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Expressão das proteínas osteoprotegerina, RANK e RANKL durante o processo de reparo alveolar em ratos : estudo imunoistoquímico /

Coutinho, Carolina Chiantelli Cláudio. January 2005 (has links)
Resumo: Na dinâmica da reparação óssea os fenômenos de reabsorção e neoformação são dependentes e acoplados. Proteínas efetivamente envolvidas na diferenciação celular determinam ativação ou inibição das atividades que regulam o ganho ou perda de massa óssea. Dentre as proteínas ósseas identificadas e envolvidas na dinâmica óssea podemos destacar a OPG, a RANK e RANKL como marcadores de atividades celulares. O presente trabalho tem como objetivo identificar, nos diferentes períodos da cronologia do processo de reparo alveolar através de técnica imunoistoquímica, a presença das proteínas OPG, RANK e RANKL. Para tanto foram utilizados 60 ratos machos submetidos à exodontia do incisivo superior direito e perfundidos aos 14, 21 e 28 dias pós-operatórios. As hemi-maxilas contendo o alvéolo dental em reparação foram removidas, pósfixadas, descalcificadas em EDTA, crioprotegidas e obtidos cortes longitudinais com 14æm em criostato. Os cortes foram submetidos à reação imunoistoquímica mediante a utilização de anticorpos primários para OPG, RANK e RANKL, como amplificador foi utilizado o sistema avidina-biotina e a diaminobenzidina (DAB) como cromógeno. Os resultados mostram que qualitativamente ocorre um balanço na expressão das proteínas que caracterizam reabsorção e neoformação óssea nos diferentes períodos estudados, onde aos 14 e 21 dias ocorre maior expressão de RANK. Com relação às proteínas OPG e RANKL, observa-se que elas apresentam-se expressas nas células da linhagem osteoblástica de forma similar, sendo que 28 dias é o período de maior expressão destas proteínas. / Abstract: In the bone healing dynamics, the resorption and neoformation processes are dependent. Proteins involved in the cellular differentiation determinate the activation or inhibition of the activities that regulate the gain or loss of bone mass. From all of the identified bone proteins, it may be distinguished the OPG, RANK and RANKL. The present study has the aim to identify, in the different periods of alveolar bone healing chronology, the expression of OPG, RANK and RANKL proteins using the immunohistochemistry methodology. To perform this study, 60 male rats had the right upper incisive extracted and they were perfused at 14, 21 and 28 pos-operative days. The hemimaxilla with the rat extraction socket was removed, pos fixed and decalcified in EDTA. Then, they were cryoprotected and longitudinal slices with 14 ìm thickness were obtained in cryostat. The slices were submitted to immunohistochemistry reaction and the primary antibodies used were against OPG, RANK and RANKL proteins. It was used the avidinbiotin system to amplify the sign and diaminobenzidine was the cromogen. The results show that there is a balance in the expression of the proteins, showing that there is an increase in the expression of RANK at 14 and 21 pos-operative periods. In relation to OPG and RANKL, these proteins presents a similar expression in all of the pos-extraction periods analysed in this study and at 28 days after the extraction there is the greater expression of both proteins. / Orientador: Roberta Okamoto / Coorientador: Roelf Justino Cruz Rizollo / Banca: Idelmo Rangel Garcia Júnior / Banca: Victor Elias Arana-Chavez / Mestre
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Análise do Polimorfismo da Osteoprotegerina (OPG) em Pacientes Diabéticos Associados à Periodontite

LUCENA, Keila Cristina Raposo 10 March 2011 (has links)
Submitted by Lucelia Lucena (lucelia.lucena@ufpe.br) on 2015-03-13T17:46:23Z No. of bitstreams: 2 Dissertação de Mestrado Odontologia Keila Cristina Raposo Lu.pdf: 939357 bytes, checksum: 50d617e01b46b1318fe7269ad743b5af (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-13T17:46:23Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação de Mestrado Odontologia Keila Cristina Raposo Lu.pdf: 939357 bytes, checksum: 50d617e01b46b1318fe7269ad743b5af (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2011-03-10 / CAPES, CNPq / OBJETIVO: Este estudo analisou a presença de polimorfismos na região promotora - 163A/G, -245T/G e -950T/C do gene da osteoprotegerina (OPG), bem como a sua distribuição em pacientes diabéticos e com periodontite quando comparados ao grupo controle. MATERIAIS E MÉTODOS: A pesquisa contou com a participação de 67 indivíduos distribuídos em um grupo teste (n=32), constituído por pacientes diabéticos e com periodontite, e outro controle (n=35) que incluíam pacientes não diabéticos e sem periodontite. Foram incluídos indivíduos entre 22 e 56 anos de idade com, no mínimo, 15 dentes presentes, que não faziam uso de medicação, exceto para a diabetes, e que não apresentavam outra doença sistêmica. Para o diagnóstico da periodontite, foram avaliados os parâmetros clínicos: profundidade de sondagem, sangramento à sondagem e nível de inserção clínica, sendo sondados seis sítios em cada dente presente e diagnosticada a periodontite na presença de dois ou mais sítios com profundidade de sondagem igual ou superior à 4mm. O DNA para a investigação dos polimorfismos da OPG, através da técnica da reação em cadeia de polimerase (PCR) convencional, foi obtido a partir do soro sanguíneo dos participantes. RESULTADOS: Não foi observada associação entre polimorfismos da região promotora do gene da OPG em pacientes com periodontite e diabetes mellitus (p>0,005). O alelo mais freqüente no grupo teste foi o A163(81,2%), seguido pelo T245(75,0%) e pelo T950(54,7%). O alelo T950, possível marcador da osteoclastogênese, não foi associado à condição periodontal dos pacientes diabéticos (p>0,005). CONCLUSÂO: Neste estudo não houve associação entre polimorfismos genéticos da OPG em pacientes diabéticos e com periodontite (p>0,005).
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Estudo Prospectivo da Associação entre Polimorfismos Ligados à Remodelação Óssea e o Insucesso de Implantes Dentários

Texeira, Camila Epitácio Cravo 31 January 2014 (has links)
Submitted by Etelvina Domingos (etelvina.domingos@ufpe.br) on 2015-04-08T17:56:32Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Camila Eptácio Cravo Teixeira.pdf: 619895 bytes, checksum: db1cbb0b8e535192f130230b48c0357f (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-08T17:56:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Camila Eptácio Cravo Teixeira.pdf: 619895 bytes, checksum: db1cbb0b8e535192f130230b48c0357f (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014 / CNPq / Objetivos: Verificar a relação entre polimorfismos genéticos ligados às citocinas da remodelação óssea osteoprotegerina (OPG) e o ligante do ativador do receptor do fator nuclear kappa B (RANKL), relacionar a presença de polimorfismos em OPG e RANKL com o insucesso clínico dos implantes dentários ao longo do tempo e determinar quais combinações de polimorfismos de OPG e RANKL estão associados ao insucesso de implantes dentários. Materiais e métodos: Vinte pacientes de ambos os sexos, maiores de dezoito anos, reabilitados no total com trinta e quatro implantes dentários e avaliados a cada seis meses durante um ano participaram do estudo. Após o exame clínico e radiográfico, os pacientes foram divididos no grupo de insucesso dos implantes, caso um ou mais do seguintes critérios fossem encontrados: mobilidade; queixas subjetivas persistentes; infecção peri-implantar recorrente com supuração; radiolucência contínua ao redor do implante; profundidade de sondagem ≥ 5mm e sangramento à sondagem; e grupo de sucesso, se nenhuma das características acima fossem identificadas. Foi coletado sangue periférico para a análise do polimorfismo das citocinas de OPG e RANKL através da reação em cadeia da polimerase (PCR). Resultados: Não houve diferença estatisticamente significante entre o grupo de falha dos implantes em relação ao genótipo de OPG e RANKL. Conclusão: Os polimorfismos de OPG e RANKL não influenciam no insucesso dos implantes dentários ao longo do tempo de estudo.
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Imunomarcação das proteínas OPG, RANK e RANKL em dentes reimplantados de rato /

Manfrin, Thais Mara. January 2007 (has links)
Resumo: O sistema OPG, RANK e RANKL é uma das mais importantes descobertas da biologia óssea. Essas proteínas regulam as atividades celulares na remodelação do tecido ósseo e na literatura há diversas investigações nos tecidos dentários. No entanto, no reimplante dentário, ainda não foram encontrados relatos. Foi objetivo deste trabalho, avaliar a imunomarcação das proteínas OPG, RANK e RANKL em dentes reimplantados de rato. Um grupo controle foi formado com quatro ratos no qual o reimplante dentário não foi realizado. Vinte e quatro ratos (Rattus norvegicus, albinus) tiveram seu incisivo superior extraído e depois reimplantado formando os seguintes grupos: grupo I - reimplante imediato; grupo II - reimplante tardio sem tratamento e grupo III - reimplante tardio com tratamento endodôntico (ressecção da papila dentária e preenchimento do canal com pasta de hidróxido de cálcio) e tratamento da superfície radicular (raspagem mecânica do ligamento periodontal necrosado e imersão em solução de flúor fosfato acidulado de sódio a 2,5%). Ao final dos períodos experimentais (10 e 60 dias) os ratos foram eutanasiados. Foram obtidos cortes longitudinais parafinados com 6μm de espessura. Os cortes foram submetidos à reação imunoístoquímica mediante a utilização de anticorpos primários para OPG, RANK e RANKL. Os resultados mostraram que a imunomarcação de OPG e RANKL ocorreu em todos os grupos e períodos estudados, muito embora RANKL não tenha sido observada no grupo reimplante imediato aos 60 dias. RANK foi observada somente aos 10 dias de todos os grupos no qual o reimplante foi realizado. A análise qualitativa dos resultados demonstrou que o sistema OPG, RANK e RANKL apresentou marcação evidente no reimplante tardio, sugerindo a efetiva participação no início do processo de reabsorção radicular, uma vez que aos 60 dias a imunomarcação foi discreta. / Abstract: The OPG, RANK and RANKL system is one of the most important discoveries in bone biology. These proteins are key regulators of bone remodeling and in the literature there are several studies of tooth resorption. However, in tooth replantation, reports have not been found. The purpose of this study was to determine the immunolabeling of OPG, RANK and RANKL in replanted teeth in rats, using immunohistochemistry methodology. A control group (no replanted teeth) was formed by four rats. Twenty-four rats (Rattus norvegicus, albinus) were submitted to the extraction of their upper right incisors. The replantation was performed according to the groups below: group I - immediate replantation; group II - delay replantation without treatment and group III - delay replantation with endodontic treatment (extirpation of papilla and the root canal filled with calcium hydroxide) and root surface treatment (periodontal ligament was removed with scalpel and teeth were immersed in 2% acidulated phosphate sodium fluoride). The animals were euthanized at the end of the experimental periods (10 and 60 days). Longitudinal 6μm slices embedded in paraffin were obtained. The slices were submitted to immunohistochemistry reaction by means of the primary antibodies for OPG, RANK and RANKL proteins. The results showed the expression of OPG in all groups and periods. RANKL expression was observed in all groups, except in the immediate replanted teeth group (60 days). RANK expression was observed only at 10 days in all groups which replantation was performed. The qualitative analysis of our findings indicated that the system OPG, RANK and RANKL presented strong expression in delayed replantation, suggesting effective participation at the beginning of root resorption, since at 60 days the immunostained cells were discreet. / Orientador: Wilson Roberto Poi / Coorientador: Roberta Okamoto / Banca: Sônia Regina Panzarini Barioni / Banca: Celso Koogi Sonoda / Banca: Luiz Guilherme Brentegani / Banca: Mirian Marubayashi Hidalgo / Doutor
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Avaliação do reparo ósseo na interface osso/implante em ratas com deficiência de estrógeno tratadas com OPG-Fc humano ou ranelato de estrôncio : análise histométrica, imunoistoquímica, biomecânica, por microtomografia computadorizada e microscopia confocal /

Coléte, Juliana Zorzi. January 2018 (has links)
Orientador: Roberta Okamoto / Coorientador: Idelmo Rangel Garcia Júnior / Banca: Francisley Ávila Souza / Banca: Leonardo Perez Faverani / Banca: Elisa Mattias Sartori / Banca: Gabriel Ramalho Ferreira / Resumo: Avaliar o reparo ósseo periimplantar em ratas submetidas à ovariectomia e tratadas com Ranelato de Estrôncio (625mg/kg/dia) ou OPG-Fc (10mg/Kg/2 vezes por semana). Material e Método: Sessenta e quatro ratas, com peso aproximado de 300 gramas, divididas em 4 grupos experimentais conforme tratamento medicamentoso e análises: SHAM; OVX; OVX/RE; OVX/OPG-Fc. Cada animal recebeu 2 implantes sendo 1 em cada metáfise tibial. A eutanásia foi realizada aos 42 e 60 dias após a instalação dos implantes. Foram realizadas as análises de microtomografia computadorizada (micro CT), biomecânica (torque reverso) histométrica, por microscopia confocal a laser, análise da expressão gênica por PCR em tempo real, histológica e imunoistoquímica. Os resultados histológicos evidenciaram para o grupo OVX-RE aspecto de neoformação óssea melhorada, com trabéculas mais espessas e baixa presença de tecido conjuntivo, comparado ao grupo OVX. Os resultados imunoistoquímicos demonstraram intensa marcação de OPG para o grupo OVX-RE e intensa marcação de RANKL para o grupo OVX. Já a análise por microscopia confocal evidenciou que o grupo OVX-RE obteve marcação superior para vermelho de alizarina comparado aos outros dois grupos (Tukey test - P < 0,05). Para os parâmetros BV/TV, Tb.Th, o grupo OVX/RE apresentou os maiores valores em relação aos demais grupos. Para Tb.Sp o grupo OVX/OPG-Fc apresentou o melhor resultado (OVX: p<0,05 e OVX/RE: p>0,05), e Tb.N, houve diferença estatisticamente significante na compa... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: O bjectives: E valuate the peri - implant bone repair in rats submitted to ovariectomy and treated with Strontium Ranelate (625mg/kg/day) or OPG - Fc (10mg/kg/2 times per week). Material and Method: six ty - four rats weighing about 300 grams, they were divided into 4 experimental groups according with the treatment and analysis: SHAM; OVX; OVX/RE; OVX/OPG - Fc. Each animal received 2 implants, 1 in each tibial metaphysis. Euthanasia was performed 42 and 60 days after implant installation. Computed micro - tomography (mi cro - CT), biomechanical (reverse torque), histometrical, laser confocal microscopy, real - time gene expression ( RT - PCR), histology and immunohistochemiscal analysis. The histological results revealed for the OVX - RE group a better bone neoformation with thick er trabeculae and low connective tissue compared to OVX group. The immunohistochemical results showed intense labeling of OPG to the OVX - RE group and intense labeling of RANKL to the OVX group. Confocal microscopy analysis exhibited that the OVX - RE group o btained a greater red alizarin marking compared to the others two groups (Tukey test - p<0.05). For the parameters BV/TV, Tb.Th, the OVX/RE group showed the larger values in relation to the other groups. For Tb.Sp the OVX/OPG - Fc group presented the best re sult (OVX: p<0.05 and OVX/RE: p> 0.05), and the Tb.N exhibited a statistical significant difference in the combination of results between the OVX and OVX / OPG - Fc groups (p<0.05). For t... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Avaliação da expressão de proteínas reguladoras do metabolismo ósseo na periodontite crônica em fumantes e não fumantes / Evaluation of the expression of bone metabolism regulating proteins on chronic periodontitis in smoking and nonsmoking individuals

Almeida, Aline Ferreira de 10 April 2014 (has links)
Submitted by Fabiano Malheiro (fabianomalheiro22@hotmail.com) on 2017-05-18T14:29:41Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Avaliação da expressão de proteínas reguladoras do metabolismo ósseo na periodontite crônica em fumantes e não fumantes.pdf: 3990055 bytes, checksum: 9a391dd3c2e0c3333e7b27ff29d0a184 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-18T14:29:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Avaliação da expressão de proteínas reguladoras do metabolismo ósseo na periodontite crônica em fumantes e não fumantes.pdf: 3990055 bytes, checksum: 9a391dd3c2e0c3333e7b27ff29d0a184 (MD5) Previous issue date: 2014-04-10 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul - FAPERGS / A periodontite é uma doença crônica que induz resposta imune inata e adaptativa nos tecidos periodontais e pode ser modulada pelo consumo de cigarros. Para avaliar possíveis diferenças na resposta imune foi determinada a expressão dos domínios de oligomerização de ligação de nucleotídeos (Nod1 e Nod2), do ligante do receptor-ativador do fator nuclear kappa B (RANKL), de osteoprotegerina (OPG), de CD20 (marcador de células B), de CD68 (marcador de monócitos/macrófagos), de CD45RO (marcador para células T) e de metaloproteinases de matriz (MMP)-8 e -9 nos tecidos periodontais de fumantes e não fumantes. Os tecidos gengivais foram coletados de pacientes saudáveis (n = 10) e pacientes com periodontite crônica - fumantes (n = 15) e não fumantes (n = 16). As expressões de Nod1, Nod2, RANKL, OPG, CD20, CD68 e CD45RO foram determinadas por reação de imunohistoquímica. A atividade das MMP-2 e MMP-9 foi verificada por zimografia. Sítios com periodontite apresentaram níveis mais elevados de todas as proteínas estudadas, quando comparado aos saudáveis (P < 0,001). No entanto, não foram observadas diferenças entre fumantes e não-fumantes (P > 0,05). Todas as proteínas foram mais expressas na porção apical da bolsa periodontal em comparação com a porção coronária. Considerando a periodontite como uma doença infecciosa, a sua progressão induz a migração de linfócitos T e B e monócitos/macrófagos para o local inflamado, principalmente regiões mais apicais da bolsa perioodntal. Além disso, os receptores de reconhecimento e reguladores de remodelação óssea mostraram-se com expressão aumentada. Não foram observadas diferenças entre fumantes e não fumantes. / Periodontitis is a chronic disease modulated by cigarette consumption inducing innate and adaptive immune responses within the periodontal tissues. To assess these immune responses, we evaluated the expression of nucleotide-binding oligomerization domains (Nod)-1 and -2, receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand (RANKL), osteoprotegerin (OPG), CD20 (B-cells), CD68 (monocytes/macrophages), CD45RO (T-cells) and matrix metalloproteinases (MMP)-8 and -9 in periodontal tissues of smokers and nonsmokers in order to identify possible differences. Gingival tissues were obtained from periodontally health subjects (n=10), and patients with chronic periodontitis smokers (n=15) and nonsmokers (n=16). Nod1, Nod2, RANKL, OPG, CD20, CD68 and CD45RO expression was determined by immunohistochemistry (IHC). MMP-2 and -9 activity were verified by zymography. Periodontitis-affected patients presented higher levels of all studied proteins when compared with healthy sites (P < 0.001). However, no differences were observed between smokers and non-smokers (P > 0.05). All proteins were more expressed at the apical portion of periodontal pocket compared with the coronal portion. Considering periodontitis as an infectious disease, its progression induce the migration of B- and T-cells and monocytes/macrophages to inflamed site. In addition, pattern recognition receptors and bone turnover regulators are overexpressed. No differences were observed between smokers and nonsmokers.
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Co-localização de OPG e RANKL durante o processo de reparo alveolar em ratas ovariectomizadas tratadas com estrógeno ou com raloxifeno /

Luvizuto, Eloá Rodrigues. January 2007 (has links)
Resumo: Objetivos: Avaliar a interferência da ovariectomia (OVX) e seu tratamento com estrógeno (E2) ou com raloxifeno (RLX) no balanço entre RANKL/OPG na cronologia do processo de reparo alveolar em diferentes períodos (7, 14, 21 e 42 dias) através da imunofluorescência por co-localização e análise histomorfométrica. Materiais e Métodos: Os grupos estudados foram: sham, OVX, OVX+E2, OVX+RLX. Após obtenção dos cortes histológicos corados em hematoxilina e eosina e as reações de co-localização por imunofluorescência de RANKL/OPG, os resultados foram avaliados quantitativamente. Resultados:Aos 7 dias: menor neoformação de trabéculas ósseas,o grupo OVX+RLX apresentou menor valor médio. O grupo OVX apresentou o maior turnover ósseo representado pelas co-localizações de OPG e RANKL. Aos 14 dias o grupo OVX+RLX apresentou menor formação óssea. O grupo sham apresentou intensa atividade celular representada pela alta imunorreatividade à OPG e RANKL observada nas células. Aos 21 dias os grupos experimentais apresentaram maiores níveis de ossificação; não apresentaram diferença estatística. O grupo OVX apresentou o menor turnover ósseo. Aos 42 dias houve diferença estatística na quantidade de formação óssea entre o grupo sham comparado aos demais grupos (p<0,05) e o grupo OVX apresentou o maior turnover ósseo. Conclusão: A ovariectomia atrasou o processo de reparo alveolar e alterou o turnover ósseo. A reposição do estrógeno e o tratamento com raloxifeno melhoraram as respostas, mas não restabeleceram completamente os valores da histometria e da colocalização do grupo sham. / Abstract: Objectives: To evaluate the influence of the ovariectomy (OVX), and its treatments with estrogen (E2) or with raloxifene (RLX) on the RANKL/OPG balance during the periods in the chronology of the alveolar wound healing process (7, 14, 21 end 42 pos operative days) in female rats by means of immunocolocalization and histomorphometric analysis. Methods: The studied groups were: sham, OVX, OVX with E2 replacement, OVX with (RLX) treatment. After obtaining the histological tissue pieces colored in hematoxilin and eosin and the immunocolocalization reaction for RANKL and OPG, the results were quantitatively evaluated. Results: At 7 days, was observed lesser neoformed trabeculae bone, the smaller medium value was observed to the OVX+RLX group. The OPG and RANKL immunocolocalization showed larger bone tunover to OVX group. At 14 days there was a larger quantity of neoformed trabeculae bone, the smaller medium value was observed to the OVX+RLX group, the sham group presented an intense cellular activity. At 21 days the experimental groups had a greater ossification levels; no statistical significance was observed. The OVX group had the lowest bone turnover. At 42 days there were statistically differences on the quantity of ossification within sham group compared to the other groups (p<0.05). The OVX group showed the largest bone turnover. Conclusions: Ovariectomy delays the alveolar wound healing process and interferes with the bone turnover. The E2 replacement and the RLX treatment improved the healing but not enough to reach histomorphometric and immunocolocalization valours of the sham group. / Orientador: Roberta Okamoto / Coorientador: Rita Cássia Menegati Dornelles / Banca: Wilson roberto Poi / Banca: Teresa Lucia Lamano Carvalho / Mestre
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Expressão das proteínas osteoprotegerina, RANK e RANKL durante o processo de reparo alveolar em ratos: estudo imunoistoquímico

Coutinho, Carolina Chiantelli Cláudio [UNESP] 19 December 2005 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-12-19Bitstream added on 2014-06-13T18:19:49Z : No. of bitstreams: 1 coutinho_ccc_me_araca.pdf: 114919 bytes, checksum: 49f558e8cba145ffdabb2e45dc62ada3 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Na dinâmica da reparação óssea os fenômenos de reabsorção e neoformação são dependentes e acoplados. Proteínas efetivamente envolvidas na diferenciação celular determinam ativação ou inibição das atividades que regulam o ganho ou perda de massa óssea. Dentre as proteínas ósseas identificadas e envolvidas na dinâmica óssea podemos destacar a OPG, a RANK e RANKL como marcadores de atividades celulares. O presente trabalho tem como objetivo identificar, nos diferentes períodos da cronologia do processo de reparo alveolar através de técnica imunoistoquímica, a presença das proteínas OPG, RANK e RANKL. Para tanto foram utilizados 60 ratos machos submetidos à exodontia do incisivo superior direito e perfundidos aos 14, 21 e 28 dias pós-operatórios. As hemi-maxilas contendo o alvéolo dental em reparação foram removidas, pósfixadas, descalcificadas em EDTA, crioprotegidas e obtidos cortes longitudinais com 14æm em criostato. Os cortes foram submetidos à reação imunoistoquímica mediante a utilização de anticorpos primários para OPG, RANK e RANKL, como amplificador foi utilizado o sistema avidina-biotina e a diaminobenzidina (DAB) como cromógeno. Os resultados mostram que qualitativamente ocorre um balanço na expressão das proteínas que caracterizam reabsorção e neoformação óssea nos diferentes períodos estudados, onde aos 14 e 21 dias ocorre maior expressão de RANK. Com relação às proteínas OPG e RANKL, observa-se que elas apresentam-se expressas nas células da linhagem osteoblástica de forma similar, sendo que 28 dias é o período de maior expressão destas proteínas. / In the bone healing dynamics, the resorption and neoformation processes are dependent. Proteins involved in the cellular differentiation determinate the activation or inhibition of the activities that regulate the gain or loss of bone mass. From all of the identified bone proteins, it may be distinguished the OPG, RANK and RANKL. The present study has the aim to identify, in the different periods of alveolar bone healing chronology, the expression of OPG, RANK and RANKL proteins using the immunohistochemistry methodology. To perform this study, 60 male rats had the right upper incisive extracted and they were perfused at 14, 21 and 28 pos-operative days. The hemimaxilla with the rat extraction socket was removed, pos fixed and decalcified in EDTA. Then, they were cryoprotected and longitudinal slices with 14 ìm thickness were obtained in cryostat. The slices were submitted to immunohistochemistry reaction and the primary antibodies used were against OPG, RANK and RANKL proteins. It was used the avidinbiotin system to amplify the sign and diaminobenzidine was the cromogen. The results show that there is a balance in the expression of the proteins, showing that there is an increase in the expression of RANK at 14 and 21 pos-operative periods. In relation to OPG and RANKL, these proteins presents a similar expression in all of the pos-extraction periods analysed in this study and at 28 days after the extraction there is the greater expression of both proteins.
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Efeitos da perda de peso sobre o metabolismo ósseo de pacientes submetidos à cirurgia bariátrica de Bypass Gástrico em Y de Roux: efeitos da cirurgia bariátrica sobre o metabolismo

Biagioni, Maria Fernanda Giovanetti [UNESP] 19 February 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2016-06-07T17:12:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-19. Added 1 bitstream(s) on 2016-06-07T17:16:36Z : No. of bitstreams: 1 000863888.pdf: 1762312 bytes, checksum: 33f6a96aaa02314d08de10f973bdf6e4 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Introdução: apesar do sucesso quanto à perda de peso e controle das comorbidades, as cirurgias bariátricas, como o Bypass Gástrico em Y de Roux (BGYR), promovem alterações no metabolismo hormonal e do tecido adiposo, as quais podem se associar a maior remodelação e perda ósseas. Entre os possíveis mecanismos envolvidos estão a influência de adipocinas sobre a modulação da expressão do ligante do receptor ativador do fator nuclear kappa β (RANKL) e da osteoprotegerina (OPG) e o aumento da expressão de esclerostina, em resposta à redução da carga mecânica. Objetivos: avaliar o efeito da perda de peso e das alterações hormonais, após o BGYR, sobre o metabolismo ósseo. Casuística e métodos: foram avaliadas mulheres com obesidade graus II e III, no menacme, submetidas ao BGYR no Hospital das Clínicas de Botucatu, antes e após três, 12 e 24 meses de cirurgia, quanto aos dados antropométricos e laboratoriais [paratormônio (PTH), fosfatase alcalina total (FA total) e fração óssea (BSAP), Interligadores C-Terminais do colágeno Tipo I (CTX), 25 hidroxi-vitamina D (25-OH-Vit D), leptina, adiponectina, RANKL, OPG e esclerostina]. Resultados: observou-se redução de leptina [34,4 (14,7; 51,9) para 22,5 (1,9; 52,7) ng/mL] e OPG [3,6 (1,1; 11,5) para 3,4 (1,5; 6) pmol/L] após o procedimento, com aumento de adiponectina [7,4 (1,7; 18,4) para 13,8 (3,0; 34,6) μg/mL], CTX [0,2 (0,1; 2,2) para 0,6 (0,4; 6,0) ng/mL], RANKL [0,1 (0,0; 0,5) para 0,3 (0,0; 2,0)pmol/L] e esclerostina [21,7 (3,2; 75,1) para 34,8 (6,4; 80,5) pmol/L], após três meses de acompanhamento. A BSAP também aumentou, após 12 meses de procedimento [10,1 (5,4; 18,9) para 13,9 (6,9; 30,2) μg/mL] (p<0,005). O CTX apresentou correlação inversa com o peso (r= -0,451), MG (r= -0,418) e MLG (r= -0,417). Houve correlação positiva entre o CTX e a FA total após 12 meses de BGYR e entre a BSAP e o PTH aos 24 meses de pós-operatório (r= 0,490). Esse marcador... / Introduction: despite the success at weight loss and control of comorbidities, bariatric surgeries such as gastric bypass Roux-Y (RYGB), promote changes in hormone metabolism and adipose tissue, which may be associated with increased remodeling and bone loss. Among the possible mechanisms involved are the adipokines influence on the modulation of the expression of the receptor activator of nuclear factor kappa β ligand (RANKL), and osteoprotegerin (OPG), and increased expression of sclerostin in response to the reduction of the mechanical load. Objectives: evaluate the effect of weight loss and hormonal changes following the RYGB, on the bone metabolism. Methods: women were evaluated with obesity grades II and III in premenopausal, submitted to RYGB at the Botucatu School of Medicine University Hospital (HC-FMB), prior, three, 12 and 24 months after the procedure, as the anthropometric and laboratory data [parathyroid hormone (PTH), total alkaline phosphatase (FA total) and bone fraction (BSAP), interconnectors collagen C-terminal type I (CTX), 25-hydroxy vitamin D (25-OH Vit-D), leptin, adiponectin, RANKL, OPG and sclerostin]. Results: leptin reduction was observed [34.4 (14.7; 51.9) to 22.5 (1.9; 52.7) ng / ml] and OPG [3,6 (1,1; 11 5) to 3.4 (1.5, 6) pmol / L] after the procedure, with an increase of adiponectin [7.4 (1.7; 18.4) to 13.8 (3.0, 34, 6) ug / ml] CTX [0.2 (0.1, 2.2) to 0.6 (0.4, 6.0) ng / ml] RANKL [0.1 (0.0, 0 5) to 0.3 (0.0; 2.0) pmol / L] and sclerostin [21.7 (3.2; 75.1) to 34.8 (6.4; 80.5) pmol / L], after three months of follow-up. The BSAP also increased after 12 months of the procedure [10.1 (5.4, 18.9) to 13.9 (6.9, 30.2) mg / mL] (p <0.005). The CTX showed an inverse correlation with weight (r = -0.451), BF (r = -0.418) and FFM (r = -0.417). There was a positive correlation between CTX and total FA 12 months after RYGB and between the BSAP and PTH at 24 months after surgery (r = 0.490). This marker was negatively ...
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Efeitos da perda de peso sobre o metabolismo ósseo de pacientes submetidos à cirurgia bariátrica de Bypass Gástrico em Y de Roux : efeitos da cirurgia bariátrica sobre o metabolismo /

Biagioni, Maria Fernanda Giovanetti. January 2015 (has links)
Orientador: Gláucia Maria Ferreira da Silva Mazeto / Coorientador: Adriana Lúcia Mendes / Banca: Célia Regina Nogueira / Banca: Vânia dos Santos Nunes / Banca: José Gilberto Henriques Vieira / Banca: Marise Lazaretti Castro / Resumo: Introdução: apesar do sucesso quanto à perda de peso e controle das comorbidades, as cirurgias bariátricas, como o Bypass Gástrico em Y de Roux (BGYR), promovem alterações no metabolismo hormonal e do tecido adiposo, as quais podem se associar a maior remodelação e perda ósseas. Entre os possíveis mecanismos envolvidos estão a influência de adipocinas sobre a modulação da expressão do ligante do receptor ativador do fator nuclear kappa β (RANKL) e da osteoprotegerina (OPG) e o aumento da expressão de esclerostina, em resposta à redução da carga mecânica. Objetivos: avaliar o efeito da perda de peso e das alterações hormonais, após o BGYR, sobre o metabolismo ósseo. Casuística e métodos: foram avaliadas mulheres com obesidade graus II e III, no menacme, submetidas ao BGYR no Hospital das Clínicas de Botucatu, antes e após três, 12 e 24 meses de cirurgia, quanto aos dados antropométricos e laboratoriais [paratormônio (PTH), fosfatase alcalina total (FA total) e fração óssea (BSAP), Interligadores C-Terminais do colágeno Tipo I (CTX), 25 hidroxi-vitamina D (25-OH-Vit D), leptina, adiponectina, RANKL, OPG e esclerostina]. Resultados: observou-se redução de leptina [34,4 (14,7; 51,9) para 22,5 (1,9; 52,7) ng/mL] e OPG [3,6 (1,1; 11,5) para 3,4 (1,5; 6) pmol/L] após o procedimento, com aumento de adiponectina [7,4 (1,7; 18,4) para 13,8 (3,0; 34,6) μg/mL], CTX [0,2 (0,1; 2,2) para 0,6 (0,4; 6,0) ng/mL], RANKL [0,1 (0,0; 0,5) para 0,3 (0,0; 2,0)pmol/L] e esclerostina [21,7 (3,2; 75,1) para 34,8 (6,4; 80,5) pmol/L], após três meses de acompanhamento. A BSAP também aumentou, após 12 meses de procedimento [10,1 (5,4; 18,9) para 13,9 (6,9; 30,2) μg/mL] (p<0,005). O CTX apresentou correlação inversa com o peso (r= -0,451), MG (r= -0,418) e MLG (r= -0,417). Houve correlação positiva entre o CTX e a FA total após 12 meses de BGYR e entre a BSAP e o PTH aos 24 meses de pós-operatório (r= 0,490). Esse marcador... / Abstract: Introduction: despite the success at weight loss and control of comorbidities, bariatric surgeries such as gastric bypass Roux-Y (RYGB), promote changes in hormone metabolism and adipose tissue, which may be associated with increased remodeling and bone loss. Among the possible mechanisms involved are the adipokines influence on the modulation of the expression of the receptor activator of nuclear factor kappa β ligand (RANKL), and osteoprotegerin (OPG), and increased expression of sclerostin in response to the reduction of the mechanical load. Objectives: evaluate the effect of weight loss and hormonal changes following the RYGB, on the bone metabolism. Methods: women were evaluated with obesity grades II and III in premenopausal, submitted to RYGB at the Botucatu School of Medicine University Hospital (HC-FMB), prior, three, 12 and 24 months after the procedure, as the anthropometric and laboratory data [parathyroid hormone (PTH), total alkaline phosphatase (FA total) and bone fraction (BSAP), interconnectors collagen C-terminal type I (CTX), 25-hydroxy vitamin D (25-OH Vit-D), leptin, adiponectin, RANKL, OPG and sclerostin]. Results: leptin reduction was observed [34.4 (14.7; 51.9) to 22.5 (1.9; 52.7) ng / ml] and OPG [3,6 (1,1; 11 5) to 3.4 (1.5, 6) pmol / L] after the procedure, with an increase of adiponectin [7.4 (1.7; 18.4) to 13.8 (3.0, 34, 6) ug / ml] CTX [0.2 (0.1, 2.2) to 0.6 (0.4, 6.0) ng / ml] RANKL [0.1 (0.0, 0 5) to 0.3 (0.0; 2.0) pmol / L] and sclerostin [21.7 (3.2; 75.1) to 34.8 (6.4; 80.5) pmol / L], after three months of follow-up. The BSAP also increased after 12 months of the procedure [10.1 (5.4, 18.9) to 13.9 (6.9, 30.2) mg / mL] (p <0.005). The CTX showed an inverse correlation with weight (r = -0.451), BF (r = -0.418) and FFM (r = -0.417). There was a positive correlation between CTX and total FA 12 months after RYGB and between the BSAP and PTH at 24 months after surgery (r = 0.490). This marker was negatively ... / Doutor

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