Proefschrift Rijksuniversiteit Groningen. / Met lit.opg. - Met samenvatting in het Nederlands.

Thesis (M.S.)--Duquesne University, 2005. / Title from document title page. Abstract included in electronic submission form. Includes bibliographical references (p. 100-110) and index.

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:05:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / CAPES: BEX0612/02-2 / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:05:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005 / As infecções causadas por P. aeruginosa são freqüentemente de difícil tratamento devido à virulência e a resistência a vários antimicrobianos apresentados por este patógeno. Os carbapenens são geralmente o tratamento de escolha para infecções causadas por P. aeruginosa multirresistentes, porém, a resistência a estes compostos tem aumentado rapidamente, principalmente, devido ao surgimento de amostras produtoras de metalo-ß-lactamases. Os objetivos deste estudo foram: i) avaliar o perfil de sensibilidade a antimicrobianos das amostras de P. aeruginosa resistentes aos carbapenens isoladas de hospitais brasileiros; ii) avaliar a freqüência da produção de MPL entre as amostras de P. aeruginosa resistentes aos carbapenens; iii) avaliar o perfil de sensibilidade a antimicrobianos das amostras de P. aeruginosa produtoras de MβL pela técnica de microdiluição em caldo; iv) detectara presença dos genes biasSPM-1, blaIMP-1, blaVIM-1, e blaVIM-2 entre as amostras de P. aeruginosa produtoras de MßL; v) avaliar a presença de variantes alélicos do gene blasIPM-1, entre as amostras de P. aeruginosa produtoras da MPL do tipo SPM-1, e vi) avaliar a similaridade genética entre as amostras de P. aeruginosa resistentes aos carbapenens produtoras de MßL. Foram avaliadas 206 amostras de P. aeruginosa resistentes aos carbapenens isoladas entre 2001 e 2003, de 25 centros médicos. As 206 amostras foram testadas pelo método de disco-difusão. Os testes de sensibilidade foram realizados de acordo com a padronização do "National Committee for Clinical Laboratory Standards" (NCCLS). Os isolados resistentes aos carbapenens foram triados para a produção de metalo-ß-lactamases pelo teste de aproximação de discos utilizando dois inibidores enzimáticos (EDTA e ácido 2mercaptopropiônico). A produção de MßL foi confirmada pela metodologia do Etest® (fita Etest©MBL). Em seguida foi realizada a técnica de PCR para a pesquisa dos genes blaIMP-1, blaVIM-1, bIaVIM-2 e blaSPM-1. A avaliação da similaridade genética entre as amostras produtoras de MßL foi realizada pela técnica da ribotipagem automatizada e PFGE. Para fins comparativos, também foram selecionadas para análise da similaridade genéticaamostras não produtoras de MßL isoladas em centros médicos, que apresentavam amostras de P. aeruginosa produtoras de MPL. Altas taxas de resistência a maioria dos antimicrobianos foram observadas entre as amostras de P. aeruginosa resistentes aos carbapenes…(au). / Infections caused by Pseudomonas aeruginosa are often difficult to treat because of its virulence and antimicrobial resistance. Carbapenems are usually active against multiresistant P. aeruginosa, but resistant to these compounds has been increasing rapidly. High-level resistance to carbapenems is still uncommon in P. aeruginosa and is usually indicative of metallo-β-lactamases (MβL). The purpose of the study were to evaluate the antimicrobial susceptibility profiles of carbapenems resistant P. aeruginosa isolated from Brazilian Hospitals, were to detect the presence of gene blaSPM-1, blaIMP-1, blaVIM-1 e blaVIM-2 and to evaluate the genetic similarity of P. aeruginosa resistant to carbapenems. Were evaluated 206 P. aeruginosa resistant to carbapenems collected during 2001 – 2003 from 25 medical centers. Antimicrobial susceptibilities testing to selected agents were determined by disk diffusion to 206 strains. The suscepptibility testing were to using the reference “National Committee for Clinical Laboratory Standards” (NCCLS). Carbapenems resistant isolates were screened for MβL production by disk approximation test using 2 enzyme inhibitors (EDTA and 2-mercaptopropionic acid). The procedure was confirmed by Etest (Etest MBL strip) and also by PCR assays using the following primers blaIMP-1, blaVIM-1, blaVIM-2 e blaSPM-1. The genetic similarity was performed in MβL producers strains and one negative-MβL strains for medical centers by automated ribotyping and PFGE. High resistance rates to majority of the antimicrobial agents were demonstrated. The polymyxins were the most active antimicrobial agents evaluated with 100,0% of susceptibility rate to all strains. The MβL production was detected in 98 (47,6%) of 206 strains. The blaSPM-1 gene was detected in 82 strains (83,7%) and blaIPM-1 gene in 3 strains (16,3%). Thirteen isolates did not show PCR amplification for none of the primers used. The analysis of genetic similarity showed a clonal diversity among the 98 carbapenems-resistant strains (46 ribogroups). CONCLUSION: This study indicates high prevalence of MβL producing in carbapenems-resistant P. aeruginosa and clonal dissemination these microrganism to a wide geographic area of Brazil. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Alimentos, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T07:55:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 284574.pdf: 1944066 bytes, checksum: ea84b90ef1fb7bb6f36e7a84a4a6ad60 (MD5) / O alginato é um polissacarídeo existente na parede celular de algas marinhas marrons (Phaeophyceae) e que também pode ser sintetizado por Azotobacter vinellandii e Pseudomonas spp. As aplicações do alginato microbiano podem ser as mesmas do alginato extraído de algas. Na indústria de alimentos, pode ser utilizado como gelificante, emulsificante, estabilizante e espessante. Ainda pode ser utilizado como agente de encapsulação e na formulação de curativos interativos, na indústria farmacêutica. Como ingrediente em pastas de impressão têxtil, detergentes e shampoos na indústria química. Na área médica, os alginatos têm sido empregados para imobilização de células vivas, no tratamento de doenças hormonais em cobaias e na manufatura de pele artificial com melhores propriedades cicatrizantes. O Alginato bacteriano pode ser produzido para fins específicos, com uma melhora nas suas propriedades qualitativas permitindo novas aplicações desse polímero no mercado. O objetivo deste trabalho foi avaliar a produção de alginato por Pseudomonas mendocina em diferentes substratos. Foram realizadas culturas em frascos agitados, utilizando glicose, sacarose ou glicerol, como fonte de carbono. Os experimentos foram delineados a um planejamento experimental para cada fonte de carbono, avaliando as diferentes concentrações de substrato e nitrogênio e limitando-se o tempo de cultivo em 48 h. A condição aximizada para a produção de alginato, a partir de glicose, dentro das condições estudadas foi 100 g.L-1 de glicose e 0,5 g.L-1 de sulfato de amônio. A produtividade obtida nessa condição foi 0,33 g.L-1h-1. Para meios utilizando glicerol como substrato, a condição maximizada foi 40 g.L-1 de glicerol e 0,7 g.L-1 de sulfato de amônio. A produtividade obtida nessa condição foi 0,23 g.L-1h-1. Utilizando sacarose como substrato, a condição maximizada para a produção de alginato dentro das condições estudadas foi 80 g.L-1 de sacarose e 0,7 de sulfato de amônio. Nas condições otimizadas utilizadas neste trabalho, o meio com sacarose como fonte de carbono apresentou a maior produtividade, 0,42 g.L-1h-1, para a síntese de alginato por Pseudomonas mendocina. O biopolímero formado foi caracterizado através da técnica de espectroscopia de ressonância magnética (1HNMR) e pode-se verificar que o alginato sintetizado por Pseudomonas mendocina possui apenas blocos M. Foram realizadas medidas reológicas do meio de cultura ao final do cultivo e todos apresentaram comportamento pseudoplástico. Meios de cultivo com o alginato formado e utilizando sacarose como fonte de carbono, apresentaram uma viscosidade aparente muito superior em relação aos meios onde foi utilizado glicose ou glicerol. / Alginate is a polysaccharide that occurs as a structural components in marine brown algae (Phaeophyceae) as well as capsular polysaccharides in two bacterial genera, Pseudomonas and Azotobacter. Alginate produced by microorganisms can have the same use of alginate obtained from brown algae. In food industry, can be used as thickeners, emulsifiers, stablizers and gelling agents. Can be used as encapsulation agent and in formulation of dressings interactive, in pharmaceutical industry. As an ingredient in textil printing, detergent and shampoos in the chemical industry. In medical applications, to immobilizing living cells, as in treatment of hormonal diseases in experimental animal models and to manufacture wound dressing with improved healing properties. Bacterial alginate can be produced to specific applications with highquality, improved properties alowing new commercial aplications. This work was aimed to study the alginate production by Pseudomonas mendocina with different substrates as carbon source. Cultures were carried out on shake frasks with glucose, sucrose or glycerol as carbon source. The experiments were fitting by the Methodology of Experiment Planning for each one substrate to evaluate different substrate and nitrogen concentration in 48 h on process productivity. Optimal conditions for alginate production from glucose as carbon source, was 100 g.L-1 glucose and 0.5 g.L-1 ammonium sulfate, the maximum productivity was 0.33 g.L-1h-1. Using glycerol as carbon source, the optimal condition was 40 g.L-1 glycerol and 0.7 g.L-1 ammonium sulfate, the productivity found was 0.23 g.L-1h-1. Using sucrose as carbon source, the optimal condition for alginate production was 80 g.L-1 sucrose and 0.7 ammonium sulfate. Optimized conditions studied in this work, showed higher productivity (0.42 g.L-1h-1) in culture media containing sucrose as carbon source for alginate synthesis by Pseudomonas mendocina. The biopolymer was characterized by 1HNMR spectroscopy and could be verified that alginate synthesized by Pseudomonas mendocina only has homopolymerics M blocks. The culture media containing alginate was characterized by rheological measurements and exhibited the typical pseudoplastic behavior. Culture media containing sucrose as carbon source exhibited a higher apparent viscosity than culture media containing glucose or glycerol as carbon source.

Publicación a texto completo no autorizada por el autor / Los ramnolípidos son una clase de biosurfactantes que presentan una gran variedad de aplicaciones, y entre las más importantes se encuentra el proceso de biorremediación mediante biodegradación y desintoxicación de efluentes industriales y en la eliminación de contaminantes de los suelos. El presente estudio se enfoca en la optimización de algunas fuentes inorgánicas para la producción de ramnolípidos por Pseudomonas aeruginosa 6K-11. En primer lugar se determinó la fuente óptima de nitrógeno, fósforo, calcio y hierro; siendo los compuestos de nitrato de sodio (NaNO3), Fosfato monopotásico (KH2PO4), Cloruro de calcio (CaCl2) y Sulfato de hierro (FeSO4), para cada fuente respectivamente. Posteriormente, el proceso para la producción de ramnolípidos fue optimizado usando el diseño experimental Box- Behnken. Los factores a tomar en cuenta fueron la proporción C/N, la proporción C/P, concentración de la fuente de calcio y la concentración de la fuente de hierro. La máxima producción de ramnolípidos fue 35,124 g/L después de 168 horas de fermentación con la proporción C/N de NaNO3 de 21,172, la proporción C/P de KH2PO4 de 16,279, 0,046 g/L de CaCl2 y 0,003 g/L de FeSO4. Los resultados de la presente investigación sugieren que la limitación nitrógeno y fósforo generan un mejor rendimiento de ramnolípidos, así como la aplicación de diseños experimentales es muy eficaz para determinar las condiciones óptimas de bioprocesos. / Tesis

This thesis describes fundamental biological characteristics of soybean. Main topic of the thesis is finding resistence of twelve soybean varieties to bacterial blight. Virulence of four Pseudomonas syringae pv. glycinea isolates was tested in laboratory conditions to find isolates with the highest virulence, which were then used for testing of selected soybean varieties resistance to this patogen. The highest virulence was found in Šumperk 112 isolate and Žabčice isolate. These isolates were used for testing of soybean varieties resistance. The lowest resistance was found in Moravians variety, low resistance was found in Laurentiana variety and Bru-nensis variety. High resistance was found in Gallec variety and Chinese NM3 variety.

Pseudomonas species are Gram-negative bacteria most abundant in soil and water bodies, with the capacity to thrive in varied environments. They are largely associated with resistant pathogenic bacteria linked to human and plant diseases. Species such as Pseudomonas aeruginosa have been particularly targeted as case studies due to the extremity to which they pose a threat to human health. With more focus directed at using these species for biocontrol and bioremediation purposes, their role in bioactive compound production may be equally important. As the crisis on antimicrobial resistance still persists, the need for effective antimicrobial compounds is ever more urgent and solutions may possibly still be dormant in bacterial species whose potential has not been fully investigated. On a bid to source out potential antimicrobial compound producers, soil samples were collected from Hogback forest reserve in the province of the Eastern Cape, South Africa. For bacterial screening, M1 and R2A agar were used and the cultures grown at 37˚C for a period of seven days. After the presumed Pseudomonas species were identified, antimicrobial production was determined by submerged fermentation method using nutrient broth as media of choice. Active isolates were further studied to determine the optimum conditions which best facilitate for antimicrobial compound production, with parameters such as temperature (25˚C – 40˚C) and pH (4 – 9) considered. The role plasmids play in antimicrobial compound production was also investigated. Each isolate was grown in fermentation media containing Sodium dodecyl sulphate and Ethedium Bromide, at varying concentrations, to facilitate for plasmid curing. With each sample, distinct colonies were identified with varying pigmentations most dominant being a cream colour. The identity of the isolated strains was achieved through sequencing of 16S rDNA. Phylogenetic analysis showed that isolate A16 had 80 percent homology with Pseudomonas plecoglossicida strain P4 and share a close ancestor with isolates Y52 and Y81, also isolate Y89 showed a 90 percent homology with Pseudomonas sp. Co-11a. With the exception of isolate A16, the isolates which were active against Gram-negative bacteria lost activity as the screening processes continued. When looking at temperature variations, isolates Y81 and A16 were highly active with maximum activity observed at 35˚C while Y89 performed best at 25˚C and Y52 showed constant activity across all studied temperatures. The plasmids in all isolates were found to be 48.5 kb in size with the exception of isolate Y89 which was 20 kb. The plasmids were cured at concentrations of (1 mg/ml; 5 mg/ml; 7 mg/ml; 10 mg/ml; 11 mg/ml) SDS and (125 μg/ml; 6.5 μg/ml; 5μg/ml) EtBr. The curing process also showed changes in both the antimicrobial activity of the isolates as well as their physical characteristics. The isolates are the first reported Pseudomonas species from Hogsback forest reserve with the ability to produce antimicrobial compounds which are active against Gram-positive and Gram-negative bacteria. These mesophilic bacteria also show that plasmids do not pay any role in the production of antimicrobial compounds and that the biosynthesis genes are highly likely to be chromosomal borne meaning that the production cannot be linked to horizontal transfer of genes. Therefore, these isolated Pseudomonas species provide a potential reservoir of antimicrobial compounds which may play an important role in the antimicrobial resistance phenomenon.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-19T12:02:55Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1276596 bytes, checksum: e320e36eac8ecfc4d887e0c9f618329e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-19T12:02:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1276596 bytes, checksum: e320e36eac8ecfc4d887e0c9f618329e (MD5) Previous issue date: 2005-04-29 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Por meio de um mecanismo denominado quorum sensing, diversas bactérias podem comunicar-se umas com as outras e coordenar a expressão gênica de acordo com a densidade populacional de forma semelhante aos organismos multicelulares. Este trabalho teve como objetivo investigar a produção de moléculas sinalizadoras de quorum, conhecidas como homoserinas lactonas aciladas (AHLs), por bactérias psicrotróficas proteolíticas isoladas de leite cru refrigerado. Verificou-se também se a atividade proteolítica de Pseudomonas fluorescens 07A é dependente da densidade populacional. Foram avaliados 53 isolados psicrotróficos proteolíticos e sete estirpes ATCC quanto à produção de AHL em meio sólido utilizando as bactérias Agrobacterium tumefaciens A136, Chromobacterium violaceum CV026 e Escherichia coli pSB403 como sistemas monitores ou sensores da presença de AHL. A produção de moléculas sinalizadoras foi freqüente entre os isolados psicrotróficos proteolíticos, constatando-se que, aproximadamente, 89 % das estirpes avaliadas foram produtoras de AHL. A extração de moléculas autoindutoras foi realizada em dois isolados, Serratia liquefaciens 016 e P. fluorescens 07A e, a presença de AHL nos extratos foi confirmada pelas estirpes monitoras C. violaceum CV026 e A. tumefaciens KYC55, respectivamente. A produção de AHL pelo isolado P. fluorescens 07A foi determinada em meio de cultivo à base de triptona suplementado com 0,25 % de cálcio (TYEP + CaCl 2 0,25 %) e em meio de constituição mínima (MMS), utilizando a estirpe monitora A. tumefaciens KYC55. Em meio TYEP + CaCl 2 0,25 % a produção de AHL(s) alcançou o máximo ao final da fase logarítmica, quando a população de P. fluorescens 07A foi da ordem de 10 9 UFC mL -1 . Esta mesma população resultou em uma concentração de AHL(s) cerca de três vezes menor no MMS. Os resultados indicaram que a produção de AHL pode estar sob controle de autoindução. O crescimento e a atividade proteolítica do isolado 07A foram avaliados em seis meios de cultivo. Não foi observada diferença no crescimento do isolado nos diferentes meios, exceto no MMS, onde a estirpe cresceu de forma mais lenta. Entretanto, a produção de proteases foi maior em meio TYEP + CaCl 2 0,25 % e em leite desnatado reconstituído (LDR 12 %). A detecção da atividade proteolítica só foi possível quando a cultura atingiu concentração populacional elevada em todos os meios avaliados, excetuando-se no meio MMS, quando a atividade proteolítica foi detectada em uma densidade populacional 10 vezes menor. Nos meios a base de triptona o pH aumentou para valores próximos a 8,5. Meios contendo íons Ca +2 apresentaram grande fluorescência ao final do período de incubação, indicando maior produção do sideróforo pioverdina. A adição de duas AHLs sintéticas não afetou o crescimento e a atividade proteolítica da estirpe P. fluorescens 07A em meio TYEP + CaCl 2 0,25 %. Quando comparada ao controle, a atividade proteolítica específica de P. fluorescens 07A não foi afetada significativamente, ao nível de 5% de probabilidade, pela suplementação do meio TYEP + CaCl 2 0,25 % com extrato de AHL obtido da própria estirpe. O quorum sensing pode não estar regulando a atividade proteolítica em P. fluorescens 07A. / In a process called quorum sensing, a range of bacterial cells communicate and coordinate the expression of multiple phenotypes according to cell density. This work aimed to evaluate the production of signaling molecules known as N-acyl homoserine lactone (AHL) by psychrotrophic proteolytic bacteria isolated from raw milk as well as to verify if the proteolytic activity of Pseudomonas fluorescens 07A is under the control of quorum sensing. Fifty three psychrotrophic isolates and seven ATCC cultures were screened for the production of AHL in agar systems using the monitor strains Agrobacterium tumefaciens A136, Chromobacterium violaceum CV026 and Escherichia coli pSB403. It was verified that almost 89 % of the psychrotrophic isolates tested elicited a positive response in at least one of the monitor strains of AHL. Signaling molecules were extracted from Serratia liquefaciens 016 and P. fluorescens 07A and the presence of AHL was detected with the monitor strains C. violaceum CV026 and A. tumefaciens KYC55, respectively. The production of AHL by the strain 07A was evaluated in a complex medium (TYEP + CaCl 2 0,25 %) and a defined medium (MMS). A. tumefaciens KYC55 was used to quantify AHL in this assay. In TYEP + CaCl 2 0,25 % the AHL concentration reached a maximum value at the end of xvthe stationary phase, when the population of P. fluorescens 07A was 10 9 CFU mL -1 . When MMS medium was used, a similar cell population was achieved, but the AHL concentration was three fold lower. The results indicated that AHL production by P. fluorescens 07A could be regulated by autoinduction. The growth and proteolytic activity of the P. fluorescens 07A were monitored in six different media. It was not observed difference in the specific growth rate of the strain in the media tested, except in MMS, where it grew slower. On the other hand, the protease activity was higher in the complex medium (TYEP + CaCl 2 0,25 %) and reconstituted skimmed milk (LDR 12 %). Proteolytic activity was only detected when the culture reached high population densities (10 8 UFC mL -1 ) in all media evaluated. In MMS, proteolytic activity was detected at lower population densities (10 7 UFC ml -1 ). An increase in pH values was observed during cultivation in media containing tryptone. The emission of fluorescence was intensified in media containing calcium. The addition of two synthetic AHLs did not affect the growth rates and the proteolytic activity of the strain 07A in TYEP + CaCl 2 0,25 %. Furthermore, the addition of AHL extracted from the culture did not increase the specific proteolytic activity in TYEP + CaCl 2 0,25 %. These results indicate that quorum sensing may not have a direct role in the regulation of protease production in P. fluorescens 07A.

OLIVEIRA, S.T. Uso do peptídeo sintético Lys-a1 no favorecimento da atividade antimicrobiana de ciprofloxacina contra Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027. 2014. 89 f. Dissertação (MESTRADO EM BIOTECNOLOGIA) - Campus de Sobral, Universidade Federal do Ceará, Sobral, 2014. / Submitted by Djeanne Costa (djeannecosta@gmail.com) on 2017-09-01T13:21:48Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_stdoliveira.pdf: 2487485 bytes, checksum: d0cf8dea8b60a03dcd5bf061b1c033af (MD5) / Approved for entry into archive by Djeanne Costa (djeannecosta@gmail.com) on 2017-10-03T14:48:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_stdoliveira.pdf: 2487485 bytes, checksum: d0cf8dea8b60a03dcd5bf061b1c033af (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-03T14:48:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_stdoliveira.pdf: 2487485 bytes, checksum: d0cf8dea8b60a03dcd5bf061b1c033af (MD5) Previous issue date: 2014 / Most microorganism lies embedded in communities called "biofilms". Among these stand out Pseudomonas aeruginosa, an opportunistic pathogen of plants, animals and humans, frequently associated with nosocomial infections difficult to be eradicated due to the presence of biofilm. The fluoroquinolone antibiotics such as ciprofloxacin (CIP) against this bacterium are used, however, the mechanism of resistance has been developed for this microorganism. Thus, new forms of microbial control have been the subject of numerous studies in order to replace or enhance conventional methods. For this purpose, antimicrobial peptides (AMPs) obtained from various living beings represent an alternative to the development of new drugs. Synthetic forms analogous to Hylin a1 AMP (Hy-a1), isolated from species Hypsiboas albopunctatus, has shown excellent antimicrobial efficacy, among which stand out the peptide Lys-[Trp6]hy-a1 (Lys-a1). Thus, the aim of this work was to verify the influence of the peptide Lys-a1 in antimicrobial activity of CIP against pathogenic microorganism Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027. Minimum inhibitory concentration (MIC), minimum bactericidal concentration (MBC) and the curve death were determined to CIP and Lys-a1 separately. The influence of Lys-a1 in the antimicrobial activity of the CIP has been verified by the checkerboard method to quantify the biomass and the number of viable cells in biofilms by crystal violet staining and counting of colony forming units (CFU), respectively. The MIC and MBC values of Lys-a1 was 125 μg.mL-1 and the CIP was 0.24 and 0.48 μg.mL-1, respectively. The data showed that both the CIP as Lys-a1 are potent antibiotics against P. aeruginosa is able to inhibit both the planktonic growth and biofilm development. The interaction of substances interpreted by the fractional inhibitory concentration index (FICI) and showed an additive effect, establishing a decrease of 16 times the MIC and MBC of the CIP, when combined with the Lys-a1. This effect was also observed in the kinetics of death and antibiofilm activity. In conclusion, the additive effect of the Lys-a1 and CIP in antimicrobial activity suggests that the peptide has potential as a therapeutic agent and an adjuvant for the treatment of infectious diseases caused by P. aeruginosa can enable the use of lower concentrations of the antibiotic. / A maioria dos micro-organismos encontra-se integrados em comunidades denominadas “biofilme”. Dentre estes se destaca a Pseudomonas aeruginosa, um patógeno oportunista de vegetais, animais e humanos, frequentemente associado à infecções nosocomiais difíceis de serem erradicadas devido à presença de biofilme. Os antibióticos fluoroquinolonas, tais como a ciprofloxacina (CIP), são utilizados contra esta bactéria, entretanto, mecanismos de resistência vem sendo desenvolvidos por este micro-organismo. Assim, novas formas de controle microbiano têm sido alvo de inúmeras pesquisas a fim de substituir ou potencializar os métodos convencionais. Para esse fim, peptídeos antimicrobianos (AMPs) obtidos de diversos seres vivos representam uma alternativa para o desenvolvimento de novas drogas. Formas sintéticas análogas ao AMP Hilina a1 (Hy-a1), isolado da espécie Hypsiboas albopunctatus, tem demonstrado excelente eficácia antimicrobiana, dentre os quais se destacam o peptídeo Lys-[Trp6]hy-a1 (Lys-a1). Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi verificar a influência do peptídeo Lys-a1 na atividade antimicrobiana de CIP contra o micro-organismo patogênico Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027. A concentração inibitória mínima (CIM), a concentração bactericida mínima (CBM) e a curva de morte foram determinadas para a CIP e a Lys-a1, separadamente. A influência da Lys-a1 na atividade antimicrobiana da CIP foi verificada pela metodologia checkerboard com quantificação da biomassa e do número de células viáveis do biofilme através da coloração pelo cristal violeta e contagem de unidades formadoras de colônia (UFC), respectivamente. Os valores de CIM e CBM da Lys-a1 foi de 125 μg.mL-1, e para a CIP foi de 0,24 e 0,48 μg.mL-1, respectivamente. Os dados mostraram que tanto a CIP quanto a Lys-a1 são potentes antimicrobianos contra P. aeruginosa, sendo capazes de inibir tanto o crescimento planctônico como o desenvolvimento do biofilme. A interação das substâncias foi interpretada pelo índice de concentração inibitória fracional (ICIF) e mostrou um efeito aditivo, estabelecendo uma diminuição de 16 vezes da CIM e da CBM da CIP, quando combinada com a Lys-a1. Esta influência foi observada também na cinética de morte e na atividade antibiofilme. Em conclusão, o efeito aditivo entre a Lys-a1 e a CIP na atividade antimicrobiana sugere que o peptídeo tem potencial como um agente terapêutico e adjuvante para o tratamento de doenças infecciosas causadas por P. aeruginosa, podendo habilitar o uso de concentrações menores do antibiótico.