Orientador: Maria José Tavares Ranzani Paiva / Coorientador: Claudinei da Cruz / Banca: Eduardo Makoto Onaka / Banca: Márcia Rita Fernandes Machado / Banca: Marco Antonio de Andrade Belo / Banca: Gilson Pereira / Resumo: O uso de fármacos no tratamento de doenças dos animais de criação na aquicultura é uma prática comum, devido ao manejo intensivo e a ocorrência de patógenos que podem causar perdas na produtividade. Objetivou-se avaliar quatro fármacos, a enrofloxacina (ENRO), o toltrazuril (TOL); o florfenicol (FFC) e o thiamethoxan (TH) no controle de parasitos e bactérias em pacu (Piaractus mesopotamicus), avaliar as variáveis histológicas e hematológicas após o tratamento e avaliar a toxicidade destes fármacos para o organismo alvo Piaractus mesopotamicus e para os bioindicadores: mato grosso (Hyphessobrycon eques); Lemna minor; Pomacea canaliculata e Daphnia magna. Nos ensaios de toxicidade os organismos foram aclimatados em salas de bioensaio de acordo com as normas vigentes para cada organismo e foram expostos às concentrações nominais em sistema estático. A eficácia do TOL no controle de Ichthyophthirius multifiliis, Trichodina heterodentata e Anacanthorus penilabiatus e da ENRO, de Aeromonas sp e Streptococcus sp foi avaliada em micro e mesocosmo. A eficácia do TH no controle de A. penilabiatus foi prospectada em laboratório e microcosmo e associado ao FFC, no controle de Aeromonas sp e Streptococcus sp, em mesocosmo. Após a eficácia em mesocosmo foi coletado sangue, para a análise hematológica e tecidos, para análise histopatológica. O FFC, a ENRO e o TH são pouco tóxicos e o TOL, moderadamente tóxico, pois o biondicador L. minor foi o end point para o FFC; o caramujo, para a ENRO e o mato grosso, para o TOL e TH. O TOL é eficaz no controle de I. multifiliis e T. heterodentata, o TH, contra A. penilabiatus e a ENRO e o FFC, Aeromonas sp e Streptococcus sp. Os fármacos não causam alterações hematológicas e histopatológicas que comprometam o desempenho zootécnico dos animais, sendo moléculas potenciais para obter registro brasileiro no tratamento de P. mesopotamicus / Abstract: The therapeutics use in the fish disease treatment is a common practice, due at intensive management and pathogens appearance that can cause high mortality rate. The objectives were to evaluate four drugs: enrofloxacine (ENRO), toltrazuril (TOL); florfenicol (FFC) and thiamethoxan (TH) in the pathogens control in pacu (Piaractus mesopotamicus), to evaluate the hemathological and histopathological variables after treatment and to evaluate the toxicity these drugs for target organism Piaractus mesopotamicus and for bioindicators: mato grosso (Hyphessobrycon eques); Lemna minor; Pomacea canaliculata and Daphnia magna. The organisms were acclimated in room bioassay with controlled temperature according to standard to each one. They were exposed at nominal concentrations in static system. The efficacy of TOL in the Ichthyophthirius multifiliis, Trichodina heterodentata and Anacanthorus penilabiatus control and ENRO, of Aeromonas sp and Streptococcus sp was evaluated in micro and mesocosm condition. The efficacy of TH in the A. penilabiatus control was prospected in laboratory and microcosmo and associated with FFC, in Aeromonas sp e Streptococcus sp control, in mesocosm. After the efficacy in mesocosm the blood was collected for hemathology analysis and tissues for histopatology. FFC, ENRO and TH are few toxics and TOL, moderately toxic, because the biondicator L. minor was the end point for FFC; the snail, for ENRO and the mato grosso, for TOL and TH. TOL is effectiveness in I. multifiliis and T. heterodentata control, o TH in A. penilabiatus and ENRO and FFC, Aeromonas sp and Streptococcus sp. The drugs cause no hemathological and histophatological changes that compromises the development of fish, and they are potentials molecules to get the register in treatment of P. mesopotamicus / Doutor

Orientador: Joaquim Gonçalves Machado Neto / Banca: Elisabeth Criscuolo Urbinati / Banca: Antonio de Queiroz Neto / Resumo: Os objetivos desse trabalho foram avaliar a toxicidade aguda e os efeitos subagudos hematológicos, hormonal, bioquímicos e biométricos do inseticida methyl parathion em pacu. Os testes de avaliação da toxicidade aguda de methyl parathion foram realizados com alevinos de pacu, Piaractus mesopotamicus expostos em dois substratos: água mole e água de uma represa de cultivo de peixes do CAUNESP, em Jaboticabal. Os efeitos subagudos foram avaliados em peixes com peso corpóreo entre 200 a 300 g. O methyl parathion foi aplicado nas concentrações 0,0; 0,5; 1,0 e 2,0 mg/L de água de abastecimento em quatro caixas de 500 L de água por concentração em exposição de 24 horas com interrupção do fluxo de ar de 400 ml/min.. Foi realizado um exame histopatológico de fragmentos de brânquias de exemplares deste mesmo lote de pacu onde foi verificado a presença dos parasitas Henneguya sp e Ichthyophthirius mutifilis. Aos 3, 8 e 15 dias após a exposição ao inseticida foram coletados sangue dos peixes e realizou-se a contagem dos números de eritrócitos, leucócitos, trombócitos, hemoglobina, hematócrito, e quantificação de cortisol, índices hepatossomáticos e volumes corpusculares. O methyl parathion foi mais tóxico para o pacu em água mole do que em água de represa, cujos valores de CL50-96h calculados foram de 4,06 mg/L em água mole e 5,15 mg/L em água de represa. Não houve efeitos significativos das concentrações do inseticida nos parâmetros hematológicos e bioquímicos avaliados nos peixes. Ocorreu aumento significativo do nível de cortisol, devido ao efeito estressor do methyl parathion, inibindo determinadas quantidades da enzima acetilcolinesterase. Os aumentos significativos nas contagens dos eritrócitos e hemoglobina e a diminuição do VCM no sangue do pacu estão diretamente relacionado com a ação dos glicocorticoides produzidos pela elevação das... / Abstract: The acute toxicity of methyl parathion in pacu fingerlings (Piaractus mesopotamicus) subjected to soft and dam water was tested. The experiment was conducted in a controlled system according to IBAMA standards (1987) and CETESB tests (1979) of acute toxicity to fish, with some modifications. We verified a linear increase in pacu mortality with the increase of the insecticide dose in water. Methyl parathion was more toxic to pacu in soft than in dam water. The estimated values of methyl parathion Cl50, to pacu in soft and dam water were 4,06 mg/L and 5,15 mg/L, respectively / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-22Bitstream added on 2014-06-13T19:18:49Z : No. of bitstreams: 1 biller_jd_me_jabo.pdf: 539636 bytes, checksum: 70b4d818490130aa0f68b0c74c41caef (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O uso de 1,3 beta-glucano tem se mostrado eficaz na imunoestimulação e diminuição da mortalidade por patógenos oportunistas. Assim, para avaliar as respostas da administração oral de 1,3 beta-glucano em pacu, Piaractus mesopotamicus, frente à inoculação com Aeromonas hydrophila, o experimento foi realizado em um delineamento inteiramente casualizado com 18 tratamentos em esquema fatorial 3x3x2, sendo três níveis de 1,3 beta-glucano na ração (0%, 0,1% e 1%), três tempos de alimentação (7, 15 e 30 dias) e duas condições de inoculação com A. hydrophila (antes e depois), com três repetições (aquários) por tratamento. Ao final de cada período de administração, peixes de cada tratamento foram desafiados com cepas de A. hydrophila para avaliação do efeito protetor do -glucano. Esses peixes ficaram sob observação para determinação da mortalidade, e no 7º dia após a inoculação bacteriana, foi realizada uma amostragem de material biológico adicional nos peixes sobreviventes de todos os dezoito tratamentos. A mortalidade observada após sete dias de alimentação foi maior no grupo controle e menor nos peixes alimentados com 0,1% de 1,3 beta- glucano. Após a inoculação da A. hydrophila, células leucocitárias (linfócitos, monócitos, célula granulocítica), e trombócitos apresentaram-se aumentados, bem como os níveis de proteína total, principalmente nos peixes alimentados por sete dias, e a atividade respiratória dos leucócitos- burst oxidativo - sendo superior nos peixes arraçoados com 1% de 1,3 beta-glucano por 30 dias. Assim, o 1,3 beta-glucano é um imuno-estimulante capaz de promover melhora nas respostas fisiológicas e imunológicas dos peixes frente à inoculação de A. hydrophila. / The beta-glucan applications have been shown effective immunostimulant, producing good protection to infections. Thus, the present work evaluated the effects of beta-glucan oral administration and the susceptibility for Aeromonas hydrophila infection in Piaractus mesopotamicus. The experiment was carried out with eighteen treatments, with 3 beta-glucan levels (0, 0,1% e 1%) and 3 administration period (7, 15 e 30 days) and two A. hydrophila inoculations conditions (before and after). At the end of each period, fish from each treatment were challenged with A. hydrophila. Mortality and clinical signs were observed every 12 hours during fifteen days, and in the 7th day pos infestation, it has been done an additional sampling in the survivors of all eighteen treatments. The observed mortality after 7 days feeding was higher in control group than fish fed 0,1% beta-glucan. There were increasing leukocytes cells number (lymphocytes, monocytes, granulocytes cells) and trombocytes, as well a total protein in plasma level increased in fish fed for 7 days. And the superoxide produced by leukocytes - respiratory burst, was higher after bacteria inoculation, but highest in fish fed with 1% beta-glucan by 30 days. Therefore, beta-glucan exhibited ability to improve resistance for A. hydrophila infection in P. mesopotamicus.

Orientador: Maeli Dal Pai / Resumo: Períodos de restrição alimentar são comuns em peixes. Nessa condição, ocorre a degradação do tecido muscular e a produção de espécies reativas de oxigênio (ROS), danosas aos seres vivos. Nesse sentido, a adição de antioxidantes como o ácido ascórbico (AA) na alimentação, pode resultar na neutralização e prevenção dos danos ocasionados pelas ROS. O objetivo desse trabalho foi avaliar os impactos da suplementação de AA no músculo esquelético de pacus submetidos ao jejum. Pacus juvenis foram divididos nos grupos: Control (C; alimentação contínua - 200 mg/kg de AA), Fasting (F; 15 dias de jejum) e três grupos realimentados por 30 dias após o jejum: Low (L-AA; 100 mg/kg de AA), Balanced (B-AA; 200 mg/kg de AA) e High supplementation (H-AA; 400 mg/kg de AA). Amostras musculares foram coletadas após jejum (15 dias) e realimentação (6 horas, 15 e 30 dias). Fibras musculares foram mensuradas e separadas em classes de acordo com seu diâmetro; análises bioquímicas foram realizadas para avaliar a atividade de enzimas antioxidantes. A expressão de genes envolvidos nas vias de anabolismo, catabolismo, miogênese e metabolismo oxidativo foram avaliadas por RT-qPCR. Além disso, análises in vitro foram realizadas para comprovar o efeito direto desse protocolo em células musculares. Após o período de jejum, ocorreu a diminuição no diâmetro das fibras e na expressão de genes anabólicos, além de aumento na expressão de genes catabólicos no grupo F. Após um curto período de realimentação (6 horas)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Fasting periods commonly occur throughout the fish’s life. During this condition, there is an increase in muscle degradation and reactive oxygen species (ROS) production, which can cause cell disturbances. Antioxidants, such as ascorbic acid (AA), can neutralize and prevent ROS’s damage. Thus, we aimed to evaluate the AA supplementation impacts in the skeletal muscle of pacu after a fasting period. Pacu juvenile were grouped in Control (C; continuous feeding - 200 mg/kg of AA), Fasting (F; 15 days of fasting) and three refeeding groups after fasting: Low (L-AA; 100 mg/kg of AA), Balanced (B-AA; 200 mg/kg of AA) and High-supplementation (H-AA; 400 mg/kg of AA). Muscle samples were collected after fasting (15 days) and refeeding (6 hours, 15 and 30 days). Muscle fibers were measured and grouped in diameter classes. Biochemistry analyses were performed to evaluate antioxidant enzymes activity. Genes related to anabolism, catabolism, myogenesis and oxidative metabolism were analyzed by RT-qPCR. Besides, in vitro analyzes were performed to evaluate the direct AA effect’s in muscle cells. After fasting, a decrease in fiber diameter and anabolic genes expression, besides an increase in catabolic genes was observed in F group. In the first moment after refeeding (6 hours), the anabolic and myogenic genes expression increased in the H-AA. After 15 days, the L-AA group presented a general decrease in gene expression, while the H-AA had an increase in myogenic genes expression and recov... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

A ingestão de lipídios e seus constituintes, os ácidos graxos, são essenciais na manutenção do crescimento, na eficiência alimentar, na higidez do organismo, no funcionamento adequado dos rins e das brânquias e na reprodução. Este estudo visa identificar a influência exercida pelos lipídios dietéticos sobre as variáveis hematológicas e desempenho imunológico de pacus Piaractus mesopotamicus expostos à ação bacteriana. Juvenis de pacu (14,4 ± 0,4g) foram alimentados com dietas contendo níveis crescentes (20, 40, 60, 80, 100%) de óleo de linhaça (OL), óleo de girassol (OG) e sebo bovino (SB), ricas em ômega-3, ômega-6 e gordura saturada, respectivamente e, posteriormente, comparadas a uma dieta isenta destas fontes e a uma ração comercial. Os resultados obtidos foram submetidos a uma análise das variâncias, rearranjados em grupos e analisados sob o teste de Dunnett. Os níveis dietéticos de 20% de óleo de linhaça, 80% de óleo de girassol ou 80% de sebo bovino condicionaram as melhores taxas de desempenho zootécnico; o uso de 80% de óleo de girassol foi o mais adequado para ganho de peso (67,51±4,950g), taxa de conversão alimentar (1,05±0,088) e taxa de crescimento específico (2,19±0,085%), assim como para o aumento no número de linfócitos (1.964,13 ± 413,550), concomitante ao aumento dos leucócitos (1.986,00 ± 256,700), o que conferiu maior resistência aos animais, quando expostos à bactéria Aeromonas hydrophila. / The intake of lipids and its components, the fatty acids, are essential for proper growth, feed efficiency, health, appropriate kidney and gills function and reproduction performance. This study aims at identifying effects of dietary lipids on hematological variables and immunological performance of pacu Piaractus mesopotamicus exposed to bacterial challenges. Performance of juvenile pacu (14.4 ± 0.4 g) fed a diet with increasing levels (20, 40, 60, 80, 100 %) of linseed oil (LO); sunflower oil (80) and beef tallow (BT), rich in omega-3, omega-6 fatty acids, and saturated fat, respectively, was contrasted to the performance of fish fed diets containing soybean oil as lipid source, and a commercial aquafeed. Recorded results were subjected to ANOVA, grouped and submitted to Dunnett\'s test. Dietary levels of 20 % LO, 80% 80 or 80% beef tallow yielded the best growth performance; fish fed 80% 80 had the best weight gain (67.51 ± 4.95 g), best feed conversion ratio (1.05 :t 0.10), specific growth rate (2.10 ± 0.10 %), and also increased number of Iymphocytes (1,964.13 ± 413.55) concomitantly to increased number of leukocytes (1,986.00 ± 256.70), which also elicited the best immunological performance to fish challenged with Aeromonas hydrophila.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O oxigênio é fundamental para os vertebrados. No entanto, variações dos níveis de oxigênio na água podem provocar estresse oxidante em peixes porque privação de oxigênio seguida de reoxigenação forma espécies reativas de oxigênio (ERO) em células. Níveis intracelulares de ERO aumentados favorecem que moléculas de proteínas, fosfolipídios e ácidos nucleicos sofram alterações, vindo a prejudicar muitas funções celulares. No Pantanal, habitat do pacu, o nível de oxigênio varia circadianamente na água das lagoas rasas que acabam isoladas dos rios na seca. O pacu evoluiu sob a pressão contínua da exposição aos efeitos prejudiciais das ERO causados pelos pulsos de inundação. A melatonina, uma indolamina produzida na glândula pineal, influencia os níveis de atividade de enzimas antioxidantes que reduzem ERO, além de ser capaz de doar elétrons ou captar radicais livres de forma não enzimática. Os níveis de melatonina no pacu são mais altos no verão e menores no inverno. Isoenzimas de glutationa S-transferases que conjugam o tripetídeo glutationa com o 4-hidroxinonenal, aldeído derivado da peroxidação de ácidos graxos por ERO, são importantes para evitar alteração funcional de proteínas por ligação do 4-hidroxinonenal à sua estrutura. Neste trabalho procuramos relação entre estresse oxidante, níveis de atividades de glutationa S-transferase e melatonina, para estabelecer se a melatonina ajudaria pacus a superar os efeitos deletérios das espécies reativas de oxigênio. Ensaiamos atividades de isoenzimas de glutationa S-transferases no citosol de fígado de pacus mantidos em normoxia, hipoxia, reoxigenação e hiperoxia no inverno e no verão. Medimos o efeito da melatonina in vitro e in vivo sobre as atividades de isoenzimas de glutationa S-transferase. Medimos os efeitos do estresse oxidante sobre a ligação do 4-hidroxinonenal com proteínas nos fígados de pacus tratados com melatonina. Somente as isoenzimas que conjugam 4-hidroxinonenal com glutationa mostraram menor atividade no inverno em relação ao verão; outras isoenzimas de glutationa S-transferases não alteram suas atividades sazonalmente. In vitro a melatonina não alterou a atividade de isoenzimas de glutationa S-transferase que conjugam o 4-hidroxinonenal, mas inibiu outras isoenzimas de glutationa S-transferase. In vivo a melatonina aumentou a atividade encontrada no inverno das isoenzimas que conjugam o 4-hidroxinonenal para os níveis do verão. A ligação de 4-hidroxinonenal com proteínas foi menor em pacus inoculados com melatonina. Nossos resultados mostram que a melatonina pode influenciar os efeitos de ERO em fígado de pacus. Ficou claro que a melatonina do plasma mantém os níveis de atividade conjugadora de 4-hidroxinonenal do fígado em pacus e que a baixa produção de melatonina no inverno não é adequada para a conjugação do 4-hidroxinonenal em fígado de pacus. / Oxygen is vital for vertebrates. However, changes in the levels of dissolved oxygen in water might cause oxidative stress in fishes because the shortage of oxygen followed by reoxygenation originates reactive oxygen species (ROS) inside cells. Higher intracellular levels of ROS favor alterations of proteins, phospholipids and nucleic acid molecules, which result in impairment of many cell functions. In Pantanal, the pacus habitat, circadian variation of the oxygen levels occurs in water of the shallow lagoons that ended up isolated from the rivers along the dry season. Pacu has evolved under the pressure of continuous exposition to harmful effects of ROS caused by the annual inundation pulses. Melatonin, an indolamine produced by the pineal gland, influences the levels of activity of antioxidant enzymes that reduce ROS, and is capable of donating electrons or scavenge free radicals nonenzymatically. Pacus melatonin levels are higher during summer than in winter. Glutathione S-transferases isoenzymes that catalyze the conjugation of the tripeptide glutathione with 4-hydroxynonenal, an aldehyde derived from peroxidation of fat acids by ROS, are important to avoid functional alterations of proteins consequential to the binding of 4-hydroxynonenal to their structures. In this work, we searched for facts that linked oxidative stress, levels of activity of glutathione S-transferase and melatonin, in order to establish whether melatonin could help pacus to overcome the pernicious effects of reactive oxygen species. We carried out assays of glutathione S-transferases in liver cytosol of pacus kept under normoxia, hypoxia, reoxygenation and hyperoxia, in the summer and in the winter. We measured the effect of melatonin in vitro and in vivo on isoenzymes of glutathione S-transferases. We measured the effects of oxidative stress on the binding of 4-hydroxynonenal to proteins in liver of pacu treated with melatonin. Only isoenzymes that conjugate 4-hydroxynonenal with glutathione showed less activity during the winter in comparison to the summer; other isoenzymes did not have their activities changed seasonally. In vitro, melatonin did not change the activity of glutathione S-transferases isoenzymes that conjugate 4-hydroxynonenal, but inhibited other isoenzymes of glutathione S-transferase. In vivo, melatonin enhanced the liver activity of the glutathione S-transferase that conjugate 4-hydroxynonenal found in winter up to the levels found in summer. The binding of 4-hydroxynonenal to proteins was lower in liver cytosol from pacus injected with melatonin. Our findings show that melatonin can influence the effects of ROS in liver of pacu. It became evident that plasma melatonin maintains the liver levels of the conjugating activity of 4-hydroxynonenal and that the lower production of melatonin during winter is not adequate to the conjugation of 4-hydroxynonenal.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:21:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3121.pdf: 1512799 bytes, checksum: 42c9ef7778750b57451bc4c5d9615c17 (MD5) Previous issue date: 2010-05-28 / Universidade Federal de Minas Gerais / Parasitosis in fishes is a relevant problem in aquaculture. Besides, the organophosphate trichlorfon (2,2,2-trichloro-1-hydroxyethyl phosphonate) is amongst the most used medicine in farming of fishes. Due to trichlorfon use in fish parasitosis control, including pacu (Piaractus mesopotamicus), in brazilian and worldwide aquaculture, it is necessary to study the effects of this organophosphorus compound related to toxicity and metabolic biochemical parameters. The aim of this work was to evaluate trichlorfon acute toxicity (LC(I)50;96h) to P. mesopotamicus and histopathological effects of this exposition; detect metabolic changes in juvenile pacu (P. mesopotamicus) exposed to trichlorfon sub-lethal concentration (10% LC (I) 50;96h); and evaluate metabolic changes after seven and 14 days of recovery. Estimated (LC (I)50;96h) of trichlorfon to alevin was 0.04mg/L; to juvenile fish was 0.07 mgL-1. Histological evaluation showed adaptive alterations, aiming to limit xenobiotic entrance; liver alterations aimed an increase in blood influx, consequently increasing detoxication; kidney alterations indicate excretion increase and skin presented cromatophore migration to superficial folds. After sub-lethal exposure, pacu presented a decrease in hemoglobin, after seven days recovery it was recorded a decrease in MCH and after 14 days recovery analysis showed a decrease in hematocrit. Metabolic alterations observed after sub-lethal expositions and recovery indicated efforts aiming to homeostatic maintenance trough energy production. Brain and muscle AChE activity decreased, regaining the control values after 14 day of recovery in xenobiotic free water. / As doenças causadas por parasitas em peixes são um problema relevante na aqüicultura. Assim, os organofosforados (OPs), incluindo o triclorfon [dimetil (2,2,2 tricloro- 1 hidroxietil) fosfonato] são utilizados para controle de ectoparasitos na aquicultura atual. Devido à utilização do triclorfon no controle de parasitoses em peixes, incluindo o pacu (Piaractus mesopotamicus) na aqüicultura brasileira e mundial, justifica-se a necessidade de ampla abordagem de estudo deste organofosforado relacionada à sua toxicidade e efeitos nos parâmetros bioquímicos metabólicos. Assim, os objetivos deste trabalho foram: determinar a concentração letal (CL (I)50;96h) do triclorfon para o pacu e avaliar os efeitos histológicos desta exposição; determinar e avaliar suas respostas metabólicas após exposição sub-letal ao triclorfon (10% da CL (I)50;96h); e avaliar suas respostas metabólicas após recuperação de 7 e 14 dias. A CL (I)50;96h encontrada para alevinos de pacu foi de 0,04 mgL-1 de triclorfon, e para jovens foi de 0,07 mgL-1 de triclorfon. A avaliação histológica branquial revelou alterações adaptativas, visando diminuir a entrada do xenobiótico; no fígado houve alterações de aumento de fluxo sanguíneo, visando maior eficiência de desintoxicação; no rim as alterações foram indicativas de aumento de excreção e na pele houve migração de cromatóforos para as camadas mais superficiais. Após a exposição sub-letal, o pacu apresentou redução da hemoglobina total, enquanto que após a recuperação de 7 dias houve redução na HCM e após a recuperação de 14 dias ocorreu redução do hematócrito. As alterações metabólicas observadas nos três períodos analisados indicam esforços a fim de manutenção homeostática através de produção de energia. A atividade da AChE cerebral e muscular apresentou queda, sendo recuperada após os 14 dias em água livre do xenobiótico.

Orientador: Elisabeth Criscuolo Urbinati / Banca: João Batista Kochenborger Fernandes / Banca: Luis Henrique Montrezor / Banca: Osmar Angela Cantelmo / Banca: Monica Yumi Tsuzuki / Resumo: Juvenis de pacu (Piaractus mesopotamicus) com peso inicial de 27,6 ± 1,44 g foram alimentados com três dietas isoprotéicas e isoenergéticas com inclusão de carboidrato. A principal fonte de carboidrato utilizado foi o amido de milho pré-gelatinizado com três níveis de inclusão: baixo (16,6%), alto (38,8%) e controle (22,4%) por 60 dias. O estudo avaliou parâmetros de crescimento, desempenho produtivo e metabolismo energético do pacu. Ao término de 60 dias de alimentação, os peixes foram amostrados 1, 3, 6, 9, 12 e 24 horas após a oferta da 1° alimentação do dia para cálculo dos índices estomaco-somático e intestinosomático cheio. Na coleta de 24 horas após a alimentação, o sangue dos animais foi retirado para análise de glicemia, ácidos graxos livres, triglicerídeos, colesterol e proteína total. Nos tecidos foram determinados a concentração de glicogênio e lipídio total no fígado e lipídio total no músculo. Fígado e gordura visceral foram pesados para cálculo dos índices: hepatosomático e índice gorduro-viscero-somático. Para avaliação da digestibilidade das dietas, foi realizado um segundo experimento com 225 pacus (peso médio de 40 ± 5,0 g). Os peixes foram alimentados por 5 dias com as dietas experimentais acrescidas de 1% de óxido de cromo como marcador inerte. Os níveis de amido da dieta não afetaram o ganho em peso e taxa de crescimento específico dos animais. Os peixes alimentados com a dieta de maior nível de amido apresentaram melhor conversão alimentar (1,14 ± 0,02), taxa de eficiência protéica (3,31 ± 0,05), alta digestibilidade da proteína (93,3 ± 0,8%) e amido da dieta (>99%). O tempo de trânsito do alimento diferiu (p<0,05) somente 9 horas após alimentação, quando os peixes alimentados com a dieta de maior nível de amido tinham maior conteúdo de alimento no estômago. Os parâmetros sanguíneos ...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Juvenile pacu (Piaractus mesopotamicus) weighing 27.6 ± 1.44 g were fed with three isoproteic and isoenergetic diets containing different levels of carbohydrates. The main source of carbohydrate (CHO) was pre-gelatinized starch in three levels of inclusion in diet: low (16.6%), high (38.8%) and control (22.4%), offered during 60 days. The study evaluated the growth performance and energetic metabolism of pacu. At the end of the experimental period, fish were sampled at 1, 3, 6, 9, 12 e 24 h after the first feeding of to day to calculate the full stomach-somatic and intestine-somatic indexes. Twenty-four h after feeding, blood was drawn for glucose, free fat acids, triglicerids, cholesterol and total protein determination. Hepatic glycogen and lipids and muscle lipid were determined. Liver and visceral fat were weighed for hepatic-somatic and fat indexes calculation. A second experiment using 225 pacu (40 ± 5.0 g) was carried out to evaluate the diets digestibility. Fish were fed during 5 days with the experimental diets with chromium oxide 1% as marker. Starch dietary levels did not influence the weight gain and growth rater of fish. Fish fed with the 38.8% CHO presented better feed conversion (1.14 ± 0.02), protein efficiency rate (3.31 ± 0.05), high digestibility of protein (93.3 ± 0.8%) and starch digestibility (>99%). The food transit time differed (p<0.05) only at 9 hours after feeding, when fish fed with 38.8% CHO diet had more food in the stomach. Blood (glucose, free fat acids, triglicerids, cholesterol and total protein) and tissue (hepatic glycogen and muscle lipid) indicators were not influenced by diets but there was an increase of the lipogenic activity of liver, increasing the hepatic somatic index, and visceral fat accumulation in fish fed 16.6% and 22.4% ....(Complete abstract, click electronic access below) / Doutor

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O oxigênio é fundamental para os vertebrados. No entanto, variações dos níveis de oxigênio na água podem provocar estresse oxidante em peixes porque privação de oxigênio seguida de reoxigenação forma espécies reativas de oxigênio (ERO) em células. Níveis intracelulares de ERO aumentados favorecem que moléculas de proteínas, fosfolipídios e ácidos nucleicos sofram alterações, vindo a prejudicar muitas funções celulares. No Pantanal, habitat do pacu, o nível de oxigênio varia circadianamente na água das lagoas rasas que acabam isoladas dos rios na seca. O pacu evoluiu sob a pressão contínua da exposição aos efeitos prejudiciais das ERO causados pelos pulsos de inundação. A melatonina, uma indolamina produzida na glândula pineal, influencia os níveis de atividade de enzimas antioxidantes que reduzem ERO, além de ser capaz de doar elétrons ou captar radicais livres de forma não enzimática. Os níveis de melatonina no pacu são mais altos no verão e menores no inverno. Isoenzimas de glutationa S-transferases que conjugam o tripetídeo glutationa com o 4-hidroxinonenal, aldeído derivado da peroxidação de ácidos graxos por ERO, são importantes para evitar alteração funcional de proteínas por ligação do 4-hidroxinonenal à sua estrutura. Neste trabalho procuramos relação entre estresse oxidante, níveis de atividades de glutationa S-transferase e melatonina, para estabelecer se a melatonina ajudaria pacus a superar os efeitos deletérios das espécies reativas de oxigênio. Ensaiamos atividades de isoenzimas de glutationa S-transferases no citosol de fígado de pacus mantidos em normoxia, hipoxia, reoxigenação e hiperoxia no inverno e no verão. Medimos o efeito da melatonina in vitro e in vivo sobre as atividades de isoenzimas de glutationa S-transferase. Medimos os efeitos do estresse oxidante sobre a ligação do 4-hidroxinonenal com proteínas nos fígados de pacus tratados com melatonina. Somente as isoenzimas que conjugam 4-hidroxinonenal com glutationa mostraram menor atividade no inverno em relação ao verão; outras isoenzimas de glutationa S-transferases não alteram suas atividades sazonalmente. In vitro a melatonina não alterou a atividade de isoenzimas de glutationa S-transferase que conjugam o 4-hidroxinonenal, mas inibiu outras isoenzimas de glutationa S-transferase. In vivo a melatonina aumentou a atividade encontrada no inverno das isoenzimas que conjugam o 4-hidroxinonenal para os níveis do verão. A ligação de 4-hidroxinonenal com proteínas foi menor em pacus inoculados com melatonina. Nossos resultados mostram que a melatonina pode influenciar os efeitos de ERO em fígado de pacus. Ficou claro que a melatonina do plasma mantém os níveis de atividade conjugadora de 4-hidroxinonenal do fígado em pacus e que a baixa produção de melatonina no inverno não é adequada para a conjugação do 4-hidroxinonenal em fígado de pacus. / Oxygen is vital for vertebrates. However, changes in the levels of dissolved oxygen in water might cause oxidative stress in fishes because the shortage of oxygen followed by reoxygenation originates reactive oxygen species (ROS) inside cells. Higher intracellular levels of ROS favor alterations of proteins, phospholipids and nucleic acid molecules, which result in impairment of many cell functions. In Pantanal, the pacus habitat, circadian variation of the oxygen levels occurs in water of the shallow lagoons that ended up isolated from the rivers along the dry season. Pacu has evolved under the pressure of continuous exposition to harmful effects of ROS caused by the annual inundation pulses. Melatonin, an indolamine produced by the pineal gland, influences the levels of activity of antioxidant enzymes that reduce ROS, and is capable of donating electrons or scavenge free radicals nonenzymatically. Pacus melatonin levels are higher during summer than in winter. Glutathione S-transferases isoenzymes that catalyze the conjugation of the tripeptide glutathione with 4-hydroxynonenal, an aldehyde derived from peroxidation of fat acids by ROS, are important to avoid functional alterations of proteins consequential to the binding of 4-hydroxynonenal to their structures. In this work, we searched for facts that linked oxidative stress, levels of activity of glutathione S-transferase and melatonin, in order to establish whether melatonin could help pacus to overcome the pernicious effects of reactive oxygen species. We carried out assays of glutathione S-transferases in liver cytosol of pacus kept under normoxia, hypoxia, reoxygenation and hyperoxia, in the summer and in the winter. We measured the effect of melatonin in vitro and in vivo on isoenzymes of glutathione S-transferases. We measured the effects of oxidative stress on the binding of 4-hydroxynonenal to proteins in liver of pacu treated with melatonin. Only isoenzymes that conjugate 4-hydroxynonenal with glutathione showed less activity during the winter in comparison to the summer; other isoenzymes did not have their activities changed seasonally. In vitro, melatonin did not change the activity of glutathione S-transferases isoenzymes that conjugate 4-hydroxynonenal, but inhibited other isoenzymes of glutathione S-transferase. In vivo, melatonin enhanced the liver activity of the glutathione S-transferase that conjugate 4-hydroxynonenal found in winter up to the levels found in summer. The binding of 4-hydroxynonenal to proteins was lower in liver cytosol from pacus injected with melatonin. Our findings show that melatonin can influence the effects of ROS in liver of pacu. It became evident that plasma melatonin maintains the liver levels of the conjugating activity of 4-hydroxynonenal and that the lower production of melatonin during winter is not adequate to the conjugation of 4-hydroxynonenal.

A ingestão de lipídios e seus constituintes, os ácidos graxos, são essenciais na manutenção do crescimento, na eficiência alimentar, na higidez do organismo, no funcionamento adequado dos rins e das brânquias e na reprodução. Este estudo visa identificar a influência exercida pelos lipídios dietéticos sobre as variáveis hematológicas e desempenho imunológico de pacus Piaractus mesopotamicus expostos à ação bacteriana. Juvenis de pacu (14,4 ± 0,4g) foram alimentados com dietas contendo níveis crescentes (20, 40, 60, 80, 100%) de óleo de linhaça (OL), óleo de girassol (OG) e sebo bovino (SB), ricas em ômega-3, ômega-6 e gordura saturada, respectivamente e, posteriormente, comparadas a uma dieta isenta destas fontes e a uma ração comercial. Os resultados obtidos foram submetidos a uma análise das variâncias, rearranjados em grupos e analisados sob o teste de Dunnett. Os níveis dietéticos de 20% de óleo de linhaça, 80% de óleo de girassol ou 80% de sebo bovino condicionaram as melhores taxas de desempenho zootécnico; o uso de 80% de óleo de girassol foi o mais adequado para ganho de peso (67,51±4,950g), taxa de conversão alimentar (1,05±0,088) e taxa de crescimento específico (2,19±0,085%), assim como para o aumento no número de linfócitos (1.964,13 ± 413,550), concomitante ao aumento dos leucócitos (1.986,00 ± 256,700), o que conferiu maior resistência aos animais, quando expostos à bactéria Aeromonas hydrophila. / The intake of lipids and its components, the fatty acids, are essential for proper growth, feed efficiency, health, appropriate kidney and gills function and reproduction performance. This study aims at identifying effects of dietary lipids on hematological variables and immunological performance of pacu Piaractus mesopotamicus exposed to bacterial challenges. Performance of juvenile pacu (14.4 ± 0.4 g) fed a diet with increasing levels (20, 40, 60, 80, 100 %) of linseed oil (LO); sunflower oil (80) and beef tallow (BT), rich in omega-3, omega-6 fatty acids, and saturated fat, respectively, was contrasted to the performance of fish fed diets containing soybean oil as lipid source, and a commercial aquafeed. Recorded results were subjected to ANOVA, grouped and submitted to Dunnett\'s test. Dietary levels of 20 % LO, 80% 80 or 80% beef tallow yielded the best growth performance; fish fed 80% 80 had the best weight gain (67.51 ± 4.95 g), best feed conversion ratio (1.05 :t 0.10), specific growth rate (2.10 ± 0.10 %), and also increased number of Iymphocytes (1,964.13 ± 413.55) concomitantly to increased number of leukocytes (1,986.00 ± 256.70), which also elicited the best immunological performance to fish challenged with Aeromonas hydrophila.