O conhecimento de todas as facetas que envolvem o processo de envelhecimento é uma necessidade atual, uma vez que a população idosa vem aumentando em todo mundo. O sistema digestório é um importante alvo das alterações do envelhecimento, sendo a constipação um freqüente distúrbio referido. Por esta razão, estudos sobre os neurônios do plexo mioentérico são necessários. Ainda, sabendo que a atividade física é uma terapêutica indicada para se evitar a constipação, este trabalho teve por objetivos estudar quantitativamente e qualitativamente os efeitos do envelhecimento nos neurônios NADH- e NADPH-diaforase reativos do plexo mioentérico do colo de ratos adultos (GRUPO A) e de meia-idade (GRUPO B), assim como o possível efeito da atividade física (corrida) sobre os neurônios dos animais de meia-idade (GRUPO C). Ainda, a presente pesquisa objetivou verificar as possíveis alterações da camada muscular (circular e longitudinal) do colo, assim como a ultra-estrutura neuronal nos diferentes grupos. Quanto à morfologia, nenhuma alteração neuronal ou no arranjo do plexo foi constatada. Entretanto, uma maior quantidade de colágeno ao redor do gânglio foi verificada nos animais do Grupo B. Alterações quantitativas foram encontradas tanto nos neurônios NADH-d reativos como nos NADPH-d reativos. Ambas populações neuronais tiveram a densidade diminuída com o envelhecimento, sendo significativa (P>0,05) apenas nos neurônios NADPH-d reativos. Em relação à atividade física, somente os neurônios NADPH-d reativos tiveram a densidade significativamente diminuída (P>0,05), enquanto que os neurônios NADH-d reativos tiveram a densidade ligeiramente aumentada. Nenhuma alteração significativa (P>0,05) foi verificada na área do perfil neuronal e na espessura da camada muscular do colo. / The known of all facets that involve this process is an actual necessity, once time the aging population is increasing in whole world. The digestory system is an important target of the aging alterations, being the constipation a frequent disturbance related. For this reason, studies about the neurons of the myenteric plexus are necessary. Moreover, knowing that the physical activity is a therapeutic recommended to avoid the constipation, this research have as objectives study quantitatively and qualitatively the effects of aging in the NADH- and NADPH-diaphorase reactive neurons of the myenteric plexus of the colon of adult rats (group A) and middle-aged (group B), as well as the possible effects of physical activity (running) about the neurons of middle-aged animals (group C). Furthermore, the present research also aimed verifies possible alterations in the muscle layers (circular and longitudinal) of colon, as well as the neuronal ultra-structure in all groups. In relation to the morphology, no neuronal alteration or in the arrangement of the plexus was showed. However, a major amount of collagen around the ganglion was verified in the animals of the group B. The quantitative alterations were showed both in the neurons NADH-d reactive and in the NADPH-reactive. Both neuronal populations had a decrease in the density with the aging, being significant (P>0,05) only in the neurons NADPH-d reactive. In relation to the physical activity, only the neurons NADPH-reactive had a decrease significant in the density (P>0,05), while the neurons NADH-d reactive had the density a little increased. No significant alterations (P>0,05) were verified in the neuronal profile area and in the thickness of the muscle layers of the colon.

Para evitar a presença de microorganismos nas rações fornecidas para animais de laboratório, são utilizados processos de esterilização como a autoclavagem, porém esta ocasiona perda de nutrientes, como as proteínas, devido à alta temperatura usada. A deficiência protéica pode afetar a atividade celular, provocando diferentes alterações nos tecidos. Por estes fatos, objetivou-se avaliar a ação da ração autoclavada sobre os neurônios do plexo mioentérico do jejuno de ratos em período de crescimento. Para tanto, foram utilizados ratos em período dedesmame (21 dias) provindos de mães que receberam ração autoclavada ou não autoclavadadurante a gestação e lactação e ratos em período de pós-desmame (21 a 70 dias) alimentados com o mesmo tipo de dieta que as mães recebiam. Para a mensuração do perfil do corpo celular e contagem do número de neurônios por área, estes foram evidenciados pelo método de nadh-diaforase. O peso corpóreo dos animais não apresentou diferença significativa em relação ao tipo de alimentação (p > 0,05). Houve uma diminuição do comprimento jejuno-íleo em ratos alimentados com ração autoclavada (p > 0,05). O número de neurônios por área aumentou aproximadamente 10% para ratos que receberam ração autoclavada (p > 0,05). Já a área do perfil dos corpos dos neurônios apresentou um aumento para ratos alimentados com ração autoclavada, sendo este significativo para animais em período de desmame. Todos os fatores observados apresentaram diferença significativa em relação às idades / Autoclaving is the most common sterilization process to avoid the presence of pathogens in the diet of laboratory animals. However, it may cause the loss of nutrients such as proteins due to the high temperature used. The protein deficiency can affect cellular activity, leading todifferent changes in the tissues. Due to these facts, this research aimed to verify the effect of autoclaved diet in the jejunum neurons of the myenteric plexus in rats during their growing phase. The experiment groups were constituted by rats in weaning period (21 days) from mothers that received autoclaved or not diets during the gestation and lactation, and rats in post weaning period (21 to 70 days) fed the same diet the mothers received. In order to measure the neurons body profile and to quantify the number of neurons by area, they were stained by the nadh-diaphorase method. No significant changes were observed to the weight body in animals with autoclaved diet (p > 0.05). There was a decrease in the length of jejunum-ileum in rats treated with autoclaved diet (p > 0.05). The number of neurons by area increased approximately 10% in the rats supplied with autoclaved diet (p > 0.05). The neuron body profile area increased in the rats that received autoclaved diet and it was significant in the animals in weaning period. Nevertheless, all factors observed showed significant differences when related to animal age

A precisão de uma ação motora depende de vários fatores, como: 1) grau de variabilidade da força gerada por cada músculo envolvido, 2) velocidade de geração da força, 3) coordenação das ativações dos músculos. A geração e o controle da força muscular possuem mecanismos que ainda precisam ser mais bem estabelecidos, tanto para o aprimoramento das teorias de controle motor, quanto para o desenvolvimento de técnicas que permitam a prevenção ou a compensação de certas deficiências. A perda de desempenho motor pode ser decorrente de doenças que afetam o sistema neuromuscular ou de alterações associadas ao envelhecimento. Sabe-se, por exemplo, que idosos podem possuir maior variabilidade e menor velocidade de desenvolvimento da força, quando comparados com jovens. Uma das formas de se entender os mecanismos responsáveis pelos fenômenos observados em experimentos neurofisiológicos, em indivíduos saudáveis, em pacientes ou em idosos, é por meio de uma representação adequada de tais mecanismos em modelos matemáticos. Tais modelos podem, pela escolha de um conjunto de parâmetros e de sinais de entrada, ser simulados, explorando-se toda gama de cenários plausíveis para a geração de um determinado fenômeno, tendo como referência os dados obtidos experimentalmente. Resumidamente, o presente trabalho trata do estudo do sistema neuromuscular por modelagem matemática e simulação computacional, com particular interesse nos músculos do tríceps sural e no primeiro interósseo dorsal (um músculo intrínseco da mão), sendo estes músculos amplamente utilizados em estudos experimentais e de modelagem. Maior enfoque é dado em contrações isométricas (i.e., ângulo articular mantido fixo), avaliando-se a organização do núcleo motor, em termos anatômicos e fisiológicos, recebendo como entrada a atividade sináptica das vias pré-motoneuronais, e estudando como diferentes arranjos das propriedades neurais podem resultar em características encontradas experimentalmente para a força muscular. Inicialmente foi feita uma ampla expansão de um simulador existente (ReMoto), tanto em aspectos de modelagem quanto de interface. Em seguida, este modelo expandido foi empregado para um estudo da influência do grau de rigidez muscular nas respostas reflexas do tornozelo. Posteriormente, um novo modelo de pool de motoneurônios, com ampla representação de características biofísicas, foi desenvolvido e, por fim, este modelo foi utilizado, em conjunto com modelos de tratos descendentes e da geração de força muscular, para representar a geração de forças isométricas em jovens e idosos. / The precision of a motor action depends on several factors such as: 1) the level of force variability of each involved muscle, 2) the rate of force development, 3) the coordination of the activations of the muscles involved. Several mechanisms underlying the force generation in a muscle and its control by the nervous system remain to be fully comprehended. An appropriate description of these mechanisms would allow an improvement in motor control theories and could contribute to the development of techniques for the prevention or compensation of some disabilities. Losses in motor performance may be caused by diseases affecting the neuromuscular system or due to aging processes. For instance, old adults may exhibit higher force variability and lower velocity of force development than young adults. Proper representations of such mechanisms in mathematical models constitute a promising way to test hypotheses raised by neurophysiological experiments to explain an observed phenomenon. These models can be used to investigate aspects of health/disease or young/old subjects and, by varying their parameter sets, it is possible to explore a broad range of plausible scenarios under which the experimentally observed phenomena are replicated. This project deals with the study of the neuromuscular system by mathematical modeling and computer simulations, applied to the triceps surae and the first dorsal interosseus (two of the most experimentally and theoretically studied muscles). The principal focus is on isometric contractions (i.e., fixed joint angle) and the study of the organization of the motor nucleus (anatomical and physiological aspects) receiving inputs from premotoneuronal pathways. The study analyzes how different patterns of organization result in experimentally observed aspects of muscle force. Initially, an existing simulator of the neuromuscular system (ReMoto) was broadly extended to include new models and a friendly interface. The extended model was used to investigate the influence of muscle stiffness on the reflex responses in the ankle joint. Next, a new motoneuron pool mathematical model was developed based on known biophysics. Finally, this model was integrated with models of pre-motoneuronal neurons estabilishing synapses with motoneurons and of muscle force generation in order to represent isometric force generation in young and old adults.

Este estudo experimental avaliou o efeito neuronal e comportamental da administração de dois esteroides anabolizantes androgênicos (EAA), Deposteron® (Cipionato de Testosterona) e Winstrol Depot® (Stanozolol), utilizados indiscriminadamente em academias em doses supra-fisiológicas. Através de extrapolação alométrica, doses foram administradas por via intraperitoneal (IP), 0,8mg/kg/dia de Deposteron® e 1,8mg/kg/dia de Winstrol Depot®, em camundongos machos e fêmeas da linhagem Swiss, estes foram comparados com animais controle tratados com solução salina (0,04mL). Os animais foram submetidos à natação durante o período do experimento, simulando uma possível atividade física. Através da análise de estimativa da densidade dos perfis de corpos celulares de neurônios, este estudo mostrou-se estatisticamente significativo, quanto à redução do número de corpos celulares neuronais, no hipotálamo lateral de machos e fêmeas, e na amígdala central de fêmeas, após administração de EAA, indicativo de que esses dois EAA podem gerar danos neuronais, prejudicando funções desempenhadas por estas estruturas cerebrais. As análises de comportamento agressivo foram realizadas pelo paradigma residente-intruso e não se mostraram estatisticamente significativas, entretanto todos os animais residentes tratados mostraram comportamento agressivo, além de uma postura submissa e neutra dos animais intrusos, em contrapartida, a uma postura dominante dos animais residentes. Contudo, este estudo apresenta grande relevância científica, devido à falta de estudos morfológicos quantitativos acerca dos EAA, mostrando que a uso abusivo de EAA levam a perda neuronal, e consequente perda de atividade, entretanto, mais estudos se fazem necessários, devido às controvérsias quanto à relação entre o uso de EAA e comportamento agressivo. / This experimental study evaluated the behavioral and neuronal effect of two Anabolic-Androgenic Steroids (AAS) administration, testosterone cypionate (Deposteron®) and stanozolol (Winstrol Depot®), which are indistinguishably used by gym customers in hyperphysiologic doses. Usingallometric extrapolation, intraperitoneal (IP) daily doses of 0.8mg/kgDeposteron® and 1.8mg/kg Winstrol Depot® were administered to male and female Swiss mice, in comparison to a control group treated with daily 0.04ml saline solution. All animals were submitted to swimming exercise during experiment time in order to simulate physical activity. By means of estimated profile analyses of neuron cell bodies density, results showed statistically significant decrease of neuron cell bodies number in lateral hypothalamus area of both male and female animalsaswell as in central amygdaloid area of female ones after AAS administration. The outcomes indicated that these two AAS can generate neuronal damage and impaired functions in these brain structures. Aggressive behavioral tests analyses were performed by resident-intruder paradigm and proved to be no statistically significant. Nevertheless, all resident-treated animals displayed an aggressive behavior; in contrast to a dominant attitude of resident animals, intruder ones presented themselves with a compliant and neutral attitude. For all that, we believe this study to be scientificallyimportant due to the scarcity of quantitative morphologic researches concerning AAS and it alsoshows that AAS abuse lead to neuronal loss and consequent activity impairment. In our opinion, further studies are necessary because of controversies about AAS use and aggressive behavior relationship.

O uso de esteroides anabólicos androgênicos (EAA), conhecidos popularmente como anabolizantes ou bomba, vem crescendo nos últimos anos, junto a este fato, temos uma crescente oferta de produtos falsificados. Esses fatores, quando combinados a uma educação de baixa qualidade, torna o Brasil um dos países entre os maiores consumidores de substâncias anabolizantes no mundo. Devido ao risco quando utilizados sem o devido acompanhamento médico, tais substâncias estão sendo continuamente estudadas, visando elucidar com dados empíricos seus reais efeitos deletérios e seus possíveis benefícios quando adequadamente utilizados, como no meio médico. O presente estudo analisou os efeitos de dois EAAs, vendidos no Brasil como Winstrol Depot® (Stanozolol) e Deposteron® (Cipionato de Testosterona) sobre a perda neuronal, através da estimativa da densidade de corpos celulares de neurônios em três regiões corticais (Límbica, Motora e Sensitiva) e três regiões hipocampais (CA1, CA2 e CA3), além da análise comportamental buscando alterações em parâmetros relacionados à ansiedade (Labirinto em Cruz Elevado - LCE), memória (Análise da Memória e Reconhecimento de Objetos) e atividade locomotora (Campo Aberto). Para isso, foram utilizados 60 camundongos da linhagem Swiss, sendo 30 machos e 30 fêmeas, vindos do Biotério Central da Universidade Federal de Alfenas. Os camundongos foram separados em três grupos: Controle e grupos experimentais Deposteron® e Winstrol Depot®, ambos com 20 animais cada, sendo 10 machos e 10 fêmeas por grupo. Os animais receberam os anabolizantes ou solução fisiológica duas vezes na semana (terças e quintas-feiras) e submetidos a 15 minutos de natação três vezes na semana (segundas, quartas e sextas-feiras), durante um mês. O peso dos animais foi aferido todas as segundas-feiras do período de tratamento. Após o término do tratamento os animais realizaram os testes comportamentais e foram sacrificados pela inalação do anestésico Alotano®, tiveram seus encéfalos retirados e estes foram armazenados em solução de formaldeído a 4% por três semanas. De cada encéfalo foram retiradas amostras homotípicas da região média do cérebro em cortes transversais para que pudéssemos avaliar as áreas estabelecidas para este estudo. Os resultados obtidos mostraram que houve uma redução na densidade dos perfis de corpos celulares de neurônios de todas as áreas corticais e hipocampais analisadas no grupo de fêmeas tratadas com Deposteron® e em algumas regiões (CA2 e CA3) no grupo de fêmeas tratadas com Winstrol Depot®, quando comparadas ao grupo Controle. Os resultados mostram também que houve redução na densidade dos perfis de corpos celulares de neurônios nos animais machos na área límbica e na região CA1 do hipocampo de ambos os grupos experimentais (Deposteron® e Winstrol Depot®). Os testes comportamentais revelaram que houve um aumento nos parâmetros relacionados à ansiedade e ao comportamento apático enquanto não houveram alterações relacionadas à atividade motora e à memória dos animais dos grupos experimentais. / The use of AAS (Anabolic-Androgenic Steroids), currently known as steroids or “roids”, has increased in the last years due to a growing bid of faked products. This fact, allied to a low-quality scholarship, put Brazil among the most anabolic-drug consuming countries in the world. Because of their use-risk without medical follow-up these drugs has being studied extensively in order to clarify by empiric data their actual harmful effects or potential benefits when properly used. The present study analyzed the effects of two AAS, sold in Brazil as Winstrol Depot® (stanozolol) and Deposteron® (testosterone cypionate), upon neuronal loss by means of estimated profile analysis of neuron cell bodies density in three cortical areas (limbic, motor and sensorial) and three hippocampal areas (CA1, CA2 and CA3), besides a behavioral analysis searching for changes in parameters related to anxiety (Elevated Plus Maze – EPM), memory (Memory Analysis and Object Recognition Memory) and motor activity (Open Field). For the experiment, we used 60 Swiss mice, 30 males and 30 females, which were divided into three groups: control, Deposteron®-treated, and Winstrol Depot®-treated, each one composed by 20 animals, 10 males and 10 females. The animals received AAS or saline solution twice a week (on Tuesdays and Thursdays) and were put on 15-minute swimming exercises thrice a week (on Mondays, Wednesdays and Fridays) for 30 days. After experiment-ending, the specimens accomplished behavioral tests and were euthanized by halothane inhalation. Their brains were withdrawn and stored in 4% paraformaldehyde solution for 12 hours. Homotypic cross-sections samples from each brain’s middle area were taken in order to evaluate the areas concerning our study. The results showed that there was a reduction in the estimated profile analysis of neuron cell bodies density of all cortical and hippocampal areas in female mice treated with Deposteron® and in hippocampal areas (CA2 and CA3) of female mice treated with Winstrol Depot® when compared to control group. A reduction in the estimated profile analysis of neuron cell bodies density was also displayed in limbic and hippocampal CA1 areas of male mice in both ASS-treated groups. Behavioral tests revealed that there was an increase in parameters related to anxiety and apathetic behavior while there were no detectable changes concerning motor activity or memory in AAS-treated animals on both groups. / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq

A fosfolipase A2 (PLA2) é considerada uma enzima chave no metabolismo de fosfolípides, principais constituintes das membranas celulares. Alterações da atividade da PLA2 têm sido descritas no cérebro e sangue (soro, plasma e plaquetas) de pacientes com diversas doenças neuropsiquiátricas e também em matrizes biológicas como tecido cerebral de ratos e cultura de células neuronais. A inibição da atividade da PLA2 em cultura primárias de neurônios corticais de rato resultou em neurotoxicidade, o que demonstra o papel da PLA2 em processos de sobrevivência e desenvolvimento neuronal. Neste estudo foi padronizado um ensaio radioenzimático para caracterização dos três principais subtipos da PLA2 em cultura primária de neurônios: PLA2 secretória dependente de cálcio (sPLA2), PLA2 citosólica dependente de cálcio (cPLA2) e PLA2 intracelular independente de cálcio (iPLA2). Para isso foram testadas variáveis críticas para a reação enzimática e com os resultados obtidos houve um aprimoramento do método empregado. Foi encontrada ainda, uma predominância do subtipo iPLA2 (71%) nas culturas de neurônios. Dessa forma, apresentamos um modelo in vitro para determinação da atividade dos subtipos de PLA2 que pode ser considerado uma ferramenta para compreensão dos mecanismos envolvidos nas doenças neuropsiquiátricas, nas quais a PLA2 encontra-se alterada. Além disso, a partir de modelos laboratoriais baseados em estudos com culturas de células, poderão ser evidenciados os efeitos de diversas substâncias químicas novas ou de uso tradicional, como drogas de interesse psiquiátrico, sobre os neurônios. / The phospholipase (PLA2) is considered a key enzyme in the metabolism of phospholipids, which are the main constitutes of cellular membranes. Alterations in PLA2 activity have been reported in the brain and blood cells of psychiatric patients and also in biological matrixes like rat brain tissues and cultures of neuron cells. Inhibition of PLA2 activity in primary cultures of rat neurons resulted in neurotoxicity, which demonstrates the role of PLA2 in survival processes and neuronal development. In this study, a radioenzymatic assay was standardized to detect the activity of the three main groups of PLA2, which are the calcium dependent secretory PLA2 (sPLA2), the cytosolic calcium dependent PLA2 (cPLA2) and the intracellular calcium independent PLA2 (iPLA2), in the culture of neurons. Critical variables for the enzymatic assay were tested and from the results the method used was modified. Our findings demonstrate that there is a predominance of iPLA2 subtype (71%) in cultures of rat neurons. So therefore we present an in vitro model which aims to determine the main activity of PLA2 subtypes and can be considered an investigative tool for comprehending the mechanisms involved in neuropsychiatric disorders that show alterations in PLA2 activity. Furthermore, the effects of new chemical and traditional substances, such as the drugs used in psychiatric treatments, can be evidenced in the neurons by the use of laboratorial models based on studies of neuron cultures.

Os gânglios da raiz dorsal (GRD) armazenam neurônios TrkA-positivos. A percepção e transmissão de estímulos por estes neurônios dependem de uma neuritogênese adequada. Miosina (MioVa) é expressa no tecido nervoso e está presente em neuritos, corpo celular e cone de crescimento. Caracterizamos o padrão de expressão de MioVa na neuritogênese de células TrkA-positivas do GRD de galinha in vivo e in vitro. In vivo, MioVa é expressa em células que não começaram a emitir neuritos em HH25, e sua expressão persiste por toda neuritogênese. In vitro, é recrutada para o processo de re-emissão de neuritos de neurônios TrkA positivos na presença de NGF, sendo expressa em neuritos em diferentes estádios de neo-neuritogênese. Nos ensaios funcionais, observamos que a superexpressão do domínio globular de MioVa em culturas de GRD com 10 ou 100ng/ml de NGF reduz a população de células com neuritos longos e aumenta a população de células com neuritos curtos ou sem neuritos. Em conjunto, estes dados sugerem que a MioVa é importante para o estabelecimento de neuritos nociceptores. / The dorsal root ganglia (DRG) harbor the TrkA-positive neurons. The stimuli perception and transmission by these neurons depend on a proper neuritogenesis. Myosin (MyoVa) is widely expressed in nervous tissue and is present in neurites, cell body and growth cone. Here, we characterized the MyoVa expression pattern in chicken DRG TrkA-positive cells neuritogenesis, in vivo and in vitro. In vivo, at stage HH25, MyoVa was present both in cells with and without neurites and its expression persists throughout neuritogenesis. In vitro, it is recruited for the regeneration process and TrkA-positive neurons neurites re-emission in the presence of NGF, being expressed in neurites at different stages of neo-neuritogenesis. In functional assays, we observed that MyoVa globular tail overexpression in GRD cultures maintained with 10 or 100ng/ml NGF reduces the number of neurons with long neurites and increased the number of neurons with short neurites or no neurites. Taken together, these results suggest that Myosin Va is important for the establishment of nociceptor neurites.

Diferentes tipos de neurônios possuem formas distintas, um fator importante para a regulação da forma é a expressão gênica. Além disso, esta característica também está relacionada com a conectividade entre as células nervosas, formando redes. Por meio delas ocorrem as dinâmicas, como por exemplo o aprendizado. Neste trabalho foi desenvolvido um arcabouço de modelagem e simulação neuronal, para analisar a integração das etapas desde a expressão gênica, passando pela geração dos neurônios até as dinâmicas, permitindo o estudo do sistema e relacionamento entre as partes. Na etapa de geração, foram utilizados diferentes padrões de expressão gênica. Por meio dos neurônios, foram criadas as redes, caracterizadas utilizando medidas de centralidade. Ademais, foram executadas as dinâmicas integra-e-dispara, que simula a comunicação entre os neurônios, e o desenvolvimento hebiano, que é uma dinâmica aplicada para simular o aprendizado. Para quantificar a influência da expressão gênica, foram utilizadas as medidas de correlação de Pearson e a informação mútua. Por meio destes testes, foi possível observar que a expressão gênica influencia todas as etapas, sendo que nelas, exceto na geração da forma neuronal, os padrões de expressão com que os neurônios foram organizados também são um fator importante. Além disso, na medida de centralidade betweenness centrality, foi possível observar a formação de caminhos, denominados caminhos do betweenness. Para descrever os caminhos, foram feitas comparações entre as redes neuronais e outras redes espaciais. Assim, foi possível observar que estes caminhos são uma característica comum em redes geográficas e estão relacionados com as comunidades da rede. / Different types of neurons have distinct shapes. An important factor for shape regulation is gene expression, which is also related to the connectivity between nervous cells, creating networks. Dynamics, such as learning, can take place in those networks. In this work we developed a framework for modeling and simulating neurons allowing an integrated analysis from gene expression to dynamics. It will allow the study of the system as a whole as well as the relationships between its parts. In the neuron generation step, we used different patterns of gene expression. The networks were created using those neurons, and several centrality measures were computed to characterize them. Moreover, the dynamic processes considered were the integrate-and-fire model, which simulates communication between neurons, and the hebbian development, which is applied to simulate learning. During every step, Pearsons correlation and mutual information between the level of expression was measured, quantifying the influence of gene expression. Through these experiments it was observed that the gene expression influences all steps, which is in all cases, except in the generation of neuronal shape, an important factor. In addition, by analyzing the betweenness centrality measure, it is possible to observe the formation of paths. To study these paths, comparisons between models and other spatial networks were performed. Thus, it was possible to observe that paths are a common feature in other geographical networks, being related to the connections between network communities.

Os objetivos do presente trabalho foram determinar a morfologia do plexo cardíaco e verificar se o coração de camundongos é alterado pela exposição à poluição atmosférica em relação ao peso, ao número de neurônios e gânglios. Camundongos foram mantidos em câmaras situadas próximas a vias de trafego intenso em São Paulo. Os animais foram divididos em 4 grupos (n=5) segundo a exposição à poluição atmosférica no período gestacional e/ou pós natal: ar filtrado (F-F), ar não filtrado (NF-NF), ar filtrado e ar não filtrado (F-NF) e ar não filtrado e ar filtrado (NF-F). Ao atingirem 120 dias de vida, os animais foram eutanasiados e seus corações removidos. O número de neurônios cardíacos assim como seu volume, volume do gânglio, área do neurônio, perímetro e o diâmetro de Feret máximo (FMax) e mínimo (FMin) foram estimados por meio de avaliações morfométricas e estereológicas. Os neurônios e gânglios cardíacos foram corados pelo método de Giemsa. As fibras colágenas foram identificadas pelo método de Picro-sirius sob luz polarizada. Verificou-se que as fibras colágenas tipo III são predominantes na cápsula do gânglio nos grupos NF-F e NF-NF. O peso corpóreo foi significativamente menor nos animais que foram expostos no período pós natal (F-NF, NF-NF) quando comparados aos grupos F-F e NF-F. A média do perímetro neuronal foi maior no grupo F-F que nos grupos expostos no período gestacional e pós natal (F-NF, NF-F e NF-NF). O FMax foi estatisticamente diferente entre o grupos expostos no período pós natal (F-NF e NF-NF) (p<0,05). Houve uma redução significativa no volume dos neurônios nos grupos F-NF e NF-NF. Os resultados permitem especular que a mudanças no controle autonômico do coração resultante da exposição à poluição atmosférica, pode ser relacionado a alterações no desenvolvimento do plexo cardíaco / The aims of the present study were to determine the cardiac plexus morphology and to test whether or not the heart of the mice alters in weight, neuronal and ganglia number with air pollution exposure. Mice were maintained in exposure chambers situated close to a busy crossroads in São Paulo. Animals were grouped in to four groups (n=5) according to prenatal and/or postnatal exposure to air pollution: filtered air (F-F); non-filtered air (NFNF); filtered and non-filtered air (F-NF); non-filtered and filtered air (NF-F). Reaching 120 days of life, the animals were euthanized for obtaining their hearts. The number of cardiac neurons as well as their volume, ganglion volume, neuron sectional area, perimeter and maximum (FMax) and minimum (FMin) Ferrets diameter were estimated under the stereological and morphometric aspects. The cardiac neurons and ganglia were stained employing the Giemsa method. Collagen fibers were identified by Picro-sirius under polarized light. Type III collagen fibers predominate in the ganglion capsule of the NF-F and NF-NF groups. Body weight was significantly reduced in those animals exposed to air pollution postnatally (F-NF, NF-NF) when compared to groups F-F and NF-F. The average of the neuronal perimeter was larger in F-F group than in those groups with gestational and postnatal exposure (F-NF, NF-F and NF-NF). The volume, volume do gânglio, área do neurônio, perímetro e o diâmetro de Feret máximo FMax was statistically different among the groups exposed to air pollution postnatally (F-NF and NF-NF) (p<0.05). A decrease in the total neuronal volume was significantly detected in F-NF and NF-F groups. The mean neuron volume was significant in the F-NF and NF-NF. Our results, allow us to speculate that changes in autonomic control of heart resulting from exposure to air pollution may be linked to alterations in the development of the cardiac plexus

A Esclerose Lateral Amiotrófica (ELA) é uma doença progressiva caracterizada pela perda de neurônios motores levando rapidamente os pacientes à morte. Os mecanismos da morte neuronal são desconhecidos e estudos recentes indicam que a microglia pode participar deste processo. Para investigar o papel da microglia na ELA, camundongos transgênicos SOD1G93A foram utilizados na avaliação da morte e do trofismo neuronal em sistemas de co-culturas neurônio/microglia e do efeito do meio condicionado microglial sob os neurônios motores. Ambas as células foram extraídas da medula espinal de camundongos transgênicos (TG) e wild type (WT). A microglia foi obtida dos animais neonatos e adultos na fase pré-clínica da doença. Os neurônios extraídos de neonatos foram marcados com reagente específico para morte neuronal e seus prolongamentos foram quantificados em contraste de fase por métodos estereológicos específicos. A expressão gênica de moléculas candidatas à participação do processo neurodegenerativo relacionadas com a microglia foi quantificada pelo PCR em tempo real, assim como a quantidade de moléculas secretadas no meio condicionado das culturas microgliais dosada pelo ELISA sanduíche. O meio condicionado da microglia TG neonatal não foi capaz de acentuar a morte neuronal, entretanto a neurodegeneração foi potenciada nas análises das co-culturas. Interessantemente, o meio condicionado das microglias WT provenientes de animais adultos foram capazes de aumentar os prolongamentos neuronais feito não observado em relação às microglias TG. Quantidades aumentadas do fator de necrose tumoral ?, interleucina-6 e fator de crescimento derivado do nervo foram quantificadas no meio condicionado das microglias TG. A microglia TG neonatal apresentou dimuição na expressão gênica de AKAP13, HIPK3, UBE2I E NTF5. Esses achados precoces sugerem perda de migração microglial, perda de resistência à apoptose, desbalanço entre proliferação e morte celular e diminuição do suporte trófico neuronal. Em conjunto, os resultados evidenciam a participação da microglia nos mecanismos da ELA / Amyotrophic Lateral Sclerosis (ALS) is a progressive degenerative disorder affecting motoneurons and leading the patient to death.The cause of motor neurons degeneration in ALS is uncertain and there is any treatment able to prolong the patient life. Recent studies show that microglia could participate of the process of ALS degeneration. Its activation is linked to the disbalance of neuroprotective and neurotoxic action. To investigate the microglia role in ALS, SOD1G93A transgenic mice that develop symptoms similar to the clinical disease were used. We evaluated the neuronal death and trophism in microglia/neuron co-cultures system and in microglial conditioned medium effect under the neurons. Neurons and microglia were extracted from transgenicor wild type mice spinal cord. Microglia was obtained from 1 day pos natal pups and adult onset of disease mice. Cells were stained with a specific marker to neuronal death. Neuronal extensions area and neuronal death was quantified by stereological method. The genic expression of candidate molecules related to degeneration in ALS was quantified by real time PCR and the release of some molecules were quantified by ELISA sandwich. Results showed that maybe transgenic neonatal microglia is not able to increase the neuronal death through releasing molecules in its conditionated medium, on the other hand when transgenic microglia was co-cultured with any kind of neuron, neuronal death was observed. Microglia from adult transgenic mice was not able to promote a neuroprotection compared to wild type in co-culture and conditionated medium experiments. In addition to this, was observed increased tumor necrosis factor alpha, interleukin 6 and nerve growth factor secretion by transgenic microglia. Neonatal transgenic microglia also exhibited reduced genic expression of AKAP13, HIPK3, UBE2I and NTF5. These findings at an early stage suggest a lost of migration potential, lost of apoptosis resistance, disbalance of proliferation and cell death and reduction of neuronal trophic support. So together, these data indicate the involvement of microglia in ALS mechanisms