O mecanismo mais importante para a homeostase do K+ é o controle da secreção de K+ no néfron distal. O objetivo deste trabalho foi avaliar em animais submetidos à depleção de K+ por sete dias, a expressão de AT1R da ATRAP e algumas vias de sinalização como as WNK1, KS-WNK1 e WNK4. Estes animais apresentaram menor ganho de peso corporal, hipertrofia renal, isostenúria, e redução da FE de Na+ e K+, com aumento de Ang II, sem alterar a aldosterona. Verificamos aumento da expressão de AT1R mais acentuado em lisado celular e o aumento de ATRAP foram iguais nas frações de lisado total, membranas total e apical. Não detectamos variação nos níveis de RNAm dessas proteínas. A depleção de K+ induziu a fosforilação de c-Src, ERK1/2 e p38, bem como aumento dos RNAm de WNK1 e WNK4, e redução do RNAm de KS-WNK1. Considerando nossos resultados, a depleção aumenta a ação da Ang II, provavelmente devido à hiperexpressão de AT1R, sem diminuir a expressão de ATRAP. A hiperexpressão de WNK1 e WNK4, associada à redução da KS-WNK1. / The most important mechanism for the K+ homeostasis on varying the content of this ion in the diet is the control of K+ secretion in the distal nephron. Since angiotensin II (Ang II) is an important modulator of K+ secretion, the aim of this study was to evaluate, in animals subjected to K+ depletion for seven days, the expression level of angiotensin type 1 receptor (AT1R) and the AT1R-associated protein (ATRAP). Moreover, it was intended to evaluate the possible activation of some signaling pathways triggered by Ang II via AT1R. We also looked for evaluate the expression of ion transporters and \'\'with no lysine kinases\'\' (WNKs) WNK1, KS-WNK1 and WNK4 in these animals, since some of the effects of angiotensin II in the distal tubular segments are mediated by these kinases. The animals subjected to K+ depletion have showed lower body weight gain, renal hypertrophy, marked polyuria, isosthenuria, and significant reduction in FE Na+ and K+, and increased plasmatic Ang II levels, without changing the aldosterone levels. We found that the expression of ATRAP and AT1R is increased in all cell fractions analyzed, with the highest rise in the AT1R in total cell lysate and ATRAP increase was not significant in the apical membrane. We did not detect changes in mRNA levels of these proteins, suggesting no changes in the transcription rate. The mRNA levels of Na+/H+ exchanger isoform 3 (NHE3) and Cl-/Formate (CFEX), abundant in proximal tubuleswere not altered as well. Regarding signaling pathways, K+ depletion induced c-Src, ERK1/2 and p38 phosphorylation, as well as a significant increase in WNK1 and WNK4 mRNA , and reduced KS- WNK1 mRNA. Considering our results, K+ depletion increases Ang II action in renal tissue, probably due to the overexpression of AT1R, and that effect is not associated to the decreased expression of ATRAP. However, the total cell lysate AT1R increasing, was greater than that of ATRAP. The overexpression of WNK1 and WNK4 associated with (to) the reduction of KS - WNK1 appears to be important for K+ secretion inhibition in K+-depleted animals. The inhibitory activity of WNK4 on ROMK channels depends on its dephosphorylation, which depends on the activation of c-Src. The activation of c-Src was evidenced by the increase in K+ -depleted animals phosphorylation.

Trabalho de investigação desenvolvido na Delft University of Technology / Tese de Mestrado Integrado. Engenharia do Ambiente. Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto. 2012

The recommendations of fertilization have as main purpose to facilitate and aid the decisions about application of fertilizers necessary to obtain yields of maximum economic efficiency. Pointing out the importance of the numerical tables indications, should be also important the crops and area history, the history of fertilizations and calcareous use, the yields obtained and expected, the farmer social-economic conditions, the management system and soil type, the area climatic conditions and the environmental impact of the technology used. With the no-till (SPD) adoption in Paraguay, questions appeared about the use of fertilizers technical recommendations, especially of phosphorus (P) and potassium (K), considering that this tables had been elaborated having as base researches accomplished with experiments carried out in soil conventional tillage system (SC). This research aimed to generate recommendations of phosphate and potassium fertilization through experiments of calibration in seven places in the Região Oriental of Paraguay. The experiments, in no-till, were carried out since 2003 to 2006, in soils with different texture and initial levels of fertility, in representative areas of grains crops production and in areas with known history of no-tillage adoption in the country. In the Misiones Department experiments were carried in two areas (one of medium and another of low fertility, both with the same texture); in the Itapúa Department in two areas (one of high and another of low fertility, with different texture); in the Alto Paraná Department (two areas of low fertility, but with the same texture) and one of low fertility in the Amambay Department. The experimental design used was randomized blocks, with subdivided plots and three replicates. For phosphorus, the main plots were fertilized with five doses of P (0, 50, 100, 200 e 400 kg ha-1 of P2O5) with the purpose to create levels of fertility and seeded with wheat later. In the sub plots were applied four doses of P (0, 40, 80 e 120 kg ha-1 of P2O5) during corn and soybean seeding, aiming to obtain the response curve. For potassium, the treatments were five doses of K2O (0, 25, 50, 75 and 100 kg ha-1), with applications in soil surface before the crops seeding. The doses were applied every planting, respecting the same amounts and in the same plots, which varied in the second phase of the experiments, for the winter of 2005 and summer of 2005-2006. To obtain more points in the response curves in the project second phase, an application of 120 kg of phosphorus was done in the plots with level 200 kg of P2O5, and in the plots of K2O were applied 25 kg of K2O. Were sampled ten soil samples by plot in the depth of 0 to 10 cm before seeding and after crop harvest. The P build level was more influenced by P start level and by areas fertilization history than soil texture. In the soils with low P level and with no fertilization history was necessary to apply 35,4 kg of P2O5 ha-1 to increase 1 mg dm-3 of P in the soil. On the other hand, to soils with intermediate to high level and history of previous fertilizer application was necessary to apply 20,3 kg of P2O5 ha-1 to increase 1 mg dm-3 of P in the soil. Was necessary to add 27,85 kg of P2O5 ha-1 to increase 1 mg dm-3 of P in the soil, when the distinction between soils with or without history of fertilization was not done. To reach the P critical level in the soil, the addition of 210 kg ha-1 of P2O5 is recommended for class "very low", 105 kg ha-1 for class "low" and 30 kg ha-1 for class "medium". The critical level of P was higher than that established by the ROLAS, and the influence of the soil texture was smaller than that previewed by the ROLAS. The critical level for soils with 410-600 g kg- 1 of clay (Class 1) was 12 mg dm-3 and for soils of 210 a 400 g kg-1 of clay (Class 2) was 15 mg dm-3. The critical level determined for soybean, corn and wheat crops were of 15, 10 and 12 mg dm-3, respectively. The K critical level determined by Mehlich-1 for wheat, corn and soybean under no-tillage in the Paraguay is 75 mg dm-3. To reach the K critical level in the soil, the addition of 250 kg ha-1 of K2O is recommended for class "very low", 125 kg ha-1 for class "low" and 40 kg ha-1 for class "medium". It is necessary 5 kg ha-1 of K2O to increase one mg dm-3 of its level in the soil. In K2O soil levels upper 150 mg dm-3, the plants presents low probability of answer to potassium fertilizers application. Smaller relative and absolute yields were obtained with wheat after soybean than after corn. / As recomendações de fertilização têm como principal finalidade facilitar e auxiliar na tomada de decisão de aplicação de fertilizantes, que se necessita para obtenção de rendimentos de máxima eficiência econômica. Salientando a importância das indicações numéricas das tabelas, devemos também dar importância ao histórico de cultivo e da área, o histórico de adubação e calagem, as produtividades obtidas e a esperadas, as condições sócioeconômicas do produtor rural, o sistema de manejo e tipo de solo, o clima da região e o impacto ambiental da tecnologia a ser utilizada. No Paraguai surgiram questionamentos com a adoção do SPD quando se referia a utilização das recomendações técnicas de fertilizantes, especialmente de fósforo (P) e potássio (K), considerando que as mesmas haviam sido elaboradas tendo como base pesquisas realizadas com experimentos conduzidos no sistema convencional (SC) de preparo do solo. O objetivo deste trabalho foi a obtenção de tabelas próprias para a recomendação fosfatada e potássica das principais culturas sob sistema de plantio direto no Paraguai. Os experimentos foram conduzidos desde 2003 a 2006, em solos com diferentes texturas e níveis iniciais de fertilidade, em regiões representativas de produção de grãos e em locais com histórico de adoção do SPD do país. No Departamento de Misiones conduziu-se experimentos em dois locais (um de média e outro de baixa fertilidade inicial com a mesma textura); no Departamento de Itapúa em dois locais (um de alta e o outro de baixa fertilidade inicial com diferente textura); no Departamento de Alto Paraná (dois locais de baixa fertilidade, porém com diferente textura) e um no Departamento de Amambay de baixa fertilidade. O delineamento experimental foi de blocos ao acaso em parcelas subdivididas com três repetições. Para o fósforo as parcelas principais foram adubadas com cinco doses de P (0, 50, 100, 200 e 400 kg ha-1 de P2O5) visando a criação de níveis de fertilidade e semeadas posteriomente com trigo. Nas subparcelas foram aplicadas quatro doses de P (0, 40, 80 e 120 kg ha-1 de P2O5) no momento da implantação do milho e da soja visando a obtenção de curva de resposta. E para o potássio os tratamentos consistiram de cinco doses de K2O (0, 25, 50, 75 e 100 kg ha-1) e as aplicações foram efetuadas em superfície antes da semeadura das culturas. As doses foram aplicadas em todas as safras, respeitando as mesmas quantidades e nas mesmas parcelas, o que variou na segunda etapa da condução dos experimentos, para as safras de inverno de 2005, e de verão de 2005/2006. Para se obter mais pontos nas curvas de resposta na segunda fase do projeto, foi realizada uma aplicação de 120 kg de fósforo nas parcelas com nível 200 kg de P2O5, e nas parcelas de K2O foram aplicadas 25 kg de K2O. Foram coletadas dez amostras de solo por parcela na profundidade de 0-10 cm antes da semeadura e após a colheita de cada cultura. A construção do nível de P foi mais influenciada pelo teor inicial de P e histórico de adubação das áreas do que pela textura do solo. Em solos com baixo teor de P e sem histórico de adubação foi necessário aplicar 35,4 kg P2O5 ha-1 para elevar 1 mg dm-3 de P no solo. Por outro lado, para solos com teor médio a alto com histórico de adubação foi necessário aplicar 20,3 kg P2O5 ha-1 para elevar 1 mg dm-3 de P no solo. E foram necessários adicionar em média geral 27,85 Kg P2O5 ha-1 para elevar 1 mg dm-3 de P no solo, quando não se faz a distinção entre áreas com e sem histórico de adubação. Para atingir o teor crítico de P no solo é recomendada a adição de 210 kg ha-1 de P2O5 para a classe muito baixo , 105 kg ha-1 para a classe baixo e 30 kg ha-1 para a classe médio . O teor crítico de P foi superior ao estabelecido pela ROLAS, também a influência da textura foi inferior em relação à prevista pela ROLAS. O teor critico para solos de 410-600 g kg-1 de argila (Classe 1) foi de 12 mg dm-3 e para solos de 210 a 400 g kg-1 de argila (Classe 2) foi de 15 mg dm-3. O teor crítico determinado para as culturas de soja, milho e trigo, foram de 15, 10 e 12 mg dm-3, respectivamente. O teor crítico de K no solo determinado por Mehlich-1 para trigo, milho e soja sob sistema plantio direto no Paraguai é de 75 mg dm-3. Para atingir o teor crítico de K no solo é recomendada a adição de 250 kg ha-1 de K2O, quando se encontra na classe muito baixo , 125 kg ha-1 quando se encontra na classe baixo e 40 kg ha-1 quando se encontra na classe médio . São necessários 5 kg ha-1 de K2O para elevar em um mg dm-3 o teor de potássio no solo. Em teores no solo acima de 150 mg dm-3, as plantas apresentam baixa probabilidade de resposta à aplicação de fertilizantes potássicos. Maiores rendimentos relativos e absolutos foram atingidos com o trigo após a soja do que após o milho.

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 4097090 bytes, checksum: 20afefc885332713d2591aa778f7c7c0 (MD5) Previous issue date: 2012-02-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The essential oils are volatile organic constituents found in aromatic plants, which present several monoterpenes, such a-terpineol. Studies have demonstrated some biologic activities such as hypotensive and vasorelaxant (Guedes et al., 2004). In the present work the cardiovascular effects of a-terpineol was investigated and the pharmacodynamics of this effect was characterized. Wistar Kyoto and spontaneously hypertensive rats (SHR) were anaesthetized and polyethylene catheters were inserted into the low abdominal aorta and inferior vena cava for blood pressure measurements and administration of drugs. Isolated superior mesenteric rings (1-2 mm) were suspended by cotton threads for isometric tension recordings in Tyrode s solution (37°C, gassed with 95% O2 and 5% CO2), under 0.75g resting tension were measured by using pressure transducers, coupled to a computer set and CVMS software Miobath-4, WPI, Sarasota, EUA. In addition, the bioavailability of NO and eNOS, AKT and AMPK activity were quantified when exposing cells to α-terpineol in the cultured endothelial cells. In both SHR and normotensive rats, i.v. bolus injections of α-terpineol (1 20 mg/kg) decreased mean arterial pressure (MAP) in a dose-related manner, WKY (-103, -399, -5211, -6212 mmHg, n=10) and SHR (-375, -577, -715, -844 mmHg, n=9) associated with tachycardia. However, hypotensive and tachycardic responses were significantly attenuated after L-NAME (20 mg/kg, i.v.). The -terpineol demonstrated improves the baroreflex sensitivity. In intact isolated rat mesenteric rings -terpineol (10-12 10-5M) induced concentration-dependent relaxation of the contractions induced by phylephrine (10M) WKY Emax= 60  4 or SHR Emax= 53.7 ± 3, p<0.05, n=9). After endothelium removal the vasorelaxant elicited by -terpineol was significantly attenuated WKY [Emax= 20.5  1*] and SHR [Emax= 16.1 ± 3*, p<0.05, n=8]. Similar results were obtained in the presence of L-NAME 100M, a competitive antagonist of NOS, hydroxocobalamin 30 μM, a NO scavenger or ODQ 10μM, a selective inhibitor of soluble guanylyl cyclase. In addition, in endothelial cells, a-terpineol increased eNOS activation and NO levels by phosphorylation of PI3K/ AKT and AMPK pathway. However, atropine (1ηM) or indometacin (10 μM) had no effect on the a-terpineol -induced vasorelaxation. Furthermore, vasorelaxation was significantly attenuated in the presence of 20 mM KCl a modulator K+ efflux or several blocking of potassium channels: 1mM 4-aminopirimidine, 10 M glibenclamide, 1 mM tetraethylammonium and carybdotoxin plus apamin (0.2uM). In conclusion, the present study demonstrated that a-terpineol induced hypotensive effect, probably due to a decrease of peripheral vascular resistances, which seems to be mediated by endothelium derived relaxant factors, at least NO induced. These results suggest that vasorelaxant response, almost completely mediated by the endothelium, likely via NO release and activation eNOS by PI3K and AMPK with consequently activation of NO-cGMP pathway and potassium channels activation at least, KCa, KV, and KATP are involved in the vasorelaxant effect induced by a-terpineol. / Os óleos essenciais são componentes voláteis orgânicos encontrados em plantas aromáticas, que apresentam vários monoterpenos, como o α-terpineol. Estudos têm demonstrado algumas atividades biológicas, tais como hipotensivas e vasorelaxantes (Guedes et al., 2004). No presente trabalho, estudaram-se os efeitos cardiovasculares do α-terpineol e caracterizou-se a farmacodinâmica destes efeitos. Para isso foram utilizados ratos normotensos Wistar (WKY) e espontaneamente hipertensos (SHR), empregando técnicas combinadas in vivo, in vitro, e cultivo de células endoteliais. Para determinar a medida direta da pressão arterial, foram implantados cateteres na artéria aorta e veia cava inferior para administração de drogas em ratos WKY e SHR. Adicionalmente, foram realizados estudos para avaliar a reatividade vascular, assim, animais foram sacrificados e a artéria mesentérica superior foi isolada. Os anéis foram mantidos em cubas com solução de Tyrode, e gaseificada com carbogênio. Os anéis foram fixados a um transdutor de força, o qual estava acoplado a um sistema de aquisição de dados (Miobath-4, WPI, Sarasota, EUA) a uma tensão de 0,75 g por 1h. Após este período as preparações, foram pré-contraídas com 10 μM de fenilefrina (FEN) e, em seguida, concentrações crescentes de a-terpineol (10-12-10-5 M) foram adicionadas cumulativamente. Adicionalmente, realizamos experimentos para quantificação da produção de NO e determinação da atividade da eNOS, AKT e AMPK em cultivo de células endoteliais, utilizando as técnicas de citometria de fluxo e western blotting. Assim, observamos que a-terpineol (1, 5, 10 e 20 mg/kg i.v., randomicamente) produziu uma hipotensão dose-dependente em ratos WKY (-103, -399, -5211, -6212 mmHg, n=10) e SHR (-375, -577, -715, -844 mmHg, n=9, respectivamente), associada a taquicardia. A resposta hipotensora foi atenuada significantemente, após o tratamento com L-NAME (20 mg/kg, i.v), sugerindo que esse efeito pode ser decorrente de uma diminuição da resistência periférica., α-terpineol demonstrou melhorar a sensibilidade do barorreflexo. A resposta vasorelaxante foi significativamente atenuada quando comparada aos anéis na presença (WKY Emax= 60  4 e SHR Emax= 53,7 ± 3, p<0,05, n=9) e na ausência do endotélio funcional [WKY Emáx= 20,5  1 e SHR Emáx=16,1 ± 3, p<0,05, n=8]. Em anéis pré-contraídos com FEN na presença de L-NAME (100 μM), Hidroxicobalamina (30 μM) e ODQ (10 μM), a resposta relaxante foi atenuada significantemente, sugerindo uma participação da via NO-GMPc. Adicionalmente, a-terpineol aumentou os níveis de produção de NO e a atividade da eNOS por fosforilar vias como a PI3K e AMPK. No entanto, na presença de atropina (1 mM) ou indometacina (10 uM), a resposta vasorelaxante de a-terpineol não foi alterada indicando que os receptores muscarínicos e metabólitos da enzima Ciclooxigenase parecem não estar envolvidos. KCl (20mM) foi capaz de atenuar o efeito de a-terpineol, e preparações com endotélio vascular incubados com glibenclamida (10 uM) e 4-aminopiridina (1 mM), tetraetilamônio (1 mM) e caribdotoxina + apamina (0,2 μM). Deste modo, concluímos que resposta vasorelaxante promovida pelo a-terpineol é dependente de endotélio e envolve a via L-Arginina-NO-GMPc por aumentar a fosforilação da eNOS por vias PI3K e AMPK, produção de NO e EDHF com participaçãode canais para potássio do tipo KCa, KV e KATP em SHR e WKY e estes efeitos são responsáveis por eventos in vivo.

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1945153 bytes, checksum: 2c1abc7e6111c3fc75af32ff4400e496 (MD5) Previous issue date: 2012-02-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / From Xylopia langsdorfiana A. St-Hil. & Tul. stem bark was isolated the diterpene of trachylobane class, ent-7α-hydroxytrachyloban-18-oic acid (trachylobane-318) that in previous studies showed to be able to relax guinea-pig trachea pre-contracted by carbachol (CCh). Thus, we aimed to investigate the action mechanism underlying in this trachylobane-318 relaxant activity. Trachea rings were suspended in organ baths, containing Kreb s solution, at 37 ºC and aired with carbogenic mixture. Isometric contractions were registered using a digital acquisition system. In order to evaluate a direct effect of the diterpene in Ca2+-calmodulin complex was used chlorpromazine (CPZ) (10-6 M), a calmodulin inhibitor, and we observed that trachylobane-318 relaxation effect (pD2 = 4.38 ± 0.07, n = 5) was not significantly altered in presence of this inhibitor (pD2 = 4.25 ± 0.07, n = 5). Then, was performed a protocol using different potassium (K+) extracellular concentrations which indicated that trachylobane-318 would be acting as a possible potassium channels activator since its relaxation was more potent when guinea-pig trachea was pre-contracted by KCl 18 mM (pD2 = 4.90 ± 0.25, n = 5) than by KCl 60 mM (pD2 = 3.88 ± 0.01, n = 5). To confirm the potassium channels participation was used a non-selective potassium channels blocker, tetraethylammonium (TEA+) 10 mM, that was pre-incubated before CCh addition, that resulted in an attenuation of diterpene relaxation (pD2 = 4.01 ± 0.06, n = 5). To determinate which potassium channels subtypes would be involved in the trachylobane-318 action, the diterpene relaxation curve was assessed in the presence of several potassium channels selective blockers. The fact of the trachylobane-318 relaxation curve was shifted to the right in a significant manner in the presence of 4-AP, a selective blocker of voltage activated K+ channels (Kv) (pD2 = 4.00 ± 0.06, n = 5); glibenclamide, a selective blocker of ATP-sensitive K+ channel (KATP) (pD2 = 3.91 ± 0.003, n = 5); apamin, a selective blocker of small conductance calcium-activated K+ channels (SKCa) (3.45 ± 0.14, n = 5) and big conductance calcium-activated K+ channels (BKCa) (3,80 ± 0,05, n = 5) is suggestive that the diterpene is modulating positively these channels to exert its relaxant effect. On the other hand, the inwardly rectifying K+ channels (Kir) was discarded since the relaxation curve was not altered (pD2 = 4.15 ± 0.10, n = 5) in the presence of BaCl2, selective blocker of these channels. Cyclic nucleotides participation was discarded since the relaxation curve obtained with aminophylline on guinea-pig contracted by CCh (pD2 = 4.27 ± 0.09, n = 5), a phosphodiesterases (PDEs) non-selective inhibitor, was not altered in trachylobane-318 presence (pD2 = 4.46 ± 0.08, n = 5). Thus, trachylobane-318 relaxant effect seems to involve the positive modulation of potassium channels subtypes Kv, KATP, SKCa and BKCa on guinea pig trachea. / A partir das cascas do caule de Xylopia langsdorfiana A. St-Hil. & Tul. foi isolado o diterpeno da classe dos traquilobanos, ent-7α-hidroxitraquiloban-18-oico (traquilobano-318) que em estudos anteriores mostrou-se capaz de relaxar a traqueia de cobaia pré-contraída com carbacol (CCh). Assim, o objetivo deste trabalho foi investigar o mecanismo de ação envolvido nesta atividade relaxante do traquilobano-318. Os anéis de traqueia foram suspensos em cubas para órgão isolado, contendo solução de Krebs, a 37º C e aerados com carbogênio. As contrações isométricas foram registradas com o auxílio de um sistema de aquisição digital. Para avaliar uma possível ação direta do diterpeno sobre o complexo Ca2+-calmodulina foi utilizado a clorpromazina (CPZ) (10-6 M), um inibidor da calmodulina, e observou-se que o efeito relaxante do traquilobano-318 (pD2 = 4,38 ± 0,07, n = 5) não foi significantemente alterado na presença deste inibidor (pD2 = 4,25 ± 0,07, n = 5). Em seguida foi realizado um protocolo usando diferentes concentrações extracelulares de potássio (K+) que indicaram que o traquilobano-318 estaria agindo como um possível ativador dos canais de K+, uma vez que seu efeito relaxante mostrou-se mais potente quando a traqueia era pré-contraída por 18 mM de KCl (pD2 = 4,90 ± 0,25, n = 5) do que quando pré-contraída por 60 mM de KCl (pD2 = 3,88 ± 0,01, n = 5). Para confirmar a participação dos canais de K+ utilizou-se um bloqueador não seletivo destes canais, tetraetilamônio (TEA+) (10 mM) que foi pré-incubado antes da adição de CCh, o que resultou na atenuação do relaxamento promovido pelo diterpeno (pD2 = 4,01 ± 0,06, n = 5). Com o objetivo de se determinar quais subtipos de canais de potássio estariam envolvidos na ação relaxante do traquilobano-318, a curva de relaxamento do diterpeno foi avaliada na presença de vários bloqueadores seletivos destes canais. O fato da curva de relaxamento do traquilobano-318 (pD2 = 4,38 ± 0,07) ter sido desviada para direita, de maneira significante, na presença de 4-AP, bloqueador dos canais de K+ sensíveis a voltagem (Kv) (pD2 = 3,91 ± 0,003); glibenclamida, bloqueador dos canais de K+ sensíveis ao ATP (KATP) (pD2 = 4,00 ± 0,06); apamina, bloqueador dos canais de K+ ativados pelo cálcio de pequena condutância (SKCa) (pD2 = 3,45 ± 0,14) e na presença de iberiotoxina, bloqueador dos canais de K+ ativados pelo cálcio de grande condutância (BKCa) (pD2 = 3,80 ± 0,05) sugere que o diterpeno está modulando positivamente estes canais para exercer seu efeito relaxante. Por outro lado a participação dos canais de potássio retificadores de entrada (Kir) foi descartada pois a curva de relaxamento do traquilobano-318 não foi alterada (pD2 = 4,15 ± 0,10, n = 5) na presença do BaCl2, bloqueador seletivos destes canais. A participação dos nucleotídios cíclicos foi descartada, uma vez que a curva de relaxamento em traqueia pré-contraída por CCh obtida com aminofilina (pD2 = 4,27 ± 0,09, n = 5), um inibidor não seletivo das fosfodiesterases (PDEs), não foi alterada na presença do traquilobano-318 (pD2 = 4,46 ± 0,08, n = 5). Assim, o efeito relaxante do traquilobano-318 parece envolver a modulação positiva dos subtipos de canais de potássio KATP, Kv, SKCa e BKCa em traqueia isolada de cobaia.

Made available in DSpace on 2015-04-17T14:49:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 2291771 bytes, checksum: 640ef610553845f44a31d6ad07e7462f (MD5) Previous issue date: 2014-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Coalho cheese is configured as one of the most widespread dairy and prized in the Northeast, with the main source of income for farmers . The addition of sodium chloride it is one of the key steps in the process, but are concrete evidence linking high sodium intake to cardiovascular disease and hypertension. One of the strategies aiming to decrease the consumption of NaCl is the partial substitution of potassium chloride (KCl) . This research aimed to assess, in preliminary tests the best conditions for salting and percentage of salt inserted into curd, then aiming to optimize the levels of NaCl and KCl using a design type experimental a central composite design. The effects of combinations of salts on physico-chemical characteristics such as percentage of moisture , total solids , ash , protein, lipid , fat solids and chlorides , performed physical analysis of water activity , pH and color were evaluated in addition to sensory responses by Quantitative Descriptive Analysis. The levels assessed, no differences in the physical or physico- chemical parameters , only evidenced significant changes in the percentages of chlorides and ash were observed . Sensory attributes raised by the judges , the perception of salty taste , flavor Residual Bitter and White Color Feature were significant , outlining a great range of concentrations when interacting with each other, corresponding to concentration ranges between 1.2% KCl and 2.3 % NaCl added directly into the curds . At these concentrations it is possible to obtain a decrease of 34% NaCl in use, being appreciated sensory rated by consumers when untrained. / O queijo de Coalho configura-se como um dos produtos lácteos mais difundidos e apreciados no Nordeste, sendo principal fonte de renda de pequenos produtores rurais. Uma das etapas primordiais do processo trata-se da adição do cloreto de sódio, que devido a falta de padronização pode ser adicionado em grandes quantidades, comprometendo a qualidade do produto, pois são concretas as evidências que relacionam o alto consumo que sódio a doenças cardiovasculares e hipertensão. Uma das estratégias buscando diminuir o consumo de NaCl consiste na substituição parcial por cloreto de potássio (KCl). Nesta pesquisa objetivou-se primeiramente avaliar em testes preliminares as melhores condições de salga e percentuais de sal inseridos na coalhada, visando em seguida otimizar os níveis de NaCl e KCl utilizando um delineamento exterimental tipo Delineamento Composto Central Rotacional (DCCR). Foram avaliados os efeitos das combinações dos sais sobre características físico-químicas como percentual de umidade, extrato seco total, cinzas, proteínas, lipídeos, gordura do extrato seco e cloretos, realizadas análises físicas de atividade de água, pH e cor, além de respostas sensoriais através da Análise Descritiva Quantitativa (ADQ) e teste de aceitação com consumidores não treinados após a otimização das concentrações. Nos níveis avaliados, não foram observadas diferenças nos parâmetros físicos ou físico-químicos, apenas evidenciado alterações significativas nos percentuais de cloretos e cinzas. Dos atributos sensoriais levantados pelos julgadores, a percepção do Sabor Salgado, Sabor Residual Amargo e Cor Branco Característica foram significativos, delineando uma faixa ótima de concentrações quando interagindo entre si, correspondente a níveis de concentração entre 1,2% de KCl e 2,3% de NaCl adicionado diretamente na coalhada. Nestas concentrações é possível obter uma diminuição de até 34% no uso do NaCl, sendo apreciado sensorialmente quando avaliado por consumidores não treinados.

Submitted by Socorro Pontes (socorrop@ufersa.edu.br) on 2017-02-24T13:47:51Z No. of bitstreams: 1 YuriLM_TESE.pdf: 1780571 bytes, checksum: aae11f1d977aed41e763a7fe347f49ca (MD5) / Approved for entry into archive by Vanessa Christiane (referencia@ufersa.edu.br) on 2017-03-21T15:01:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 YuriLM_TESE.pdf: 1780571 bytes, checksum: aae11f1d977aed41e763a7fe347f49ca (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-21T15:02:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 YuriLM_TESE.pdf: 1780571 bytes, checksum: aae11f1d977aed41e763a7fe347f49ca (MD5) Previous issue date: 2016-04-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The supplying of 9 mM K+ and 6 mM Ca2+ in the composition of three salt treatments (control; 75 and 150 mM NaCl) were evaluated in leaves, stem and roots of Jatropha curcas plants for 24 and 240 hours of exposure, based on growth indicators, water status, membranes integrity and ion stress and osmotic adjustment indicators. Salt reduced plant growth in all treatments regardless of time of exposure. The water status after 24 h was kept in leaves (75 mM) and roots (150 mM) and in all plant parts after 240 h regardless of the addition K+ or Ca2+. There were no membrane damage in 75 and 150 mM treatments in leaves and stem after 24 h. The sodium levels increased regardless of the plant part and treatment, however both K+ and Ca2+ levels were higher than Na+, helping in the ion toxicity mitigation (K+/Na+; Ca2+/Na+) in almost all the plant parts, regardless of exposure time. The highest values of K+/Na+ and Ca2+/Na+ ratios were observed in salt treatments supplied with K+ and Ca2+, respectively. It was observed in leaves (Sal1) and roots (Sal2), 24 h after treatment (DT), that the maintenance of water status (CRA) suggests an osmotic adjustment partially assigned to the increase of total soluble proteins (PST) and proline (PRO) levels and also to the membrane integrity maintenance in leaves and amino acids (AALT), total soluble sugars (AST) and starch levels maintenance in J. curcas roots. Increases in NaCl concentrations lowered the CRA in J. curcas stems, however the membrane integrity maintenance of this part seems to be associated to the increases of AALT, PRO and AST levels. In leaves, the addition of K+ to the salt solution increased PST and starch levels in Sal1 + K+ and AALT in Sal2 + K+ 24 h after treatment. In roots, the addition of K+ increased the PST, ALLT and PRO levels in Sal1+K+ treatment, as well as the AST levels in treatment Sal2 + K+, 24 h after treatment. The addition of K+ to the salt solution promoted an increase in PST, PRO and AST levels in Sal1 + K+ treatment in stem 24 h after treatment. The maintenance of CRA happened in all plant parts, 240 h after treatment and regardless of the NaCl concentration in most of the plant parts evaluated may be related to the maintenance in the PST, AALT and PRO levels. For all plant parts, the relation between carbohydrates and osmotic adjustment in J. curcas 240 h after treatment is not clear. The addition of K+ to the salt solution increased AALT (Sal1 + K+), PRO, AST (Sal2 + K+) and starch (Sal1 + K+) levels in leaves; PST, AALT (Sal1 + K+) and AST (Sal2 + K+) levels in stem; and AALT, PRO and starch levels only in the Sal1+K+ treatment. For all the plant parts and when exposed to the Sal1 + Ca2+ treatment 24 h after treatment, the supplying with Ca2+ increased the PST levels. In the same period, the supplying with Ca2+ increased the AALT levels mainly in leaves. After 240 h exposure, the presence of Ca2+ increased the AALT levels in all plant parts exposed to the Sal1 + Ca2+ treatment. PRO levels were increased with the supplying of Ca2+ mainly in leaves, 240 h after treatment. Stem of J. curcas was the part that had the highest increase of AST levels after the addition of Ca2+ to the salt solution in both times of exposure. Increases of starch levels were observed mainly in leaves in both exposure times. In conclusion, both K+ and Ca2+ individual additions to the salt solution supported the maintenance of ionic homeostasis and contributed to the increase of K+/Na+ and Ca2+/Na+ ratios, alleviating the toxicity effects by sodium in most of the evaluated plant parts, regardless of the exposure time and dosage of NaCl tested. Additionally, the osmotic adjustment observed in J. curcas occurred mainly by nitrogen compounds, being both K+ and Ca2+ individual additions related to the increases of most of the compatible solutes studied. The contribution of K+ and Ca2+ supplying in osmotic adjustment verified in J. curcas showed distinct responses in terms of exposure time, NaCl dosage and plant organ / As suplementações com 9 mM de K+ e 6 mM de Ca2+ na composição de três tratamentos salinos (controle; 75 e 150 mM de NaCl), foram avaliadas em folhas, caule e raízes de plantas Jatropha curcas durante 24 e 240 horas de exposição, baseando-se em indicadores de crescimento, status hídrico, integridade das membranas, indicadores de estresse iônico e de ajustamento osmótico. O sal reduziu o crescimento das plantas em todos os tratamentos, independente do tempo. O status hídrico das plantas, após 24 h, foi mantido em folhas (75 mM) e raízes (150 mM) e em todos os órgãos, após 240 h, independente da adição de K+ ou Ca2+. Não houve danos às membranas nos tratamentos 75 e 150 mM, em folhas e caule, após 24 h. Os níveis de sódio aumentaram independente do órgão e tratamento, porém tanto os níveis de K+ quanto os de Ca2+ foram maiores que o Na+, auxiliando na minimização da toxicidade iônica (K+/Na+; Ca2+/Na+) em quase todos os órgãos da planta, independente do tempo de exposição. Observou-se maiores valores nas relações K+/Na+ e Ca2+/Na+ nos tratamentos salinos suplementados com K+ e Ca2+, respectivamente. Observou-se em folhas (Sal1) e raízes (Sal2), 24 h DT, que a manutenção do status hídrico (CRA) sugere um ajustamento osmótico atribuído em parte ao aumento nos níveis de proteínas solúveis totais (PST) e prolina (PRO), e ainda, à manutenção da integridade das membranas em folhas e à manutenção nos níveis de aminoácidos livres totais (AALT), açúcares solúveis totais (AST) e amido em raízes de J. curcas. Aumentos nas concentrações de NaCl, reduziram o CRA em caules de J. curcas, contudo, a manutenção da integridade das membranas deste órgão aparentemente está associada ao aumento nos níveis de AALT, PRO e AST. Em folhas, adição de K+ à solução salina aumentou os níveis de PST e amido no tratamento Sal1 + K+ e AALT em Sal2 + K+, 24 h DT. Em raízes, o incremento de K+ aumentou os níveis de PST, AALT e PRO no tratamento Sal1 + K+, bem como os níveis de AST no tratamento Sal2 + K+, 24 h DT. A adição de K+ à solução salina promoveu um aumento nos níveis de PST, PRO e AST no tratamento Sal1 + K+, em caule 24 h DT. A manutenção no CRA que ocorreu em todos os órgãos da planta, 240 h DT, independente da concentração de NaCl, na maioria dos órgãos estudados, pode estar relacionado à manutenção nos níveis de PST, AALT e PRO. Em todos os órgãos, não ficou clara a relação dos carboidratos com o ajustamento osmótico de J. curcas, 240 h DT. A adição de K+ à solução salina aumentou, em folhas, os níveis de AALT (Sal1 + K+), PRO, AST (Sal2 + K+) e amido (Sal1 + K+); em caule, os níveis de PST, AALT (Sal1 + K+) e AST (Sal1 + K+); em raízes, os níveis de AALT, PRO e amido apenas no tratamento Sal1 + K+. Em todos os órgãos da planta, expostos ao tratamento Sal1 + Ca2+, 24h DT, a suplementação com o Ca2+ aumentou os níveis de PST. Neste mesmo período a suplementação com o Ca2+ incrementou os níveis de AALT principalmente em folhas. Após 240 h de exposição, a presença do Ca2+ incrementou os níveis de AALT em todos os órgãos expostos ao tratamento Sal1 + Ca2+. Os níveis de PRO foram incrementados com a suplementação de Ca2+ principalmente em folhas, 240 h DT. O caule de J. curcas foi o órgão que mais aumentou seus níveis de AST após o incremento de Ca2+ à solução salina, em ambos os períodos de exposição. Incrementos nos níveis de amido foram observados principalmente em folhas, em ambos os períodos de exposição. Conclui-se que tanto o incremento de K+ quanto o de Ca2+ à solução salina auxiliou na manutenção da homeostase iônica e contribuiu para o aumento das relações K+/Na+ e Ca2+/Na+, reduzindo o efeito tóxico do sódio na maioria dos órgãos estudados, independente do tempo de exposição ao NaCl e dose utilizada. Ainda, o ajustamento osmótico, observado em J. curcas se deu principalmente por compostos nitrogenados, estando tanto o incremento de K+ quanto o de Ca2+ relacionados ao aumento da maioria dos solutos compatíveis estudados. A contribuição da suplementação de K+ e Ca2+ no ajustamento osmótico, verificados em J. curcas, apresentam respostas distintas quanto ao tempo de exposição, dose de NaCl e órgãos da planta / 2017-02-20

p. 1-102 / Submitted by Santiago Fabio (fabio.ssantiago@hotmail.com) on 2013-04-09T17:44:48Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Joseni Lima SEG.pdf: 487372 bytes, checksum: 59ca931b8411aed4bf2a20d09cef54c5 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Meirelles(rodrigomei@ufba.br) on 2013-04-10T14:03:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertacao Joseni Lima SEG.pdf: 487372 bytes, checksum: 59ca931b8411aed4bf2a20d09cef54c5 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-04-10T14:03:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Joseni Lima SEG.pdf: 487372 bytes, checksum: 59ca931b8411aed4bf2a20d09cef54c5 (MD5) Previous issue date: 2009 / O leite humano é um alimento completo, capaz de suprir todas as necessidades fisiológicas e nutricionais da criança. Vários estudos destacam a importância do aleitamento materno para a saúde e nutrição do lactente, em especial pela sua proteção contra doenças e pelo valor nutricional, contudo poucas investigações abordam seu conteúdo mineral. O objetivo deste estudo foi quantificar os elementos minerais cálcio, magnésio, potássio, ferro e zinco em 102 amostras de leite humano coletadas de doadoras de cidades do Vale do Jiquiriçá, Bahia em diferentes estágios: 1, 6 e 12 meses de lactação bem como estudar a relação entre os minerais e as variáveis maternas. Para o tratamento das amostras foi utilizado um procedimento de decomposição por via úmida com uma mistura composta de HNO3, H2SO4 e H2O2. A determinação dos minerais foi realizada empregando um espectrômetro de emissão optica com plasma de argônio indutivamente acoplado (ICP OES). Os valores médios obtidos para os elementos estudados no 1º. mês de lactação foram: Ca (204,11 ± 49,15 mg L-1); Mg (25,17 ± 6,58 mg L-1); K (497,26 ± 103,09 mg L-1); Fe (0,48 ± 0,27 mg L-1); Zn (2,56 ±0,90 mg L-1). Para os 6 meses, com exceção do Mg (26,99 ±9,64 mg L-1) observou-se um ligeiro declínio nas concentrações médias do Ca (177,70 ±48,60 mg L-1); K (403,61 ±106,31 mg L-1); Fe (0,26 ± 0,16 mg L-1); Zn (1,14 ± 0,63 mg L-1). Para os 12 meses de lactação as médias declinaram mais ainda, identificando as seguintes concentrações Ca (169,54 ± 43,18 mg L-1); K (362,53 ± 88,64 mg L-1); Fe (0,38 ± 0,25 mg L-1); Zn (0,92 ± 0,66 mg L-1), exceto para Mg (25,17 ± 6,43 mg L-1). Quando analisadas por pareamento (teste t) o declínio foi significante para o Ca (ρ=0,029); K (ρ=0,001); Fe (ρ=0,006) e Zn (ρ<0,001) no intervalo de 1/6 meses. Contudo, no intervalo de 6/12 meses, apenas o teor de Ca manteve diferença estatisticamente significante no declínio ao longo de tempo (ρ=0,01). As concentrações obtidas para Mg não apresentam variação média significante ao longo da lactação. Os resultados apresentados demonstram que a composição mineral do leite humano modifica-se à medida que o aleitamento materno se prolonga e que o Fe é o mineral que apresenta maior variabilidade. Observou-se, através da comparação de médias, influência significante do tipo de parto para os resultados obtidos para Mg no 6º mês de lactação (ρ= 0,028) e do estado nutricional materno para Ca no 12º mês de lactação (ρ= 0,04) a 5% de probabilidade. / Salvador

118 f. / Submitted by Ana Hilda Fonseca (anahilda@ufba.br) on 2013-04-11T17:50:31Z No. of bitstreams: 1 Dissertação de Mestrado - PDF[1].pdf: 2378495 bytes, checksum: 988193a81cd9a137da1f1458daa95968 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Hilda Fonseca(anahilda@ufba.br) on 2013-05-14T17:22:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação de Mestrado - PDF[1].pdf: 2378495 bytes, checksum: 988193a81cd9a137da1f1458daa95968 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-14T17:22:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação de Mestrado - PDF[1].pdf: 2378495 bytes, checksum: 988193a81cd9a137da1f1458daa95968 (MD5) Previous issue date: 2011 / CAPES / Devido aos inúmeros incentivos governamentais que impulsionam a produção do Biodiesel no mundo, tal combustível está sendo produzido largamente, e um fator preocupante frente a esse crescimento é o destino do glicerol excedente, já que seu uso é condicionado ao seu grau de pureza, que deve estar usualmente acima de 95%. No caso do glicerol bruto, resultante do processo de transesterificação do biodiesel, são necessários processos complexos e onerosos para que essa matéria-prima alcance as exigências em grau de pureza necessária para seu emprego. Além disso, os mercados tradicionais que o consomem (indústria de cosméticos, resinas, indústria farmacêutica, têxtil e alimentícia) têm uma capacidade limitada de absorção de quantidades maiores desse sub-produto. Sendo assim, esse trabalho tem como objetivo promover modificações estruturais na molécula do glicerol (comercial, alcalino e bruto), utilizando como agentes oxidantes os sais de bismuto (Zn(BiO3)2 e NaBiO3), NaClO e KBrO3/NaHSO3. As reações foram realizadas em ácido acético , ácido lático, acetona, água, com variação de tempo, temperatura, concentração dos reagentes e catalisadores. Essa metodologia sintética tem como finalidade gerar produtos com maior valor agregado tornando o glicerol um sub-produto mais reaproveitado e competitivo no mercado. Os melhores resultados na conversão do glicerol para os produtos mono, di e triacetilados foram alcançados utilizando 1mol% do catalisador NaBiO3 em diferentes concentrações de ácido acético glacial. Na ausência do catalisador a reação também ocorre, porém com tempo elevado. Em nenhum dos experimentos ocorreu à oxidação do glicerol. O modelo experimental realizado mostrou que é necessário excesso de ácido a fim de promover o equilíbrio na direção da conversão do glicerol e seletividade para os produtos mais valiosos comercialmente, o di e triacetilados. / Salvador

The foods are excellent nutrient sources for a wide variety of microorganisms, such as filamentous fungi and yeast or bacteria. They are therefore vehicle for a number of infectious diseases. So the man has sought to prevent such proliferation microbial, and maintain the integrity of the product to be sold or consumed, through physical and chemical barriers. To reduce the risk of multiplication of microorganisms and the consequent deterioration of food, the industries are using, in addition to heat treatment, increasingly, chemical additives (preservatives). Among them, sulphur dioxide, sorbic acid and benzoic acid, and derivatives of them, have been employed in the steps of processing. Thus, seeking to provide subsidies to reduce the use of inadequate quantities of preservatives in the food industry, and therefore unfit to ingestion by the population, it was determined in this work the minimum concentrations of sodium metabisulphite, sodium benzoate and sorbate, potassium necessary for the inhibition of the development of heat-resistant fungi, such as Byssochlamys fulva, Neosartorya fischeri and Talaromyces flavus, and of bacteria, such as Salmonella Enteritidis, S. Typhimurium, Escherichia coli and Bacillus cereus in vitro. The growth-media used were Potato-Dextrose-Agar (PDA) and Tripton- Soybean-Agar (acidified with citric acid, pH 3.5 and 5), for tests with fungi and bacteria, respectively. To these media were added the preservatives in different quantities, in order to obtain concentrations of 100, 150, 200, 250, 300, 400, 500, 600, 700, 800 and 1000 mg.L-1 of them. After inoculation and incubation (28 and 30 ± 2 ° C, in the dark), it was observed that the lowest concentrations of sodium metabisulphite showed greater efficiency in inhibiting the growth of all microorganisms, in comparison with the other preservatives tested in vitro. The lowest concentrations of sodium benzoate, on the other hand, were more effective in inhibiting bacterial growth. Already the potassium sorbate showed greater action to combat the heat-resistant fungi. / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Alagoas / Os alimentos se constituem em ótimos suprimentos para uma grande diversidade de microrganismos, sendo eles fungos filamentosos e leveduriformes ou bactérias. São, portanto, veículo de uma série de doenças infecciosas. Assim o homem tem buscado evitar tal proliferação microbiana, mantendo a integridade do produto a ser comercializado ou consumido, através de barreiras físicas e químicas. Para reduzir os riscos de multiplicação de microrganismos e a conseqüente deterioração dos alimentos, as indústrias estão utilizando, além do tratamento térmico, cada vez mais, aditivos químicos (conservantes). Entre eles, o dióxido de enxofre, ácido benzóico e o ácido sórbico, além de derivados dos mesmos, têm sido empregados em linhas de processamento. Assim, visando fornecer subsídios para se reduzir a utilização de quantidades inadequadas de conservantes pela indústria de alimentos e, portanto, a ingestão imprópria dos mesmos pela população, determinou-se neste trabalho as concentrações mínimas de metabissulfito de sódio, benzoato de sódio e sorbato de potássio necessárias à inibição do desenvolvimento dos fungos termorresistentes Byssochlamys fulva, Neosartorya fischeri e Talaromyces flavus, e das bactérias Salmonella Enteritidis, S. Typhimurium, Escherichia coli e Bacillus cereus in vitro. Os meios de cultura utilizados foram Batata-Dextrose- Agar (BDA) e Triptona-Soja-Agar (acidificado com ácido cítrico, pH 3,5 e 5), respectivamente para os ensaios com fungos e com bactérias. A esses meios adicionaram-se os conservantes em diferentes quantidades, de modo a obterem-se concentrações compreendidas entre 80 e 1000 mg.L-1 dos mesmos. Após inoculação e incubação (28 e 30 ± 2 ºC, no escuro), observou-se que as menores concentrações do metabissulfito de sódio apresentaram uma maior eficiência em inibir o crescimento de todos os microrganismos em comparação com os demais conservantes testados in vitro. As menores concentrações do benzoato de sódio, por outro lado, foram mais efetivas em inibir o crescimento bacteriano. Já o sorbato de potássio apresentou maior ação no combate aos fungos termorresistentes.