A expressão dos receptores da ocitocina (OTR) em machos, embora estudada em algumas espécies, não foi ainda estabelecida em cães. O objetivo deste estudo foi trazer novas perspectivas para a utilização terapêutica da ocitocina (OT) em patologias reprodutivas em cães já que tem sido utilizada no tratamento da infertilidade em homens. Foi realizada a imunolocalização dos receptores de OTR em amostras de testículo e epidídimo de cães coletadas por cirurgia eletiva de orquiectomia e fixadas em formaldeído tamponado a 10%. Seguiu-se o processamento histológico de rotina, desparafinização, desidratação e recuperação de sítios antigênicos. A incubação foi feita com o anticorpo primário anti-OTR humano policlonal produzido em coelho e o polímero NOVOLINK da Nicherei®. A imunomarcação foi observada nas células mioepiteliais, células da musculatura lisa do estroma e nas células de Leydig no testículo e muito mais intensa nas células da musculatura lisa da região do epidídimo. A expressão dos OTR demonstrou-se maior no epidídimo quando comparada ao testículo. A distribuição dos OTR na imunomarcação e no western blotting reforçam os dados da literatura que sugerem ação da ocitocina no estímulo da contratilidade dos túbulos seminíferos e epidídimo, assim como seu papel na modulação dos níveis de androgênios nestes tecidos estimulando a conversão da testosterona em diidrotestosterona (DHT). Nossos resultados corroboram com a literatura permitindo que o conhecimento da distribuição das OTR no testículo e epidídimo de cães possibilite a utilização terapêutica da ocitocina e novas perspectivas para a área de reprodução e biotecnologia de cães. / The expression of oxytocin receptors (OTR) in the male reproductive tract has been studied in several species with the exception of the dogs. In men, oxytocin (OT) therapy has been successfully used to treat infertility. Therefore, the aim of the present study was to provide new perspectives for the therapeutic use of oxytocin (OT) in reproductive disorders in dogs. We performed the immunolocalization of OTR in samples of testis and epididymides of dogs collected by elective orchiectomy and fixed in 10% buffered formaldehyde. This was followed by routine histological processing, deparaffinization, dehydration and recovery of antigenic sites. Incubation was performed with the human polyclonal anti-OTR primary antibody produced in rabbits and the NOVOLINK polymer (Nichirei, Japan). Oxytocin receptor Immunostaining was observed in myoepithelial, smooth muscle, stromal, and Leydig cells in the testis and, a more intense staining was found in the smooth muscle cells in the region of the epididymis. The distribution of OTR immunostaining and expression on western blotting reinforces the hypothesis proposed by previous studies that oxytocin may stimulate seminiferous tubules and epididymis contractility, and modulate the androgen levels in these tissues, stimulating the conversion of testosterone to dihydrotestosterone (DHT).Results suggest that testicular and epididymal OTR immunolocalization in dogs may be similar to previously studied species. This could indicate that the therapeutic use of oxytocin could be an alternative in infertile dogs, providing new insights to the reproduction and biotechnology in this species.

Orientador: Rita Cássia Menegati Dornelles / Banca: Willian Fernando Zambuzzi / Banca: Márcio Mateus Beloti / Resumo: Ocitocina (OT) é hormônio peptídico sintetizado no hipotálamo e armazenado na neurohipófise. A literatura evidencia atuação anabólica da OT no esqueleto de animais jovens. Em nosso laboratório estamos realizando pesquisas para estudar a ação da OT no metabolismo ósseo, durante o envelhecimento. Analisamos inicialmente o processo de remodelação óssea alveolar em ratas com 24 meses e detectamos ação importante da OT na maior formação óssea nesses animais, o que não foi observado em animais com 12 meses. Esses resultados evidenciaram a necessidade de investigação da ação da OT, visando à compreensão dos mecanismos envolvidos na maior formação óssea em organismos senis, no período caracterizado pela aciclicidade estral (estropausa - 24 meses) comparado com organismos adultos com ciclo estral regular (12 meses). Nesse estudo foi avaliada a influência da idade (12 e 24 meses) e a ação da OT associada a indutores osteogênicos clássicos durante a diferenciação em linhagem osteogênica de células-tronco mesenquimais (CTMs) a partir do estroma da medula óssea de fêmures de ratas Wistar, com 12 e 24 meses. Quatro grupos de cada idade foram formados, sendo: MC (meio de crescimento); MO (meio de crescimento suplementado com indutores osteogênicos); MCO (meio de crescimento + OT); MOO (meio de crescimento suplementado com indutores osteogênicos + OT). O ensaio com vermelho de alizarina demonstrou mineralização biológica a partir do 17º dia no grupo com 12 meses em ambos os grupos osteogênicos (MO e MOO), porém a adição de OT (MOO) promoveu a mineralização a partir do 14º dia. No grupo de 24 meses não foi detectada mineralização em nenhum dia experimental no grupo MO, porém a adição de OT no meio (MOO) promoveu a mineralização a partir do 17º dia. As escalas de expressão... / Abstract: Peripheral oxytocin (OT) has been shown to have direct effects on the skeleton, and to provide stimulus for the activity of osteoblasts, as an anabolic factor affecting bone mass. The effects of OT can vary with age. Here we evaluated the effects of OT on the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells, in 12- and 24-months-old Wistar female rats. Four treatment groups were formed for each age group: control (C) (growth medium); osteogenic medium (OM); control + oxytocin (C+OT) (growth medium + oxytocin) and osteogenic medium + oxytocin (OM+OT). Alizarin Red assay was performed and in cells from 12-month-old rats mineralization was detected on day 17 in OM. However, the addition of OT to osteogenic medium (OM+OT) provided biological mineralization on day 14. In cells from 24-month-old acyclic rats, the OM subgroup showed no mineralization; in the OM+OT subgroup mineralization was detected on day 17. Osterix, matrix protein (bone sialoprotein, osteopontin and osteocalcin) and oxytocin gene expression was lower in the 24-month-old than the 12-month-old group; these proteins were increased by OT. The oxytocin receptor was up-regulated only in the 12-month-old group and PGE2 showed an increase in the OM group than in the OM + OT group in both age groups. These findings suggest that OT shows different, differentiation-dependent actions, and is important in the biological mineralization performed by osteoblasts, mainly in cells of bone marrow mesenchymal stem cells from acyclic 24-month-old rats highlighting oxytocin as a potential therapy for control of osteoporosis. / Mestre

Orientador: Jose Guilherme Cecatti / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-27T16:04:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Aquino_MarciaMariaAuxiliadorade_D.pdf: 18562702 bytes, checksum: 921ed8994e27526428160da3630330bb (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: O objetivo deste estudo foi comparar a efetividade e segurança do misoprostol intravaginal versus ocitocina endovenosa no amadurecimento cervical e indução do parto em gestantes com colo uterino desfavorável e feto vivo. Foi um ensaio clínico controlado e aleatorizado, realizado no Hospital Maternidade Leonor Mendes de Barros, em São Paulo, no período de novembro de 1998 a dezembro de 2000. Foram sujeitos do estudo, 210 gestantes com idade gestacional igualou superior a 37 semanas e membranas íntegras, que necessitaram de indução do trabalho de parto, as quais receberam, de acordo com a randomização, 25'mu'g de misoprostol a cada 4 horas até 8 doses (105 mulheres), ou infusão contínua de ocitocina (2-20mU/min; 105 mulheres). As principais variáveis estudadas foram: período de latência, tempo do início da indução até o parto vaginal, tipo de parto, incidência de parto vaginal em 24 horas, alterações da contratilidade uterina, hipóxia e morbidade neonatal. Os procedimentos estatísticos utilizados foram cálculo de médias, desvio padrão e teste t para as variáveis numéricas contínuas, 'X POT. 2' para as variáveis categóricas e 'X POT. 2' trend para as categóricas ordenadas. Para avaliar período de latência e tempo da indução ao parto vaginal, foi utilizada análise de sobrevivência, através de tabelas de vida, com a significância estatística avaliada pelo método de Kaplan-Meyer através do teste de log-rank. O valor de significância estatística adotado foi 5%. Não houve diferença significativa entre os grupos com relação à indicação da indução, idade, escolaridade, cor, paridade, índice de Bishop inicial e peso do recém-nascido. O índice de cesárea, o período de latência e o tempo da indução ao parto vaginal foram significativamente menores para o grupo do misoprostol. Com relação às alterações da contratilidade uterina, taquissistolia foi significativamente mais freqüente no grupo do misoprostol. Entretanto, quando hipóxia e morbidade neonatal entre os grupos foram estudadas, não se verificou diferença significativa. Misoprostol em dose apropriada e a intervalos de 4 horas é seguro e eficiente para amadurecimento cervical e indução do trabalho de parto / Abstract: The purpose of the current study was to compare the effectiveness and safety of intravaginal misoprostol versus intravenous oxytocin for cervical ripening and labor induction in pregnant women with unripe cervices. It was a randomized controlled trial, performed at Hospital Maternity Leonor Mendes de Barros (HMLMB), São Paulo, Brazil, from November 1998 to December 2000. Two hundred and ten term pregnant women, with intact membranes and with indication for labor induction, were selected. They randomly received 25'mu'g of vaginal misoprostol every 4 hours, not exceeding 8 doses (105 women), or oxytocin in a continuous infusion (105 women). The main outcome variables were: latent period, time from the onset of induction to vaginal delivery, route of delivery, occurrence of vaginal delivery within 24 hours, occurrence of alterations of the uterine tonus, hypoxia and neonatal morbidity. To verify the statistical significance of the differences between the groups, means, standard deviations, Student t, 'X POT. 2' and 'X POT. 2'trend tests were used. To evaluate latent period and time from induction to vaginal delivery, survival analysis was used through life tables and the statistical significance was evaluated by the Kaplan-Meyer method through the log-rank test. The statistical significance considered was 5%. There were no significant differences between the groups concerning condition indicating labor induction, age, literacy, race, parity, initial Bishop Index and weight of newborn. The rate of cesarean section, the latent period and the period from the onset of induction to vaginal delivery were significantly lower for the misoprostol group. Concerning the alteration of uterine tonus, tachysystole was significantly more common in the misoprostol group. However, when hypoxia and neonatal morbidity between the groups were studied, there was no statistical significance. Misoprostol in a proper dosage every 4 hours is safer and more efficient for cervix ripening and labor induction than oxytocin / Doutorado / Tocoginecologia / Doutor em Tocoginecologia

Orientador: Rita Cássia Menegati Dornelles / Banca: Edilson Ervolino / Banca: Vilma Clemi Colli / Resumo: Este estudo teve como objetivo analisar e comparar a ação da ocitocina (OT) no metabolismo ósseo de ratas Wistar cíclicas (12 meses) e acíclicas (18 meses/período de periestropausa). Os animais foram distribuídos em quatro grupos: (1) animais com 12 meses que receberam injeção com veículo NaCl (Veh/12); (2) animais com 12 meses que receberam injeção de OT (Ot / 12); (3) animais com 18 meses que receberam injeção com veículo NaCl (Veh/18); (4) animais com 18 meses que receberam injeção de OT (Ot / 18). Cada grupo foi composto por 8 animais. Os animais receberam duas injeções intraperitoneais de NaCl (0,15 M - grupo controle) ou OT (134 ug / kg - grupo tratado) com 12 horas de intervalo. Força, microarquitetura e biomarcadores ósseos [fosfatase alcalina (FAL) e fosfatase ácida resistente ao tartarato (TRAP)] foram analisados. Imunoistoquímica foi realizada para fator de transcrição relacionado com o Runt 2 (RUNX2), osterix (OSX), osteocalcina (OCN), osteopontina (OPN), proteína óssea morfogenética 2 e 4 (BMP-2/4), periostina (PER), esclerostina (ESC) e TRAP. Os animais que receberam OT demonstraram melhora significante na dosagem plasmática: aumento na FAL dos animais de 12 meses (p < 0,0001) e 18 meses (p = 0,0138); diminuição na TRAP dos animais de Ot / 12 (p = 0,0465) e Ot / 18 (p = 0,0045). Houve melhora nos parâmetros biomecânicos: força máxima (N) do grupo Ot / 18 (p = 0,0003); rigidez óssea (x103N/mm) do grupo Ot / 12 (p = 0,0223) e Ot / 18 (p = 0,0145); microarquitetura... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study aimed to analyze and compare the acting of oxytocin (OT) on bone metabolism of cyclic (12 months) and acyclic Wistar rats (18 months/peri-estropause period). Animals were allocated to four groups: (1) animals with 12 months that received vehicle injection NaCl (Veh/12); (2) animals with 12 months that received OT injection (Ot / 12); (3) animals with 18 months that received vehicle (Veh/18) and (4) animals with 18 months that received OT injection (Ot / 18). Eight animals composed each group. The animals received two intraperitoneal injections of NaCl (0.15 M - control group) or OT (134 ug / kg - treated groups) with 12 hours apart. Bone strength, microarchitecture, and biomarkers [alkaline phosphatase (ALP) and tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP)] were assessed. Immunohistochemistry was performed for runt-related transcription factor 2 (RUNX2), osterix (OSX), osteocalcin (OCN), osteopontin (OPN), bone morphogenetic protein 2 and 4 (BMP- 2/4), periostin (PER), sclerostin (ESC) and TRAP. Animals that received OT showed significant improvements at plasma assay: increase in the ALP from the animals with 12 months (p < 0.0001) and 18 months (p = 0.0138); decrease in the TRAP from the Ot / 12 (p = 0.0465) and Ot / 18 (p = 0.0045). There was improvements at biomechanical parameters: maximum load (N) from the Ot / 18 (p = 0.0003); bone stiffness (x103N/mm) from the Ot / 12 (p = 0.0223) and Ot / 18 (p = 0.0145); cortical bone microarchitecture from the Ot / 18 to Ct... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-04-05Bitstream added on 2014-06-13T18:41:38Z : No. of bitstreams: 1 colli_vc_dr_araca.pdf: 1176842 bytes, checksum: 7b5e4f64a86568d1041b8b5218994711 (MD5) / A ação da ocitocina (OT) como regulador direto da massa óssea foi reportada em roedores jovens e este efeito anabólico foi atribuído à ação periférica deste hormônio. O objetivo deste estudo foi investigar a ação periférica de OT no processo de reparo alveolar de ratas Wistar de 12, 18 e 24 meses. Ratas de 12 meses com ciclo estral normal e ratas de 18 e 24 meses em diestro permanente receberam duas injeções intra-peritoniais (12 horas de intervalo) de salina (NaCl 0,15M – grupos controle) ou OT (134g/Kg – grupos tratados). Sete dias após, o incisivo direito foi extraído e as análises foram realizadas com 28 dias de reparo alveolar (35 dias após administração de salina ou OT). Os resultados plasmáticos de cálcio e fósforo não diferiram entre os grupos. Os marcadores bioquímicos sistêmicos de formação óssea, fosfatase alcalina (FAL) e osteocalcina (OC), não revelaram diferença significativa de valores na comparação entre grupos controle e tratado de 12 meses, porém esta diferença foi significativa para os dois marcadores quando os animais tratados de 18 e 24 meses foram comparados com os respectivos controles. A análise histomorfométrica e a reação de imunohistoquímica contra OC confirmaram estes resultados mostrando que o tratamento com OT, promoveu maior formação óssea nos animais de 18 e 24 meses. O marcador sistêmico de reabsorção óssea, fosfatase ácida resistente ao tartarato (TRAP) não foi estatisticamente diferente entre animais dos grupos controle e tratado de 12 e 18 meses, porém nos de 24 meses este valor foi significativamente menor nos animais tratados indicando diminuição de reabsorção por ação de OT nos animais desta idade. A imunomarcação para TRAP realizada nos cortes alveolares confirmou os... / The action of oxytocin (OT) as a direct regulator of bone mass has been reported in young rodents and this anabolic effect was attributed to the peripheral action of this hormone. The aim of this study was to investigate the peripheral action of OT in the process of alveolar repair of Wistar rats with 12, 18 and 24 months. Rats of 12 months with normal estrous cycle and rats with 18 and 24 months in permanent diestrus received two intra-peritoneal injections (12 hours apart) of saline (NaCl 0.15 M - control group) or OT (134  g / kg - treated groups). Seven days later, the right incisor was extracted and the analyzes were performed with 28 days of alveolar repair (35 days after administration of saline or OT). The plasma results of calcium and phosphorus did not differ between groups. The systemic biochemical bone formation markers, alkaline phosphatase (ALP) and osteocalcin (OC), revealed no significant difference of values in animals of 12 months, but this difference was significant for both markers when treated animals of 18 and 24 months were compared to controls. The histomorphometric analysis and immunohistochemical reaction against osteocalcin confirmed these results showing that treatment with OT, promoted greater bone formation in animals with 18 and 24 months. The systemic marker of bone resorption, tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) was not statistically different between animals of the control and treated groups of 12 and 18 months, but in 24 months the values were significantly lower in treated animals indicating decreased resorption action of OT in animals of this age. The immunostaining for TRAP performed on alveolar cuts confirmed the results of the results of systemic markers in groups of 12 and 24 months... (Complete abstract click electronic access below)

Durante as duas primeiras semanas após o nascimento, os ratos mostram respostas neuroendócrinas diminuídas ao estresse, caracterizando uma fase conhecida como o “período hiporresponsivo ao estresse”. No entanto, é um período sensível do desenvolvimento do sistema nervoso, no qual o animal é suscetível a eventos ambientais, tais como estresse e qualidade do cuidado materno, os quais podem ter efeitos duradouros no indivíduo. No presente estudo, foram investigados os níveis plasmáticos de corticosterona e ocitocina e a atividade monoaminérgica central em ratos neonatos submetidos ao estresse por frio. Também foram investigadas as possíveis influências do gênero e do cuidado materno recebido. No final do 1º dia pós-parto (P0), 60 ratas Wistar tiveram suas ninhadas padronizados em 8 filhotes. Do P1 ao P10, as mães tiveram seus comportamentos maternos analisados de acordo com trabalhos anteriores, nos quais o comportamento de lambida foi tido como uma medida de qualidade de cuidado materno (freqüência média de lambida da população = 5,52 ± 0,19). As mães apresentando as menores e as maiores freqüências de lambida foram selecionadas como Pouco-Cuidadoras (média<4,18, n=12) e Muito- Cuidadoras (média>6,99, n=10), respectivamente. No P13, um par de filhotes foi removido da ninhada e imediatamente sacrificado por decapitação (grupo controle) e outros dois pares foram removidos da ninhada e colocados em um recipiente plástico dentro de uma câmara fria (0ºC, 6 min.), sendo sacrificados 15 e 30 min. após o término do estresse por frio. O sangue do tronco foi colhido para radioimunoensaio de corticosterona e ocitocina plasmáticas. Os encéfalos foram rapidamente removidos para dissecção dos hipotálamos e hipocampos que foram usados na análise das monoaminas e seus metabólitos na Cromatografia Líquida de Alta Performance. A ANOVA de três vias com Post Hoc de Duncan mostrou um efeito do estresse aumentando a corticosterona plasmática (p<0,001), comparada ao período pré-estresse (basal). As filhotes fêmeas de ambos os grupos e os filhotes machos e fêmeas Muito- Cuidados apresentaram níveis maiores de ocitocina plasmática (p<0,05 para ambos), comparados aos Pouco-Cuidados. O estresse também diminuiu a atividade da dopamina (p=0,05), comparado aos grupos controles. O efeito do cuidado materno foi também observado no hipocampo, cuja atividade serotonérgica foi maior em filhotes Muito- Cuidados (p=0,05), comparados a filhotes Pouco-Cuidados, independente do gênero. Conforme relatado anteriormente em outros trabalhos, o estresse aumenta a corticosterona plasmática em filhotes, mesmo no período hiporresponsivo. Os níveis plasmáticos aumentados de ocitocina na prole Muito-Cuidada estão de acordo com evidências a respeito do papel deste hormônio no apego mãe-filhote. A ocitocina aumentada em filhotes fêmeas mostra que diferenças hormonais quanto ao gênero já estão presentes no início da vida de roedores. Interessantemente, o estresse diminuiu a atividade dopaminérgica, o que está de acordo com resultados encontrados em certas áreas hipotalâmicas de animais adultos expostos ao frio. É sugerido que esse efeito seja devido à peculiaridade do estresse por frio, uma vez que as respostas monoaminérgicas podem variar dependendo do estressor usado. O hipocampo foi sensível ao cuidado materno, o qual já foi anteriormente indicado por ser uma importante estrutura encefálica cuja atividade é influenciada por diferentes qualidades de cuidado materno por meio da sinalização serotonérgica. / During the first two weeks after birth the rats show decreased neuroendocrine responses to stress, characterizing a stage known as “stress hyporesponsive period”. However, this is a neurodevelopmental sensitive period in which the animal is susceptible to environmental events, such as stress and the quality of maternal care, which may have long-term effects upon the individual. It was investigated plasma corticosterone and oxytocin, and central monoaminergic activity in neonatal rats submitted to cold stress. It was also investigated the possible influences of gender and maternal care received. In the end of 1° postpartum day (P0), the 60 Wistar dams had their litters culled to 8 pups. From P1 to P10, dams had their maternal behaviour analysed according to previous works, in which licking behaviour was taken as a measure of the quality of maternal care (population’s mean licking frequency= 5.52 ± 0.1863). Dams showing the lower and higher frequencies of licking were selected as Low Licking (mean<4.1814, n=12) and High Licking (mean>6.991, n=10), respectively. At P13, a pair of pups was removed from the litter and immediately sacrificed by decapitation (control group) and other two pairs were removed from the litter and placed in a plastic container inside a cold chamber (0ºC, 6 min), being sacrificed 15 and 30 min after the termination of the cold stress. Blood trunk was taken for plasma corticosterone and oxytocin radioimmunoassay. The brains were quickly removed for dissection of the hypothalami and hippocampi for monoamine and their metabolites High Performance Liquid Chromatography analysis. The three-way ANOVA with Duncan Post Hoc showed an effect of stress increasing plasma corticosterone (p<0.001) compared to the control group (basal situation). The female pups of both groups and High Licked male and female pups showed higher levels of plasma oxytocin (p<0.05 for both). The stress also decreased hypothalamic dopamine turnover (p=0.05) compared to the control groups. The maternal effect was also found in the hippocampus, whose serotonergic activitiy was increased in High Licked pups (p=0.05), independent of gender. As previously reported in other works, stress increases plasma corticosterone in the pups even in the stress hyporesponsive period. The increased plasma oxytocin levels in the High Licked offspring are according to evidences supporting the role of this hormone upon the mother-infant attachment. The increased oxytocin in female pups shows that hormonal gender differences are present in the early life of rodents. Interestingly, it was found that stress decreased the hypothalamic dopaminergic activity, which is according to results found in certain hypothalamic areas of adult animals exposed to cold. It is suggested that this is due to the peculiarity of cold stress, since the monoaminergic responses vary depending on the stressor used. The only central effect of maternal care was found in the hippocampus, which was previously found to be an important brain structure whose activity is influenced by different qualities of maternal care through serotonergic signaling.

Eventos que acontecem aos filhotes, tais como intervenções no ambiente ou alterações no comportamento maternal, durante o período neonatal induzem a alterações neuroendócrinas e comportamentais estáveis, percebidas já na infância e perduram na vida adulta do animal. O modelo de manipulação dos filhotes no período neonatal tem sido estudado com o objetivo de tentar compreender as alterações no ambiente perinatal e suas manifestações, visto que muitas patologias psicológicas podem ser desencadeadas neste período e se manifestar na vida adulta. A principal conseqüência da manipulação neonatal é uma redução da ansiedade a ambientes novos em ratos adultos. Logo após o nascimento, o sistema nervoso central (SNC) ainda está em formação e intervenções ocorridas no período neonatal afetam alguns sistemas neurais. Este trabalho teve como objetivo estudar o efeito da manipulação durante os primeiros dias de vida, em filhotes de rato e suas conseqüências em comportamentos sociais e em sistemas neurais relacionados à ocitocina e vasopressina. A ocitocina, um hormônio neuro-hipofisário cujo papel na reprodução é bem conhecido foi estudado neste trabalho porque tem funções importantes no SNC, principalmente em modular comportamentos, como sexual, social, afetivos e memória social. A vasopressina, conhecida por sua função na manutenção da osmolalidade, também é reconhecida por modular agressividade, o eixo hipotálamo-hipófise-supra-renal, comportamentos sexuais, memória e tem sido estudada em transtornos depressivos. Este estudo comparou vários parâmetros relacionados à produção e à liberação de ocitocina e vasopressina entre ratos manipulados e não-manipulados no período neonatal. Os resultados apresentados neste trabalho mostram uma reduzida interação social em ratos adultos. Ainda pôde-se observar aumento da agressividade nestes animais. Esse efeito comportamental aparentemente é dependente do sexo, pois somente foi detectado em machos. Também foi relatado um menor número de neurônios ocitocinérgicos e um aumento no número dos vasopressinérgicos no hipotálamo de ratos adultos, machos e fêmeas, que sofreram manipulação. Não foi demonstrada diferenças na liberação destes hormônios na resposta ao estresse, nem na expressão total de ocitocina e de vasopressina no núcleo paraventricular de ratos adultos. Entretanto, em filhotes machos e fêmeas, aos 10 dias de idade, pôde-se observar que a manipulação aumenta a secreção plasmática de ocitocina. Conclui-se assim, que, a manipulação no período neonatal interfere negativamente no estabelecimento de relações sociais na vida adulta, podendo ter como causa uma possível alteração nos sistemas ocitocinérgico e vasopressinérgico central nestes.

Eventos que acontecem aos filhotes, tais como intervenções no ambiente ou alterações no comportamento maternal, durante o período neonatal induzem a alterações neuroendócrinas e comportamentais estáveis, percebidas já na infância e perduram na vida adulta do animal. O modelo de manipulação dos filhotes no período neonatal tem sido estudado com o objetivo de tentar compreender as alterações no ambiente perinatal e suas manifestações, visto que muitas patologias psicológicas podem ser desencadeadas neste período e se manifestar na vida adulta. A principal conseqüência da manipulação neonatal é uma redução da ansiedade a ambientes novos em ratos adultos. Logo após o nascimento, o sistema nervoso central (SNC) ainda está em formação e intervenções ocorridas no período neonatal afetam alguns sistemas neurais. Este trabalho teve como objetivo estudar o efeito da manipulação durante os primeiros dias de vida, em filhotes de rato e suas conseqüências em comportamentos sociais e em sistemas neurais relacionados à ocitocina e vasopressina. A ocitocina, um hormônio neuro-hipofisário cujo papel na reprodução é bem conhecido foi estudado neste trabalho porque tem funções importantes no SNC, principalmente em modular comportamentos, como sexual, social, afetivos e memória social. A vasopressina, conhecida por sua função na manutenção da osmolalidade, também é reconhecida por modular agressividade, o eixo hipotálamo-hipófise-supra-renal, comportamentos sexuais, memória e tem sido estudada em transtornos depressivos. Este estudo comparou vários parâmetros relacionados à produção e à liberação de ocitocina e vasopressina entre ratos manipulados e não-manipulados no período neonatal. Os resultados apresentados neste trabalho mostram uma reduzida interação social em ratos adultos. Ainda pôde-se observar aumento da agressividade nestes animais. Esse efeito comportamental aparentemente é dependente do sexo, pois somente foi detectado em machos. Também foi relatado um menor número de neurônios ocitocinérgicos e um aumento no número dos vasopressinérgicos no hipotálamo de ratos adultos, machos e fêmeas, que sofreram manipulação. Não foi demonstrada diferenças na liberação destes hormônios na resposta ao estresse, nem na expressão total de ocitocina e de vasopressina no núcleo paraventricular de ratos adultos. Entretanto, em filhotes machos e fêmeas, aos 10 dias de idade, pôde-se observar que a manipulação aumenta a secreção plasmática de ocitocina. Conclui-se assim, que, a manipulação no período neonatal interfere negativamente no estabelecimento de relações sociais na vida adulta, podendo ter como causa uma possível alteração nos sistemas ocitocinérgico e vasopressinérgico central nestes.

O período inicial da vida dos animais é de fundamental importância para a formação das ligações sociais e o estabelecimento da relação do indivíduo com o ambiente. O contexto do neonato é o aspecto mais importante de estimulação para os ratos recém-nascidos sendo de fundamental importância para a organização de respostas comportamentais durante as etapas precoces do desenvolvimento. O objetivo da presente tese foi estudar os efeitos da manipulação neonatal sobre o desenvolvimento comportamental social no período pós-natal (7º e 11º dia de idade) e juvenil (25º, 30º e 35º dia de idade) e quantidade de receptores de ocitocina no córtex pré-frontal, locus coeruleus e bulbo olfatório (7º e 11º dia de idade). Os resultados demonstraram que a manipulação neonatal induz déficits em comportamentos sociais iniciais revelando ter um efeito determinante sobre o desenvolvimento do comportamento social precoces em ratos. Verificamos uma diminuição no comportamento de agregação social nas duas idades estudadas (7º e 11º dias de idade) e uma diminuição do comportamento de brincadeira nas três idades estudadas (25º 30º e 35º dias de idade). Além disto, verificamos que a manipulação neonatal diminui a expressão de receptores de ocitocina no bulbo olfatório no 30º dia de idade demonstrando que o efeito da manipulação neonatal é prevalente por toda vida do animal. Estes resultados evidenciam a importância da experiência precoce como moduladora das respostas comportamentais sociais ainda no período neonatal e na puberdade. Conclui-se assim, que, a manipulação no período neonatal interfere negativamente no estabelecimento de relações sociais, podendo ter como causa uma possível alteração no sistema ocitocinérgico. / The initial period of life in animals is of fundamental importance for the formation of social bonds and the establishment of relationships between the individual and the environment. The newborn’s context is the most important aspect of stimulation for newborn rats being essential for the organization of behavioral responses during the early stages of development. The aim of this thesis was to study the effects of neonatal handling on the behavioral development during the postnatal (7 and 11 days old) and juvenile periods (25 º, 30 º and 35 days of age), well as the amount of oxytocin receptors in prefrontal cortex, olfactory bulb and locus coeruleus (7 and 11 days of age). The results demonstrated that neonatal handling induces deficits in social behaviors revealing a decisive impact on the development of early social behavior in rats. We observed a decrease social aggregation behavior in both age groups (7 and 11 days of age) and a decrease in play behavior at the three age groups (25, 30 and 35 days old). Furthermore, we demonstrated that neonatal handling decreased the expression of oxytocin receptors in the olfactory bulb at 30 days of age showing that the effects of neonatal manipulation are prevalent throughout the animal's life. These results highlight the importance of early experience as a modulator of social behavioral responses even during the neonatal period and puberty. We conclude therefore that the manipulation during the neonatal period impairs the establishment of social relations, can be caused by a possible change in the oxytocin system.

A ocitocina (OT) é um hormônio peptídico cujas funções clássicas incluem a contração uterina durante o parto e o reflexo de liberação do leite. Trabalhos recentes identificaram a participação da OT em outros processos, como no reconhecimento social, no comportamento maternal e na memória. O objetivo desta tese é identificar com maior precisão os efeitos da administração sistêmica de OT sobre os processos de consolidação e evocação da memória, em especial na tarefa de esquiva inibitória (EI), bem como mapear os mecanismos neurofisiológicos através dos quais a OT sistêmica exerce seus efeitos sobre o sistema nervoso central no processo de evocação da memória. A fim de estudar os efeitos da OT sobre a memória, ratos Wistar machos e fêmeas foram treinados na EI e receberam, imediatamente pós-treino ou 30 minutos pré-teste, ocitocina i.p. ou seu veículo (solução salina). A OT não apresentou efeitos sobre os ratos machos que a receberam imediatamente pós-treino, mas apresentou efeito amnésico sobre os outros três grupos - machos com OT pré-teste, fêmeas com OT pós-treino ou pré-teste. Uma vez que a OT tem conhecidos efeitos ansiolíticos, a tarefa do labirinto em cruz elevado foi utilizada para demonstrar que o efeito amnésico encontrados nesses três grupos não tem relação com os níveis de ansiedade, pois a dose consistentemente amnésica de OT não foi ansiolítica. Nas outras duas tarefas testadas, com caráter menos aversivo e mais espacial que a EI, o labirinto aquático e a habituação ao campo aberto, a OT não apresentou qualquer efeito sobre os ratos machos nelas treinados. Para investigar os mecanismos através dos quais a OT exerce seus efeitos sobre a evocação da memória, ratos Wistar machos receberam, 30 minutos préteste, administrações concomitantes de ocitocina i.p. (ou seu veículo, salina) e de 1) escopolamina (antagonista colinérgico não-seletivo) intra-hipocampal, ou 2) MT3 (antagonista colinérgico seletivo para M4) intra-hipocampal, ou 3) timolol (antagonista beta-adrenérgico) intra-hipocampal, ou 4) dexametasona (glicocorticóide sintético) i.p., ou ainda de veículo, tampão fosfato-salina para administração hipocampal ou salina para administração i.p.. Em todos estes experimentos, o efeito amnésico da OT sobre a evocação foi revertido por uma dose sem efeito próprio da outra droga. Estes resultados indicam que os efeitos amnésicos da ocitocina sobre a evocação da memória na tarefa da esquiva inibitória envolvem a participação dos sistemas colinérgico e adrenérgico no hipocampo e também dos glicocorticóides circulantes.