina ou em associação com pentoxifilina e melatonina, protege o parênquima renal de lesões histopatológicas e reduz os níveis séricos de creatinina, além de influenciar na redução dos níveis séricos de ALT e nos danos compatíveis com a doença hepática gordurosa não alcoólica em animais diabéticos submetidos à dieta hiperlipídica.

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-07-13T20:37:59Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Rayane Mendes de Lima - 2016.pdf: 1517541 bytes, checksum: 21e56d88c3ecbe596bbba9be9f3ea87e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-07-14T13:04:34Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Rayane Mendes de Lima - 2016.pdf: 1517541 bytes, checksum: 21e56d88c3ecbe596bbba9be9f3ea87e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-14T13:04:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Rayane Mendes de Lima - 2016.pdf: 1517541 bytes, checksum: 21e56d88c3ecbe596bbba9be9f3ea87e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-03-02 / Diabetic nephropathy is the leading cause of end-stage renal disease (ESRD) in developed countries and in the literature shows as oxidative stress possibly contributes to the development of the diseases. Glutathione S-transferases (GSTs) are a family of multifunctional enzymes that play an important role in the cellular detoxification and excretion of numerous substances and can also work as one of the antioxidants. The genetic polymorphism of deletion in GSTT1 and GSTM1 gene, when homozygous, show lack of activity of these isoforms, known as null genotype. Looking for a possible relationship between diabetic nephropathy and polymorphisms mentioned above, this study was made for the case-control and genotyping using real-time PCR (qPCR) and melting curve. Clinical and laboratorial data of 65 patients (diagnosed with diabetic nephropathy and were on hemodialysis) and 90 controls were collected through interviews and consultation with medical records (patients) and the results of recent surveys (controls). It was found that in the group if there is a risk associated with deletion polymorphism, where the GSTT1-null genotype (p = 0,0230) causes an increased risk of about 2,9 times in developing the disease (diabetic nephropathy) compared to carriers of the genotype GSTT1-present. There was no association of GSTM1 (p = 0.3860) with susceptibility to disease in this population. Analysis of the influence of the deletion of GSTT1 and GSTM1 about the biochemical and clinical changes in the group case did not result in a significant association in any of the clinical variables analyzed. These results suggest that the GSTM1 deletion polymorphism may be associated with risk of developing the disease, but not with the biochemical changes that were analyzed. Further studies may clarify the relationship of this polymorphism with diabetic nephropathy and help in the treatment of this disease. / A nefropatia diabética é a principal causa de Estágio Final de Doença Renal (ESRD) em países desenvolvidos e evidências tem apontado o estresse oxidativo como unificador de várias vias de dano celulares em condições de hiperglicemia, que resultaria no desenvolvimento e complicações da doença. As glutationa-S-transferases (GSTs) são uma família de enzimas multifuncionais que desempenham um papel importante na desintoxicação celular e eliminação de numerosas substâncias e também pode funcionar como um dos antioxidantes. O polimorfismo genético de deleção nos genes GSTT1 e GSTM1, quando em homozigose, apresentam ausência de atividade dessas isoformas, conhecido como genótipo nulo. Procurando estabelecer uma possível relação entre nefropatia diabética e os polimorfismos acima mencionados, foi feito um estudo por caso-controle e a genotipagem por meio de PCR em tempo real (qPCR) e curva de melting. Dados clínico-laboratoriais de 65 pacientes (diagnosticados com nefropatia diabética e que estavam em hemodiálise) e 90 controles foram coletados, por meio de entrevistas e consulta a prontuários (pacientes) e a resultados de exames recentes (controles). Foi verificado que no grupo caso existe um risco associado ao polimorfismo de deleção, onde o genótipo GSTT1-nulo (p=0,0230) provoca um risco aumentado de aproximadamente 2,9 vezes em desenvolver a doença (nefropatia diabética) em relação aos portadores do genótipo GSTT1-presente. Não houve associação de GSTM1 (p=0,3860) com a susceptibilidade a doença na população estudada. A análise da influência da deleção de GSTT1 e GSTM1 sobre as alterações bioquímicas e clínicas no grupo caso não resultou em uma associação significativa de nenhuma das variáveis clínicas analisadas. Estes resultados sugerem que o polimorfismo de deleção de GSTT1 pode estar associado ao risco de desenvolvimento da doença, mas não com as alterações bioquímicas que foram analisadas. Novos estudos poderão esclarecer a relação desse polimorfismo com a nefropatia diabética e auxiliar no tratamento desta doença.

Diabetic nephropathy (DN) is a multifactorial patholgy, characterized by the increased presence of albumin in urine. Currently, urinary albumin (uAlb) is a marker for glomerular damage mostly used for the diagnosis of DN; however, some reports in the literature showed that patients might exhibit histological signs of DN and normal uAlb. Markers of tubular damage have shown great ability to diagnose DN prior to onset of uAlb stages. Urinary markers can be adjusted by urinary creatinine (uCr), to compensate for the daily excretion rates; nevertheless, these standards are not fully established. Thus, the aim of this study was to evaluate the diagnostic ability of the markers of tubular damage NAG, GGT, NAP, KIM-1 and NGAL and the influence of the correction for uCr in DN. Glycemic control, lipid and hepatic enzyme profile as well urinary markers of glomerular and tubular damage were assessed in type 2 DM patients stratified into two groups regarding the existence of DN. The tubular markers evaluated in this study were higher in type 2 DM patients with DN compared to type 2 diabetes without DN for both markers expressed in absolute values or as a ratio to the uCr. When analyzing the areas under the curve (AUROC) obtained, we find that all markers, except for GGT expressed in absolute values, have the ability to identify the ND. NGAL and KIM-1, when expressed in absolute values had better diagnostic ability (AUROC> 0.9, sensitivity and specificity> 90%). NAG, GGT and NAP were when expressed in ratio had the best diagnostic capability, with AUROC equal to 0.683, 0.783 and 0.850, respectively. Stratifying patients into groups according to urinary albumin excretion (UEA), we found that NGAL and KIM-1 already showed increased levels in UEA range 10 - 30 mg/g cr. In addition to being, GGT showed an association with glomerular hyperfiltration Individuals in type 2 DM without nephropathy. Urinary tubular markers used in the study have potential value in diagnosis, especially NGAL and KIM-1 that showed the best diagnostic features, and are early markers of DN type 2 DM patients. / A nefropatia diabética (ND) é uma desordem multifatorial, caracterizada pelo aumento da presença da albumina na urina. A albumina urinária (uALb) é um marcador de dano glomerular mais utilizado para o diagnóstico da ND, no entanto, existem relatos na literatura que demonstraram que pacientes já apresentam sinais histológicos de ND mas com a uALb dentro da faixa de normalidade. Tem sido demonstrado uma grande capacidade dos marcadores de dano tubular em diagnosticar a ND em estágios anteriores ao aparecimento da uAlb. Os marcadores urinários na maioria são corrigidos pela creatinina urinária (uCr), para compensar as taxas de excreção diária, apesar de não haver padronização a respeito. Assim o objetivo deste estudo foi avavliar a capacidade diagnóstica dos marcadores de dano tubular NAG (N-β-acetil-glucosaminidase), GGT (Gama-glutamiltransferase), NAP (Protein nonalbumin), KIM-1(Kidney molecule injury 1) e NGAL (Neutrophil gelatinase associated lipocalin) em relação à ND e verificar a influência da correção pela uCr nas características diagnósticas dos mesmos em pacientes com DM tipo 2. Foram mensurados indicadores do controle glicêmico, perfil lipídico e hepático, marcadores urinários de dano glomerular e tubular nos pacientes com DM do tipo 2 estratificados em dois grupos, com e sem ND. Observou-se que os marcadores tubulares avaliados foram significativamente mais elevados nos pacientes com DM tipo 2 com ND em relação ao grupo sem ND, tanto para os marcadores expressos em valores absolutos ou na forma de razão com a uCr. Quando foram analisadas as áreas sob a curva (AUROC) obtidas, verificamos que todos os marcadores, com exceção de GGT expressa em valores absolutos, tiveram a capacidade de identificar a ND. NGAL e KIM-1, quando expressos em valores absolutos tiveram a melhor capacidade diagnóstica (AUROC > 0,9, sensibilidade e especificidade > 90%). NAG, GGT e NAP quando expressos na razão tiveram a melhor capacidade de diagnóstico, com AUROC igual a 0,683, 0,783 e 0,850, respectivamente. Estratificando os pacientes em grupos de acordo com a excreção urinária de albumina (EUA), verificamos que a NGAL e o KIM-1 já apresentaram níveis aumentados no intervalo EUA 10 - 30 mg/g cr. Além disso, a GGT demonstrou estar associada com a hiperfiltração glomerular em indivíduos DM tipo 2 sem nefropatia. NGAL e KIM-1 foram os marcadores tubulares urinários que demonstraram as melhores características diagnósticas, além de ser marcadores precoces da ND em pacientes DM tipo 2.

Background: Diabetic nephropathy (DN) is defined as a rise in urinary albumin excretion rate, often associated with an increase in blood pressure. It is the leading cause of end-stage renal disease and carries an increased risk for cardiovascular mortality. Microalbuminuria is the first sign of diabetic renal impairment or incipient nephropathy and is generally considered the best noninvasive predictor for the development of DN. Urinary markers of tubular damage are mainly composed of enzymes or plasma proteins of low molecular weight that are normally freely filtered by the glomerulus, and these biomarkers can be useful for diagnosis of DN. Thus, the aim of this study was to test the diagnostic accuracy of the urinary excretion of gama-glutamyltransferase (GGT) and alkaline phosphatase (ALP) for diagnosis of diabetic nephropathy (DN). Methods: Fasting glucose, fructosamine, serum creatinine, glomerular filtration rate (GFR), serum uric acid, serum albumin, and urinary albumin, creatinine, GGT and ALP were assessed in 74 type 2 diabetic patients without nephropathy and 38 type 2 diabetic patients with nephropathy. Results: Urinary GGT and ALP were threefold higher in type 2 diabetic patients with nephropathy. Significant correlations were observed between urinary albumin and GGT (r=0.439, P<0.001) and urinary albumin and ALP (r=0.305, P<0.01). Areas under the curve for GGT and ALP were 0.7696 (P<0.001) and 0.7233 (P<0.001), respectively. At a cut-off value of 72 U/g creatinine, GGT demonstrated a sensitivity of 96.0% and a specificity of 52.6%. At a cut-off value of 20 U/g creatinine, ALP demonstrated a sensitivity and specificity of 83.8% and 36.8%, respectively. Conclusions: Urinary GGT and ALP have potential value in the diagnosis of nephropathy in type 2 diabetic patients, but GGT has a slightly higher ability to discriminate nephropathy than ALP. / Introdução: A nefropatia diabética (ND) é definida como um aumento na taxa de excreção urinária de albumina, sendo esta frequentemente associada ao aumento da pressão sanguínea. A ND é a principal causa de doença renal em estágio final, estando também associada ao aumento do risco de mortalidade cardiovascular. A microalbuminúria é o primeiro sinal de dano renal ou nefropatia incipiente, sendo geralmente considerado o melhor preditor não-invasivo para o desenvolvimento de ND. Os marcadores urinários de dano tubular são principalmente compostos por enzimas ou proteínas plasmáticas de baixo peso molecular que são normalmente filtradas pelo glomérulo, sendo que estes biomarcadores podem ser úteis para o diagnóstico da ND. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar as características diagnósticas dos níveis urinários de gama-glutamiltransferase (GGT) e fosfatase alcalina (FAL) para o diagnóstico da ND. Métodos: Glicemia de jejum, frutosamina, creatinina sérica, taxa de filtração glomerular (TFG), ácido úrico, albumina, além dos níveis urinários de albumina, GGT e FAL foram mensurados em 74 pacientes diabéticos tipo 2 sem nefropatia e 38 pacientes diabéticos tipo 2 com nefropatia. Resultados: As enzimas GGT e FAL, mensuradas em amostras de urina, foram três vezes mais elevadas nos pacientes diabéticos tipo 2 com nefropatia. Foram observadas correlações significativas entre a albumina urinária e GGT (r=0,439, P<0,001) e albumina urinária e FAL (r=0,305, P<0,01). As áreas sob a curva para GGT e FAL foram 0,7696 (P<0,001) e 0,7233 (P<0,001), respectivamente. Ao considerar o ponto de corte de 72 U/g de creatinina, a GGT demonstrou uma sensibilidade de 96,0% e especificidade de 52,6%. Considerando o ponto de corte de 20 U/g de creatinina, a FAL demonstrou uma sensibilidade e especificidade de 83,8% e 36,8%, respectivamente. Conclusões: As enzimas GGT e FAL mensuradas em amostras de urina apresentaram potencial valor para o diagnóstico de nefropatia em pacientes com diabetes tipo 2, mas a GGT apresentou uma habilidade discretamente superior à FAL nesta diferenciação.